Prctica 1 Fisiologa Humana Posgrado de Fsica Mdica

FISIOLOGA HUMANA

PRCTICA 1

DATOS DEL ALUMNO:

NOMBRE: JUAN APELLIDOS: PREZ CASTILLO
CORREO ELECTRNICO: JUAN.PEREZCASTILLO@YAHOO.ES

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Consulte el Tutorial de Histologa que se incluye en el CD. Es recomendable reconocer los tipos de tejidos y ser de utilidad para realizar la Tarea 1 a la hora de comprender mejor la estructura tisular.

PARTE 1 - TRANSPORTE A TRAVS DE MEMBRANA

Difusin simple
Realice un estudio de la difusin de los productos siguientes en las condiciones experimentales que se especifican a continuacin para cada una de las membranas (20, 50, 100 y 200 MCWO). Recipiente 1:
Experimento 1 Experimento 2 NaCl Urea Albumina Glucosa 5 mM 5 mM 5 mM 5 mM 15 mM 15 mM 15 mM 15 mM

Recipiente 2: agua destilada Tiempo: 60 minutos. Explique razonadamente a qu se deben los resultados obtenidos. Los pesos moleculares de los componentes de los dos experimentos son: Na+ (23g/mol), Cl- (35,5g/mol), Urea (60g/mol), Albumina (6,83*10^4g/mol), Glucosa (180g/mol). En la difusin simple la transferencia se realiza simplemente por el movimiento de las partculas, segn los gradientes de concentracin. Experimento 1 Con la membrana de 20 no se realiza difusin ya que los pesos moleculares de todos los elementos contenidos en el primer recipiente son mayores que los poros de la membrana. Con la membrana de 50 se han filtrado 2.5NM de NA+CL- debido a que sus pesos moleculares son menores que los tamaos de los poros de esta membrana. El equilibrio se produce a los 9 minutos cuando existe la misma concentracin en un recipiente y en otro. Con la membrana de 100 se han filtrado 2.5NM de NA+Cl- y 2.5 de UREA, pasa exactamente igual que en los casos anteriores, ahora al ser los poros mayores la Urea puede difundirse hacia el otro recipiente. El equilibrio se da a los 9 minutos en el NaCl y a los 15 en la Urea (La Urea tarda ms por su tamao mayor) Con la membrana de 200 se filtra 2.5NM de NACL, 2.5NM UREA y 2.5NM Glucosa, el motivo es exactamente igual a los anteriores. La albumina nunca difunde debido a su gran peso molecular. Equilibrio se consigue en 9, 15 y 34 minutos (El que ms tarda es el de tamao mayor)

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Experimento 2 Con la membrana de 20 no se realiza difusin. Exactamente igual que en el primer experimento. Con la membrana de 50 se han filtrado 7.5NM de NA+CL-, se filtra exactamente la mitad de soluto para igualar las concentraciones. El equilibrio se produce a los 10 minutos, prcticamente igual que con tres veces menos soluto, por lo que parece que la cantidad no importa. Con la membrana de 100 se han filtrado 7.5NM de NA+Cl- y 7.5 de UREA (Cuando se consigue el equilibrio). El equilibrio se da en 10 minutos para el NACL y en 17 para la UREA. Con la membrana de 200 se filtran 7.5NM de NACL, 7.5 UREA y 7.5 Glucosa. El Equilibrio en 10, 17 y 36 minutos respectivamente. Al tener ms soluto la difusin se acelera, la transferencia es mayor de un recipiente a otro hasta alcanzar el equilibrio, no importa la cantidad de soluto, los tiempos parecen ser los mismos para conseguir el equilibrio.

Qu ocurre s el recipiente 2 contiene una solucin de NaCl 10 mM, Urea 5 mM, Albumina 10 mM y Glucosa 5 mM en vez de agua destilada? Experimento 1 Con la membrana de 20 no habra difusin por el tamao de la membrana con respecto a los pesos moleculares de los elementos. Con la membrana de 50 se dara un equilibrio del NaCl en ambos recipientes quedando 7.5nM en cada uno de NaCl y el resto sin alterarse, los tiempos seran los mismos (9 minutos). Con la membrana de 100 y de 200 ocurria lo mismo que en el experimento 1 con agua destilada. Se equilibraran los elementos que pueden traspasar la membrana en el mismo tiempo que con agua destilada (En este caso hay elementos que ya estan equilibrados desde el principio del experimento). La albumina nunca pasara. Con 100 se equilibran NaCl y Urea, NaCl igual que con la membrana de 50 y la Urea ya estara equilibrada desde el principio a 5nM en cada recipiente. Con el de 200 se equilibra tambin la glucosa a 5nM en cada recipiente (Ya est equilibrada al inicio del experimento como la Urea). Experimento 2 En este caso ocurre lo mismo que en el caso anterior, si los elementos pueden traspasar el grosor de poro de las membranas se producir difusin e igualacin de concentraciones en ambos recipientes. De acuerdo con los resultados, de qu depende el tiempo necesario para alcanzar el equilibrio?

