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FRANCISCO JOS DE MORAES MACEDO

CONTRIBUIO AO ESTUDO DO DESENVOLVIMENTO DO TUBRCULO ARTICULAR DA ARTICULAO TEMPOROMANDIBULAR EM EMBRIES HUMANOS

Tese apresentada ao Instituto de Cincias Biomdicas da Universidade de So Paulo para obteno do ttulo de Doutor em Cincias.

So Paulo 1998

FRANCISCO JOS DE MORAES MACEDO

CONTRIBUIO AO ESTUDO DO DESENVOLVIMENTO DO TUBRCULO ARTICULAR DA ARTICULAO TEMPOROMANDIBULAR EM EMBRIES HUMANOS

Tese apresentada ao Instituto de Cincias Biomdicas da Universidade de So Paulo para obteno do ttulo de Doutor em Cincias. rea de concentrao: Anatomia Funcional: Estrutura e Ultra-estrutura Orientador: Prof. Dr. Bruno Knig Jnior Co-orientador: Prof. Dr. Gerson Chadi

So Paulo

1998

FICHA CATALOGRFICA Preparada pela Biblioteca do Instituto de Cincias Biomdicas da Universidade de So Paulo
Macedo, Francisco Jos de Moraes. Contribuio ao estudo do desenvolvimento do tubrculo articular da articulao temporomandibular em embries humanos / Francisco Jos de Moraes Macedo.-- So Paulo, 1998. Tese (Doutorado)--Instituto de Cincias Biomdicas da Universidade de So Pau-lo. Departamento de Anatomia. rea de concentrao: Anatomia funcional : estrutura e ultra-estrutura. Orientador: Knig Jnior, Bruno. Descritores:1.Articulao temporomandibular 2.Estereologia 3. Embries humanos 4.Desenvolvimento 5.Msculo pterigideo lateral 6.Tubrculo articular
ICB/SBIB-036/98

Candidato(a):

FRANCISCO JOS DE MORAES MACEDO.

Ttulo da Tese: Contribuio ao estudo do desenvolvimento do tubrculo articular da articulao temporomandibular em embries humanos.

A Comisso Julgadora dos trabalhos de Defesa da Tese de Doutorado, em sesso pblica realizada a ........../........../.........., considerou o(a) can-didato(a): ( ) Aprovado(a) ( ) Reprovado(a)

1) Examinador(a) _____________________________________________

2) Examinador(a) _____________________________________________

3) Examinador(a) _____________________________________________

4) Examinador(a) _____________________________________________

5) Presidente _________________________________________________

Aqueles que no chegaram a nascer, mas que com a sua morte trouxeram luz para um maior entendimento da vida....

Por exemplo no prova.


Ditado idiche.

Selma minha esposa e s minhas filhas Juliana e Raquel, todo meu amor e carinho pelo incentivo e pacincia demonstrados durante todos estes anos. Aos meus pais, Mrio e Ca-rolina, que no mediram esforos para me proporcionar uma educao volta-da para os bons valores da vida. Aos meus irmos, Mrio, Cssia e Luiz, ombros amigos em to-das as caminhadas.

AGRADECIMENTOS
Ao Prof. Dr. Bruno Knig Jnior, co-autor deste trabalho, por todo o carinho, pacincia, respeito humano e orientao precisa. Ao Prof. Dr. Gerson Chadi, co-autor deste trabalho, pela orientao segura e objetiva nas quantificaes estereolgicas. Ao Programa de Ps-Graduao em Anatomia do Instituto de Cincias Biomdicas da Universidade de So Paulo, na pessoa do atual Coordenador e Chefe do Departamento de Anatomia, Prof. Dr. Ii Sei Watanabe.

Ao Prof. Dr. Jos Lzaro Barbosa dos Santos, mais que um exemplo profissional, um pai, um incentivador s pesquisas. Ao Prof. Dr. Edy Walter de Sousa pelo incentivo no incio da minha carreira universitria. Ao Prof. Dr. Jackson Cioni Bittencourt, Chefe do Laboratrio de Neuroendocrinologia Bsica, pela orientao durante as fotografias junto ao microscpio ptico comum. Ao Professor Doutor Nelson Francisco Anunciato, pelo incentivo ao incio destes trabalhos. Professora Doutora Helosa Amlia de Lima Castro, pelo apoio durante o exame de seleo para o ingresso ps-graduao. Aos amigos do Laboratrio de Fatores Neurotrficos e Plasticidade Neuronal, pelo auxlio nas quantificaes estereolgicas. Doutoranda Fonoaudiloga Vnia Canterucci Gomide, pelo companheirismo e apoio durante toda esta jornada. Aos amigos Carla Arajo Carvalho, Giovaldo Serafim Correia e Maria Cristina dos Santos, funcionrios da Secretaria do Departamento de Anatomia do ICB III da USP, pela pronta colaborao. A todos os funcionrios da Biblioteca do Instituto de Cincias Biomdicas, em especial Carmelina de Fcio, Elza de Souza, Delza Piruna, Isabel Andrade, Maria do Socorro Rocha Bezerra, Marily Antonelli Gaeber, Priscila Ruano, Rita Ortega e Slvio Marques, pela colaborao prestada. A todos os funcionrios do Laboratrio de Anatomia do ICB I, em especial ao Senhor Adevair Urenha Alves pela constante e valiosa ajuda. Aos Diretores e Funcionrios do Laboratrio de Anatomia Patolgica e Citologia de Itu, que muito me ajudaram no preparo das peas anatmicas e das lminas, em especial Sra. Maria Aparecida Costa Silveira e ao Dr. Alex Tadeu Moraes. Ao Sr. Rogrio de Oliveira pelo auxlio nos cortes e preparo das lminas. Aos companheiros de ensino: Dra. Adriana Tessitore, Dr. Cludio Ro-

drigues Azenha, Dr. Eduardo Massatoshi Iwamoto, Dr. Eduardo Sakai, Dra. Elizabeth Sayuri Seo Nakano, Dra. Luciana Vitria Olivier, Dra. Nise Alonso Manicardi e Dr. Waldyr Wanderley Jnior, pela pacincia nos meus momentos de ausncia. Aos amigos Dr. Antnio Todesco Ferraz, Dr. Guazi Ragueb Chahda, Dra. Francelita Saraiva de Novaes Ribeiro, e Ismael Guarnelli pelo va-lioso auxlio durante toda a confeco destes trabalhos. Professora e me Carolina de Moraes Macedo e Professora e tia Martha Brand de Moraes pelo auxlio nas correes ortogrficas. s secretrias Dalila Aparecida Giacomello, Isabel Ceclia Giacomello e Rosimeire Santos Silva, pela colaborao constante. Ao Senhor Jos Cao Ribeiro Filho e famlia, pelo valioso auxlio na digitao e diagramao do presente trabalho. A todos os funcionrios do Departamento de Anatomia do ICB III da USP, que com sua amizade estiveram sempre presentes em minha jornada.

SUMRIO
Lista de abreviaturas e Smbolos Resumo Summary 1 Introduo................................................................................. 1 2 Proposio..................................................................................13 3 Material e Mtodos...................................................................15 3.1 Mensurao das idades das peas......................................16 3.2 Disseco............................................................................22 3.3 Incluso total da pea em parafina....................................31 3.4 Diviso da pea parafinada pela linha sagital mediana...32 3.5 Diviso do conjunto cabeapescoo-cngulo do membro superior, do restante do corpo.....................................34 3.6 Corte para a obteno de um paralelismo com a face do embrio......................................................................35

3.7 Seccionamento....................................................................37 3.8 Orientao dos cortes.........................................................38 3.9 Mtodo de colorao das seces......................................39 3.10 Mtodo de leitura e estruturas analisadas.........................39 3.11 Pesquisa sobre a existncia de fibras do msculo pterigideo lateral no osso temporal.........................................39 3.12 Anlise estereolgica da localizao e extenso espaciais das estruturas.............................................................40 3.13 Anlise estereolgica do volume das estruturas com o auxlio do computador........................................................42 4 Resultados..................................................................................45 4.1 Anlise quantitativa da posio espacial das estruturas...46 4.2 Anlise estereolgica quantitativa do volume das estruturas................................................................................63 4.3 Descrio dos achados histolgicos dentro de uma sequncia temporal e espacial............................................67 5 Discusso....................................................................................80 6 Concluses.................................................................................95 7 Anexos........................................................................................98 8 Referncias Bibliogrficas......................................................101

LISTA DE ABREVIATURAS E SMBOLOS

IU intra-uterina ATM articulao temporomandibular CRL comprimento cfalo-caudal, do ingls crown-rump lenght GL maior comprimento, do ingls greatest lenght CM cartilagem mandibular, cartilagem de Meckel OM osso mandibular OT osso temporal OC osso condilar MPL msculo pterigideo lateral MPM msculo pterigideo medial MT msculo temporal MM msculo masseter PZ processo zigomtico do osso temporal

AC apfise coronide do osso mandibular tab. tabela fig. figura m micrmetro f1 primeira frao A(p) rea do ponto P somatria dos pontos n nmero de peas antmicas

RESUMO
MACEDO, F.J.M. Contribuio ao estudo do desenvolvimento do tubrculo articular da articulao temporomandibular em embries humanos. So Paulo, 1998. Tese (Doutorado) Instituto de Cincias Biomdicas, Universidade de So Paulo. O perodo compreendido entre a 7a e a 11a semanas de vida intra-uterina, parecem ser crticos para o desenvolvimento de determinadas estruturas da futura articulao temporomandibular. Em nossos trabalhos procuramos pesquisar os perodos de surgimento da cartilagem mandibular (de Meckel), osso mandibular, osso temporal, osso condilar, e msculo pterigideo lateral. Escolhemos estes cinco componentes estruturais da articulao temporomandibular, com o intuito de tambm pesquisar a formao de uma sexta estrutura que surge do osso temporal o tubrculo articular. Nosso principal objetivo foi determinar a existncia ou no de fibras do msculo pterigideo lateral inserindo-se no osso temporal, antes de se inserirem no conjunto cndilo-disco-cpsula, nesta etapa de desenvolvimento embrionrio. Para tanto trabalhamos com 10 embries humanos com idade entre 5 e 11 semanas de vida intrauterina.

O estudo foi desenvolvido atravs de quantificaes estereolgicas e anlises temporais e espaciais, procurando relacionar a influncia da ao muscular sobre estas estruturas. A anlise quantitativa do volume das estruturas estudadas mostrou a grande massa muscular do msculo pterigideo lateral, quando comparado aos volumes dos ossos temporal e condilar, o que nos leva a ter nestes dados, um indicativo morfolgico da atividade muscular presente na poca. Fibras do msculo pterigideo lateral foram encontradas inseridas no osso temporal em embries com 10 semanas de vida intrauterina, o que indica a sua provvel participao no processo de formao do tubrculo articular do osso temporal.

SUMMARY
MACEDO, F.J.M. Contribution to the study of the articular tubercles development of the temporomandibular joint in human embryos. So Paulo, 1998. Tesis (Ph.D) Biomedical Sciences Institute, University of So Paulo.

