Universidad Nacional Autnoma de Mxico Escuela Nacional Preparatoria N 2 Erasmo Castellanos Quinto Prctica N 2 Determinacin de la Velocidad de Reaccin de la Catalasa.

Materia: Biologa V Profesor: Pablo Gonzlez Yoval Grupo: 604 Integrantes: Olivera Lpez Ramses Reyna Gonzlez Emmanuel Snchez Garca Nancy Donaj Torres Ramrez Laura Maricela Vargas Lpez Fernanda Amairani Zavala Baca Diana Ildegar

Fecha de entrega: mircoles 23 de Noviembre de 2011 Ciclo escolar: 2011-2012

Practica No. 2 Determinacin de la Velocidad de Reaccin de la Catalasa Introduccin La mayora de las veces, las enzimas pasan inadvertidas cuando se estudia los procesos metablicos del organismo, por eso es que, nosotros nos tomamos la tarea de demostrar la importancia de las enzimas en el organismo, en este caso de la catalasa, y profundizar un poco las reacciones que se llevan a cabo mediante clculos matemticos. Primero definiremos que es la catalasa y su funcin. La catalasa es una enzima que se encienta en las clulas de los tejidos animales y vegetales. La funcin de la catalasa en los tejidos es necesaria porque durante el metabolismo celular, se forma una molcula txica que es el perxido de hidrgeno, H 2O2. La catalasa aumenta la velocidad de la descomposicin del perxido de hidrgeno aproximadamente 1000 millones de veces. (Melo, Cuamatzi, 2004, p. 105). Pero, qu es el perxido de hidrgeno? Es un lquido transparente e incoloro; es agua con una molcula extra de oxgeno: H2O2.El perxido de hidrgeno, tambin llamado, agua oxigenada, es uno de los productos del metabolismo celular en diversos organismos, pero dada su potencial toxicidad, es transformado enseguida en agua y oxgeno por la enzima catalasa. (Devlin, 1999, p. 140). Ahora, sabiendo esto, la descomposicin del perxido de hidrgeno en agua y oxgeno queda como se muestra en la Figura 1.

Figura 1: Reaccin de descomposicin del perxido de hidrgeno. Melo, V. Cuamatzi, O. (2004).

Todas las enzimas son protenas, por lo tanto, todas las enzimas sufren una desnaturalizacin, que son cambios ambientales o los tratamientos qumicos que pueden causar una desorganizacin en la conformacin nativa de la protena, con la prdida concomitante de la actividad biolgica. Como la conformacin nativa slo es estable de manera marginal. La energa necesaria para causar la desnaturalizacin es con frecuencia pequea. (Melo, Cuamatzi, 2004, p. 98). La catalasa tiene una Km (Son unidades de concentracin que representan la cantidad de sustrato necesaria para fijarse a la mitad de la enzima disponible y producir la mitad de la velocidad mxima. El subndice m se refiere a MichaeliMenteln como reconocimiento a sus esfuerzos de investigacin. Como una aproximacin puede considerarse que el valor de Km representa la concentracin
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del sustrato en una clula viva) alta para el H2O2, por tanto, su efecto es limitado y slo puede ejercer su funcin bajo condiciones donde los niveles de H 2O2 estn particularmente elevados. (Mamposo, 1998). La cintica enzimtica estudia la velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas. Estos estudios proporcionan informacin directa acerca del mecanismo de la reaccin cataltica y de la especificidad del enzima. La velocidad de una reaccin catalizada por un enzima puede medirse con relativa facilidad, ya que en muchos casos no es necesario purificar o aislar el enzima. La velocidad puede determinarse bien midiendo la aparicin de los productos o la desaparicin de los reactivos. (Devlin, 1999, p. 160) La relacin entre la velocidad y la concentracin de los reactivos puede expresarse mediante una ecuacin muy simple. Para escribir estas reacciones se utilizan constantes de velocidad (simbolizadas por k).Un valor exponencial de 1 significa que la velocidad de reaccin incrementa en forma lineal con la concentracin del reactivo, doblndose con cada duplicacin en la concentracin del reactivo. Esta situacin se denomina cintica de primer orden (Bohinsk, 1991, p. 181).

Objetivos Diseo y elaboracin de un dispositivo que nos permita calcular la velocidad de reaccin de la catalasa con agua oxigenada (H2O2). Determinar la velocidad de reaccin de la catalasa con agua oxigenada (H2O2).

