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UNIVERSIDADE JOS DO ROSRIO VELLANO UNIFENAS CURSO DE FARMCIA

DIAGNSTICO PARASITOLGICO

SIMONE SONARA OLIVEIRA SUZANA SAMARA OLIVEIRA MARCUS HENRIQUE LILIANA AP. OLIVEIRA HENRY LANOICAR PIRES MARINE BITTENCOURT

PROF. KLAUBER

DIVINPOLIS MG 2007

ANLISES DE AMOSTRAS FECAIS

Exame macroscpico As amostras de fezes no preservadas devem ser examinadas macroscopicamente para determinar a consistncia, o odor, a cor, a presena ou ausncia de sangue, de muco, de proglotes e de vermes adultos ou outras condies anormais. Consequentemente, o exame macroscpico deve sempre anteceder o exame microscpico. O material fecal varia quanto a sua consistncia, e geralmente classificado em fezes formadas, semi-formadas, pastosas ou lquidas diarricas. Os trofozotos so usualmente encontrados nas fezes lquidas, nas pastosas ou nas mucosanguinolentas, enquanto que os cistos so diagnosticados nas fezes formadas ou semiformadas. Ovos e larvas de helmintos podem estar presentes em todos os tipos de amostras fecais; entretanto, eles podem ser mais dificilmente encontrados em espcimes lquidos e, se presentes, em pequeno nmero. As formas mveis de protozorios se degeneram mais rapidamente do que as formas csticas; por esta razo, de extrema importncia que o estudo de espcimes fecais seja realizado o mais rpido possvel. A consistncia das fezes no interfere na distribuio dos ovos e das larvas de helmintos, apesar de nas amostras lquidas haver uma distribuio relativa do nmero de ovos, devido ao fator de diluio. As fezes devem ser distribudas no laboratrio quanto a sua consistncia. O material fecal lquido ou pastoso deve ser examinado primeiro, sendo seguido pelos espcimes semiformados e formados. Registrar a presena de sangue e muco

nas amostras fecais, os quais podem indicar manifestaes patolgicas do trato gastrointestinal. O sangue oculto nas fezes pode estar relacionado com uma infeco parasitria, ou ser um resultado de outras condies anormais. A ingesto de diferentes produtos qumicos, medicamentos ou alimentos pode atribuir s fezes coloraes variadas. O exame macroscpico pode ser realizado pela simples observao ou pela tamizao, as quais, em muitos casos, so suficientes para estabelecer um diagnstico final. Simples Observao Examinar e revolver todo o material fecal com basto de vidro. Anotar todas as caractersticas observadas e coletar os vermes adultos ou progltes de tnias dejetadas.

FiG 1. Distribuio de cistos e trofozoitas em relao consistncia do material fecal.

Tamisao Emulsionar as fezes com gua. Coar a emulso atravs de peneira metlica. Este procedimento deve ser realizado em uma pia, servindo-se de um jato de gua corrente. Vermes adultos como o Ascaris lumbricoides e Enterobius vermicularis so encontrados frequentemente misturados ou na superfcie das fezes, como tambm as progltides de tenias. Outros helmintos como o Trichiuris trichiura, ancilostomdeos e Hyminolepis nana so depositados no bolo fecal aps o incio do tratamento. Frequentemente podero ser encontrados helmintos adultos nas amostras fecais e ausncia dos ovos. Esses processos

macroscpicos so vantajosos para a demonstrao e coleta de pequenos helmintos, de proglotes e de esclices.

Identificao de Progltides de Taenia Dois mtodos so indicados para a identificao de progltes de Taenia: o cido actico e o de CAMPOS (AMATO NETO & CORREA, 1980). Mtodo do cido Actico Glacial: 1. Colocar em uma placa de Petri, contendo cido actico glacial, a proglote a ser identificada, durante 15 a 20 minutos. 2. Aps o perodo, comprimi-la entre lminas. 3. Examinar sob iluminao intensa. Mtodo de CAMPOS: 1. Dissolver trs comprimidos de metoquina em 5 ml de gua destilada-deionizada. 2. Mergulhar nesta soluo, durante 15 minutos, a proglote a ser identificada. 3. Aps este perodo, comprimi-la entre lminas. 4. Examinar sob iluminao intensa.

Exame Microscpico Exame de esfregao a fresco pelos mtodos diretos o mtodo mais fcil e, talvez, o mais usado na rotina do laboratrio, permitindo visualizar os estgios de diagnstico dos protozorios (trofozotas e cistos) e dos helmintos (ovos, larvas e pequenos adultos). Para uma diagnose absoluta necessrio observar o parasita em um de seus estgios de evoluo. O simples exame microscpico , em muitos casos, suficientemente para o diagnstico. Entretanto, para a obteno de melhores resultados ser necessrio o uso de tcnicas de concentrao, ou seja, processos mecnicos e/ou biolgicos. Exame Direto a Fresco O exame direto a fresco um procedimento simples e eficiente para o estudo das fezes, permitindo observar as formas trofozoticas vivas dos protozorios. Este procedimento coprolgico jamais deve ser omitido. As preparaes a fresco so obtidas diretamente dos espcimes fecais e requerem o mnimo de material (2 mg) para cada mtodo de exame . Todos os estgios de diagnstico dos organismos, pelo uso de diferentes solues, podem ser determinados e identificados. Os esfregaos com fezes frescas e no fixadas so rotineiramente preparados com as solues salina a 0,85% e de iodo. Entretanto, se o nmero de organismos for pequeno, o exame de pequena quantidade de fezes usadas para a preparao de esfregaos a fresco pode ser insuficiente para revelar a presena de parasitas. Os esfregaos devero ser sistemtica e completamente examinados atravs da objetiva do microscpio de pequeno aumento (10x) e com pequena intensidade de luz. A confirmao dos parasitas deve ser realizada com a objetiva de grande aumento (40x).

Exame Direto para a Pesquisa de Ovos de Helmintos (KATO & MIURA, 1954). Mtodo: 1. Colocar 60 a 70 mg de fezes (tamanho de um gro de feijo preto) em uma lmina de microscopia. 2. Cobrir as fezes com lamnula e celofane (embebida em soluo aquosa de verde de malaquita a 3%), aps a remoo do excesso do corante. 3. Comprimir a lamnula, com uma folha de borracha macia, e espalhar o material com uniformidade at as margens da cobertura de celofane. Examinar ao microscpio. TCNICA DE CONCENTRAO TCNICA DE FLUTUAO FLUTUAO SIMPLES Flutuao em Soluo Saturada de Cloreto de Sdio (WILLIS, 1921)

1. Colocar uma quantidade de fezes de aproximadamente 1 a 2 g. coletada de vrias partes do bolo fecal, em pequena cuba de vidro de 3 cm de dimetro com

capacidade aproximada de 20 ml. Completar da capacidade do recipiente com soluo saturada de cloreto de sdio. 2. Suspender as fezes na soluo saturada salina at haver uma total homogeneizao. 3. A lamnula deve ficar em contato com o menisco durante 30 a 45 minutos; no dever haver formao de bolhas de ar entra a lamnula e a superfcie do lquido. A gota contendo os ovos se adere face inferior da lamnula . 4. Remover a lamnula e inverter rapidamente a sua posio sobre uma lmina. 5. Examinar ao microscpio com objetiva de pequeno aumento. Observaes: Os ovos no flutuam na superfcie do reagente quando a homogeneizao do material fecal incompleta, havendo uma imperfeita separao dos ovos e dos detritos fecais. A flutuao muito curto ( menos de 30 minutos ) ou muito longo ( mais de 60 minutos ). Nesse caso os ovos que flutuam na superfcie podem descer para o fundo da pequena cuba ( Suzuki, 1980 ).

CENTRFUGO-FLUTUAO Centrifugo - Flutuao em soluo de Sulfato de Zinco (FAUST et al. 1938). A: Material fecal fresco 1. Colocar 1 ou 2 g de fezes coletadas de vrias partes do bolo fecal em frasco contendo 10 ml de gua corrente . Filtrar a suspenso atravs de gazes dobrado em quatro vezes , e receber o filtrado em um tubo cnico de centrfuga de 15 ml.

2. Adicionar gua corrente at completar 2/3 da capacidade do tubo. Centrifugar ( 650 x g por 1 minuto ). 3. Decantar o sobrenadante e adicionar 1 a 2 ml de gua corrente ao sedimento , ante de ressuspend-lo. Completar com gua corrente 2/3 do volume do tubo, agitar e centrifugar. 4. Repetir a etapa 3, at que o sobrenadante apresente-se relativamente claro. 5. Depois que o ltimo sobrenadante decantado, adicionar 1 a 2 ml do reagente , e ressuspender o sedimento: completar com sulfato de zinco at 0,5 cm da borda do tubo e centrifugar (650 x g por 1 min ). 6. Cuidadosamente, remover o tubo da centrifuga e, sem agitao Coloca-lo em uma estante em posio vertical. 7. Com uma ala de arame (dimetro de 5 a 7 mm) tocar no centro da membrana formada na superfcie, transferido vrias aladas para uma lmina de microscopia. Examinar ovos larvas e cistos. 8. Alguns pesquisadores preferem a sobreposio de uma lamnula na borda do tubo remoo da pelcula com ala de arame. (BURROWS, 1965: MELVIN & BROOKE, l982). Depois de concluda a etapa 4, com auxlio de pipeta, encher o tubo at a borda com soluo de sulfato de zinco. Colocar uma lamnula (22 x 22 mm) na superfcie do tubo. Deixando-a em contato com o lquido durante 8 a 10 minutos. Remover a

lamnula, invertendo a sua posio, e colocar a face com a gota sobre uma lmina. Examinar para larvas e cistos. B: Material Fecal Preservado pela Soluo de Formaldeido: 1. A suspenso fecal formolizada dever ser aproximadamente uma parte de fezes para duas a trs partes de soluo de formoldeido. Se a suspenso for muito espessa, diluir com soluo de formaldeido a 10 % para se aproximar da proporo. 2. Filtrar a suspenso fecal fomolizada, atravs de gazes umedecida. De modo a obter de um tubo de 13 x 100 mm. Adicionar, se necessrio, ao tubo gua corrente. 3. Seguir as etapas de 2 a 8 , como foi descrito para o material fecal no preservado, usando sulfato de zinco de densidade 1.20 g/ml. Observao: Alguns ovos de trematdeos e de cestides podem estar presentes nas superfcie da membrana , em densidade alta de 1,20 g/ml. Entretanto, para um exame completo, devero ser examinados a membrana e o sedimento uma permanecia prolongada da suspenso de fezes na soluo de sulfato de zinco, de alta densidade especifica, pode resultar em colapso e distoro dos cistos e dos ovos de nematodes com parede fina. Examinar a preparao aps 20 minutos ( ASH & ORIHEL, 1987 ).

