Estudio de un Biopreparado de Microorganismos Benficos como mejorador de suelos e inoculante en el desarrollo vegetal integrado de tomate (Licopersicon esculentum Mill)

bajo condiciones de invernadero. Jaime Lpez-Cervantes1, Dalia Snchez-Machado1, Mara Isabel Estrada-Alvarado1, Marco Antonio Gutirrez-Coronado1, Ofelda Peuelas-Rubio1, Catalina MungarroIbarra1 & Maritza Arellano-Gil1
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Direccin de Recursos Naturales, Instituto Tecnolgico de Sonora. Cd. Obregn, Sonora, Mxico. marellano@itson.mx

Resumen Como parte de las actividades del Cuerpo Acadmico de Biotecnologa y Productos Naturales se llevan a cabo proyectos de investigacin que responden a las necesidades de la regin y considerando la problemtica de los suelos agrcolas por las incontroladas aplicaciones de productos qumicos y el auge de la comercializacin de productos orgnicos se han estudiado estrategias de balance de las poblaciones microbiolgicas en el suelo para mejorar la calidad de ste y favorecer el crecimiento y desarrollo de la planta libre de pesticidas. En este sentido en la presente investigacin se evalu la aplicacin al suelo de cuatro tratamientos (0, 1, 2 y 4 ml l-1) de un Biopreparado de Microorganismos Benficos (BMB) en etapas jvenes del cultivo de tomate bajo condiciones de invernadero. Las variables evaluadas fueron altura, volumen radical, biomasa area para las plantas y anlisis fisicoqumico y microbiolgico al suelo. Los tratamientos de 2 y 4 ml l-1 de BMB favorecieron las variables de desarrollo vegetativo del cultivo superando en 20% en algunos casos al testigo; el suelo se vio favorecido tambin con la dosis ms alta (4 ml l-1 de BMB) mejorando en ms de 40% las caractersticas fisicoqumicas y microbiolgicas del suelo sin aplicacin. Introduccin Conforme van pasando los aos se hacen ms evidentes los daos que causa el uso indiscriminado e inconsciente de fungicidas, plaguicidas y fertilizantes qumicos; provocando efectos negativos y acumulativos en suelo, plantas, animales y el hombre. Segn Scheuerell (2003) las plantas se pueden ver beneficiadas con el uso de microorganismos para el control de plagas y enfermedades, ya que se generan en especial dos tipos de interacciones benficas para la planta: inhibicin por competencia y amensalismo. Una alta concentracin de microorganismos en el suelo facilita el desplazamiento de nutrientes especialmente los inmviles (calcio) y la conservacin de la humedad favoreciendo a la planta para un mejor desarrollo; por lo tanto si el agricultor disminuye el volumen de insumos como son los fertilizantes, gracias al manejo de microorganismos, el medio ambiente se ver beneficiado por la disminucin

de uso de productos inorgnicos que desequilibran los procesos biolgicos (Alexander, 1980). La presente investigacin est dirigida a determinar el efecto mejorador del suelo que tiene la aplicacin de CMB Bacto, CMB Fungi, Biomedia y Antiagallas integrados en un Biopreparado de Microorganismos Benficos (BMB) sobre el Desarrollo Vegetal Integrado de hortalizas de importancia econmica de la regin sur de Sonora. Fundamentacin Terica Las prcticas agrcolas llevadas a cabo durante dcadas, en las cuales se ha hecho una explotacin exhaustiva del recurso suelo, aunado a la adicin excesiva de fertilizantes y agroqumicos, han conducido a un desequilibrio de la ecologa microbiana del suelo (Terry et al., 2005), lo cual se manifiesta en aspectos fsicos, qumicos y biolgicos (desequilibrio ecolgico de la microflora del suelo, disminucin en la eficiencia de mineralizacin y humificacin de la materia orgnica del suelo e incremento en la incidencia de enfermedades radiculares) (Daz et al., 2001; Santillana, 2006). Enfocados en ste ltimo y partiendo de que en un suelo sano todos los organismos que la planta requiere deben estar presentes y activos, se han utilizado diversas estrategias basadas en los beneficios que brindan las adiciones aisladas de ciertos microorganismos como Azotobacter (Martnez-Viera et al., 1997), Pseudomonas sp. (Santillana, 2006), Trichoderma (Jimnez, 2001), Azospirillum (Terry et al., 2005) y Rhizobium (vila et al., 2005); sin embargo, la recuperacin de la biodiversidad de los suelos cansados o tecnolgicamente agotados se da cuando las poblaciones logran auto regularse y esto sucede cuando se tiene aplicacin de diversos gneros y especies de la biologa del suelo los cuales estn incluidos en productos como compostas, o t de composta enriquecidos.

