**GERT BEUVING - Las operaciones internacionales de productos farmacuticos - Los sistemas internacionales de calidad.

TAREAS

-auditora interna. -auditora de proveedores y fabricantes por contrato. -la preparacin y gua de las inspeccionesexternas de revisin y asesoramiento sobre los procedimientos y validaciones.
VALIDACIN FDA-directrices: La validacin es el establecimiento de evidencia documentada que proporciona un alto grado de certeza de que un proceso especfico consistentemente un producto que cumpla sus especificaciones predeterminadas y atributos de calidad. Directivas de la UE: Accin de la prueba, de acuerdo con los principios de GMP que cualquier procedimiento, proceso, equipo, material, actividad o sistema de realidad conduce a los resultados esperados CONCLUSIN - Necesidad de pre-determinados por el usuario y el rendimiento operativo requisitos (URS) de un proceso o sistema. - Acreditar la reunin de pre-definidos y operativos los requisitos de performance. - Proporcionar datos sobre la consistencia de cumplir con estos requisitos.

MS ESPECFICOS "Los mtodos de validacin es el proceso de lo que demuestra que los procedimientos analticos adecuado para el uso previsto" (ICH Topic Q2B, March 1995) 1. 2. 3. POR QU LA VALIDACIN? GMP-la legislacin buena economa Las buenas prcticas de la ciencia

DIRECTRICES DE VALIDACIN 1. 2. 3. 4. ICH Q2A: Texto de validacin de procedimientos analticos: Definiciones y terminologa (marzo de 1995) ICH Q2B: Validacin de procedimientos analticos: Metodologa (junio de 1997) FDA: (Proyecto) Gua para la industria: los procedimientos y mtodos analticos validacin Farmacopeas: USP y Farmacopea Europea

 QU MTODOS SE VALIDAN? Definido por: - la identificacin - Pruebas cuantitativas del contenido en impurezas - Pruebas de lmite para el control de las impurezas - Las pruebas cuantitativas de la fraccin activa de sustancias de drogas y productos Se refiere a: - Disolucin de las pruebas - La determinacin del tamao de partcula (principio activo)

CUNDO DEBE SER VALIDADO LOS MTODOS? Desarrollo y toxicologico: No hay validacin necesaria fase 1: No hay datos de validacin necesarios fase 2: Por principio activo y del producto de la droga apoyo de validacin de datos sobre mtodos de anlisis deben estar disponibles bajo peticin CUNDO DEBEN SER VALIDADOS LOS MTODOS? - Fase 3 (estudios pivotales): Informacin de validacin apropiada debe ser proporcionado. Validacin de los anlisis debe cubrir la exactitud, precisin, especificidad (incluyendo las pruebas de estrs), la cuantificacin y los lmites de deteccin, linealidad y el rango (si procede). La degradacin se debe identificar, calificar y cuantificar QU ASPECTOS A CUBRIR? ESPECIFICIDAD: Definicin: Capacidad de evaluar de manera inequvoca la sustancia analizada en la presencia de de componentes que se puede esperar que se presente (impurezas, productos de degradacin, la matriz) aspectos: - Identificacin - Pruebas de pureza - Ensayo (Noticias / potencia) LINEALIDAD: Definicin: Capacidad (dentro del rango especificado) para obtener resultados de las pruebas que se directamente proporcional a la concentracin de analito en la muestra. Aspectos: - Prueba de toda la gama (por lo menos cinco concentraciones) - Evaluar la linealidad mediante una inspeccin visual de las parcelas yestadsticas tcnicas. - Calcular coeficiente de correlacin, interseccin, la pendiente y la resolucin. Suma de cuadrados. RANGO: Definicin: Intervalo entre la concentracin superior e inferior de la sustancia analizada en la muestra que se ha demostrado que el procedimiento tiene un adecuado nivel de precisin, exactitud y linealidad aspectos:

- Definicin de estudio de linealidad - Depende de la aplicacin del mtodo (ensayo, ensayo de disolucin, uniformidad de contenido) PRECISIN: Definicin: Expresa el grado de concordancia entre el valor que se aceptado como un valor convencionalmente verdadero o aceptado una valor de referencia y el valor encontrado. MATERIAL Y MTODOS: De drogas de sustancias: - El uso del estndar de referencia con una pureza conocida - Comparacin con el procedimiento independiente, bien caracterizados - Se puede inferir una vez que la precisin, la linealidad y la especificidad son establecido.

De productos de droga: - Adicin de la mezcla de placebo - Adems del analito que "activa" de material - La comparacin de los resultados obtenidos con independientes, bien caracterizados procedimiento - Se puede inferir una vez que la precisin, la linealidad y la especificidad son establecido las impurezas - Adicin de muestras de productos - La utilizacin de procedimientos independientes, bien caracterizados Datos recomendados: - Evaluado por 9 determinaciones durante un mnimo de tres concentraciones niveles que cubren el rango especificado - Para ser reportado como porcentaje de recuperacin. PRECISIN Definicin: Grado de concordancia ("scatter") entre una serie de las mediciones obtenidas a partir de un muestreo mltiple de la misma muestra homognea. Aspectos: -Repetibilidad - Intermedio de precisin - Reproducibilty PRECISIN REPETIBILIDAD Definicin: Precisin en las mismas condiciones de funcionamiento durante un corto intervalo de tiempo. Mtodo: - 9 determinaciones que cubre el rango especificado - 6 determinaciones al 100% de la concentracin de ensayo

PRECISIN - LA PRECISIN INTERMEDIA Definicin: Expresa dentro de las variaciones de laboratorio.