The period between 7th and 11th weeks of intrauterine life, seems to be critical to the development of certain structures of the future temporomandibular joint. In our works we try to research about the periods of the uprising of mandibular cartilage (Meckels), mandibular bone, temporal bone, condilar bone and lateral pterigoyd muscle. These five structural components were chosen in the temporomandibular joint, with the aim of including the research of a sixth structure that arises in the temporal bone, the articular tubercle. Our main objective was to determine the existence or not of the lateral pterigoyd muscles fibers inserting in the temporal bone, before inserting in the group condile-disc-capsule at this time of embryological development. To achieve our target we worked with 10 human embryos

with age extending from 5 to 11 weeks of intrauterine life. The study was developed through stereologic quantification and temporal and spacial analysis, trying to relate the muscular action to these structures. The quantitative analysis of the studied structures volume showed the great muscular mass of the lateral pterigoyd muscle when compared to the temporal and condilar bones volumes, what indicates that period of time we have a morphologic indicative of the muscular activity. Lateral pterigoyd muscles fibers were encountered inserting in the temporal bone embryos with 10 weeks of intrauterine life, what indicates its probable participation in the formation process of the articular tubercle of the temporal bone.

INTRODUO

INTRODUO
O estudo da embriologia da articulao temporomandibular mostra que esta difere consideravelmente das outras articulaes, devido a uma complexa histria evolutiva. Enquanto a maioria das junturas sinoviais completa o desenvolvimento da sua cavidade inicial por volta da 7 semana gestacional, a articulao temporomandibular no aparece antes desta poca. Alm disso, ela surge de dois blastemas, um temporal e outro condilar, que apresentam direo e potencial de crescimento distintos (Richany et al., 1956; Moffett, 1957, 1966; Baume, 1962a; Baume & Holz, 1969; Keith, 1982; Sperber, 1989). Com o avano das patologias correlacionadas s disfunes da articulao temporomandibular, aumentaram tambm os trabalhos cientficos, tendo essa articulao como enfoque principal. Referem-se em sua maioria, ao disco articular, cpsula articular, conjunto disco-cndilo, mas ao revermos a literatura, pouco ou quase nada encontramos sobre o tubrculo articular do osso temporal. Na quarta semana de vida IU (vida intrauterina), as c-

lulas da crista neural migram para a futura regio da cabea e pescoo. Estas clulas mesenquimais, representadas pelos osteoblastos e condroblastos, viro a formar as estruturas das futuras regies facial e cranial (Richany et al., 1956; Kitamura, 1989; Avery, 1992). Do 1 arco branquial1 surge a cartilagem mandibular (de Meckel)2, bilateralmente. Esta, no seu limite anterior, aproxima-se da regio da linha mediana, mas no se funde com a cartilagem oposta. No seu limite posterior, ela termina num incremento de forma e volume, o martelo, o qual est em ntima relao com uma pequena condensao cartilagnea conhecida como bigorna. Mais longe e posteriormente a eles, temos um terceiro pequeno corpo cartilagneo, o estribo que se origina no 2o arco branquial. Estes trs corpos transformam-se em ossos da orelha mdia (Symons, 1952; Macalister, 1955; --------------------------------------1- Na quarta semana de vida IU, as regies ceflicas de um embrio humano e de um embrio de peixe so muito semelhantes. Isto explica o uso do adjetivo branquial, do grego branchia, que significa guelra. Como o embrio humano no ir desenvolver estas guelras, esses arcos so chamados de arcos farngeos. O termo recomendado na Nomina Embryologica (Warwick, 1989) arco farngeo, mas cita arco branquial como termo alternativo reconhecido oficialmente.

--------------------------------------2- Consultando a Nomina Histolgica de 1980, verificamos que permaneceu o nome Cartilagem de Meckel. Esta Nomina foi recomendada pela Comisso de Nomenclatura do II Congresso Brasileiro de Biologia Celular.

Moffet, 1957, 1966; Gray, 1986; Kitamura, 1989; Avery, 1992; Ashworth, 1990; Cesarani et al., 1991; Moore & Persaud, 1993; gtchen-Toller & Juniper, 1993; Rodriguez Vazquez et al., 1992, 1993). Isto , portanto, uma boa evidncia de que o contato entre o martelo e a bigorna faz as vezes da articulao primitiva da mandbula nas primeiras semanas de vida IU, at que a segunda articulao temporomandibular, a articulao do cndilo com a fossa temporal, esteja pronta e torne-se funcional (Symons, 1952; Macalister, 1955; Moffett, 1957, 1966; Jackson, 1993). Por volta de 6,5 semanas de vida gestacional, temos o primeiro sinal do incio da ossificao mandibular, que ocorre por uma condensao mesenquimal, lateral a cada cartilagem mandibular, na futura regio dos caninos. Tal condensao expande-se anteroposteriormente e, na 7a semana IU, forma o corpo da mandbula, ao redor da cartilagem mandibular. Esta ossificao d origem ao canal mandibular que alojar o nervo dental inferior, ponto de partida para a formao do osso alveolar, que abrigar os germes dentais (Macklin, 1914, 1921; Moffett, 1957, 1966). A ossificao membranosa do corpo mandibular ocorre lateralmente cartilagem mandibular, tomando um aspecto circular ao

redor desta e provocando uma gradativa atrofia de suas clulas cartilagneas (Moffet, 1957). Na 16a semana IU, quando o martelo e a bigorna esto se ossificando, o segmento da cartilagem mandibular compreendido entre o forame mandibular e a regio da futura fossa mandibular do osso temporal, transforma-se no ligamento esfenomandibular. Internamente orelha mdia, este ligamento recebe o nome de ligamento esfenomaleolar (Smeele, 1988; Ashworth, 1990; Cesarani et al., 1991; Rodriguez Vazquez et al., 1992, 1993). Na 8a semana IU, a regio do futuro ramo mandibular aparece como uma condensao mesenquimal, que apresenta uma progressiva diferenciao de fibras musculares (Spyropoulos, 1977; Burdi & Spyropoulos, 1978). Tais processos de condensao mesenquimal daro origem, bem como forma, aos ramos mandibulares. Na 10a semana gestacional tanto o osso basal mandibular como seus ramos continuam a aumentar o seu volume, bem como a alterar-se seguidamente, mantendo, porm, a cartilagem mandibular como orientao embriolgica (Richany et al., 1956; Moffett, 1957, 1966; Baume, 1962a; Keith, 1982; Gray, 1986; Kitamura, 1989; Sperber, 1989; Avery, 1992). A forma bsica da mandbula em seu conjunto corporamo-osso condilar, j pode ser vista ao redor da 9a a 10a semanas gestacionais, a partir da qual continuar sofrendo modificaes gradativas at o perodo neonatal. Tais modificaes continuaro acontecendo durante toda a existncia do indivduo (Moffett, 1957, 1966; Wright & Moffett, 1974). O blastema condilar surge da cartilagem secundria da mandbula e ir formar o osso condilar (Moffett, 1957, 1966; Gray, 1986; Kitamura, 1989; Avery, 1992). Ao redor da 8a semana gestacional, uma condensao mesenquimal aparece ao redor da poro posterior do ramo mandibular primitivo, com um aumento acentuado de clulas, como uma acomodao celular. Esta massa celular se condensa ao redor da 9a a 10a semanas gestacionais, formando a cartilagem condilar (Macalister, 1955; Baume 1962a, 1962b). O osso condilar apresenta-se ento com a forma de um cone, cujo pice voltado para a extremidade do ramo mandibular, a que se une por volta da 12a semana gestacional. Desta poca at a 20a semana de vida IU, esta massa cartilagnea se transforma em tecido sseo, por ossificao do tipo endocondral, permanecendo a poro condilar superior como tecido cartilagneo por toda sua existncia. Nesta mesma poca, entre 9 e 10 semanas gestacionais, possvel notar-se a presena de fibras musculares prximas ao ramo e regio condilar, nas suas pores mediais. Estas fibras musculares do

origem ao msculo pterigideo lateral (Baume, 1962b). O blastema temporal surge da cpsula tica, componente da poro basal cranial, e formar o osso temporal (Macklin, 1914, 1921; Avery, 1992). As pores escamosa e timpnica do osso temporal so formadas por ossificao membranosa, enquanto as pores petrosa e estilidea desenvolvem-se a partir da ossificao endocondral de algum dos 21 centros de ossificao presentes (Macklin, 1914, 1921; Gray, 1986; Sperber, 1989; Avery, 1992). A poro escamosa formada por ossificao intramembranosa de um centro de ossificao que surge na 8 semana gestacional; o arco zigomtico se estende a partir deste centro (Macklin, 1914, 1921; Macalister, 1955; Baume, 1962a; Furstman, 1963; Youdelis, 1966a, 1966b; Baume & Holz, 1969; Van der Linden et al., 1987). J o anel timpnico, que envolve o meato acstico externo, ossifica-se de quatro centros de ossificao diferentes, iniciando-se no 3 ms de vida IU (Gray, 1986; Sperber, 1989). As maiores alteraes da articulao temporomandibular humana ocorrem entre as 7a e 11a semanas de vida gestacionais (Diewert, 1983, 1985; Sperber, 1992; Larssen, 1993). A fossa mandibular somente uma rasa depresso ao nascimento, aprofundando-se com o desenvolvimento do tubrculo articular (Van der Linden et al., 1987). A ao muscular necessria para a cavitao articular, j na fase IU (Symons, 1952; Baume, 1962b; Hooker, 1954, 1958; Humprey, 1968, 1971; Spyropoulos, 1977; Burdi & Spyropoulos, 1978; Perry et al., 1985; Diewert, 1985; Van der Linden et al., 1987; Sperber, 1989; Sato, 1994). Perry et al. (1985) sugeriram que a unio prematura entre o msculo pterigideo lateral, o blastema condilar e a cartilagem mandibular, que persiste atravs do desenvolvimento da articulao temporomandibular, pode atender outra funo, alm de simplesmente refletir um passado filogentico em que o martelo era visto como parte da articulao mandibular (Symons 1952). Ainda segundo eles, o msculo pterigideo lateral executa a funo de piv na histodiferenciao da articulao temporomandibular, influenciando na formao do disco articular e podendo contribuir, indiretamente, por estimulao mecnica, para a diferenciao endocondral do cndilo e para a formao das cavidades articulares inferior e superior. O msculo pterigideo lateral parece estar ativo durante o processo da cavitao e da formao da cavidade articular, atravs de traes diferenciadas em suas inseres, representadas pela cabea condilar e o martelo (Perry et al., 1985). Youdelis (1966) considerou que a maioria dos investigadores dava ateno mais especfica aos componentes do blastema con-

dilar, com pouca ou quase nenhuma nfase aos componentes do blastema temporal. Para aquele autor, o processo condilar foi o primeiro a aparecer, desenvolvendo-se em uma direo dorsolateral e superior. O processo temporal surge depois, desenvolvendo-se em uma direo anterolateral (Youdelis, 1966). Apesar de os componentes do processo temporal surgirem depois dos componentes do processo condilar, igualam-se em termos de velocidade de desenvolvimento, dentro do espao de tempo compreendido entre a 10 e 12 semanas gestacionais (Youdelis, 1966). Segundo Furstman (1963), ramificaes do nervo trigmeo e ramos do nervo auriculotemporal esto presentes nos tecidos moles destas regies, a partir da 12a semana IU, embora os vasos sangneos j sejam visveis ao redor da 10a semana gestacional. Finalmente, ao redor da 18a a 20a semanas gestacionais, a nica regio que ainda apresenta vestgios da cartilagem mandibular, o local da insero do msculo milo-hiideo ao longo da superfcie medial do corpo mandibular (Richany et al., 1956; Ten Cate, 1980; Perry et al., 1985; Avery, 1987). Estudando o nvel de calcificao da mandbula e do osso temporal em fetos humanos, com idade variando de 12 a 32 semanas, Sato (1994) concluiu que os diferentes estgios destas calcificaes esto provavelmente relacionados com as funes musculares. Deste modo, pudemos verificar que quase nada foi escrito nestes ltimos anos a respeito do desenvolvimento do tubrculo articular do osso temporal. Quando do nascimento, o recm nascido est com sua articulao temporomandibular preparada para exercer funes relacionadas a esta etapa da vida, que inclui movimentos gerais de abertura e fechamento da mandbula e de ordenha, que necessitam de translados condilares no sentido pstero-anterior, em que, basicamente, so os msculos pterigideos laterais, os mais ativos (Torres, 1973; Planas, 1993, 1994). A ausncia de dentes na arcada, nesta idade, faz com que as nicas referncias fsicas que a articulao temporomandibular tem em seu trajeto pstero-anterior, sejam a presena dos tubrculos articulares dos ossos temporais (Ricketts, 1966). A forma deste tubrculo muda gradativamente, sendo praticamente raso ao nascimento, mostrando, porm, alteraes considerveis com o desenvolvimento, fato que aumenta a complexidade dos fatores relacionados ao desenvolvimento da articulao temporomandibular (Wright & Moffett, 1974). A parede posterior deste tubrculo articular o limite anterior da fossa mandibular. A sua inclinao de suma importncia quando das reabilitaes protticas em Odontologia (Wadsworth, 1925;