TCNICAS DE SEDIMENTA0 SEDIMENTAO SIMPLES: Sedimentao Espontnea em gua (LUTZ, 1919; HOFFMANN, PONS E JANER, 1934). 1. Colocar cerca de 5g de fezes, coletados de vrias partes do bolo fecal, em copo graduado ou Becker de 250 ml. Completar o volume de 50 a 60 ml de gua corrente e misturar vigorosamente. 2. Preparar a suspenso juntando 100 ml de gua corrente. 3. Filtrar essa suspenso atravs de gaze dobrado 4 vezes, recolhendo-a em copo de sedimentao de capacidade de 125 ml. 4. Se necessrio, adicionar gua corrente, at completar aproximadamente do volume do copo cnico. Deixar a suspenso em repouso durante 1 a 2 horas. 5. Com uma longa pipeta capilar, fixada a um bulbo de borracha, colher uma pequena poro do sedimento na camada inferior, depositando sobre uma lmina. Se a preparao estiver muito espessa, diluir com uma gota de soluo salina a 0,85% ou gua corrente. Colher amostra adicionais do centro e do fundo do sedimento. 6. Examinar ao microscpio, a presena de ovos, larvas e cistos. Observao: MELVIN & BROOKE, (1982) e ASH & ORIHEL (1987) apresentaram a seguinte conduta depois de concluda a etapa 4 (1) decantar com cuidado 2/3 do lquido sobrenadante sem perder nenhuma poro do seguimento; (2) ressuspender o sedimento em gua corrente, e deixar a suspenso em repouso por mais 1 h; (3) esse

procedimento de lavagem pode ser repetido at o lquido sobrenadante fique relativamente claro. Aps seguir as etapas 5 e 6 na tcnica acima descrita. CENTRFUGO-SEDIMENTAO Centrfugo - Sedimentao pela Formalina-ter, (RITCHIE, 1948). A. Material Fecal a Fresco 1. Colocar 1 ou 2g de fezes coletadas de vrias partes do bolo fecal em frasco contendo 10ml de gua corrente ou soluo salina a 0,85%; 2. Filtrar a suspenso atravs de gaze dobrada quatro vezes, e receber o filtrado em um tubo cnico de centrfuga de 15 ml. 3. Centrifugar (650 x g por minuto); 4. Decantar o sobrenadante e adicionar 1 a 2 ml de gua corrente ou soluo salina a 0,85% ao sedimento antes de ressuspend-lo. Completar com gua corrente (ou soluo salina a 0,85%) 2/3 do volume do tubo. Agitar e centrifugar (650 x g por 1 min). 5. Repita a etapa 4, at que o sobrenadante se apresente relativamente claro. 6. Depois que o ltimo sobrenadante decantado, ressuspender o sedimento com 1 a 2 ml de formalina a 10% (dar preferncia soluo tamponada de formalina a 10% , pH. Neutro). Completar o volume da suspenso em 10 ml com formalina a 10%. Deixar em repouso em repouso durante 5 minutos.

7. Adicionar 3ml de ter ou acetado de etila, fechar o tubo e agitar vigorosamente, na posio invertida, por 30 minutos. Remover a tampa com cuidado. 8. Centrifugar (500 x g por 1 min). Quatro camadas se formaro: (1) sedimento no fundo do tubo contendo os parasitas, (2) camada de formalina, (3) tampo de detritos fecais, e (4) camada de ter na superfcie. 9. Afrouxar e separar o tampo de detritos das paredes do tubo com um estilete fino,e com cuidado decantar as trs camadas superiores. Limpar com swab de algodo as paredes do tubo, removendo os detritos remanescentes. 10. Uma pequena quantidade de lquido que permanece nas paredes do tubo escorre para o fundo junto ao sedimento. Misturar o lquido e o sedimento, preparando as lminas para a pesquisa de ovos, lavas e cistos. MTODOS QUANTITATIVOS Mtodo Modificado de KATO-KATZ (KATO,1960; KATZ, CHAVES E PELLEGRINO, 1972) 1. Colocar a amostra fecal sobre o papel absorvente. 2. 3. Comprimir a tela metlica ou de nilon sobre as fezes, fazendo com que parte passe atravs das malhas. 4. Remover as fezes que passam atravs das malhas e transferi-las para o orifcio do carto, colocado sobre a lmina.

5. Depois de encher o orifcio central, remover com cuidado o carto, deixando as fezes com a lamnula. 6. Cobrir as fezes com a lamnula de celofane, invertendo e pressionando a lmina sobre o papel absorvente. 7. Deixar a preparao em repouso (clarificao) durante 30 minutos a 34-40C ou temperatura ambiente por 1-2 horas. 8. Examinar a preparao ao microscpio MTODOS PARA O ISOLAMENTO DE LARVAS MTODO DE BAERMANN (1917) E MORAES (1948) 1. Encher o funil com gua corrente, aquecida a 40-45C. 2. Abrir a pina de Mohr, deixando escorrer uma pequena quantidade de gua para evitar a formao de bolhas de ar na haste e no tubo de ltex. 3. Colocar 8 a 10 g de fezes, recentemente emitidas, sobre gaze dobrada quatro vezes e, se necessrio, juntar mais gua, at que as fezes fiquem submersas. 4. Deixar em repouso durante 60 minutos. 5. Abrir a pina e coletar parte do lquido em vidro de regio; examinar ao microscpio estereoscpio (aumentos 20 a 30 x). Deixar em repouso durante alguns minutos, pois desta forma as larvas migraro para o centro do vidro de relgio, ou proceder de acordo com o item 6. 6. Coletar em tubo cnico de centrfuga. Centrifugar (500 x g por 1 min), e exarminar o sedimento entre lmina e lamnula. Corar a preparao com soluo de Lugol,

para a identificao das caractersticas morfolgicas das larvas, e examinar ao microscpio com aumento de 20x. Nota: Esse mtodo baseado no hidro e termotropismo das larvas que saem do material, migrando para a gua quente; por densidade, se depositam no fundo do funil. Para maior comunidade, costuma-se construir um pequeno suporte de tbua, com vrios furos circulares para receberem os funis, facilitando o trabalho. Algumas vezes, para examinar larvas de helmintos h necessidade de mat-las, e para isso coloca-se gotas de lugol (estando imveis, permitem a visualizao dos detalhes no diagnstico especfico). MTODO DE RUGAI, MATTOS & BRISOLA (1954). 1. Estender, sobre a abertura de um recipiente contendo fezes, gaze dobrada quatro vezes, e repuxar as extremidades para trs; 2. Encher, com aproximadamente 70 a 100 ml de gua corrente aquecida a 40-45C, um copo cnico de sedimentao (capacidade de 125ml); 3. Transferir o recipiente com as fezes para o interior do copo cnico de sedimentao, de modo que o lquido alcance toda a extenso da abertura do recipiente, cuidando para no formar bolhas de ar; 4. Deixar em repouso durante 60 minutos. 5. Colher o sedimento, no fundo do copo cnico, com pipeta capilar longa. Alguns autores recomendam retirar o recipiente do copo Cnico antes da colheita do sedimento. Entretanto, outros preferem manter o recipiente, para evitar o revolvimento do lquido;

6. Examinar o sedimento entre lmina e lamnula. Corar a preparao com soluo de lugol. Observao: Este mtodo indicado para a pesquisa de larvas de S. Stercoralis. IDENTIFICAO DE OOCISTOS DE Cryptosporidium Preparao e Armazenamento dos Espcimes Fecais Contendo Oocistos. 1. Preservao dos Espcimes A deteco e identificao dos oocistos est em relao direta com a quantidade da amostra entregue ao laboratrio. So recomendados certos princpios bsicos que asseguram uma coleta correta. As fezes podero ser examinadas frescas ou aps a fixao em soluo salina de formaldedo a 10%, ou no fixador acetato de sdio cido actico-formaldedo (SAF). A soluo salina de formaldedo a 10% apresenta a vantagem de fixar os oocistos e destruir o seu poder patognico e inativar outros agentes infecciosos (CENAC et al ., 1984). Entretanto, o material preservado na soluo fixadora lcool polivinlico (fixador APV) no apresenta bons resultados quando corado pelos mtodos derivados da fuscsina fenicada. 2. Armazenamento dos Espcimes A soluo de bicromato de potssio a 2 ou 2,5% (m/v) usada na rotina como meio para preservar a viabilidade dos oocistos. Essa soluo no fixadora. Quando os oocistos so armazenados a temperatura de 4C em soluo de bicromato de

potssio, eles permanecem viveis durante 3 meses, e alguns podem manter a sua infectibilidade por mais de 12 meses (CURRENT, 1990)

EXAME DIRETO EXAME MACROSCPICO DE PREPARAES A FRESCO O diagnstico realizado pela observao microscpica dos oocistos entre lminas e lamnulas. O exame direto a fresco realizado diretamente das fezes diarreicas, ou aps a diluio das fezes pastosas, em soluo salina a 0,85% (1:5). Examinar com objetiva de imerso. A microscopia de contraste de fase facilita a observao dos parasitas. Observaes: O oocisto no exame direto aparece maior que aqueles observados nos esfregaos fixados e corados. Os oocistos apresentam-se como elemento esfricos de 5 a 6 m de dimetro, com membrana externa fina, com um citoplasma finalmente granulado, e com mancha negra proeminente, central ou lateral, quer representa os corpos residuais. Os quatro esporozotos livres aparecem como pequenas manchas dispostas na periferia em forma de "C". O ncleo visto no centro do organismo (GARCIA et al., 1983; LEMETEIL, 1987; MEHLHORN, 1988). Mtodos de Colorao Derivados de Ziehl Neelsen