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Depende del peso molecular de las partculas que usemos con respecto al grosor de la membrana. Tambin depende de la diferencia de concentraciones que existan entre los solutos de ambos recipientes (Si tenemos 15 NACL en el recipiente 1 y 0 en el 2, el equilibrio tardar ms en producirse que si tenemos 5 en el primero y 10 en el segundo). En el caso que usemos agua destilada en uno de los recipientes esta difundir del medio hipotnico (menor concentracin) al medio hipertnico (mayor concentracin). Qu se puede concluir respecto al tamao de cada producto de acuerdo con el experimento realizado? Pues que contra mayor sea el peso molecular del producto mayor tendr que ser el grosor de la membrana para que pueda producirse difusin. Adems parece que cuanto mayor sea el producto ms lentamente se produce la difusin (el producto de menor tamao se traslada mas rpidamente).

Difusin facilitada
Empleando un tiempo de 60 minutos fijar las concentraciones de NaCl y glucosa en 10 mM y 8 mM en el recipiente 1 y en 1 mM para ambos productos en el recipiente 2. Realice un cuadro indicando los resultados obtenidos para una membrana que presente 100 transportadores, una membrana con 300 transportadores y una membrana con 600 transportadores.

Membrana 100 Transportadores Na+ClGlucosa

Recipiente 1 5.500 5.623

Recipiente 2 5.500 3.377

Equilibrio 10 minutos No conseguido

Membrana 300 Transportadores Na+ClGlucosa

Recipiente 1 5.500 4.605

Recipiente 2 5.500 4.395

Equilibrio 10 minutos No conseguido

Membrana 600 Transportadores Na+ClGlucosa

Recipiente 1 5.500 4.500

Recipiente 2 5.500 4.500

Equilibrio 10 minutos 48 minutos

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Explique razonadamente las diferencias observadas. El Na+Cl- se difunde mediante difusin simple por lo que no le afecta el nmero de transportadores de glucosa, tarda lo mismo en los tres casos. En la glucosa al aumentar los transportadores de su tipo se aumenta la velocidad a la que se difunde haca el otro recipiente hasta alcanzar el equilibrio, por lo que a mayor nmero de transportadores mayor ser la cantidad de soluto que se puedan difundir, es totalmente razonable (a mayor nmero de transportadores mayor cantidad de material se podr trasladar). Comente cmo se produce el transporte de agua a travs de la membrana plasmtica y la sntesis de ATP en la mitocondria. El transporte de agua a travs de la membrana plasmtica se produce sin gasto de energa, el agua pasa de un lado a otro de la membrana segn la cantidad de soluto que haya en uno u otro. En un medio isotnico se da un intercambio constante de agua ya que estn en equilibrio en ambas partes. En uno hipotnico el agua traspasa la membrana hasta el equilibrio o hasta que la clula no aguante ms presin y reviente (citlisis). En uno hipertnico el agua sale de la clula hasta el equilibrio o hasta la deshidratacin y muerte de dicha clula (crenacin). Difusin simple. En la sntesis de ATP en la mitocondria el transporte de agua se realiza mediante difusin facilitada. Realmente del NADH inicial se extraen iones H+ y electrones que recorren la denominada cadena transportadora de electrones por medio de transportadores, finalmente el oxgeno capta ese electrn y ese in formando agua (Es un poco ms complicado, pero el funcionamiento es as).

smosis
En esta parte de la prctica se emplea un tiempo de 60 minutos y las condiciones que se indican a continuacin para cada una de las membranas:
Experimento 1 NaCl Albumina Glucosa Recipiente 1 10 mM 10 mM 10 mM Recipiente 2 5 mM 5 mM 5 mM NaCl Albumina Glucosa Experimento 2 Recipiente 1 10 mM 10 mM 10 mM Recipiente 2 15 mM 15 mM 15 mM

Explique razonadamente lo que ocurre en cada experimento con cada una de las membranas, a qu se debe el cambio de presin en cada recipiente? Experimento 1: o El equilibrio osmtico se produce desde el inicio ya que debido al tamao de los poros de la membrana no se produce difusin, el peso molecular de todos los componentes del experimento es mayor al de la membrana de 20. La presin que produce el R1 sobre la membrana es de 340mmHG, ya que quiere pasar al otro recipiente para igualar los solutos.