Bennett, 1924; Hanau, 1925; Gysi, 1931; Posselt, 1952; DAmico, 1958, 1959; Pankey & Mann, 1963; Schuyler, 1963, 1969). Em uma reconstruo prottica, a guia incisiva, assim como os outros fatores determinantes da ocluso, na busca do equilbrio fsico-dinmico, se interrelacionam com a inclinao da trajetria condilar, principalmente na reabilitao dos desdentados totais. Esta trajetria no uma relao fsica entre cndilo, disco e tubrculo articular, sendo mais uma relao espacial (Angel, 1948; Ricketts, 1950; Moffett, 1962). Ela depende portanto de uma orientao que dada pela atividade de um msculo principal, em sintonia com todos os outros msculos envolvidos no equilbrio dinmico-funcional da mandbula (Pankey & Mann, 1963; Schuyler, 1963, 1969). Assim sendo, quem determinaria a orientao destes movimentos, e quando se iniciaria a atividade muscular que poderia definir a morfologia deste tubrculo articular? A anlise do desenvolvimento do tubrculo articular que este trabalho se props a fazer, poder trazer alguma contribuio ao entendimento deste importante fator determinante da ocluso.

PROPOSIO

PROPOSIO
Nossa proposio foi analisar a existncia ou no de fibras do msculo pterigideo lateral inserindo-se na regio do futuro tubrculo articular do osso temporal, na fase anterior sua insero no conjunto cndilo-disco-cpsula mandibular. A anlise se completou com a descrio da localizao espacial e do volume do msculo pterigideo lateral, bem como de sua posio relativa entre cinco estruturas topograficamente relacionadas - a cartilagem mandibular, os ossos mandibular, temporal e condilar, e o msculo pterigideo lateral - atravs de quantificaes estereolgicas em seces seriadas e amostradas da regio da futura articulao temporomandibular de embries e fetos humanos.

MATERIAL E MTODOS

MATERIAL E MTODOS

Neste trabalho utilizamos 12 peas anatmicas, sendo 11 embries e um feto humanos, sem distino de sexo e raa, aparentemente normais. Os embries tinham idades aproximadas de 05 a 11 semanas (figs. 1, 3 e 4) e, o feto, idade aproximada de 19 semanas (fig. 5). As idades foram determinadas por procedimentos que descreveremos a seguir.

1) Mensurao das idades das peas


A dificuldade de se medir com preciso, o tamanho e, consequentemente, se obter idades embrionrias e/ou fetais precisas, estimulou o desenvolvimento de tcnicas especiais para tal finalidade.

Classicamente utiliza-se o Termo GL (maior comprimento do ingls Greatest Lenght) para embries com menos de 28 dias de vida IU, sendo que para embries com mais de 29 dias, utiliza-se o termo CRL (comprimento cfalo-caudal do ingls Crown-Rump Lenght).

Fig. 1: Comparao entre o tamanho de um embrio com 11 mm CRL com aproximadamente 5 semanas de vida IU e um molar decduo.

Tabela com o tamanho e a respectiva idade dos Embries:


Gestao
1o Ms

Idade de fertilizao
20 - 21 dias 21 - 24 dias 24 - 26 dias 26 - 28 dias 28 - 30 dias 28 +/- 1 dia 29 dias 31 dias 33 dias

CRL (mm)
1 - 3 somitos 4 - 12 somitos 14 - 20 somitos 26 somitos 30 somitos 4.0 - 5.0 mm 6.0 - 7.0 mm 6.5 - 8.5 mm 8.0 - 11.0 mm

2o ms

3ms

35 dias 37 dias 39 dias 41 +/- 1 dia 45 +/-1 dia 47 +/- 1 dia 49 +/- 1 dia 51 - 53 dias 54 - 56 dias 57 - 60 dias

11.0 - 13.6 mm 14.0 - 16.0 mm 17.0 - 20.0 mm 21.0 - 23.0 mm 25.0 - 27.0 mm 28.0 - 30.0 mm 30.0 - 32.5 mm 32.0 - 36.0 mm 36.0 - 47.0 mm 39.0 - 47.0 mm

Tab. 1: Idades de fertilizao e respectivos tamanhos cefalocaudais (CRL), em mm, de embries humanos de acordo com o publicado por Streeter (1920, 1948 e 1951).

Fig. 2: Mtodo padro de mensurao de embries e fetos.

Tabela com o tamanho e a respectiva idade dos Fetos:


Gestao
2ms 3ms

Idade de fertilizao
8 semana 9 semana 10 semana 11 semana 12 semana

CRL (mm)
32.0 40.4 mm 39.0 50.0 mm 51.0 60.0 mm 61.0 74.0 mm 75.0 86.0 mm 87.0 102 mm 103 116 mm 117 130 mm 131 142 mm

4ms

13 semana 14 semana 15 semana 16 semana

5ms

17 semana 18 semana 19 semana 20 semana

143 152 mm 153 164 mm 165 174 mm 175 186 mm 187 196 mm 197 206 mm 207 216 mm 217 218 mm 229 236 mm 237 248 mm 249 256 mm 257 266 mm 267 274 mm 275 284 mm 285 290 mm 291 302 mm 303 312 mm 313 320 mm 321 330 mm 331 340 mm 341 350 mm 351 362 mm

6ms

21 semana 22 semana 23 semana 24 semana

7ms

25 semana 26 semana 27 semana 28 semana

8ms

29 semana 30 semana 31 semana 32 semana

9ms

33 semana 34 semana 35 semana 36 semana

10ms

37 semana 38 semana

Tab. 2: Idades de fertilizao e respectivos tamanhos cefalocaudais (CRL), em mm, de fetos humanos de acordo com o publicado por Streeter (1920, 1948 e 1951).

As peas anatmicas da amostra no passaram pelo mtodo de disseco por serem muito pequenas. Sabe-se que nesta fase de desenvolvimento embrionrio, temos mais de 80% de gua como volume corpreo, o que torna difcil prepar-las para os cortes histolgicos. Entretanto, realizamos a disseco de duas peas com o intuito de nos servir de orientao e gabarito para a rea em questo a ser estudada. Padronizou-se o seguinte: a) Realizamos as medies das peas menores, medindo-se o comprimento cefalocaudal, CRL em mm, utilizando-se um paqumetro da marca STARRET, modelo 125MEA. A pea com mais de 16 semanas, foi medida utilizando-se uma rgua, de acordo com o traba-lho de Liberti & Adamo (1985). Nas figuras 4 e 5 podemos ver como tais medidas foram tomadas.
Fig. 3: Embrio com 29 mm CRL, idade aproximada de 7 semanas IU.

Fig. 4: Mensurao de um embrio com 23,5 mm CRL, com 6 semanas IU.

2) Disseco
Conforme j citado, realizamos primeiramente a disseco de duas das 12 peas, com o intuito de termos um padro da rea com a qual iramos trabalhar, e para tanto comeamos com o feto de 165 mm CRL, com 19 semanas gestacionais (fig. 6 a). Decidido pelo acesso articulao temporomandibular esquerda, iniciamos a disseco. Incisionamos tomando como referncias, a linha temporal superiormente, a regio ps-auricular posteriormente, a regio da base mandibular, inferiormente, e a regio posterior ao globo ocular esquerdo, anteriormente. Removida a pele e o tecido subcutneo, deparamo-nos com o msculo temporal, a glndula partida, o msculo masseter e o arco zigomtico. Removemos totalmente a glndula partida, o msculo masseter e o msculo temporal, mantendo neste

ltimo sua insero profunda, como podemos visualizar na figura 6b.


Fig. 5: Mensurao de um feto medindo 165 mm CRL e com idade de 19 semanas de vida IU.

Em seguida, com o auxlio de uma broca esfrica carbide no 4, de uso odontolgico, acoplada a uma pea de mo de baixa rotao, tambm de uso odontolgico, removemos o arco zigomtico em

toda a sua extenso, incluindo nessa remoo, a parte posterior do osso zigomtico para aumentarmos a rea de viso. Isto feito deparamo-nos com o processo coronide da mandbula, j livre de sua insero muscular (msculo temporal); realizamos ento uma ostectomia em L invertido, ampla, tendo como limite posterior a regio condilar, ao nvel da regio da futura cpsula articular. Com a remoo do processo coronide pudemos visualizar a poro profunda do msculo temporal. Esta seqncia mostrada na figura 6c. Removemos a insero profunda do msculo temporal, quando ento pudemos visualizar o msculo pterigideo lateral. Este acesso nos possibilitou ver bem a rea de origem do msculo, no processo pterigideo do osso esfenide, em toda a sua extenso, bem como j nos foi possvel visualizar a sua insero, na regio do conjunto cpsuladisco-cndilo, como nos mostra a figura 6d. Fizemos ento mais duas fotografias da mesma regio, porm em ngulos diferentes. Na figura 6e, pode-se ver o msculo pterigideo lateral de uma forma mais completa, pois a foto foi tomada com o filme fotogrfico paralelo ao msculo, no sendo mantido um paralelismo com o plano sagital mediano. J na fotografia ilustrada na figura 6f, pode-se ver que esta foi tomada com o filme paralelo ao plano sagital mediano. Comparando-as, podemos verificar que a orientao das fibras do msculo pterigideo lateral direcionada de medial para lateral, de inferior para superior e de anterior para posterior, se partirmos da origem em direo sua insero. Isto para ns foi muito importante, pois o msculo pterigideo lateral o nico nesta regio dissecada, a apresentar uma orientao espacial quase paralela ao plano axial. Na pgina seguinte podemos visualizar todos estes passos na figura 6:

Fig. 6: Passos da disseco do feto de 165 mm, com 19 semanas IU.

Fig. 6: Passos da disseco: em a, mensurao do feto; em b, incio da disseco com a remoo das estruturas dos planos superficiais; em c, remoo do arco zigo-mtico e

ostectomia em L invertido da mandbula; em d, remoo da insero pro-funda do msculo temporal e visualizao do msculo pterigideo lateral em sua origem e insero; em e e f, duas tomadas fotogrficas feitas em ngulos diferentes, com o intuito de mostrar a orientao espacial do msculo pterigideo lateral em relao aos planos sagital e axial.

