Rev Cubana Hematol Inmunol Hemoter 1997;13(2):124-131

Instituto de Hematologa e Inmunologa. Ciudad de La Habana, Cuba.

Frecuencia de los grupos sanguneos A1, A2, Aint, Ael, B y O en donantes de sangre
Lic. Antonio Bencomo Hernndez, Lic. Yalile Alfonso Valds,1 Dra. Mara E. Alfonso Valds,1 Dra. Rene Gonzlez Sampedro,1 Dr. Jos Fernndez Estrada y Dr. Adalberto Ballester Santovenia

RESUMEN
Se estudi la frecuencia de los grupos sanguneos A1, A2, Aint, Ael, B y O en 2 107 donantes de sangre, clasificados en 1 261 blancos, 569 mestizos y 277 negros. El grupo sanguneo A1 predomin en los blancos y el fenotipo Ael se identific nicamente en este grupo racial. Los grupos sanguneos B y Aint fueron ms frecuentes en los negros. En este grupo racial se observ una alta incidencia de fenotipos con deficiencia de sustancia H, que origin un aumento de la frecuencia de los grupos A2 y del A2B en relacin con el A1B. El grupo sanguneo O fue ms frecuente en los mestizos en relacin con los blancos. Las frecuencias gnicas calculadas expresaron resultados similares a los observados en las frecuencias fenotpicas. Descriptores DeCS: SISTEMA DEL GRUPO SANGUINEO ABO/gentica; DONADORES DE SANGRE; RAZAS; FENOTIPO; FRECUENCIA DE LOS GENES; ALELOS. El sistema de grupos sanguneos ABO es el ms importante para la transfusin de sangre.1 Los antgenos de este sistema son productos gnicos fcilmente detectables, por lo que constituyen tambin excelentes marcadores genticos.2 Debido a ello, se utilizan en estudios genticos de individuos, familias y poblaciones. En el grupo sanguneo A se pueden identificar variantes y los subgrupos A1 y A2, que son codificados por alelos diferentes del locus del sistema de grupos sanguneos ABO.3 Las determinaciones de estos subgrupos son un complemento de las investigaciones en inmunohematologa, en la solucin de casos mdico-legales de paternidad dudosa o discutida y es de sumo inters para el estudio de las poblaciones.4 En nuestra poblacin se han realizado varios estudios de la distribucin de los grupos sanguneos ABO en diferentes reas geogrficas.5-7 Sin embargo, nicamente se han determinado los subgrupos A1 y A2 en una poblacin compuesta en el 97 % por individuos mestizos y descendientes de africanos.8 Por otra parte, no se han realizado investigaciones sobre la incidencia de otras variantes del grupo sanguneo A. Por esta razn, el presente trabajo tiene la finalidad de conocer la distribucin de las frecuencias de los grupos sanguneos ABO y especialmente de los subgrupos y variantes del grupo sanguneo A en los donantes de sangre. MTODOS Se estudiaron muestras de sangre de 2 107 donantes de sangre provenientes de los bancos de sangre del Instituto de Hematologa e Inmunologa (n=549), Municipal de "10 de Octubre" (n=596), del Hospital "Hermanos Ameijeiras" (n=310) y Provincial de Villa Clara (n=652). De la informacin sobre el lugar de nacimiento de cada uno de los donantes se conoci que la muestra estuvo compuesta por 1 188 (53,38 %) individuos de Ciudad de La Habana; 471 (22,35 %) de Villa Clara, 206 (9,77 %) de Pinar del Ro y de 242 (11,5 %) de las restantes provincias del pas. Los individuos se clasificaron en: descendientes de europoides (blancos), descendientes de africanoides (negros) y como mestizos a la mezcla entre ambos. Esta