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Con la membrana de 50 slo puede difundir el NaCl (por los tamaos), automticamente se produce una difusin desde el R1 al R2, se igualan las concentraciones de NaCl (7.5Nm en cada) y disminuye un poco la presin (se queda a 170 mmHG). El ratio de transferencia de NaCl ha sido de 0,0093Nm por minuto. La presin ha disminuido porque se ha producido parte de la difusin y por lo tanto las concentraciones estn un poco ms igualadas que en el caso anterior con la membrana de 20.

Con la membrana de 100 pasa exactamente lo mismo que en el caso anterior, slo difunde el NaCl ya que la Glucosa y la albumina tienen un peso molecular mayor a 100 g/mol. Los resultados son exactamente iguales y por el mismo motivo que con la membrana de 50. El tiempo ha sido de 9 minutos en la difusin del NaCl.

Con la membrana de 200 ya podr difundir la glucosa por lo que la presin tiene que disminuir y slo se deber a causa de la Albmina que quiere pasar para igualarse en ambos recipientes pero no puede por su tamao (34 minutos). El tiempo para el NaCl es el mismo que en los dos anteriores y la Glucosa tarda un poco ms en equilibrarse porque tiene mayor tamao que el NaCl. La presin resultante de R1 sobre R2 es de 85mmHg (Debido a la Albumina y en sentido R1 a R2).

Experimento 2: o El equilibrio osmtico se produce desde el inicio ya que debido al tamao de los poros de la membrana no se produce difusin, el peso molecular de todos los componentes del experimento es mayor al de la membrana de 20. La presin se produce desde R2 a R1 (ya que en R2 hay mayor cantidad de soluto y quiere difundirse para conseguir el equilibrio). La presin es de 340mmHg, igual que en la primera parte del experimento anterior, esto es debido a que en ambos experimentos la diferencia entre los solutos de R1 y R2 es la misma, 5mM. o Con las membranas de 50 y 100 se producen los mismos resultados que en el experimento anterior. Presin de 170mmHg en sentido R2 a R1 debido a Glucosa y Albumina, solo difunde el NaCl con el mismo ratio 0.0093. Presin de 170mmHG. o Con la membrana de 200 se vuelven a producir los mismos resultados ya que la diferencia de solutos sigue siendo 5. La presin se dar en este caso de R2 a R1 y ser producida por la albumina (Presin de 85 mmHG).

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A nivel celular, qu importancia tiene la smosis en el mantenimiento de la homeostasis? Supongo que la principal razn es para que haya un equilibrio en las concentraciones de los componentes que forman las clulas. Los desechos tendrn que salir para que no se acumulen (toxicidad) y se necesitarn elementos exteriores que han de entrar para, por ejemplo, realizar la respiracin celular. La osmosis realiza estas acciones y mantiene la homeostasis para el correcto funcionamiento celular.

Filtracin
El tiempo a emplear es de 60 minutos y las condiciones de los experimentos se indican a continuacin para cada una de las membranas:
Presin 50 mmHg NaCl Urea Glucosa Carbn vegetal pulverizado Recipiente 10 mM 10 mM 10 mM 10 mM Presin 100 mmHg NaCl Urea Glucosa Carbn vegetal pulverizado Recipiente 10 mM 10 mM 10 mM 10 mM

Comente, razonadamente y de manera breve, la influencia que ejerce el tipo de membrana y la presin aplicada sobre cada soluto en el proceso de filtracin. Experimento 1: o Usando la membrana de 20 ninguno de los elementos del experimento atraviesan la membrana en los 60 minutos, la filtracin completa se hubiera realizado a los 100 minutos. Debido a la presin se han encontrado residuos de los 4 elementos en el anlisis que hemos realizado en la membrana. El ratio de filtracin ha sido de 1ml/min. o Usando la membrana de 50 la filtracin se ha completado en 40 minutos. Existen residuos en la membrana como en el caso anterior. Ahora al poder filtrarse el NaCl el ratio de filtracin ha aumentado a 2.5ml/m, en la concentracin filtrada podemos encontrar 9.62mg/ml de NaCl. o Usando la membrana de 100 la filtracin se ha completado en 20 minutos. Ha difundido el NaCl y la Urea, el ratio ha aumentado a 5ml/min. Cuanto mayor sea el grosor del poro ms elementos podrn atravesarla y la filtracin se realizar en menos tiempo (Si aumentsemos la presin el tiempo sera an menor como veremos en el experimento2). 9.62mg/ml de NaCl y 942mg/ml de Urea en el resultado filtrado. o Usando la membrana de 200 se completa en 10 minutos. La glucosa puede atravesar la membrana y la velocidad aumenta por el mismo motivo que el anterior. 9.62mg/ml de NaCl , 942mg/ml de Urea y 8,79 de glucosa en el resultado filtrado.

