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5. Processos Bioinorgnicos

5.1. Metais de Transio: Transporte e Armazenamento de Oxignio

As protenas envolvidas no processo de transporte e armazenamento de oxignio (O
2
) so a
mioglobina (Mb) e a hemoglobina (Hb), ambas estruturalmente caracterizadas e contendo o grupo
protoporfirina (IX) (heme), como centro prosttico essencial e o on ferro como o centro metlico
(Figura 17).

Figura 17. Grupo ferroprotoporfirina IX ( heme) da mioglobina e hemoglobina.

A funo de cada uma das protenas depende da reversibilidade em relao ligao com o
O
2
, mas as suas funes biolgicas so diferentes. A mioglobina armazena o oxignio no tecido
celular, enquanto a hemoglobina transporta o O
2
no plasma sanguneo (Figura 18).


Figura 18. Esquema representativo do armazenamento e transporte do oxignio no organismo.

A estrutura da molcula de mioglobina apresenta um grupo heme e a hemoglobina uma
protena contendo multisubunidades, sendo duas cadeias o e duas | de polipeptdios. Em cada
cadeia existe um grupo Fe-protoporfirina IX (Figura 17) e, portanto, h 4 grupos heme. No grupo
2
heme, o on ferro se encontra coordenado a quatro nitrognios do anel porfirinico e um do grupo
imidazol de uma histidina (Figura 19). Considerando o nmero de grupos heme presente nessas
protenas, a mioglobina e hemoglobina se coordenam, respectivamente, a uma e a quatro molculas
de oxignio (Figura 19).

Figura 19. Representao da unidade funcional da hemoglobina e da mioglobina. A espcie no
coordenada ao oxignio denominada deoxihemoglobina e a aquela coordenada denominada
oxihemoglobina.

As equaes qumicas (Equaes 11 a 15) que representam o processo envolvido no
transporte e armazenamento de oxignio so apresentada a seguir:

Como descrito na mioglobina e hemoglobina o on ferro se encontra coordenado a cinco
tomos de nitrognio, portanto est coordenativamente insaturado. Assim possvel se ter um
aumento do nmero de coordenao, fato que ocorre ao coordenar a molcula de O
2
(Figura 19).
3
Os termos deoxihemoglobina ou deoximioglobina se referem as protenas no estado reduzido.
Os estudos das estruturas para essas espcies indicam que na Hb-Fe(II), o Fe(II) se encontra
deslocado 0,36-0,40 e, na Mb-Fe(II), o valor de 0,40 para fora do plano do anel.
Os termos oxihemoglobina ou oximioglobinas se referem s protenas no estado oxidado, isto
, com oxignio coordenado. Os estudos das estruturas para essas espcies indicam que na Hb-Fe-
O
2
e Mb-Fe-O
2
o Fe(III) se encontra deslocado cerca de 0,12 para dentro do plano do anel.

E como explicar a coordenao do O
2
ao on ferro?

Para avaliar a ligao qumica do O
2
ao on ferro, deve-se lembrar que esse processo se
refere a uma reao cido-base de Lewis. A representao da estrutura de Lewis da molcula de O
2

ilustra a existncia de pares de eltrons no ligantes, portanto atua com base de Lewis. O on
ferro(II), com configurao eletrnica [Ar] 3d
6
, apresenta orbitais d incompletos, logo atua como
cido de Lewis.
O O
2
uma base de Lewis, mas pode atuar como doadora de par de eltrons e,
simultaneamente, receptora de densidade eletrnica. Para entender isso, necessrio analisar o
diagrama de orbitais moleculares para o O
2
(Figura 20).


Figura 20. Representao do diagrama de orbitais moleculares para a molcula de oxignio.

O tomo de oxignio tem seis eltrons na camada de valncia, logo no O
2
h um total de 12
eltrons que devem ser distribudos nos orbitais moleculares o e t, representados na Figura 20.
Tem-se que os orbitais moleculares preenchidos e de maior energia so os orbitais o
2p
e t
2p
. Assim,
o O
2
pode doar um dos pares de eltrons desses orbitais moleculares, provavelmente, o que se
encontra no orbital molecular de maior energia (t
2p
), para o on ferro. Nos orbitais t
2p
*, tem-se um
4
eltron em cada, de modo que eles so os orbitais moleculares incompletos de menor energia. Por
meio desses orbitais t
2p
*, o O
2
pode receber densidade eletrnica do on ferro.
Com base nas informaes citadas pode-se concluir que, na ligao Fe(II)O
2
alm, da
ligao o, O
2
Fe(II), forma-se tambm a ligao t, Fe(II)O
2
. A Figura 21 mostra uma
representao dessa interao, na qual o on ferro e o O
2
atuam ambos como cidos e bases de
Lewis.

Figura 21. Representao da interao entre os orbitais do centro metlico e os orbitais da molcula
de oxignio.

Tanto na hemoglobina como na mioglobina existe uma molcula de histidina situada
relativamente prxima da molcula O
2
, a qual forma uma ligao de hidrognio entre o oxignio
coordenado e o prton do grupo NH da histidina. A unidade Fe-O-O-H-N acomodada de forma tal
que, resulta em uma estrutura deformada da molcula O
2
. Essa disposio contribui para a fora da
ligao FeO
2
.

