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MEMBRANA CELULAR

- Bicamada Lipdica: formada por fosfolipdios anfipticos, ou seja, que tm uma extremidade hidroflica polar e uma hidrofbica apolar. . Os quatro pincipais fosfolipdos constituinte da bicamada so a fosfatidilserina, a esfingomielina, a a fosfatidiletanolamina e a fosfatidilcolina. a responsvel pela estrutura fluida bsica da membrana e serve como uma barreira relativamente impermevel passagem da maioria das molculas hidrossolveis. J os compostos hidrofbicos atravessas com mais facilidade a bicamada lipdica. Ex: a maioria dos venenos hidrofbica.

Fosfato cabea polar (hidroflica) Cadeia de (hidrofbica) cidos graxos apolares

Insaturao cis

~ Importncia da insaturao na cadeia de cidos graxos:

Os fosfolipdios ficam mais espaados, o que provoca uma menor interao entre eles, aumentando a fluidez da membrana.

- Os fosfolipdos, em gua, podem formar: Micela (1 camada): a poro apolar (hidrofbica) ainda permanece em contato com a gua.

H20 H20

Bicamada (forma plana): as pores laterais das cadeias apolares ainda apresentam contato com a gua.

H20

H20

Lipossomo (bicamada na forma esfrica): situao estrutural de organizao que energicamente mais favorvel, pois nenhuma poro das cadeias hidrofbicas est em contato com a gua.

H20

H20

- O lipossomo separa, dessa forma, seu contedo do meio externo. A clula nada mais do que um grande lipossomo, que separa os meios intra e extracelular. A formao da bicamada lipdica facilita a passagem de substncias hidrofbicas, e dificulta a passagem de substncias hidroflicas, incluindo a prpria gua. - Movimento dos fosfolipdios na membrana: Difuso lateral: movimento dos fosfolipdios na mesma monocamada. Acontece intensamente. Difuso transversa (flip-flop): movimento do fosfolipdeo indo de uma monocamada para outra. Raramente ocorre. Porm, esse processo pode ser intensificado e acelerado por uma classe de enzimas, denominadas translocadores de fosfolipdeos. Movimentos giratrios das cadeias de cidos graxos. Esses movimentos so importantes pois conferem fluidez e assimetria membrana, que so mantidas atravs de gasto energtico.

(Assimetria: h uma diferena na formao, na constiuio fosfolipdica entre as monocamadas da membrana. Exemplo: a face intracelular da membrana mais eletronegativa, devido fosfatidilserina,fosfolipdio eletronegativo que est mais concentrado na poo citoslica da membrana.) - Colesterol: quando este se encontra entre os fosfolipdios de cadeias saturadas, tende a afastar tais cadeias, tornando esta poro da membrana mais fluida. Quando localizado entre cadeias insaturadas, as torna menos fluidas, pois preenche os espaos entre elas, tornando a bicamada lipdica menos sujeita a deformaes nesse regio e, assim, diminui a permeabilidade da bicamada a pequenas moleculas hidrossolveis.. - Rafts lipdicos (microdomnios): domnios de membrana celular ricos em colesterol e esfingomielina (fosfolipdio saturado nesse caso, o colesterol est ento aumentando a fluidez). So mais espessos que o resto da membrana e determinadas protenas s conseguem se inserir nessas ilhas. Os fosfolipdios tambm participam ativamente da sinalizao celular, funcionando, por exemplo, como ncoras. Exemplo: ncora de GPI (glicosilfosfatidilinositol). O fosfatidilinositol pode ser fosforilado pela enzima PI3 quinase, desencadeando uma srie de reaes que formam uma ncora, pois a mudana conformacional faz com que enzimas se liguem. Ele tambm funciona como substrato de enzimas, que quebram sua estrutura uma cadeia hidrofbica e uma cadeia polar. - Protenas de Membrana: Protenas perifricas: no atravessam a bicamada lipdica. Protenas integrais: atravessam a bicamada lipdica. Elas podem se inserir na bicamada de duas formas principais: unipasso: atravessa a membrana uma nica vez. - - hlice multipasso:atravessa a membrana mais de uma vez.

Alas: domnios de interao com outras protenas Aminocidos hidrofbicos

Aminocidos hidroflicos Unipasso Multipasso

- Folha -pregueada: formam canais (poros) atravs da membrana, permitindo a passagem de substncias grandes.

- Glicoprotenas e proteoglicanos: protenas associadas membrana sempre na poro extracelular e que esto ligadas a carboidratos (acares) que formam o glicoclix. O glicoclix um envoltrio que protege a clula contra choques mecnicos e agentes qumico, como fosfolipases, que quebrariam os fosfolipdios da membrana. Importante tambm no reconhecimento celular. - Polarizao da Clula: ocorre devido morfologia da clula ou disposio dos componentes proticos. O trnsito das protenas na membrana regulado pelas protenas dos citoesqueleto, ou pela interao com outras protenas.