Metodologa. Para realizar esta prctica necesitaremos conocer dos procedimientos. 1. Elaboracin del dispositivo. 2. Procedimientos de la reaccin qumica entre el hgado de pollo y el perxido de hidrgeno. Comenzaremos con el desarrollo y elaboracin del dispositivo: 1. Primero se requiere una manguera de aproximadamente 54 cm. que graduaremos con ayuda de una jeringa, agregando poco a poco un mililitro

de agua. Dejaremos 3 cm de manguera sin graduar. A partir del tercer centmetro se hace la marca de 0 ml, graduar del cero en adelante. 2. Necesitaremos un recipiente con tapa (recipiente 1), esta ltima con 2 perforaciones del tamao de la manguera, en uno de los hoyos se insertarala manguera graduada slo dejando adentro del recipiente los 3 cm que no se graduaron, dejando la marca de 0 ml a la misma altura de la tapa del contenedor. Sella las posibles fugas que puedan existir alrededor de la manguera con plastilina o silicn. Para sostener el peso de la manguera, se pegar un palito de bandera a la superficie de la tapa del contenedor y con cinta adhesiva transparente pegar el palito a la manguera. 3. En la segunda perforacin se insertar una manguera ms corta de 12 cm aproximadamente sin graduar, slo se dejaran dentro del contenedor 1 2 cm de la manguera. Sella las posibles fugas que puedan existir alrededor de la manguera con plastilina o silicn. 4. A travs de la manguera corta, se introducir al recipiente, agua con colorante (cualquier color, en este caso rosa) con ayuda de una jeringa, puede ser la misma que se emple para graduar la manguera de 54 cm. Se debe llenar el contenedor hasta el tope, para que el agua coloreada llegue a la altura de la marca de 0 ml de la otra manguera. 5. Necesitaremos otro recipiente (recipiente 2), igual al primero, con tapa y sta a su vez con dos perforaciones, una del tamao de la manguera de 12 cm y otra del tamao de una tapa de goma de tubo de ensayo. El extremo libre de la manguera corta sin graduar ya conectada al primer contenedor, se conectara a la perforacin de la tapa del segundo recipiente, sellando de igual modo, para evitar fugas, con plastilina. El la perforacin restante de la tapa del segundo recipiente, se colocara un tapn de goma de tubo de ensayo, sellando con plastilina las posibles salidas de aire. 6. En el segundo recipiente se colocara en su interior el hgado de pollo, y con una jeringa (con aguja), se inyectara el agua oxigenada a travs del tapn de goma.

Ahora se describir el proceso a realizar para efectuar la reaccin qumica, por medio de la cual se obtendr el volumen de oxgeno que desplazara el mismo volumen de agua, para que pueda ser medido.

1. Primero se necesita un hgado de pollo macerado. Con ayuda de una bscula se pesaran 10 gramos de hgado de pollo macerado. 2. Ahora se depositaran los 10 gramos de hgado de pollo macerado en el recipiente 2, (aquel que en su tapa tiene el tapn de goma) y para hacer que los resultados no se vean afectados, se inyectara con una jeringa 10 ml de agua oxigenada, en proporcin a los 10 gramos de hgado de pollo. 3. Una vez iniciada la reaccin, se comenzara a elevar un volumen de agua en el otro contenedor, subir por la manguera graduada, este volumen de agua ser proporcional al volumen de oxigeno que se desprende de la reaccin que se efectu en el recipiente 2. Una vez que se note la elevacin de agua a travs de la manguera graduada, es decir, el cambio de volumen, se comenzara a registrar cada dos segundos el volumen que se desplaz de agua a causa del volumen de oxgeno. 4. Anota en una Tabla la cantidad de mililitros que se registraron a los 2,4, 6 segundos que se inici la reaccin. 5. Repite los cuatro pasos anteriores unas 3 veces ms, para hacer la prueba de que tus resultados son precisos.

Manguera que transporta el O2 liberado Manguera

Frasco con 2 orificios, con agua

Frasco donde se coloca el hgado con H2O2 5

Resultados Durante el desarrollo de la prctica se llevaron a cabo 4 muestras para as analizar los resultados y obtener un promedio de las 4 pruebas. A continuacin se presentan los resultados de nuestra primera prueba (Vase Tabla 1 y Figura 1).
Tabla 1.-Resultados de la primera prueba.