CO interfere no processo e armazenamento de O
2
?

A representao da estrutura de Lewis da molcula de CO ilustra a existncia de pares de
eltrons no ligantes, de modo que ele pode atuar como base de Lewis e, portanto, coordenar-se ao
on ferro(II).
A Figura 22 apresenta o diagrama de orbitais moleculares do CO. Distribuindo os 10 eltrons
de valncia presentes nesta molcula, conclui-se que os orbitais t* se encontram vazios. Portanto,
tal como o O
2
, o CO um ligante o-doador e t-receptor de eltrons.
5

Figura 22. Representao do diagrama de orbitais moleculares para a molcula de CO.

A Equao 16 representa a reao entre a molcula de CO e a mioglobina.

Mb(Fe
II
) + CO Mb(FeCO) K = 4,7 10
7
mol
-1
L Equao 16

Comparando os valores das constantes das reaes para formao dos complexos MbO
2
e
MbCO, observa-se que com monxido de carbono a extenso maior, logo o AG da reao mais
favorvel. Para explicar esse fato, necessrio avaliar os parmetros AS e AH, visto que AG = AH
TAS. A variao de entropia desfavorece o processo para ambos os casos na mesma extenso.
A variao de entalpia (AH) o parmetro que justifica a diferena entre as constantes em
discusso. A anlise do valor qualitativo do AH pode ser baseada na fora da ligao qumica Fe(II)
L (L = O
2
e CO). Essa ligao Fe(II)L, envolve a doao-o LFe(II) e a retrodoao-t Fe(II)L. O
orbital molecular o do CO, no qual est o par de eltrons que doado ao Fe(II), se encontra em um
nvel de maior energia do que o da molcula O
2
. Assim, CO um doador de par de eltrons mais
forte do que o O
2
.
O orbital molecular t* do O
2
, de menor energia do que o t* do CO, deste modo conclui-se
que O
2
um acceptor t de eltrons mais forte do que o CO. Porm importante lembrar que em
cada orbital t* da molcula de O
2
, h um eltron, o que provoca uma repulso maior e, como
resultado lquido, o CO um t acceptor mais forte que o O
2
. Essas informaes levam a uma
proposta fundamentada de que a ligao Fe(II)CO mais forte do que a ligao Fe(II)O
2
,
justificando assim a maior extenso da reao com o monxido e, portanto, a toxicidade deste gs.
6
Um estudo da estrutura do complexo contendo o monxido de carbono, a
carboxihemoglobina, mostra que a molcula de CO coordenada ao Fe(II), Fe(II)CO, encontra se
inclinada para longe do eixo de ligao N(histidina)Fe, evitando colises com o N no coordenado
da histidina (grupo NH). Essa disposio reflete na diferena entre a energia de ligao Fe(II)L( L =
O
2
e CO) e, como conseqncia, a diferena entre os valores das extenses das reaes
envolvendo Hb ou Mb com O
2
e Hb ou Mb com o CO, no to alta como esperada, ao considerar
somente a fora de L como base de Lewis para o cido Fe(II).
De grande importncia para as funes fisiolgicas da hemoglobina e mioglobina , sem
dvida, o sistema bioinorgnico sofisticado arquitetado pela natureza no qual a molcula de O
2
se
liga hemoglobina nos pulmes e transferida para a mioglobina nos tecidos ou transferida para a
hemoglobina fetal no tero de grvidas. O fundamental nesse processo o fato de o tomo de ferro
ter a liberdade de se mover para dentro e para fora do plano do anel da porfirina, o que lhe confere a
capacidade para reagir e liberar o O
2
, a depender da distncia do O
2
ao N-histidina.
Como proposta para a estrutura da hemoglobina, tem-se que esta protena apresenta duas
estruturas quaternrias distintas, designadas por R, que se refere a uma forma relaxada, e T que se
refere a uma forma tensa (Figura 23). A primeira tem alta afinidade pela molcula oxignio, como se
fossem subunidades isoladas. A forma tensa tem uma menor afinidade pelo O
2
. Essas formas se
encontram em equilbrio.

Figura 23. Representao das estruturas T e R da hemoglobina [KAIM, W e SCHWEDERSKI, B.
(1996)].

A forma T, que prevalece quando as quatro subunidades no esto coordenadas ao O
2
,
sugere que as interaes das subunidades bloqueiam o movimento das histidinas prximas, para
dentro do anel da porfirina e, assim, diminui a energia de ligao Fe-O
2
. Aps a ligao de duas
7
molculas O
2
hemoglobina, a estrutura quaternria se torna relaxada (forma R) o que facilita a
ligao das duas molculas O
2
remanescentes.
A questo chave nesse mecanismo que, aps a ligao do O
2
com o ferro, este on metlico
move-se para dentro do plano do anel da porfirina levando consigo a histidina, que se encontra
ligada ao O
2
atravs de ligao de hidrognio.
Dados experimentais indicam que na deoxihemoglobina o ferro se encontra no estado de
oxidao II, cujo raio covalente suficientemente grande para que possa se ajustar no plano, onde
se encontram os quatro tomos de N do anel. Por outro lado, na oxihemoglobina o estado de
oxidao do ferro III, sendo que o raio deste menor e, assim, o centro metlico move-se para
dentro do plano do anel.
O resultado final um ajuste fantstico na coordenao do centro metlico ao O
2
e, como
conseqncia, tem-se um sistema flexvel para ocorrer a ligao e liberao do O
2
, sob condies
biolgicas variadas. Tem-se que a hemoglobina apresenta uma afinidade mnima pelo O
2
em pH
entre 6 6,5 sendo, assim, destacam-se a necessidade do controle do pH em 7,4. Valores de pH
mais baixos favorecem a liberao do O
2
a partir da hemoglobina, facilitando a transferncia do O
2

do sangue para os tecidos.