Em seguida, iniciamos a segunda disseco, a do embrio de 57 mm CRL, com idade de 10 semanas gestacionais. Optamos tambm pela articulao temporomandibular esquerda, seguindo todos os passos da disseco anterior. Na figura 7a, tomamos a medida do embrio para determinar sua idade aproximada, o que nos deu mais segurana para saber o que iramos encontrar durante a disseco, visto no existir nada na literatura, sobre o assunto. Na figura 7b, v-se o embrio antes do incio da disseco. Na figura 7c, pode-se ver a inciso realizada, tendo como limite a linha temporal superiormente, a regio ps-auricular posteriormente, a regio da base mandibular inferiormente e a regio posterior ao globo ocular esquerdo anteriormente. Removida a pele e o tecido subcutneo, deparamo-nos com o msculo temporal, a glndula partida, o msculo masseter e o arco zigomtico. Uma vez exposta a regio, com um cotonete secamos a rea, pois as estruturas nesta idade no so visveis como as estruturas da pea anterior, principalmente os msculos que ainda no se apresentam com colorao avermelhada, devido ao pequeno aporte sangneo existente neste estgio de desenvolvimento. Neste caso, o que nos auxiliou na visualizao, foi o ato de secar as estruturas musculares, que nos permitiu uma melhor avaliao da sua anatomia. Na figura 7d, j se pode visualizar o arco zigomtico e a mandbula, sem os msculos masseter e temporal. Aqui o processo de disseco foi feito, removendo os msculos por partes, tendo o cuidado de manter intactas as estruturas sseas, visto serem elas, a partir deste momento, os nossos nicos pontos de referncia. Este mesmo momento da disseco foi novamente fotografado, figura 7e, porm de um ngulo diferente, para que pudssemos ver as estruturas ramo mandibular e osso condilar presentes nesta idade, porm no unidos. Em seguida, removemos o arco zigomtico com o auxlio de um delicado alicate de cutculas, com o intuito de preservarmos ao mximo, as estruturas abaixo dele localizadas. Aqui neste caso, mantivemos o processo zigomtico do osso temporal intacto, bem como a

rea do processo zigomtico do osso malar. Estes cuidados todos, voltamos a afirmar, foram tomados para evitar que perdssemos os poucos referenciais anatmicos. Este foi sem dvida o momento mais crtico de toda a disseco: sabamos que nesta idade gestacional, o osso condilar ainda no est totalmente unido ao osso mandibular, ento tivemos o maior cuidado para levantar o corpo mandibular e com uma pina de microscpio eletrnico, removendo o osso condilar (esta segunda disseco podese dizer que foi uma mesodisseco, pois foi toda ela realizada com o auxlio de uma lupa com aumento de 4X). Pode parecer estranho usarmos o termo levantar o corpo mandibular, mas que nesta idade gestacional, a mandbula na realidade formada por duas hemimandbulas, mais precisamente, dois ossos mandibulares, que iro fundir-se na altura da linha mediana, perto do sexto ms, aps o nascimento. Distalmente eles se relacionaro com os dois ossos condilares, direito e esquerdo; foi ento, que deslocamos para lateral a hemimandbula esquerda, ou seja, afastamos a sua poro distal utilizando como fulcro a sua poro mesial, conforme a figura 7f. A partir deste momento, tivemos que analisar as estruturas musculares: topograficamente, de lateral para medial nesta regio, encontramos os msculos masseter, j removido, msculo temporal, j removido, msculo pterigideo lateral, ainda presente na pea, msculo pterigideo medial, ainda presente e topograficamente abaixo do msculo pterigideo lateral, e por ltimo, o msculo constrictor superior da faringe, tambm presente, ltimo plano muscular, antes de chegarmos ao espao farngeo. Sabendo pela reviso da literatura que todos estes msculos j esto formados nesta idade gestacional e que o msculo pterigideo lateral, o nico a apresentar uma orientao de suas fibras paralelas ao plano axial, tomamos uma agulha de costura e, encostando-a delicadamente na face infratemporal da asa maior do osso esfenide, com uma direo de superior para inferior, sempre escorregando na estrutura ssea citada, delicadamente separamos o msculo pterigideo lateral dos planos musculares mais profundos, como podemos ver na figura 7g. importante salientarmos que o msculo pterigideo lateral j apresenta sua origem pr-definida, qual seja o processo pterigideo e crista infratemporal do osso esfenoide, sendo que a sua insero neste momento, a nosso ver, se localiza no osso temporal, pois o condilar, como dissemos acima, foi removido em um passo anterior, o que veio de encontro a nossas hipteses e que ser discutido posteriormente. Os aspectos so mostrados na figura 7:

Fig. 7: Passos da disseco de um embrio com 57 mm CRL e com 10 semanas de vida IU.

Fig. 7: Passos da disseco: em a, mensurao do embrio; em b, pea antes do incio da disseco; em c, remoo da pele e planos mais superficiais; em d, visualiza-

o do arco zigomtico e ramo mandibular; em e, mesma viso anterior, porm em um ngulo diferente, mostrando osso mandibular e osso condilar no unidos; em f, remoo do arco zigomtico, osso condilar e levantamento do corpo mandibular, expondo o stio do msculo pterigideo lateral; em g, separao do msculo pterigideo lateral dos planos musculares mais profundos, mostrando sua origem na regio do processo pterigoide do osso esfenoide e sua insero na regio temporal, visto termos no passo anterior removido o osso condilar.

Aps estas disseces feitas com o intuito de nos orientar espacialmente, passamos ao seguinte:

3) Incluso total da pea em parafina


Se segussemos o mtodo tradicional de preparo das peas, ou seja, incluso em xilol, para posterior emblocagem em parafina, isto iria diminuir em muito o volume corporal, devido enorme perda de gua, o que comprometeria em muito nossos trabalhos. Ento, com a finalidade de mantermos um referencial anatmico em termos volumtricos e topogrficos, todas as peas, aps serem medidas, foram includas por inteiro, em parafina (fig. 8). Este mtodo diminuiu as deformaes por retrao, muito comum nos processos de desidratao e emblocamento histolgicos.

4) Diviso da pea parafinada pela linha sagital mediana


Na reviso da literatura classicamente encontramos: reduo da regio da cabea atravs de cortes inicialmente no plano sagital mediano e, que eram utilizados na obteno de cortes nos planos frontal e horizontal, perpendiculares ao primeiro. Esses planos no se mostraram adequados ao nosso trabalho, assim estabelecemos um plano de orientao que utilizamos como padro. No esquema da figura 9 podemos ver como so os planos clssicos, sendo que a descrio da nossa metodologia de orientao e seccionamento vem a seguir.
Fig. 8: Embrio aps imerso total em parafina.

Estando agora os embries com suas estruturas anatmicas mais preservadas, em termos volumtricos e espaciais, utilizandonos de uma lmina de ao aquecida, e tomando por referencial a linha sagital mediana, dividimos as peas em lados direito e esquerdo, como podemos ver na figura 10.

Fig. 9: Padro clssico dos planos de corte.

5) Separao do conjunto cabea-pescoocngulo do membro superior3, do restante do corpo


Em seguida separamos o conjunto cabea-pescoocngulo do membro superior do restante do corpo, com o intuito de dimi------------------------------3- Consultando a Nomina Anatmica de 1984, verificamos que o nome cintura escapular passou a ser chamado de cngulo do membro superior.
Fig. 10: Embrio dividido sagitalmente.

nuir o volume de emblocagem em parafina; no entanto, tivemos o cuidado de preservar o cngulo do membro superior como mais um referencial anatmico, como podemos ver na figura 11.

6) Corte para a obteno de um paralelismo

com a face do embrio


A hemiface direita do embrio recebeu, antes de ser emblocada na parafina para os cortes histolgicos, mais um corte, agora paralelo a uma linha imaginria paralela tangente da face do embrio, conforme a foto da figura 12.
Fig. 11: Separao do conjunto cabea-pescoo-cngulo do membro superior, do restante do corpo.

Com isto criamos um plano frontal perpendicular a um suposto plano oclusal, muito diferente dos planos frontais perpendiculares ao sagital mediano, encontrados nos cortes clssicos. O posicionamento da pea direita no bloco de parafina, sempre colocada com a face occipital voltada para baixo, nos deu um plano que permitiu obter seces perpendiculares ao plano oclusal, importante ponto de referncia na anlise do msculo pterigideo lateral. Obviamente a hemiface esquerda, preparada para cortes parassagitais, foi emblocada com a sua face medial, paralela ao plano de corte.
Fig. 12: Lado direito com corte paralelo a uma linha imaginria passando pela face do embrio.

Colocamos a foto da figura 13, que mostra lado a lado, os dois planos de colocao das peas para os cortes.

7) Seccionamento

Aps o emblocamento da pea em parafina, os cortes com 5 m de espessura foram feitos, amostrando rigorosa e sistematicamente um a cada cinco cortes.

Fig. 13: Posio de incluso das peas na parafina.

8) Orientao dos Cortes


A orientao destes cortes pode ser vista a seguir, no esquema da figura 14: lado direito com cortes parafrontais, de posterior para anterior, respeitando uma linha imaginria paralela a face do embrio; lado esquerdo com cortes parassagitais, de medial para lateral, paralelos ao plano sagital mediano.

Fig. 14: Padro da seqncia de cortes.

9) Mtodo de colorao das seces


Foi feita a colorao pelo mtodo hematoxilina-eosina. Com ele conseguimos ter os ncleos celulares e outras estruturas de natureza cida, corados em azul pela hematoxilina, em contraste com estruturas de carter bsico, como o citoplasma e o colgeno corados em diversas tonalidades de vermelho pela eosina, para posterior anlise qualitativa e quantitativa em microscpio de luz.

10) Mtodo de leitura e estruturas analisadas


A leitura das lminas foi feita por ordem cronolgica

crescente da idade da amostra, verificando a presena das seguintes estruturas: cartilagem mandibular, osso temporal, osso mandibular, osso condilar e logicamente o msculo pterigideo lateral.

11) Pesquisa sobre a existncia de fibras do msculo pterigideo lateral no osso temporal
Foi analisada a existncia ou no de fibras do msculo pterigideo lateral, inserindo-se na regio do osso temporal, mais precisamente na regio do futuro tubrculo articular.

12) Anlise estereolgica da localizao e extenso espaciais das estruturas


Orientamo-nos do seguinte modo: durante a anlise dos cortes histolgicos, fomos realizando a marcao de todas as estruturas encontradas em nossa leitura, numa planilha quadriculada apropriada, tomando o cuidado de sempre ter a cartilagem mandibular como referencial inicial. Como podemos ver na figura 15, realizamos as medies das estruturas encontradas e atravs dos quadriculados da planilha, estimamos o comprimento destas, pois sabamos serem os cortes de uma espessura de 5 m, e que entre os cortes aproveitados, foram desprezados 5 deles, o que nos deu uma distncia entre os cortes amostrados de 30 m. Avaliamos a distncia entre o aparecimento do osso temporal em relao ao aparecimento da cartilagem mandibular, assim fazendo com todas as outras estruturas, e lanando os resultados na planilha. Uma vez feitas todas as marcaes, transferimos os resultados para grficos onde as abscissas representaram as peas anatmicas individuais ou por grupamentos, enquanto que as ordenadas representaram a distncia entre os locais de aparecimento das estruturas, tomando-se como referncia e ponto zero, o local do surgimento da cartilagem mandibular. Os resultados obtidos foram apresentados em m x 6.
Fig. 15: Esquema mostrando como os cortes foram lidos e colocados em uma planilha.