As coloraes recomendadas para oocistos de C. parvum no so indicadas para amostras fecais preservadas pelo fixador lcool - polivinlico ( fixador APV). As coloraes

de rotina, com tricrmio e hematoxilina frrica, no apresentam bons resultados na identificao desse coccdio. A colorao de Ziehl-Neelsen e suas variaes so os procedimentos que oferecem os melhores resultados. Colorao da Amostra 1. Preparar o esfregao com fezes frescas ou preservadas. 2. Deixar secar temperatura ambiente. 3. Fixar com lcool metlico por 5 minutos e deixar secar temperatura ambiente. 4. Corar com o corante de Kinyoun ( a frio) durante 1 hora. 5. Lavar com gua corrente. 6. Diferenciar com soluo aquosa de cido sulfrico a 2%. 7. Lavar com gua corrente. 8. Corar o fundo com soluo de verde de malaquita a 5% por 8 minutos. 9. Lavar com gua corrente e secar. Observaes: A diferenciao depende do corante, de ensaios preliminares sobre fezes positivas para adaptar a concentrao do cido a ser utilizada, e da definio dos tempos de diferenciao. Current (1990) usa a soluo aquosa de cido sulfrico a 10% na etapa 6 e os corantes light green SF yellowish (CI 42095) ou azul-de-metileno a 0,3% (CI 42780) diludos em gua destilada - deionizada na etapa 8. Outros autores preferem lavar o esfregao na etapa 7 com lcool etlico a 50% (v/v). Alguns procedimentos usam o mtodo a quente. Entretanto, a colorao a frio apresenta os melhores resultados. O escarro dever ser tratado com soluo de formaldedo a 10% e processado como as amostras fecais.

Centrfugo - Sedimentao pelo Formaldedo-ter (Tcnica de Ritchie, 1948; Modificada por Allen & Ridley, 1970). A tcnica de Ritchie, modificada por Allen & Ridley, a que apresenta os melhores resultados. A concentrao pode ser realizada a partir de fezes frescas ou formolizadas. Sendo a amostra mucosa, ela dever ser fluidificada, sob agitao, com algumas gotas de hidrxido de potssio a 10%.

Tcnica 1. Diluir 1 ou 2g de fezes frescas ou formolizadas em 7ml de soluo de formaldedo a 10%. 2. Filtrar em gaze dobrada quatro vezes e receber o filtrado em tubo cnico de centrfuga de 15 ml. 3. Adicionar 3 ml de ter, fechar o tubo e agitar vigorosamente, na posio invertida, por 30 segundos. Remover a tampa com todo cuidado. 4. Centrifugar ( 500xg por 2 min). Quatro camadas se formaro: (1) sedimento no fundo do tubo contendo os parasitas; (2) camada de forrmalina; (3) tampo de detritos fecais, e (4) camada de ter na superfcie . 5. Afrouxar e separar o tampo de detritos das paredes do tubo com estilete fino, e com cuidado decantar as trs camadas superiores. Limpar com swab de algodo as paredes do tubo, removendo os detritos remanescentes.

6. Uma pequena quantidade de lquido permanece nas paredes do tubo, escorrendo para o fundo junto ao sedimento. Misturar o lquido e o sedimento e preparar as lminas para a pesquisa de ovos, larvas e cistos. 7. Corar o sedimento pelos mtodos de Giemsa ou de Henriksen e Pohlenz. Observao : Adicionar 10 gotas de soluo de hidrxido de sdio ( NaOH) a 10% ao sedimento, quando este se apresentar mucide ( RITCHIE, 1948; DELUOL et al., 1984; LEMETEIL, 1987). Pesquisa de Sangue Oculto Nas Fezes Tcnica: Espalhar pequena quantidade de fezes sobre o papel de filtro limpo e colocar duas gotas de gua oxigenada sobre o esfregao. Adicionar duas gotas de soluo de benzidina. Observar imediatamente a cor. Leitura: A reao de benzidina sensvel, mas as gorduras podem torna-la positiva. Nenhuma mudana de cor: Negativo Cor esverdeada: Traos Cor verde claro: + Cor vede escuro: ++

Cor verde azulado: +++ Azul intenso: ++++ Mtodos de Colorao Derivados de Ziehl Neelsen (Pesquisa de Coccdeos) Colorao da Amostra 1. Preparar o esfregao com fezes frescas ou preservadas. 2. Deixar secar temperatura ambiente. 3. Fixar com lcool metlico por 5 minutos e deixar secar temperatura ambiente. 4. Corar com o corante de Kinyoun ( a frio) durante 1 hora. 5. Lavar com gua corrente. 6. Diferenciar com soluo aquosa de cido sulfrico a 2%. 7. Lavar com gua corrente. 8. Corar o fundo com soluo de verde de malaquita a 5% por 8 minutos. 9. Lavar com gua corrente e secar. Observaes: A diferenciao depende do corante, de ensaios preliminares sobre fezes positivas para adaptar a concentrao do cido a ser utilizada, e da definio dos tempos de diferenciao. Current (1990) usa a soluo aquosa de cido sulfrico a 10% na etapa 6 e os corantes light green SF yellowish (CI 42095) ou azul-de-metileno a 0,3% (CI 42780) diludos em gua destilada - deionizada na etapa 8. Outros autores preferem lavar o esfregao na etapa 7 com lcool etlico a 50% (v/v). Alguns procedimentos usam o mtodo a quente. Entretanto, a colorao a frio apresenta os melhores resultados. O escarro dever ser tratado com soluo de formaldedo a 10% e processado como as amostras fecais.

TESTES IMUNOLGICOS

Os teste imunolgicos so baseados no modelo biolgico do tipo enzima-substrato, um perfeito encaixe espacial entre duas molculas, lembrando a idia de chave-fechadura. Tem como caractersticas: Reversibilidade: a interao entre os eptopos antignicos e o sito combinatrio do anticorpo do tipo no covalente e dependem de interaes do tipo pontes de hidrognio e hidrofobicidade. Especificidade: em razo das caractersticas da resposta imune, para cada eptogo antignico so obtidos anticorpos com stio combinatrio perfeitamente especfico para essa conformao. Constante de afinidade: uma medida da fora de ligao molecular entre o antgeno e o anticorpo.

Princpio de alguns testes imunolgicos: Precipitao: Foram os primeiros mtodos utilizados na deteco do complexo Ag- Ac.No entanto, eram de baixa sensibilidade, j que para a visualizao do macrocomplexo era necessrias enormes quantidades de molculas de Ag e de Ac.Para a obteno de precipitados visveis preciso que o antgeno contenha mltiplos determinantes e que ocorram interaes cruzadas entre molculas diferentes de Ac e esses determinantes, formando uma rede complexa e de elevado peso molecular. Aglutinao:

O princpio das tcnicas de aglutinao o mesmo das de precipitao, mas o componente conhecido, Ag ou Ac, est ligado superfcie de partculas/ clulas, o que facilita em muito a visualizao do complexo Ag/Ac na forma de agregados.Outra vantagem desse mtodo a rapidez com que se obtm os resultados, de minutos a hora.Em relao precipitao, a aglutinao perde o poder de discriminar fraes dos componentes; por outro lado, quando os antgenos so fixados s clulas pode ser purificado e ainda sim conservar suas caractersticas de complexibilidade. Quando as clulas so hemceas, a tcnica chamada de Hemoaglutinao.

Reao de fixao do complemento: A tcnica utilizada para detectar Ac fixadores de complemento.Os Ac s fixam complemento aps a interao com o antgeno especfico.A tcnica realizada em duas etapas.Na primeira, o soro incubado com extrato antignico solvel e complemento ( soro fresco de cobaia ).Se a amostra contiver Ac especficos fixadores de complemento, este ser ativado e consumido.Na segunda etapa do teste utiliza-se sistema hemoltico para detectar se o complemento est livre ou no.O complemento livre ir lisar as hemcias sensibilizadas indicando um resultado negativo do teste.Se o complemento for consumido na etapa anterior no haver hemlise, indicando um teste positivo.

Mtodos utilizando ligantes: 1- IMUNOFLUORESCNCIA So molculas capazes de absorver radiao eletromagntica ou energia luminosa, tornando-se excitadas por alterao na configurao de seus eltrons.A energia absorvida dissipada na forma de calor.Certas substncias dissipam essa energia por emisso de ftons

de luz.Esse fenmeno chamado de Luminescncia.H dois tipos de substncias luminescentes: A fosforescncia, em que o tempo entre a excitao e emisso longo, e a fluorescncia, em que esse tempo menor. 2 - IMUNOFLUORESCNCIA DIRETA: a tcnica utilizada para a pesquisa de antgenos em clulas ou tecidos, usando-se conjugados compostos de anticorpos especficos para o antgeno em questo e marcados com fluorocromos. 3- IMUNOFLUORESCNCIA INDIRETA: a opo de escolha para detectar Ac circulantes especficos para os mais variados antgenos infecciosos (bactrias, protozorios, helmintos, vrus).Esses antgenos so fixados em lminas, o soro contendo anticorpos incubado sobre eles e esses anticorpos so detectados por meio de imunoglobulinas especficas para cada classe de anticorpos ( IgG, IgM, ou IgA ). 4- IMUNOENZIMTICOS: Nesse tipo de teste o marcador uma enzima que na presena de um substrato altera sua cor, de modo a diferenciar o teste positivo do teste negativo.Esse ensaio um ensaio em fase slida, o que significa que os imunocomplexos marcados devero ser separados da substncia marcada livre.Quando h um suporte de fase slida o teste ganha o nome de ELISA, que de fcil realizao, principalmente para a deteco de anticorpos e de antgenos circulantes. 5-WESTERN BLOTTING um teste imunoenzimtico em que o antgeno processado por eletroforese em gel, separando os componentes antignicos por peso molecular.Esses componentes so transferidos para membranas de nitrocelulose (blotting ) e nessas tiras se processa o teste.

6-RADIOIMUNOENSAIO: H 30 anos tm sido aplicado como instrumento de diagnstico na prtica diria do laboratrio clnico, devido a sua sensibilidade, especificidade e simplicidade.Sua elevada sensibilidade o tornou-se til para a dosagem de hormnios e marcadores tumorais.Porm algumas desvantagens importantes levaram a busca de alternativas, como marcador de meia-vida curto e cuidados especiais necessrios com o material radioativo, desde o transporte at o descarte final.

