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MICROBIOLOGIA DA GUA

gua: mais importante constituinte das clulas vivas. Por que tratar a gua? Veculo de : - bactrias - vrus - bolores e leveduras - protozorios - contaminantes qumicos

1 ligao entre gua e doena 1854-1855: epidemia de clera em Londres. gua: Recurso renovvel e cada vez mais escasso!!!!

A atividade humana aumentou vertiginosamente a poluio presente na gua cuja origem pode ser:

Pontual Descarga de efluentes a partir de indstrias e de estaes de tratamento de esgoto So bem localizadas, fceis de identificar e de monitorar

Difusa Escoamento superficial urbano, escoamento superficial de reas agrcolas e deposio atmosfrica Espalham-se de forma difusa so difceis de identificar e tratar

Proteo dos mananciais de todos os tipos de contaminao humana , animal, industrial, ambiental

Basicamente 2 categorias de guas: - guas de consumo - guas para fins industriais

gua de consumo: Microbiota inicial: depende da fonte * guas superficiais - variao de qualidade biolgica, fsica e qumica durante o ano * guas profundas - melhor qualidade microbiolgica - Mais usadas em regies ridas ou muito poludas

GUA DE CONSUMO
Pode conter grande quantidade de bactrias no patognicas
Flavobacterium, Pseudomonas, Acinetobacter, Moraxella, Chromobacterium,

guas de pases tropicais * maior variedade de microrganismos * predomnio de mesfilos e termotolerantes

Bactrias patognicas veiculadas pela gua: Vibrio cholerae, Salmonella spp., Escherichia coli, Yersinia enterocoltica, Aeromonas hydrophila Leptospira, Shigella spp., Staphylococcus aureus, Vibrio parahaemolyticus

Fungos veiculados pela gua Candida albicans C. tropicalis C. krusei Geotrichum spp. Protozorios veiculados pela gua Entamoeba histoltica Giardia lamblia Vrus veiculados pela gua Poliomielite Hepatite (A) Rotavirus Reovirus Adenovirus Contaminantes fsicos e qumicos - contaminao direta ou indireta Schistossoma mansoni Ascaris lumbricoides

Grupo Microrganismos
Bactrias Clera

Doenas

Microrganismos
Vibrio cholerae Salmonella tiphy Leptospira sp. E. coli, Shigella, Yersinia Shigella sp. Entamoeba Giardia Ascaris Rotavirus, Adenovirus Hepatite Poliovirus

Febre Tifide Leptospirose Gastroenterites Disenteria Bacilar Protozorios Disenteria amebiana Giardiase Ascaridase Virus Gastroenterites Hepatites infecciosa Poliomielite

Utilizao da gua na Indstria


Incorporao ao produto; Lavagens de mquinas, tubulaes e pisos; guas de sistemas de resfriamento e geradores de vapor; guas utilizadas diretamente nas etapas do processo industrial Esgotos sanitrios dos funcionrios.

ou incorporadas aos produtos;

Exceto pelos volumes de guas incorporados aos produtos e pelas perdas por evaporao, as guas tornam-se contaminadas por resduos do processo industrial, originando assim os efluentes lquidos

guas para fins industriais Indstrias de alimentos: uma das maiores consumidoras de gua gua usada como ingrediente: - bebidas - sorvetes - produtos crneos - enlatados Contato direto - lavagem, transporte, branqueamento de frutas e hortalias - escaldagem, resfriamento e limpeza de carcaas - armazenamento de peixes e carnes em gelo - lavagem de queijos e manteiga ..

Contato indireto - limpeza de utenslios e equipamentos Contato acidental - falhas de engenharia : condensao - falhas de manipulao: resfriamento de latas - defeitos de equipamentos :gua de circulao - trocador de calor

Qualidade da gua para fins industriais: mesma que a de consumo

Reciclagem - permitida para poucas atividades * transporte de frutas e legumes antes da lavagem

gua no potvel - emprego em sistema de resfriamento (motores, torres) - combate a incndios, descarga sanitrios, lavagem caladas externas

Anlise microbiolgica da gua


BIOINDICADORES:

Grupo de microrganismos que indicam a POSSIBILIDADE de ocorrncia de patgenos na amostra Presena em dejetos (fezes) amostras de guas. contaminao por esgotos domsticos Muito caro e trabalhoso avaliar diretamente TODOS os patgenos nas

Caractersticas de um Indicador Biolgico Ideal Presente em todos os tipos de gua Ocorrncia e desaparecimento concomitante com patognicos Densidade populacional diretamente relacionada com o grau de contaminao Maior sobrevida que a dos patognicos Ausncia em gua potvel Fcil deteco e recuperao laboratorial No prejudicial pessoas e animais Manipulao segura Dificuldade em encontrar um microrganismo que rena todas estas caractersticas!!!