TRANSPORTE ATRAVS DA MEMBRANA


- Transporte Passivo: dependente do gradiente qumico e do gradiente eltrico (a face interna da membrana mais eletronegativa devido a uma maior concentrao de fosfatidilserina. Logo, as molculas carregadas positivamente tendem a entrar na clula e as carregadas negativamente tendem a sair). Dessa maneira, o transporte baseado em um gradiente eletroqumico.

Difuso Passiva: permite a passagem de pequenas molculas hidrofbicas e de pequenas molculas polares, a favor de seu gradientre eletroqumico. Difuso facilitada por carreadores proticos: compostos hdroflicos em geral so transportados, a favor de seu gradiente eletroqumico, por canais formados por protenas transmembrana (carreadores proticos). Esses canais possuem um poro seletor que especfico, permitindo apenas a passagem de um determinado tipo de molcula.

Canais inicos: seu funcionamento pode ser dependente de voltagem ou de um ligante. Os canais dependentes de voltagem so ativados pela variao da voltagem da membrana celular, o que pode sensibilizar determinadas protenas, que alteram sua conformao e abrem ou fecham o canal inico, pemitindo ou impedindo a passagem de ons como Na+ ou K+, por exemplo. So importantes na formao do potencial de ao nas clulas excitveis (nesse caso, o canal se abre quando o potencial da membrana se inverte). +++++ +++++ - - - - - - - ( )- - - - - - Canal fechado ------+ + + + (+ ) ------+++++

Canal aberto

J os canais dependentes de ligantes, ou receptores ionotrpicos, so ativados, como j diz o prprio nome, aps um ligante especfico se ligar ao canal. Exemplo: sinapse neuromuscular. A acetilcolina liberada no meio extracelular e se liga ao canal inico j formado, promovendo a sua abertura e a passagem de ons. (OBS: Canal X Carreador: No canal, o on perde a camada de solvatao, e ento o prprio canal substitui essa camada, havendo uma interao muito forte entre os dois. Logo, esse transporte altamente especfico. O canal age apenas pelo gradiente eletroqumico. J o transporte via carreador mais lento, pois necessrio que o carreador altere sua conformao para haver a combinao perfeita com a molcula a ser transportada. O carreador pode atuar tantono transporte

passivo quanto no ativo, indo contra o gradiente eletroqumico. Nesse caso, so denominados bombas.) Aquaporinas: So protenas integrais de membrana que formam canais especficos para a passagem de gua, que uma molcula grande e polar. - Transporte ativo: nesse caso, as molculas so transportadas contra o seu gradiente eletroqumico, num processo dependente de gasto de ATP. Bomba de Na+/K+-ATPase: responsvel por manter o gradiente eletroqumico dos ons Na+ e K+ atravs da membrana. Essa bomba ativada pela hidrlise do ATP. Existem trs stios de ligao para o Na+ no transportador, que so formados por aminocidos especficos. Quando h a hidrlise do ATP, o Na+ se liga e a protena transportadora altera sua conformao, transportando o Na+ atravs da membrana . O fosfato liberado pela converso de ATP em ADP tambm promove uma alterao nos aminocidos, ativando os dois stios de ligao para o K+, que ento transportado para o interior da clula.

Transporte ativo de glicose dependente de gradientes inicos de Na+: permite a passagem da glicose para dentro da clula, juntamente com o Na+, em um sistema de co-transporte. No intestino, a glicose est mais concentrada no meio intracelular, tendo que ser transportada ativamente para o interior da clula. Ela transportada, ento, junto com o Na+, que mais concentrado no meio extracelular, tendendo ento a entrar na clula. Nesse momento, a glicose se acopla ao transportador do Na+, entrando junto com ele na clula. Mas por que ento a glicose no transportada para fora com o Na+ pela bomba Na+/K+-ATPase? Porque, ao entrar na clula, a glicose sofre fosforilao, e tem sua conformao alterada, no se ligando mais ao tranportador de Na+.

- Endocitose: transporte de macromolculas. Fagocitose: englobamento, por modificao da estrutura da membrana, de molculas grandes. Ocorre um recobrimento por clatrina de partes da membrana interna, gerando uma fora que curva a membrana, formando vesculas. (molcula receptor adaptina clatrina dinamina vescula) Exemplos: internalizao de receptores (protenas) especficos para a cadeia constante dos anticorpos ligados a um determinado antgeno / endocitose mediada por receptores internalizao do LDL (colesterol ruim, de baixa densidade, que ocupa um maior volume e se deposita nas artrias). Quando a clula precisa do LDL, receptores especficos para ele se concentram em regies onde esto sendo formadas vesculas recobertas por clatrina. Pinocitose: englobamento de pequenas molculas, geralmente lquidos, por invaginao da membrana (do grego, clula bebendo). Transcitose: transporte sem alterao dos solutos atravs da clula. Exemplo: transporte de imunoglobulinas pelas clulas endoteliais. Potocitose: vrias molculas pequenas so endocitadas ao mesmo tempo, em uma cavola, vescula formada pela protena caveolina. Exemplo: reabastecimento dos estoques intracelulares de Ca++. O Ca++ mantido mais concentrado no exterior da clula, devido uma srie de mecanismos que favorecem essa concentrao (bombas, transporte acoplado, trocadores, canais). Essa regulao importante, pois nveis elevados de Ca++ no meio intracelular podem levar a clula apoptose. Na cavola, exitem protenas que concentram Ca++ nessa regio. Dessa forma, ao ocorrer a vesiculao, o Ca ++ liberado da clula. Existem

protenas (Trp 3) que foram canais para a passagem de Ca ++ para o retculo endoplasmticco, onde h receptores IP3.