Parmetros dos testes imunolgicos: Na etapa de padronizao dos testes imunolgicos so utilizadas amostras de referncia, positivas e negativas, para a doena em questo.Portanto, na adequada escolha dessas amostras importante definir qual ser a referncia padro-ouro (gold standart).Outro aspecto a ser considerado importante a incluso de amostras de pacientes em diferentes fases da evoluo da doena.Por isso, necessrio seguir rigorosamente o protocolo padronizado com a incluso de controles positivos e negativos.Dentre eles: Limiar de radioatividade; Sensibilidade; Especificidade; Eficincia. Simplicidade e custo dos testes imunolgicos:

To importante quanto eficincia diagnstica, os testes imunolgicos devem apresentar custo acessvel, pois a populao mais beneficiada com essas metodologias

justamente a de baixa renda.Espera-se facilidade no processo de execuo e realizao dos testes.Os testes de diagnstico de parasitoses, por exemplo, devem ser realizados em laboratrios sem complexidade; de preferncia devem poder ser realizados em campo, ou seja, sem a necessidade de equipamentos.

Testes imunolgicos nas infeces parasitrias: Diversos fatores devem ser considerados no desenvolvimento dos testes imunolgicos para diagnstico de infeces parasitrias.Esses fatores so determinantes na eficincia do teste utilizado.So eles: 1Relao parasita/hospedeiro: Bastante complexa e diversificada em razo

das variveis da espcie humana. 2Intensidade e localizao do parasitismo: Isso acontece quando parasita

se instala em estruturas privilegiadas, como no globo ocular ou sistema nervoso central, a, a resposta imunolgica pode ser apenas local, requerendo a coleta de material biolgica de stios especficos e minuciosos, necessitando de um profissional especializado e condies adequadas para a realizao da coleta. 3Ciclo biolgico do parasita: a fase de evoluo do parasito e as variaes

antignicas entre as cepas, representando uma outra dificuldade para a padroniozao deste teste. 4Escolha do material biolgico e conservao da amostra:

Dependendo do elemento a ser detectado, h uma grande dificuldade da coleta do material e na sua conservao. 5Mecanismo de evaso parasitria:

o modo de sobrevivncia do organismo dentro do hospedeiro, sua ao espoliativa e suas variaes antignicas. 6Hospedeiro humano: A ao do parasita depende muito da resposta do

hospedeiro e o equilbrio do organismo do mesmo. 7Papel da resposta imune: muitas vezes a imunopatogenia que explica as

leses graves da infeco parasitria.Em infeces crnicas, comum o aparecimento de fenmenos de auto- imunidade, responsveis por danos adicionais ao hospedeiro.

Testes de hipersensibilidade imediata: So testes, especialmente de helmintos para obter um diagnstico de infeces sistmicas causadas pelo mesmo, como exemplo a HIDATIDOSE.

Testes de hipersensibilidade tardia Como em toda resposta imune complexa, nas infeces parasitrias h uma participao da resposta celular T e de macrfagos. A injeo subcutnea de antgenos no paciente previamente sensibilizado ir promover a migrao celular para este local, formando uma ppula ou um ndulo constitudo por essas clulas.

Outros testes de imunidade celular: A utilizao de tcnicas de estudo da imunidade celular restrita investigao de mecanismo de patogenicidade.A tcnica de estimulao de linfcitos em cultura com antgenos especficos, mede a proliferao induzida e permite a determinao de citocinas

no sobrenadante da cultura.A dosagem de citocinas, como interleucinas e interferons, pode auxiliar na compreenso dos mecanismos de defesa contra os patgenos.

MARCADORES IMUNOLGICOS NO DIAGNSTICO DE ALGUMAS INFECES PARASITRIAS


Protozorios Amebase Emtamoeba histolytica a nica da classe locozia que considerada patognica. A amebase de distribuio mundial, com predomnio nas regies tropicais. Os sintomas clnicos surgem em cerca de 10% dos infectados e se caracterizam por sintomas gastrintestinais, disenteria e colites. Destes 2 a 10% evoluem para a forma invasiva extraintestinal, de elevada letalidade, com formao de abscessos, principalmente no fgado. So caractersticas imunolgicas da amebase: a) anticorpos circulantes so detectados em pacientes com as formas extra-intestinais e invasivas da mucosa intestinal; b) esses

anticorpos podem indicar infeces atual (IgM, IgE, IgG) ou passada (IgG e IgE); c) testes de hipersensibilidade imediata (IgE) e tardia (celular) podem ser utilizados, mas a padronizao de antgenos adequados e difcil; d) pacientes com abscessos amebianos apresentam resposta de hipersensibilidade tardia menos intensa, sugerindo possveis eventos de supresso imune desencadeados por antgenos parasitrios; e) essa supresso abolida aps a cura; f) o papel protetor da imunidade parece importante em pacientes curados de abscessos hepticos indicando participao da resposta celular T; e g) em pacientes com elevados nveis de antibiticos podem ocorrer reinfeco com a forma intestinal, mas parecem no desenvolver formas invasivas, indicando imunidade parcial. A

elevada prevalncia de portadores sadios transmitindo a infeco pode ser reduzida pelo diagnostico parasitolgico e a instituio teraputica adequada.

Doena de chagas

O trypamosoma cruzi um protozorio flagelado, que se desenvolve no tubo digestivo de vetores insetos da subfamlia Triatominae e transmitido na forma de tripomastigota metacclico pelo contato direto com as fezes do vetor. Originariamente, era encontrado em diversas espcies de animais silvestres e atingiu a espcie humana, quando se pode determinar quadros crnicos inaparentes ou graves. A transmisso vertical possvel e os parasitos j foram encontrados em leite materno de mulheres infectadas. Uma das caractersticas imunolgicas na doena de chagas mais interessantes o desenvolvimento de auto-imunidade envolvendo antgenos das clulas infectadas em processos crnicos de longa durao, exarcebando assim os imunopatogenicidade. Os testes imunolgicos para deteco de anticorpos anti-T. cruzi so amplamente empregados para selecionar doadores em bancos de sangue, para acompanhamento teraputico, para fins sociais na seleo de trabalhadores, para confirmar ou excluir suspeita clinica e para inquritos epidemiolgicos. A complexidade antignica do parasito e a variao imunolgica do hospedeiro tornam difcil o diagnostico sorolgico de certeza e indicam a necessidade de criteriosa avaliao clinica com exames radiolgicos e, se possvel, isolamento do parasito para definio do caso. Vrios testes foram utilizados para o diagnostico imunolgico da doena de chagas, como a reao de fixao de complemento, precipitao e aglutinao direta e foram substitudos por outros de mecanismos de

metodologia com maior reprodutibilidade e sensibilidade, como imunofluorescncia indireta, hemaglutinao passiva e testes imunoenzimticos, ELISA e dot-ELISA.

Leishmaniose

Causada por protozorios intracelulares do sistema retiloendotelial. As espcies do complexo Leishmania tropica, L. major, L. brasiliensis e L. mexicana comumente envolvidas na forma tegumentar e mucocutanea. Na forma visceral, ou calazar, as espcies L. donovani, L. chagasi e L. infantum so as causadoras da doena. A Leishmania, aps ser introduzida na pele pela picada do inseto do gnero Lutzomyia, fagocitada pelos macrfagos, processada e apresentada a linfcitos T e, dependendo da espcie e da suscetibilidade do hospedeiro, haver predomnio da resposte Th1 ou Th2. na resposta Th1, presente na forma tegumentar, operfil de citocinas presente de IL-2, delta-IFN e IL-12, regulando a resposta para hipersensibilidade tardia com manuteno da infeco ao nvel da pele. Quando h predomnio da resposta Th2, h excesso de IL-4 e Il-10 com aumento da resposta humoral e menor quantidade de ativao macrofgica, permitindo a disseminao de parasitos e a infeco de maior numero de clulas. A resposta Th2 mais intensa na forma visceral. Os mecanismos imunopatognicos observados na leishmaniose servem de modelo para o estudo da complexa relao parasito/hospedeiro e do papel da resposta imune nas leses teciduais. So exemplos dessas caractersticas a invaso da mucosa e do tecido cartilaginoso, na forma tegumentar, dependente de mecanismos de hipersensibilidade, e a alergia observada na forma visceral.

Toxoplasmose

O agente etiolgico da toxoplasmose, Toxoplasma gondii, um protozorio intracelular e presente em lquidos somticos, exceto em hemcias, com tropismo por clulas embrionrias e tecido nervoso. Infeco disseminada entre aves e mamferos, com elevada prevalncia entre os humanos. Os sintomas clnicos dependem da virulncia da cepa e da resistncia do hospedeiro. Destacam-se como formas graves o comprometimento ocular, a forma congnita por transmisso placentria e , mais recentemente, a forma de reativao, observada entre indivduos imunocomprometidos, pela presena do HIV ou pelo uso de imunossupressores, especialmente entre transplantados. Os testes imunolgicos na toxoplasmose so de uso em larga escala e diversos marcadores tem sido utilizados para melhor esclarecer os perfis das infeces aguda, crnica ou latente, ocular, do sistema nervoso, de forma congnita e de reativao. A toxoplasmose apresenta trs perfis distintos de marcadores humorais IgG e IgM. O perfil I est presente na soroconverso recente e caracteriza-se pela presena de IgM e IgG. Na fase muito inicial pode no ser detectada a IgG e em razo da menor especificidade da IgM detectada, pode ser til a repetio do teste com amostra coletada em intervalos de 7-15 dias para surpreender o aparecimento de Igg e confirmar a positividade de IgM. Nessa fase, anticorpos IgG so de baixa avidez. O perfil II, de transio, apresenta elevados nveis de IgG com ndices de avidez crescentes ao longo do tempo e reduo gradativa da IgM. O emprego do teste ELISA de captura de IgM, pela elevada sensibilidade, pode mostrar reatividade muito prolongada, por meses, dificultando a definio adequada da fase da infeco. No caso de gestantes, j no segundo ou terceiro trimestre gestacional, que estejam fazendo o teste pela primeira vez das