Mtodo: - Depende de las circunstancias de uso de los mtodos - Debe incluir las variaciones en da, analists, columnas PRECISIN - LA REPRODUCIBILIDAD Definicin: Precisin entre laboratorios Mtodo: - Depende del uso del mtodo - En caso de incluir el estudio interlaboratorios

LMITE DE DETECCIN Definicin: Menor cantidad necesariamente cuantificada. Mtodo: - Basado en la evaluacin visual - Sobre la base de la relacin seal-ruido (3:1) - Basado en st.dev. (SD) de la respuesta y la pendiente (DL = 3.3xSD / S) - Informe de resultados y el mtodo de eleccin de un analito en una muestra que se puede detectar, pero no

CUANTIFICACIN LMITE Definicin: Menor cantidad de un analito en una muestra que puede ser cuantitativamente determinar con una precisin adecuada y precisin. Mtodo: - Basado en la evaluacin visual - Sobre la base de la relacin seal-ruido (10:01) - Basado en st.dev. (SD) de la respuesta y la pendiente (DL = 10xSD / S) - Informe de resultados y el mtodo de eleccin ROBUSTEZ Definicin: Medida de la capacidad de un mtodo para no ser afectado por pequeas variaciones en los parmetros del mtodo. Aspectos: - Para ser considerados durante el desarrollo - Para ser utilizado para el establecimiento de criterios de idoneidad del sistema - Incluya las pruebas de estabilidad de las soluciones - Para ser probado por la introduccin de pequeas variaciones en los parmetros del mtodo

SISTEMA DE PRUEBA DE APTITUD Definicin: Conjunto de parmetros y criterios thereoff asegurar que el sistema es funcionando correctamente.

Aspectos: - Depende del tipo de prueba - Por los mtodos cromatogrficos: factor de asimetra, rel. tiempos de retencin, resolucin, rel. st. desviacin, el nmero de platos tericos - Para ser comprobado antes de comienzo de carrera y ser verificados posteriormente - Se describe en las farmacopeas RECOMENDADO CARACTERSTICAS DE VALIDACIN DE DIVERSOS TIPOS DE PRUEBAS

factor

de

APLICACIN DE LAS DIRECTRICES - Los protocolos estndar - Establecer los procedimientos - El mutuo acuerdo de las pruebas - El mutuo acuerdo en los criterios - El mutuo acuerdo sobre la documentacin ==> PROCEDIMIENTOS DE DESARROLLO DE INVERSIN (MDP) EJECUCIN 1.6 MDP "Validacin del mtodo de ensayo de los compuestos activos por HPLC, electroforesis capilar o de gas cromatografa en productos farmacuticos"

Selectividad Pruebas: - Inyectar las soluciones de la norma, producto, impurezas, conocido productos de degradacin, los excipientes; - Inyectar las soluciones de los productos de degradacin / estrs y placebo - 2 horas de arte. la luz del da (70-90 Klux) - 1 semana a 75 C / amb. humedad y 75 C/100% HR - 24 horas H2O2 al 3%, 1 mol / L HCl 1 mol / L NaOH - Demostrar la separacin - Demostrar la pureza del pico Criterios: - La separacin entre los picos relevantes de por lo menos R> 2,0 - Pico de analito debe ser pura documentacin - Los cromatogramas de todas las soluciones - Tiempos de retencin - Resultados de pureza de pico - Datos de contenido de sustancia activa y los productos de degradacin en las muestras de la tensin.

Linealidad Pruebas: - Inyectar las soluciones de 25%, 50%, 75%, 100%, 125% y 150% de concentracin esperada por duplicado; - Calcular mediante tcnicas estadsticas de la orden de la funcin (primer o segundo), la importancia de interceptar y coeficiente de correlacin - En caso de segundo orden y / o desviacin significativa de la interseccin de cero: determinar el grado de linealidad en la rango de 70-130%. Criterios: - El uso de una concentracin de referencia es aceptable cuando: Lnea de regresin es lineal (la falta de prueba de ajuste) Cero verdadero est dentro del 95% conf. intervalo de interceptar calculado o en el caso de la curva de segundo orden: i. Si experimental rel. respuesta en un 70% y 130% no diferir en ms del 1% de los valores calculados ii. Lineal, cuando corr. coeficiente> 0,9990 documentacin iii. Parcelas de altura del pico y las reas de pico iv. Los resultados estadsticos (ecuaciones, la importancia de interceptar, Offitfalta prueba, rel. respuestas, corr. coeficiente) v. Los grficos de rea del pico y pico de residuos alturas Precisin Prueba: - Preparacin de la muestra placebo - Preparacin de muestras adicionadas con placebo: 3 repeticiones ms de 3 niveles de concentracin (por ejemplo, 70%, 100%, 130% del terico fuerza) - Llevar a cabo el mtodo - Calcular significa la recuperacin por ciento y rel. desviacin estndar (RSD) de ambas reas de los picos y las respuestas de los picos de altura. Criterios: - El resultado promedio de la media de cada nivel debe ser 98,0 - 102,0% - Rango de respuesta de placebo dentro de -1% y 1% - RSD de los resultados combinados debe ser <2% documentacin - Detalles sobre los preparativos de la muestra - Los resultados individuales (reas de los picos y alturas de los picos) - RSD calculado% de recuperacin y se agruparon

La repetibilidad del sistema Prueba: - Inyectar en seis veces una de las soluciones 100% de la precisin experimento - Calcular RSD, tanto para la altura del pico y el rea del pico criterio RSD <1,5% documentacin - Resultados y clculos estadsticos Repetibilidad del mtodo Prueba: - Analizar el plazo de un da por un operador con una columna de 6 veces de una muestra homognea del producto - Calcular el RSD de los resultados que a la altura de pico y pico rea criterio RSD <2% documentacin Resultados y clculos estadsticos