Principais Bioindicadores Utilizados Coliformes totais Coliformes Termotolerantes (fecais) Coliforme especfico: Escherichia coli Estreptococos fecais (Enterococcus) Pseudomonas aeruginosa

Grupo coliforme: coliformes totais e fecais


Quando um rio recebe esgoto, passa a ter outros tipos de bactrias que no so da gua e podem causar doenas s pessoas que a beberem. As nossas fezes contm cerca de 200 bilhes de coliformes fecais que so eliminados diariamente e, geralmente, lanadas nos rios em forma de esgoto. Coliformes fecais = indicador de poluio por fezes na gua

Grupo Coliforme
indicadores de escolha para monitorar qualidade da gua; Presena riscos sade Salmonella, Shigella, Vibrio, Mycobacterium, Pasteurella, Leptospira e vrus entricos

gneros: Citrobacter, Escherichia, Enterobacter e Klebsiella Citrobacter, Enterobacter e Klebsiella: coliformes ambientais

Grupo coliforme: totais e fecais

Coliformes termotolerantes:E.coli Klebsiella Coliformes fecais: E.coli

Coliformes totais
Bactrias da famlia Enterobacteriaceae, capazes de fermentar a lactose com produo de gs, quando incubadas a 35-37C, por 48 horas. So gram-negativas e no formadoras de esporos. Escherichia habitat primrio o trato intestinal do homem e animais Enterobacter, Citrobacter e Klebsiella presentes nas fezes, vegetais e solo (coliformes ambientais). Presena de coliformes totais no indica necessariamente contaminao fecal recente ou ocorrncia de enteropatgenos.

Coliformes fecais
Sub-grupo: coliformes totais Escherichia coli Contaminao fecal oriundas de animais de sangue quente Metodologia: crescimento e formao de gs a partir da lactose a 44,5 +0.2 fator seletivo (termotolerantes) C,

Escherichia coli

Outros indicadores microbiolgicos


Bactrias Heterotrficas

Bactrias que utilizam nutrientes orgnicos A contagem de bactrias heterotrficas UFC/mL presena em maior ou menor quantidade grau de poluio da gua enriquecimento MO.

Outros indicadores microbiolgicos


Estreptococos fecais Bioindicador referenciado na legislao Melhores indicadores para guas marinhas Tolerncia a altas concentraes de sal Grupo Streptococcus fecais Streptococcus faecalis, S. faecium, S. galinarum e S. avium; contaminao fecal humana X fezes outros animais

Outros indicadores microbiolgicos


Pseudomonas aeruginosa Solo, gua, matria orgnica em decomposio; Microbiota do intestino e pele de seres humanos; Patgeno oportunista - infeces auditivas em usurios de guas recreativas contaminadas surtos de gastroenterites veiculadas por gua imunodeprimidos capacidade de crescer em ambientes oligotrficos

Staphylococcus aureus Pele e mucosa (nariz, garganta) do homem: Diversas infeces No esto relacionados com contaminao fecal; Sobrevivem mais tempo na gua; Ambientes aquticos intensa utilizao para fins recreacionais - contagens de S. aureus

Leveduras Indicadoras de poluio: ambientes de gua doce, quanto marinhos; nmero e espcie tipo e pureza da gua;

Ocorrncia e distribuio presena de poluio orgnica; complemento a contagem de coliformes; Gneros comuns: Aureobasidium, Candida, Cryptococcus, Rhodotorula, Saccharomyces e Trichosporon Maioria associada a plantas, solos ou fontes de poluio orgnica

Legislao

gua potvel: obedecer ao padro de potabilidade, no oferecer riscos sade humana

Bactrias heterotrficas - at 100 UFC/ml aceitvel (padro intern.) - at 500 UFC/ml ( MS, Br) nmeros maiores no ponto de consumo: * recontaminao na distribuio * na caixa dgua Metodologia para anlise microbiolgica de gua Coleta: Coletar a amostra em recipiente esterilizado; At 4/5 da capacidade do frasco; gua com cloro: 0,1 ml de tiossulfato a 10%; gua bruta que contenha metais pesados: 0,3 ml EDTA a 15%.

Principais mtodos utilizados (deteco coliformes)

Tubos Mltiplos
Leitura NMP

Membrana Filtrante

Leitura Direta

Leitura NMP

Substrato Cromognico

Contagem de Coliforme tcnica dos tubos mltiplos (NMP)

Amostra de gua 1- Caldo lactosado 35/370C/ 24-48 h


presuntivo c. totais

2- Caldo Verde Brilhante e Bile 2% 35/370C/ 24-48 h

10 ml

1 ml

0,1 ml

confirmativo

3- Caldo Ec 44,50C- 24 h
Coliformes fecais

gua: trs sries de cinco tubos

Teste presuntivo

Teste confirmativo coliformes fecais

Teste confirmativo coliformes totais

Mtodo membrana filtrante

Coliformes Totais

Tpicas (Brilho metlico)

Atpicas

Coliformes fecais

Metodologia com Substrato Cromognico / Fluorognico


Baseia-se na utilizao de substratos anlogos lactose (glicopiranosdeos) processados somente por Escherichia coli. Exemplos: ONPG (Orto Nitrofenil galactopiranosdeo) e MUG (MetilUmbeliferone Galactopiranosdeo) Ferramenta poderosa para identificao de Escherichia coli (teste confirmativo)

Incubao por 24 h. Incolor: Negativo; Adio do meio com substrato amostra Amarelo Coliforme total +; Azul Coliforme E. coli +

Deteco de Coliformes em Amostras De guas Deteco de Coliformes em Amostras De guas

D e t e c o d e E . c o li e m A g a r N u t r ie n t e c o m M U G

Contagem de bactrias heterotrficas

Diluies

1,0ml Pour Plate PCA

gar padro para contagem (PCA). Incubao: aerobiose por 24-48 horas a 350C Quantificao:UFC/ml