quais se desconhea a historia previa da toxoplasmose, pode haver dificldade em esclarecer a i,portancia de resultado positivo de TgM nessa fase. Nesses casos, a ausncia de anticorpos IgA, que desaparecem mais rapidamente, e o achado de elevado nvel de acidez dos anticorpos IgG podem definir o caso. Os testes diretos podem ser outra opo suplementar nessa situao. O perfil III, caracterstico da infeco latente ou crnica, apresenta apenas anticorpos IgG, geralmente e baixos ttulos e com elevada avidez. Na triagem sorolgica de gestantes, o ideal seria o teste antes da gravidez ou o mais precocemente possvel, facilitando a interpretao dos resultados. Devem ser realizados testes para pesquisa de IgG e IgM. A presena de IgG e ausncia de IgM geralmente indicam infeco crnica, sem risco de transmisso placentria. a presena de IgM que sugere infeco aguda ou recente, sendo difcil estabelecer o perodo em que ocorreu a parasitemia de risco para infeco fetal. Nesses casos, podem ser necessrios testes complementares, como determinao de anticorpos IgA e do ndice de avidez de IgG, e ate exames diretos de deteco do parasito. Na vigncia de suspeita, o diagnostico e o tratamento da toxoplasmose congnita so importantes para prevenir leses cerebrais e oculares que podem ocorrer, ainda que de forma assintomtica, devido maior suscetibilidade do neonato, mesmo quando ele no apresenta sinais aparentes da doena. No recm-nascido infectado, o Toxoplasma pode ser isolado na camada leucocitria de sangue. O exame da placenta, mostrando os parasitos, tambm til. Os anticorpos IgG detectados so em parte maternos e a deteco de IgM confirma a infeco intra-uterina. No entanto devido imaturidade imunolgica, muitos neonatos no produzem IgM. A deteco de IgA parece ser mais sensvel nesses casos, mas o emprego de tcnicas de

biologia Molecular ainda a perspectiva mais promissora para o diagnostico precoce e eficiente da toxoplasmose congnita. O diagnostico imunolgico da toxoplasmose ocular mais difcil. Se o paciente apresenta anticorpos IgM indicando fase aguda/recente da infeco, a certeza do comprometimento ocular pode ser presumida. J na fase crnica, a etiologia da leso ocular pode requerer exames diretos de isolamento do parasito ou o achado de anticorpos no humor aquoso. recomendado que se determinem as concentraes de IgG srica e no humor aquoso, bem como os ttulos de anticorpos em cada compartimento, para calculo do ndice de produo intra-ocular de anticorpos.

HELMINTOS Constituem um grupo muito numeroso, com trs filos: Platyhelminthes, Aschelminthes e Acanthocephala, incluindo espcies de vida livre e espcies parasitas. As ocorrncias no homem so muito comuns. A exemplo, cerca de 20% da populao humana do mundo est parasitada por ancilostomdeos, o que equivale a mais de um bilho de pessoas. A situao equivalente em relao ao Ascaris lumbricoides. Estas infeces, em geral. Resultam em danos para o hospedeiro, os quais se manifestam de formas variadas. No Brasil, a situao no diferente, justificando lembrar a antolgica figura do Jeca Tatu, criada por Monteiro Lobato. O jeca no assim, est assim.

Cisticercose A cisticercose humana representa importante problema de Sade Pblica em reas carentes de condies sanitrias e de Polticas de Sade.A dificuldade em detectar e notificar os casos da doena advm da necessidade de confirmao diagnstica por procedimentos de custo elevado, pouco disponveis e inacessveis para grande parcela da sociedade. O ser humano o nico hospedeiro do verme adulto, Taenia solium, e elimina ovos nas fezes, contaminando o meio ambiente.No suno , aps ingesto dos ovos, o embrio liberado, com a ruptura da casca quitinosa calcria, no intestino delgado atravessa a mucosa por meio de seus acleos e alcana tecidos e rgos, desenvolvendo-se at a forma larvria , cisticerco.Completando o ciclo, o ser humano ingerindo carne suna com cisticercos

viveis permitir o desenvolvimento do verme adulto a partir da fixao das ventosas e acleos do parasita na mucosa intestinal.Acidentalmente ocorre a cisticercose humana,associada a maus hbitos de higiene,presena de portadores de tenase,gua e alimentos contaminados.Cisticercos de Taenia solium tm sido observados no globo ocular, msculos e sistema nervoso central, sendo a neurocisticercose a mais freqentemente relatada com 60% a 90% dos casos, possivelmente pela gravidade dos sintomas que leva o paciente a buscar auxlio mdico.Entre os pacientes com neurocisticercose predomina a faixa etria de 21 a 40 anos , economicamente produtiva, o que revela o impacto social da parasitose.O perodo de hospitalizao desses pacientes em mdia de 9 a 28 dias por ano, com letalidade estimada entre 5% e 25%.A sintomatologia apresentada depende do nmero , tamanho, idade, vitalidade, localizao, estgio de evoluo do parasito e seus processos reacionais sobre o hospedeiro, alm das respostas imune-inflamatrias do hospedeiro ao parasito.As apresentaes clnicas mais freqentes so:convulso,hipertenso intracraniana, hidrocefalia , demncia, meningite e paresias, isoladas ou associadas. A neurocisticercose apresenta-se com mecanismo fisiopatognico do tipo repetitivo e os surtos de agudizao, com exacerbao da resposta imune detectada no lquido cefalorraquiano (LCR),verificam-se quando da morte e degenerao do parasito, com liberao macia de antgenos e quadro clnico meningtico, em decorrncia da resposta imune-inflamatria do hospedeiro. A pleocitose observada no LCR , geralmente, do tipo linfomononuclear com eosinfilo e neutrfilos; a proteinorraquia revela padro do tipo gama poli e oligoclonal, custa de anticorpos especficos que podem ser detectados por vrios testes, mas aqueles mais sensveis , como o teste imunoenzimtico ELISA , so recomendveis e amplamente utilizados.A sensibilidade e a especificidade relatadas so de 90% a 100% para o teste

realizado no LCR, enquanto a deteco de anticorpos no soro apresenta menor especificidade, principalmente em populaes com outra infeces parasitrias. A pesquisa de antgenos de cisticercos, principalmente de excreo e secreo, ampliaria as perspectivas de estudo dos mecanismos imunopatognicos da

neurocisticercose.No entanto ,esses mtodos requerem ainda melhores avaliaes.

Esquistossomose Mansnica A esquistossomose mansnica representa uma das principais endemias parasitrias no Brasil.A espcie Schistossoma mansoni a responsvel pela infeco humana por contato com gua doce infestada de cercarias eliminadas por moluscos planorbdeos do gnero Biomphalaria . A infeco do caramujo feita atravs dos miracdios eliminados naquela gua e que foram liberados dos ovos viveis.O parasito adulto, macho e fmea acasalados, habita o sistema porta e elimina ovos embrionados, que em parte conseguem atravessar a mucosa intestinal e so excretados nas fezes.Parte dos ovos se perde no processo migratrio, se deposita em tecidos , principalmente no fgado, e a entra em degenerao.A resposta de defesa do hospedeiro, que se inicia j na infeco pelas cercrias, desencadeia intenso processo imune-inflamatrio com reao do tipo granulomatosa , responsveis pela imunopatogenia da esquistossomose. Alguns ovos podem migrar de forma errtica at o canal espinhal,onde tambm se processam as mesmas reaes, determinando formas graves de mietlites,paresias e at paraplegia.Na neuroesquistossomose, a anlise do lquido cefalorraquidiano pode ser de grande utilidade diagnstica, principalmente porque a administrao precoce de antiinflamatrios minimiza o processo e as conseqentes leses.A apresentao clnica

clssica da esquistossomose pode ser dividida em duas formas:intestinal e hepatoesplnica, sendo esta ltima de maior gravidade e morbidade, subdividindo-se em forma hepatoesplnica compesada e descompensada.Como a evoluo natural da infeco depende do nmero de parasitos, proporcional quantidade de ovos e intensidade reacional do hospedeiro, costuma ser logo o perodo at a manifestao grave, sendo muito freqente o achado de grande nmero de pacientes assintomticos nas reas endmicas. O diagnstico parasitolgico, achado dos ovos nas fezes, eficiente na fase intestinal, principalmente na parasitemia intensa.So utilizados os mtodos clssicos de pesquisa de ovos, sedimentao espontnea e o mtodo quantitativo de Kato-Katz.Esses testes sero negativos se a infeco unissexuada e tm menor eficincia na forma hepatoesplnica, quando j se observam granulomas e fibrose na mucosa intestinal, impedindo que os ovos ganhem o lmen intestinal. Na esquistossomose, as principais caractersticas imunolgicas so a presena de anticorpos IgG e IgM, a resposta de hipersensibilidade imediata e tardia e, como mecanismo de evaso parasitria, a adsoro de protenas do hospedeiro no tegumento dos vermes.Os testes imunolgicos de pesquisa de anticorpos sricos anti-Schistosoma so muito utilizados em nosso meio, embora ainda restritos a Centros de Pesquisa, j que no h reagentes disponveis no mercado.Uma das principais utilizaes dos testes imunolgicos na esquistossomose mansnica em estudos epidemiolgicos para determinar ndices de prevalncia ou incidncia ou avaliar programas de controle e vigilncia epidemiolgica.