Finalmente, avaliamos a presena simultnea das estruturas nos cortes, a que chamamos de Interseco das Estruturas, com o intuito de se analisar a interrelao espacial delas. As interseces tambm foram avaliadas na amostragem individual, por peas anatmicas e por grupamentos.

13) Anlise estereolgica do volume das estruturas com o auxlio do computador


A anlise estereolgica foi feita com o intuito de se determinar o volume dos ossos condilar e temporal e do msculo pterigideo lateral, bem como o de uma amostra definida da cartilagem mandibular. O volume total das estruturas estudadas foi obtido segundo o princpio de Cavalieri, atravs da somatria das reas de seco transversal das mesmas, multiplicada pela distncia entre elas. Toda a

extenso das estruturas a serem medidas, e uma amostra definida da cartilagem mandibular foi sistematicamente amostrada a cada cinco seces (f1=5). As seces foram analisadas usando o sistema CAST (Computer Assisted Stereological Toolbox) do Laboratrio de Fatores Neurotrficos e Plasticidade Neuronal do Departamento de Anatomia do ICB/USP. Um microscpio Olympus BX50 (Olympus, Dinamarca) foi acoplado a um computador (IBM 330-P75) e uma vdeo-cmera colorida (JAL 2040, Protec, Japo), ambos acoplados a um monitor colorido de alta resoluo (G 70, IBM). Um programa chamado GRID (Interactvision, Silkeborg, Dinamarca) foi utilizado para gerar molduras de contagens sobrepostas imagem captada pelo microscpio no monitor, bem como controlar a mesa motorizada do microscpio que se desloca nos eixos X e Y (Lang, Alemanha). A quantificao foi realizada sob uma objetiva de 4x. Uma moldura com pontos regularmente dispostos, com rea por ponto definida, era sobreposta s reas das imagens de seces transversais projetadas no monitor (fig. 16). A rea do ponto da moldura aplicada foi rigorosamente mantida constante em A(p) = 4300,38 m2. Os pontos que tocavam as seces transversais das estruturas eram contados (P estrutura) (Gundersen et al., 1988; West & Gundersen, 1990; West et al., 1991; Janson & Mller, 1993).

Fig. 16: Moldura com pontos regularmente dispostos, com rea por ponto definida, sobreposta sobre as reas de seces transversais das estruturas a serem quantificadas.

RESULTADOS

RESULTADOS
1) Anlise quantitativa da posio espacial das estruturas

Analisados os cortes histolgicos, pudemos observar a presena das estruturas que compem a articulao temporomandibular nas primeiras semanas de vida IU, porm ainda em formao, diferentemente da maioria das articulaes sinoviais, que ao redor da 7 semana
a

gestacional j completaram o desenvolvimento da sua cavidade inicial. Primeiramente foi realizada a leitura das lminas com cortes parafrontais; para melhor entendimento dos resultados, dividimos as dez peas em 3 grupamentos a saber: Grupamento A: 3 embries com idade aproximada entre 5 e 6 semanas gestacionais; Grupamento B: 4 embries com idade aproximada entre 6 e 9 semanas gestacionais; Grupamento C: 3 embries com idade aproximada entre 9 e 11 semanas gestacionais. Optamos por analisar as seguintes estruturas nos cor-tes histolgicos: Cartilagem mandibular: estrutura bastante visvel, que passvel de ser vista desde a regio retroauricular, estendendo-se at a regio da snfise mental embrionria. Osso temporal: limite sseo superior da futura fossa a mandibular - uma estrutura que j dever estar presente a partir da 7 semana gestacional, tendo porm sua forma e tamanho bastante alterados com a idade. Osso condilar: limite sseo inferior da fossa mandibular - uma estrutura que surge ao redor da 8 semana, cujo volume vai aumentando, e cuja forma vai alterando com o passar da idade. Msculo pterigideo lateral: estrutura j presente ao a redor da 5 semana gestacional, que o objetivo principal da anlise deste trabalho. Osso mandibular: estrutura ssea distante da regio da articulao temporomandibular - foi a que confirmou os dados de idade da amostra, e a localizao espacial das estruturas nos cortes. O aparecimento das estruturas estudadas nos cortes frontais e parassagitais dos 3 grupamentos apresentado na tabela 03:
Pea Analisada Embrio A1 Embrio A2 Embrio A3 Embrio B1 Embrio B2 Embrio B3 Embrio B4 Embrio C1
a

C.M. O. T. + + + + + + + + + +

O. M.P.L. O. C. .M. + + + + + + + + + + + + +

Embrio C2 Embrio C3

+ +

+ +

+ +

+ +

+ +

Tab. 3: Presena ou ausncia da cartilagem mandibular (C.M.), osso temporal (O.T.), osso condilar (O.C.), msculo pterigideo lateral (M.P.L.) e osso mandibular (O.M.), nos embries dos grupamen-tos A, B e C.

Constatamos a presena da cartilagem mandibular e do osso mandibular em 66% dos embries do grupamento A e em todos os embries dos grupamentos B e C. Os ossos temporal e condilar e o msculo pterigideo lateral apareceram a partir do embrio B3 (8 semana gestacional), tendo sido visualizados nas seces de todos os embries do grupamento C. A anlise individual por embrio das distncias entre o local de surgimento das estruturas em relao cartilagem mandibular, foi transferida para o grfico da figura 17. Nele pudemos observar a presena de 2 picos de crescimento entre a distncia do surgimento do osso mandibular em relao ao surgimento da cartilagem mandibular, sendo o primeiro entre os embries A2 e B1, e o segundo entre os embries B4 e C3. A distncia do surgimento do msculo pterigideo lateral em relao ao surgimento da cartilagem mandibular foi de 240 m na pea B3, apresentando uma reduo de 12,5% na pea C3. A distncia entre o surgimento do osso condilar em relao cartilagem mandibular foi de 120 m no embrio B3, aumentando progressivamente com a idade das peas, chegando a estar 75% maiores no embrio C3 (fig. 17). A distncia entre o surgimento do osso temporal em relao cartilagem mandibular aumentou paulatinamente do embrio B3 C1, entretanto, aumentos substanciais foram observados nos embri-es C2 e C3, sendo, respectivamente, 100% e 110% em relao a C1 (fig. 17).
a

Na figura 18, representando a distncia entre o surgimento da cartilagem mandibular e as demais estruturas, agora numa amostragem por grupamento, vimos que, medida que o embrio vai se desenvolvendo, tambm as distncias entre as estruturas vo aumentando. No grupamento A pudemos avaliar somente a distncia entre a cartilagem mandibular e o osso mandibular, visto no existirem

ainda as demais estruturas (fig. 18). J nos grupamentos B e C, mais desenvolvidos, foi-nos possvel medi-las, quando ento pudemos notar que foram aumentando com o progredir da idade dos embries (fig. 18).
Fig. 17: Grfico mostrando a distncia entre a cartilagem mandibular e as demais estruturas (OT: osso temporal; OC: osso condilar; MPL: msculo pterigideo lateral; OM: osso mandibular).

Na anlise da distncia entre o surgimento do osso mandibular em relao cartilagem mandibular, pudemos verificar que os grupamentos B e C tiveram um aumento de 97% e 106% respectivamente, em relao ao grupamento A. Na figura 19, descrevemos que a distncia entre o osso temporal e as demais estruturas somente pde ser medida, a partir do embrio B3, dada a inexistncia destas. Ao analisarmos a distncia entre o osso temporal e o osso mandibular, pudemos ver que ela sofreu um decrscimo de 8%, quando comparamos B3 e C3.
Fig. 18: Grfico mostrando a distncia entre a cartilagem mandibular e as outras estruturas analisadas (por grupamento).

Avaliando a distncia entre o surgimento do osso temporal e o msculo pterigideo lateral, verificamos que a mesma foi de 240 m, caindo para 120 m no embrio B4, subindo para 180 m no embrio C1 e no havendo distncia nos embries C2 e C3 (fig. 19). Por ltimo, analisando a distncia entre os surgimentos do osso temporal e do osso condilar notamos que esta distncia foi decrescendo, saindo de 120 m no embrio B3, caindo para 90 m e assim, mantendo-se nos embries B4 e C1, quando ento passou a inexistir nos embries C2 e C3 (fig. 19).

Fig. 19: Grfico mostrando a distncia entre o osso temporal e as demais estruturas analisadas (por embrio).

Passamos ento a avaliar esta mesma distncia, entre a posio do surgimento do osso temporal e aquela das demais estrutu-ras, agora por grupamentos. Verificamos que o grupamento A no pde ser quantificado pelo fato de que as peas A1, A2 e A3, no apresenta-vam osso temporal (fig. 20). No grupamento B verificamos que a distncia entre o osso temporal e as demais estruturas foi aumentando gradativamente (fig. 20). No grupamento C, a distncia entre o osso temporal e

o osso condilar diminuiu 43%, em relao mesma distncia no grupamento B; a distncia entre o osso temporal e o msculo pterigideo lateral tambm sofreu uma diminuio, se comparada com a mesma distncia no grupamento B, s que agora esta diminuio foi de 33% (fig. 20). Finalmente, ao analisarmos a distncia entre o osso temporal e o osso mandibular, pudemos ver que ocorreu um acrscimo de 82%, um aumento considervel desta distncia, quando comparamos os grupamentos B e C (fig. 20).

Na seqncia, avaliamos a distncia entre o osso condilar e as demais estruturas, e pelo mesmo motivo citado anteriormente, s pudemos faz-lo a partir do embrio B3 por razes bvias: inexistncia de osso condilar nos embries A1, A2, A3, B1 e B2 (fig. 21). Constatamos ento que a distncia entre os ossos condilar e mandibular foi de 240 m no embrio B3, sofrendo uma diminuio da ordem de 50% em B4, assim se mantendo nos embries C1 e C3, sendo que no embrio C2, este decrscimo foi um pouco menor, na ordem de 37%.
Fig. 20: Grfico mostrando a distncia entre o osso temporal e as demais estruturas analisadas (por grupa-mento).

A distncia do surgimento do osso condilar em relao ao surgimento do msculo pterigideo lateral mostrou-nos o seguinte: no embrio B3 a distncia calculada foi de 120 m, a qual decresceu em 75% no embrio B4, voltando a aumentar no embrio C1 (90 m, 25% menor em relao B3), quando ento caiu para zero nos embries C2 e C3 (fig. 21). Analisando-se agora a distncia entre o osso condilar e as demais estruturas por grupamento, pode-se verificar que no grupamento B, a distncia entre o osso condilar e o msculo pterigideo lateral foi ligeiramente maior que no grupamento C (37,5 m e 30 m, respectivamente), enquanto a distncia entre o osso condilar e o osso mandibular foi menor no grupamento B (90 m) em relao ao grupamento C (130 m), como se v no grfico da figura 22:
Fig. 21: Grfico mostrando a distncia entre o osso condilar e as demais estruturas analisadas (por embrio).

Finalmente partimos para a anlise da distncia entre os surgimentos do msculo pterigideo lateral e do osso mandibular (fig. 23).
Fig. 22: Grfico mostrando a distncia entre o osso condilar e as demais estruturas analisadas (por grupa- mento).

Na pea B3 tivemos uma distncia de 120 m, que decresceu 25% no embrio B4 (90 m), atingindo o seu menor valor no embrio C1 (30 m), aumentando seu pico no embrio C2 (150 m), e, voltando a cair no embrio C3 (120 m), a mesma distncia encontrada no embrio B3 (fig. 23).