La precisin intermedia Prueba: - Igual que para la repetibilidad del mtodo, pero por lo menos 2 analists, ms das, los diferentes laboratorios, diferentes (lotes de) columnas - Calcular el RSD en los resultados globales criterio RSD <2,5% La precisin intermedia Documentacin: - Descripcin de la preparacin de la muestra homognea - Descripcin de las condiciones experimentales - Los resultados y la evaluacin estadstica La deteccin y lmite de cuantificacin Determinacin no es necesario Slo se aplica a las impurezas y productos de degradacin Gama No existe una prueba especfica: Normalmente, una gama de 70 a 130% es aceptable, a menos que un rango ms amplio se requiera segn la naturaleza de la forma farmacutica (por ejemplo, inhaladores de dosis medida) Robustez Prueba de estabilidad de las soluciones: - Prepare dos muestras y dos soluciones patrn de referencia - Guarde en el refrigerador ya temperatura ambiente - Analizar en el tiempo cero y despus de un mnimo de 24 y 72 horas almacenamiento - Calcular las diferencias entre las muestras criterio Perodo de almacenamiento se define por el perodo de no ms de 1% diferencia entre la temperatura ambiente y la nevera

Documentacin: - Los resultados individuales - Los clculos, la diferencia entre la habitacin y la nevera muestras Prueba de las variaciones: - Variar los parmetros relevantes de anlisis por ejemplo, - Composicin y / o pH de la fase mvil - Temperatura de la columna - Columna diferente (otro lote o marca / proveedor) - La estabilidad del sistema cromatogrfico criterios - Resultados de cromatografa cumplir con los criterios de idoneidad del sistema - Por lo general recuento en placa no deber disminuir en ms del 50% Documentacin: - Cromatogramas correspondientes - Los clculos y los resultados de los parmetros de idoneidad del sistema Utilizar los resultados de los experimentos de desarrollo del mtodo!

Pruebas de aptitud del sistema Prueba: - Recopilar todos los datos de los experimentos anteriores con respecto a la - Nmero de platos tericos - Factor de asimetra - Retencin relativos - Resolucin de los factores - Precisin del sistema - Incluir informacin sobre la resolucin mnima entre el analito y ms difciles de resolver impureza / degradacin del producto criterios - Criterios depende del desarrollo y resultados de la validacin. - Evaluar y optimizar los criterios definidos cuando ms experiencia se obtiene con el mtodo. Documentacin: - Resumen de datos sobre los parmetros individuales - Clculos y cromatogramas correspondientes 4.6 MDP "Validacin de la determinacin de una impureza en medicinales por HPLC, electroforesis capilar o cromatografa de gases "

una

productos

Selectividad Pruebas y documentacin: - Igual que para la determinacin de la sustancia activa. Criterios: - Determinacin de impurezas no debe ser influenciado por ningn otro pico procedente de otros componentes en la solucin de la muestra. - Factor de resolucin entre dos picos deben ser por lo menos> 1,5. - Resolucin entre la sustancia activa y la impureza debe ser > 2. Linealidad Pruebas: - Inyectar las soluciones de 10%, 50%, 100%, 150% y 200% de concentracin esperada por duplicado (basado en la concentracin lmite de inscritos, si no se definen a continuacin, 1%); - Calcular mediante tcnicas estadsticas de la orden de la funcin (primer o segundo), la importancia de interceptar y coeficiente de correlacin - En caso de segundo orden y / o desviacin significativa de la interseccin de cero: determinar la desviacin en la relacin respuesta del 10% y 200% puntos. Criterios: - El uso de una concentracin de referencia es aceptable cuando: - Lnea de regresin es lineal (la falta de prueba de ajuste) - Cero verdadero est dentro del 95% conf. intervalo de interceptar calculado o en el caso de la curva de segundo orden: - Si la desviacin de la rel. respuesta de un 10% menos de momento isd 20% y del punto de 200% es inferior al 5% los valores - Lineal, cuando corr. coeficiente> 0,995 Documentacin (igual que para DS): - Parcelas de altura del pico y las reas de pico - Los resultados estadsticos (ecuaciones, prueba, rel. respuestas, corr. coeficiente) - Los grficos de rea del pico y pico de residuos alturas

la

importancia de interceptar, Offitfalta

Gama No existe una prueba especfica: Normalmente, una gama de 10 a 200% es aceptable. En la mayora de los casos 100% es del 1% en relacin con el frmaco. Precisin Prueba: - Preparacin de la muestra placebo - Preparacin de muestras adicionadas con placebo: 3 repeticiones ms de 3 niveles de concentracin (por ejemplo, 2 x CV, el 100% y 200% del 1% de la concentracin de la droga de sustancias) - Realizar un anlisis de: Calcular significa la recuperacin por ciento y rel. desviacin estndar (RSD) de ambas reas de los picos y las respuestas de los picos de altura.

Criterios: - El resultado promedio de la media de 100% y 200% del nivel de debe ser 90 a 110% y para 2xQL 70 130% - RSD de 100 y un 200%: <5% y 2xQL:% <15 Documentacin: - Detalles sobre los preparativos de la muestra - Los resultados individuales (reas de los picos y alturas de los picos) - RSD calculado% de recuperacin y se agruparon La repetibilidad del sistema Prueba: - Inyectar en seis veces de cada uno de los puntos fuertes de la referencia soluciones a partir del experimento de precisin - Calcular RSD, tanto para la altura del pico y el rea del pico criterio RSD (2xQL) <15%; RSD (100% y 200%) <5% Documentacin: Resultados y clculos estadsticos Repetibilidad del mtodo Prueba: - Inyectar en seis veces de cada uno de los puntos fuertes de las muestras utilizados en el experimento de Precisin: - Calcular el RSD de los resultados que a la altura de pico y pico rea

