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BRUCELLA

CARACTERISTICAS GENERALES
Coco Bacilos pequeos Gram negativos, resistentes a decoloracin por Acidos dbiles ( Tincin de Stamp ) aislados o en cadenas cortas inmviles, asporognos, sin cpsula aerobios estrictos, aunque algunas especies requieren 5 - 10% CO2 como B. abortus y B. ovis oxidasa (+) --> excepcin B. neotomae y B. ovis catalasa (+), ureasa (+), Indol (-), Citrato (-) metabolismo oxidativo no hemolticas bacterias intracelulares facultativas con afinidad por el sistema retculo endotelial y tracto genital
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Enfermedades Infecciosas 2005

Brucella

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Produce la BRUCELOSIS --> enfermedad infecto contagiosa transmisible de los animales al hombre ( Zoonosis ) Afecta a bovinos, porcinos, caprinos, ovinos, caninos y roedor del desierto de USA Tambin pueden infectar a equinos, aves de corral y varias especies de vertebrados silvestres ( liebres, zorros, hurones, etc ) Afecta a rumiantes silvestres ( Bisones y Bufalos son reservorios en USA ) se caracteriza por producir aborto e infertilidad en las hembras, orqutis y epididimtis en machos En el hombre --> Brucelosis, Fiebre de Malta, Fiebre Ondulante ---> proceso generalizado, febril ondulante, enfermedad terminal ( no se contagia a otra persona ) . Si se torna crnica es difcil de tratar --> grandes dosis de antibiticos por tiempo prolongado (dada su caracterstica intracelular ) Enfermedades Universidad de las Amricas
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Brucella - Zoonosis

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Brucella - Epididimitis

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Brucella (retencin placentaria y Orquitis)

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Existen 6 especies--> todas son patgenas ESPECIES CLASICAS

B. abortus --> Bovinos ( cerdo, caprinos, ovinos, hombre) Bang 1897 B. melitensis --> Caprinos y ovinos ( bovinos, hombre ) Malta 1887 B. suis --> cerdo ( caprinos, hombre )
OTRAS ESPECIES

B. ovis --> Ovino nicamente. UNICA QUE NO ES ZOONOSIS B. canis -->canino ( hombre ) B. neotomae--> ratn del desierto USA Neotoma lepida ( hombre ) Virulencia: B. melitensis > B. suis > B. abortus > B. canis
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La identificacin de las ESPECIES se realiza en base a : Sensibilidad a la lsis por fagos ( Tb, Wb, etc ) Estudio de propiedades oxidativas sobre aminocidos y carbohidratos Actividad ureasa

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Algunas especies de Brucella presentan distintas variedades o BIOVARES La identificacin de los BIOVARES se realiza en base a : Requerimiento de CO2 Produccin de H2S Sensibilidad a Colorantes ( Tionina y Fucsina bsica, etc ) Aglutinacin con sueros monoespecficos A, M y R Las especies Lisas de Brucella portan antgenos de superficie A y M --> y reaccionan serolgicamente frente a los antisueros A y M --> la proporcin relativa de cada antgeno vara entre cada Biovar Las especies Rugosas --> reaccionan frente al suero anti R

B. melitensis --> tiene 3 biovares B. abortus --> tiene 9 biovares B. suis --> tiene Universidad de las Amricas 4 biovares Enfermedades
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Biovares de Brucella

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Son bacterias de desarrollo lento ( 3 - 4 hasta 21 das ) Forman colonias --> Lisas (S ), Mucoides ( M ) o Rugosas ( R ) Las especies clsicas ( B. abortus, B. suis, B. melitensis ) adems de B. neotomae --> Colonias Lisas B. ovis y B. canis --> Colonias rugosas

Las colonias S tienden a disociarse hacia R ( menos patgenas ) Las colonias R son estables, tienen una virulencia constante

Esta capacidad de disociacin de las colonias desde S a R, se puede estudiar por distintos mtodos
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Especies Brucella

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PATOGENIA
las vas de infeccin son las mucosas del tracto digestivo ( oral ), mucosa conjuntival, va aergena , genital y piel va de entrada --> va linftica a ganglios regionales ( retrofarngeos, parotdeos, submaxilares )--> multiplicacin --> conducto torxico --> sangre --> rganos linfticos (bazo, ganglios ilacos y retromamarios) infectan principalmente los MACROFAGOS --> focos granulomatosos en tejido linftico, hgado, bazo, mdula sea la afinidad de la bacteria por la placenta, lquidos fetales y testculos se debe a la presencia de ERITRITOL ( alcohol polihidratado ) en estos tejidos --> estimula su crecimiento. No existe en placenta humana