clasificacin se bas en el color de la piel, apariencia y textura del cabello, grosor de los labios y tipo de nariz.9 La muestra consisti en 1 261 blancos, 569 mestizos y 277 negros. Los grupos sanguneos ABO se realizaron con los reactivos anti-A, anti-B y anti-AB (MediCuba) y la presencia de isoaglutininas en el suero con el empleo de hemates de los grupos A1, A2, B y O. En estas determinaciones se utiliz la tcnica de microplacas.10 Los subgrupos de A se determinaron con el empleo de las lectinas anti-A1 de Dolichos biflorus (Menarini) y anti-H de Ulex europeaus (Menarini) segn las instrucciones del productor. Se clasificaron como fenotipo A1 los eritrocitos que reaccionaron con una intensidad de 4 cruces de aglutinacin con el anti-A1 y no reaccionaron con el anti-H. Se consideraron hemates de grupo A2 aqullos que no reaccionaron con el anti-A1 y mostraron una intensidad de 2 cruces de aglutinacin con el anti-H. Los eritrocitos de fenotipo Aint fueron aquellos que reaccionaron con 2 y 3 cruces de aglutinacin con el anti-A1 y el anti-H, respectivamente.11 Los hemates de grupo A y AB que no aglutinaron con el anti-A1 y el anti-H se clasificaron como A2 y A2B con deficiencia de sustancia H (A2HW ; A2BHW ).12 La variante Ael se investig en aquellos individuos de grupo sanguneo O en el tipaje eritrocitario y nicamente con anti-B en su suero. El antgeno A en estos hemates se detect en ensayos de adsorcin-elucin.11 Se calcularon las frecuencias de los genes del sistema ABO y las esperadas a partir de las frecuencias gnicas.4 Para el clculo de la frecuencia del gen A2 se incluy la frecuencia observada del fenotipo Aint, ya que este ltimo es una variante de ese gen.13 Para el anlisis estadstico se emple el estadgrado chi-cuadrado (X2). RESULTADOS Las frecuencias observadas de los grupos sanguneos ABO fueron en orden decreciente: O, A, B y AB en todos los grupos raciales estudiados, pero con distribuciones diferentes entre ellos (tabla 1). El grupo sanguneo A predomin en los blancos, particularmente el grupo A1. La distribucin de este subgrupo fue diferente entre los grupos raciales (p < 0,01); se observ con menor frecuencia en los negros. El grupo A2 fue ms frecuente en los negros que en los blancos (p < 0,05) y en los mestizos (p < 0,01). TABLA 1. Frecuencias fenotpicas de los grupos sanguneos ABO en donantes de sangre Grupo racial Blancos Fenotipos 0 A1 A2 Aint Ael B N 578 408 102 8 2 126 f(%) 45,84 32,35 8,09 0,63 0,16 10,00 Mestizos N 314 137 36 2 0 62 f(%) 55,18 24,08 6,32 0,35 0 10,90 Negros N 141 38 36 4 0 48 f(%) 50,91 13,72 13,00 1,44 0 17,33 Poblacin general N 1 033 583 174 14 2 236 f(%) 49,03 27,67 8,26 0,66 0,09 11,20

A1B A2B

28 9 1 261

2,22 0,71 100

15 3 569

2,64 0,53 100

5 5 277

1,80 1,80 100

48 17 2 107

2,28 0,81 100

f= frecuencia. X2=68,27 (p < 0,01). En los individuos blancos se encontr el fenotipo Ael, que dentro de variantes infrecuentes del grupo A, fue la nica identificada en este estudio. No se demostraron diferencias en la distribucin de los grupos Aint, A1B y A2B entre los grupos raciales. Sin embargo, entre los descendientes de africanos, el fenotipo Aint represent el 5,1 % del total de grupos A y los subgrupos A2 y A2B fueron el 48 % del total de los grupos A y AB, con una proporcin entre el A1B y A2B del 50 %, a diferencia de los blancos, en los que el grupo Aint represent el 1,5 % del total de fenotipos A y los grupos A2 y A2B fueron el 20 % de los grupos A y AB, con una proporcin entre el A1B y el A2B del 74 y el 26 %, respectivamente. El grupo sanguneo B fue ms frecuente en negros (p < 0,01) que en los blancos y mestizos, y se observ una mayor frecuencia del grupo O en los mestizos en relacin con los blancos (p < 0,01). Las expresiones dbiles del antgeno H (HW ) en los eritrocitos de los grupos A2 y A2B se identificaron con mayor frecuencia en los negros que en los blancos; en los mestizos no se encontraron estas variantes (tabla 2). TABLA 2. Frecuencia de la deficiencia de H en los fenotipos A2 y A2B A2 Grupo racial Blancos Negros N 102 36 A2Hw f(%) 6 6 N 5,8 16,6 f= frecuencia. Las frecuencias gnicas calculadas expresaron resultados similares a los observados en las frecuencias fenotpicas. As el gen A1 fue ms frecuente en los blancos (p < 0,01), los genes A2 y B predominaron en los negros (p < 0,01) y el gen O en los mestizos en relacin con los blancos (p < 0,01) (tabla 3). TABLA 3. Frecuencias gnicas dentro del sistema de grupos sanguneos ABO Grupo racial Blancos Gen A1 A2 Ael B O N=1 261 0, 1923 0, 0605 0, 0011 0, 0701 0, 6760 1, 0000 Mestizos N=569 0, 1405 0, 0433 0 0, 0700 0, 7462 1, 0000 X2=35,8 (p < 0,01). Las frecuencias fenotpicas esperadas calculadas a partir de las frecuencias gnicas no Negros N=277 0, 0808 0, 0942 0 0, 1125 0, 7125 1, 0000 N=2 107 0, 1629 0, 0605 0, 0006 0, 0758 0, 7002 1, 0000 Poblacin general A2B f(%) 9 5 N 2 4 A2BHw f(%) 22,2 80,0