5.2. Metais de Transio: Transferncia de eltrons e produo de energia no
organismo vivo

No organismo animal os metablitos como os carboidratos, lipdios e protenas so
degradados principalmente, nas suas unidades monomricas (glicose, cidos graxos, aminocidos,
etc) que so metabolizadas para a produo de energia. As necessidades energticas dirias de um
homem de 70 kg, em ocupao sedentria, so de aproximadamente 10000 kJ. A energia livre
padro proveniente da hidrlise do ATP de 30,5 kJ mol
-1
. Dessa forma, esse indivduo deve
hidrolisar o equivalente a 328 mol molculas de ATP, ou seja 165 kg de ATP por dia. No entanto, o
corpo contm somente cerca de 50 g de ATP. O clculo sugere que cada molcula de ATP seja
sintetizada e desfosforilada mais de 3000 vezes a cada 24 horas, para suprir as atividades do
organismo. O atendimento da maior parte dessas necessidades tem lugar na membrana mitocondrial
interna e realizada por dois sistemas acoplados: a cadeia mitocondrial transportadora de eltrons e
a fosforilao oxidativa. Portanto, dentro das mitocndrias se realiza o processo de extrao de
energia dos alimentos (respirao celular), que armazenada na molcula de ATP. o ATP que
fornece energia necessria para que as reaes qumicas no nosso organismo ocorram.
Em 1789, Armand Sguin e Antoine Lavoisier, escreveram: ...em geral, a respirao nada
alm de uma lenta combusto de carbono e hidrognio, inteiramente semelhante quela que ocorre
em um lampio ou em uma vela acesos e, deste ponto de vista, animais que respiram so
verdadeiros corpos capazes de combusto, que queimam e se consomem.
Lavoisier havia, nessa poca, demonstrado que animais vivos consomem oxignio e
produzem dixido de carbono. Entretanto, foi apenas no incio do sculo XX, com o avano da
8
enzimologia, que foi estabelecido que as oxidaes biolgicas so catalisadas por enzimas
intracelulares.
Entre as diversas reaes qumicas que ocorrem no nosso organismo, h um nmero
considervel delas envolvendo transferncia de eltrons, onde h espcies que so oxidadas e,
paralelamente, espcies que so reduzidas. No final da cadeia respiratria, os substratos orgnicos
reagem com o O
2
produzindo CO
2
. Sendo este substrato a glicose, a oxidao completa da mesma
pelo oxignio molecular apresenta uma variao de energia livre de Gibbs de 2823 kJ mol
-1

(Equao 17).

C
6
H
12
O
6
+ 6 O
2
6 CO
2
+ 6 H
2
O AG = 2823 kJ mol
-1
Equao 17

Neste processo tem-se a oxidao da glicose (Equao 18) e reduo do oxignio (Equao
19).
C
6
H
12
O
6
+ 6 H
2
O 6 CO
2
+ 24 H
+
+ 24 e- Equao 18
6 O
2
+ 24 H+ + 24e- 12 H
2
O Equao 19

A degradao da glicose at formao do piruvato, processo denominado de gliclise,
apresenta um G = 148 kJ mol
-1
. Portanto, nesta etapa do metabolismo, ocorre liberao de
somente 5,2% da energia total da que pode ser obtida por oxidao completa da glicose. Assim, as
duas molculas de piruvato formadas na gliclise, ainda retm a maior parte da energia disponvel na
molcula de glicose.
Para cada mol de glicose oxidada tem-se a produo de 38 mol de ATP (estudos revelam que
este valor deve ser inferior ou igual a 38 e superior ou igual a 32), portanto, uma fonte de produo
de energia. importante destacar que a reduo e oxidao em uma clula viva no ocorrem em
uma nica etapa, mas normalmente envolve vrios estgios. A Figura 24 representa o ciclo que
ocorre na cadeia respiratria.
9

Figura 24. Reduo do oxignio: processo que ocorre no final da cadeia respiratria.
A Figura 25 ilustra uma srie de mediadores de transferncia de eltrons em clulas
biolgicas, em pH igual a 7, envolvidas na reduo do O
2
.

Figura 25. Potenciais de reduo de algumas substncias envolvidas nos processos biolgicos.

A equao que representa a reduo do O
2
pode ser escrita como indicado na equao 20.

O
2
+ 4 H
+
+ 4 e

2 H
2
O E = 0,82 V Equao 20
10

De acordo com os valores de potenciais de reduo (Figura 25) tem-se que as espcies
redutoras mais fortes da cadeia, em determinadas clulas, se referem s ferrodoxinas (um grupo de
protenas que contm ferroenxofre).