SINALIZAO CELULAR
O desenvolvimento celular um processo complexo, composto por diversas etapas: gerao, proliferao, diferenciao, morte celular (apoptose). Todas essas etapas so controladas por sinalizao qumica. - Diferenciao: no desenvolvimento embrionrio, as clulas localizadas em diferentes regies do embrio esto expostas a sinais qumicos diferentes, o que leva a uma diferenciao das clulas. Esses sinais inibem ou estimulam a expresso de determinados genes. Assim, as clulas se diferenciam porque em algumas certos genes so expressos, e em outras no. Algumas clulas, como as clulas da glia, tm a capacidade de se desdiferenciar e se diferenciar novamente em um outro tipo celular. Nesse caso, a clula da glia poderia se desdiferenciar e depois se diferenciar em neurnio. - Proliferao: o cncer um grupo de clulas que proliferam e no se diferenciam. A quimioterapia o tratamento que bloqueia essa proliferao descontrolada. - Apoptose: morte celular natural ou programada. Todas as clulas apresentam uma forte tendncia suicida. Sinalizaes qumicas fazem com que a clula no entre em apoptose (esses sinais bloqueiam a transcrio dos genes da apoptose). A combinao de sinais atua de forma a desencadiar etapas diferentes do desenvolvimento. - Comunicao celular: Sinais solveis: so secretados de uma clula para outra. Sinais associados membrana: quando a clula com o sinalizador de membrana entra em contato com a clula com o recptor de membrana, ocorre a sinalizao. - Sinalizao solvel: Endcrina: uma clula libera um sinalizador (hormnio) na corrente sangunea. O sinalizador ir se ligar clulas que tenham o respectivo receptor.

Parcrina: ocorre atravs de mediadores locais, que no tm a capacidade de se difundir. S so capazes de interferir na populao de clulas mais prximas. Podem, inclusive, atuar na propria clula que os liberou (sinalizao autcrina), num mecanismo importante na potencializao da sinalizao (feedback).

Neuronal: Sinalizao sinptica. O neurnio sinaliza por meio de neurotransmissores, que so liberados no meio extracelular, atingindo uma clula-alvo prxima. Dessa maneira, trata-se de uma sinalizao parcrina especializada. Os neurotransmissores so levados pelo axnio at as regies mais distantes.

- Receptores: os receptores podem estar localizados tanto na membrana da clula-alvo como na poro intranuclear (nesses casos, o sinalizador uma molcula hidrofbica, capaz de atravessas a membrana plasmtica). A ligao entre o sinal e o receptor fraca, o que significa que eles no permancem muito tempo ligados, apenas o suficiente para ativar o receptor. Em muitos casos, o receptor mais importante para determinar o efeito que o sinal vai ter na clula do que o prprio sinal. Isso acontece porque podem existir diversos receptores para um mesmo sinal. Dessa maneira, ou o receptor determina o resultado da sinalizao, ou ento essa determinao feita pela via

bioqumica desencadeada. Exemplo: acetilcolina. No msculo epitelial, esse neurotransmissor promove a contrao. J no msculo cardaco, causa o o relaxamento e, em clulas glandulares, induz a secreo. Isso ocorre porque cada um desses tecidos apresentar um receptor diferente para a acetilcolina. Quando os receptores se localizam no interior da clula, existem protenas de um complexo que bloqueiam, inativam esse receptor, para que ele no desencadeie reaes bioqumicas na ausncia do sinal. Quando o sinal liberado e se liga ao receptor, este tem sua conformao alterada e se desliga do complexo inibitrio. Os receptores nucleares so, em geral, fatores de transcrio. Ou seja, aps ativados, induzem a transcrio de determinados genes: Sinal receptor alteraes conformacionais ativao de certos genes (transcrio)/ resposta primria sntese de protenas ativao da transcrio de outros genes/ resposta secundria sntese de protenas secundrias. OBS: O complexo ligante-receptor atua em uma regio especfica do DNA, que atua na transcrio de protenas tambm especficas, que por sua vez podem ser um fator indutor ou repressor da transcrio de outras protenas. - Agonistas e Antagonistas: os agonistas so as molculas que induzem a ativao de um determinado receptor; j os antagonistas tm papel oposto: so agentes que bloqueiam esse receptor. - Receptores de membrana: geralmente so protenas integrais de membrana (transmembrana). Podem ser de trs principais classes: Ionotrpicos: so canais que permeiam ons. Quando o canal est fechado no h fluxo de ons; quando aberto, h. O canal se abre quando o sinal se liga a ele. Aps essa ligao, o receptor muda a sua conformao, abrindo a passagem e permitindo a entrada ou sada de ons. o mtodo mais rpido.