J a anlise da distncia entre o msculo pterigideo lateral e o osso mandibular, por grupamento, mostrou-nos um padro de crescimento pois esta distncia foi aumentando, de acordo com o grau do desenvolvimento.
Fig. 23: Grfico mostrando a distncia entre o msculo pterigideo lateral e o osso mandibular (por em-brio).

Nada pudemos obter do grupamento A, pelo fato de no termos nesta fase embrionria o msculo pterigideo lateral. J o grupamento B apresentou uma distncia de 52,5 m ao passo que esta mesma distncia foi de 100 m no grupamento C, um aumento significativo de 91% (fig.24).

Fig. 24: Distncia entre o msculo pterigideo lateral e o osso mandibular (por grupamento).

Passamos ento a analisar as posies de interseces entre as estruturas estudadas, primeiro atravs de uma avaliao individual, pea por pea, e depois por grupamento. Analisamos trs possibilidades de regies de interseco: osso temporal - osso condilar, osso temporal msculo pterigideo lateral, e osso condilar msculo pterigideo lateral, ou seja, com isto pretendemos avaliar por quanto tempo estas estruturas caminha-ram juntas nos cortes. De acordo com o grfico da figura 25, pudemos ver que analisando primeiramente a interseco osso temporal - osso condilar, encontramos o seguinte: no embrio B3 elas estiveram presentes nos cortes por uma distncia de 240 m, diminuindo esta distncia em 25% (180 m) nos embries B4 e C1, voltando a aumentar nos embries C2 (270 m) e C3 (300 m). Analisando a regio de interseco osso temporal msculo pterigideo lateral constatamos: em B3 esta distncia foi de 120 m, que quadruplicou, passando a 480 m em B4 e C1, diminuindo para 240 m em C2, e aumentando um pouco em C3, sendo o valor de 300 m, 150% maior que aquele de B3. Por ltimo, na regio de interseco osso condilar msculo pterigideo lateral, encontramos uma distncia em B3 de 180m, que tambm aumentou em B4 e C1 (480 m), diminuiu em C2 (240 m), voltando a aumentar em C3 (300m), valor 67% maior em

relao B3 (fig. 25).

Fig. 25: Grfico mostrando a interseco entre as estruturas analisadas (por embrio).

Por ltimo, analisando as medidas de regies de interseces por grupamento, verificamos que s puderam ser avaliadas nos grupamentos B e C, pois no grupamento A nem todas as estruturas estiveram presentes (fig. 26). A distncia de interseco das estruturas osso temporal - osso condilar no grupamento B foi de 105 m, sendo 138% maior no grupamento C (250m). A distncia de interseco do osso temporal com o msculo pterigideo lateral foi de 150 m, aumentando em 113% no grupamento C (320 m) (fig. 26). Finalmente, a distncia de interseco do osso condilar e o msculo pterigideo lateral aumentou 94% do grupamento B para o C, passando de 165 m no grupamento B para 320 m no grupamento C (fig. 26).

Feita a anlise espacial quantitativa da posio destas estruturas nas seces, passamos ento a quantificar o volume das estruturas estudadas.

Fig. 26: Grfico mostrando a interseco entre as estruturas analisadas (por grupamento).

2) Anlise estereolgica quantitativa do volume das estruturas


A anlise estereolgica quantitativa mostrou-nos que a mdia e o desvio padro da mdia do volume da cartilagem mandibular 7 7 3 (por volume amostrado) foram de 6 x 10 1 x 10 m (fig. 27).
Fig. 27: Figura mostra o volume da cartilagem mandibular, por volume amostrado, de embries entre 45 a 58 mm CRL. A rea de seco frontal da cartilagem mandibular foi obtida atravs do mtodo estereolgico utilizando-se uma moldura de pontos com rea definida sobreposta s imagens da seco projetadas em um monitor. O volume da cartilagem foi ento calculado pelo princpio de Cavalieri. Mdia +/- erro padro. n=3.

A mesma anlise feita para se quantificar o volume do osso temporal nos deu uma mdia e um desvio padro da mdia de 8 x 10 1 x 10 m (fig. 28).
6 6 3

Fig. 28: Figura mostra o volume do osso temporal de embries entre 45 a 58 mm CRL. A rea de seco frontal do osso temporal foi obtida atravs do mtodo estereolgico utilizando-se uma moldura de pontos com rea definida sobreposta s imagens da seco projetadas em um monitor. O volume do osso foi ento calculado pelo princpio de Cavalieri. Mdia +/- erro padro. n=3.

J quando analisamos e quantificamos o volume do osso 7 6 3 condilar encontramos os seguintes valores: 3 x 10 5x10 m (fig. 29).

Fig. 29: Figura mostra o volume do osso condilar de embries entre 45 a 58 mm CRL. A rea de seco frontal do osso condilar foi obtida atravs do mtodo estereolgico utilizando-se uma moldura de pontos com rea definida sobrepostas s imagens da seco projetadas em um monitor. O volume do osso foi ento calculado pelo princpio de Cavalieri. Mdia +/- erro padro. n=3.

Por ltimo, ao realizarmos a anlise estereolgica quantitativa do volume do msculo pterigideo lateral nos embries do grupamento C, encontramos uma mdia e um desvio padro da mdia de 8 7 6 3 x 10 7 x 10 m (fig. 30).

Fig. 30: Figura mostra o volume do msculo pterigideo lateral de embries entre 45 a 58 mm CRL. A rea de seco frontal do msculo pterigideo lateral foi obtida atravs do mtodo estereolgico utilizando-se uma moldura de pontos com rea definida sobrepostas s imagens da seco projetadas em um monitor. O volume do msculo pterigideo lateral foi ento calculado pelo princpio de Cavalieri. Mdia +/- erro padro. n=3.

3) Descrio dos achados histolgicos dentro de uma seqncia temporal e espacial


De todas as estruturas analisadas, a cartilagem mandibular foi por ns eleita como estrutura referencial, por vrios motivos. Quando analisamos as lminas, fizemo-lo em ordem cronolgica crescente, sendo que o primeiro corte, onde visualizamos a cartilagem mandibular, foi considerado o marco zero dentro de cada grupamento. Este foi padronizado como sendo o corte em que vimos a cartilagem formando-se lateralmente a uma estrutura, que sabamos ser o incio da formao da cclea, na regio da orelha interna; foi para ns um bom referencial, visto que a esta altura, a cartilagem mandibular se torna nica, ou seja, a sua poro distal, mais precisamente os centros de ossificao dos ossculos da orelha mdia, martelo e bigorna, j no so mais visveis. Neste momento iniciamos nossa marcao. O descrito acima pode ser visualizado na figura 31, da pgina seguinte:

A cartilagem mandibular, posteroanteriormente vinha se posicionando de lateral para medial, sendo que a uma determinada altura dos cortes, j nos foi possvel visualizar, lateralmente a sua estrutura, uma condensao que foi se transformando em osso, correspondente regio do corpo mandibular (fig. 32).
Fig. 31: Corte histolgico mostrando as estruturas cartilagem mandibular (CM) e cclea (CC) de um embrio com 6 semanas de vida IU (aumento de 40X).

Estas, cartilagem mandibular e osso mandibular, so as duas estruturas que, como descrevemos anteriormente, foram visualizadas em nove das dez peas preparadas. Na pea A1, encontramos um tecido mesenquimal indiferenciado, na regio da futura formao da articulao temporomandibular, que em determinados stios mostrava um processo agrupamento celular. Apesar de os cortes histolgicos terem sido feitos at a regio da futura snfise mental, a anlise foi feita at onde as fibras do msculo pterigideo lateral foram visveis, ou seja, assim que nos confrontamos com reas de ossificao do processo pterigideo do osso esfenoide, rea que sabamos ser local da origem deste msculo, paramos nossas anlises. O osso mandibular foi visto como nos mostra o corte histolgico da figura 32:

medida que fomos avaliando os cortes em ordem cronolgica crescente, pudemos visualizar a partir do grupamento B, mais precisamente na pea B3, uma condensao mesenquimal forman-do-se lateralmente cartilagem mandibular, que conforme dissemos, medida que progrediam os cortes para anterior, foram se transformando em tecido sseo, surgindo ento o osso temporal.
Fig. 32: Corte histolgico mostrando as estruturas cartilagem mandibular (CM) e osso mandibular (OM) em um embrio com 6 semanas de vida IU (aumento de 40X).

Ela se apresentou com uma forma achatada, mais longa lateromedialmente do que superoinferiormente, sendo que na seqncia da leitura dos cortes, o nmero de clulas osteoblsticas foi aumentando para lateral, o que constatamos ser o processo zigomtico do osso temporal, em formao naquela poca (fig. 33).

Fig. 33: Corte histolgico mostrando as estruturas cartilagem mandibular (CM), osso tempo-ral (OT), processo zigomtico do osso temporal (PZ), em um embrio com 8 a 9 semanas de vida IU (aumento de 80 x).

Seguimos uma seqncia muito pequena de cortes e logo nos deparamos com uma nova estrutura, que iniciou sua formao logo abaixo da condensao ssea do osso temporal: o osso condilar. Este surgiu primeiro como uma condensao semelhante quela descrita para o osso temporal, porm logo nos foi possvel ver que se tratava de um tecido cartilagneo, responsvel pela formao do osso condilar; de forma semelhante a um cone, com a base voltada para cima e para lateral, e com uma discreta inclinao de seu pice para medial (fig. 34). O osso condilar se localizou sempre acima e mais para lateral, em relao cartilagem mandibular. At este momento, em todos os cortes em que encontramos o osso temporal e o osso condilar, ainda no havia sinais do osso mandibular. Isto pode ser visto na figura 34:

Na seqncia dos cortes seriados, pudemos ver que o osso condilar ia pouco a pouco apresentando uma forma mais definida, enquanto o osso temporal ia desaparecendo, quando ento, foi-nos possvel distinguir uma condensao mesenquimal que se localizava na altura do polo medial do cndilo.
Fig. 34: Corte histolgico mostrando as estruturas cartilagem mandibular (CM), osso temporal (OT) e osso condilar (OC) em um embrio com 8 a 9 semanas de vida IU (aumento de 80X).

Esta apresentou-se com um aspecto diferente de todas as condensaes encontradas. Este foi o primeiro sinal do msculo pterigideo lateral, aparecendo na anlise dos cortes seriados. Este surgiu como uma estrutura formada por fibras musculares de forma arredondada, cuja rea de seco foi aumentando e adquirindo uma forma elptica com o seu longo eixo no sentido superoinferior, e estas seces foram descendo, dirigindo-se para medial, e desaparecendo, medida que surgiam as condensaes mesenquimais do processo pterigide do osso esfenoide, estruturas sseas prximas a sua rea de origem (fig. 35).

Descrevemos em linhas gerais o que visualizamos em relao ao msculo pterigideo lateral, mas logo aps seu aparecimento nos cortes, entre ele e o cndilo, mais precisamente entre ele e o colo do cndilo comeou a ser visto nos cortes, o osso mandibular. Isto tudo tendo medialmente a companhia da cartilagem mandibular (fig. 36).
Fig. 35: Corte histolgico mostrando as estruturas cartilagem mandibular (CM), osso condilar (OC), processo zigomtico do osso temporal (PZ) e msculo pterigideo late-ral (MPL), em um embrio com 8 a 9 semanas de vida IU (aumento de 80X).