O transporte de eltrons termodinamicamente eficiente!

A Figura 26 representa a cadeia transportadora de eltrons mitocondrial no organismo animal,
cuja seqncia de transferncia de eltrons termodinamicamente favorecida. Essa afirmao pode
ser ratificada onsiderando o processo de oxidao do NADPH (primeira espcie qumica redutora)
(Equao 21) e reduo do O
2
(Equao 22) e os respectivos valores de potencial. Neste caso tem-
se uma variao de potencial (AE) de +1,13 V, o que resulta em G= 218 kJ mol
-1
.

Figura 26. Representao da cadeia transportadora de eltrons mitocondrial.

O
2
+ 2 H
+
+ 2 e

2 H
2
O E = + 0,815 V Equao 21
NADH + H
+
NAD
+
+ 2 H
+
+ 2 e

E = + 0,315 V Equao 22

A energia livre padro necessria para a produo de ATP, a partir do ADP+Pi (fosfato
inorgnico), de 30,5 kJ mol
-1
. A energia livre padro para a oxidao do NADPH pelo oxignio, se
acoplada sntese do ATP, portanto suficiente para a produo de diversos mols de ATP. Esse
acoplamento alcanado por meio de uma cadeia transportadora de eltrons, na qual os eltrons
passam por trs complexos proticos. Os complexos proticos apresentam potenciais de reduo
crescente (Figura 27), assim os eltrons, so transferidos em etapas ao invs de passarem
Citocromo aa
3

11
diretamente ao O
2
. Isso permite que grandes variaes globais de energia livre sejam quebradas
em trs pacotes menores, cada um acoplado a sntese do ATP em um processo denominado de
fosforilao oxidativa.

Figura 27. Representao do fluxo de eltrons na fosforilao oxidativa.

Resultados experimentais da determinao da taxa de consumo de O
2
por uma suspenso de
mitocndrias (sem ADP e com fosfato livre) revelaram, aps insero de ADP, que a fosforilao no
processo de oxidao da NADH pelo oxignio leva produo de 3 mols de ATP. Neste caso, para
cada 90 mol de ADP adicionados ocorreu um consumo de 15 mol de O
2
, cuja razo 3. Para
FADH
2
tem-se 2 mols.
De acordo com os experimentos efetuados pode-se avaliar que a eficincia termodinmica da
fosforilao oxidativa para a oxidao do NADH considerando o gasto de energia para a produo de
ATP, a qual de 3 x 30,5 kJ mol
-1
. Visto que o G da reao (Equaes 21 e 22) 218 kJ mol
-1
,
logo tem-se um valor de 42%, em condies bioqumicas padro. Entretanto, acredita-se que em
condies fisiolgicas, na mitocndria ativa (em que as concentraes das espcies qumicas
matria prima e produtos bem como o pH, desviam das condies padro), essa eficincia
termodinmica seja de aproximadamente 70%.

Sequncia do transporte de eltrons

12
A energia livre para a produo do ATP por meio da fosforilao oxidativa proveniente da
oxidao do NADH e FADH
2
, por meio da cadeia transportadora de eltrons. Essa cadeia envolve
quatro complexos proticos, cuja seqncia envolve uma alterao dos potenciais de reduo a
qual justifica a posio dos mesmos na seqncia que o processo segue. A Figura 27 ilustra que a
transferncia de eltrons inicia com o complexo I (tambm chamado de NADH-coenzima Q
oxidorredutase ou NADH desidrogenase). O complexo I catalisa a transferncia de dois eltrons do
NADH (nicotinamida adenina dinucleotdeo) para a coenzima Q (ubiquinona) (Equao 23). As
principais fontes do NADH so as reaes envolvidas no ciclo do cido ctrico e a oxidao de cidos
graxos. Na composio do complexo I tem-se a FMN (flavina mononucleotdeo) e ferro-protenas
sem o grupo heme (Fe-S). Nesta etapa, como indicado na Figura 27, h produo de ATP.

NADH + CoQ
(oxidada)
NAD
+
+ CoQ
(reduzida)
AE = + 0,360 V AG = - 69,5 kJ mol
-1
Equao 23

importante destacar que o transporte de eltrons, como por exemplo, o envolvido na
primeira etapa, mais complexo do que o colocado; na realidade a transferncia de carga ocorre em
vrias etapas intermedirias. Os eltrons so transferidos inicialmente do NADH para FMN (ver
seqncia da Figura 26), para produzir FMNH
2
(Equao 24).

NADH + H
+
+ FMN NAD
+
+ FMNH
2
Equao 24

Na prxima etapa h transferncia de eltrons da FMNH
2
para uma srie de protenas Fe-S
(ferrodoxinas), cujos grupos mais comuns so 2Fe2S e 4Fe4S. O nmero de oxidao de on ferro
3+, logo pode ser reduzido pela FMNH
2
(Equao 25).

FMNH
2
+ 2 protena(Fe
III
S) FMN + 2 H
+
+ 2 protena(Fe
II
S) Equao 25

Em uma outra etapa as protenas FeS so reoxidadas pelo coenzima Q (ubiquinona) (Figura
26, Equao 26), um composto lipossolvel presente em todos os sistema vivos.