X Tiempo (s) 2 4 6 8

Y [O2] (ml) 3 5 7 9

Nota: En esta Tabla se muestra la relacin entre los valores independientes (tiempo) y dependientes (mL).

O2 (mL)
10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 0 2 4 3 5

Y [O2] (ml)
9

y=x+1 R = 1 Pendiente= X

Y [O2] (ml) Linear (Y [O2] (ml))

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Tiempo (s)

Figura 1.- Grfica de la prueba 1

Como se muestra en la Figura 1, la ecuacin de la recta es la siguiente:

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y= x+1 Y el valor del coeficiente de determinacin es: R2= 1 Como R2= 1 podemos concluir que nuestros resultados no tienen ningn error, puesto que son precisos. Con esto podemos determinar que la velocidad de reaccin en esta primera prueba es: Velocidad de reaccin= 1 mL/s Posteriormente se presentaran de igual forma los resultados obtenidos, pero ahora en nuestra segunda prueba (vase Tabla 2 y Figura 2)

Tabla 2.- Prueba 2 resultados

X Tiempo (s) 2 4 6 8

Y [O2] (ml) 3 5 8 10

Nota: Se presentan los datos de la prueba 2 de igual forma viendo relacin entre tiempo y concentracin.

O2 (mL)
12 10 8 6 5 4 3 2 0 0 2 4

Y [O2] (ml)
y = 1.2x + 0.5 R = 0.9931 10 8 Y [O2] (ml) Linear (Y [O2] (ml))

Tiempo (s)
6 8 10

Figura 2.- Grfica de los datos en prueba 2

Como podemos ver en la Figura 2 la lnea no pasa por el centro de todos los datos, en este caso nuestra precisin no fue tan exacta, pero al realizar nuestra regresin nos pudimos dar cuenta de esto, tambin se observa en la ecuacin de la recta, puesto que si la comparamos con la ecuacin de la Figura 1 podemos darnos cuenta que es muy distinta. Para obtener la ecuacin debemos observar lo datos de en la Figura 2 con esto llegando a: y= 1.2x+0.5 Y analizamos que: R2= 0.9931,(vase Figura 2) de igual modo el valor es cercano a 1 por lo tanto no existi una gran diferencia entre la prueba 1. Con esto podemos determinar que la velocidad de reaccin en la segunda prueba es: Velocidad de reaccin= 1.2 mL/s

A continuacin se presentan los resultados de la prueba 3.

Tabla 3.- Presentacin de datos en la prueba 3

X Tiempo (s)

Y [O2] (ml) 8

2 4 6 8

3 5 7 9

Nota: Datos de la prueba 3 analizando los segundos y los mL de concentracin.

O2 (mL)
10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 0 2 4

Y [O2] (ml)

y=x+1 R = 1

Y [O2] (ml) Linear (Y [O2] (ml))

Tiempo (s)
6 8 10

Figura 3.- Representacin grafica de la prueba 3

Mediante el anlisis correspondiente vemos que los datos de esta prueba en general son iguales a los de la prueba uno, por lo consiguiente el razonamiento es el mismo que en el primer caso. Ecuacin: y= x+1 Y determinamos que R2= 1 Con esto podemos determinar que la velocidad de reaccin en esta tercera prueba es: Velocidad de reaccin= 1 mL/s Con esto visualizando que es igual a la velocidad de la prueba 1. Para finalizar se presentan los datos de la ultima prueba.
Tabla4.- Datos de la ltima prueba

X Y Tiempo (s) [O2] (ml) 2 3 9

4 6 8

5 7 10

Nota: Datos correspondientes para la creacin de la grafica Concentracin (mL) vs Tiempo (s)

O2 (mL)
12 10 8

Y [O2] (ml)
10

y = 1.15x + 0.5 R = 0.9888

7 6 5 4 3 2 0 0 2 4 6 8 10

Y [O2] (ml) Linear (Y [O2] (ml))

Tiempo (s)

Figura4.- Representacin grafica de la 4 prueba.

