246

QUEBRA-PEDRA
Phyllanthus niruri herbae

Phyllanthus niruri L. EUPHORBIACEAE A droga vegetal constituda pelas folhas e ramos secos de Phyllanthus niruri e suas subespcies, Phyllanthus niruri ssp. niruri L. e Phyllanthus niruri ssp. lathyroides (Kunth) G.L. Webster, contendo, no mnimo, 6,8% de taninos totais e 0,17% de cido glico.

SINONMIA VULGAR

Erva-pombinha, arrebenta-pedra, falso-quebra-pedra.

CARACTERES ORGANOLPTICOS

Droga inodora; sabor amargo no incio da mastigao, tornando-se suave posteriormente.

DESCRIO MACROSCPICA

Planta herbcea, glabra, com at 80 cm de altura, caules simples ou ramificados, os principais delgados e sem folhas, com ramos ou rmulos laterais filiformes, estes portando folhas. Folhas alternas dsticas, simples, membranceas, glabras, oblongo-elpticas, de pice atenuado, s vezes mucronado e base assimtrica, margem lisa; lminas discolores, face adaxial de cor verde-oliva e face abaxial verde-plida a cinza-plida. As folhas, quando observadas em conjunto, tm o aspecto de folhas compostas de pequenas leguminosas. Lminas com 0,5 cm a 1,4 cm de comprimento e 0,3 cm a 0,6 cm de largura. Nervuras visveis, no proeminentes, com exceo da nervura principal na face abaxial. Venao broquiddroma. Pecolo de 0,05 cm a 0,1 cm de comprimento. Estpula interpeciolar triangular-lanceolada, de 0,1 cm a 0,2 cm de comprimento, com pice longo e estreitamente agudo a acicular, de base inteira e margem lisa. Flores femininas, com at 0,4 cm de dimetro, isoladas e axilares nos ns apicais, com cinco tpalas elpticas e disco inteiro, carnoso; ovrio tricarpelar, trilocular, cada lculo bisprmico; trs estiletes, bfidos, com estigmas globosos; pedicelo com 0,1 cm a 0,4 cm de comprimento. Flores masculinas, com at 0,3 cm de dimetro, em fascculos de uma a duas flores, dispostas nos ns basais, com cinco tpalas largo-ovaladas, disco pentalobado, lobos carnosos e papilosos, e trs estames com filetes conatos na base; pedicelos com cerca de 0,2 cm de comprimento. Frutos esquizocrpicos, do tipo tricoca, depresso-globosos, expostos para a regio abaxial dos ramos, separando-se em carpdios (cocas); exocarpo verde-oliva, membranceo e endocarpo verrucoso, com 0,1 cm a 0,25 cm de dimetro; duas sementes por lculo, triangulares, com as duas faces ventrais retas e a face dorsal arredondada, verrucosa, verrugas proeminentes, com pice agudo a arredondado; pedicelos cilndricos, com cerca de 0,4 cm a 0,5 cm de comprimento na maturao; clice persistente, membranceo, desenvolvido, atingindo 2/3 da altura do fruto. As caractersticas macroscpicas das duas espcies, Phyllanthus niruri e
F. BRAS. IV, 2003

Phyllanthus tenellus, so determinantes para distingui- las, uma vez que so muito similares quanto s caractersticas anatmicas para alguns rgos vegetativos.