O complexo II (succinato-coenzimaQ oxidorredutase), cuja composio apresenta os grupos
redox FAD (flavina adenina dinucleotdeo), protenas Fe-S e citocromo b, catalisa a oxidao do
13
FADH
2
(produzido no ciclo do cido ctrico, via oxidao do succinato a fumarato) pela CoQ
(Equao 27).


Para a reao redox representada pela Equao 27, tem-se E = + 0,085 V, o que resulta em
G = 16,4 kJ mol
-1
. Esse processo no libera energia suficiente para sintetizar ATP, a reao
apenas contribui para transferir eltrons de FADH
2
na cadeia transportadora de eltrons.
O complexo III (coenzima Q-citocromo-c oxidorredutase ou citocromo bc1), catalisa a
oxidao da CoQ (reduzida) pelo citocromo c (Equao 28). O complexo enzimtico formado por
dois citocromos b, cujo centro redox o on ferro, um citocromo c (c
1
) e protena que contem Fe-
enxofre. Devido a essa composio, o complexo III denominado de citocromo bc
1
.

CoQH
2
+ 2 citocromo c(Fe
3+
) CoQ + 2 citocromo c(Fe
2+
) + 2 H
+
Equao 28

Para o referido processo que envolve o complexo III (Equao 28) tem-se um E = + 0,190 V
e G = 36,7 kJ mol
-1
,

nesta etapa h produo de ATP (Figura 28).

Figura 28. Representao esquemtica dos centros metlicos na citocromo oxidase
[PORTERFIELD, W. W., (1993)].

O complexo IV (citocromo c oxidase) um complexo protico que catalisa a oxidao do
citocromo c(reduzido) pelo oxignio molecular, o receptor final de eltrons no processo de transporte
14
de eltrons (Equao 29). O potencial de reduo Fe
3+/2+
no citocromo c de +0,235 V, assim o E =
0,580 V, o que resulta em um G = 112 kJ mol
-1
.
2 citocromo c
(reduzido)
+ O
2
2 citocromo c
(oxidado)
+ H
2
O Equao 29
Em resumo os eltrons so transportados dos complexos I e II para o complexo III pela
coenzima Q (ou ubiquinona) e do complexo III para o complexo IV pela protena perifrica da
membrana, citocromo c (Figura 27). As variaes de potenciais-padro de reduo de um par de
eltrons na medida em que ele sucessivamente atravessa os complexos I, III e IV correspondem, em
cada estgio, a uma quantidade de energia livre suficiente para prover a energia para a sntese de
um molcula de ATP.

Etapa Final da Cadeia Transportadora de Eltrons e o Metais de Transio

A enzima citcromo c oxidase, a qual constitui o complexo IV da cadeia transportadora de
eltrons mitocondrial, a espcie diretamente envolvida na reduo do O
2
. O processo de redox
representado pela equao 30.

4 cit c-Fe
2+
(c-oxidase) + O
2
+ 8 H
+
(int)
4 cit c-Fe
3+
(c-oxid) + 2 H
2
O + 4 H
+
(ext)
Equao 30

Essa enzima constituda pelos citocromos a e a
3
, os quais interagem com o citocromo c
(Figura 28). Nas estruturas dos citocromos, os centros metlicos so os ons ferro e cobre (Figura
28). Os potenciais redox Fe
3+/2+
, (vs eletrodo padro de hidrognio, EPH) para os citocromos a e a
3
,
b e c esto indicados no Quadro 3.

Quadro 3. Valores de potencial redox para os diferentes citocromos.
Citocromo E (V, vs EPH)
a + 0,200
a
3
+ 0,385
b + 0,03
c + 0,235

A fim de avaliar como a citocromo oxidase c atua, importante verificar que na cadeia
transportadora de eltrons tem-se como centros redox os citocromos. Os citocromos so protenas
transportadoras de eltrons caracterizados pela presena de um grupo heme (Figura 17) como grupo
protico. No decorrer do processo de transporte de eltrons h uma alterao do nmero de
oxidao do ferro, como exemplo de Fe
2+
para Fe
3+
e vice-versa. Os citocromos so classificados
pela natureza das cadeias laterais do grupo heme (Figura 12c) em trs classes principais,
denominadas de a, b e c.
15
Avaliando a Figura 25, verifica-se que o citocromo b antecede o citocromo c, ambos fazem
parte da composio do complexo III. No transporte de eltrons o citocromo b reduzido transfere
eltrons para o citocromo c.
Na constituio dos citocromos b e c, o cido de Lewis o on ferro se encontra coordenado
aos tomos de N do anel porfirnico e a dois tomos doadores dos aminocidos histidina e metionina,
portanto o nmero de coordenao igual a 6. No citocromo b, tem-se somente a histidina, cujo
tomo doador o nitrognio (Figura 29) e no citocromo c, tem-se a histidina e a metionina., cujos
tomo doador o enxofre (Figura 29).

Figura 29. Representao das estruturas dos aminocidos histidina e metionina, indicando o stio de
coordenao ao centro metlico.

A histidina e metionina so bases de Lewis doadores de par de eltrons e t acceptora de
densidade eletrnica, portanto so bases relativamente moles. O on Fe
2+
, comparado ao Fe
3+
, um
cido mole.