En infecciones crnicas --> localizacin en tero, glndula mamaria, glndulas sexuales del Universidad de las Amricas macho y ndulos linfticos Enfermedades
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Brucella - Vas de Infeccin

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Brucelosis
Bovinos:Zona central: 7-15% en lechera y 0.2% carne, 2-3% pas, 9% en cerdos Caprinos:No en cajn del Maipo y Til-Til ni en el norte Perros: 6% vet afectados B. canina: por B. canis, abortos en la hembra, epididimitis y atrofia testicular en los machos (infertilidad), mas en criaderos por manejo en perros y cnidos salvajes (coyotes, gatos salvajes), puede afectar al hombre

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Brucelosis Canina
Al abortar (tejido Fetal y placentario, descarga vaginal), leche a los cachorros--- elimina Brucella--- ingestin o heridas al hombre ( por al macho es por la orina, tambin a animales fluido seminal, semen y garrapatas ) Transmisin venrea, alimentos contaminados, por la mucosa oral Signos son de tipo reproductivo, fiebre poco comn, discoespondilitis, uveitis, glomerulonefritis En perra: endometritis, aborto tardo (45-55 das), o nacen cachorrros dbiles o muertos o con linfoadenopatas. En perro: baja capacidad reproductiva, menos eyaculado, alteracin en Prostata, epididimitis, dermatitis escrotal y atrofia testicular
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Brucelosis Canina
Hiperplasia linfoide y reticular (placas de peyer, vejiga, otros) Infiltracin de clulas inflamatorias en rganos y genitales Vasculitis necrotizante (en prstata, epididimo y vulva) alteraciones espermticas Zoonosis, es mas leve que otras Brucellas pero produce malestar general, nauseas, escalofros, dolor de cabeza y de garganta, linfoadenopata y perdida de peso Diagnstico: AGID, SAP, SAT Tratamiento: son largos (mas de 1 mes) en altas dosis (rifampicina, streptomicina, tetraciclinas, doxiclinas) y no siempre efectivos (para considerarse negativos deben tener 2 exmenes serolgicos negativos) Enfermedades Sin vacunas, se recomienda elde las Amricas Universidad sacrificio
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BRUCELLA CANIS RESUMEN


BRUCELOSIS CANINA ( B. canis )
Infeccin por Ingestin de descargas urogenitales contaminadas con Brucella ( descargas infecciosas durante 4 - 6 semanas) Transmisin venrea --> Semen contaminado No muestran sntomas clnicos. Infeccin durante gestacin puede producir Aborto ltimo trimestre Despus de 1 - 3 abortos --> Infertilidad Machos ocasionalmente epididimitis y orquitis, dermatitis escrotal Fuente potencial de infeccin para animales y hombre

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Brucelosis
Bovinos: Zoonosis, delas parsonas enfermas un 80% de los casos son MV, el problema es que se elimina tambin por parto normal, manipulacin del feto, manos, palpaciones, infeccin en conjuntiva, mataderos, ordeadores, consumo de quesos frescos sin maduracin (no el quesillo ni queso chanco) o con leche sin pasteurizacin, en el laboratorio. Produce una fiebre alta ondulante o en serrucho en fase aguda, escalofros, dolor de cabeza, GRAVE, difcil y largo tratamiento (30-40das), recordar que la Brucella es intracelular, la mayora de los casos son por abortus y luego por canis (menos graves) Se ubica en ganglios uterinos produciendo aborto, orquitis, epididimitis y osteomielitis.
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Brucelosis
Brucella ovis no afecta al hombre, es de carneros y ovejas, y ocasionalmente en caprinos Brucella neotomae: en roedores, (eventualmente hombre) La Brucella no se transmite entre humanos Brucella melitensis: No en Chile (trabajo de Valdivia), zoonosis (preferentemente afecta a las cabras a veces a bovinos y cerdos) Brucella ovis: en todo el pas (15-17% de los machos y 2% de las hembras) Equinos: 8% con B. abortus