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Experimento 2: Los tiempos sern menores (la mitad aproximada en cada caso) debido a la mayor presin que se ejerce forzando a las partculas a pasar ms rpido por la membrana de filtracin.

Tamao de la membrana

Presin de filtrado

Inicial y Final

En qu procesos biolgicos puede tener importancia la filtracin? Respiracin: Se necesita de un filtrado previo para que los elementos perjudiciales del aire no entren en nuestro cuerpo. Nutricin: Por lo mismo que en el caso anterior, se necesita de un filtrado para eliminar elementos dainos. Excrecin: Para captar los ltimos elementos que se puedan usar en el cuerpo provenientes del material digerido en la nutricin (No estoy muy seguro si esta funcin ya se incluye en la Nutricin). Circulacin: Para limpiar la sangre de elementos perjudiciales provenientes de los alimentos ingeridos o del aire exterior.

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Transporte activo
Para realizar esta prctica se emplean las condiciones que se indican a continuacin y un tiempo de 60 minutos:
Membrana de 100 transportadores de glucosa y 100 de bomba Na+/K+ ATP: 5 mM NaCl KCl Glucosa Recipiente 1 10 mM 10 mM 10 mM Recipiente 2 2 mM 2 mM 2 mM NaCl KCl Glucosa ATP: 15 mM Recipiente 1 10 mM 10 mM 10 mM Recipiente 2 2 mM 2 mM 2 mM

Membrana de 300 transportadores de glucosa y 300 de bomba Na+/K+ ATP: 5 mM NaCl KCl Glucosa Recipiente 1 10 mM 10 mM 10 mM Recipiente 2 2 mM 2 mM 2 mM NaCl KCl Glucosa ATP: 15 mM Recipiente 1 10 mM 10 mM 10 mM Recipiente 2 2 mM 2 mM 2 mM

Indique el sentido del transporte de cada producto. Realice el experimento con la membrana de 100 transportadores para cada producto sin aportar ATP, se produce transporte de alguno de los productos? Si es as, a qu se debe? 1. Usando ATP 5nM y membrana de 100 se han obtenido los siguientes resultados : o Podemos observar que el Na+ y la Glucosa se han difundido desde R1 a R2 intentando conseguir el equilibrio. En cambio Na+ ha difundido desde R2 a R1 aumentando la diferencia de concentracin en un recipiente y otro. o Despus de 60 minutos an tenemos disponible 4.171nM de ATP. Podemos observar los ratios de movimiento en el cuadro de la izquierda.

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2. Usando ATP 15nM y membrana de 100 se han obtenido los siguientes resultados :

Observamos que tenemos exactamente los mismos resultados que en el caso anterior. Deducimos que la cantidad diramos minutos de ms se ATP de no 60 modifica la velocidad, si le podra

conseguir el equilibrio con esta cantidad de ATP. Por lo que la cantidad de ATP nos sirve para poder difundir ms cantidad de soluto, no modifica la velocidad de difusin del soluto.

3. Usando ATP 5nM y membrana de 300 se han obtenido los siguientes resultados : o Al aumentar los transportadores en la membrana la difusin se acelera (podemos observarlo en los ratios). El equilibrio no se consigue en 60 minutos. La direccin de movimiento es la misma que en los casos anteriores (Na y Glucosa de R1 a R2 y K de R2 a R1).

4. Usando ATP 5nM y membrana de 300 se han obtenido los siguientes resultados : o Volvemos a observar que el ATP no aumenta la velocidad de difusin, la ventaja es que nos permitira transportar ms cantidad de soluto.