se diferenciaron estadsticamente de las observadas (tabla 4), por lo que la poblacin estudiada se encuentra en equilibrio para los genes del sistema de grupos sanguneos ABO, y por lo tanto, se ajusta al enunciado de la ley de Hardy-Weinberg. Resultados similares se encontraron para cada uno de los grupos raciales estudiados (datos no mostrados). TABLA 4. Comparacin de las frecuencias observadas y esperadas de los grupos sanguneos del sistema ABO Observados Fenotipos A1 A2* Ael A1B A2B B O N 583 188 2 48 17 236 1 033 2 107 f(%) 27,67 8,92 0,09 2,28 0,81 11,20 49,03 100 N 579 187 2 52 18 236 1 033 2 107 Esperados f(%) 27,48 8,88 0,09 2,47 0,85 11,20 49,03 100 X2 0,03 0,00 0,00 0,30 0,05 0,00 0,00 0,38

f= frecuencia. * En el fenotipo A2 se incluy la frecuencia del fenotipo Aint. DISCUSIN La distribucin de los grupos sanguneos ABO es diferente entre las razas. El grupo sanguneo A predomina en los caucsicos, el B en los mongoloides y el O en los indios americanos.1 En los caucsicos y africanos, la secuencia en orden de frecuencia es O, A, B y AB. La diferencia fundamental entre ambos radica en que el grupo A es ms frecuente en los caucsicos y el B en los africanos.14 Los resultados de este trabajo coinciden con lo expuesto anteriormente y con otros estudios realizados en individuos descendientes de europoides y de africanoides de nuestra poblacin.5,6 En stos se obtienen resultados variables en relacin con la frecuencia del grupo B en los mestizos. Las frecuencias observadas oscilan entre el 12 y el 16 % y nuestros resultados mostraron una frecuencia del 10,9 %. Las discrepancias pueden atribuirse a errores al clasificar a este grupo racial por su heterogeneidad fenotpica. Estos investigadores encontraron un aumento de la frecuencia del grupo sanguneo O en los mestizos, similar a lo observado en este estudio. El descubrimiento de los subgrupos del A ampli las investigaciones y permiti demostrar diferencias en la distribucin de stos en diferentes poblaciones.4 Las frecuencias observadas entre los alemanes4 e ingleses14 son: A1: 33-34 %, A2:8-9 %, A1B: 2-4 % y A2B: 0,64-1,71 %. La distribucin de los subgrupos del A en los individuos blancos estudiados es similar a lo encontrado en estas poblaciones. En nuestro pas slo conocemos de un estudio de la frecuencia de los subgrupos A1 y A2 realizado en Baracoa.8 En ste se obtuvieron cifras de 0,16 % para el fenotipo A2 y de 29,15 % para el grupo A1, y no se describieron los fenotipos A1B y A2B. La frecuencia del grupo A2 observada por estos investigadores es inferior a la obtenida en todos los grupos raciales estudiados. Las discrepancias se deben a que en el estudio realizado en Baracoa no se emplearon los reactivos especficos anti-A1 y anti-H en la clasificacin de los subgrupos A1 y A2. En las poblaciones africanas las frecuencias del grupo A2 y A2B comprenden el 40 % del total de los fenotipos A y AB y la proporcin entre el A1B y el A2B es del 47 y el 53