DESCRIO MICROSCPICA

Em seco transversal, o caule em desenvolvimento secundrio exibe epiderme uniestratificada, com estmatos. Subepidermicamente encontram-se uma ou mais camadas de clulas colenquimticas com espessamento angular, interrompidas somente nas regies das cmaras subestomticas. Clornquima formado por duas a quatro camadas de clulas isodiamtricas, com espaos intercelulares evidentes ou no e com amido. Mais internamente, ocorrem uma ou mais camadas de parnquima cortical, cujas clulas apresentam maior eixo no sentido periclinal. O floema constitudo externamente por agrupamentos de fibras de paredes muito espessas e lume reduzido. Drusas de oxalato de clcio presentes no clornquima, parnquima cortical, parnquima medular e em maior abundncia no floema, sempre em clulas de maior tamanho do que as demais, abrangendo quase todo o volume da clula. Elementos de vaso, com disposio radial, alternam-se com uma ou mais fileiras de fibras xilemticas e clulas parenquimticas esclerificadas. Parnquima medular constitudo por clulas isodiamtricas, de grande volume, com grandes espaos intercelulares. Em caules de maior dimetro, pode ocorrer periderme, seguida de duas a trs camadas clorenquimticas, com grande quantidade de amido. O parnquima cortical mantm as mesmas caractersticas encontradas nos caules mais jovens. O floema apresenta pequena quantidade de amido, no se observando diferenas quanto ao seu desenvolvimento, comparando-se caules jovens e mais desenvolvidos. O maior desenvolvimento do xilema, comparado ao dos ramos mais jovens, muito evidente, com conseqente reduo da rea ocupada pelo parnquima medular. Nos raios parenquimticos, observa-se a presena de amido e de compostos fenlicos. A folha geralmente hipoestomtica. Raramente so encontrados estmatos tambm na face adaxial, onde ocorrem sobre as nervuras de menor porte. Os estmatos so do tipo paractico e, menos freqentemente, anomoctico. Em vista frontal, as clulas da epiderme da face adaxial mostram contornos irregulares e paredes onduladas, podendo a ondulao ser mais expressiva nessa face do que na face abaxial. As ceras epicuticulares apresentam granulaes. A cutcula fina, tornando-se mais espessa na nervura principal. A epiderme uniestratificada em ambas as faces, possui clulas fundamentais achatadas e algumas papilosas. As clulas fundamentais da face adaxial so de maiores dimenses do que as da face abaxial. Ocorrem cristais nesta camada celular. A simetria do mesofilo dorsiventral. O parnquima palidico uniestratificado, ocupando cerca de 2/3 da espessura do mesofilo, apresentando idioblastos cristalferos do tipo drusas, em sua maioria. Cristais pequenos e de diferentes formas so comuns e raramente encontram-se cristais rombodricos. O parnquima esponjoso constitudo por duas a trs camadas, apresentando clulas de contornos irregulares, cujo maior comprimento corresponde ao sentido periclinal. Cristais pequenos agregados e/ou isolados so comuns. Em seco paradrmica, evidencia-se o carter braciforme dessas clulas. Na nervura principal, o parnquima palidico pode distribuir-se continuamente ou ser interrompido por pequeno nmero de clulas clorenquimticas ou ainda, por clulas colenquimticas isodiamtricas. Nesta regio, junto a epiderme abaxial, ocorre uma camada de colnquima angular, de paredes pouco espessas, podendo conter cloroplastos, seguido de tecido clorenquimtico de clulas isodiamtricas, com poucos cloroplastos. O sistema vascular do tipo colateral e formado por dois a seis raios. O floema possui pequeno nmero de clulas. O padro de venao broquiddromo.

F. BRAS. IV, 2003

DESCRIO MICROSCPICA DAS IMPUREZAS

A raiz em crescimento secundrio apresenta periderme formada por trs a quatro camadas de clulas suberificadas, felognio e feloderme. Abaixo deste tecido encontra-se o parnquima cortical, formado por trs a seis estratos celulares. O floema apresenta fibras dispostas perifericamente. O xilema apresenta duas a quatro fileiras de fibras dispostas radialmente. Os raios parenquimticos so ricos em amido. A regio medular freqentemente ocupada pelo tecido xilemtico. Cristais so comuns em todos os tecidos, sendo mais abundantes na regio cortical e no parnquima medular; comumente so pequenos, isolados e/ou agregados, ocorrendo sob diferentes formas, geralmente drusas.

DESCRIO MICROSCPICA DO P

O p atende a todas as exigncias estabelecidas para a espcie, menos os caracteres macroscpicos. So caractersticos: presena de frutos depresso-globosos, carpdios (cocas) isolados e sementes como descritos; flores como descritas; cristais de oxalato de clcio do tipo drusas; fragmentos de tecido epidrmico como descritos; fragmentos de tecidos foliares e caulinares como descritos; fragmentos de tecido vascular com elementos de vaso apresentando espessamentos anelados, espiralados ou pontoados, e fibras.

IDENTIFICAO

Proceder conforme descrito em Cromatografia em camada delgada (V.2.17.1), utilizando slicagel G, com espessura de 0,25 mm, como suporte, e mistura de acetato de etila, cido frmico e gua (90:5:5), como fase mvel. Aplicar, separadamente, em forma de banda, 10 l da soluo (1) e 5 l da soluo (2), recentemente preparadas, descritas a seguir.