Hidatidose

A hidatidose humana ocorre na Amrica do Sul, principalmente no Uruguai, na Argentina e no Chile.No Brasil, a regio de fronteira com Uruguai e Argentina de destaque para hidatidose, embora casos isolados sejam detectados em outras reas.Dentre as espcies de Echinococcus , o E.granulosus de maior importncia clnica no Brasil. O ciclo biolgico do E. granulosus envolve o co e outros carnvoros como hospedeiros definitivos, eliminando ovos no meio ambiente, e os ovinos, os bovinos e os sunos so os hospedeiros intermedirios.Da, ser comum a presena do parasito em reas de pastoreio de gado ovino, onde auxiliando o homem na atividade pastoril temos o co , que se alimenta e vsceras de ovinos infectados com cistos hidticos e elimina ovos nas fezes.Por sua vez, o gado no pasto ingere os ovos do parasito e assim passa a ser hospedeiro da forma larvria.O embrio do E. granulosus, aps atravessar a mucosa intestinal, pode migrar para todos os tecidos e rgos, sendo encontrado de preferncia no fgado e pulmes e mais raramente nos ossos e crebro.A evoluo clnica longa e os sintomas dependem do crescimento do cisto e de seus eventuais rompimentos, que podem desencadear reao anafiltica devido elevada concentrao de anticorpos IgE que so produzidos.Como a principal interveno teraputica a cirrgica para retirada do cisto, o seu rompimento, causando disseminao posterior ou choque anafiltico imediato, o principal risco do procedimento.Os exames de imagem so ferramentas obrigatrias para a adequada avaliao clnica do caso , alm , do diagnstico. O cisto de E. granulosus, diferente dos cistos de Taenia, possui milhares de

esclices no interior da vescula, circundada por uma membrana germinativa ou prolgera, com capacidade de regenerao.Essa caracterstica faz com que o cisto, aps rompimento e

extravasamento de seu contedo, possa disseminar-se formando novos cistos, que iro crescer individualmente. So caractersticas imunolgicas da hidatidose:o elevado nvel de IgE, que pode desencadear anafilaxia aps a ruptura de cistos e liberao macia de antgenos; anticorpos IgG so produzidos desde o incio da infeco; o teste intradrmico de Casoni permite a leitura imediata (IgE) e tardia (resposta celular); tanto os anticorpos quanto a resposta T podem mostrar resultados cruzados com outras helmintases.Para o diagnstico da hidatidose so considerados, alm de dados clinicoepidemiolgicos, os resultados de exames de imagem (ultra-sonografia, ressonncia magntica) e de testes imunolgicos para pesquisa de anticorpos sricos. Os principais testes imunolgicos utilizados para pesquisa de anticorpos contra antgenos do lquido hidtico so o ELISA para triagem e dupla difuso, e a contraimunoeletroforese ou imunoblot para confirmar a especificidade dos peptdeos reativos.

Toxocarase (Sndrome de Larva Migrans Visceral)

A sndrome de larva migrans visceral (LMV) se manifesta pela migrao e persistncia de larvas vivas, em tecidos de hospedeiro no habituais, impedindo o completo ciclo biolgico do parasito.No ser humano , o Toxocara canis o agente mais relacionado com a LMV.Ovos do parasito contaminam o ambiente e, em solo argiloso e condies de umidade e calor, podero se manter embrionados at a ingesto acidental pelo ser humano.Os ces so o reservatrio natural do parasito e desenvolvem o verme adulto com postura de ovos nas fezes.Atravs da circulao umbilical, o feto canino pode ser infectado e desse modo, em cerca de 28 dias aps o nascimento , o cozinho j estar eliminado ovos.

Utilizando testes imunolgicos , tem sido observada maior freqncia de anticorpos anti-Toxocara em crianas, sugerindo possvel imunidade protetora em adultos.a maioria dos casos passa como assintomtica, mas so descritas trs formas de apresentao da LMV:visceral, ocular e atpica ou oculta.Esta ultima se caracteriza por manifestaes inespecficas , como cefalia, hepatomegalia como aumento dos nveis de

gamaglutamiltransferase, astenia e dor abdominal.Na forma oculta mais rara a eosinofilia intensa, mas h elevados ttulos de anticorpos.A forma ocular foi identificada em olhos enucleados com suspeita de retinoblastoma.So observados granulomas retinianos , catarata, ceratite e endoftalmite.Embora o quadro seja grave, pode no haver larvas em outros tecidos e o nvel de anticorpos estar muito baixo ou indetectvel, dificultando o diagnstico imunolgico. A forma clssica da LMV apresenta febre , manifestaes pulmonares, s vezes semelhantes s alergias respiratrias, hepatomegalia, anemia, leucocitose, intensa eosinofilia(>20%) e hipergamaglobulinemia.Os casos fatais geralmente esto associados com envolvimento do sistema nervoso, meningoencefalites e polirradiculoneurites ou com resposta anafiltica do hospedeiro.O diagnstico direto pode ser feito em tecidos de bipsia, onde se observam granuloma eosinoflico e o parasito que pode ser identificado morfologicamente ou por meio de tcnicas imunolgicas de pesquisa de antgenos ( imunohistologia).Devido s limitaes da tcnicas diretas e ausncia de ovos e vermes nas fezes, a toxocarase humana anticorpos sricos. estudada por meio de testes imunolgicos para deteco de

TRATAMENTO DAS HELMINTOSES

A teraputica anti-helmntica tem apresentado apreciveis progressos ao longo deste sculo, sobretudo nas duas ltimas dcadas, com a introduo de novas drogas cada vez mais prxima do anti-helmntico ideal, ou seja, aquele que rena as seguintes caractersticas: 1) capacidade de alcanar o parasito onde este se encontre, no intstino, no sangue ou nos tecidos; 2) ao deletria sobre o helminto; 3) boa tolerncia pelo hospedeiro; 4) utilizao em dose nica ou em esquemas de curta durao; 5) amplo espectro de ao, cobrindo o maior nmero possvel de helmintos; 6) preo reduzido; 7) possibilidade de tratamento em massa, sem inconvenientes ou grandes dificuldades; 8) possibilidade de uso profiltico, de forma cmoda. Importantes estudos da biologias e fisiologia dos helmintos, bem como a utilizao de tcnicas adequadas para a avaliao e controle da atividade anti-helmntica de drogas, tm contribudo para o descobrimento e o uso clnico de novas substncias dotadas de maior especificidade, melhor tolerncia e, mais recentemente, dotadas tambm de amplo espectro de ao.

DROGAS MAIS USADAS NA TERAPUTICA ANTI-HELMNTICA

ALBENDAZOL um derivado imidazlico de amplo espectro de ao, pois eficaz no tratamento de ascaridase, enterobase, tricocefalase e ancilostomase, entre os nematides, sendo recentemente utilizado como droga preferida no tratamento da cisticercose.

Em sua farmacodinmica ele atua inibindo a captao de glicose associada a uma depleo de glicognio e diminuio do ATP, que essencial para a sobrevivncia e a reproduo dos parasitas. Comercializada pelos nomes; Parasin, Zentel, Zoben.

CAMBENDAZOL O cambendazol o 2-(4-tiazolil)-5 isopropoxicarbonilaminobenzimidazol, cuja frmula estrutural, muito parecida com a do tiabendazol. uma droga especfica para o tratamento da estrongiloidase. Comercializada pelo nome Cambem.

IVERMECTINA um derivado dos anvermctins, uma nova classe de 16-lactonas, amplamente utilizado em medicina veterinria e que, ultimamente, teve sua utilizao estendida tambm a seres humanos. A ivermectina o Mectizan; 22,23 diidroavermectin B1a, um semi-sinttico anlogo de avermectin B1a (Abamectin), um inseticida desenvolvido para amplo manejo, cuja frmula. Em humanos, a droga preferida para o controle e tratamento em massa de oncocercase e, de acordo com vrios trabalhos em andamento, para o tratamento da filariose linftica. Adiocionalmente, a ivermectina tambm, eficaz para tratar a estrongiloidase. Sua farmacodinmica consiste em provocar imobilizao dos vermes induzindo uma paralisia tnica da musculatura.

Em seres humanos, j ficou demonstrada sua eficcia teraputica Ochicerca volvulus, Wulchereria bancroft, Strongiloidis stercoralis, Ascaris lumbricoides, Enterobius vermiculares e Trichurus trichura, entre os nematides, alm de eficcia tambm comprovada na escabiose, pediculose e larva migrans. Comercializada pelo nome; Revectina.

MEBENDAZOL O mebendazol, derivado benzimidazlico, representa real progresso no arsenal teraputico anti-helmntico, tanto pela sua elevada eficcia e excelente tolerabilidade, como tambm pelo seu amplo espectro de ao contra nematides; A. lumbricoides, Tricocephalus trichiuris, Enterobius vermicularis, Ancylostoma duodenale, Necator americanus e cestides como Taenia solium e Taenia saginata. O mebendazol o metil N-[5(6)-benzoil-2 benzi-mendazolil] carbamato, e seu mecanismo de ao semelhante ao albendazol. Comercializado pelos nomes; Necamin e Pantelmin.

OXAMNIQUINA A atual droga de escolha para o tratamento da esquitossomose mansnica no Brasil, um derivado da tetraidroquinolena. A oxamniquina uma droga esquitossomicida que age inicialmente deslocando os vermes para o fgado, onde eles morrem. Parece que a ao esquitossomicida mais pronunciada sobre vermes machos. Entretanto o verdadeiro mecanismo de ao da droga no conhecido. Comercializado pelo nome de; Mansil.

Outros frmacos anti-helmnticos;

CLOROSSALICOLAMIDA ATENASE DICLOROFENO DIFENTAN DIETILCARBAMAZINA HETRAZAN HIDROXINAFTOATO DE BEFNIO DEBEFENIUM PAMOATO DE PIRANTEL PIRANVER PAMOATO DE PIRVNIO PYR-PAM PIPERAZINA UVILON PRAZIQUANTEL CESTOX TETRAMISOL/LEVAMISOL ASCARIDIL TIABENDAZOL THIABEN

Frmacos Leishmanicidas

Amebicidas,

Tricomonicidas,

Giardicidas,

Tripanosomicidas,

IODO-CLORO-HIDROXIQUINOLENA VIOFRMIO DIIODO-HIDROQUINOLENA DIODOQUINA GLICOLILARSENILATO DE BISMUTO WINTODON CLOBETAMIDA DIANTIL ETOFAMIDA KITNOS PENTAMIDINA SURAMINA TRIPARSAMIDA

NIFURTIMOX LAMPIT ANTIMONIATO DE N-METIL-GLUCAMINA GLUCANTINE PAMOATO DE CLICOQUANIL CAMOLAR

ARTIGO CIENT

Uma abordagem histrica da trajetria da parasitologia

RESUMO O texto relata os caminhos trilhados pela parasitologia, uma cincia que emergiu no sculo 19 com o surgimento e o estabelecimento de vrias reas da medicina, entre elas, a medicina tropical. Essa cincia, segundo o sumrio bibliogrfico, foi indicada inicialmente como um ramo da histria natural, sendo construda com a descoberta e posterior descrio de vrios agentes patognicos, responsveis por alguns processos mrbidos, at ento no atribuveis a organismos externos ao indivduo. Alguns parasitologistas ao redor do mundo comearam a descrever, alm dos agentes patognicos, os vetores e os mecanismos de transmisso das diversas doenas causadas pelos parasitas. No Brasil, o histrico da parasitologia margeia o trajeto da medicina

tropical, com o constante embate entre os mdicos da Sociedade de Medicina e Cirurgia do Rio de Janeiro e da Escola Tropicalista Baiana. J em 1900, renomados mdicos parasitologistas surgem no cenrio brasileiro: Oswaldo Cruz e Carlos Chagas que, atravs de suas descobertas, impulsionaram a parasitologia at os dias atuais.