Criterios: RSD (2xQL) <15%; RSD (100% y 200%) <5%

Documentacin: Resultados y clculos estadsticos

La precisin intermedia Pruebas y documentacin: Igual que para el ensayo, pero probado en muestras adicionadas al 1% criterio RSD <10%

La deteccin y lmite de cuantificacin Prueba: - Determinar el pico a pico de distancia de la lnea de base en la posicin de analito en una muestra en blanco. Calcular el ruido de hasta 0,5 veces este distancia - Calcular el lmite de deteccin hasta 3 veces el ruido y la cuantificacin lmite de 10 veces el ruido - Verifique que el DL y QL calcula mediante la inyeccin de al menos un solucin con una concentracin en o cerca del DL y QL. Criterio: El lmite de cuantificacin es, por preferencia, menos del 0,1% en relacin a la sustancia de la droga. Documentacin: - Cromatogramas utilizado para el clculo de - Cromatograma de la muestra a una concentracin cerca de DL y QL Robustez Pruebas y documentacin sobre la estabilidad de las soluciones: Igual que para el ensayo Criterio: Perodo de almacenamiento se define por el perodo de no ms de 5% diferencia entre las muestras almacenadas a temperatura ambiente y en el refrigerador Pruebas de aptitud del sistema Prueba, criterios y la documentacin: Igual que para el ensayo

http://www.ikev.org/haber/beuvingall.pdf

 TIPOS DE PROCEDIMIENTOS ANALTICOS a ser validado La discusin sobre la validacin de procedimientos analticos se dirige a los cuatro ms comunes tipos de procedimientos analticos: - Las pruebas de identificacin. - Pruebas cuantitativas para el contenido de impurezas. - Limite las pruebas para el control de las impurezas. - Las pruebas cuantitativas de la fraccin activa en las muestras de sustancia de la droga o producto de drogas u otro componente seleccionado (s) en el producto farmacutico. Aunque hay muchos otros procedimientos de anlisis, tales como las pruebas de disolucin de la droga productos o la determinacin del tamao de partcula de sustancia de la droga, estos no han sido abordados en el texto inicial en la validacin de procedimientos analticos. La validacin de estos anlisis adicionales procedimientos es igualmente importante para las aqu indicadas, y puede ser abordado en posteriores de los documentos. Una breve descripcin de los tipos de pruebas consideradas en este documento se proporciona ms abajo. - Las pruebas de identificacin tienen por objeto garantizar la identidad de un analito en una muestra. Es normalmente se logra mediante la comparacin de una propiedad de la muestra (por ejemplo, el espectro, comportamiento cromatogrfico, reactividad qumica, etc) a la de un patrn de referencia. - Las pruebas de impurezas puede ser una prueba cuantitativa o una prueba de lmite para la impureza en una muestra. Cualquiera de las pruebas est diseado para reflejar con precisin las caractersticas de pureza de la muestra. Caractersticas diferentes de validacin son necesarias para una prueba cuantitativa de un lmite de prueba. - Los procedimientos de ensayo se pretende medir el analito en una muestra dada. en el contexto de este documento, el ensayo representa una medida cuantitativa de las principales componente (s) en la sustancia de la droga. Para el medicamento, de similares caractersticas tambin se aplican cuando la validacin ensayo de un componente activo o seleccionado (s). Las caractersticas de validacin mismo puede aplicarse tambin a los ensayos relacionados con otros procedimientos analticos (por ejemplo, la disolucin). El objetivo del procedimiento analtico debe quedar claro desde este regirn las caractersticas de validacin que necesitan ser evaluadas. Las caractersticas tpicas de validacin que deben ser considerados son los siguientes: precisin precisin repetitividad intermedias de precisin especificidad Lmite de deteccin Lmite de cuantificacin linealidad alcance Cada una de estas caractersticas de validacin se define en el glosario adjunto. La tabla muestra las caractersticas de validacin considerado como el ms importante para la validacin de los diferentes tipos de procedimientos analticos. Esta lista deber ser representativa de la analtica procedimientos citados, pero hay excepciones ocasionales deben tratarse sobre una base caso por caso. Cabe sealar que la robustez no aparece en la tabla, pero se debe considerar en un momento oportuno en el desarrollo del procedimiento analtico. Adems revalidacin puede ser necesario en las siguientes circunstancias: - Los cambios en la sntesis de la sustancia medicamentosa; - Cambios en la composicin del producto terminado; - Los cambios en el procedimiento analtico; El grado de revalidacin requerido depende de la naturaleza de los cambios. algunos otroscambios pueden requerir la validacin, as.

TABLA

- Significa que esta caracterstica no suele ser evaluado + Significa que esta caracterstica se evala normalmente (1) en los casos en que la reproducibilidad (ver glosario) se ha realizado, la precisin intermedia no es necesario (2) la falta de especificidad de un procedimiento analtico puede ser compensada por otros el apoyo a la tcnica analtica (s) (3) puede ser necesaria en algunos casos

GLOSARIO 1. Procedimiento analtico El procedimiento de anlisis se refiere a la forma de realizar el anlisis. Se debe describir en detalle los pasos necesarios para realizar cada prueba analtica. Esto puede incluir pero no se limita a: la muestra, la norma de referencia y los preparativos reactivos, el uso del aparato, generacin de la curva de calibracin, el uso de las frmulas para el clculo, etc. 2. Especificidad La especificidad es la capacidad de evaluar inequvocamente el analito en la presencia de componentes que se puede esperar que se presente. Normalmente, estos pueden incluir impurezas, productos de degradacin, matriz, etc. La falta de especificidad de un procedimiento analtico individuo puede ser compensada por otros el apoyo a la tcnica analtica (s). Esta definicin tiene las siguientes implicaciones: Identificacin: para garantizar la identidad de un analito. Pruebas de pureza: para asegurarse de que todos los procedimientos analticos realizados permiten una declaracin exacta del contenido de impurezas de un analito, es decir, relacionados prueba de sustancias, metales pesados, contenido de disolventes residuales, etc. (Contenido o potencia):

