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INSTRUES DE USO

Meio de Cultura Desidratado; Cd. M234-500G; 500 gramas.

AGAR AK N 2

MARCA: HIMEDIA

Finalidade de Uso: O Agar AK N 2 um meio de cultura recomendado para a produo de esporos de Bacillus subtilis ATCC 6633, os quais so utilizados para deteco de penicilina e outros resduos de antibiticos em leite e lacticnios. Composio em g/L: Digesto Pancretica de gelatina: 6.00 Casena Enzimtica hidrolisada: 4.00 Extrato de Levedura: 3.00 Extrato de Carne Bovina: 1.50 pH Final (a 25C): 6.6 0.2 Dextrose: 1.00 Sulfato Manganoso: 0.30 Agar: 15.00

Base Cientfica: O Agar AK foi desenvolvido por Arret e Kishbaum para a produo de esporos de Bacillus subtilis ATCC 6633, para uso em processos de testes de penicilina em leite. Esse meio altamente nutritivo pois contm duas peptonas, extrato de levedura, extrato de carne bovina e dextrose. Digesto pptica de tecido animal e extrato de carne bovina so fontes de nitrognio, enxofre, aminocidos e elementos de trao. Sulfato manganoso tem um papel importante no processo de esporulao. Uma cultura fresca de Bacillus subtilis lavado com salina fisiolgica estril na superfcie de potes Roux contendo 300ml de meio estril. Os potes so incubados a 35C por 5 dias e o resultado crescido numa suspenso em 50ml de soluo salina fisiolgica estril. O crescido lavado centrifugando a suspenso e descartando o sobrenadante. O sedimento obtido re-suspendido em soluo salina fresca estril e aquecido a 70C por 30 minutos para matar clulas vegetativas e obter suspenso de esporos. Essa suspenso de esporos pode ser armazenada por meses para uso na deteco de resduos de penicilina/antibitico no leite e laticnios (2). Procedimento de Preparao do Meio de Cultura: Dissolva 30.8 gramas em 1000ml de gua destilada. Ferva com agitao para dissolver completamente o meio. Dispense em alquotas de 300ml em frasco de Roux ou outra garrafa apropriada. Esterilizar autoclavando a 15lbs de presso a 121C por 15 minutos.No autoclavar at que o meio tenha sido completamente dissolvido. Avaliao de Resultados: Caractersticas da cultura aps 14 dias a 35C. Organismos (ATCC) Bacillus subtilis (6633) Bacillus megaterium (9855)

Crescimento

Abundante com esporulao Abundante com esporulao

Controle de qualidade: Aparncia do p: P amarelo claro, homogneo e livre circulante. Solidificao: Firme, comparvel com gel Agar 1.5%. Cor e Transparncia: Colorao mbar claro, gel claro a levemente opalescente, em placas de Petri. Reao: o A reao de 3.08% de soluo aquosa tem pH final de 6.6 0.2 a 25 C. Condies de Armazenamento: Armazenar o p a temperatura ambiente (abaixo de 30C) e o meio preparado de 2-8C. Validade: 5 anos. Referncias Bibliogrficas 1. Arret and Kirshbaum, 1959, J. Milk and Food Tech., 22; 329. th 2. Richardson (Ed.), 1985, Standard Methods for the Examination of Dairy Products, 15 ed., APHA, Washington D.C.