Como a citocromo c oxidase atua?

Nos citocromos a e a
3
, o Fe
2+
e Cu
1+
tm respectivamente, nmero de coordenao 5 e 4,
porm com uma diferena entre os potenciais de reduo como reflexo, dos diferentes grupos heme.
No citocromo c o Fe
2+
, como j colocado tem nmero de coordenao 6. Em todos os citocromos o
on ferro se encontra coordenado a 4 tomos de N do anel porfirnico. No citocromo c h mais duas
ligaes, sendo uma com o tomo de S da metionina e outra com o N da histidina. No citocromo a
3

h como ligante axial a histidina.
O mecanismo proposto para a reduo cataltica do O
2
na cadeia respiratria se encontra
representado na Figura 30. Na prtica ao citocromo a
3
que o O
2
se coordena.
16


Figura 30. Ciclo cataltico para reduo do oxignio no organismo: etapas envolvendo a citocromo
oxidase - c. [PORTERFIELD, W. W. (1993)].

Interpretando as etapas do ciclo cataltico

1) Na primeira etapa o O
2
, que uma base de Lewis o-doador e t-acceptor de eltrons, se
coordena aos centros metlicos Fe
2+
e Cu
1+
do citocromo a
3
, o qual, do mesmo modo que o
citocromo a, tem o on ferro com nmero de ccordenao 5. Nesses dois citocromos, o ferro se
encontra coordenativamente insaturado, visto que h possibilidade de ampliar este nmero para
6, como o caso do nmero de coordenao deste centro metlico, no citocromo c. Portanto,
nesta etapa tem-se reao cidobase de Lewis e, paralelamente, uma reao em que o O
2

reduzido e os centros metlicos so oxidados; como produto resulta a espcie a
3
- 2.

2) Na segunda etapa, o citocromo a cede um eltron para a
3
e h o envolvimento de 1 mol de H
+
,
o qual protona o oxignio que se encontra coordenado ao Cu
2+
, que um stio mais bsico do
que o oxignio coordenado ao Fe
3+
. Como conseqncia dessa protonao, a densidade
eletrnica entre os dois tomos de oxignio diminui, levando ao enfraquecimento da ligao

OO

a qual se rompe. Um dos tomos de oxignio reduzido a O


2
Como produto desta etapa
tem-se a espcie a
3
- 3.

Fe
2+
Cu
+
O
2
O O
Fe
3+
Cu
2+
e-
H
+
O
Fe
4+
Cu
2+
O
2-
H
-
e-
H
+
Fe
3+
Cu
2+
O
H
e-
Fe
3+
Cu
+
O
H
e-
H
+
H O
2
(1)
(a3-2)
( a3-3 )
H O
2
( a3-4 )
( a3-5 )
2
17
3) Na terceira etapa do ciclo, o citocromo c cede um eltron para a que cede a
3
, e h tambm a
participao de dois mols de H
+
. Para resultar na espcie (4), tem-se a formao de um
intermedirio, o qual tem os grupos OH

coordenados ao Cu
2+
e o O
2
coordenado ao on Fe,
ambos protonados. Das protonaes ocorridas h liberao de O e o eltron cedido reduz Fe
4+
a
Fe
3+
. Como base de Lewis coordenada aos dois centros metlicos tem-se a base OH

. Como
produto desta etapa tem-se a espcie a
3
- 4.

4) Na quarta etapa, novamente, o citocromo c, o qual recebe eltrons de outra espcie envolvida
na cadeia respiratria, cede mais um eltron para a
3
Neste ponto tem-se a reduo Cu
2+
/ Cu
1+
,
formando assim um intermedirio no qual o Cu
1+
e Fe
3+
se encontram coordenados ao OH

. O
OH

uma base relativamente dura e, para essa anlise, podemos avaliar a extenso da reao
com o cido mais duro que conhecemos, que o H
+
(H
3
O
+
, Equao 31):

H
3
O
+
+ OH

2 H
2
O K = 1,0 10
14
Equao 31

O valor de K alto, o que ratifica a classificao de OH

como base dura. O on Cu


1+
, que
apresenta dez eltrons nos orbitais d, um cido relativamente mole. Portanto, a ligao
Cu
1+
OH

fraca quando comparada com Fe


3+
OH

, sendo, portanto rompida. Como produto


nesta etapa tem-se a espcie (a
3
-5).

5) Mais uma vez o citoromo c que doa um eltron para a
3
(a
3
-5) e h tambm nesta etapa a
participao de 1 mol de H
+
. O eltron cedido propicia o processo Fe
3+
/Fe
2+
e ocorre protonao
do OH

. Deste modo tem-se a liberao de 1 mol de H


2
O e assim regenera a
3
(1), logo a enzima
citocromo c oxidase.

O papel da citocromo c oxidase, deixa clara a importncia dos metais de transio ferro e
cobre em nosso organismo. Verifica-se no ciclo (Figura 30) que esses metais atuam como
catalisadores, sendo que dois fatores so importantes para desempenhar a funo cataltica:

i) Variabilidade no estado de oxidao.
ii) Alterao do nmero de coordenao.