Catalticos: so uma enzima, ou esto diretamente acoplados a uma. Aps a ligao do sinalizador, a face intracelular dessa enzima se torna ativa, capaz de catalisar uma determinada reao. Esses receptores muitas vezes respondem a fatores de crescimento (como NGF, EGF, etc), que so importantes para o desenvolvimento do organismo. - Ativao do receptor cataltico: o receptor um monmero, mas cada fator de crescimento (ligante) se liga a dois receptores simultaneamente, aproximando-os e formando um dmero (dimerizao do receptor), Em seguida, o receptor transfosforilado um monmero fosforila o outro, tornando a poro cataltica ativa.

- Principais classes de receptores catalticos: Receptor tirosina quinase Receptor com atividade tirosina quinase associada Receptor serina/treonina quinase Receptor histidina quinase Receptor com atividade tirosina fosfatase Receptor com atividade guanililciclase Metabotrpicos: sempre agem atravs da desencadeao de vias bioqumicas intracelulares. A ativao dessas vias feita atravs da protena G, a quem est sempre associado o receptor metabotrpico.

- Ativao da protena G: a protena G trimrica, composta pelas subunidades , e . Tem a capacidade de ligar-se ao GDP (inativa) ou ao GTP (ativa). Se localiza na face interna da membrana plasmtica, associada a um receptor metabotrpico. Quando est inativa, sua subunidade est ligada ao GDP, que bloqueia sua ligao com o receptor metabotrpico. Quando o ligante ativa o receptor, este altera sua conformao, permitindo com a protena G se ligue a ele e troque o GDP por uma molcula de GTP. A subunidade se separa do complexo -, e ambos tm a capacidade de ativar efetores.

A subunidade ligada ao GTP uma GTPase, ou seja, pode hidrolisar o GTP, convertendo-o em GDP. Dessa maneira, ela volta a ter afinidade pelo complexo - e a protena G retorna a sua conformao inicial. - Principais classes de protena G: Gs: estimulatria estimula efetores Gi: inibitria inibe efetores Golf: olfatria Gt: visual (transducina) Gq: ativa a fosfolipase C - Sistemas efetores: Quando a protena G ativa uma enzima, ela desencadeia uma reao, e o produto dessa reao chamado de segundo mensageiro. Exemplos de segundos mensageiros: AMPc, GMPc, DAG, IP3. Via do AMP cclico: A protena G ativa a enzima adenilato ciclase, que converte o ATP em AMP cclico (AMPc), atravs da remoo de dois fosfatos. Quando muito AMPc sintetizado, uma enzima chamada fosfodiesterase o converte em 5AMP, que no tem atividade biolgica. O AMPc ativa uma proteinoquinase, a PKA. A PKA tem duas subunidades regulatrias e duas subunidades catalticas. Nas subunidades regulatrias existem stios para a ligao do AMPc.

Quando essas ligaes ocorrem, as subunidades catalticas so liberadas para fosforilar diversas protenas, desencadeando uma cascata de sinalizao.

A PKA pode fosforilar (ativar) uma protena chamada CREB, que um fator de transcrio gnica localizado no citoplasma. A CREB, ao ser ativada, entra no ncleo e se liga ao CRE, uma regio do DNA, induzindo uma transcrio gnica e sintetizando um canal inico ou outras protenas. No caso do canal inico, a clula se torna permevel a um in que no era antes. PKA
ATIVA

CREB (fator de transcrio gnica)

Se liga ao CRE e induz a transcrio Via do GMP cclico: Funciona da mesma forma que a via do AMPc. A enzima que o sintetiza a guanilato ciclase, e o GMPc ativa a PKG. Via do Clcio: A protena G ativa a fosfolipase C, que cliva o PIP2 (fosfolipdio da membrana plasmtica, derivado do fosfatidilinositol), gerando dois produtos (segundo-mensageiros): o DAG (diacilglicerol) e o IP3 (inositol trifosfato). O IP3 estimula a liberao de Ca++ do retculo endoplasmtico, atravs da ativao de canais especficos. J o DAG pode ser clivado novamente (desta vez, pela fosfolipase A2) para gerar cido aracdnico, ou ento ativar a proteinoquinase C (PKC), que dependente de Ca++. O aumento inicial de Ca++ no citosol, induzido pela IP3, altera a PKC, fazendo com que ocorra sua translocao do citosol para a face citoplasmtica da membrana plasmtica. Na membrana, ela

ativada pela combinao de Ca++, DAG e fosfatidilserina (PS), podendo ento fosforilar outras vias.

