CROMATOGRAFA DE GASES Y DE LQUIDOS DE ALTA RESOLUCIN

TEMA XXIII
CURSO DE POSTGRADO

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TEMA XXIII Anlisis cualitativo. Mtodo de coincidencia. ndices de retencin. Identificacin. Anlisis cuantitativo. Fundamento terico. Tcnicas de anlisis cuantitativo. Informatizacin de la tcnica analtica cromatogrfica.
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Seal FID

Aplicaciones I.

100

Tiempo retencin

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MUESTRA

UTILIDAD ANALTICA CUALITATIVA DE LA COMATOGRAFA POR COMPARACIN DE CROMATOGRAMAS

PATRONES

Iguales condiciones No inequvoco

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ANLISIS CUALITATIVO

Un cromatograma de una muestra conteniendo un nico pico puede interpretarse como: criterio de pureza en un control de purificacin parmetro de identificacin (tR)

VALOR ORIENTATIVO, TCNICA NO INEQUVOCA

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CONFIRMACIN NECESARIA: deteccin identificativa control de pureza de pico mtodo de coincidencia con patrones ndices de retencin (relativa).

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MTODO ANALTICO DE IDENTIFICACIN POR COINCIDENCIA

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NDICES DE KOVATS

N = Nmero carbonos alcano anterior n = diferencia n carbonos entre alcanos X = problema

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ANLISIS CUANTITATIVO (ACTUACIONES PREVIAS)

Mismos componentes en la misma proporcin Voltiles, precipitados Disolventes, oxgeno, adsorbentes

Situaciones ideal y real

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Reparto de reas segn grado de solapamiento.

PICOS MAL RESUELTOS

Tamao relativo de los picos solapados (errores en la divisin)

Picos en la cola de un pico mayor

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ANLISIS CUANTITATIVO (ACTUACIONES PREVIAS)

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FUNDAMENTO TERICO DEL ANLISIS CUANTITATIVO

X
mi = cantidad de componente i ci = concentracin componente i V = volumen
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ANLISIS CUANTITATIVO

Y
La posicin de cualquier punto del pico:

* (xi,yi)

X
mi = cantidad de componente i ci = concentracin componente i V = volumen vy =sensibilidad de registro Si = sensibilidad del detector para i vx = velocidad del papel F = caudal
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ci

Ai = k Si mi Y

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MTODOS DE CUANTIFICACIN

Deduccin terica:

Ai = rea de pico k = constante Si = sensibilidad detector mi = masa componente

Aplicacin a dos solutos, 1 y 2, en el mismo cromatograma.

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1. MTODO DE NORMALIZACIN (APROXIMATIVO)

CONDICIN:

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CARACTERSTICAS DEL MTODO

simple y rpido. deben eluirse todos los componentes. poca precisin y exactitud. exclusivamente utilizable cuando la respuesta del detector sea similar para todos los componentes.

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2. MTODO DEL ESTNDAR EXTERNO 1. Determinar aproximadamente en las muestras a analizar los intervalos de concentracin para cada componente de inters por normalizacin. 2. Preparar estndares de concentraciones similares a los intervalos en los que van a estar en el problema los componentes de inters. 3. Si el intervalo de concentraciones a determinar de un componente es estrecho se pueden usar distintos volmenes de una nica disolucin estndar. 4. Si el intervalo es amplio preparar disoluciones de distinta concentracin para que los volmenes inyectados no sean muy distintos. 5. Preparar una curva de calibrado componente de inters a determinar. para cada

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2. MTODO DEL ESTNDAR EXTERNO

* * * *

* * *

(!)
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CARACTERSTICAS DEL MTODO

Mantener las condiciones cromatogrficas constantes. Disponer de patrn puro de todos los analitos. No es necesario eluir todos los componentes. Varias repeticiones para valor estadstico. Precisin y exactitud media-alta. Requiere inyecciones de volmenes muy exactos (recomendado inyector automtico).

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3. MTODO DEL ESTNDAR INTERNO

Seleccin de un patrn de caractersticas adecuadas: muy alta pureza. naturaleza similar a la muestra en conjunto. no estar presente en el problema. dar pico resuelto y simtrico. factor de capacidad (k) intermedio en el problema. similar concentracin, tiempo de retencin y respuesta del detector que el analito.

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3. MTODO DEL ESTNDAR INTERNO Se preparan diversos estndares de composicin exacta conocida y aproximada a la de las muestras que se van a analizar y que se han aproximado por normalizacin.

Cuanto mayor sea el nmero de estndares preparados mayor exactitud se conseguir.

A los estndares se les aade una cantidad exactamente conocida del patrn antes seleccionado para calcular el factor de respuesta:

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3. MTODO DEL ESTNDAR INTERNO (E) = estndar Existe un nico volumen:

i = componente
Factor de respuesta
**

p = patrn

* * * * * * *

Un factor de respuesta se determina para cada componente de inters

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3. MTODO DEL ESTNDAR INTERNO Conocido el factor de respuesta (fi) se puede hacer la determinacin del componente i en una muestra problema desconocida (X): incgnita Ai (X) Ap (X) Ci (X) Cp (X) ------------ = fi -------------

i = componente p = patrn

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CARACTERSTICAS DEL MTODO

Tediosa preparacin de estndares y patrn. Un factor de respuesta para cada analito. Laboriosa eleccin del patrn interno. Requiere alta pureza del patrn y los componentes a determinar para los estndares. No se afecta por pequeos cambios en las condiciones. No requiere medidas exactas de volmenes. Alcanza precisin y exactitud mximas.

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INFORMATIZACIN DE LA TCNICA ANALTICA CROMATOGRFICA SITUACIN ACTUAL: gran disponibilidad de hardware gran disponibilidad de software cromatogrfico interfases de comunicacin ordenadorcromatgrafo 1. OPERACIONES DE FUNCIONAMIENTO Y CONTROL: preparacin e introduccin muestra programacin variables y mdulos almacenamiento de metdicas informacin en tiempo real.

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2. ACTUACIN EN ANLISIS CUALITATIVO-CUANTITATIVO Libreras de ndices de retencin. Libreras de identificacin. Programas para la cuantificacin: recogida de datos construccin grficas de calibrado determinacin factores de respuesta expresin directa de concentraciones Diseo de informes de resultados. Adecuacin a buenas prcticas de laboratorio. Validacin de mtodos.
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DESVENTAJAS: Complejidad del manejo de software. Complica ciertas operaciones manuales sencillas. Caducidad software y hardware. Costo elevado. Falta de flexibilidad y operatividad.

BALANCE FINAL POSITIVO PARA LA INFORMATIZACIN

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