Soluo (1): transferir cerca de 0,75 g da droga moda para balo de fundo redondo, adicionar 10 ml de gua e aquecer sob refluxo durante 15 minutos em manta aquecedora. Resfriar temperatura ambiente e filtrar sob presso reduzida. Transferir o filtrado para balo volumtrico de 10 ml e completar o volume com gua. Concentrar esta soluo secura em banho- maria. Ressuspender o resduo em 5 ml de metanol.

Soluo (2): dissolver 5 mg de cido glico em 5 ml de metanol.

Desenvolver o cromatograma. Remover a placa, deixar secar ao ar. Nebulizar a placa com soluo de cloreto frrico a 5% (p/V) em metanol. A mancha principal obtida no cromatograma com a soluo (1), corresponde em posio e intensidade quela obtida com a soluo (2) (Rf de aproximadamente 0,70). A manc ha correspondente ao cido glico apresenta colorao azul escura.

F. BRAS. IV, 2003

ENSAIOS DE PUREZA

Material estranho (V.4.2.2). No mximo 2%. Correspondente s razes.

gua (V.4.2.3). No mximo 10%.

Cinzas totais (V.4.2.4). No mximo 6%.

DOSEAMENTO

Taninos totais

Soluo me: pesar, exatamente, cerca de 0,75 g da droga moda, transferir para balo de fundo redondo e adicionar 150 ml de gua. Aquecer em banho- maria, sob refluxo, durante 30 minutos, em temperatura entre 80 C e 90 C. Resfriar em gua corrente, transferir a mistura para balo volumtrico de 250 ml e completar o volume com gua. Deixar decantar o sedimento e filtrar, desprezando os primeiros 50 ml do filtrado.

Polifenis totais: transferir 5 ml da soluo me para balo volumtrico 25 ml e completar o volume com gua. A 5 ml desta soluo, adicionar 2 ml de reagente de Folin- Denis e diluir para 50 ml com carbonato de sdio SR. Medir a absorvncia da soluo (A1 ) em 715 nm (V.2.14), exatamente 3 minutos aps a adio do ltimo reagente, utilizando gua para ajuste do zero.

Polifenis no adsorvidos pelo p-de-pele: adicionar 0,2 g de p-de-pele a 20 ml da soluo me e agitar, mecanicamente, durante 60 minutos. Filtrar. Diluir 5 ml dessa soluo para 25 ml com gua. A 5 ml desta soluo, adicionar 2 ml do reagente de Folin- Denis e diluir para 50 ml com carbonato de sdio SR. Medir a absorvncia da soluo (A2 ) em 715 nm (V.2.14), exatamente 3 minutos aps a adio do ltimo reagente, utilizando gua para ajuste do zero.

Soluo referncia: dissolver 50 mg de pirogalol em gua e diluir a 100 ml com o mesmo solvente. Diluir 5 ml desta soluo para 100 ml com gua. A 5 ml desta soluo, adicionar 2 ml de reagente de Folin- Denis e diluir para 50 ml com carbonato de sdio SR. Medir a absorvncia da soluo (A3 ) em 715 nm (V.2.14), exatamente 3 minutos aps a adio do ltimo reagente e dentro de 15 minutos contados da dissoluo do pirogalol, utilizando gua como branco. Calcular o teor de taninos totais pela expresso:

TT =

13,12 ( A1 A2 ) A3 m

F. BRAS. IV, 2003

em que TT = taninos totais; A1 = absorvncia medida para polifenis totais; A2 = absorvncia medida para polifenis no adsorvidos; A3 = absorvncia medida para a substncia referncia; m = massa da droga vegetal considerando a determinao de gua.

cido glico

Proceder conforme descrito em Cromatografia lquida de alta eficincia (V.2.17.4). Utilizar cromatgrafo provido de detector ultravioleta a 275 nm; pr-coluna empacotada com slica quimicamente ligada a grupo octadecilsilano; coluna de 250 m de comprimento e 4 mm de m dimetro interno, empacotada com slica quimicamente ligada a grupo octadecilsilano (5 m); fluxo da fase mvel de 0,5 ml/minuto; sistema de gradiente linear, partindo de 100% do eluente A at 100% de eluente B em 15 minutos, e permanecendo 5 minutos de modo isocrtico em 100% do eluente B.