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Brucelosis
Transmisin: (vara segn B) BRUCELOSIS BOVINA ( B. abortus ) en bovinos, a veces en caballos, ingresa por va oral (agua, alimento) o por semen (por IA y no por monta natural debido a la flora de competencia) (B. canis y suis s porque el depsito del semen es intrauterino, son zoonosis), por la leche al ternero (calostro con Ac sin problemas o portadores primer parto aborto) (la proteccin es bsicamente celular) ganglios de la cabeza y de ah por la circulacin se elimina por todas las secresiones. Tambin se aloja en los ganglios (mesentricos, mamarios y otros) y reaparece segn estado inmune (B. canis: repetidas reapariciones) como en la gestacin aborto ( generalmente Enfermedades la primera infeccinde las Amricas Universidad luego solo lo transmite a la cra) aborto en
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BRUCELOSIS BOVINA ( B. abortus )
Infeccin por Ingestin de alimentos contaminados, agua, placentas y fetos abortados de vacas infectadas --> infectan otras especies --> perros consumen restos de abortos bovinos Terneras y vacas: bacterias crecen lentamente in vivo, excepto en tero grvido despus del 5 mes de gestacin Placenta y fluidos fetales --> estimulan la multiplicacin rpida--> presencia de Eritritol. Aborto despus del 5 mes, nacimiento ternero normal o dbil --> eliminacin de Brucella despus del parto Secuelas: retencin de placenta y metritis --> Infertilidad Toros: Orquitis y epididimitis.
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Brucelosis
los animales prepberes no son susceptibles queda en ganglios y reaparece en primer parto de la ternera BRUCELOSIS OVINA ( B. ovis ) se transmite diferente, no afecta al hombre, explotacin con todos los machos juntos, por va orina, semen y montas. (Transmisin venrea --> Coito con semen contaminado) Las hembras se pueden infectar tambin por va oral Alteracin del semen, epididimitis, destruye espermios por la produccin de anticuerpos anti espermios, vesiculitis seminal y anormalidades espermticas en carneros; en ovejas el efecto ms frecuente es falla reproductiva, muerte embrionaria y abortos espordicos. La mayor parte de las infecciones son subclnicas
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Examen Testicular

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BRUCELOSIS EQUINA ( B. abortus )
Infeccin por Ingestin de alimentos contaminados, agua, placentas y fetos abortados de vacas infectadas directamente realcionado con el contacto con bovinos infectados Bacterias se localizan en bolsas sinoviales, tendones, y articulaciones ---> Fstula de la cruz y lcera de la nuca lesiones crnicas de drenaje Aborto es raro.

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BRUCELOSIS PORCINA ( B. suis )
Infeccin por Ingestin de descargas tracto genital de hembra contaminado con brucelas. Transmisin venrea --> coito con semen contaminado. Cerdas abortan 2- 3 mes --> eliminacin de Brucella por 1-2 aos Aborto o nacimiento de fetos dbiles Verracos --> Lesiones testiculares y glndulas anexas --> con eliminacin de Brucella por semen durante toda su vida (tambin por orina). Muchas infecciones son subclnicas, aunque la bacteremia pueda persistir durante meses o aos. Infertilidad frecuente.
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RESISTENCIA
Todas las especies clsicas son igualmente resistentes a los desinfectantes qumicos pueden sobrevivir hasta 6 meses en el ambiente si existen condiciones favorables pueden resistir 4 horas a la exposicin solar directa, 5 das en orina, 10 das en leche refrigerada y suelos hmedos, 45 das en carnes saladas, 75 das en fetos abortados Sensibles a Tetraciclina, Estreptomicina, Gentamicina, CAF, Sulfonamidas, Neomicina Resistentes a Penicilina Especialmente sensibles a combinacin Tetraciclina - Estreptomicina y Tetraciclina - Gentamicina
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DIAGNOSTICO DIRECTO
Tinciones especficas Tincin de Stamp ( Ziehl Neelsen modificado ) --> Carbofucsina , Acido actico, Azul de Metileno Medios de cultivo requiere medios ricos como Agar triptosa por estar las muestras generalmente muy contaminadas se utilizan medios selectivos como --> Agar Brucella, Medio de Farrel y Medio Thayer Martin modificado
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Muestras leche exudado vaginal productos del aborto ( cotiledones, membranas fetales ) feto abortado ( contenido estomacal, pulmn y bazo ) Inoculacin experimental inoculacin va IP o SC en cobayos --> se sacrifican a 3 - 6 semanas aumento volumen de ganglios, hgado con lesiones necrticas, hipertrofia del bazo abscesos testiculares, epididimitis --> cultivo puro