Outra via importante na qual est envolvido o Ca++ a da calmodulina. O Ca++ se liga a calmodulina e, aps essa ligao, esse complexo ativa a protena CAMquinase II, que tem a capacidade de se autofosforilar e de fosforilar outras vias. A CAMquinase II atua na liberao de neurotransmissores nas sinapses. Via das MAP-quinases: As MAP-quinases (proteinoquinases ativadas por mitgeno), tambem chamadas de ERKs, so proteinoquinases que no so ativadas por segundo-mensageiros, e sim por uma proteinoquinase, como a PKA. Essa via composta por uma cascata de fosforilao: uma MAP3K (MAP-quinase-quinase-quinase), ao ser ativada por estmulos extracelulares, fosforila a MAP2K (MAP-quinase-quinase) em seu resduo de serina e treonina, e ento a MAP2K ativa a MAPK (MAPquinase), que fosforila (ativa) fatores de transcrio gnica.

xido ntrico (NO): O NO um gs que se difunde facilmente pela bicamada lipdica, e atua como sinalizador qumico em vertebrados. Sua ligao feita atravs da ligao direta do NO em uma enzima no interior da clula-alvo. Essa sinalizao mediada por NO acontece em diferentes tipos celulares (endotlio- relaxamento dos vasos, neurnios, clulas gliais, macrfagos e neurtfilos- resposta imune, pnis- ereo). - Sntese do NO: O NO sintetizado a partir do aminocido arginina, numa reao catalisada pela enzima NO-sintase, e tem um vida mdia de 5-10 segundos. Aps esse tempo, ele convertido em nitritos e nitratos.

- Modo de ao do NO: o principal alvo do NO na clula-alvo a enzima guanilato ciclase solvel, que produz ento GMPc, e leva a ativao da PKG. NO
ATIVA PRODUZ Guanilato ciclase solvel

GMPc

ATIVA

PKG

- Vias de Ao do NO: Endotelial: nesse caso, o NO induz vasodilatao- o msculo relaxa e aumenta o dimetro interno do vaso Os mecanismos de vasoconstrio e vasodilatao so importantes do direcionamento do aporte de nutrientes em cada momento. So controlados pelo NO, que produzido em resposta acetilcolina. Acetilcolina
LIGA

Receptor Metabotrpico

ATIVA

NO-sintase

ATIVA guanilato ciclase solvel Msculo liso DIFUNDE NO INDUZ GMPc Relaxamento INDUZ Vasodilatao

Macrfagos: em resposta a determinados fatores, os macrfagos sintetizam a NO-sintase (NO-sintase induzida). Em casos de clulas tumorais, o NO pode bloquear a sntese de DNA, o que impede a proliferao. O ciclo de Krebs tambm pode ser inibido, interrompendo a gerao de energia para a clula. Sinal (microorganismo) receptores no macrfago sntese de NO-sintase
DIFUNDE

NO Inibe a proliferao da clula contaminada Sistema antgeno ou inibe fatoresnervoso, o NO considerado um pelo Nervoso: no sistema que fornecem mensageiro para essa clula energia intracelular ou mensageiro retrgrado. Na sinapse, a clula pr-sinptica libera neurotransmissores, como o glutamato, que se ligam aos receptores na clula ps-sinptica. Aps essa ligao, aumenta a permeabilidade a Ca++ na clula ps-sinptica o que, junto com a

calmodulina, ativa a NO-sintase, gerando NO. O NO se difunde para a clula pr-sinptica, o que estimula a liberao de mais neurotransmissor (glutamato), num mecanismo de feedback positivo, que fortalece a sinapse. Se essa sinalizao retrgrada no estiver sincronizada, a sinapse enfraquecida, o que caracteriza a plasticidade do sistema nervoso. cido aracdnico: O cido aracdnico no considerado um segundo mensageiro clssico, mas um mensageiro intracelular importante, que pode atuar na prpria clula ou em clulas vizinhas. A fosfolipase A2 induz a formao do cido aracdnico, a partir de fosfolipdos da membrana (DAG). Esse mecanismo induzido por altas concentraes de Ca++. O cido aracdnico pode ser convertido em leucotrienos, prostaglandinas e tromboxanos. - Vias: Lipooxigenase leucotrienos Ciclooxigenase prostaglandinas e tromboxanos - Caractersticas de receptores catalticos e metabotrpicos: Especificidade: cada ligante atua sobre um stio especfico de seu receptor. Amplificao do sinal: a partir de um nico sinal, uma cascata de reaes desencadeada. Capacidade de integrao de sinais: dois sinais geram uma nica resposta biolgica. Exemplos: no msculo cardaco, dois receptores (um de adrenalina e um de acetilcolina) esto associados a um mesmo efetor. A adrenalina, associada a protena Gs, ativa o receptor, enquanto que a acetilcolina,associada a protena Gi, inativa o receptor. Dessensibilizao/Adaptao: a clula deixa de ser sensvel a um determinado ligante. Por exemplo, no caso de concentraes de ligante muito altas, a clula pode se dessensibilizar para evitar um efeito txico. A clula tambm pode se dessensibilizar retirando o receptor da membrana (sequestro do receptor), o que pode acontecer das seguintes maneiras: - degradao do receptor em lisossomos (efeito prolongado) down regulation; - inativao do receptor (modificao da estrutura do receptor, da protena G ou do efetor) arrestina se liga ao receptor fosforilado, bloqueando o stio de ligao da protena G, e promovendo a internalizao do receptor.

