Ing.

Estuardo Monroy Bentez

Guatemala, C. A. ESTIMACION DE LA INCERTIDUMBRE DE LA MEDICION DEL METODO PARA DETERMINAR AZUCARES POR CROMATOGRAFIA LIQUIDA DE ALTA EFICIENCIA (HPLC) INCERTIDUMBRE: La Gua ISO GUM para la estimacin de la incertidumbre, define los conceptos siguientes: Error de Medicin: Resultado de una medicin menos el valor verdadero del mensurando Incertidumbre de la Medicin: Magnitud asociada con el resultado de medicin que caracteriza la dispersin de los valores que razonablemente podran ser asignados al mensurando. En pocas palabras: El nmero detrs del Incertidumbre estndar: Incertidumbre de un resultado de medicin expresada como desviacin estndar Incertidumbre estndar combinada: Incertidumbre estndar como resultado de una estimacin mediante la propagacin de errores con base en las incertidumbres individuales. Incertidumbre expandida: Mltiplo de una incertidumbre estndar que se usa como un intervalo de confianza. Ejemplo de expresin de un resultado con su incertidumbre: Concentracin de Sacarosa en Jugo Primario:

Sacarosa= 0.2809 grs./100ml 0.02 grs./100ml (95%)

Resultado de la Medicin

Incertidumbre

Nivel de Confianza

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Guatemala, C. A. Etapas para la estimacin de la incertidumbre

1. Especificar/definir la Magnitud de medicin

2. Identificar fuentes De IDM

3. Cuantificar las fuentes De incertidumbre

4. Transformar las fuentes De incertidumbre en Incertidumbres estndar 5. Clculo de la Incertidumbre combinada

Si
Re-evaluacin de Componentes Significativos Re-evaluacin De componentes Relevantes?

No Final

1. Definir El Mensurando El mensurando en esta investigacin se enfocara en la cuantificacin de la Sacarosa encontrada en la solucin. (Aplica para Glucosa, o Fructosa). 2. Definir El Modelo Matemtico Incertidumbre debida al modelo matemtico de la regresin lineal Grs/100 ml = (Am/Ap) * Cp * Pp

Nota: Este resultado puede convertirse en % peso o sea Pureza, utilizndose los pesos de la solucin y la dilucin respectiva.

Donde: Am= Ap = Cp= Pp=

rea obtenida de la solucin de la muestra. (Ej. 781860) rea obtenida de la solucin patrn del Azcar respectivo Por un valor tpico como 782170. Concentracin del patrn en Grs. /100 ml del Azcar Respectivo, por ejemplo un valor como 0.2503. Pureza del patrn (%/100)., para casos locales. (Ejemplo 99.5%)

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Guatemala, C. A. 3. Identificar Fuentes de Incertidumbre y sus tipos

a. Incertidumbre Tipo A Esta corresponde a la incertidumbre obtenida por correccin sistemtica o estadstica (desviacin estndar etc.) b. Incertidumbre Tipo B Certificados que deben asumir un determinado tipo de distribucin Formulas de Clculo para conversiones de Incertidumbres: Incertidumbre expandida (certificados)

Incertidumbre Rectangular

Incertidumbre Triangular

IDENTIFICACIONES DE FUENTES E INFORMACION: a) la incertidumbre del material volumtrico, (Pipeta de 100 ml) La cristalera debe ser tipo A, y generalmente solo se cuenta con los datos de tolerancia, por ejemplo 0.02 ml.(Incertidumbre tipo B) b) Incertidumbre asociada a la columna cromatogrfica Normalmente reportada por el proveedor, en su certificado de Performance, tal como Repetibilidad, por ejemplo valores como 0.0005, etc. (Incertidumbre tipo A) c) La incertidumbre del material de referencia o patrn utilizado El certificado de calibracin del material de referencia (reactivo patrn), contiene la incertidumbre. (Puede clasificar como Incertidumbre tipo expandida o tipo B si es presentada como pureza u otra informacin de la calidad) /pureza 99.5% o nivel de error 0.5%. d) La incertidumbre de la balanza analtica digital El certificado de calibracin debe contener la informacin de Incertidumbre a tomar, o a si no se cuenta con ello, debe utilizarse datos de repetibilidad, resolucin, linealidad, etc., tales como: Calibracin para el intervalo de trabajo de 0 500 mg: Incertidumbre = 0,0001 mg (Incertidumbre tipo A) Repetibilidad = 0,000025 mg (Incertidumbre tipo A) Resolucin = 0,00001 mg (Incertidumbre tipo B)

