Toxicologia Forense

Ramos da Toxicologia: 1. Testagem forense de drogas. 2. Toxicologia postmortem; 3. Toxicologia de performance humana / antidoping; Tipos de casos: o Suspeita de morte por intoxicao; o Mortes violentas e sua relao com o uso de drogas ou lcool.

Testagem de drogas

o Um falso positivo identificar uma amostra como sendo positiva para uma droga em particular quando de fato nenhuma substncia relevante est presente. Isto pode estar tanto associado com a contaminao da amostra questionada com a droga ou com uma falha do teste analtico em produzir um resultado exato. o Um falso negativo freqentemente considerado como um erro menos srio e pode ser definido como uma falha em identificar a presena de um droga quando sabe-se que ela est presente na amostra. Falsos negativos esto associados com a falha do mtodo analtico e podem resultar na perda de dados crticos. Falsos negativos e falso positivos podem ser evitados com a incluso de controles positivos e negativos no regime de anlises.

Testagem de drogas
o Um controle positivo uma substncia que sabidamente reage da mesma forma que uma amostra positiva. Por exemplo, ao testar uma amostra de urina para a presena de anfetamina, uma amostra fortificada com uma soluo padro de anfetamina ir funcionar como um controle positivo. o Um controle negativo poderia consistir de uma amostra de urina isenta de drogas.

Testagem de drogas

Testagem de drogas
o Estabilidade das amostras o Muitas drogas no so quimicamente estveis e podem estar sujeitas degradao qumica, fsica ou microbiana. o Degradao qumica pode resultar na perda da droga pura pela decomposio outro composto (como cocana para o metablito benzoilecgonina) o Decomposio fsica pode resultar em: o mudanas na forma cristalina de um frmaco o agregao de partculas slidas em uma suspenso o perda de compostos volteis para a atmosfera e para o frasco (lcool etlico) o Contaminao microbiana pode ocorrer em qualquer amostra contendo gua.

Testagem de drogas
o Princpios dos testes preliminares ou testes de cores o Estes testes preliminares so alguns dos mais antigos testes para frmacos ou para identificao toxicolgica. Testes de via mida ou testes de cores envolvem a reao de uma amostra de frmaco, um filtrado livre de protenas ou um extrato com um reagente ou uma srie de reagentes a fim de produzir uma cor ou uma mudana de cor. Estes testes de identificao preliminar possuem diversas vantagens: o Estes testes so rpidos e simples o No so necessrios equipamentos sofisticados o Requerem mnimo treinamento o Requerem pequenas quantidades de amostra

Testes de cores

Exame da Cannabis

o Embora testes de cores possam ser conduzidos em extratos de material vegetal, uma forma rpida de determinar se um material vegetal desconhecido maconha determinar microscopicamente a presena de caractersticas celulares especficas (tricomas glandulares). Embora diversas caractersticas celulares estejam presentes, tais como pelos superficiais e cistolticos, estas caractersticas so comuns muitos outros materiais vegetais. a presena de tricomas glandulares contendo leo de cannabis alaranjado que distingue o material como sendo derivado de Cannabis sativa. Este teste particularmente til para testar amostras vegetais que esto misturadas com tabaco e outros material vegetais no controlados. As estruturas mais freqentemente encontradas so trs tipos de plos ou tricomas:

Exame da Cannabis

Toxicologia Postmortem
1. Sangue: 2 amostras (central e perifrica) para drogas e lcool, at 5 para CO; 2. HV: estvel e resistente contaminao, putrefao e ao do calor e do fogo; 3. Urina: altas concentraes de muitas drogas, por longos perodos. Boa para screening; 4. Bile: concentra drogas como narcticos e benzodiazepnicos. Substitui a urina SN; 5. Fgado: stio metablico principal. ATCs so seqestrados no fgado;

Toxicologia Postmortem
6. Pulmo: interessante em substncias volteis; 7. Bao: alta concentrao de hemcias, bom para CO; 8. Contedo gstrico: overdose por via oral, venenos, nitratos; 9. Cabelos, plos, unhas: bom indicador de exposio prvia, concentra metais, arsnico, grupos sulfidrila; 10. Msculos, gordura, ossos, medula ssea, liquido pleural ou asctico, liquido cefaloraqudeano, etc.