BIOELETROGNESE
- O impulso eltrico a base da comunicao entre as clulas excitveis (neurnios), que essencial para o funcionamento do sistema nervoso. O neurnio apresenta dois estados: repouso (perodo no qual neurnio no est sendo estimulado) e atividade. - Potencial de Repouso: Os estudos que confirmam a voltagem das membranas se deram atravs da medio via eletrodos: R1 R2 R3 Axnio Meio extracelular Diferena de potencial (d.d.p.) = 0 mV - R1, R2 e R3: eletrodos de registo medem a voltagem comparao entre os meios. Ao retirar um eletrodo do meio extracelular (R2)e aproxim-lo da membrana, observa-se que a d.d.p. entre R1/R2 de -60 mV. Logo, conclui-se que a face interna da membrana negativa em relao face externa. +++++++++++
- -------------------

Citoplasma neutro Meio extracelular neutro

- Voltagem da membrana = potencial de membrana. Quando a clula de encontra no repouso = potencial de repouso. Quando o neurnio est em repouso, sua voltagem (potencial) se mantm constante (potencial de repouso). Quando a clula entra em atividade, ocorre uma variao nessa voltagem.

importante manter estvel a voltagem durante o repouso, porque assim a menor mudana nessa voltagem faz com que a clula perceba um estmulo, respondendo-o adequadamente. - Gerao do Potencial: 1 2 + + + + + + Migrao Os nions ( ) migram do meio mais concentrado (1) para o meio menos concentrado (2), pela fora difusional. O mesmo processo aconteceria com os ctions ( ),+sendo que o fluxo de nions gera uma atrao por esses ctions no meio 2. Porm, a membrana seletiva e, no desenho, nota-se que esses ctions so muito grandes, ou seja, a membrana impermevel a eles. Dessa maneira, os nions passam para o meio 2 e os ctions se acumulam no meio 1, sem conseguir passar. Devido fora eltrica (Fe), muitos nions tendem a voltar para o meio 1.

1 + + + + + -

2 + + Fd (Gradiente Qumico) Fe (Gradiente Eltrico)

- Quando Fd = Fe, o fluxo resultante = 0 (equilbrio inico) Fd = Fe = Eon (Potencial de equilbrio do on) Exemplos: + + + + + + + + + + +

+
-

K
-

+
Fe
+

- + - + - + - + - + - + - +

K+ ClFd

Cl
Fd Fe

+ + Ek : -75 mV

Na+
Na+ Fd Fe Ca++ Ca++ Fd Fe

Ca++

ENa+: +55 mV - O equilbrio do Na+ s acontece quando a face interna estiver, momentaneamente, carregada positivamente. Desse modo, a Fe estar direcionando o Na+ para o meio extracelular. - Clulas da glia: PR = Ek+ = -75 mV Essas clulas s so permeveis ao K+, por isso seu PR= Ek+ Canal de repouso ou vazamento

Na atividade, a clula se torna ainda mais permevel ao K+, ou a outros ons. A manuteno do repouso depende do gradiente eletroqumico dos ons, da permeabilidadde da membrana ao on, e da atividade da bomba de Na+/K+ ATPase. - Neurnio: PR= -60 Mv No repouso, permevel ao K+ e ao Na+.

Via canal de repouso

K+

Na+ Bomba de Na+/K+ ATPase

Via canal de repouso

- A medida que o Na+ entra na clula, a Fe do K+ diminui, pois esto entrando muitas cargas positivas. A atrao do K+ pela face interna da membrana j no , ento, to grande. O efluxo de K+ maior do que o influxo.

Como s entra Na+ e sai K+, os gradientes inicos iniciais da clula so alterados, porm isso no desejado. O gradiente eletroqumico original mantido atravs da bomba de Na+/K+ ATPase. A bomba quebra ATP (transporte ativo) para bombear os ons K+ para dentro e Na+ para fora, ou seja, contra o gradiente qumico (bomba eletrognica gera eletricidade; bombeia mais cargar positivas para fora do que para dentro, mantendo a voltagem negativa da interface interna da membrana). OBS: Apesar de haver duas foras puxando o Na+ para dentro da clula, ele no tem muitas entradas (canais), por isso no ocorre um desequilbrio.

POTENCIAL DE AO
- Assim como o potencial de repouso, o potencial de ao tambm foi constatado a partir de estudos utilizando eletrodos. PR = -60 mV
__:

R1 R2 -----++++

E = eletrodo de estmulo. Para que a clula fosse estimulada, foram colocadas cargas em seu interior, injetando uma corrente na clula. Aps a injeo de cargas negativas, a face interna da membrana ficou ainda mais negativa (aumento da d.d.p.), por um certo tempo. mV t(ms) - 60 Estmulo Essa hiperpolarizao atingiu o eletrodo R1, mas no o R2: R1: Clula hiperpolarizada R2: no hiperpolarizou

Quanto mais carga negativa, mais aumenta a d.d.p. e maior a resposta da clula. Quando so injetadas cargas positivas, a d.d.p. diminui, e a clula despolariza. Conforme se aumenta o estmulo, nota-se que, a partir de certo ponto, a clula assume uma pado de resposta: o chamado potencial de ao.

E:

= R1:

R2:

Potencial de Ao - A resposta hiperpolarizante sempre proporcional ao estmulo aplicado e no propagada na clula (resposta local/resposta eletrnica). - A resposta despolarizante proporcional ao estmulo aplicado s at certo ponto. Depois, essas respostas se tornam iguais (potencial de ao). Pode ser uma resposta local ou uma resposta que se propaga a longas distncias (resposta propagvel). Estmulo propagvel = Impulso nervoso. O que diferencia os estmulos geradores de potencial de ao com a mesma amplitude a quantidade de potenciais de ao gerados (frequncia). - Cintica de um Potencial de Ao:

2 1 3

P.R. 4

- Tempo constante: 1-2 ms - Amplitude constante ( no existe um P.A. maior do que outro, em um mesmo tipo celular) - Velocidade de conduo constante - Perodo refratrio (relativo ou absoluto)

- Fases: Fase 1 Ascendente (despolarizao): mais canais dependentendes de voltagem se abrem, permitindo um maior influxo de sdio na clula (aumento de cargas positivas). TTX: neurotoxina que fecha esses canais de sdio impede a ocorrncia do P.A. Fase 2 Overshoot: a interface interna da membrana est positiva em relao externa, ao contrrio do que ocorre no repouso. Fase 3 Descendente (repolarizao): ocorre efluxo do K+, atravs de canais dependentes de voltagem. A toxina TEA bloqueia esses canais, prolongando o P.A. Fase 4 Hiperpolarizao ps-potencial: ocorre pois a clula continua, por um tempo, com os canais de K+ abertos, chegando a perder muito K+ e se hiperpolarizando. Na+ Estmulo (despolarizao) Canais dependentes de voltagem abertos K+

Canais dependentes de voltagem fechados

Na+

K+

K+

Bomba Fe Na+

K+ Fd
Fd

Fe

Na+

- Estados dos canaisdependentes de voltagem:

Canais de Vazamento (P.R. e P.A.)

++ -Fechado (no conduz corrente)

+ Aberto (conduz corrente)

+ Inativado (clula despolarizada, mas o canal pra de conduzir corrente)

Um canal fechado pode se abrir a qualquer momento, e um canal inativado no. - Perodo Refratrio: a clula pode no responder a uma estmulo, se ela j estiver respondendo a um anterior, Absoluto: a clula no responde ao segundo estmulo porque ainda est respondendo ao primeiro (canais de sdio ainda abertos ou inativos). Relativo: alguns canais de sdio j esto fechados, podendo responder se o estmulo for maior que o anterior. - Limiar de Excitabilidade: variao de voltagem necessria para abrir um nmero de canais dependentes de voltagem de Na+ suficiente para que o P.A. seja disparado.

PROPAGAO DO POTENCIAL DE AO
- Regies do Neurnio: Corpo celular: onde esto localizadas as organelas. Regio onde ocorre a sntese proteca. Dendritos (rede dendrtica): responsvel pela recepo de sinais. a regio responsvel pela integrao de sinais e pelo disparo do P.A. Axnio: regio onde se propaga o P.A. (o P.A. autopropagvel). a regio que transmite o sinal (liberao de neurotransmissores) para a outra clula. Cone de Implantao Liberao de sinais

Sinal

- clula despolarizada = clula excitada / clula hiperpolarizada = clula inibida (se afasta do limiar do P.A.) - Cone de implantao (zona de disparo): regio onde gerado o potencial de ao. onde esto presentes os canais de Na+ dependentes de voltagem que causam a despolarizao da clula.

- O P.A. autopropagvel. O estmulo inicial abre um canal de Na +. A entrada de cargas positivas vai despolarizando a clula, o que estimula a abertura de novos canais, em segmentos adjacentes do axnio (impulso autoregenerativo). Aps a entrada do Na+, ocorre a sada do K+ (repolarizao, naquele segmento do neurnio). Um P.A. sempre segue uma s direo.