O cianeto txico para nosso organismo, pois ele inativa a citocromo oxidase c em
concentraes to baixas quanto 10
-8
mol L
-1
, pois interrompe o ciclo cataltico representado na
Figura 30.

Explicao qumica da alta toxicidade do CN
-


18
Na estrutura da citocromo c oxidase um dos centros metlicos o on ferro. Como ilustrado
na Figura 30, este on oxidado, em uma primeira etapa, a Fe
3+
, e o O
2
reduzido. Fazendo uma
analogia da estrutura do citocromo a
3
, presente na enzima, com o on complexo [Fe(OH
2
)
6
]
2+
,
podemos considerar as Equaes 32 e 33, para representar as reaes envolvidas na transferncia
de eltrons.
[Fe(OH
2
)
6
]
2+
[Fe(OH
2
)
6
]
3+
+ e

E = 0,77 V Equao 32
O
2
+ 4 H
+
+ 4 e

2 H
2
O E = + 0,82 V Equao 33

Considerando um organismo contaminado com CN
-
, como este on uma base de Lewis e
classificada como o-doador e t-receptor de eltrons, portanto, tal como O
2
, pode se coordenar ao on
Fe
2+
do citocromo a
3
.
Fazendo uma analogia do citocromo a
3
contaminado, com o on complexo [Fe(CN)
6
]
4
,
podemos analisar o processo redox por meio das Equaes 33 e 34.
[Fe(CN)
6
]
4
[Fe(CN)
6
]
3
+ e

E = 0,36 V Equao 34

Avaliando-se a variao de potencial (AE) do processo redox que ocorre com o citocromo a
3

e com o citocromo a
3
contaminado e, consequentemente, a variao da energia livre de Gibbs (AG),
pode-se afirmar que o processo redox em um organismo contaminado com CN
-
mais favorvel.
Neste ponto pode-se questionar: se na cadeia respiratria h necessidade da reduo do O
2

e este processo favorecido pelo CN
-
, qual o porqu da toxicidade? Para se ter uma resposta ao
referido questionamento necessrio avaliar que o CN

se coordena ao on ferro nos estados de


oxidao 2+ e 3+. As Equaes 35 e 36 representam essas reaes cido/base de Lewis e as
extenses das mesmas so importantes para a anlise da toxicidade.

[Fe(OH
2
)
6
]
2+
+ 6 CN

[Fe(CN)
6
]
4
+ 6 H
2
O K = 10
35
Equao 35
[Fe(OH
2
)
6
]
3+
+ 6 CN

[Fe(CN)
6
]
3
+ 6 H
2
O K = 10
42
Equao 36

Como AG = nRTln(K), a reao representada pela Equao 36 mais favorvel do que
aquela representada pela Equao 35. A interpretao das extenses das reaes deve ser baseada
nos parmetros entrpicos e entlpicos, uma vez que AG = AH TAS.




19
Avaliando o parmetro entlpico:

A anlise de AH feita considerando; AH = AH
ligao rompida
+ AH
ligao formada,
na qual:
AH
ligao rompida
: para este parmetro, devem ser avaliadas as ligaes Fe
2+
OH
2
e Fe
3+
OH
2
. Como o
Fe
3+
apresenta uma maior razo carga/raio do que o Fe
2+
, ento atrai mais fortemente as molculas
de H
2
O, requerendo maior energia para romper a ligao.
AH
ligao formada
: avaliam-se as foras relativas das ligaes entre Fe
2+
CN

e Fe
3+
CN

.

Lembrando que a fora de uma ligao qumica tem como energia total a soma das
contribuies da energia da ligao inica e de covalncia:
i) Avaliando a ligao qumica entre Fe
n+
CN

, considerando a contribuio inica, conclui-se que


a ligao Fe
3+
CN

mais forte, visto que: Fe


3+
tem maior carga e raio menor, logo a atrao
com CN

maior.
ii) Avaliando a contribuio de covalncia. Neste ponto importante considerar que CN

o-
doador e t-receptor de eltrons:
a) Considerando o carter o-doador: Como o Fe
3+
tem maior deficincia de eltrons do que o Fe
2+
,
ento CN

tem maior tendncia em doar o par no ligante para o Fe


3+
.
b) Considerando o carter t-receptor: O Fe
2+
tem seis eltrons nos orbitais d (d
6
) e Fe
3+
tem cinco
(d
5
); deste modo o Fe
2+
apresenta maior tendncia em retrodoar a densidade eletrnica para o CN

.
Portanto na ligao qumica Fe
2+
CN

, alm da ligao o CN

Fe
2+
, tem-se tambm a ligao
t Fe
2+
CN

. A Figura 21 mostra uma representao dessa interao, onde o on Fe


2+
e o CN

atuam,
ambos, como cidos e bases de Lewis. Por outro lado, na ligao Fe
3+
CN

tem-se uma contribuio


significativa da ligao o, CN

Fe
3+
.
c) Distncia da ligao Fe
2+
CN

(1.92 ); Fe
3+
CN
-
(1.95 ).
Em funo do exposto a fora da ligao Fe
2+
CN

um pouco mais alta do que a ligao


Fe
3+
CN

, logo a variao de entalpia (AH) do processo representado pela Equaao 35 mais


favorvel do que a variao de entalpia (AH) do processo representado pela Equao 36, no
justificando assim os valores relativos do AG.