Quase ao mesmo tempo em que surgiu o osso mandibular, o osso condilar no pde mais ser visto, ficando visvel somente uma estrutura ssea de rea de seco circular, na altura do osso temporal - o arco zigomtico - que j apresentava a esta altura dos cortes, fibras do msculo masseter. Tambm nesta altura dos cortes, nos foi possvel visualizar fibras do msculo temporal inserindo-se na regio da apfise coronide mandibular (fig. 36). Enquanto as seces do msculo pterigideo lateral foram descendo e dirigindo-se para medial, em direo sua futura rea de origem, o osso mandibular foi sofrendo uma srie de alteraes, passando de uma forma longilnea no sentido superoinferior, para uma forma que poderamos chamar de cncava, com a sua face interna voltada para a cartilagem mandibular (fig. 36). Nesta altura dos cortes, tambm nos foi possvel visualizar fibras do msculo pterigideo medial. Continuando a se-

qncia de cortes, enquanto o osso mandibular foi tendo a sua rea de seco aumentada, a cartilagem mandibular foi tendo a sua rea de seco diminuda. Quando a estrutura do osso mandibular comeou a manter constante a sua rea, e a cartilagem mandibular teve a sua rea de seco aumentada, isto nos sinalizou estarmos prximos regio da snfise mental, limite dos nossos cortes, pelo menos no que nos interessava (fig. 36).
Fig. 36: Corte histolgico mostrando as estruturas cartilagem mandibular (CM), processo zigom-tico do osso temporal (PZ), osso mandibular (OM), apfise coronide do osso mandibular (AC), msculo temporal (MT), msculo masseter (MM), msculo pterigideo lateral (MPL) e msculo pterigideo medial (MPM) em um embrio com 8 a 9 semanas de vida IU (aumento de 40X).

Outras estruturas foram visualizadas durante toda a anlise dos cortes, formando-se de grupamentos celulares e organizando-se a partir do mesnquima, porm, como escrevemos anteriormente, nosso propsito foi somente analisar a cartilagem mandibular, osso mandibular, osso temporal, osso condilar e o msculo pterigideo lateral. Passamos ento a descrever o que encontramos nos cortes parassagitais. O marco zero aqui, tambm foi a cartilagem mandibular. Analisando de lateral para medial, verificamos que nas peas do grupamento A, excetuando-se a pea A1, encontram-se somente a cartilagem e o osso mandibular. Quando avanamos na anlise do grupamento B, mais precisamente a partir da pea B3, deparamo-nos com as outras estruturas de interesse: osso temporal, osso condilar e msculo pterigideo lateral, o

mesmo acontecendo nas peas do grupamento C. A foto da figura 37 mostra-nos um corte parassagital onde pudemos encontrar fibras do msculo pterigideo lateral cortadas longitudinalmente, apresentando-se em um sentido horizontal, paralelas a um plano basal, diferentemente das fibras do msculo temporal, que se apresentam numa disposio vertical e quase perpendiculares s fibras do msculo pterigideo lateral. A figura 37 mostra o trajeto das fibras do msculo pterigideo lateral no direcionadas ao cndilo mandibular e sim regio do osso temporal.

Fig. 37: Corte histolgico mostrando as fibras do msculo pterigideo lateral se inserindo no osso temporal e no no cndilo mandibular, em um embrio com 10 semanas de vida IU ( cartilagem mandibular (CM), osso condilar (OC), osso temporal (OT), apfise coronide do osso mandibular (AC), msculo temporal (MT), msculo pterigideo lateral (MPL) ( aumento de 35X).

DISCUSSO

DISCUSSO
Nosso principal objetivo foi estudar a presena de fibras do msculo pterigideo lateral inserindo-se no osso temporal, antes de sua insero no conjunto cpsula-disco-cndilo. Quando revisamos a literatura, constatamos que poderamos dividi-la em trs partes: um perodo em que os pesquisadores se preocuparam em estudar as estruturas, determinando-lhes pocas para os seus surgimentos (Symons, 1952; Macalister, 1955; Baume 1962a, 1962b; Moffett, 1966; Youdelis, 1966a, 1966b); um segundo perodo em que se preocuparam em estudar as relaes da fisiologia muscular e sua influncia na determinao da forma destas estruturas, nestes precoces perodos de desenvolvimento (Hooker, 1954, 1958; Humprey, 1968, 1971; Baume & Holz, 1969; Spyropoulos, 1977; Burdi & Spyropoulos,

1978; Perry et al., 1985; Diewert, 1983, 1985; Van der Linden et al., 1987; Sperber, 1989). E por ltimo, mais recentemente, os trabalhos voltaram-se para a determinao das correlaes existentes entre as estruturas da articulao temporomandibular e da orelha mdia, alm das implicaes clnicas destas correlaes (Smeele, 1988; Ashworth, 1990; Cesarani et al., 1991; Sperber, 1992, Rodriguez Vazquez et al., 1992, 1993; gtchen-Toller & Juniper, 1993; Jackson,1993). Para tanto, analisamos as articulaes temporomandibulares de embries humanos com uma idade variando entre 5 e 11 semanas de vida IU, uma poca crtica no desenvolvimento destas (Macalister, 1955; Youdellis, 1966a; Humprey, 1968; Diewert, 1983, 1985; Gray, 1986; Van der Linden et al., 1987; Kitamura, 1989; Sperber, 1989; Avery, 1992). As investigaes sobre os componentes da articulao temporomandibular sempre estiveram voltadas para o blastema condilar, com pouca ou quase nenhuma ateno voltada ao blastema temporal (Youdelis, 1966b). Como nossos trabalhos envolveram quantificaes estereolgicas e avaliaes da distribuio das estruturas analisadas espacialmente, a metodologia de preparo das peas e de seu posterior corte histolgico, foi de suma importncia. A pea anatmica menos desenvolvida, A1, 11 mm CRL, 5 semanas de vida IU, ainda no apresentava estruturas definidas e sim esboos do que viriam a ser a cartilagem mandibular e o osso mandibular (Gray, 1986; Kitamura, 1989). Em stios prximos regio de futura formao das articulaes temporomandibulares, j se podia ver organizaes do mesnquima, sinalizando futuras alteraes teciduais. Partindo para a anlise da pea A2, 19 mm CRL, 6 semanas de vida IU, pudemos visualizar no s a cartilagem mandibular, como tambm o osso mandibular, mais precisamente a regio do seu futuro corpo, quando nos dirigimos para os cortes parafrontais mais anteriores (Gray 1986, Kitamura 1989). Esta mesma seqncia de anlise pde ser realizada nas peas A3, 22 mm CRL, 6 semanas de vida IU, B1, 24 mm CRL, 6 semanas de vida IU e B2, 29 mm CRL, 7 semanas de vida IU, onde pudemos visualizar tanto a cartilagem mandibular como o osso mandibular. Ao analisarmos tais estruturas nestes embries, foi-nos possvel verificar modificaes na distncia entre elas, medida que os embries foram crescendo. Quando dividimos as peas anatmicas em trs grupamentos, assim o fizemos para que pudssemos analis-las tanto em termos de idade como em tamanho. Numa primeira anlise, pudemos deduzir que a partir da 7 semana gestacional, as estruturas de interesse deste trabalho comearam efetivamente a surgir; o osso condilar s foi visvel
a

em nossa pesquisas a partir da pea B3, 8 a 9 semanas de vida IU, bem como o osso temporal (Baume, 1962a; Furstman, 1963; Moffett, 1966; Youdelis, 1966a; Baume & Holz, 1969; Spyropoulos, 1977; Keith, 1982; Larssen, 1993; Van der Linden et al., 1987; Sperber, 1989), sendo que a nica diferena entre elas foi seu estgio de calcificao, fato que esteve de acordo com o que disseram Baume (1966a) e Youdelis (1966b), que as estruturas da articulao temporomandibular se originam de dois blastemas, com direes opostas de desenvolvimento, sendo que o blastema temporal est no tempo e no espao, atrs do blastema condilar. Foi portanto a partir do embrio B3, 8 a 9 semanas de vida gestacional, que pudemos quantificar as distncias entre o surgimento do osso temporal e as demais estruturas, tendo como marco zero o surgimento da cartilagem mandibular. Isto explica por que todas as marcaes nos mostraram zero at a pea B3. importante lembrar que a cartilagem mandibular foi por ns considerada o marco zero, pois a sua presena nos cortes histolgicos representou um excelente referencial espacial. Este marco zero, anteriormente descrito, foi determinado a partir do momento em que no mais visualizamos nos cortes histolgicos, os ossculos martelo e bigorna, estruturas que surgem a partir do 1 arco branquial e que se localizam espacialmente na poro mais distal da cartilagem mandibular, na regio da futura orelha mdia (Avery, 1992). Como os ossos temporal e condilar so, estruturalmente e pelo menos nesta etapa embrionria, os principais componentes da futura articulao temporomandibular, foi interessante o que encontramos nas distncias entre seus surgimentos. Na pea B3, a distncia entre o surgimento do osso temporal em relao ao osso condilar foi de 120 m, caindo para 90m e assim se mantendo nos embries B4 e C1, quando passou a inexistir nos embries C2 e C3. Isto perfeitamente a explicvel pois a partir da 8 semana de vida IU, ocorre um crescimento sagital rpido entre as posies relativas das estruturas faciais com o neurocrnio (Diewert, 1995). Em outras palavras, ocorre no complexo cranioorocervical do embrio, um enorme ganho no sentido vertical e rotacional, trazendo o osso condilar contra o osso temporal no sentido anteroposterior, ao mesmo tempo em que este osso temporal avoluma-se no sentido pstero-anterior, mais precisamente na regio do futuro tubrculo articular. Ainda segundo Diewert (1985), nesta fase embrionria aumentam as atividades da musculatura de toda a regio craniofacial (Hooker, 1954, 1958; Humprey, 1968, 1971; Baume & Holz, 1969; Spyropoulos, 1977; Burdi & Spyropoulos, 1978; Perry et al., 1985; Van der Linden et al., 1987; Sperber, 1989). O mesmo raciocnio pode ser
o

aplicado, quando analisamos as distncias entre o surgimento do osso temporal e o msculo pterigideo lateral: a distncia entre eles no embrio B3 foi de 240 m, caindo para 120 m em B4, subindo para 180 m em C1 e no havendo distncia em C2 e C3. Isto nos mostra que, provavelmente, a partir dos embries C2 e C3, as trs estruturas osso temporal, osso condilar e msculo pterigideo lateral esto espacialmente em um mesmo plano, paralelo a um plano predeterminado de corte. Se no corte histolgico da pea B3, embrio com 8 a 9 semanas de vida gestacional, pudemos ver o msculo pterigideo lateral aparecendo medialmente ao osso condilar (Baume, 1962b), isto nos mostra que ele no se insere no cndilo, mais precisamente na futura fvea pterigide do osso condilar, e sim, continua seu direcionamento espacial para a estrutura que est medial e posteriormente a ele, o osso temporal. Ao analisarmos a distncia entre o surgimento do osso temporal e o osso mandibular, na anlise por grupamentos, pudemos verificar que houve um aumento de 82% do grupamento B (6 a 9 semanas de vida IU), para o grupamento C (9 a 11 semanas de vida IU), aumento considervel dentro de um curto espao de tempo, fato que veio de encontro ao exposto por Diewert (1985) sobre o crescimento sagital rpido entre as posies relativas das estruturas faciais com o neurocrnio. Continuando a anlise estereolgica, ao avaliarmos a distncia entre o surgimento do osso condilar em relao ao surgimento do msculo pterigideo lateral, verificamos que a distncia encontrada no embrio B3 foi de 120 m, decrescendo em 75% no embrio B4, aumentando para 90 m no embrio C1, quando ento caiu para zero nos embries C2 e C3. J as distncias entre o surgimento do msculo pterigideo lateral e o osso mandibular, nos mostraram, tanto nas anlises por embries individuais como nas anlises por grupamentos, que, medida que os embries iam se desenvolvendo, estas distncias iam aumentando. Em seus trabalhos Macalister (1955) concluiu que a partir da 10 semana de vida IU havia uma acomodao das clulas mea a senquimais e que entre a 10 e 12 semanas j havia uma histodiferenciao, bem como uma nova orientao mesenquimal. Isto foi por ns encontrado quando analisamos a distncia de interseces das estruturas analisadas. A anlise individual das peas por grupamentos das estruturas osso condilar, osso temporal e msculo pterigideo lateral mostraram que elas apresentaram uma distncia de interseco entre si, indicando que aps o surgimento delas, inicia-se um processo de reorganizaa

