BIOTECNOLOGIA

TRABALHO REALIZADO POR:

DIOGO GARRIDO, DIOGO PINTO E MARIA AZEVEDO
SUMÁRIO

TÉCNICAS DE ENGENHARIA
01 GENÉTICA 03 ELETROFORESE

TÉCNICAS DE DNA
02 RECOMBINATE 04 CONCLUSÃO
TÉCNICAS DE
ENGENHARIA
GENÉTICA
ENGENHARIA GENÉTICA - O QUE É?

manipulação dos
genes de organismos
RECOMBINAÇÃO GENÉTICA TRANSFORMAÇÃO

BACTERIANA
TRANSDUÇÃO

CONJUGAÇÃO
RECOMBINAÇÃO PCR
DE DNA

TÉCNICAS DE ENGENHARIA
GENÉTICA

VETORES DE TRANSFERÊNCIA
CLONAGEM EDIÇÃO DE
GENES GENÉTICA
 DNA recombinante

O DNA RECOMBINANTE (RDNA) É UMA MOLÉCULA DE ÁCIDO

NUCLEICO ARTIFICIAL CRIADA ATRAVÉS DA COMBINAÇÃO DE DUAS OU
MAIS SEQUÊNCIAS QUE NA NATUREZA NÃO OCORRERIAM JUNTAS.
 Método de Clonagem de DNA
por Vetores

OBJETIVO: GERAR RDNA.

DESCRIÇÃO: ESTE MÉTODO ENVOLVE A INTRODUÇÃO DE UM FRAGMENTO
DE DNA (O GENE DE INTERESSE) NUM VETOR DE CLONAGEM, GERALMENTE
UM PLASMÍDEO BACTERIANO.
 Vetor de clonagem
Molécula de DNA que apresenta resistência a determinados
antibióticos e que é responsável por transportar e replicar
fragmentos de DNA inseridos em células hospedeiras.

Exemplos de vetores: plasmídio bacteriano, bacteriófago

lambda, cosmídeos, YAC , BAC, fagóides.
 Passos principais
1. Isolamento e obtenção de DNA
2. Introdução de DNA recombinante
3. Seleção de Clones
4. Recolha da proteína
 Isolamento e obtenção de
DNA
1) selecionar a sequência que será utilizada.
2) Isolar e purificar essa sequência de DNA com recurso a enzimas de
restrição.
3) selagem dos fragmentos de DNA no vetor de clonagem
 Introdução de DNA
recombinante
Para introduzir DNA estranho numa bactéria, é usada uma técnica
chamada transformação bacteriana, em que o corpo é submetido a
um tratamento com catiões divalentes que o torna suscetível ao
DNA.
 Seleção de Clones

Introdução do antibiótico na cultura de bactérias.

Seleção das bactérias sobreviventes.

Recolha da proteína

Realização da lise/degradação celular.

Obtenção da proteína pretendida.

Benefícios do DNA Recombinante

Melhoramento das culturas

Análise genética

Indústria farmacêutica
ELETROFORESE
SEPARA FRAGMENTOS DE DNA PELO TAMANHO.
OS FRAGMENTOS DNA ESTÃO CARREGADOS
NEGATIVAMENTE, ENTÃO MOVEM-SE NA
DIREÇÃO DO ELETRODO POSITIVO.
TODOS OS FRAGMENTOS DE DNA TÊM A MESMA
QUANTIDADE DE CARGA POR MASSA
CADA BANDA REPRESENTA UM GRUPO DE
FRAGMENTOS DE DNA DO MESMO TAMANHO.
 CIÊNCIA TESTE DE
FORENSE PATERNIDADE

ELETROFORESE

MICROBIOLOGIA GENÉTICA
CONCLUSÃO
ENCERRAR A APRESENTAÇÃO E MOTIVAR A EQUIPE
 Webgrafia
https://mundoeducacao.uol.com.br/amp/biologia/recombina
cao-genetica-bacteriana.htm
https://maestrovirtuale.com/dna-recombinante-tecnica-
aplicacoes-e-fundamentos/
https://rce.casadasciencias.org/rceapp/art/2014/099/
https://pt.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-
expression-and-regulation/biotechnology/a/gel-
electrophoresis
OBRIGADO PELA
ATENÇÃO