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UF

GD

Universidade Federal da
Grande Dourados
Faculdade de Cincias Biolgicas e Ambientais
Disciplina de biologia celular prtica
Prof. Dr. Marcos Gino Fernandes
Aluna: Michele da Rosa dos Santos

Relatrio de aula prtica


Tema: Clulas Vegetais
Prtica Estudo de clulas da epiderme do catafilo de Allium cepa (cebola)
Objetivos:
Conhecer a morfologia de uma clula eucaritica vegetal.
Realizar a colorao de clulas vegetais.
Diferenciar material corado e no corado.
Observar ncleo, citoplasma e parede celular.
Introduo:
Clula
As clulas eucariticas dividem-se em duas categorias: clulas animais (anexo fig.3) e clulas
vegetais. Apesar das diferenas estruturais entre as clulas animais e vegetais, ambas possuem:
membrana celular, citoplasma e ncleo. A membrana celular limita exteriormente o citoplasma,
separando o meio intracelular do meio extracelular. No citoplasma encontram-se diversas organelas.
O ncleo est rodeado pelo citoplasma, e no seu interior encontra-se o material gentico que contm
informaes importantes para o funcionamento da celular. As clulas vegetais possuem organelas
nicas, como por exemplo: a parede celular, os cloroplastos e os vacolos que existem em menor
nmero do que na clula animal, mas so de maiores dimenses.
Colorao
A colorao uma tcnica importante para o estudo das clulas ao Microscpio tico, porque
cada constituinte celular tende a absorver um determinado corante, evidenciando assim uma
determinada estrutura. O vermelho neutro um corante vital, que usado em baixa concentrao,
penetra a clula sem a matar, corando o vacolo de vermelho e mantendo o citoplasma e os
organitos incolores. O azul metileno um corante vital que atua sobre o ncleo, corando-o de
azul. A gua iodada um corante no vital que evidencia vrias estruturas celulares. A gua
destilada no tem qualquer efeito nas estruturas das clulas.
Quando se observam ao microscpio ptico, a preparao de material biolgico fresco pouco se
distingue da estrutura interna das clulas, ao contrrio do que acontece no microscpio eletrnico.
As diferentes estruturas celulares apresentam pouco contraste ptico, isto , tm um determinado
grau de transparncia luz, de modo que, aparentemente, o contedo celular homogneo, por isso
temos de recorrer a estratgias que permitam melhor visualizao do contedo celular. Para superar
este problema os citologistas (cientistas que estudam a clula) desenvolveram tcnicas de colorao

que consistem em mergulhar a clula numa substncia denominada corante, capaz de tingir
diferencialmente uma ou mais partes celulares. No microscpio eletrnico no se usam corantes
porque a imagem obtida sempre a preto e branco.
Material:

Catfilo de cebola.
Placa de Petri.
Lmina e lamnula.
Lugol ou cloreto de zinco iodado.
Papel absorvente.
Conta-gota ou pipeta.
Pina.

Procedimento A:
I.

Destacou-se um pedao da epiderme do catfilo da cebola (de preferncia a parte interna).


Distendeu-se o material sobre uma com auxlio de um pincel.
III.
Pingou-se uma gota de gua sobre o material distendido.
IV.
Iniciou-se a colorao da lamnula em posio de 45 com relao lamnula e foi se
abaixando lentamente at que a mesma ficou totalmente sobre a lmina, evitando formao de
bolhas.
V.
Ouve excesso de lquido, retirou-se com papel absorvente, para manter a lamnula fixa.
VI.
Analisou-se em aumentos crescentes, utilizando as objetivas da 40x, 100x e 400x.VII.
Esquematizou-se nos aumentos de 100x e 400x para o relatrio, identificando as estruturas
celulares reconhecidas.
II.

Procedimento B:
I.

Realizaram-se os mesmos procedimentos I e II do procedimento A.


Pingou-se sobre o material distendido gotas de lugol, deixando corar por 5 minutos.
III.
Iniciou-se a colorao da lamnula como descrito no procedimento A.
IV.
Ouve excesso de lquido, retirou-se com papel absolvente, para manter a lamnula fixa.
V.
Analisou-se em aumento crescentes, utilizando as objetivas de 40x, 100x e 400.
VI.
Esquematizou-se nos aumentos de 100x, e 400x para o relatrio, identificando as estruturas
celulares reconhecidas
II.