Al finalizar esta prueba observamos que de igual forma los datos observados en la Figura 4 no son muy precisos, puesto que la recta de regresin no pasa por el centro, vemos que R2= 0.988, concluyendo que no fue una gran variacin puesto que el valor se acerca a 1. Con el anlisis de los datos (vase Figura 4) llegamos a la siguiente ecuacin: y= 1.15x+0.5 Siendo esta la ecuacin de nuestra recta. Con esto podemos determinar que la velocidad de reaccin en esta ltima prueba es: Velocidad de reaccin= 1.15 mL/s
Tabla5.-Promedio de los datos de la concentracin en las 4 pruebas

Prueba 1

Prueba 2

Prueba 3

Prueba 4

Promedio 10

Tiempo 2 seg. Tiempo 4 seg. Tiempo 6 seg. Tiempo 8 seg.

3 5 7 9

3 5 8 10

3 5 7 9

3 5 7 10

3 5 7.25 9.5

Nota: Se muestra el promedio de los datos obtenidos durante nuestro experimento.

A continuacin se muestra la grafica promedio del experimento:

O2 (mL)
10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 0 2

Y [O2] (ml)
9.5 7.25 5 3

y = 1.0875x + 0.75 R = 0.9992

Y [O2] (ml) Linear (Y [O2] (ml))

Tiempo (s)
4 6 8 10

Figura5.- Representacin grafica del promedio de los datos

Con esto se puede concluir que el promedio de la velocidad de reaccin es de: Velocidad de reaccin promedio = 1.0875 mL/s Obtenida de la ecuacin presentada en la Figura5. Y Obteniendo una dispersin de los datos (R2) cercana a 1, es decir, 0.9992 por lo tanto nuestros datos son precisos en cuanto a nuestro experimento. Y observando que la lnea de regresin pasa por el centro en la mayora de los puntos. Clculo del valor terico y comparacin con el valor observado: En la prueba 1 se obtuvo la siguiente ecuacin: y= x+1 Donde:

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1 es la pendiente de nuestra recta x es el tiempo o la abscisa de nuestra grafica, 1 es nuestro punto de interseccin en la ordenada Sustituyendo valores obtenemos:
Tabla 6.-Calculo de valor terico

Tiempo (s) [O2] (ml) 2 4 6 8

valor terico y=x+1 3 5 7 9 3 5 7 9

Nota: Comparacin de los datos observados y los datos tericos segn la ecuacin de la recta.

Con el anlisis de los resultados (vase Tabla 6) nos damos cuenta que nuestros valores observados son exactos en relacin con nuestros valores tericos. En la prueba 2 se obtuvo la siguiente ecuacin: y= 1.2x+0.5 Donde: 1.2 es la pendiente de nuestra recta x es el tiempo o la abscisa de nuestra grafica, 0.5 es nuestro punto de interseccin en la ordenada Sustituyendo los valores obtenemos:

Tabla 7.-Prueba 2 (valor terico)

Tiempo (s) [O2] (ml) 2 3 4 5 6 8 8 10

Valor terico y=1.2x+0.5 2.9 5.3 7.7 10.1

Nota: Comparacin de los datos observados y los datos tericos segn la ecuacin de la recta.

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Mediante el anlisis de la Tabla7, nos dimos cuenta que existe una pequea diferencia entre los datos observados y los valores tericos, pero sin caer en una exageracin puesto que solo son decimas las que varan. En la prueba 3 se obtuvo la siguiente ecuacin: y= x+1 Donde: 1 es la pendiente de nuestra recta x es el tiempo o la abscisa de nuestra grafica, 1 es nuestro punto de interseccin en la ordenada

Sustituyendo valores obtenemos:

Tabla 8.-Prueba 3 calculo de valor terico

Tiempo (s) [O2] (ml) 2 4 6 8

valor terico y=x+1 3 5 7 9 3 5 7 9

Nota: Comparacin de los datos observados y los datos tericos segn la ecuacin de la recta.

Con el anlisis de la ecuacin y el valor terico (vase Tabla 8) nos damos cuenta que nuestros valores observados son exactos en relacin con nuestros valores tericos. Como lo analizamos en la prueba 1. En la prueba 4 se obtuvo la siguiente ecuacin: y= 1.15x+0.5 Donde: 1.15 es la pendiente de nuestra recta x es el tiempo o la abscisa de nuestra grafica, 0.5 es nuestro punto de interseccin en la ordenada. Sustituyendo valores obtenemos:
Tabla 9.-Calculo de valor terico ultima prueba

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X Tiempo (s) 2 4 6 8

Y [O2] (ml) 3 5 7 10

Valor terico y= 1.15x+0.5 2.8 5.1 7.4 9.7

Nota: Comparacin de los datos observados y los datos tericos segn la ecuacin de la recta.