Uma abordagem histrica da trajetria da parasitologia A histria nos mostra que ao invs de existir um processo linear e relativamente simples de transio epidemiolgica, no qual as chamadas doenas de pobreza so substitudas pelos males da modernidade, o que se observa um quadro complexo de alteraes, mudanas, adaptaes e emergncias tpicas dos fenmenos vivos. A relao entre as populaes de homens, vetores e agentes etiolgicos bastante complexa e no parece estar no horizonte, para os prximos anos, a miragem de uma vida livre de infeces (Barata, 2000). Entre as doenas decorrentes da "pobreza", destacamos as parasitrias, ou as parasitoses. Entende-se que parasitismo apenas um dentre muitos tipos de associao de dois organismos e no h um carter nico possvel para rotular um animal como parasita (Wilson, 1980). O parasita obtm alimento s expensas de seu hospedeiro, consumindo-lhe os tecidos e humores ou o contedo intestinal, sendo

que o relacionamento do parasita com seu hospedeiro tem base nutricional no podendo lesar drasticamente o hospedeiro, evitando alteraes comprometedoras, o que o faria perder o seu hospedeiro. O parasitismo ideal aquele que no causa dano ao hospedeiro e, por conseguinte, no provoca doena. Isso o que acontece com alguns parasitas que, ao longo de milhares de anos, se adaptaram de tal forma aos seus hospedeiros que passaram a viver outro tipo de relao entre dois organismos denominada simbiose. Por volta de 1860, os fundamentos da cincia chamada de parasitologia foram estabelecidos e os parasitas se tornaram ento os responsveis por importantes doenas do homem e dos seus animais domsticos. Apesar de muitos parasitologistas terem qualificaes mdicas, a parasitologia se estabeleceu como um ramo da histria natural na metade do sculo 19; muitos dos personagens que se distinguiram na parasitologia eram mdicos, zologos, ou de outros ramos da histria natural. Embora houvesse muita especulao se os parasitas seriam os responsveis pelas srias condies patolgicas apresentadas pelas doenas, foi nesse perodo que se constatou que a hidatidose e a trichinelose tinham como agentes patognicos os parasitas (Foster, 1965). Segundo Foster, a histria da parasitologia no uma histria de grandes eventos; ela se desenrolou ao longo dos sculos 19 e 20 nos laboratrios das universidades, na grande maioria das vezes, em

precrias condies. Os maiores avanos e descobertas da parasitologia tropical foram realizados por homens isoladamente ao redor do mundo pertencentes a algumas universidades: Army e Laveran, na Arglia; Bunch, na frica do Sul; Ross, na ndia; Manson, na China; e Bancroft, Queensland e Wucherer, no Brasil. Na Europa, podemos destacar Rudolphi, Von Siebold e Leuckhart, apoiados por grandes universidades e Kcheinmeister e Cobbold, indivduos independentes, que nunca tiveram posio acadmica de muita importncia. Em 1872, Timoty Lewis localizou o nematide causador da filariose no sangue de hematricos, denominando-o Filaria sanguinis hominis. Os primeiros relatos dos parasitas adultos apareceriam anos depois em um abscesso linftico examinado por Bancroft. Manson, atento a essas observaes, desvendou grande parte do ciclo da filria, entre 1877 e 1878. Conseguiu comprovar o mecanismo de infeco pelo mosquito Culex e a "periodicidade" que a filria realizava invadindo a circulao perifrica ao cair da tarde e refluindo durante o dia, de acordo com o ciclo de vida do vetor, atravs da dissecao progressiva dos mosquitos (Foster, 1965). A descoberta de Manson consagrou um novo modelo de experincia e reformulou uma srie de questes no campo da patologia. Questes que requeriam novos saberes e dinmicas de pesquisa para dar conta dos complexos ciclos de vida dos parasitos patognicos, envolvendo

mudana de hospedeiros e numerosas adaptaes e metamorfoses nos organismos parasitados e no meio externo (Benchimol, 2000) Inspirado nas idias de Patrick Manson, Ronald Ross, mdico do servio ingls na ndia, identificou, em 1897, o parasito da malria desenvolvendo-se nas paredes do estmago de um mosquito do gnero Anopheles. Em 1898, estudando malria aviria, Ross estabeleceu, de maneira definitiva, seu mecanismo de transmisso (Matos, 2000). As oportunidades de desenvolvimento da parasitologia aumentaram com a criao e o estabelecimento das escolas de medicina e hospitais nos trpicos, fato que s ocorreu no final do sculo 19, criando assim oportunidade de estudar os parasitas tropicais. Embora no houvesse clara distino entre a medicina dos trpicos e das regies temperadas, a maioria dos trabalhos de parasitologia no final do sculo foi realizada nos trpicos (Lacaz, 1972). A primeira escola de medicina tropical em clima temperado foi inaugurada em Liverpool em 1899, com Boyce como professor de patologia e chefe organizador, e Ross como conferencista convidado. Os maiores trabalhos da escola foram inicialmente testar as idias de Ross na erradicao da malria atravs da destruio do vetor, e foi tambm nessa escola que Dutton identificou o primeiro tripanossomo humano, Trypanossoma gambiense, no sangue de um paciente e descrevendo logo aps o segundo, o T. rhodesiense.

A London School of Tropical Medicine desenvolveu dois ramos de atividade sob a direo de Manson: a "muck-room", ou sala de fezes, como o laboratrio ficou conhecido e o Seaman's Hospital, em Greenwich. Nessa escola foram descritos pela primeira vez, pelo mdico ingls George Low, embries de Wuchereria bancroft na probscide dos mosquitos (Foster, 1965). A exemplo da Inglaterra, outras escolas de medicina tropical e de parasitologia se estabeleceram: o French Institute de Mdicine Coloniale, em 1902 e o original Pasteur Institute, fundado em 1888, em Paris, que encorajava seus alunos a sarem da Frana e alar vos, fundando outros institutos. O primeiro Pasteur Institute no Norte da frica francesa foi fundado em 1893 em Tunis. Dentre os trabalhos desses institutos destacavam-se os de investigao na rea da biologia e da medicina tropical, mas inevitavelmente muitos dos trabalhos eram sobre parasitologia mdica. Outro importante centro de pesquisa foi o de Cambridge, fundado em 1906, responsvel pela editorao da segunda revista cientfica de parasitologia Parasitology que, juntamente com o primeiro peridico de parasitologia Archives de Parasitologie , editado em 1898, constitui os primeiros traos da histria da parasitologia. Parasitologistas de renome deixaram neles seus artigos: Davaine, Cobbold, Nuttall, Blanchard e Hoeppli (Foster, 1965).

O estudo da parasitologia iniciou-se nos EUA em 1850 com Joseph Leidy, que ficou sozinho por aproximadamente 20 anos, publicando, entre outros trabalhos relevantes, a descrio, em 1860, do parasita Trichinella spirallis. Em 1910 foi fundada a Helmintological Society e em 1952 a American Society of Parasitology. As descobertas de Laveran, Ross e Bruce, no final do sculo 19, expandiram a protozoologia como importante ramificao da parasitologia. Em 1903, o Imperial Health Office, em Berlim, fundou a diviso de protozoologia e Schaudinn foi chamado para dirigi-la, sendo que em 1906 nascia a primeira escola de protozoologia, estabelecida em Londres em conexo com o Listen Institute. No Brasil, o histrico da parasitologia margeia o caminhar da medicina tropical, quando em 1829, foi criada a Sociedade de Medicina e Cirurgia do Rio de Janeiro que, atravs de um amplo programa, se estendeu desde a adoo de medidas de higiene pela populao at a medicina legal, passando pela educao fsica das crianas, enterro nas igrejas, denncias da carncia em hospitais, estabelecimento de regulamentos sobre as farmcias, elaborao de medidas para melhor atendimento aos doentes mentais, alerta da insalubridade dos prostbulos, destacando o saneamento bsico. Foi a poca da medicalizao das instituies hospitais, cemitrios, escolas, quartis e prostbulos , quando o projeto de medicina procurou destacar o saneamento (Nunes, 2000).

A Escola Tropicalista Baiana, integrada por vrios parasitologistas de renome, designava inicialmente um conjunto de mdicos que se organizavam ao redor de um peridico fundado em 1866 A Gazeta Mdica da Bahia margem da Faculdade de Medicina existente na antiga capital do Brasil Colnia. Os tropicalistas permaneceram na fronteira entre o paradigma miasmtico/ambientalista e a Teoria dos Germes, sendo que a escola estava preocupada em refutar o preconceito historiogrfico de que a medicina brasileira era imitao da europia, produzindo investigaes originais sobre as patologias nativas da Bahia e se posicionando independentemente face medicina acadmica europia e a classe mdica local (Benchimol, 2000). Peard (1992) enfatiza o antagonismo entre os integrantes dessa escola e os mdicos da capital do Imprio, encastelados na academia e na Faculdade de Medicina do Rio de Janeiro. A Sociedade Mdica de Cirurgia do Rio de Janeiro encarava o progresso como imitao da cincia e das instituies europias; os tropicalistas baianos investigavam a singularidade das doenas dos trpicos, a influncia do clima sobre as raas e sobre a gerao ou multiplicao de miasmas e germes, com interesse crescente pelo papel dos parasitas como produtores de doenas. Segundo esse mesmo autor, foi o modelo cientfico, que deslocava a ateno do meio ambiente para as etiologias parasitrias especficas, que deu "clara e poderosa" identidade aos tropicalistas baianos. Essa identidade adveio principalmente das

investigaes de Wucherer, relacionadas ancilostomase, filariose e malria. Segundo Benchimol (2000), as contribuies brasileiras ao programa de controle das filarioses seriam dadas pelas pesquisas embriolgicas e patognicas de Jlio de Moura e Pedro Severiano de Magalhes, destacando os trabalhos de Adolfo Lutz, o mais preparado para implementar o modelo mansoniano em reas ainda no exploradas pelos helmintologistas brasileiros, inclusive no campo da veterinria. A Escola Tropicalista Baiana tinha como membro, em 1841, Jos Cruz Jobim que elaborou trabalho sobre as doenas que mais afligiam escravos e indigentes do Rio de Janeiro. Entre elas, sobressaa uma doena vulgarmente conhecida como opilao, cansao, caquexia africana e, na literatura estrangeira, "tropical chlorosis", "mal de coen", etc. Baseando-se nos trabalhos de Jobim, Otto Wucherer diagnosticou, em 1865, um caso adiantado de hipoemia em um escravo que faleceu em seguida. Na autpsia, encontrou vermes da espcie Anchylostomum duodenale, identificado por Angelo Dubini, em 1838. As investigaes sobre essa doena prosseguiram na Bahia e no Rio de Janeiro, aps a morte prematura de Wucherer em 1873, porm as questes fundamentais relativas biologia e aos hbitos dos parasitas s seriam retomadas, num patamar bem mais sofisticado, em meados de 1880 por Adolfo Lutz (Benchimol, 2000).

Cerca de 20 anos depois do surgimento da Escola Tropicalista Baiana, Oswaldo Cruz criaria uma nova escola de medicina, voltada para a sade pblica. Em 1902, ele assume a direo da rea de sade pblica no governo de Rodrigues Alves, propondo ao congresso que o Instituto Soroterpico Federal fosse transformado "num instituto para estudo das doenas infecciosas tropicais, segundo as linhas do Instituto Pasteur de Paris" (Benchimol, 2000). Ele no foi atendido, porm destinou verbas prprias para elevar a categoria do ento Instituto de Manguinhos. As fronteiras de Manguinhos se alargaram e seus cientistas se embrenharam pelos sertes do Brasil para estudar e combater doenas, principalmente a malria. O instituto chefiado por Oswaldo Cruz foi a nica instituio sulamericana a participar do 14o Congresso Internacional de Higiene e Demografia, realizado em Berlim em 1907. Nesse evento, Oswaldo Cruz recebeu medalha de ouro pela sua atuao em Manguinhos, tendo essa condecorao uma enorme repercusso no Brasil. Em 1906 foi inaugurada, em Belo Horizonte, a primeira filial do antigo Instituto de Manguinhos e Carlos Chagas executou a primeira campanha antipaldica, em Itatinga, interior de So Paulo, onde se construa uma hidreltrica. Em 1908, o ento denominado Instituto de Manguinhos foi renomeado de Instituto Oswaldo Cruz. O modelo de mdico da poca do

campanhismo era Oswaldo Cruz, que sustentava que o saber assentavase na pesquisa e na experimentao com o objetivo de combater as endemias e as epidemias (Nunes, 2000). Em 1909, Carlos Chagas, mdico e pesquisador do Instituto Oswaldo Cruz, descobriria uma nova doena em Lassance, interior de Minas Gerais, a tripanossomase americana, ou doena de Chagas. Pela primeira vez na histria da medicina, um mesmo pesquisador identificaria o vetor (inseto conhecido como "barbeiro"), o agente etiolgico (o protozorio Trypanossoma cruzi) e a doena causada por esse parasita. A nfase dada originalidade cientfica da descoberta de Carlos Chagas expressou a importncia assumida no processo de institucionalizao da cincia biomdica no Brasil (Kropf et al., 2000). No ano seguinte, 1910, Chagas obteve o prmio Shaudinn, conferido pelo Instituto Naval de Medicina de Hamburgo, por uma comisso que reunia a nata da microbiologia e da medicina tropical mundial. A doena de Chagas consolidou a protozoologia como rea de concentrao das pesquisas, assim como a insero de Manguinhos (IOC) na comunidade cientfica internacional como importante centro de estudos sobre as doenas tropicais (Benchimol, 2000) Segundo Barata (2000), a forma de ocupao do espao agrrio e do espao urbano em So Paulo em meados do sculo 20 determinou as condies extremamente favorveis ocorrncia de doenas

transmitidas por vetores, doenas de transmisso hdrica e doenas de transmisso respiratria. Dentre as doenas transmitidas por vetores, destacaram-se nesse perodo a febre amarela, a peste, a malria, as leishmanioses cutneo-mucosas e a doena de Chagas. Em meados do sculo 20, eclodiu em So Paulo a epidemia de leishmaniose tegumentar durante a construo da Estrada de Ferro Noroeste, disseminando-se por toda a Alta Sorocabana, Alta Paulista e regio noroeste do Estado, seguindo a penetrao do homem e a derrubada das matas. A designao "lcera de Bauru" surgiu em decorrncia desse surto, visto que o acampamento dos trabalhadores localizava-se nessa cidade. Outros surtos ocorreram em cidades da regio (Piraju, Birigui, Penpolis, Araatuba), sendo que os casos ocorreram entre trabalhadores que derrubavam matas, moradores de vilas e povoados recm-instalados bem como sitiantes e fazendeiros (Pessa, 1949). No final do sculo, a endemia retornou ao Estado, apresentando-se agora como doena de reas periurbanas submetidas a processos de desmatamento para loteamento, nas quais os vetores apresentariam variao domiciliar. A doena, considerada inexistente no Estado, se manifestou em rea que sofreu grande transformao econmica substituindo a criao de gado pelo plantio da cana, na qual se emprega, temporariamente, grande contingente de mo de obra migrante durante a colheita (Barata, 2000).

As caractersticas epidemiolgicas da ocorrncia de malria em So Paulo refletem as condies de desenvolvimento socioeconmico do Estado. O incio da cultura cafeeira, no sculo 19, comea a modificar as condies de ocupao do espao no Estado, intensificando o processo de desmatamento, promovendo intensos fluxos migratrios internos e externos, estimulando a construo de ferrovias e propiciando grande crescimento econmico (Barata, 1997). As referncias s febres palustres intermitentes e febres paulistas so freqentes nesse perodo. possvel supor, a despeito da carncia de dados numricos sobre a doena, que todo o processo de ocupao, intensificado durante o sculo 19, tenha propiciado a instalao, consolidao e o aumento da endemia no Estado. Os relatos de epidemias no interior do Estado, durante a dcada de 1910, registram prevalncias altas, atingindo de 40 a 85% da populao. A ampliao dos conhecimentos relativos produo da malria evidencia paulatinamente a complexidade e o nmero de fatores envolvidos, seja em relao s diferentes espcies de plasmdios, em relao aos vetores e seus comportamentos extremamente variados ou em relao ao homem e s suas condies de vida (Barata, 1997). Dessa forma, a entrar no sculo 20, a malria tem sua sentena epidemiolgica central: a relao entre o agente, o meio ambiente e o hospedeiro. Alm dos estudos entomolgicos, o avano da

parasitologia e da imunologia permitiu, no decorrer do sculo, avanar

no conhecimento dos ciclos do parasito no homem e no mosquito, na produo de drogas especficas a cada fase do desenvolvimento dos diferentes plasmdios e, mais recentemente, na busca de uma vacina (Matos, 2000). Entre as endemias rurais importantes, a ltima a aparecer em So Paulo foi a esquistossomose, cujos primeiros casos autctones foram registrados em 1923. Foram registrados 11 casos sem que se conhecesse a espcie de transmissor envolvido. No foi atribuda maior importncia descoberta visto que se acreditava no haver condies propcias para a instalao da endemia (Barata, 2000). Na Segunda metade do sculo 20, surgem casos autctones de esquistossomose nos municpios de Ourinhos, Palmital e Ipau, regio onde encontrada a Biomphalaria glabrata, hospedeiro intermedirio com maior potencial para a manuteno de focos. Novos focos so detectados ainda no vale do Ribeira e vale do Paraba, regio que se tornar endmica para a doena, sendo a transmisso associada principalmente lavoura de arroz em alagados (Chieffi e Waldman, 1988). Alm da esquistossomose, as enteroparasitoses, ao longo da histria, so indicadas como um dos mais srios problemas de sade pblica do Brasil (Pessa, 1949, 1963, 1982; Rey, 1991; Neves, 2000). Pessa (1949, 1963) afirmou que entre os trpicos de Cncer e Capricrnio, existem mais infeces helmnticas que pessoas.

Observando os diversos e numerosos levantamentos sobre as enteroparasitoses realizados em todo o mundo e especialmente em nosso pas, vemos que a afirmao bastante atual (Bundy, 1995; Ferreira et al., 2000). Considerando a morbidade e a mortalidade que podem advir das infeces por enteroparasitas, a diminuio da capacidade de trabalho dos adultos parasitados e os custos sociais de assistncia mdica ao indivduo e comunidade, percebe-se facilmente que as parasitoses intestinais humanas representam expressivo problema de sade pblica nos pases do Terceiro Mundo (Barata, 2000).

Comentrios finais Neste incio de sculo 21, as parasitoses deixaram de ser doenas em torno das quais so mobilizados recursos internacionais de diferentes ordens, cedendo lugar a novos problemas, as chamadas "doenas da modernidade", como a sndrome da imunodeficincia adquirida (Aids) e as chamadas doenas reemergentes (antigos problemas), como a tuberculose e outras a ela associadas. A histria nos mostra que os antigos males persistem nos pases do Terceiro Mundo, frutos na sua grande maioria de condies socioeconmicas, sanitrias e higinicas deficientes, da no-

implantao de polticas pblicas que promovam o crescimento econmico, da no-distribuio igualitria de renda e do no-acesso universal educao e aos servios bsicos de saneamento e de sade.

REFERNCIAS

SILVA, Penilson. Farmacologia. 2002.Ed. Guanabara, 6 edio, 1374p. NEVES, David Pereira; Melo, Alan Lane; GENARO, Odair; LINARDI, Pedro Marcos. Parasitologia Humana. Ed. Atheneu, 10 edio, 422p. WWW.SIELO.COM acessada em setembro, 2007. REVISTA BRASILEIRA DE ANLISES CLNICAS. WWW.DIAGNSTICOPARASILOLGICO.COM acessada em setembro,2007.

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