Resultados:
Procedimento A:
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100x

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10/0.25

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400x

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Procedimento B:
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100x

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10/0.25

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400x

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Discusso:
1) Quais as estruturas das clulas da epiderme da cebola que puderam ser observadas?

R.: Ncleo, nuclolo, ncleo plasma, citoplasma e parede celular.


2) Quais as diferenas das clulas coradas e no coradas?

R.:
3) A observao das clulas melhor quando esto coradas ou no coradas? Por qu?
R.:
4) Com que finalidade so usados os corantes? Quando seu uso dispensado?
R.: necessrio usar corantes na observao de clulas ao Microscpio ptico, porque
estes evidenciam determinadas estruturas das clulas;
5) Qual a diferena de corante supra-vital, vital, e no vital?
R.: Para realizar preparaes temporrias utilizam-se corantes vitais porque podem ser
usados em clulas vivas sem as matarem. Esto em concentraes muito baixas (0,01%), a fim
de diminuir a toxicidade nas clulas. Os corantes podem ser vitais ou no vitais, conforme
permitam colorar clulas vivas e mant-las assim ou no. O mesmo corante pode ser vital ou
no, dependendo da concentrao em que se encontra.
Ex.: Azul de metileno pode ser um corante vital se estiver em baixa concentrao.
O soluto de lugol um corante no vital pois mata rapidamente o material biolgico.
No existe uma tcnica de colorao que ponha em evidncia todas as estruturas celulares.
A colorao das clulas deve-se sobretudo combinao dos corantes com as protenas,
dependendo portanto da sua carga elctrica e pH. Por esta razo, o facto de os corantes
poderem corar especificamente um organelo e no outro (corantes selectivos) est relacionado
com a diferena de cargas elctricas existente entre as protenas dos diferentes organelos
celulares, tendo os corantes uma especificidade para determinada carga elctrica ou pH, que
permita atraco pelo seu prprio e que ocorram ligaes qumicas.
6) Defina o preparo de lminas ditas a fresco ou no permanentes e o preparo de lminas
ditas permanentes.

R.: Clulas permanentes: clulas de ciclo vital muito longo, coincidindo, geralmente, com o tempo de vida do indivduo.
So produzidas apenas durante o perodo embrionrio. Na eventual morte dessas clulas, no h reposio, uma vez que o
indivduo nasce com o nmero completo e necessrio de suas clulas permanentes. Essas clulas simplesmente aumentam de
volume (exceo lei de Driesch), acompanhando o crescimento do indivduo. Como permanentes, podemos citar as clulas
nervosas (neurnios) e as clulas musculares estriadas.

7) Porque necessrio fixar o material biolgico destinado ao preparo de lminas permanetes?


R.: A fixao a etapa da histotcnica que tem por finalidade assegurar a preservao das estruturas
Morfolgicas das clulas e tecidos, como se estivesse no animal in vivo. Para tal, utiliza-se de
meios fixadores qumicos e fisicos, dentre os quais as misturas qumicas, tm sido as mais
indicadas.
Nestas associaes, fixadores simples como formaldedo, cido actico, etc., podem ser compatveis
e promoverem uma excelncia na fixao dos tecidos em geral. Como exemplos, citamos os
lquidos de Bouin (formaldedo, cido actico, cido pcrico), Helly ou Zenker-Formol (bicloreto de

mercrio, dicromato de potssio), etc. Para ME, os mais comuns so glutaraldedo e tetrxido de
smio.

Bibliografia:

JUNQUEIRA, L.C. & CARNEIRO, J. Biologia Celular e Molecular. 7a edio. Ed.


Guanabara Koogan, Rio de Janeiro. 2000. 339 p.
REIS, C.M.G.
Matias, Osrio., & P. (2006). Biologia 10. Porto: Areal Editores.
Portal So Francisco
http://pt.wikipedia.org/
http://www.webciencia.com/11_03celula.htm
http://www.malhatlantica.pt/cnaturais/celula.htm
http://www.universitario.com.br/celo/topicos/subtopicos/
citologia/celula_unidade_vida/celula.html#cel_vegetal

Anexos: