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PITANGUEIRA
Eugeniae folium

Eugenia uniflora L. MYRTACEAE A droga vegetal constituda pelas folhas secas contendo, no mnimo, 4% de taninos, 2% de flavonides totais, expressos em quercetina, e 0,5% de leos essenciais. O leo essencial constitudo de, no mnimo, 30% de curzerenos (cis e trans).

SINONMIA CIENTFICA

Stenocalyx micheli (Lam.) Berg e Eugenia micheli Lam.

NOMES POPULARES

Pitanga.

CARACTERES ORGANOLPTICOS

A droga apresenta odor caracterstico e sabor levemente adstringente.

DESCRIO MACROSCPICA

As folhas so ovalado-lanceoladas, de pice acuminado e base aguda ou obtusa, com margem inteira de 2,0 cm a 6,0 cm de comprimento e 1,0 cm a 2,5 cm de largura, glabras, membranosas, com pontos translcidos mais visveis na face abaxial, face adaxial verde-escura, brilhante, face abaxial pouco mais clara, opaca. As nervuras secundrias, tercirias ou mais terminam em uma nervura prxima ao bordo da lmina.

DESCRIO MICROSCPICA

A folha, em seco transversal, exibe epiderme uniestratificada com cutcula fina e suas clulas, em vista frontal, apresentam paredes anticlinais de contornos sinuosos, com aparncia semelhante nas faces adaxial e abaxial. A lmina hipoestomtica, com estmatos anomocticos, com quatro a sete clulas adjacentes. O mesofilo tem estrutura dorsiventral, com uma camada de parnquima
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palidico e vrias camadas de parnquima esponjoso de clulas desenvolvidas, com espaos intercelulares conspcuos. Cavidades secretoras do tipo esquizolisgenas, com gotas de leo, apresentando dimetro mdio de 60 m, encontram-se distribudas em ambos os parnquimas, bem como drusas de oxalato de clcio e cristais rmbicos. Na regio da nervura principal, ocorre colnquima laminar, voltado para ambas as faces da folha, contendo drusas de oxalato de clcio. O sistema vascular organizado em disposio bicolateral, envolvido por uma bainha delgada de fibras. As cavidades secretoras podem tambm ocorrer nesta regio. O pecolo tem contorno levemente cncavo-convexo, apresentando na face adaxial duas expanses aliformes. A epiderme uniestratificada, seguida de 2 ou 3 camadas de colnquima laminar contendo drusas, interrompido por cavidades esquizolisgenas. O parnquima fundamental tambm apresenta drusas, cristais rmbicos e as cavidades secretoras, encontradas neste tecido, medem cerca de 70 m de dimetro. O sistema vascular bicolateral fechado e semelhante ao da nervura principal.

DESCRIO MICROSCPICA DO P

O p atende a todas as exigncias estabelecidas para a espcie, menos os caracteres macroscpicos. So caractersticas: clulas epidrmicas da lmina foliar, em vista frontal, semelhantes nas duas faces, apresentando paredes anticlinais de contornos sinuosos; estmatos anomocticos, com quatro a sete clulas adjacentes, ocorrendo apenas na face abaxial (lminas hipoestomticas); pores de parnquima ou colnquima com cavidades secretoras; gotas de leo.

IDENTIFICAO

A. Proceder conforme descrito em Cromatografia em camada delgada (V.2.17.1), utilizando cromatoplaca de slica-gel GF 254 , com espessura de 0,25 mm, como suporte, e mistura de acetato de etila, cido frmico e gua (90:5:5), como fase mvel. Aplicar, separadamente, placa, em forma de ponto, 10 l de cada uma das solues, recentemente preparadas, descritas a seguir. Soluo (1): submeter cerca de 10 g da droga seca pulverizada decoco com 100 ml de gua, durante 20 minutos, em temperatura entre 80 C e 90 C. Esfriar temperatura ambiente e filtrar. Transferir o filtrado para funil de separao e extrair com quatro pores de 25 ml de acetato de etila. Reunir as fraes de acetato de etila e lavar duas vezes com 50 ml de gua. Desprezar a fase aquosa. Evaporar a fase orgnica at secura em banho- maria. Ressuspender o resduo em 1 ml de metanol.

Soluo (2): dissolver 10 mg de galocatequina em 2 ml de metanol.

Soluo (3): dissolver 10 mg de 4-O- metilgalocatequina em 2 ml de metanol.

Desenvolver o cromatograma. Remover a placa, deixar secar ao ar. Nebulizar a placa com soluo de cloreto frrico a 2% (p/V) em metanol. O cromatograma obtido com a soluo (1) apresenta manchas nas mesmas alturas que as obtidas nos cromatogramas com a soluo (2) e com a soluo (3) (Rf de aproximadamente 0,85 e 0,92, respectivamente). A mancha correspondente
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galocatequina desenvolve colorao cinza-azulada e a correspondente 4-O- metilgalocatequina desenvolve colorao azulada.

B. Aquecer, sob refluxo, cerca de 3 gramas da droga pulverizada com 60 ml de gua durante 15 minutos. Esfriar e filtrar. A 2 ml do extrato adicionar 2 gotas de cido clordrico SR e gotejar gelatina SR at precipitao. O aparecimento de um precipitado ntido indica reao positiva para taninos totais.

C. A 2 ml do extrato obtido no teste B Identificao adicionar 10 ml de gua e 2 a 4 gotas de soluo de cloreto frrico a 1% (p/V) em etanol. O desenvolvimento de colorao cinza-escura, indica positivo para taninos hidrolisados e condensados.

D. A 2 ml do extrato obtido no teste B Identificao adicionar 0,5 ml de vanilina a 1% (p/V) em metanol e 1 ml de cido clordrico. O desenvolvimento de colorao vermelha indica a presena de taninos condensados.

E. A 5 ml do extrato obtido no teste B de Identificao adicionar 10 ml de cido actico 2 M e 5 ml de acetato de chumbo (II) SR. O aparecimento de precipitado esbranquiado indica presena de taninos.

ENSAIOS DE PUREZA

Material estranho (V.4.2.2). No mximo 2%.

gua (V.4.2.3). No mximo 13%.

Cinzas totais (V.4.2.4). No mximo 12%.

DOSEAMENTO

Taninos totais

Soluo me: pesar, exatamente, cerca de 0,75 g da droga moda, transferir para balo de fundo redondo e adicionar 150 ml de gua. Aquecer em banho- maria, sob refluxo, durante 30 minutos, em temperatura entre 80 C e 90 C. Resfriar em gua corrente, transferir a mistura para balo volumtrico de 250 ml e completar o volume com gua. Deixar decantar o sedimento e filtrar, desprezando os primeiros 50 ml do filtrado.

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Polifenis totais: transferir 5 ml da soluo me para balo volumtrico de 25 ml e completar o volume com gua. A 5 ml desta soluo, adicionar 2 ml de reagente de Folin- Denis e diluir para 50 ml com carbonato de sdio SR. Medir a absorvncia da soluo (A1 ) em 715 nm (V.2.14), exatamente 3 minutos aps a adio do ltimo reagente, utilizando gua para ajuste do zero.

Polifenis no adsorvidos pelo p-de-pele: adicionar 0,2 g de p-de-pele a 20 ml da soluo me e agitar, mecanicamente, durante 60 minutos. Filtrar. Diluir 5 ml desta soluo para 25 ml com gua. A 5 ml desta soluo, adicionar 2 ml de reagente de Folin-Denis e diluir para 50 ml com carbonato de sdio SR. Medir a absorvncia da soluo (A2 ) em 715 nm (V.2.14), exatamente 3 minutos aps a adio do ltimo reagente, utilizando gua para ajuste do zero.

Soluo referncia: dissolver 50 mg de pirogalol em gua e diluir para 100 ml com o mesmo solvente. Diluir 5 ml desta soluo para 100 ml com gua. A 5 ml desta soluo, adicionar 2 ml de reagente de Folin- Denis e diluir para 50 ml com carbonato de sdio SR. Medir a absorvnc ia da soluo (A3 ) em 715 nm (V.2.14), exatamente 3 minutos aps a adio do ltimo reagente e dentro de 15 minutos contados da dissoluo do pirogalol, utilizando gua para ajuste do zero. Calcular o teor de taninos totais pela expresso:

TT =
em que

13,12 ( A1 A2 ) A3 m

TT = taninos totais; A1 = absorvncia medida para polifenis totais; A2 = absorvncia medida para polifenis no adsorvidos; A3 = absorvncia medida para a substncia referncia; m = massa da droga vegetal considerando a determinao de gua.

Flavonides totais

Soluo me: pesar, exatamente, cerca de 0,4 g da droga pulverizada e transferir para balo de fundo redondo de 100 ml. Adicionar 1 ml de soluo de metenamina a 0,5% (p/V) em gua, 2 ml de cido clordrico e 20 ml de acetona. Aquecer em banho- maria, sob refluxo, durante 30 minutos. Filtrar a mistura em algodo para balo volumtrico de 100 ml. Retornar o resduo insolvel e o algodo ao mesmo balo de fundo redondo e adicionar 20 ml de acetona. Aquecer ebulio, sob refluxo, durante 10 minutos, e filtrar em algodo para o mesmo balo volumtrico de 100 ml. Repetir esta operao mais uma vez. Resfriar temperatura ambiente e completar o volume com acetona. Transferir 20 ml desta soluo para funil de separao, 20 ml de gua e extrair com uma poro de 15 ml e trs pores de 10 ml de acetato de etila. Combinar os extratos em funil de separao e lavar com duas pores de 50 ml de gua. Transferir a fase de acetato de etila para balo volumtrico de 50 ml e completar o volume com acetato de etila.

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Soluo amostra: transferir 10 ml da soluo me para balo volumtrico de 25 ml, adicionar 1 ml de soluo de cloreto de alumnio a 2% (p/V) em metanol e completar o volume com soluo de cido actico a 5% (V/V) em metanol.

Soluo branco: transferir 10 ml da soluo me para balo volumtrico de 25 ml e completar o volume com soluo de cido actico a 5% (V/V) em metanol.

Medir a absorvncia da soluo amostra em 425 nm (V.2.14) 30 minutos aps seu preparo, utilizando a soluo branco para ajuste do zero. Calcular o teor de flavonides totais segundo a expresso:

Q=
em que A = absorvncia medida; m = massa da droga (g); Pd = determinao de gua (%).

A 62 500 500 m (100 Pd )

leos essenciais

Proceder conforme descrito em Determinao de leos essenciais (V.4.2.6). Utilizar balo de 1 000 ml contendo 500 ml de gua como lquido de destilao e 0,5 ml de xilol. Utilizar planta seca rasurada e no contundida. Proceder imediatamente determinao do leo essencial, a partir de 100 g da droga rasurada. Destilar por 4 horas.

Curzerenos

Proceder conforme descrito em Cromatografia a gs (V.2.17.5). Utilizar cromatgrafo provido de detector de ionizao de chamas, utilizando mistura de nitrognio, ar sinttico e hidrognio (1:1:10) como gases auxiliares chama do detector; coluna capilar de 30 m de comprimento e 0,25 mm de dimetro interno, preenchida com polidifenildimetilsiloxano, com espessura do filme de 0,25 m; temperatura da coluna de 60 C a 300 C, a 3 C por minuto (total: 80 minutos), temperatura do injetor a 220 C e temperatura do detector a 250 C; utilizar hlio a uma presso de 80 kPa como gs de arraste; fluxo do gs de arraste de 1 ml/minuto.

Soluo amostra: diluir o leo essencial em ter etlico na proporo de 2:100. Procedimento: injetar 1 l da soluo amostra no cromatgrafo a gs, utilizando diviso de fluxo de 1:50. Os ismeros cis e trans apresentam, respectivamente, tempos de reteno linear (ndice de Kvats) de 1 486 e 1 489. As concentraes relativas so obtidas por integrao manual ou eletrnica.
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Calcular o ndice de Kvats (IK), segundo a expresso:

IK = 100 n +
em que

100 (trx trz ) ( trz +1 trz )

n = nmero de tomos de carbono do alcano de menor peso molecular; trx = tempo de reteno do composto x (intermedirio a trz e trz+1 ); trz = tempo de reteno do alcano com n carbonos; trz+1 = tempo de reteno do alcano com n +1 carbonos.

EMBALAGEM E ARMAZENAMENTO

Em recipientes bem- fechados, ao abrigo da luz e do calor.

XII.2. REAGENTES E SOLUES REAGENTES Carbonato de sdio SR Preparao Dissolver 14,06 g de carbonato de sdio em 100 ml de gua. Gelatina SR Preparao Dissolver 2,5 g de gelatina em 100 ml de gua quente. Utilizar a soluo aps o resfriamento em temperatura ambiente. Reagente de Folin-Denis Preparao A 75 ml de gua adicionar 10 g de tungstato de sdio, 2 g de cido fosfomolbdico e 5 ml de cido fosfrico. Manter a mistura em refluxo por 2 horas, resfriar e diluir a 100 ml com gua. A soluo apresenta colorao esverdeada.

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LEGENDA Figura 1. Eugenia uniflora L. - A. esquema do aspecto geral da folha; B. aspecto da nervao foliar prximo ao bordo; C. face adaxial da epiderme da lmina foliar, em vista frontal; D. face abaxial da epiderme da lmina foliar, em vista frontal; E. esquema do aspecto geral da folha, em seco transversal; cs. cavidade esquizolisgena; F. detalhe de uma poro da lmina foliar, em seco transversal, segundo indicado em E; G. esquema do aspecto geral do pecolo, em seco transversal; H. detalhe de uma poro do pecolo, em seco transversal, conforme indicado em G. As escalas correspondem: 1 (A) 2 (E e G) 3 (C, D, F e H) 4 (B).

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