ACCIN DE LOS SISTEMAS AMORTIGUADORES

Introduccin

El comportamiento qumico de muchas molculas cambia conforme el pH de la solucin en la que esta disuelta cambia, por ejemplo, las enzimas trabajan mediante rangos estrechos de pH .La sobrevivencia de un organismo depende de su habilidad para regular el pH de los fluidos corporales dentro de un rango estrecho. Las desviaciones del rango normal de pH de la sangre son mortales. De ah la necesidad de medir la acidez o alcalinidad (pH) de la orina o de la sangre. Una manera de regular el pH de los fluidos corporales tiene que ver con la funcin de los amortiguadores, que resiste los cambios de pH de la solucin, ya sea que se aumenten cidos o bases. Un amortiguador es una solucin de un par de de acido-base conjugado, en la cual el componente acido y la base estn en concentraciones similares. Los amortiguadores importantes encontrados en los sistemas vivos tienen como componentes bicarbonatos, fosfatos, aminocidos y protenas.

Las soluciones de cidos dbiles y sus sales amortiguan el pH

Las soluciones de cidos dbiles y sus bases conjugadas (o de bases dbiles y sus cidos conjugados) exhiben la propiedad de amortiguar -tendencia de una solucin para resistir con mayor eficacia a un cambio en el pH despus de la adicin de un cido o una base fuertes que un volumen igual de agua. Los amortiguadores fisiolgicos importantes incluyen bicarbonato (HCO3/H2C03), fosfato inorgnico (H2PO4/HPO4 -2) y protenas intracelulares. Los amortiguadores no fisiolgicos usados en experimentacin bioqumica comprenden al TRIS (pK 8.2) y al HEPES (pK 7.6). El efecto de amortiguador se observa mejor por titulacin de un acido o base dbil utilizando un potencimetro (medidor de pH). De manera alterna, es posible calcular el desplazamiento del pH que acompaa a la adicin de cido o de base a una solucin amortiguada.

Objetivos:
1.-Preparar sistemas amortiguadores. 2.-Demostrar la accin de los sistemas amortiguadores y su eficacia. 3.-Comprender la importancia de mantener los valores de pH dentro los limites normales.

Material
Pipetas de 5ml y 6ml Vasos de precipitados Agitador Potencimetro Pizeta

Reactivos
Solucin de hidrxido de sodio 0.1 N. Solucin de acido clorhdrico 0.1 N. Solucin de fosfato monobsico de sodio 0.2 M. Solucin de fosfato dibasico de sodio 0.1 M. Solucin de carbonato de sodio 0.2 M. Solucin de bicarbonato de sodio 0.2 M. Agua destilada.

Mtodo

A) Sistema amortiguador de fosfatos.

1.-Rotular dos vasos de precipitados con las letras (A) y (B), aadir a cada uno de lo siguiente: 12.75 ml de fosfato monobsico de sodio 1.2 M + 12.25 ml de fosfato dibasico de sodio 0.2 M. Mezclar el sistema, medir el pH en cada vaso de precipitado y anotar.

2.-Para comprobar la funcin amortiguadora del sistema adicionar: a) Al vaso de precipitado (A) 2.0 ml de acido clorhdrico 0.1 N y mezclar b) Al vaso de precipitado (B) 2.0 ml de hidrxido de sodio 0.1 N y mezclar.

3.-Medir respectivamente el pH y anotar

NaH2PO4 + Na2HPO4 HCL =========== NaH2PO4 +NaCI

NaH2PO4 + Na2HPO4 NaOH =========== NaH2PO4 +NaCI

B) Sistema amortiguador bicarbonatos.

1. Rotular dos vasos de precipitados con las letras (A) y (B), aadir a cada uno lo siguiente: 12.5 ml de carbonato de sodio 0.2 M + 12.5 ml de bicarbonato de sodio 0.2 M. Mezclar el sistema, medir el pH en cada vaso y anotar.

2.-Para comprobar la funcin amortiguadora del sistema adicionar: a) Al vaso de precipitado (A) 2.0 ml de acido clorhdrico 0.1 N y mezclar. b) Al vaso de precipitado (b) 2.0 ml de hidrxido de sodio 0.1 n y mezclar.

H2CO3 + NaHCO3 HCL =========== H2CO3 + NaCI

H2CO3 + NaHCO3 NaOH =========== NaHCO3 + H2O

Resultados

RESULTADOS SISTEMA

VASO DE PRECIPITADO A - VASO DE PRECIPITADO B pH inicial pH despus de adicionar el acido 6.26 8.40 pH inicial pH despus de adicionar la base 6.34 8.44

FOSFATOS

6.32

6.32 8.46

BICARBONATOS 8.46

No hubo demasiada diferencia en los resultados entre el pH inicial y finales, El cambio de pH por los amortiguadores debe ser lo suficiente para no tener complicaciones de acidosis o alcalosis en el organismo.

Conclusiones
Se pudo comprobar el mecanismo de los sistemas amortiguadores en el equilibrio de pH en fosfatos y carbonatos mediante la adicin de cidos y bases (HCl Y NaOH).

Cuestionario:

1.-Explique el mecanismo bioqumico de la accin de los amortiguadores fisiolgicos.

2.-Mensione la importancia de mantener el ph del medio interno de los seres vivos y el intervalo compatible con la vida. R=La sobrevivencia de un organismo depende de su habilidad para regular el pH de la sangre humana son mortales 3.-Mensione la localizacin de los principales sistemas amortiguadores

a) Fisiolgicos/CO2, disuelto en el plasma y liquido intersticial. b) Hemoglobina, en los eritrocitos. c) Protenas plasmticas en el plasma. d) Fosfato disodico/fosfato monosodico,en el plasma, eritrocitos y liquido intersticial.