Para proporcionar un resultado exacto que permite determinar con precisin sobre el contenido o la potencia de la sustancia analizada en una muestra. 3. Precisin La precisin de un procedimiento analtico expresa el grado de concordancia entre el valor que se acepta como un valor convencionalmente verdadero o un valor de referencia aceptado y el valor encontrado. Esto a veces se denomina veracidad. 4. Precisin La precisin de un procedimiento analtico expresa el grado de concordancia (grado de dispersin) entre una serie de medidas obtenidas de muestreo mltiple de la misma muestra homognea en las condiciones prescritas. La precisin puede ser considerado en tres niveles: repetibilidad, precisin intermedia y reproducibilidad. La precisin se debe investigar con muestras homogneas, autntico. Sin embargo, si no es posible obtener una muestra homognea puede ser investigado utilizando preparados artificialmente muestras o una solucin de la muestra. La precisin de un procedimiento analtico se expresa generalmente como la varianza, la norma desviacin o coeficiente de variacin de una serie de mediciones. 4.1. Repetitividad Se expresa la precisin en las mismas condiciones operativas en un corto intervalo de tiempo. Repetibilidad se denomina tambin intra-ensayo de precisin. 4.2. Intermedias de precisin La precisin intermedia se expresa dentro de los laboratorios de las variaciones: diferentes das, diferentes los analistas, los distintos equipos, etc. 4.3. Reproducibilidad Reproducibilidad expresa la precisin entre laboratorios (estudios en colaboracin, generalmente se aplica a la normalizacin de la metodologa). 5. Lmite de deteccin El lmite de deteccin de un procedimiento analtico individual es la menor cantidad de analito en una muestra que se puede detectar, pero no necesariamente cuantificada como un valor exacto. 6. Lmite de cuantificacin El lmite de cuantificacin de un procedimiento analtico individual es la menor cantidad de analito en una muestra que puede determinarse cuantitativamente con precisin y exactitud adecuadas. La lmite de cuantificacin es un parmetro de anlisis cuantitativos de los bajos niveles de compuestos en la muestra matrices, y se utiliza sobre todo para la determinacin de impurezas y / o degradacin los productos. 7. Linealidad La linealidad de un procedimiento analtico es su capacidad (dentro de un rango determinado) para obtener pruebas resultados que son directamente proporcionales a la concentracin (cantidad) de analito en la muestra. 8. Alcance El rango de un procedimiento analtico es el intervalo entre la parte superior e inferior la concentracin (cantidad) de analito en la muestra (incluyendo estas concentraciones) para los que se ha demostrado que el procedimiento analtico tiene un nivel adecuado de precisin, exactitud y la linealidad. 9. Robustez La robustez de un procedimiento analtico es una medida de su capacidad para no ser afectado por pequeas variaciones, pero deliberadas de los parmetros del mtodo, y proporciona una indicacin de su fiabilidad durante el uso normal.

Validacin de procedimientos analticos: METODOLOGA INTRODUCCIN Esta gua es complementaria a la directriz principal que presenta un anlisis de lacaractersticas que deben tenerse en cuenta durante la validacin de procedimientos analticos. Su propsito es proporcionar orientacin y recomendaciones sobre la manera deconsiderar los diversos caractersticas de validacin para cada procedimiento analtico. En algunos casos (por ejemplo, demostracin de la especificidad), la capacidad global de una serie deprocedimientos analticos en la combinacin puede ser investigado a fin de garantizar la calidad de la sustancia activa o medicamento. Adems, el documento ofrece una indicacin de los datos que deben se presentar en una solicitud de autorizacin de comercializacin. Toda la informacin relevante recopilada durante la validacin y frmulas para el clculo de validacin caractersticas deben ser presentadas y discutidas en su caso. Enfoques distintos de los establecidos en esta norma sea aplicable y aceptable, es la responsabilidad del solicitante a elegir el procedimiento de validacin y el protocolo ms adecuada para el producto. Sin embargo, es importante recordar que el objetivo principal de validacin de un procedimiento de anlisis es demostrar que el procedimiento es adecuado para su la finalidad prevista. Debido a su naturaleza compleja, los procedimientos analticos para la diversidad biolgica y productos biotecnolgicos en algunos casos puede ser de manera diferente que en este documento. Bien caracterizados los materiales de referencia, con la pureza documentacin, se debe utilizar a lo largo de el estudio de validacin. El grado de pureza necesario depende del uso previsto. De acuerdo con la gua * padre, y para mayor claridad, este documento considera las caractersticas de validacin en diferentes secciones. La disposicin de estas secciones refleja el proceso por el cual puede ser un procedimiento analtico desarrollado y evaluado. En la prctica, por lo general es posible disear el trabajo experimental a fin de que la adecuada caracterstica de validacin se puede considerar al mismo tiempo para proporcionar un sonido, en general conocimiento de las capacidades del procedimiento analtico, por ejemplo: la especificidad, linealidad, alcance, precisin y precisin. 1. Especificidad Una investigacin de la especificidad debe ser llevado a cabo durante la validacin de la identificacin pruebas, la determinacin de impurezas y el ensayo. Los procedimientos utilizados para demostrar especificidad dependern del objetivo previsto del procedimiento analtico. No siempre es posible demostrar que un procedimiento analtico es especfico para un determinado analito (discriminacin completa). En este caso, una combinacin de dos o ms anlisis procedimientos se recomienda para lograr el nivel necesario de la discriminacin. 1.1 Identificacin:

Pruebas adecuadas de identificacin debe ser capaz de discriminar entre los compuestos de cerca estructuras relacionadas que puedan estar presentes. La discriminacin de un procedimiento puede ser confirmado por la obtencin de resultados positivos (quiz en comparacin conuna referencia conocida material) de las muestras que contienen la sustancia analizada, junto con los resultados negativos de las muestras que no contengan la sustancia analizada. Adems, la prueba de identificacinpuede ser aplicado a materiales estructuralmente similares o estrechamente relacionados con el analitopara confirmar que un resultado positivo la respuesta no se obtiene. La eleccin de estos materiales potencialmente interferentes se debe basar en el criterio cientfico slido con una consideracin de las interferencias que pudieran ocurrir. 1.2 Ensayo y prueba de impureza (s)

Por tcnicas cromatogrficas, cromatogramas representativos se deben utilizar para demostrar la especificidad y los componentes individuales deben estar debidamente etiquetados. Similar consideraciones se debe dar a las tcnicas de separacin. Separaciones crtico en la cromatografa se debe investigar a un nivel apropiado. Para

separaciones crtico, la especificidad puede ser demostrada por la resolucin de los dos componentes que eluyen cerca uno del otro. En los casos en que se utiliz un ensayo no especfico, el apoyo a otrosprocedimientos de anlisis deben ser para demostrar la especificidad global. Por ejemplo, en una valoracin que se adopte para el ensayo principio activo para la liberacin, la combinacin de la prueba y una prueba adecuada para las impurezas pueden ser utilizado. El enfoque es similar para los ensayos y pruebas de impureza. 1.2.1. La discriminacin de analitos donde las impurezas se encuentran disponibles

Para el ensayo, este debe incluir la demostracin de la discriminacin de la sustancia analizada en la presencia de impurezas y / o excipientes, en la prctica, esto se puede hacer aadiendo al puro sustancias (sustancia activa o el producto) con niveles adecuados de impurezas y / o excipientes y demostrar que el resultado del ensayo no se ve afectada por la presencia de estos materiales (en comparacin con el resultado del ensayo obtenidos en las muestras sin marcar). Para la prueba de la impureza, la discriminacin puede ser establecida por adicin de sustancias activas o productos con niveles adecuados de impurezas y la demostracin de la separacin de estos las impurezas de forma individual y / o de otros componentes de la matriz de la muestra.

1.2.2.

La discriminacin de la sustancia analizada en las impurezas no estn disponibles

Si las normas de impureza o degradacin del producto no estn disponibles, la especificidad puede ser demostrada mediante la comparacin de los resultados de las pruebas de las muestras que contienen impurezas o productos de degradacin a un segundo procedimiento bien caracterizado, por ejemplo: mtodo de la farmacopea u otro validado procedimiento analtico (procedimiento independiente). En su caso, esto debe incluir muestras almacenados bajo condiciones de estrs relevantes: la luz, el calor, la humedad, el cido / base de hidrlisis y oxidacin. Para el ensayo, los dos resultados deben ser comparados. Para las pruebas de impureza, los perfiles de impurezas debe ser comparado. Las pruebas de pureza de pico puede ser til para demostrar que el pico de la cromatografa analito no es atribuible a ms de un componente (por ejemplo, diodos, espectrometra de masas). 2. Linealidad Una relacin lineal deben ser evaluados en toda la gama (ver seccin 3) de la analtica procedimiento. Puede demostrarse directamente sobre la sustancia activa (por dilucin de un estndar solucin madre) y / o pesadas por separado de las mezclas sintticas de los componentes del producto, utilizando el procedimiento propuesto. Este ltimo aspecto puede ser estudiado durante la investigacin del rango. Linealidad debe ser evaluado por la inspeccin visual de un complot de las seales en funcin del analito concentracin o contenido. Si hay una relacin lineal, los resultados deben ser evaluados por mtodos estadsticos apropiados, por ejemplo, mediante el clculo de una lnea de regresin por el mtodo de los mnimos cuadrados. En algunos casos, para obtener la linealidad entre los ensayos y las concentraciones de la muestra, los datos de prueba tenga que ser sometido a una transformacin matemtica antes de la regresin anlisis. Los datos de la lnea de regresin en s puede ser til para proporcionar matemtica estimaciones del grado de linealidad. El coeficiente de correlacin, interseccin, pendiente de la recta de regresin y suma residual de los cuadrados debern presentarse. Una grfica de los datos deben ser incluidos. Adems, un anlisis de la desviacin de los puntos de datos reales de la lnea de regresin tambin puede ser til para la evaluacin de la linealidad.

Algunos de los procedimientos analticos, como los inmunoensayos, no demuestran linealidad despus de cualquier transformacin. En este caso, la respuesta analtica debe ser descrita por una adecuada funcin de la concentracin (cantidad) de un analito en una muestra. Para el establecimiento de la linealidad, un mnimo de cinco concentraciones se recomienda. Otro enfoques deben ser justificadas. 3. Gama Del rango especificado se deriva normalmente de los estudios de linealidad y depende de la intencin la aplicacin del procedimiento. Se establece por lo que confirma que el procedimiento analtico proporciona un grado aceptable de linealidad, exactitud y precisin cuando se aplica a las muestras que contienen cantidades de analito dentro o en los extremos del rango especificado del procedimiento analtico. Los siguientes rangos mnimos especificados deben ser considerados: Para la prueba de una sustancia activa o un producto terminado: normalmente 80 a 120 por ciento de la concentracin de ensayo; Para uniformidad de contenido, con un mnimo de 70 a 130 por ciento de la prueba concentracin, a menos que una gama ms amplia ms apropiado, en base a la naturaleza de la forma de dosificacin (por ejemplo, los inhaladores de dosis medida), se justifica; Para las pruebas de disolucin: + / -20% en el rango especificado, por ejemplo, si las especificaciones de un producto de liberacin controlada cubrir una regin de 20%, despus de 1 hora, hasta un 90%, despus de 24 horas, el rango validado sera 0-110% de la demanda de la etiqueta. Para la determinacin de una impureza: desde el nivel de informacin de un impurity1 al 120% de la especificacin, por las impurezas que se sabe inusualmente potentes o de productos txicos o inesperados efectos farmacolgicos, el lmite de deteccin / cuantificacin debe ser acorde con el nivel en el que las impurezas se debe controlar.