%, respectivamente.15 En los individuos negros estudiados se encontraron resultados similares a los comunicados entre los africanos. La alta frecuencia de los fenotipos A2 y A2B es originada por una supresin de la expresin del fenotipo A1, debido a la presencia de alelos H dbiles que codifican para cantidades insuficientes de sustancia H precursora en los eritrocitos.12 De esta forma, pueden encontrarse individuos que genotpicamente son A1 y fenotpicamente se expresan como A2. La supresin de la expresin del fenotipo A1 se observa mayormente en el grupo AB, porque en ste la sustancia H es tambin utilizada en la formacin del grupo B.16 Otro factor que contribuye a este fenmeno es que en los africanos el gen B es ms activo que el A, por lo que se transforma mayor cantidad de sustancia H en B que en A.15 Entre los caucsicos, la frecuencia del gen H dbil flucta entre el 7,6 y el 57,5 % en el grupo A2B, y es del 0,6 % en los A2.12,15 En los africanos la frecuencia del fenotipo A2B con deficiencia de H es del 80 %.15 Las observaciones realizadas en este estudio en relacin con estas variantes en los individuos blancos y negros, son similares a las comunicadas entre los caucsicos y africanos. Entre los fenotipos A2 y A2B con deficiencia de H se pueden reconocer los codificados por el gen A1 o por el gen A2. Los primeros se denotan como A2Hw y A2BHw en dependencia del grupo sanguneo. Los codificados por el gen A2 son denominados A2Hw y A2BHw.15 En este trabajo se utiliz esta ltima clasificacin independientemente del gen que origin el fenotipo. La incidencia de los fenotipos A2 y A2B con deficiencia de H provenientes de los genes A1 y A2 son comentados en otra publicacin.17 El trmino Aint fue utilizado para describir un fenotipo intermedio entre el A1 y el A2. Los eritrocitos de este fenotipo muestran reacciones de aglutinacin ms intensas con el reactivo anti-H que los hemates A2.14En los europeos, las frecuencias del fenotipo Aint fluctan entre el 0,01 4 y el 0,9 %.14 Entre los africanos la frecuencia es del 2,1 %. 15 En estudios realizados en Norteamrica en individuos blancos y descendientes de africanos de grupo A, se ha identificado el fenotipo Aint entre el 0,9 y el 2,5 % y el 8,47 y 31,6 %, respectivamente. 14,18 En este trabajo, aunque no se demostraron diferencias significativas en la distribucin del grupo Aint entre los grupos raciales estudiados, se encontr que este fenotipo es ms frecuente entre los negros de grupo A que en los blancos de igual fenotipo. Reed y Moore 19 en 1964 describieron la variante Ael. Estos hemates no son aglutinados por el reactivo hemoclasificador anti-A y el Anti-AB, pero adsorben anticuerpos anti-A que son detectados en el eluato de los mismos. Este fenotipo es codificado por el alelo Ael del locus del sistema de grupos sanguneos ABO.3 La variante Ael se ha identificado en individuos caucsicos y en descendientes de africanos, pero no se ha comunicado la frecuencia del mismo en estas poblaciones.3,14 Este fenotipo se encontr nicamente entre los blancos, debido probablemente al nmero limitado de muestras analizadas en individuos de los otros grupos raciales en comparacin con la baja incidencia de esta variante. En estudios realizados en un gran nmero de individuos de nuestra poblacin no se detect este fenotipo, porque se realiz la tipificacin eritrocitaria del grupo sanguneo ABO y no se estudiaron las isoaglutininas del suero o su correspondencia con el grupo celular.5 El clculo de la frecuencia gnica permite una mejor comparacin de la distribucin de los grupos sanguneos en diferentes poblaciones, as como determinar la frecuencia de los diferentes genotipos esperados en una muestra determinada. 14 En los caucsicos, 4,14 la frecuencia de los genes de los grupos sanguneos ABO son: A1: 0,209-0,214; A2:0,065-0,069; B: 0,06-0,11 y O:0,60-0,66. Entre los descendientes de africanos de Norteamrica se ha comunicado la siguiente distribucin: 13 A1:0,017, A2: 0,040; B: 0,15 y O: 0,70. Estas frecuencias son similares a las calculadas en este estudio para estos grupos raciales, excepto para el gen A2 en los negros, en el que se observ un valor