Mediante los datos presentados en la Tabla 9, nos dimos cuenta que existe una pequea diferencia entre los datos observados y los valores tericos, pero sin caer en una exageracin puesto que solo son decimas las que varan. Con la presentacin de los datos y las graficas se finalizan los resultados.

Discusiones En el caso de lo mencionado por Melo y Cuamatzi (2004, p. 105) estamos de acuerdo ya que pudimos comprobar que el perxido de hidrgeno efectivamente es descompuesto por la catalasa liberando oxgeno ya que al hacer nuestro experimento con nuestro catalmetro pudimos observar la reaccin por medio de burbujas (demostrndonos el oxgeno liberado). De acuerdo con Devlin (1999, p.140) l nos dice que la enzima catalasa transforma rpidamente el perxido de hidrgeno en agua y oxgeno. Estamos de acuerdo en lo que l nos menciona ya que al momento de macerar el hgado e introducirlo a nuestro catalmetro y al suministrarle el agua oxgenada (H2O2) pudimos observar en cuestin de segundos que esto es efectivamente verdico ya que, como habamos mencionado anteriormente, se observan burbujas indicndonos la presencia de agua y la liberacin de oxgeno. Lo que mencionaremos posteriormente habla de lo que hicimos previamente a nuestra prctica (hecha en casa), todo esto con el fin de explicar la desnaturalizacin de las protenas. De acuerdo a Melo y Cuamatzi (2004, p.98) nos hablan de la desnaturalizacin de las protenas que no es otra cosa que quitarle las propiedades a las enzimas, en este caso siendo protenas del hgado, esta desnaturalizacin se lleva a cabo por cambios ambientales, en este caso, al momento de la coccin del hgado dando lugar a la descomposicin de las enzimas. Esto lo pudimos comprobar al momento de poner el pedazo de hgado en el recipiente con agua oxigenada ya que no observamos ningn cambio en ste

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porque no haba presencia de enzimas. Por lo tanto estamos de acuerdo con ellos por lo ya mencionado. Todo lo anterior lo podemos explicar ms amenamente de esta manera, con nuestras palabras: 1. De descomposicin: 2H2O2 2H2O + O2 Esto es porque el perxido de hidrgeno da lugar a la formacin de agua y la liberacin de oxgeno en estado gaseoso. La liberacin del Oxgeno, es notable a la vista cuando se comienza a producir un burbujeo al contacto del agua oxigenada con el hgado de pollo. 2. Irreversible: 2H2O2