Avaliando o parmetro entrpico:

A variao de entropia (AS) desfavorece a termodinmica do processo representado pela
Equao 35, uma vez que h uma alterao na carga do sistema de 3 para 4. Uma carga maior,
indica uma maior interao da espcie qumica com as molculas de gua (lembrar que o sistema
aquoso) e deste modo h uma menor desordem.
A variao de entropia (AS) no interfere na termodinmica do processo representado pela
equao (d), uma vez que no h uma alterao em nenhum parmetro que interfira no AG.
20
Conclui-se com base nas discusses do AH e AS, que o parmetro entrpico tem efeito
primrio em relao ao parmetro entlpico, para explicar o AG mais favorvel da reao
representada pela Equao 36 em relao quela representada pela Equao 35. Alis, este efeito
do parmetro entrpico tambm justifica os valores relativos de AG das reaes, envolvendo a
oxidao do on ferro, representado pelas Equaes 32 e 34. Tem-se que no processo representado
pela Equao 32, como h uma alterao de carga de 2 para 3, h um decrscimo de AS, o que
desfavorece o processo redox. J no processo representado pela Equao 34, ocorre uma alterao
de carga de 4 para 3, o que indica um aumento na desordem, favorecendo assim, a oxidao do on
ferro.
De acordo com todas as justificativas apresentadas, conclui-se que CN

interfere na cadeia
respiratria, pois inativa a citocromo c oxidase, uma vez que interfere no ciclo cataltico que envolve
a reduo do O
2
, interrompendo o processo j na primeira etapa.
O mecanismo natural de desintoxicao se d devido ao papel de uma enzima denominada
de sulfurtransferase (rodanase), existente nas mitocndrais. Essa enzima catalisa reaes entre
substncias sulfuradas (S) e CN

(Equao 37).
S + CN
-
SCN
-
Equao 37

Como conseqncia h um deslocamento do equilbrio qumico representado na Equao 36, no
sentido de consumo do [Fe(CN)
6
]
3
. O SCN

formado pode ainda consumir o [Fe(OH


2
)
6
]
3+
(Equao
38).
[Fe(OH
2
)
6
]
3+
+ 6 SCN

[Fe(SCN)
6
]
3
+ 6 H
2
O K = 10
8
Equao 38

A desintoxicao natural pode ainda ser auxiliada por meio do uso de injeo de tiossulfato. O
S
2
O
3
2
, alm de fornecer compostos de enxofre (Equao 39) para otimizar a cintica da reao com
CN

pode reduzir o [Fe(OH


2
)
6
]
3+
[Fe(OH
2
)
6
]
2+
.

S
2
O
3
2
S
4
O
6
2
+ e

E = 0,08 V Equao 39

A desintoxicao natural, bem como aquela que realizada de forma auxiliar, no efetiva
em caso do envenenamento crtico, e uma medida mais segura deve ser tomada. Se o
envenenamento for diagnosticado muito rapidamente, o paciente recebe dosagem controlada de
nitrito (soluo a 3%). O NO
2

uma base de Lewis e se coordena ao on Fe(II) da hemoglobina;


paralelamente tem-se uma reao de transferncia de eltrons (Equao 40 a 42), resultando como
produto a metahemoglobina. A taxa de metahemoglobina no pode ultrapassar 30% a fim de no
acarretar a falta de oxigenao no organismo.
21

Fe(II)-Hb Fe(III)-Hb + e- E = - 0,15 V Equao 41
NO
2

+ e

+ H
+
NO + H
2
O E = + 0,96 V (meio cido) Equao 42

Uma vez formada a metahemoglobina, o Fe(III) desta compete com Fe(II) do citocromo a
3
pelo CN
-
,
resultando como produto a cianometahemoglobina (Equao 43).



Paralelamente administrao de nitrito, o paciente recebe como medicamento auxiliar o
tiossulfato de sdio (soluo a 25%). Esse medicamento aumenta a concentrao de S no organismo
do paciente, o que favorece a reao entre compostos que contm enxofre (S
2
O
3
2-
e aminocidos
como cistena e metionina) com CN
-
, a qual viabilizada pela ao da enzima rodanase (Equao
37). Com a formao de SCN
-
, que uma base de Lewis, tem-se como produto a
tiocianometahemoglobina (Equao 44), a qual eliminada do organismo.



22
Bibliografia

+ Bertini, I.; Gray, H. B.; Lippard, S. J. e Valentine, J. S. Bioinorganic Chemistry. University Science
Books. California. 1994.
+ Kaim, W. e Schwederski, B. Bioinorganic Chemistry: Inorganic Elements in the Chemisty of Life.
John Wiley & Sons. England. 1996.
+ Lippard, S. J. e Berg, J. Principles of Bioinorganic Chemistry. University Science Books.
California. 1994.
+ Lehninger, A L. Princpios de Bioqumica. 3
a
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+ Porterfield, W. W. Inorganic Chemistry. A Unified Approach. Academic Press, Inc. 2
a
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California. 1993.
+ Wilkins, P. C. e Wilkins, R. G. Inorganic Chemistry in Biology. Oxford University Press. New York.
1997.