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Guatemala, C. A. e) Incertidumbre por la dosificacin en el inyector: El certificado de calibracin debe contener la informacin de Incertidumbre, como por ejemplo 0.000001ml expansin k=2. f) Incertidumbre asociada al Analista o varios analistas Repetibilidad y/o Reproducibilidad (Incertidumbre tipo A necesaria de calcular, a travs de ensayos estadsticos con muestras y analistas). Un ejemplo de desviacin estndar es: 0.0008 4. Cuantificacion y conversion/reduccion a Incertidumbre STD: 4.1 Balanza El certificado de calibracin de la balanza indica que la incertidumbre en el rango de 0-500 mg es + 0,0001 mg., con una expansin de k=2 Por lo tanto la incertidumbre estndar es: (0.0001/2)= 0.00005 4.2 Repetibilidad del Analista: Se obtiene de realizar el ensayo por sextuplicado de una misma muestra, el mismo operador en un lapso de tiempo relativamente corto, y se calcula la desviacin estndar, igual a u(rep.): 0,0008 4.3 Pipeta de 100ml Utilizando el valor de tolerancia (0.02), y distribucin triangular Incertidumbre = 0.02/raz(6)=0.008161 4.4 Material de Referencia Con dato de error de 0.5% y para un peso de 0.2809 grs., da un valor error de 0.01404 grs., tomado como tipo B rectangular Incertidumbre = 0.014045/raz(3)=0.008108 4.5 Repetibilidad de la columna Caso de ejemplo, un valor de 0.0005 expresado como incertidumbre expandida con k=2, la incertidumbre estndar es: 0.00025 4.6 Incertidumbre del inyector-dosificador Con incertidumbre de 0.000001ml y expansin k=2, la incertidumbre estndar es: (0.000001/2)= 0.0000005 5. Calcular Incertidubre combinada Esta se obtiene combinando apropiadamente las incertidumbres estndares de los estimados de las magnitudes de entrada que puede ser tipo A y B.

U(x) =

(0.00005)2 + (0.0008)2 + (0.00816)2 + (0.008108)2 + (.00025)2 + (0.0000005)2

El resultado con incertidumbre de una concentracin de Sacarosa es: 0.011 Incertidumbre expandida con k=2, entonces 0.011 * 2= 0.022 Siendo la expresin final: 0.2809 grs. /100ml 0.022 grs. /100ml (95%)

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Guatemala, C. A. ANALISIS DE CAUSA-EFECTO:

INCERTIDUMBRE
Material Referencia Condiciones ambientales Material Volumetrico

Certificado de analisis

Calibracion Termometros Temperatura

Temp

Calibracion Pipetas

Concentracion Sacarosa

Inyector

Repetibilidad Linealidad Linealidad Columna Repetibilidad Calibracion

Linealidad

HPLC

Repetibilidad Analista

BALANZA

Balanza analitica Calibracion

Planilla de factores y su evaluacion:

Factor/Causa Balanza Analista Pipeta 100 ml Material Ref. Rep. Columna Inyector Total: Varianza 0.0000000025 0.000000664 0.00006658 0.00006573 0.0000000625 0.00000000000025 0.000133039000 % Efecto 0.00 0.50 50.05 49.41 0.04 0.00 100.00 Consideraciones No considerable No considerable CONSIDERABLE CONSIDERABLE No considerable No considerable

Conclusin de Efectos: Las Dos (2) principales causas de incertidumbre en el ensayo de HPLC evaluado, son el efecto de la Pipeta de 100 ml y el Material de referencia utilizado para la calibracin.
Ing. Estuardo Monroy Consultorias Profesionales Ingmonroy1@yahoo.com