Mtodo El experimento se llev a cabo en el invernadero del Instituto Tecnolgico de Sonora, en Ciudad Obregn, Sonora. Se evaluaron cuatro tratamientos (0, 1, 2 y 4 ml l-1 de BMB) con 10 repeticiones cada uno, bajo un diseo simple completamente al azar. Se utiliz el sofware Statgraphics PLUS 4.0 para determinar los anlisis de varianza y Tukey (p<0.05) para comparar las medias. Establecimiento del cultivo El experimento se llev a cabo bajo condiciones de invernadero con plantas de tomate, se sembraron de tres a cinco semillas en macetas de 1 L de capacidad conteniendo suelo agrcola caracterstico de la regin. Los tratamientos se aplicaron simulando aplicacin en el agua de riego con 100 mL por maceta. Para elaborar el biopreparado se mezclaron 10 mL de CMB Fungi, 10 mL de CMB Bacto y 20 g de Biomedia por cada Litro de BMB y se aire con bomba de pecera durante 12 h como mnimo. Los tratamientos se aplicaron al momento de la siembra y a los 15 y 30 das despus, para ser evaluados a los 45 das despus de la siembra. Parmetros evaluados Altura. Se midi la altura de la planta desde la base del tallo hasta el punto de crecimiento ms alto cada cinco das con cinta mtrica. Volumen radical. Se introdujeron las races cortadas y lavadas en una probeta graduada con cierta cantidad de agua y se midi la cantidad de lquido que desplaza la raz. Peso de materia seca. Se seccionaron cada una de las unidades experimentales en hojas y tallos, se colocaron en bolsas de papel independientes y etiquetadas y se secaron en horno a 70 grados centgrados por 48 horas. Se extrajeron del horno y se midi el peso seco de cada rgano en una balanza analtica. Anlisis de pasta saturada. Se tom una muestra de 50 g del suelo contenido en cada maceta y se obtuvieron 3 muestras compuestas de cada

tratamiento para efectuar anlisis fsico-qumico de suelo (salinidad y fertilidad). Conteo de hongos y bacterias en suelo rizosfrico. Se colect el suelo adherido a las races de cada planta y se obtuvieron 3 muestras compuestas de cada tratamiento, se utiliz la tcnica de epifluorescencia para cuantificar biomasa de hongos y bacterias totales y activos. Resultados y discusin Altura. El anlisis de varianza para esta variable no present diferencia significativa entre tratamientos, sin embargo, como se observa en la figura se present un desarrollo aceptable de las plantas a lo largo de las ocho mediciones evaluadas, (Vase Figura 1).

TRATAMIENTOS: 1. Testigo; 2. BMB 10 L/Ha; 3. BMB 20 L/Ha; 3. BMB 40L/Ha.

Figura 1. Evaluacin de BMB en altura de tomate bajo nueve fechas de medicin.