- Fatores que alteram a velocidade de propagao do Potencial de ao: - Dimetro do axnio: quanto maior o dimetro, maior a velocidade de propagao. - Propriedades passivas da membrana: resistncia da membrana (RM)bicamada lipdica, impemeabilidade a ons, capacitncia (a membrana funciona

como um capacitor eltrico, pois armazena cargas), resistncia do axoplasma (RA). Considerando que as clulas tenham a mesma RM e capacitncia, o fator diferencial o RA: quanto maior o dimetro, menor o RA (pois as organelas, os obstculos corrente, ficam mais dispersos). - Bainha de Mielina: axnios de pequeno dimetro so envoltos por uma capa lipdica, para aumentar a velocidade de propagao do P.A. RM +++ --------Corrente Saltatria Apenas onde no tem mielina

Regio sem mielina N de Ranvier: RM baixa muitos canais

Mielina

- Onde tem mielina, a capacitncia menor do que no resto do axnio. mais fcil despolarizar nas regies onde as cargas esto mais separadas (ns de Ranvier)

TRANSMISSO SINPTICA
- Input: informaes que chegam ao neurnio - Output: informaes que saem do neurnio - Um axnio pode se ramificar e hiperpolarizar ou despolarizar diversos alvos. - Sinapse: regio de contato onde ocorre a transmisso do potencial de ao. - Clula pr-sinptica: envia o sinal de estmulo (despolarizao) ou inibio (hiperpolarizao). sempre um neurnio - Clula ps-sinptica: recebe o sinal. No necessariamente um neurnio. Pode ser um clula muscular (sinapse neuromuscular). - Tipos de transmisso sinptica: Sinapse eltrica: ocorre contato fsico entre as clulas pr e pssinpticas, atravs de junes do tipo GAP. A fenda sinptica bem estreita. O sinal o mesmo para todas as clulas (se uma despolariza,

todas despolarizam). A corrente vai se perdendo com o tempo. extremamente rpida, pois as clulas so estimuladas praticamente ao mesmo tempo (sincronizao de atividades). Sinapse qumica: muito mais lenta que a sinapse eltrica. Quando a clula pr-sinptica despolarizada, ocorre a liberao de neurotransmissores. O neurotransmissor reconhecido por receptores na clula ps-sinptica, podendo hiperpolariz-la ou despolariz-la. Pode causar respostas diferentes nas clulas ps-sinpticas.

SINAPSE NEUROMUSCULAR (PERIFRICA)


- Ocorre entre neurnio e msculo esqueltico. Os neurnios que atuam nessas sinapses so os neurnios motores (motoneurnios). Os que se conectam com os msculos esto localizados na medula espinhal. Quem trabalha, pensa no que vai fazer, so os neurnios motores corticais. O neurnio se prolonga at o msculo (enerva o msculo). A regio especfica da fibra muscular que recebe essa enervao a placa motora. As fibras musculares esquelticas s possuem receptores para um tipo de neurotransmissor, a acetilcolina. No msculo esqueltico a acetilcolina sempre induz a contrao (despolarizao). Cada fibra recebe informaes de um nico motoneurnio. A liberao dos neurotransmissores se d por exocitose, via vesculas, que se fundem membrana plasmtica da clula ps-sinptica e liberam seu contedo. A liberao dos neurotransmissores ocorre em regies especficas do terminal pr-sinptico. Potencial de Ao despolarizao abre canais entra Ca++ protenas das vesculas reconhecem protenas da membrana liberao do neurotransmissor. As protenas do citoesqueleto conduzem essas vesculas at os terminais sinpticos. A CAMquinase fosforila a sinapsina, que faz com que a vescula se desligue do citoesqueleto. Se no houver Ca++, no h liberao. - Acetilcolina: sintetizada pela enzima colina acetiltransferase no citosol. Acetil-CoA + colina = acetilcolina. Formada, h um armazenamento de acetilcolina, que liberada de forma quntica, pois armazenada em vesculas. A acetilcolina internalizada nas vesculas contra o seu gradiente de concentrao, atravs de uma bomba. A bomba hidrolisa ATP, internaliza H+ (prton), acidificando o meio, e fazendo com que uma protena acople a sada do H+ entrada da acetilcolina (transporte ativo secundrio). - O sinal (liberao da acetilcolina) deve ser interrompido (dessensibilizao), pois pode haver fadiga (contrao sucessiva e excessiva), levando a uma falta de energia, causada por excesso de acetilcolina. Logo, uma enzima, na fenda sinptica, a acetilcolinesterase, degrada a acetilcolina em acetato e colina, empedindo que ela fique muito ligada ao receptor. O acetato se difunde no meio e a colina internalizada pelo

neurnio por um transportador (recaptao), para ser reciclada e produzir mais acetilcolina.. No msculo esqueltico, os receptores para acetilcolina so receptores ionotrpicos com trs anis com aminocidos carregados negativamente que carreiam Na+, K+, Ca++. A entrada de Na+ despolariza a membrana da fibra muscular. - Potencial de Placa Motora: despolarizao de grande amplitude na clula muscular causada pela ligao da acetilcolina ao receptor. No propagvel. A despolarizao local capaz de promover abertura de canais de Na+ para que possa haver gerao e propagao do potencial de ao por toda a fibra muscular, para que toda a fibra despolarize. Na+ e K+ entram ou saem por canais diferentes.