Nota: para la validacin de procedimientos de ensayo de impurezas lleva a cabo durante el desarrollo, puede ser necesario considerar el rango de alrededor de un sugerido (probable) lmite; si ensayo y la pureza se llevan a cabo como una sola prueba y es slo un estndar de 100% utilizados, la linealidad debe abarcar el conjunto de la informacin a nivel de la impurities1 a 120% de la especificacin de ensayo;

4. Precisin La precisin debe ser establecida a travs del rango especificado del procedimiento analtico. 4.1 ensayo 4.1.1 sustancia activa Existen varios mtodos para determinar la precisin estn disponibles: a) la aplicacin de un procedimiento analtico de un analito de pureza conocida (por ejemplo, referencia material); b) la comparacin de los resultados del procedimiento analtico propuesto con los de un segundo bien caracterizados procedimiento, la exactitud de lo que se dice y / o definido (procedimiento independiente, vase 1.2.2); c) la precisin se puede inferir una precisin, linealidad y especificidad han sido establecido. 4.1.2 Medicamento Existen varios mtodos para determinar la precisin estn disponibles: a) la aplicacin del procedimiento de anlisis de mezclas sintticas del producto componentes para el cual las cantidades conocidas de la sustancia a analizar se han aadido;

b) en los casos en que es imposible obtener muestras de todos los componentes del producto, puede ser aceptable ya sea para aadir cantidades conocidas del analito en el producto o en comparacin con los resultados obtenidos de un segundo procedimiento, bien caracterizado, la exactitud de que aparece y / o definido (procedimiento independiente, vase 1.2.2). c) la precisin se puede inferir una precisin, linealidad y especificidad han sido establecido. 4.2 Las impurezas (cuantificacin) La precisin debe ser evaluada en muestras (sustancia / el producto) enriquecida con cantidades conocidas de las impurezas. En los casos en que es imposible obtener muestras de ciertas impurezas y / o degradacin productos, se considera aceptable para comparar los resultados obtenidos por un procedimiento independiente (vase 1.2.2). El factor de respuesta del frmaco se puede utilizar. Debe quedar claro cmo las impurezas individuales o totales se han de determinar, por ejemplo, por ciento en peso / peso o rea, en todos los casos con respecto a la sustancia analizada importante. 4.3 Los datos recomendados La precisin debe ser evaluada mediante un mnimo de 9 determinaciones durante un mnimo de tres niveles de concentracin que cubre el rango especificado (por ejemplo, las concentraciones de 3 / 3 repeticiones cada una de el procedimiento analtico total). La precisin debe ser reportado como porcentaje de recuperacin por el ensayo de la cantidad conocida aadido de analito en la muestra, o como la diferencia entre la media y el valor real aceptado junto con los intervalos de confianza. 5. Precisin Validacin de las pruebas de ensayo y para la determinacin cuantitativa de las impurezas incluye un investigacin de precisin. 5.1 Repetitividad De no ser evaluado mediante: i. un mnimo de 9 determinaciones que cubre el rango especificado para el procedimiento (por ejemplo, 3 concentraciones / 3 repeticiones cada una), ii. un mnimo de 6 determinaciones al 100% de la concentracin de ensayo. 5.2 precisin intermedia La medida en que se debe establecer la precisin intermedia depende de la circunstancia en que el procedimiento est destinado a ser utilizado. El solicitante debe establecer los efectos de los eventos aleatorios en la precisin del procedimiento analtico. Tpico variaciones que se estudiar incluir los das, los analistas, equipos, etc, no se considera necesario. Para estudiar estos efectos por separado. El uso de un diseo experimental (matriz) se anima. 5.3 Reproducibilidad La reproducibilidad se evalu por medio de un ensayo inter-laboratorio. Reproducibilidad debe ser considerado en el caso de la estandarizacin de un procedimiento analtico, por ejemplo, para la inclusin de los procedimientos en las farmacopeas. Estos datos no son parte del expediente de autorizacin de comercializacin. 5.4 Los datos recomendados La desviacin estndar, la desviacin estndar relativa (coeficiente de variacin) y el intervalo de confianza deben ser reportados para cada tipo de precisin investigado.

6. Lmite de deteccin Varios mtodos para determinar el lmite de deteccin son posibles, dependiendo de si el es un procedimiento no-instrumental o instrumental. Enfoques distintos de los enumerados a continuacin puede ser aceptable. 6.1 Con base en la evaluacin visual Evaluacin visual se puede utilizar para no instrumental mtodos, pero tambin puede ser usado con mtodos instrumentales. El lmite de deteccin se determina mediante el anlisis de muestras con concentraciones conocidas de analito y al establecer el nivel mnimo al que se puede detectar con seguridad la sustancia analizada. 6.2 Sobre la base de la seal-ruido Este mtodo slo puede aplicarse a los procedimientos analticos que exhiben ruido de lnea base. Determinacin de la relacin seal-ruido se realiza mediante la comparacin de las seales medidas de muestras con concentraciones conocidas bajo de analito con los de las muestras en blanco y establecimiento de la concentracin mnima a la que se puede detectar con seguridad la sustancia analizada. A relacin seal-ruido entre 3 o 2:1 se considera aceptable para la estimacin del lmite de deteccin. 6.3 Sobre la base de la desviacin estndar de la respuesta y la pendiente El lmite de deteccin (DL) se puede expresar como:

Donde = la desviacin estndar de la respuesta y S = la pendiente de la curva de calibracin La pendiente S se puede estimar a partir de la curva de calibracin del analito. La estimacin de puede llevarse a cabo en una variedad de maneras, por ejemplo: 6.3.1 Sobre la base de la desviacin estndar del blanco La medicin de la magnitud de la respuesta de fondo de anlisis se lleva a cabo mediante el anlisis de un nmero apropiado de muestras en blanco y el clculo de la desviacin estndar de estos respuestas. 6.3.2 Sobre la base de la curva de calibracin Una curva de calibracin especfica debe ser estudiado utilizando muestras con un analito en el gama de DL. La desviacin estndar residual de una lnea de regresin o la desviacin estndar de intersecciones de las lneas de regresin puede utilizarse como la desviacin estndar. 6.4 Los datos recomendados El lmite de deteccin y el mtodo utilizado para determinar el lmite de deteccin debe ser presentado. Si DL se determina con base en la evaluacin visual o sobre la base de la relacin seal-ruido, la presentacin de los cromatogramas correspondientes se considera aceptable para la justificacin. En los casos en que un valor estimado para el lmite de deteccin se obtiene por clculo o extrapolacin, esta estimacin puede posteriormente ser validado por el anlisis independiente de un nmero adecuado de muestras conocidas de estar cerca o preparados en el lmite de deteccin. 7. Cuantificacin LMITE Varios mtodos para determinar el lmite de cuantificacin son posibles, dependiendo de si el procedimiento es un no-instrumental o instrumental. Enfoques distintos de los enumerados a continuacin puede ser aceptable.

7.1 Con base en la evaluacin visual Evaluacin visual se puede utilizar para no instrumental mtodos, pero tambin puede ser usado con mtodos instrumentales. El lmite de cuantificacin es generalmente determinada por el anlisis de las muestras con conocidos concentraciones de analito y por establecer el nivel mnimo en el cual el analito puede ser cuantificarse con exactitud y precisin adecuadas. 7.2 basado en el enfoque de seal a ruido Este mtodo slo puede aplicarse a los procedimientos analticos que exhiben ruido de lnea base. Determinacin de la relacin seal-ruido se realiza mediante la comparacin de las seales medidas de muestras con concentraciones conocidas bajo de analito con los de las muestras en blanco y establecimiento de la concentracin mnima a la que puede ser el analito cuantificarse. Una tpica relacin seal-ruido es de 10:1. 7.3 Sobre la base de la desviacin estndar de la respuesta y la pendiente El lmite de cuantificacin (QL) se puede expresar como:

Donde = la desviacin estndar de la respuesta y S = la pendiente de la curva de calibracin La pendiente S se puede estimar a partir de la curva de calibracin del analito. La estimacin de puede llevarse a cabo en una variedad de maneras, incluyendo: 7.3.1 Sobre la base de la desviacin tpica del blanco de La medicin de la magnitud de la respuesta de fondo de anlisis se lleva a cabo mediante el anlisis de un nmero apropiado de muestras en blanco y el clculo de la desviacin estndar de estos respuestas. 7.3.2 Sobre la base de la curva de calibracin Una curva de calibracin especficos deben ser estudiados con muestras, que contiene un analito en el rango de QL. La desviacin estndar residual de una lnea de regresin o la desviacin estndar de intersecciones de las lneas de regresin puede utilizarse como la desviacin estndar. 7.4 Los datos recomendados El lmite de cuantificacin y el mtodo utilizado para determinar el lmite de cuantificacin debe ser presentado. El lmite debe ser posteriormente validada por el anlisis de un nmero adecuado de muestras se sabe que cerca o preparados en el lmite de cuantificacin. 8. Solidez La evaluacin de la solidez debe ser considerada durante la fase de desarrollo y depende en el tipo de procedimiento en estudio. Se debe demostrar la fiabilidad de un anlisis con respecto para deliberar las variaciones en los parmetros del mtodo. Si las mediciones son susceptibles a las variaciones en las condiciones de anlisis, el anlisis condiciones deben ser adecuadamente controlados o una declaracin de precaucin deben ser incluidos en el procedimiento. Una de las consecuencias de la evaluacin de la solidez que debe ser una serie de parmetros de idoneidad del sistema (por ejemplo, la resolucin de la prueba) se establece para asegurar que la validez de el procedimiento analtico se mantiene si se utiliza.

Ejemplos de variaciones tpicas son: Estabilidad de las soluciones analticas, Extraccin de tiempo

En el caso de la cromatografa lquida, ejemplos de las variaciones tpicas son influencia de las variaciones de pH en una fase mvil, influencia de las variaciones en la composicin de la fase mvil, columnas diferentes (diferentes lotes y / o proveedores), temperatura, caudal.

En el caso de cromatografa de gases, los ejemplos de las variaciones tpicas son columnas diferentes (diferentes lotes y / o proveedores), Temperatura, Caudal.

9. Sistema de prueba de conveniencia Las pruebas de aptitud del sistema es una parte integral de muchos procedimientos analticos. Las pruebas se basan en el concepto de que el equipo, la electrnica, las operaciones de anlisis y muestras que se analizado constituyen un sistema integral que puede ser evaluado como tal. Sistema de pruebas de aptitud parmetros que se establezcan para un procedimiento particular depende del tipo de procedimiento que se validados. Ver las farmacopeas para obtener informacin adicional.

http://www.ema.europa.eu/docs/en_GB/document_library/Scientific_guideline/2009/09/WC500002662.pdf