En la altura final, el tratamiento 4 (BMB 40L/Ha) fu 4.9% mas alto que el testigo sin aplicacin. Es bien conocido que un considerable nmero de bacterias y hongos que colonizan la raz poseen relacin funcional y constituyen un sistema holstico con las plantas y el suelo. Estas son capaces de producir efectos benficos sobre el crecimiento vegetal (Vessey, 2003), lo que est asociado con un incremento de elementos qumicos disponibles la produccin de sustancias de crecimiento de control de patgenos (Reyes y Valery, 2007). El efecto positivo de la aplicacin de microorganismos se ve reflejado en estudios similares a este, como el realizado por

Carrillo-Castaeda et al. (2000), donde inocularon Pseudomonas fluorescens en plantas de tomate (Lycopersicon esculentum Mill) debido a que encontraron resultados interesantes en cuanto a la elongacin de la planta, ya que stas alcanzaron 90 cm, mientras el testigo sin inocular alcanz 81 cm, es decir, superaron al testigo con 11% aproximadamente. Volumen radical. El anlisis estadstico realizado no mostr diferencias estadsticas significativas, sin embargo, los tratamientos con aplicacin de BMB fueron mayores que el testigo: el tratamiento 2 (BMB 10L/Ha) lo super con 34.4%, el 3 (BMB 20L/Ha) con 53.1% y el 4 (BMB 40L/Ha) con 62.5% (vase Figura 2).
12 10.4

9.8 8.6 6.4

Volumen radical (ml)

10 8 6 4 2 0 1

Tratamientos
TRATAMIENTOS: 1. Testigo; 2. BMB 10 L/Ha; 3. BMB 20 L/Ha; 3. BMB 40L/Ha.

Figura 2. Evaluacin de BMB en el Volumen radical de tomate.

Carrillo-Castaeda et al. (2000), inocularon diferentes aislamientos de Pseudomonas fluorescens en plantas de tomate, y no encontraron diferencias entre tratamientos al evaluar la variable de longitud de raz, caso contrario a lo ocurrido en el presente experimento, dichos resultados corroboran que algunos de los microorganismos presentes en BMB como Pseudomonas, pueden promover el crecimiento de las plantas va produccin de siderforos extracelulares que secuestran xidos frricos para convertirlos en formas disponibles para las races, adems que incrementa el volumen radical (Daz et al., 2001). Soberanes (2008) observ que el volumen radicular en plantas de zanahoria al aplicar un biopreventivo radicular a base

de Bacillus y Pseudomonas se vio favorecido, mostrando efectos que presentaron una diferencia altamente significativa entre tratamientos, superando al testigo con 110%. Peso seco areo. Estadsticamente, el anlisis para esta variable present diferencias significativas, donde el tratamiento 3 (BMB 20L/Ha) super con 51.2% al testigo. Los tratamientos 2 (BMB 10L/Ha) y 4 (BMB 40L/Ha) fueron mayores con 17.9% y 14.1% respectivamente. Las medias para cada tratamiento se muestran en la Figura 3.

TRATAMIENTOS: 1. Testigo; 2. BMB 10 L/Ha; 3. BMB 20 L/Ha; 3. BMB 40L/Ha.

Figura 3. Evaluacin de BMB en peso seco areo de tomate.

Pea y Reyes (2007), aislaron y evaluaron bacterias de importancia agronmica, donde al medir el efecto de la inoculacin de stas en forma aislada y en consorcio sobre el crecimiento de lechuga, este increment el peso seco de la planta presentando diferencias estadsticamente significativas en relacin al testigo. Seplveda (2007), comprob que la concentracin recomendada de un biopreparado a base de Pseudomonas y Bacillus es de 0.016 mL/planta, ya que en su trabajo esta dosis demostr un incremento en el peso seco areo en plantas de brcoli, superando al testigo con 25%. Anlisis fisicoqumico. El suelo analizado segn los resultados es pobre en cuanto al contenido de materia orgnica, ya que el rango aceptable es de 5%, sin embargo, haciendo la comparacin entre los tratamientos, T4 (BMB 40 L/Ha)

increment 62% su contenido respecto al testigo sin aplicacin, como lo muestra la Figura 4 (c), seguido por T3 (20 L/Ha) que present un incremento de 31% sobre el testigo (Figura 4). De suma relevancia es este comportamiento ya que para lograr aumentos de materia orgnica utilizando otros medios, como la aplicacin de gallinaza o estircol, se requeriran toneladas de producto. Estos resultados representan un avance debido a las caractersticas del suelo evaluado, como el grado de compactacin y erosin que presenta. Numerosos estudios coinciden en que la materia orgnica, es el principal indicador e indudablemente el que posee una influencia ms significativa sobre la calidad del suelo y su productividad. La descomposicin de la materia orgnica produce CO2 que forma H2CO3 en el suelo. Este aumenta la solubilidad de muchos compuestos del suelo aumentando as el aprovechamiento de nutrientes (Ortiz y Ortiz, 1980).

