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1 INTRODUO

As enzimas so protenas com a funo especifica de acelerar reaes
qumicas que ocorrem sob condies termodinmicas no-favorveis. Elas aceleram
consideravelmente a velocidade das reaes qumicas em sistemas biolgicos
quando comparadas com as reaes no catalisadas. As protenas no so nicas
com propriedades catalticas nos sistemas biolgicos, alguns RNA, denominados
ribozimas, tambm executam essa funo.
As reaes catalisadas pelas enzimas so caracterizadas pela formao de
um complexo entre o substrato e a enzima. A ligao ocorre em uma fenda na
molcula da enzima chamada sitio ativo. A funo das enzimas e de outros
catalisadores diminuir a energia de ativao da reao e dessa forma, aumentar a
velocidade da reao.
As enzimas so os catalisadores os mais especficos que se conhece, tanto
para o substrato como para o tipo de reao efetuada sobre o substrato, porem
alguns fatores podem influenciar na ao enzimtica, dentre eles: elevada
especificidade da reao diante de varias rotas potencialmente possveis, a
enzima escolhe a com menor energia livre de ativao; condies reacionais mais
brandas a atividade de cada enzima dependente do pH, da temperatura, da
presena de vrios co-fatores e das concentraes de substrato e produto.
Os inibidores e ativadores modificam a taxa de uma reao na qual eles
nos so substratos, so geralmente pequenas molculas e ons, podendo ser
tambm outras enzimas. A ao pode ser reversvel ou irreversvel, se ligadas
covalentemente so irreversveis. Os ativadores aceleram as taxas da reao
enzimtica por promoverem o estado ativo do substrato ou da enzima, diferente dos
cofatores, os ativadores no entram na reao como bisubstrato.
A catalase uma enzima intracelular, encontrada na maioria dos
organismos, que decompem o peroxido de hidrognio (H
2
O
2
). A atividade da clula
produz substancias, o peroxido de hidrognio que altamente toxico para o
organismo, dai a grande importncia desta enzima que o degrada em agua (H
2
O) e
gs oxignio (O
2
), seguindo a seguinte reao: 2H
2
O
2
; 2H
2
O + O
2
, ou seja, para


cada molcula de agua oxigenada expostas a enzima catalase temos a quebra
destas com posterior formao de duas molculas de agua e uma de gs oxignio,
substancias incuas ao organismo.




OBJETIVOS

1 Objetivo GeraI
O Observar a ao da catalase, analisando a influencia da temperatura na
atividade enzimtica.
Objetivos Especficos
O Atribuir o efeito do pH na atividade enzimtica.
O Estabelecer a ao de ativadores e inibidores da atividade enzimtica.
O Verificar e discutir os resultados obtidos.




MATERIAS E METODOS
1 Materiais
O Tubos de ensaio
O Piceta
O Erlenmeyer
O Proveta
O Funil
O Algodo
O Bquer
O Baqueta
O Placas de petri
O Pedao de fgado (cru e cozido)
O Banana
O Grmen de trigo
O gua destilada
O gua oxigenada
O Guaiacol 0,
O Lugol
O Acido ascrbico 0,02M
O Sulfato de cobre a 1
O Soluo de amido a 1
O Acido clordrico 0,1

Mtodo
1 Ao da Enzima cataIase
Em um tubo de ensaio colocou-se um pedao de fgado cru, para ser o tubo
de controle, em outro tubo de ensaio colocou-se um pedao de fgado cru e
acrescentaram-se algumas gotas de gua oxigenada, observou-se a anotou-se os
resultados. J em um terceiro tubo de ensaio colocou-se um pedao de fgado
cozido para ser o tudo de controle, em um quarto tubo de ensaio colocou-se um


pedao de fgado cozido e acrescentaram-se algumas gotas de gua oxigenada,
observou-se e anotou-se os resultados.

Ao de ativadores e inibidores da atividade enzimtica
Separou-se quatro tubos de ensaios numerados de um a quatro, em seguida
cortou-se uma banana em pedaos pequenos e colocou-a em cada um dos tubos de
ensaio. No tubo de numero 1 colocou-se 2,0ml de agua destilada, nos demais tubos
colocou-se 2,0ml da soluo guaiacol 0,. No tubo de numero alm dos 2,0 ml
da soluo de guaiacol 0,, acrescentou-se 0,ml da soluo de cido ascrbico
0,02M. J no tubo de numero quatro adicionou-se 0,ml da soluo de sulfato de
cobre a 1. Observou-se os resultados, comparando o aspecto da banana em cada
caso, verificando qual substancia funcionou como inibidora e ativadora.