Toxicologia Postmortem

Toxicologia Postmortem

Tcnicas
Quando se determina a concentrao de drogas em matrizes biolgicas, importante conhecer a estabilidade da substncia em tais tecidos (Drummer, 2002).

o Screening: imunoensaio pode ser usado em urina, fgado, bile ou sangue. o Falso (+): por reao cruzada. Comum para anfetaminas e estimulantes, produtos da putrefao com grupo amino e em casos de proteinria e acidria lctica. o Extrao lquido/lquido ou fase slida (SPE) depende da experincia do laboratrio; o Anlise preliminar por TLC+ e/ou Spec UV/Vis o Anlise confirmatria por HPLC/DAD ou CG/MS.

Imunoensaios

Imunoensaios

Imunoensaios

Imunoensaios

Imunoensaios portteis

Imunoensaios portteis

Imunoensaios portteis

HPLC-DAD

HPLC-DAD

HPLC-DAD

HPLC-DAD

HPLC-DAD

Extrao de Fase Slida

CG-MS

CG-MS

CG-MS

CG-MS

CG-MS

CG-MS

CG-MS

Estabilidade e artefatos
o THC o Carbxi-THC se perde na urina a temperatura ambiente por vrios dias ou congelada por longos perodos; o Morfina o 6-AM se desacetila a M em temperatura ambiente; o 6-AM perde <2% em 12m si congelada, at 3m no se espera perda; o Desconjugao de metablitos no fgado = > concentrao de M em amostras de fgado; o Morfina instvel se conservada a 4oC ou + por vrios dias. o Herona o > concentrao de M no fgado coletado 8-9h postmortem e armazenado 10d em temperatura ambiente (converso de glucorondeos / desconjugao?) o E. coli fonte de B-glucoronidases.

Estabilidade e artefatos
o Benzodiazepnicos o Nitrobenzodiazepinas (nitrazepam, flunitrazepam, clonazepam): perdem seus metablitos 7-amino analisar prontamente; o Mudanas so minimizadas em outras BZD se conservadas a -20oC. o Cocana e BZE so instveis o podem sofrer hidrlise espontnea; o em urina at <37% em 12m a -20oC; o estvel at 6m.

Estabilidade e artefatos
o Clorpromazina o instvel em amostras armazenadas por longos perodos. o Tioridazina o instvel em amostras armazenadas por longos perodos. o Dotiepina o degrada por ao bacteriana. o Metaqualona o Recuperados 72% depois de 26m;

Estabilidade e artefatos
o Paraquat o 42% recuperados em estmago no 7o dia; o 11% recuperados em ceco no 7o dia; o no fgado, a concentrao sobe no 3o dia (redistribuio / desconjugao?) e cai depois; o Paratin / Malatin o variao menor que do Paraquat. o Organoclorados o muito estveis, recuperveis > 72% em material putrefato.

Redistribuio

o Importante em: o sustncias com alta lipossolubilidade e com alta concentrao em tecidos em relao a sangue; o drogas bsicas com grande VD, que demonstram maior faixa de razo C/P (p.ex. doxepina: 1-20) e maior razo C/P; o Considerar excees: o Imipramina tem C/P < 2 (droga bsica, com alto VD); o Propranolol e triazolam tem C/P > 2 (drogas cidas, com baixo VD). o Relao C/P est influenciada por: o Tipo de droga, VD, concentrao, aderncia a protenas, pK, intervalo postmortem.

Redistribuio

o Podem ocorrer mudanas de at 10x em sangue cardaco ante e postmortem; o Mais afetados: digoxina, propoxifeno, ATCs, metadona, fluoxetina, anfetaminas / metanfetaminas; o Sangue femural tambm distribui, mas menos; o No ocorre somente em sangre: o lobo heptico Esq pode ter concentraes > que el Dir.

Anlise diferencial
o Bile / sangue o txico / insignificante para paracetamol; o Rel de 3-6 para coca, BZE, EME, CE; o Rel de 1 para anfetamina; o Rel de 2000 para desmetilclobazan. o HV / sangue o importante para distinguir formao postmortem de lcool. Intil para estimar lcool em sangue. o Fgado / sangue o cuidado com lcool postmortem. o lcool postmortem o cerca de 12% de todos os casos; o 20% dos descompostos; o sugere-se limite superior de alcoolemia em cerca de 0,15%.

Interpretao dos dados

A anlise de drogas de espcimes postmortem depende de processos que ocorrem durante autlise e putrefao. A degradao ou concentrao postmortem de drogas e venenos pode ocorrer como resultado de processos metablicos, decomposio qumica ou ao bacteriana.