a)

450 400 350 300 250 200 150 100 50 0

1 2 3 4

380

b)

70 60 50 40

54.8

35.2 25.5 32.5

1 39 94 56

30 20 10 0

c)

d)
1.5

14 12 10 8

1 .25 1 .01 0.77 0.52

1 .1 15 9.43 6.89 7.48

1.0

6 4 2

0.5

0.0
1 2 3 4

0
1 2 3 4

e)

1.5

18 .1
1.0 0.5

f)
0.79 0.69

8 6 4 2

7.3 5.7 4.1 5.9

0.83

0.0
1 2 3 4

0
1 2 3 4

Tratamiento s

Tratamiento s

TRATAMIENTOS: 1. Testigo; 2. BMB 10 L/Ha; 3. BMB 20 L/Ha; 3. BMB 40L/Ha. a) Nitrgeno ntrico; b) fsforo; c) materia orgnica; d) porcentaje de sodio intercambiable (PSI); e) conductividad elctrica (C E); f) conductividad hidrulica (CH)

Figura 4. Anlisis fisicoqumico de suelos tratados con BMB.

Segn Silva (2005), la materia orgnica incide directamente sobre propiedades edficas, como estructura y disponibilidad de carbono y nitrgeno, considerando a este ltimo como el principal elemento que influye en el desarrollo vegetal. Relacionando las variables evaluadas con los resultados fisicoqumicos del suelo, T4 (BMB 40 L/Ha) fue el tratamiento que mostr mayores ndices de altura en los cultivos de tomate, pepino y cebolla, as como rea foliar ms grande comparada con el testigo en cebolla y chile. Como se muestra en la Figura 4 (a), T4 (BMB 40 L/Ha) present mayor asimilacin de nitrgeno ntrico, lo que se traduce en mayor aprovechamiento de este nutriente por las plantas. En cuanto al porcentaje de sodio intercambiable (PSI), T3 (BMB 20 L/Ha) y T4 BMB (40 L/Ha) presentaron 27% y 21% menos que el testigo, como se observa en la Figura 4 (d). Este comportamiento es de suma relevancia ya que el sodio es uno de los iones que ms favorece a la degradacin del suelo, produciendo problemas de filtracin en los mismos. Esta situacin da lugar a una dispersin de los agregados y a una prdida de la estructura, que dificulta la circulacin del aire y agua, por lo que el suelo adquiere un aspecto polvoriento y amorfo, perdiendo rpidamente su permeabilidad (Porta et al., 2003). Dichos resultados se relacionan con los estimados para la conductividad elctrica, ya que T3 (BMB 20 L/Ha) y T4 (BMB 40 L/Ha) presentaron valores por debajo del testigo: 5% y 17% respectivamente. En la misma tendencia se observa en la Figura 4 (e) que estos dos tratamientos (T3 y T4) lograron aumentar la conductividad hidrulica 4 y 28% con respecto al testigo. Este acontecimiento presenta suma importancia ya que dentro de los parmetros que determinan la eficiencia del drenaje de agua en suelos el ms importante es la conductividad hidrulica, debido a que esta determina la facilidad con que el agua se mueve en el suelo, hecho fundamental para el crecimiento y desarrollo de las plantas, como tambin para la recuperacin de los suelos sdicos.