Efeito do pH na atividade enzimtica
Misturou-se 2 colheres de caf cheias (,0g) de grmen de trigo num bquer
com 0 ml de gua destilada e agitou-se com uma baqueta. Filtrou-se a mistura em
algodo e recuperou o liquido filtrado (extrato enzimtico) para uma proveta.
Colocou-se 100 ml de soluo de amido num Erlenmeyer e corou, com algumas
gotas de lugol, ate a soluo obter uma uma cor bem evidente. Em seguida
distribuiu-se a soluo de amido a 1 corada em trs placas de petri, sendo que em
uma das placas adicionou-se cinco gotas de acido clordrico 0,1N, promovendo a
mistura de ambos. Com auxilio de uma piceta colocou-se 10 gotas do extrato
enzimtico, em duas caixas de petri (uma com HCl e outra sem HCl), evitando-se
agitar as mesmas. Por fim observou-se, e anotaram-se os resultados obtidos.




RESULTADOS E DISCUSSO

A partir do experimento foi possvel construir as tabelas 1, 2 e , mostrando
todos os resultados obtidos atravs da pratica.
TabeIa 1 - Ao da enzima catalase em fgado cru e cozido.
Tubo Amostra ResuItado
1 Fgado cru -
2 Fgado cru + H
2
O
2
Formao imediata de espuma
Fgado cozido -
Fgado cozido + H
2
O
2
Formao de pouca espuma

Os tubos de numero 1 e serviram somente para controle por isso, no
apresentaram resultados. No tubo 2 houve formao imediata de espuma porque
quando se adiciona gua oxigenada a fgado cru, a catalase presente no fgado
decompe o peroxido em gua e oxignio, o oxignio que se liberta forma a espuma
que vista. J no tubo houve pouca formao de espuma, pois a catalase tem
uma temperatura tima de SC, sendo que no processo de cozimento do fgado a
catalase foi completamente ou parcialmente desnaturada por exposio s elevadas
temperaturas do cozimento, sendo assim no h reao e no h oxignio
produzido, ou muito pouco como no caso do experimento.
TabeIa Ao de ativadores e inibidores da atividade enzimtica na banana.
Tubo Amostra ResuItado
1 Banana + gua destilada No houve alterao
2 Banana + Guaiacol 0, Escurecimento da Banana

Banana + Guaiacol 0, +
Acido ascrbico 0,02M
No houve alterao

Banana + Guaiacol 0, +
sulfato de cobre 1
Escurecimento da Banana

O tubo 1 serviu somente para controle por isso no apresentou resultado, no
tubo 2 houve um escurecimento na banana (marrom avermelhado), pois o guaiacol
0, reage com a peroxidasse que catalisa a degradao da gua oxigenada,


liberando O
2
, alterado a cor da amostra, sendo o guaiacol um agente ativador. No
tubo , no houve alterao, pois o acido ascrbico um inibidor do escurecimento
enzimtico, por causa da capacidade em reduzir quinonas a compostos fenlicos
antes que formem pigmentos escuros. No tubo houve escurecimento da banana
(marrom avermelhado), pois o sulfato de cobre um ativador enzimtico que atua no
transporte e transferncia de oxignio.
TabeIa Efeito do pH na atividade enzimtica em soluo de amido.
!Iaca de !etri Amostra ResuItado
1
Soluo de amido + lugol +
HCl, diludo na mistura
-
2 Soluo de amido + lugol + HCl Formao de precipitado

Soluo de amido, + lugol sem
HCl
Formao de pouco
precipitado

A placa 1 serviu somente para controle, j a placa de numero 2, houve
formao de precipitado pois o HCl, agiu como ativador da enzima, formando um
precipitado, j a placa de numero formou pouco precipitado, pois a reao
enzimtica no teve um fator ativador.



CONCLUSO

As enzimas podem ter suas reaes aceleradas ou diminudas, dependendo
de determinados fatores, no caso da amostra de fgado a temperatura foi
determinante na reao enzimtica, j na amostra da banana, compostos qumicos,
atuaram como inibidores ou ativadores das reaes enzimticas, j na amostra de
soluo de amido, a reao enzimtica tambm foi afetada por compostos qumicos.
Portanto as enzimas esto suscetveis a fatores que podem alterar a velocidade da
sua atividade de reao.