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INDIRECTO
deteccin de anticuerpos especficos en suero, plasma y otros lquidos orgnicos ( leche, plasma seminal, mucus vaginal, etc )

PRUEBAS DE AGLUTINACION --> detecta Brucella Lisas 1.1. Pruebas Sreening Seroaglutinacin lenta en tubo (SAT ) -->antgeno diluido,detecta IgM y IgG Rosa de Bengala: antgeno teido, pH 3.65 Aglutinacin en placa --> antgeno tamponado ( pH 3.8 ) Ring Test --> prueba de masa ( leche--> hasta 150 vacas ), antgeno teido con Hematoxilina --> detecta IgM, IgA
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1.2. Pruebas complementarias Prueba aglutinacin con 2-mercapto-etanol Prueba de Rivanol- ->elimina IgM Las Pruebas de aglutinacin presentan reaccin cruzada con Yersinia enterocoltica, Vibrio, Campylobacter, Pasteurella, Salmonella, Moraxella y Acinetobacter --> por compartir LPS de pared celular PRUEBA DE FIJACION DEL COMPLEMENTO: detecta IgG1, IgM PRUEBAS DE PRECIPITACION Inmunodifucin radial, Inmunodifusin doble, Contra Inmuno Electroforsis ELISA --> detecta animales en las primeras etapas de infeccin, eliminacin de falsos positivos debido a exposicin de antgenos que presentan reaccin cruzada
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Brucelosis
PCR Animales no se tratan (serologa, costo, garanta)--- matadero

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Brucelosis
Vacunas: Antes en Chile: Cepa 19 en bovinos, en terneras de 3-8 meses, luego se puede en el adulto pero con dosis diluida en lugares con alta prevalencia, el problema es que interfiere con el diagnstico. 45/20: vacuna muerta Rugosa, protege contra B. ovis RE1: para B. melitensis ( no en Chile) S2 : cepa China RB51: Hoy en Chile : B. abortus 2308 cepa mutante (51 pasajes) resistente, seleccionada y clonada (1984), sin interferencia en diagnsticos por no sintetizar LPS de la cadena O Aplicada slo por MV acreditados, el que emite un certificado--SAG 9 Aplicacin en terneras 4-12 meses (10-34 X10 UFC/2 ml SC)
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Brucelosis
Aplicacin en mayores de 12 meses, dosis reducida (1 X10 UFC/2 ml SC) No vacunar 3 semanas antes de la faena y 1 sola vez en la vida ***ver pgina SAG****
ESTIMACION DE PERDIDAS ANUALES DIRECTAS CAUSADAS POR BRUCELOSIS Clculo realizado con una prevalencia de 2.4% Leche no producida ITEM o (US$) 11.125.000 lts. US$2.250.000
9

Terneros no paridos 432.000 kg. US$432.000 Terneras no paridas 2.700 terneras US$945.000 Eliminacin prematura 3.000 hembras US$1.050.000 Enfermedades Universidad de las Amricas Total US$4.677.000 Infecciosas 2005

BRUCELLA Bovinos
SITUACION CHILENA XII Regin --> No registra predios positivos --> En va de demostrar su condicin libre XI Regin --> aprox. 1.1% de prevalencia V - X Regin --> aprox 2.4% prevalencia RM --> aprox 4.5 % de prevalencia PROGRAMA DE ERRADICACION Vigilancia --> accin en ferias, mataderos, plantas lecheras y predios adyacentes Saneamiento en rebaos infectados --> muestreo de masa susceptible, eliminar reactores positivos, Vacunacin hembras adultas con la Vacuna RB-51 Accin preventiva y Control de diseminacin de la enfermedad--> Enfermedades Universidad de las Amricas masa susceptible protegida --> Vacunacin terneras
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Vacunacin RB-51

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PREVALENCIAS
1976 PAIS 7,0 % VI R 3,2 % 1982 PAIS 2,94 VI R 2,16 1991 PAIS 2,4 VI R 1,5 %