Fase mvel: eluente A: mistura de metanol, gua e cido trifluoractico (30:70:0,05); eluente B: mistura de metanol e cido trifluoractico (100:0,05). Soluo amostra: pesar exatamente, cerca de 0,75 g da droga seca e moda (800 m) e transferir para balo de fundo redondo. Adicionar 10 ml de gua, adaptar em condensador de refluxo e aquecer em manta ebulio durante 15 minutos. Esfriar sob gua corrente e filtrar o extrato sob presso reduzida. Lavar o resduo com gua. Transferir o filtrado para balo volumtrico de 10 ml e completar o volume com gua. Pipetar 4 ml desta soluo para balo volumtrico de 100 ml e completar o volume com gua.

Soluo padro: dissolver quantidade exatame nte pesada de cido glico padro em metanol para obter soluo a 1 mg/ml. Curva de calibrao: diluir uma alquota de 175 l da soluo padro em balo volumtrico de 5 ml, completar o volume com metanol. Diluir esta soluo metade (Soluo me). Alquotas da soluo me de 10, 20, 40, 60, 80 l so diludas a 100 l com metanol, obtendo-se as seguintes concentraes tericas: 1,8; 3,6; 7,2; 10;8; 14,4 g/ml. Procedimento: injetar, separadamente, 20 l das solues padro e amostra, registrar os cromatogramas e medir as reas dos picos. O tempo de reteno relativo cerca de 6,5 minutos para o cido glico. Calcular o teor de cido glico na amostra a partir da equao da reta obtida com a curva de calibrao do cido glico. O resultado expresso pela mdia das determinaes em gramas de cido glico por 100 gramas da droga considerando a determinao de gua (%).

F. BRAS. IV, 2003

EMBALAGEM E ARMAZENAMENTO

Em recipientes bem- fechados, ao abrigo da luz, calor e umidade.

XII.2. REAGENTES E SOLUES REAGENTES Carbonato de sdio SR Preparao Dissolver 10,06 g de carbonato de sdio em 100 ml de gua. Reagente de Folin-Denis Preparao A 75 ml de gua adicionar 10 g de tungstato de sdio, 2 g de cido fosfomolbdico e 5 ml de cido fosfrico. Manter a mistura em refluxo por 2 horas, resfriar e diluir a 100 ml com gua. A soluo apresenta colorao esverdeada.

F. BRAS. IV, 2003

LEGENDAS Figura 1: Phyllanthus niruri L. A. aspecto geral da folha; B. aspecto geral da estpula na regio do n; b. base da folha; e. estpula; ra. ramo; C. aspecto geral do fruto; D. aspecto geral da semente; E. vista frontal da epiderme da face adaxial; es. estmato; F. vista frontal da epiderme da face abaxial; es. estmato; G. lmina foliar na regio do mesofilo, em seco transversal; ep. epiderme; ic. idioblasto cristalfero; pj. parnquima esponjoso; pp. parnquima palidico; H. regio do mesofilo ao nvel do parnquima palidico, em seco paradrmica, evidenciando idioblastos com drusas; ic. idioblasto cristalfero; pp. parnquima palidico; I. lmina foliar na regio da nervura principal em seco transversal; co. colnquima; ep. epiderme; f. floema; pj. parnquima esponjoso; pp. parnquima palidico; x. xilema; J. detalhe da nervao broquiddroma de um segmento da lmina foliar em vista frontal. As escalas correspondem: A, D (0,05 cm), B, C, J (0,1 cm), E a I (50 m). Figura 2: Phyllanthus niruri L. A. detalhe do caule em seco transversal; cl. clornquima; co. colnquima; ep. epiderme; f. floema; ff. fibras do floema; ic. id ioblasto cristalfero; pc. parnquima cortical; pm. parnquima medular; x. xilema; B. detalhe da raiz em seco transversal; f. floema; ff. fibras do floema; pc. parnquima cortical; pe. periderme; x. xilema; C. elemento de vaso com espessamento pontoado em vista longitudinal; D. clulas parenquimticas esclerificadas; E. fibras do floema em vista longitudinal; F. clulas clorenquimticas junto s fibras do floema; G. fibra em vista longitudinal; H. detalhe de um fragmento da epiderme caulinar em vista frontal, mostrando estmato; es. estmato. As escalas correspondem: A, B, H (50 m), C a G (100 m).

F. BRAS. IV, 2003