2H2O + O2 La reaccin es irreversible porque los

productos que se obtienen, al pertenecer a las reacciones del metabolismo, son utilizadas prcticamente al instante, como productos de nuevas reacciones. En nuestro dispositivo, el oxgeno liberado, se desplazaba por completo hacia el otro recipiente, evitando as que volviera a formarse perxido de hidrgeno una vez ms. De acuerdo a Mamposo (1998) l nos dice que Km son unidades de concentracin que representan la cantidad de sustrato de una clula viva, tomando al perxido de hidrgeno como el sustrato y la enzima catalasa que se encuentra en el hgado. La enzima catalasa entonces produce una velocidad mxima con el perxido de hidrgeno haciendo que la reaccin se acelere. Estamos de acuerdo con l ya que las condiciones del hgado fueron favorables por la reaccin que se hizo en cuestin de segundos, comprobando que fue una reaccin rpida y viendo de esta forma que Km fue alta. Segn Devlin (1999. P. 160) la cintica enzimtica estudia la velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas. Estos estudios proporcionan informacin directa acerca del mecanismo de la reaccin cataltica y de la especificidad del enzima; estamos de acuerdo con esta idea ya que la enzima catalasa tiene una especificidad que acta slo en la descomposicin del perxido de hidrgeno en agua y oxgeno, es decir, la enzima solamente tiene esa funcin. La velocidad de una reaccin catalizada por un enzima puede medirse con relativa facilidad, ya que en muchos casos no es necesario purificar o aislar el enzima; esto lo pudimos verificar ya que el hgado a pesar de tener microorganismos u otras sustancias ms la enzima catalasa actu para la descomposicin de perxido de hidrgeno. La velocidad puede determinarse bien midiendo la aparicin de los productos o la desaparicin de los reactivos; los observamos al momento de introducir el agua oxigenada en el hgado de pollo ya que aparecieron los productos (el agua y el oxgeno) y gracias al oxgeno liberado pudimos ver el desplazamiento del agua
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con nuestro dispositivo como ayuda para medir la velocidad de la reaccin de la catalasa presente en el hgado. De acuerdo a Bohinsk (1991. P.181) el valor exponencial de 1 significa que la velocidad de la reaccin incrementa en forma lineal con la concentracin del reactivo; esto es verdico ya que en la primera Tabla de resultados podemos comprobar que el valor de R es exactitud de los resultados (esto viene explicado detalladamente en la parte de los resultados) por lo tanto el incremento es en forma lineal con la concentracin del reactivo. Esto lo pusimos a prueba con la concentracin de reactivo (perxido de hidrgeno) con una proporcionalidad de 10ml de perxido de hidrgeno a 10gr de hgado de pollo, pudiendo tener como resultado valores exactos y precisos como se pudo verificar en la Tabla 1, teniendo un resultado de una lnea recta. Al finalizar nuestro trabajo y obteniendo los resultados ya mostrados, nos dimos cuenta que el funcionamiento del dispositivo fue el correcto, puesto que los datos tienen un rango de diferencia muy pequeo. Los datos en las 4 pruebas se mantienen de cierto modo constantes, ya que inician en los primeros segundos con la misma liberacin de oxigeno, poco a poco mientras el tiempo avanza, en algunas de las pruebas hay una diferencia, pero no tan grande para encontrar un problema en el dispositivo. Los resultados obtenidos creemos que fueron los correctos en cuanto al uso y objetivos del equipo, ya que quiz al hacer una comparacin con otros equipos exista una diferencia entre los resultados, pero esto implicara analizar diferentes cosas, como puede ser, la cantidad usada de los reactivos, el funcionamiento de su dispositivo, el tiempo medido, entre otras cosas. El uso y funcionamiento del dispositivo fue el correcto, as como los resultados obtenidos, el equipo se siente satisfecho con los datos generados al finalizar la practica, y por lo tanto se concluye que los datos son correctos en cuanto a los factores utilizados.

Conclusiones En la unidad nmero 2: Metabolismo del curso de Biologa V, el principal objetivo es analizar todas aquellas reacciones qumicas que el cuerpo necesita realizar para poder funcionar correctamente y evitar el aumento en su grado de entropa. El Metabolismo puede dividirse en anabolismo y catabolismo, y la reaccin que se llev a cabo en esta prctica, es un claro ejemplo del catabolismo ya que se
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descompone el perxido de hidrgeno en agua y oxgeno. Esta reaccin es exergnica pues libera ms energa de la que se absorbe. En el experimento puede comprobarse porque, en el frasco donde se pone el hgado y el agua oxigenada puede percibirse un aumento de temperatura. Finalmente, gracias a este experimento, podemos comprobar que, de acuerdo a lo que hemos tratado en clase sobre las enzimas, segn lo que nos dice Bohinski, C., 1991, son stas las que se encargan de acelerar vertiginosamente la velocidad de una reaccin y adems tienen la caracterstica de poseer una estricta especificidad, pues la catalasa reacciona exclusivamente con el perxido de hidrgeno.

Bibliografas: Bohinsk, C. (1991) a. Bioqumica. Mxico: Addison Wesley. pp. 174-181. Bohinsk, C (1991) b. Capitulo 5: Enzimas en Bioqumica (5ta, ed) Mxico: Addison Wesley Longman Devlin, T. (1999). Bioqumica. Espaa: Revert. pp. 140-160. Mamposo, M. (1998). Centro de Investigaciones y Evaluaciones Biolgicas (CIEB) en sitios Web. bvs.sld.cu. Recuperado el 18 de Noviembre de 2011, de http://bvs.sld.cu/revistas/end/vol10_1_99/end02199.htm Melo, V., Cuamatzi, O. (2004), Bioqumica de los procesos Metablicos. Mxico: Revert. pp. 98-105.

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