Anlisis microbiolgico. Con respecto al anlisis microbiolgico realizado a las muestras de suelo de los tratamientos evaluados, la Figura 5 (a) muestra las medias donde se observa que T3 (BMB 29 L/Ha) y T4 (BMB 40 L/Ha) superan cinco veces el contenido de hongos del testigo sin aplicacin de BMB. En cuanto a las bacterias encontradas en las muestras de suelo, T4 (BMB 40 L/Ha) increment el contenido de bacterias totales en 242% con respecto al testigo sin aplicacin, como se aprecia en la Figura 5 (a); mientras que T3 (BMB 20 L/Ha) increment el nmero de bacterias con 61% sobre el testigo; dicho comportamiento se presenta en la Figura 5 (b). En la Figura 5 (a y b) se observa que el nmero de microorganismos es directamente proporcional a la concentracin de BMB. Haciendo relacin con el anlisis fisicoqumico, hay un efecto de las propiedades de ste (nivel de materia orgnica, conductividad elctrica y conductividad hidrulica) sobre la vida y actividad microbiana. Ortz y Ortiz (1980) describen que los microorganismos del suelo y sus clases son altamente influenciados por los niveles de materia orgnica en el suelo. La mayora de los microorganismos derivan su energa de los compuestos del carbono en la materia orgnica y sta favorece las relaciones adecuadas entre aire-humedadmicroorganismos a travs de su efecto en la estructura del suelo.
a)
20 17.0 15 11.6 10 16.0

b)
45 40 35 30 25 20 15 5 2.7 10 5 0 1 2 3 4 0 1 2 3 4 11.4 18.3 18.4 39.0

Tratamientos
TRATAMIENTOS: 1. Testigo; 2. BMB 10 L/Ha; 3. BMB 20 L/Ha; 3. BMB 40L/Ha. a) Bacterias totales; b) Hongos totales

Tratamientos

Figura 5. Anlisis microbiolgico de suelos tratados con BMB.

Conclusiones La aplicacin de BMB mejor la calidad del suelo evaluado, ya que provoc cambios en su fertilidad (vista como contenido de materia orgnica). Con el aumento logrado en el aspecto microbiolgico, se inici la mejora en la relacin microorganismos-suelo-planta, ya que los primeros hicieron ms disponibles los nutrientes para la planta, provocando un mejor desarrollo vegetativo que el testigo sin aplicacin. Se mejor no slo el aspecto biolgico del suelo, sino tambin las propiedades fisicoqumicas relacionadas directamente con el desarrollo de los cultivos. El empleo de BMB es una opcin para mejorar la calidad del suelo y evitar el deterioro de los ecosistemas agrcolas. Referencias Alexander, M. (1980). Introduccin a la microbiologa del suelo. EGT Editors. 27, 3638,64-66, 73, 101-103, 109-111, 429-430, 433-434 p. vila, N., Murillo, B., Palacios, A., Troyo, E., Garca, J., Larrigana, J. & Mellado, M. (2005). Caracterizacin y obtencin de funciones para produccin de biomasa de cinco cultivares de frjol Yorimn: I. Mtodo destructivo. Tcnica Pecuaria en Mxico 43(3): 449-458. Carrillo-Castaeda, G., Jurez, J., Ruiz, D. & Mller, R. (2000). Aumento del rendimiento de tomate (Lycopersicon esculentum Mill) cuando la raz se desarrolla colonizada por microorganismos. Biotecnologa Aplicada 17(3). pp. 174 Daz, P., Ferrera-Cerrato, R., Almaraz-Surez, J. & Alcntar, G. (2001). Inoculacin de Bacterias Promotoras de Crecimiento en Lechuga. Terra 19(4): 327-335. Jimnez, R., Calleros, G., Tabares, S. & Olalde, V. (2001). Bacterias promotoras del crecimiento de plantas: agro-biotecnologa. Avance y Perspectiva 20: 395-400. Martnez-Viera, R., Dibut, B., Casanova, I. & Ortega, M. (1997). Accin estimuladora de Azotobacter chroococcum sobre el cultivo del tomate en el suelo Ferraltico Rojo. I. Efecto sobre los semilleros. Agrotecnia de Cuba 27(1): 23-26. Ortiz, V. & Ortiz, C. (1980). Edafologa. (3a. ed.) Chapingo, Mxico: Imprenta Universitaria-UACh.

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