4.-Explique el papel regulador de los pulmones y riones en el mantenimiento del equilibrio acido base. REGULACIN RESPIRATORIA DEL PH Nuestro sistema respiratorio se encarga de regular la presin parcial de dixido de carbono (PCO2) arterial. El CO2 es barrido en los pulmones por la ventilacin. La presin parcial de dixido de carbono es proporcional a su concentracin. Nuestros pulmones regulan indirectamente la concentracin de cido del organismo. Al ser la PCO2 de la sangre mayor que la alveolar, en condiciones normales se va a producir una difusin neta de CO2 hacia el interior del alveolo desde donde ser eliminado.La respuesta ventilatoria ante los cambios de pH es una respuesta rpida y est mediada por los quimiorreceptores de los cuerpos carotdeos y articos y del centro respiratorio bulbar. Dichos receptores son sensibles a los cambios de la concentracin de protones del lquido extracelular y a los cambios en la PCO2, de manera que ante un descenso del pH (o el ascenso de la PCO2), el aumento en la concentracin de H+ estimula a los quimiorreceptores provocando una hiperventilacin, aumentando de este modo la eliminacin de CO2, y disminuyendo por tanto la PCO2 arterial. Por el contrario, si el pH se eleva el descenso de la concentracin de protones inhibe los quimiorreceptores provocando un descenso rpido de la ventilacin, una reduccin de la eliminacin de CO2, y por tanto una elevacin de la P CO2 arterial.

La capacidad del sistema respiratorio como sistema buffer es 1 a 2 veces mayor que el del resto de los sistemas. La duplicacin de la tasa ventilatoria (hiperventilacin) implica un ascenso del pH en 0,25 unidades. Una disminucin a la mitad de la tasa ventilatoria (hipoventilacin) implica in descenso de 0,25 unidades de pH. REGULACIN RENAL DEL PH El sistema renal tiene una participacin clave en la homeostasis del pH ya que por medio de tres mecanismos regula la concentracin de HCO3-. Regula el HCO3- recuperado o reabsorbido del filtrado glomerular. El bicarbonato es filtrado continuamente hacia la luz del tbulo renal de modo que en el filtrado glomerular intacto la concentracin de bicarbonato es prcticamente igual a la del plasma, de ah la importancia del proceso de reabsorcin del mismo. A la concentracin fisiolgica de bicarbonato plasmtico (24 mEq/l), prcticamente todo el bicarbonato filtrado va a ser reabsorbido. Este proceso tiene lugar fundamentalmente en el tbulo contorneado proximal (TCP) donde se reabsorbe un 85%. El resto es reabsorbido en el asa de Henle (10-15%) y en el tbulo contorneado distal (TCD) y colector.Genera HCO3- nuevo que reemplaza al que se pierde amortiguando cidos producidos por el organismo Si a pesar del proceso de reabsorcin la concentracin de bicarbonato plasmtico permanece por debajo del valor normal, en las clulas tubulares se va a sintetizar bicarbonato. Esto sucede fundamentalmente en el tbulo contorneado distal a partir del CO2 procedente de la sangre o del propio metabolismo de la clula tubular por accin de la anhidrasa carbnica. El H2CO3 as generado se disocia en bicarbonato que se reabsorbe hacia la sangre y un protn que es eliminado.. Secreta HCO3- en condiciones de alcalosis crnica. El sistema renal es lento en su ejecucin como sistema amortiguador, requiriendo entre 10 y 20 horas para iniciar una actuacin eficaz y 4-5 das para desarrollarse por completo. Es por eso que su accionar es muy eficaz en condiciones de desequilibrio crnico.

5.- Que iones intra y extracelulares se encuentran involucrados en la regulacin del pH? R=Na

6.- Que mecanismos intervienen en la regulacin de la concentracin de bicarbonato y en que rgano se lleva a cabo?

7.- Por que es importante el mecanismo de acidificacin de la orina, en que parte de la nefrona acurre y cual es el par amortiguador que interviene? El ion H+ es generado a partir del CO2 y H2o,es secretado hacia la luz del tubulo a cambio del ion sodio

8.-En el sistema amortiguador bicarbonato/acido carbnico; cual es la relacin que debe existir para mantener el pH normal de acuerdo a la ecuacin de HendersonHasselbach. R= De acuerdo a la ecuacin de Henderson-Hasselbach, puede verse que a un pH de 7.4 la concentracin de bicarbonato (HCO3-) es 20 veces mayor que la concentracin del acido carbnico(H2CO3 o CO2 disuelto.

9.-Definir acidosis y alcalosis, de que origen pueden ser estas alteraciones y cite algunos ejemplos de patologas que las producen. En la acidosis respiratoria ,la resorcin de HCO3 en los tbulos renales depende no solo del nivel de HCO3- plasmtico, sino tambin de la tasa de secrecin de H+ por las clulas de los tbulos renales, puesto que el HCO3-es reabsorbido a cambio de H. En la alcalosis respiratoria, la concentracin de H2CO3 disminuye, por lo tanto ,se evita la secrecin renal de H+ y la resorcin de Hco3-,reduciendo el nivel del HCO3- plasmtico. Acidosis o Cetoacidosis diabtica. La acidosis hiperclormica resulta de la excesiva prdida de bicarbonato de sodio del cuerpo, como puede suceder con la diarrea intensa. La acidosis lctica es una acumulacin de cido lctico.

Bibliografa Harper Bioqumica Ilustrada Pag. 24