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Qu influencia tiene el ATP en el transporte de estos solutos?, produce algn cambio en el transporte la variacin en el nmero de transportadores? Si es as, a qu se debe? Como he explicado antes el ATP nos sirve para poder transportar ms cantidad de soluto, no modifica la velocidad de difusin. Al aumentar la cantidad de transportadores en la membrana se acelera la velocidad de difusin, el ratio aumenta, pero no proporcionalmente (con un incremento de 200 transportadores la velocidad no ha aumentado considerablemente). Supongo que es porque si en un transportador se puede mover un soluto en 300 transportadores se podrn mover muchos ms solutos, as a primeras 300 ms. (Los nmeros no son correctos, se por la proporcin, pero con un ejemplo simple se puede entender mejor). Comente cmo participa el transporte activo en la transmisin del impulso nervioso y en la resistencia de los tumores a los medicamentos. La accin del transporte activo en la transmisin del impulso nervioso es la de volver al estado de reposo. Mediante transporte activo se introducen iones potasio en las clulas y se expulsan iones sodio al exterior produciendo carga negativa en el interior de las clulas (nerviosas en este caso), esta situacin se denomina estado de descanso (como hemos indicado antes).

Con respecto a la resistencia de los tumores se podra deber a que los medicamentos antitumorales podran entrar en el tumor por difusin (pasiva), por ejemplo, y antes de que pudieran realizar su accin curativa seran expulsados por transporte activo. He encontrado un artculo que habla sobre ellos:
El transporte activo tiene tambin inters biomdico. As, uno de los transportadores en cuestin, la glicoprotena p (Pgp) puede ser sobreexpresado por clulas tumorales, explicando as su resistencia a los frmacos quimioterpicos antitumorales, que entraran en la clula, por ejemplo por difusin pasiva (ver esquema), pero posteriormente seran expulsados de la misma por medio de transporte activo gracias a la Pgp, antes de que lleven a cabo su accin teraputica.

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Parte 2 - Fisiologa Muscular

Estimulacin simple Realizar la prctica empleando los siguientes parmetros:
Longitud de msculo: 50 mm Voltaje 3 6 9 Longitud de msculo: 70 mm Voltaje 3 6 9 Longitud de msculo: 90 mm Voltaje 3 6 9

Siguiendo las indicaciones del libro que viene con el CD, obtenga el periodo de latencia y el voltaje umbral para cada longitud de msculo.

Longitud de 50 mm: Voltaje umbral: 0.9 voltios Periodo de latencia con 3V: 4.44 ms Periodo de latencia con 6V: 3.33 ms Periodo de latencia con 9V: 3.33 ms

Longitud de 70 mm: Voltaje umbral: 0.8 voltios Periodo de latencia con 3V: 2.78 ms Periodo de latencia con 6V: 2.78 ms Periodo de latencia con 9V: 2.78 ms

Longitud de 90 mm: Voltaje umbral: 0.8 voltios Periodo de latencia con 3V: 2.22 ms Periodo de latencia con 6V: 2.22 ms Periodo de latencia con 9V: 2.22ms

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Qu influencia tiene la longitud del msculo en el resultado obtenido? Comente brevemente la influencia del voltaje en la respuesta del msculo. El voltaje umbral disminuye con la longitud del msculo. Los periodos de latencia disminuyen con respecto a la longitud del msculo (por lo que cuanto ms largo sea el msculo antes reaccionar a los estmulos). El voltaje modifica la fuerza con la que se contrae el msculo, cuanto ms voltaje ms fuerza se produce (se puede ver en las grficas adjuntas).

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Estimulacin mltiple
Longitud de msculo: 50 mm Longitud de msculo: 70 mm 150 Nmero de estmulos 50 100 150 Longitud de msculo: 90 mm Nmero de estmulos 50 100 150

Realizar la prctica empleando como voltaje constante 5 V y los siguientes parmetros:

Nmero de estmulos 50 100

Compare los resultados obtenidos en cada longitud de msculo y explique razonadamente lo que ocurre en cada caso con la variacin del nmero de estmulos y las consecuencias que conlleva. Longitud de 50 mm:

En este primer caso las variaciones en la fuerza obtenida apenas varan al aumentar los estmulos. Las grficas son todas prcticamente iguales. No se produce fuerza pasiva. Longitud de 70 mm:

En el segundo caso se produce mucha ms energa como consecuencia de haber aumentado la longitud del Msculo. Como en el caso anterior al aumentar los estmulos tambin se produce ms fuerza. En las grficas vemos que el pulso inicial es ms fuerte y luego va disminuyendo. Longitud de 90 mm:

En este tercer caso se produce menos fuerza que en el segundo aun cuando el msculo es ms largo. Parece que es debido a que se produce fuerza pasiva, tensin desarrollada al estirar el msculo. Podemos decir que el voltaje llega a un pico a una determinada longitud del msculo y luego baja debido a que se empieza a crear fuerza pasiva (cuanta ms longitud ms fuerza pasiva)

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