o estrutural influenciado pela atividade muscular. As estruturas osso temporal msculo pterigideo lateral e osso condilar msculo pterigideo lateral tiveram as regies de seces aumentadas com a progresso da idade dos embries, sendo que houve neste desenvolvimento um pico, observado nas peas B4 e C1, com 9 a 10 semanas de vida IU. Essa idade caracteriza-se pela importncia dos processos de determinao da forma da cavidade articular (Van der Linden et al., 1987). O nosso principal objetivo foi pesquisar a existncia ou no de fibras do msculo pterigideo lateral, inserindo-se no osso temporal. Baume & Holz (1969) afirmaram que do blastema glenide que surgiam os elementos da poro superior da articulao temporomandibular, e que sua origem se dava em uma regio onde primitivamente se uniriam os msculos masseter e temporal, com o que concordamos, pois apesar de no estarmos analisando estes msculos, foi-nos possvel verificar sua presena em nossas peas, prximos aos futuros stios de diferenciao histolgica, que viriam a formar o arco zigomtico (origem do msculo masseter) e o processo coronide (insero do msculo temporal, mais precisamente o seu tendo superficial). Em seus trabalhos, Van der Linden et al. (1987) mostraram que j na 5 semana de vida IU possvel a visualizao de fibras do msculo pterigideo lateral nos cortes histolgicos, o que vem de encontro ao descrito por Baume (1962b) segundo o qual a formao muscular precede a ossificao intramembranosa, tanto que verificou em embries humanos com 30 mm CRL, 8-9 semanas de vida IU, um discreto desenvolvimento de mioblastos imaturos, acontecendo medialmente ao blastema condilar, exatamente o achado por ns na pea B3, 8-9 semanas de vida IU. Nesta pea visualizamos os primeiros sinais do msculo pterigideo lateral, localizado medialmente ao osso condilar porm, no inserido neste. Humprey (1968) relatou ser provvel que muitos dos msculos abaixadores da mandbula j estarem funcionando com 8,5 semanas de vida IU, o que vem de encontro a nossas suposies. Ainda Humprey, em 1971, continuando os trabalhos de Hooker ( 1954, 1958) sobre a estimulao em embries vivos, comprovou que na idade entre 8,5 e 9,5 semanas de vida IU, a abertura de boca era mais completa que a comparada ao estgio anterior, ao passo que o fechamento era evidentemente passivo devido ao tempo gasto para realiz-lo. Estas anlises vieram de encontro s nossas observaes de que o msculo pterigideo lateral com 9 semanas de vida IU se encontra medialmente ao cndilo, e que sendo ele, por excelncia, o principal msculo abaixador mandibular, quando o reflexo de abertura bucal ocorre, ao contrair-se, traz o conjunto cndiloosso temporal para a frente, para baixo e para medial,
a

tracionando a regio do futuro tubrculo articular (Sperber, 1989). Isto ocorre pelo fato de que nesta poca do desenvolvimento, a regio da futura articulao temporomandibular ainda se apresenta como uma rea no diferenciada em sua totalidade, possuindo ainda um volume grande de tecido mesenquimal indiferenciado (Macalister, 1955; Moffett, 1966), ao passo que o msculo pterigideo lateral bem como outros msculos abaixadores, j se formaram anteriormente (Van der Linden et al., 1987). Isto posto, parece-nos lgico que, quando um msculo contrai, ele tende a tracionar os seus pontos de origem e insero. Como a rea de insero ainda est se definindo, o que provavelmente est sendo tracionado o conjunto cndilo-osso temporal, atravs do mesnquima interposto entre estas duas estruturas. Nossa linha de raciocnio foi ento mais reforada com o que encontramos na literatura, a partir desta poca. Spyropoulos (1977) ao estudar as relaes entre os msculos masseter e temporal com suas estruturas sseas pertinentes, verificou que os mesmos comeavam o seu desenvolvimento antes dos componentes esquelticos, aos quais iriam se unir futuramente, com o que concordamos, pois tais msculos, como o pterigideo lateral, j so passveis de contrao comprovada por Hooker (1954, 1958) e Humprey (1968, 1971) e com isso seriam tambm os responsveis pela futura forma destas estruturas sseas em desenvolvimento. Burdi & Spyropoulos (1978) estudaram 19 embries e fetos em uma idade de 16 a 33 semanas de vida IU, avaliando a correlao entre o msculo masseter e a mandbula, em suas atividades musculares, atravs do estudo de suas reas de insero mandibular, o que para ns no foi passvel de discusso, pelo fato de serem nossas peas mais novas do que as utilizadas por aqueles autores em suas anlises. Keith (1982) descreveu a articulao temporomandibular como sendo formada por 2 blastemas que cresciam de encontro um ao outro, com o que concordam Baume (1962a) e Larssen (1993). Alm disso, o surgimento, entre estes dois blastemas, de uma terceira condensao celular associada ao msculo pterigideo lateral, a qual posteriormente se transformaria no disco articular, parece corroborar com nossas anlises. Assim tudo indica que o msculo pterigideo lateral relaciona-se ao blastema temporal atravs de sua insero no osso temporal, na regio do futuro tubrculo articular, bem como regio do blastema condilar, mais precisamente na altura da parede medial do osso condilar. Encontramos fibras do msculo pterigideo lateral inserindo-se no osso temporal, mais precisamente na regio do futuro tubrculo articular antes de sua insero no conjunto cpsuladisco cndilo. Se nesta fase, ao redor da 9 semana de vida IU, o embrio j realiza movimentos de abertura de boca (Hooker, 1954, 1958; Humprey,

1968, 1971; Spyropoulos, 1977), ento, provvel que o msculo pterigideo lateral, quando contrado, possa ser responsvel pela formao do tubrculo articular do osso temporal, conforme descrito por Perry et al. (1985) que sugeriram haver uma unio prematura entre o msculo pterigideo lateral, o blastema condilar e a cartilagem mandibular, e que graas a esta unio, o msculo pterigideo lateral mostrava-se funcional durante os processos de formao da cavidade articular, atravs de traes diferenciadas em suas futuras inseres. Segundo Van der Linden et al. (1987) a primeira apario do osso temporal ocorre entre 7 e 7,5 semanas de vida IU, 21 mm CRL, cuja evidncia concreta s se verifica ao redor da 8 a 9 semanas, com que concordamos. Em nossos achados histolgicos, o osso temporal comeou a ser mais visvel e a ter seu volume aumentado, a partir da 9 semana de vida IU, como pudemos avaliar em nossas quantificaes estereolgicas. A fossa articular inicialmente convexa, at a 9 semana, sendo que a partir de ento, torna-se rasa, passando a ter um formato cncavo definitivo, que combina mais com a cabea do cndilo. Assim, dados como a convexidade da cavidade articua lar at a 9 semana (Van der Linden et al., 1987), evidncias de funo muscular a partir de 8,5 a 9 semanas de vida IU (Hooker 1954 e 1958, Humprey 1968, 1971; Spyropoulos 1977), a unio prematura entre o msculo pterigideo lateral, blastema condilar, cartilagem mandibular (Perry et al., 1985), os nossos achados histolgicos das fibras do msculo pterigideo lateral inserindo-se na regio do futuro tubrculo articular do osso temporal, a ao muscular necessria cavitao articular (Sperber, 1989), levam-nos a crer que a mudana de forma da cavidade articular d-se no incio dos movimentos de abertura de boca. Esses aspectos reafirmam a possibilidade de trao das fibras do msculo pterigideo lateral, inseridas no osso temporal. Dentro desta proposio, foi tambm de nosso interesse quantificar o volume destas estruturas. Sobre isto, nada encontramos na literatura, principalmente pela forma como foram apresentadas, ou seja a distribuio temporal e espacial das estruturas, e depois uma quantificao volumtrica das mesmas. Novamente utilizamos a cartilagem mandibular por volume amostrado, como um referencial seguro, pois o marco zero; conforme dissemos, foi determinado a partir do momento em que no mais visualizamos nos cortes histolgicos, pontos de ossificao do martelo e bigorna. Isto nos deu segurana em termos de localizao espacial pelo fato de que estes ossculos se situam na orelha mdia, regio pertencente cpsula tica, que por sua vez faz parte da cpsula basal, uma das trs cpsulas formadoras do condrocrnio, estrutura que surge a partir da 4
a

semana de vida IU, dividindo a regio ceflica em neurocrnio e viscerocrnio (Diewert, 1985; Gray, 1986; Sperber, 1989; Avery, 1992). Quantificamos ento os volumes da cartilagem mandibular, por volume amostrado, dos ossos temporal e condilar e do msculo pterigideo lateral, sendo que nesta quantificao, trabalhamos com embries do grupamento C, 9 a 11 semanas de vida IU, 45 a 58 mm CRL. A anlise quantitativa do volume das estruturas estudadas mostrou a grande massa muscular do msculo pterigideo lateral, quando comparado aos volumes dos ossos temporal e condilar, o que nos leva a ter nestes dados, um indicativo morfolgico da atividade muscular presente na poca. O encontro de fibras do msculo pterigideo lateral inseridas no osso temporal, indica a participao do msculo pterigideo lateral no processo de formao do tubrculo articular do osso temporal.

CONCLUSES

CONCLUSES
Deste estudo pudemos concluir o seguinte: As quantificaes estereolgicas nos mostraram que as estruturas estudadas surgem de alteraes do mesnquima embrionrio j se posicionando espacialmente nos seus stios predeterminados. Elas, ento, vo se desenvolvendo dentro de orientaes espaciais tambm predeterminadas, relacionando-se dentro de um rigoroso padro estrutural. Pudemos chegar a estas concluses porque estudamos as estruturas espacial e temporalmente. Foram encontradas fibras do msculo pterigideo lateral inserindo-se no osso temporal, mais precisamente na regio de formao do futuro tubrculo articular, em embries com idade aproximada de 9 a 11 semanas de vida IU.

Estes achados indicaram que a atividade muscular quando do reflexo de abertura da boca, j presente nesta etapa de desenvolvimento embrionrio, a responsvel pela modificao da forma da fossa mandibular de convexa para cncava, dando origem ao tubrculo articular.

ANEXOS

ANEXOS

Tab. 4 : Tabela mostrando as quantificaes estereolgicas realizadas no embrio C1 (A(p)=4300,38 m ; objetiva 4x).
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Tab. 5: Tabela mostrando as quantificaes estereolgicas realizadas no embrio C2 (A(p)=4300,38 m ; objetiva 4x). Tab. 6: Tabela mostrando as quantificaes estereolgicas realizadas no embrio C3 (A(p)=4300,38 m ; objetiva 4x).
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1998

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