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ERRADICACION
XII R :AO 2000 LIBRES LOS ULTIMOS PREDIOS INFECTADOS XI R : PROGRAMA EN EJECUCION VIGILANCIA : deteccin rebaos infectados (muestreos predios adyacentes a los identificados en estudio de prevalencia , deteccin en ferias y mataderos) SANEAMIENTO de predios infectados:muestreo serolgico y eliminacin de positivos a mataderos PREDIOS INFECTADOS :Vacunacin a rebao completo

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ERRADICACION ENTRE III Y X REGIONES


CARACTERISTICAS Activa participacin sector privado SAG Acredita Mdicos Veterinarios y laboratorios Realiza diagnostico Recopila y analiza informacin del proyecto Modifica estrategias Divulga , legisla y administra
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ERRADICACION ENTRE III Y X REGIONES


PRIVADOS Asumen los costos de eliminacin de animales reactores positivos, ( no hay indemnizacin ) Paga vacunaciones Paga exmenes diagnsticos.

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ERRADICACION ENTRE III Y X REGIONES LINEA DE ACCION


VIGILANCIA - Plantas lecheras y Centros de Acopio. Ringtest detecta rebaos lecheros infectados - Ferias Mataderos

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ERRADICACION ENTRE III Y X REGIONES LINEA DE ACCION


SANEAMIENTO REBAOS INFECTADOS - Muestreo masa susceptible Bengatest( Lab Acreditado o SAG) Confirmacion Fijacion de Complemento (Lab SAG) - Predio positivo:Vacunacin hembras adultas - Plan de Manejo Predial Eliminacin reactores positivos Chequeos posteriores hasta total negativos dos chequeos sucesivos

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ERRADICACION ENTRE III Y X REGIONES LINEA DE ACCION


ACCIONES PREVENTIVAS Y DE CONTROL DE DISEMINACION DE LA ENFERMEDAD -Vacunacin de terneras con vacuna RB 51.MVA La realizan los Mdicos Veterinarios Acreditados -Control de remates en predios -Control de movimiento hembras reaccionantes -Cuarentenas prediales

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ERRADICACION ENTRE III Y X REGIONES OTRAS LINEAS DE ACCION


Sistema Unico de identificacion de animales Mantencion y actualizacion de tecnicas diagnosticas Acreditacion de Mdicos Veterinarios y Laboratorios Perfeccionamiento personal Divulgacion Legislacion Sistema de informacin

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MUESTREO DE BOVINOS EN FERIA


Prestacion de Servicio Diagnostico en Feria pagado por los usuarios Laboratorio Diagnostico Brucelosis Tipo III provisto por la Feria y autorizado por SAG Realizado por un equipo a cargo de un M.V. Acreditado ( muestreador, laboratorista, registrador ) Supervisado por el SAG Comprende : colecta, identificacion, diagnostico , informe y comunicacin de resultados

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MUESTREO DE BOVINOS EN FERIA PROCEDIMIENTOS


Animales a muestrear: vacas,toros y vaquillas de dos dientes que no presenten certificado sanitario de Brucelosis Bovina Identificacion :tarjeta estndar SAG pegada en dorso Muestreo : Tubo al vacio identificado segn tarjeta , una aguja por animal, mnimo 2 cc de sangre

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MUESTREO DE BOVINOS EN FERIA PROCEDIMIENTOS


PROTOCOLO DE MUESTREO Numerados,original y dos copias( Lab Oficial,L.Feria N correlativo de la muestra Fecha N tarjeta Categoria animal Resultado Rosa de Bengala Propietario Nombre del predio Localidad Observaciones
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MUESTREO DE BOVINOS EN FERIA PROCEDIMIENTOS


DIAGNOSTICO PRUEBA : Rosa de bengala. Reactivo vigente PERSONAL:MVAcreditado o persona con formacion academica de laboratorio bajo responsabilidad de MVA

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MUESTREO DE BOVINOS EN FERIA PROCEDIMIENTOS


SUPERVISION Ferias y MVA deben dar facilidades para supervision SAG Muestras y copias de protocolos de resultado van a Lab Oficial para verificacion Muestras a Lab Oficial :Todas las Positivas % de las Negativas

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MUESTREO DE BOVINOS EN FERIA PROCEDIMIENTOS


EVALUACION DEL MUESTREO EXCELENTE : 100 % Aciertos ACEPTABLE : Igual o mayor a 96,6% NO ACEPTABLE : Inferior a 96,6 % Lab oficial visita Lab Acreditado para corregir problemas Si persiste el problema se retira acreditacion al Laboratorio

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