Les antibiotiques

Dfinition dun antibiotique

Substances capables dinhiber spcifiquement la croissance de micro-organismes Substances capables dinhiber spcifiquement la croissance de micro-organismes ou de les dtruire ou de les dtruire Substances chimiques, produites par des micro-organismes ou obtenus par semiSubstances chimiques, produites par des micro-organismes ou obtenus par semisynthse ou synthse chimique synthse ou synthse chimique

Cibles spcifiques au monde bactrien Faibles doses : mg/l ou g/ml Bactriostase : CMI Bactricidie : CMB Classement :: Classement Cible Cible Spectre dactivit ::espces susceptibles dtre sensibles Spectre dactivit espces susceptibles dtre sensibles laction de lantibiotique faibles doses laction de lantibiotique faibles doses Famille Chimique Famille Chimique

Caractristiques antibiotiques antiseptique

Toxicit slective / bactrie = Cible spcifique
Faible dose daction (mg/l)

Spectre dactivit : bactries voire champignons ou autres - spectre troit - spectre large Arrt du dveloppement de ces micro-organismes par - inhibition de leur croissance - Bactriostase - CMI - mort cellulaire - Bactricidie - CMB

Usage interne ou externe - Fins de thrapie - Autres usages

Antiseptique : agent antibactrien chimique toxicit brutale, peu slective et usage externe

 Toxicit slective / bactrie = Cible spcifique sp

Cellule eucaryote animale

Les antibiotiques

Cest pour les bactries

XIXme - XXme

XIXme - XXme

XVIIme - XIXme

Bactrie, vin et fromage

Bactrie, fin et dommage

HISTORIQUE des ANTIBIOTIQUES Avant le XIXme sicle

HISTORIQUE des ANTIBIOTIQUES

1877 : Terme dantibiose Pasteur et Joubert montrent laction antagoniste entre microorganismes (bacille du Charbon)

Exemple dantibiose in vitro de Pseudomonas vis--vis de myclium de G. graminis var. tritici

Exemple d'antibiose entre E. coli et Brucella partir de lysier liquide (INRA, 1966)

HISTORIQUE des ANTIBIOTIQUES

1897 : Thse de Mdecine de E. Duchesne : "Concurrence vitale" entre Penicillium et bactries

1909 : Terme de chimiothrapie Utilisation de substances chimiques vise thrapeutique antibactrienne : doit tre nocive contre le microorganisme pas lhte eucaryote

HISTORIQUE des ANTIBIOTIQUES

1929 : Fleming : Dcouverte de la pnicilline G

HISTORIQUE des ANTIBIOTIQUES

Acremonium strictum = Cephalosporium acremonium

1938-1942 : Purification, synthse et usage clinique des premires -lactamines (H. Florey, E. Chain)

HISTORIQUE des ANTIBIOTIQUES

1935-1936 : Naissance des sulfamides - Domagk montre quun colorant utilis en teinturerie gurit des souris infectes par des streptocoques et soigne la fivre puerprale

1939- 1944 : Dcouverte de la streptomycine suite au criblage de molcules issues de Steptomyces (Waksman et al.)

1940 : R. Dubois propose le terme dantibiotique = Contre la vie

: Ere de lantibiothrapie

Stricto senso - Antibiotique - Anti bactrien

Origine des antibiotiques

Substances naturelles labores par des microorganismes telluriques procaryotes ou eucaryotes Bactries du sol : Streptomyces - Actinomyces (2/3), Bacillus, Pseudomonas Champignon : Penicillium, Fusidium Rarement issues de pure synthse : ex. quinolones (1962)

Actuellement, les antibiotiques sont trs souvent obtenus par semi-synthse

antifongique

Bacillus polymyxa

Bacillus subtilis

B-lactamines

Colonie dactinomycte, Streptomyces griseus, x 10

STREPTOMYCINE

volution du rendement en pnicilline en fonction des souches de Penicillium utilises

Purification partir de souches productrices

Synthse de la pnicilline G

Publicit pour la pnicilline, un antibiotique de source naturelle. Museum of Health Care at Kingston

La chloromyctin, le premier antibiotique synthtique. Museum of Health Care at Ki

Le pronostic dune tuberculose non-traite est le suivant :

Nombre dantibiotique dantibiotique + 10 familles + 10000 molcules diffrentes Environ 100 utilisables

Dur mol Esprance de vie : + de 15 ans Dure de vie des molcules

http://fr.wikipedia.org/wiki/Antibiotique http://www.microbes-edu.org/etudiant/antibio1.html

CIBLE

Toxicit slective / bactrie

 CIBLE : Toxicit slective

B-lactamines

Ttracyclines

Rifampycine

Classification des antibiotiques

+ de 30 tapes

Beaucoup denzymes => Beaucoup de cibles

2 dernires tapes : au moins deux cibles trs diffrentes

B-lactamines (pontage)

longation

Vancomycine

Cytoplasme de la bactrie

Classification selon la cible : simple mais complexe

Carboxypeptidase

Classification selon la cible : simple mais complexe

Classification selon la cible

traduction Chloramphnicol, Macrolides

50S 23S, 5S, ~ 33 protines

30S 16S, ~21 protines Ttracyclines, aminosides

Cible : intrt BM, tude des voies de biosynthse recherche de synergie

Conditions dactions des antibiotiques

Cible spcifique existe

Atteindre la cible

Traverser la paroi Ne pas tre dgrad ; Ne pas tre rejet Etre en concentration suffisante au niveau de la cible

Cible soit apte interagir avec lantibiotique

Site daction des -lactamines = paroi

Changement morphologique de la paroi de Bacillus cereus en prsence de -lactamines Coloration de Gram de Bacillus cereus cultiv en absence de -lactamines Coloration de Gram de Bacillus cereus cultiv en prsence de faible concentration de -lactamines

http://helios.bto.ed.ac.uk/bto/microbes/penicill.htm

Pourquoi les antibiotiques agissent sur la cible ?

Comment les antibiotiques agissent ?

Inhibition de la cible dans la bactrie

Irrversible

B-lactamines

Rversible

Quinolones

Consquence arrt de la croissance des bactries mort des bactries

Effets des antibiotiques sur les bactries

Bactriostase Arrt du dveloppement des micro-organismes par inhibition partielle ou totale de leur croissance - CMI 1 concentration en AB inhibibant toute croissance visible lil nu

Bactricidie Arrt du dveloppement de ces micro-organismes par mort cellulaire avec ou sans lyse - CMB 1 concentration en AB lthale pour la bactrie

Normes
Toujours dfinir la CMI, la CMB Toujours prciser les conditions de dtermination de la CMI, de la CMB - Milieu de culture, T, inoculum, temps de lecture, -

Normes franaises : Mueller Hinton -106cfu/ml - phase exponentielle Comit de lAntibiogramme de la Socit Franaise de Microbiologie

COMPARAISON des DONNEES

Mthode de dilution en milieu liquide

CMI

Concentration : g/ml

Concentration sub-inhibitrice
Classiquement : inoculum est confront des [AB] croissantes de progression gomtriques de raison 2

16

1
Echelle log

Mthode de dilution en milieu solide Steers

Ensemencement de souches diffrentes sur des gloses 1 concentration AB

E-test
Bandelette imprgne dAB confronte 1 souche

Bilan des mthodes de dilution

Dtermination quantitative de la 1 dose inhibant toute croissance visible

CMI = - dterminable pour tout germe cultivable - dterminable pour toute substance - concentration de lordre du g/ml
- bon

prdicateur de lefficacit de la thrapeutique

Mthode par diffusion en milieu solide par la mthode des disques

diamtre dinhibition

Mesure dun diamtre dinhibition en mm ; CMI

Antibiogramme

Milieu solide : diamtre dinhibition

Milieu liquide : concentration ici 2mg/l

Accs la CMI

Droite de concordance : Corrlation entre CMI (g/ml) et Diamtre dInhibition (mm)

Echelle log

16

4 12

1 26

Concentration : g/ml

Echelle arithmtique

millimtre

Mesure de la bactricidie
Mthode de dilution en milieu liquide Mthode quantitative g/ml Dnombrement par la technique de la viabilit cellulaire du nombre de survivants dans chaque tube ne prsentant aucune culture visible loeil nu

CMB

Y-a-t-il des survivants ? Quel est leur % par rapport aux bactries ensemences t = 0 heure ?
Nombre de bactries T = 0 h

Gloses sans AB

Dose des antibiotiques ?

Conditions dactions des antibiotiques

Foyer infectieux

Rapport CMB/CMI < 4

Si CMI = 4 mg/l => CMB = 4, 8 ou 16 mg/l AB est bactricide et AB est cliniquement bactricide

Si CMB > 16 cd 32, 64, AB est bactricide mais pas au sens clinique du terme

CMB/CMI < 4 => 2 dilutions dcart max. entre les valeurs de CMI et de CMB Concentration bactricide est atteignable in vivo dans lorganisme AB cliniquement bactricide : CMB/CMI < 4

Diamtre et concentration critiques (D, d; C, c)

Valeurs critiques : - D et d; C et c - valeurs de CMI dfinissant les concentrations en AB susceptibles dinhiber suffisamment la croissance bactrienne pour tre thrapeutiquement significative

C R d I

c S D

mg/l mm

Dfinition des catgories R, I, S Notion clinique

Association dantibiotiques
a) But : largir le spectre dans le cas dinfections germes multiples traiter en urgence une infection non diagnostique prvenir la slection de mutants rsistants rechercher une synergie avec si possible effet bactricide La plupart des associations est dmontre exprimentalement mais surtout confirme par lexprience clinique

b) Les 4 Effets des Interactions Indiffrence : (A + B) = A ou B Addition : (A + B) = A + B Synergie : (A + B) > A + B Antagonisme : (A + B) < A + B

c)

Images des associations sur antibiogramme Synergie Antagonisme

Indiffrence

Image des associations en disposition angle droit

synergie

antagonisme

indiffrence

addition

Spectre dactivit dun antibiotique

Spectre hte : intrt clinique majeur - choix rapides dAB en 1intension intrt pour connatre les rsistances naturelles, les niveaux de CMI Espces bactriennes sur lesquelles sexercent laction inhibitrice ou destructrice Notion de faible dose (mg/l) Notion daction in vivo (dose thrapeutique) Dpend de la permabilit de la bactrie lAB, de la prsence ou de labsence de la cible ou denzymes apte dgrader lAB Spectre troit (Pnicilline G, C+ et C-), Spectre large (amoxicilline et cfotaxime, C+, C- et B-), Spectre tendu aux mycobactries (RA)

norme

Distribution des CMI au sein dun genre, dune espce pour un AB

0,0 15

0, 12

0, 5

16

256

+ de sensibilit

+ rsistance

+ de sensibilit au sein dun genre, Distribution des CMI

dune espce pour un AB

norme

0,0 15

0, 12

0, 5

16

256

+ de sensibilit Mutant hyper-sensibilit

Pas de notion clinique

+ rsistance Mutant hyper-rsistance

Trois catgories cliniques de souches :

Sensibles : probabilit de succs thrapeutique lev dans le cas de traitement systmique avec la posologie recommande

Intermdiaires : succs thrapeutique imprvisible, incertain Rsistantes : forte voire trs forte probabilit dchec thrapeutique quel que soit la posologie, la voie dadministration du traitement CMI lAB > la concentration sanguine maximale dAB susceptible dtre atteinte avec une posologie standard dveloppement en prsence dune forte dose dAB

Classement en catgorie CLINIQUE des souches

norme : valeurs critiques vise thrapeutique Rfrence classique Abaque Pasteur

Spectre Clinique des Antibiotiques (SCA) Espces habituellement sensibles

Espces modrment sensibles

Espces sensibles mais avec une frquence acquise de rsistance

Espces naturellement rsistante ou ayant acquis une rsistance

Classification des antibiotiques

Spectre dactivit

Classification selon la formule chimique

Antibiotiques isols Acide fusidique : Traduction (EFG) Fosfomycine : Paroi (pyruvyl-transfrase) Famille

Aminosides
(Traduction 30S ou 50S)

Macrolides
(Traduction 50S)

Ttracyclines
(Traduction 30S)

Phnicols
(Traduction 50S)

Famille

Classification selon la structure Mme parent chimique ou structurale chimique

R R CONH R

x. -lactamines
O
Mme site daction : paroi Mme type de cibles : PLP

Charge ; souvent COOH (acide faible)

Mme mode daction, de pntration : acide faible pntration faible dans le cytosol structurales dues R affinit pour la cible ; en terme daction bactricide/bactriostatique spectre dactivit /aux -lactamases, aux mcanismes de rsistance proprits pharmacocintiques (absorption, pntration os, LCR, )

Classification selon la formule chimique

Structure chimique apparente : intrt : proprits communes
1. Voie de pntration dans la bactrie 2. Interfrence avec cible 3. Mcanisme daction 4. Bactricidie 5. Spectre dhte 6. Mcanismes de rsistance

amoxicilline

Cfotaxime* Cfotaxime*

cfalxine

ampicilline nafcilline

moxalactame

Utilisation des antibiotiques

Utilisation des antibiotiques

Externe

Injection

Voie orale ou per os

Utilisations des Antibiotiques

1. Usages thrapeutiques humaines Molcules de ville : amoxicilline Molcules hospitalires : cfotaxime, amikacine Antibiotiques sans incidence majeure : -lactamines Antibiotiques usage interne sous surveillance : Chloramphnicol +/- toxique sur les cellules souches hmatopotiques Antibiotiques usage externe : mupirocine

Antibiotiques non utiliss : D-cyclosrine car toxique du SNC Novobiocine (accident hmatologique, hpatique)

2. Antibiotiques usage vtrinaire comme anti-infectieux

Usage thrapeutique prventif (priode de sevrage, de transport, ) Usage thrapeutique curatif (traitement dune infection bactrienne) AB utiliss le sont aux doses actives pour radiquer tous germes potentiellement prsents et pathognes au site infectieux => Contrle vtrinaire - AB soumis lAMM AB qui sont usage communs homme/animal (amoxicilline, streptomycine) AB qui sont usage uniquement vtrinaire CG3 : ceftriofur, cefquinome aminosides : apramycine (porc) Cm : florfnicol quinolones : enrofloxacine pleuromulines : tiamuline

3. Antibiotiques usage vtrinaire des fins non thrapeutiques

Utilisation comme additifs alimentaires cd comme facteurs de croissance dose faible (50 ppm dans lalimentation), AB -Vitesse de croissance - Efficacit alimentaire

Avantages : Inconvnients :

rapidit de la croissance - moins de lisier - moins N2 et Phte doses in fine sont importantes sur la dure de lalimentation risque pour lhomme (R aux AB, )

Depuis 1995, contrle strict en France- recherche dalternative (probiotiques) interdiction Chloramphnicol, Nitrofuranes, Avoparcine (glycopeptides)

4. Antibiotiques usage en Biologie Molculaire ou Cellulaire

Gnticine ou G418 : aminoside utilis uniquement en BMC trs forte pntration dans la cellule (culture de cellules eucaryotes)

Blasticidine S : nucloside peptidyl isol de Streptomyces griseochromogenes inhibe la synthse protique par inhibition de la liaison peptidique la fois chez un procaryote et un eucaryote peut servir selectionner des cellules transformes portant le gne de rsistance bsr

Source Invivogen

5. Antibiotiques usage en BM voire comme anti-tumoraux

Actinomycine : toxicit cellulaire forte sur cellule animale agent intercalant de lADN qui bloque la transcription

Sert anti-tumorale chez lhomme

Mitomycine interfre avec la rplication de lADN bactrien et eucaryote => Utilisation en BM - Sert anti-tumorale chez lhomme

Antifongiques sont rares pour une utilisation in vivo

5. Exemples dAB utilis en BM comme anti-tumoral

Source Invivogen

Source Invivogen

Combinaison dantibiotique et/ou antifongique

Source Invivogen

Puromycine

Source Invivogen

Antibiotiques - Traitement des infections bactriennes ou fongiques => Choix de lantibiotique : 6 critres Bactriologique : type de bactrie en cause daprs les donnes cliniques voire + CMI, ABG Pharmacologique : efficacit de lAB au site de linfection (absorption, diffusion, limination, ) Individuel : nouveau- n, ge du patient, pathologie annexe du patient, Toxicologique : entre 2 molcules possibles, la - toxique, interfrence mdicamenteuse Ecologique : viter lmergence de R, le dsquilibre de la flore digestive, cutane, Economique : entre 2 choix, prendre le - coteux Choix monothrapie / association dAB Choix de la dure du traitement, voies dadministration,

Acquisition de la rsistance aux -lactamines

Norme = Rfrence Souche sensible Changement de la Norme Acquisition dune rsistance

Rsistances acquises

Rsistance naturelle

Rsistance naturelle

Comparaison de la consommation dantibiotiques chez lanimal et lhomme

Volume dAB utiliss chez lhomme et lanimal

PRESCRIPTIONS: LA BAISSE SE CONFIRME On observe, avec le dveloppement du programme de sant publique sur le bon usage des antibiotiques, une baisse globale de 16% des prescriptions depuis 2002, soit 6,4 millions de traitements inappropris vits.

Dans le cadre du partenariat conclu entre l'Institut Pasteur et l'Assurance Maladie, lvaluation annuelle du programme antibiotiques permet d'estimer la baisse de consommation d'antibiotiques 16% depuis 2002, pidmie constante. Sur l'hiver 2003-2004 qui accuse une diminution globale de 5,4%, la tendance est particulirement sensible chez les enfants, premiers consommateurs d'antibiotiques : c'est prs de 8% de consommation en moins chez les 0-5 ans. Comme pour l'hiver 2002-2003, le suivi de la consommation nationale a t analys partir des donnes de lAssurance Maladie et les rsultats corrigs des variations pidmiques prennent en compte les fluctuations pidmiques observes par le rseau Sentinelle de lINSERM. Des rsultats positifs : il apparat possible d'atteindre d'ici 2008 une baisse de 25% qui permettrait de commencer agir efficacement sur le phnomne de rsistance bactrienne.

La prescription dantibiotiques varie selon les dpartements. Elle est plus leve en Lozre (4,59 ), dans le Cantal (4,56 ), la Creuse (4,25 ) et en Corse du sud (4,24 ), contre une moyenne nationale de 3,23 . Montant moyen de prescription dantibiotiques, par acte, de janvier juillet 2005 (donnes Cnamts, sept. 2005).

Evolution du march des antiinfectieux par voie gnrale : exemple des antibiotiques

Bien que le nombre de prsentations diffrentes dantibiotiques continue daugmenter, le nombre dunits vendues et le chiffre daffaires baissent depuis 1996. Ce changement de tendance est li aux consignes de rationalisation de prescription. Dautre part, depuis 2002, la CNAMTS multiplie les campagnes de sensibilisation au bon usage des antibiotiques :

Les antibiotiques, cest pas automatique ! .