Interpretao dos dados

o Aspectos pr-analticos: o Pedido; o Seleo de amostras; o Coleta (stios, tcnica, material); o Armazenagem; o Transporte; o Registro; o Preparao e testagem (prazos, tcnicas de extrao e anlise; o Cadeia de custdia; o Contra-prova.

o Considerar: o Uso prvio: agudo / crnico : tolerncia / nvel txico; o Medicao utilizada em emergncia mdica; o Associaes entre drogas e drogas / lcool.

lcool
o EUA em 2000 (NHTSA): o 38% de acidentes de trfego fatais; o 7% de todos os acidentes de trfego. o Tipos de lcool: o Etanol ou lcool etlico acetaldedo acetato o Metanol formaldedo c formico acidose metablica o Isopropanol acetona depresso marcada do SNC o Etilenoglicol c dicarboxlico c oxalico oxal Ca

lcool
o Absoro o pele, inalao, EV, oral (100% absoro); o aumenta com % de lcool (mx 30%); o Distribuio o intestino sistema porta fgado corao direito pulmes corao esquerdo crebro e demais rgos. o Eliminao o Baixa conc: cintica de primeira ordem (percentual) o Alta conc: cintica de ordem zero (quantidade)

lcool
o Fases de absoro / distribuio o absortiva: arterial > venoso o completa: arterial = venoso o ps absortiva: arterial < venoso o Razo de concentrao Matriz / Sangue para lcool o Saliva 1,1 o HV 1,2 o Bile 1,0 o LCR 1,1 o Fgado 0,6 o Rim 0,7 o Crebro 0,8 o Urina 1,3

Cocana
o o o o o o t para a via inalatria: 50 a 78m; t para a via respiratria: 38 a 58m; t para a via intravenosa: 40 a 67m; VD: 2L/Kg (1,5 a 2,7 L/Kg); Tempo de deteco no sangue: 5h. Tempo de deteco na urina: 1-3 dias (benzoilecgonina).

Anfetamina
o o o o t para urina acdica: 7-8h; t para urina alcalina: 18-33h; Tempo de deteco no sangue: 1-3 dias Tempo de deteco na urina: 2-7 dias.

Morfina

o t para qualquer via: 1,9 a 3,1h; o VD: 1-6L/Kg; o Tempo de deteco no sangue: para cortes de 2000ng/mL, 12h; o Tempo de deteco na urina: 1-3 dias (morfina e 6AM)

Morfina

Diazepam

Cafena

Napoleo: morte natural ou assassinato?

o Outono 1820: dor abdominal, vmitos, debilidade; o Maio 1821: morte; o Autpsia: cncer de estmago e hepatite, corpo feminilizado; o 1940: corpo transferido a Paris.

Napoleo: morte natural ou assassinato?

o 1955: sueco Sten Farshufvud conclui por intoxicao por arsnico. Sai a coletar cabelos; o 1961: com Hamilton Smith (Glasgow) publica suas concluses; o Ben Weider (NANS) conclui por arsnico, antimnio, mercrio, c prssico e hidrocinico. o Acusa o mordomo Conde DeMontholon de usar o vinho para envenenar Napoleo;

Napoleo: morte natural ou assassinato?

o Papel de parede con Verde de Scheele arsnico y cobre. Libera gs Enfermidade de Gosio; o Tnicos, plvora, carvo, etc, com arsnico; o Lavavam os barris de vinho com arsnico; o Amostras de cabelo de antes de 1808 com altas taxas de arsnico; o Em seus ltimos dias, Napoleo recebia enemas dirios, tartarato de antimnio potssico como emtico e cloreto de mercrio como purgante.

Napoleo: morte natural ou assassinato?

o Junho 2001, Pascal Kintz do Inst Forense de Strasbourg encontra arsnico 7-38x acima do normal em cabelos e confirma exposition continue et massive; o 2003 (Science et vie, Ed. 1026) publica trabalho de peritos franceses: se o arsnico tivesse causado a morte de Napoleo, teria morrido pelo menos 3 vezes. o Encontram de 15 a 100 ppm (mdia normal 0,8 ppm). o Inocentam DeMontholon.

Napoleo: morte natural ou assassinato?

as with any poisoning, the chemical form of the arsenic compound, the age and physical condition of the individual exposed, and the dose are critical issues