superior. El gen A2 es ms frecuente en este grupo debido a la alta incidencia de fenotipos H dbiles encontrada en este grupo racial. Este trabajo permiti la clasificacin de los subgrupos y variantes del grupo A, as como definir la distribucin de stos en la poblacin de donantes de sangre. Las determinaciones de los grupos A1, A2, Aint y Ael generalmente no son necesarias para la transfusin de sangre; sin embargo, son imprescindibles en los estudios inmunohematolgicos, as como para el control y evaluacin de los reactivos hemoclasificadores policlonales y monoclonales del sistema ABO. AGRADECIMIENTOS Agradecemos la colaboracin del Dr. Vicente Berovides de la Facultad de Biologa de la Universidad de La Habana y de los tcnicos Lissette Orbeal y Lourdes Palma del Instituto de Hematologa e Inmunologa. SUMMARY The frequency of blood groups A1, A2, Aint, Ael, B, and O was studied in 2 107 blood donors classified in 1 261 white subjects, 569 mulatto,and 277 black subjects. The A1 blood group was predominant in white subjects and the Ael phenotype was only identified in this racial group. B and Aint blood groups were more frequently found in black subjects. In this race group, a high incidence of phenotypes and deficiency of the H substance was observed which gave rise to an increase of the frecuency of A2 and A23 groups in relation to AlB. The O blod group was more frequent in mulattos in comparison with subjects. Genic frequencies estimated expressed similar results regarding the one observed in phenotypic frequencies. Subject headings: ABO BLOOD-GROUP SYSTEM/genetics; BLOOD DONOR; RACIAL STOCK; PHENOTYPE; GENE FREQUENCY; ALLELES. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS 1. Mollison PL, Engelfriet CP, Contreras M. Blood transfusion in clinical medicine. 8 ed. Oxford: Blackwell Scientific Publications, 1987:268-9. 2. Mesa C, Correa N. Inmunohematologa, principios y tcnicas. Santiago de Chile: Mediterrneo, 1988:53-4. 3. Issitt PD. Appield blood group serology. 3 ed. Miami: Montgomery Scientific Publications, 1985:146-50. 4. Prokop O, Ghler W. Human blood group. 1 english ed. Montreal: Denis J Paradis, 1986:22-46. 5. Mas Martin JC, Araa C, Hueste C. Contribucin al estudio de los grupos sanguneos ABO y factor Rho (D) en Cuba. Rev Cubana Med 1964;3:348-50. 6. Daz VP. Grupos sanguneos en la provincia de Pinar del Ro. I. Frecuencias fenotpicas de los grupos sanguneos del sistema ABO. Rev Cubana Invest Biomed 1985;4:361-74. 7. Lantigua A, Barrios B, Granda H, Blanco G, Guerra D, Heredero L. Texto bsico de gentica mdica. La Habana: Editorial Pueblo y Educacin, 1987:113-5. 8. Castillo S de. Distribucin de los sistemas de grupo sanguneo ABO y Rh en Baracoa. Rev Cubana Med 1978;17:361-4. 9. Gonzlez R, Ballester JM, Estrada M, Lima F, Martnez G, Wade M, et al. A study of the genetical structure of the cuban population: red cell and serum biochemical markers. Am J Hum Genet 1976;28:585-96. 10. BCSH blood transfusion task force. Guidelines for microplate technique in liquidphase blood grouping and antibody screening. Clin Lab Haematol 1990;12:43760. 11. Beattie K. ABO grouping discrepancies. En: Mallory D, ed. Immunohematology methods and procedures. 1 ed. Rockville: American National Red Cross, 1993:I1-I-9. 12. Voak D, Lodge TW, Stapleton RR, Fogg H, Roberts HE. The incidence of H deficient A2 and A2B bloods and family studies on the AH/ABH status of an Aint and some new variant blood types (AintHA1, A2HWA1, A2BHA1B and

A2BHWA2B). Vox Sang 1970;19:73-84. 13. Wiener AS, Socha WW, Gordon EB. The relationship of the H specificity to the ABO blood groups. Vox Sang 1972;22:97-106. 14. Race RR, Sanger R. Blood groups in man. 6 ed. Oxford: Blackwell Scientific Publications, 1975:8-19. 15. Ssebati ECT. A study of the African H-deficient A2 and A2B phenotypes. Vox Sang 1973;24:165-70. 16. Voak D, Lodge TW. A possible explanation of the excess of A2B phenotypes observed in some population. Vox Sang 1970;18:471-4. 17. Alfonso Y, Bencomo A, Gonzlez R, Martnez M, Alfonso ME. Incidencia de la deficiencia de sustancia H en los eritrocitos de los grupos A y AB. Rev Cubana Hematol Inmunol Hemoter (En prensa). 18. Grundbacher FJ, Summerlin DC. Inherited differences in blood group A subtypes in caucasians and negroes. Hum Hered 1971;21:88-96. 19. Reed TE, Moore BPL. A new variant of blood group A. Vox Sang 1964;9:363-6. Recibido: 30 de abril de 1997. Aprobado: 7 de mayo de 1997. Lic. Antonio Bencomo Hernndez. Instituto de Hematologa e Inmunologa. Apartado 8070, CP 10800, Ciudad de La Habana, Cuba.