Efecto del tratamiento de endometritis clnica sobre el comportamiento reproductivo en las vacas lecheras RESUMEN El objetivo de esta prueba

de campo fue comparar el efecto del antibiotico intrauterino (IU) o la prostaglandina F2 (PGF2a) intramuscular (IM) en tiempo de gestacin en vacas lecheras diagnosticadas con endometritis clnica entre 20 y 33 das en leche (DIM). La definicin de casos de endometritis fue la presencia de secrecin purulenta uterina o cervical con dimetro > 7,5 cm o la presencia de descarga muco-purulenta despus del 26 DIM. Haba 316 vacas con endometritis procedentes de 27 fincas al azar dentro del rebao para recibir 500 mg de benzatina cefapirina intrauterina (IU), 500 mg de cloprostenol IM, o ningn tratamiento. La tasa de resolucin de los signos clnicos 14 das despus del tratamiento fue de 77% y no se vio afectada por el tratamiento. El comportamiento reproductivo fue monitoreado por un mnimo de 7 meses despus del tratamiento. El anlisis de supervivencia (regresin multivariante de riesgos proporcionales) fue utilizado para medir el efecto del tratamiento a tiempo para el embarazo. No hubo beneficios del tratamiento de la endometritis posparto antes de 4 semanas. La administracin de PGF2a entre 20 y 26 de DIM a las vacas con endometritis que no tienen un cuerpo lteo palpable se asoci con una reduccin significativa en la tasa de embarazo. Entre 27 y 33 DIM, las vacas con endometritis tratados con cefapirina IU tuvieron un tiempo significativamente ms corto para quedar preadasz que las vacas no tratadas (razn de riesgo = 1,63). En este perodo de tiempo, no hubo diferencia en la tasa de embarazo entre PGF2a y las vacas no tratadas, pero la diferencia en la tasa de embarazo entre las vacas tratadas con cefapirina IU y con PGF2a no fue estadsticamente significativa. El tratamiento de la endometritis posparto debe reservarse para los casos diagnosticados despus del 26 de DIM, con base en los criterios que se asocian con una tasa de embarazo posterior. INTRODUCCIN La eficacia reproductiva es un componente clave del manejo de produccin de leche. El diagnstico y tratamiento de la enfermedad uterina posparto, y su supuesto impacto sobre el comportamiento reproductivo, tradicionalmente han atrado considerable atencin de los veterinarios y productores. La endometritis es una inflamacin localizada de la pared uterina, asociada a la infeccin posparto crnica del tero con bacterias patgenas, principalmente Arcanobacterium pyogenes (Bondurant, 1999). Los criterios de diagnstico para identificar las vacas que han afectado el desempeo reproductivo asociados con endometritis clnica han sido examinados (LeBlanc et al., 2002). El tratamiento de la endometritis es objeto de controversia entre los profesionales veterinarios, particularmente con respecto a aquellas terapias a usar, y en menor medida, a aquellas vacas a tratar, o si se debe tratar a todas (Gilbert, 1992). El principio general de tratamiento de la endometritis es detener y revertir los cambios inflamatorios que perjudican la fertilidad. Prcticamente, los tratamientos tienen por objeto reducir la carga de bacterias patgenas y mejorar los procesos de defensa del tero y la reparacin. Una amplia variedad de terapias para la endometritis se han reportado, incluyendo los antibiticos sistmicos o locales, as como PGF2a sistmicas o el estradiol. El

tratamiento de la endometritis posparto ha sido revisado (Gustafsson, 1984; Bretzlaff de 1987, Gilbert y Schwark, 1992; Olson, 1996). Bien diseados, los ensayos clnicos a gran escala con las definiciones de caso objetivo y econmicamente resultados significativos faltan. Muchos ensayos teraputicos sufren de la falta de controles negativos, un pequeo nmero de animales que resulta en poco poder estadstico, o ambos. La mayora de las investigaciones han utilizado los criterios diagnsticos de la endometritis que no fueron validados en cuanto a su efecto sobre el comportamiento reproductivo, lo que hace difcil o imposible de discernir un verdadero efecto del tratamiento. Algunos estudios han utilizado la curacin clnica o bacteriolgica en el punto final (Callahan y Horstman, 1993; Dohmen et al, 1995; Brooks, 2000.), ms que econmicamente las medidas pertinentes de la funcin reproductora: la probabilidad y el momento del embarazo. Por otra parte, muchos estudios han informado de las medidas de la funcin reproductora que estaban sesgados o incorrectamente analizados estadsticamente. Hay poca evidencia de un beneficio de cualquier antimicrobiano IU en el desempeo reproductivo en vacas con endometritis (Steffan et al, 1984;. Thurmond et al, 1993.), Pero hay algunas pruebas de que el uso rutinario de PGF2a despus del parto reduce el tiempo de embarazo (Etherington et al, 1988;. Risco et al, 1994). La mayora de los ensayos clnicos comparativos (Steffan et al, 1984;. Sheldon y Noakes, 1998) y comentarios (Gilbert y Schwark, 1992; Olson, 1996) han concluido que PGF2a es al menos tan eficaz como o es preferible una infusin iu de antimicrobianos para el tratamiento de la endometritis. Sin embargo, sigue habiendo una falta de resultados convincentes sobre esta cuestin, la administracin de antibiticos IU a las vacas lecheras sigue siendo comn. La reciente aprobacin de antibiticos IU etiquetados para el tratamiento de la endometritis con retirada de leche cero da la oportunidad de llevar a cabo una comparacin de campo a gran escala entre antibitico iu e inyeccin de PGF2a para el tratamiento de la endometritis en hatos lecheros. El objetivo de este estudio fue comparar los avances para el tratamiento de la endometritis clnica que se utilizan comnmente en la prctica veterinaria, incluyendo un control negativo. El objetivo especfico fue evaluar el efecto sobre el comportamiento reproductivo de una sola administracin de antibitico iu (benzatina cefapirina) o la administracin IM de PGF2a (Cloprostenol) en el perodo posparto como terapia para la endometritis en las vacas lecheras. MATERIALES Y MTODOS Los detalles completos de la poblacin de estudio y protocolo de examen han sido reportados previamente (LeBlanc et al., 2002). En pocas palabras, todas las vacas Holstein en 27 rebaos fueron examinadas rutinariamente una vez entre los 20 y 33 DIM. Se registraron la historia del parto con ayuda de veterinarios, nacimientos de mellizos, retencin de placenta durante > 24 h, o metritis (Enfermedades sistmicas atribuibles a la infeccin del tero) en la lactancia en curso. El examen incluy la inspeccin de la vulva, la cola, y el perineo; vaginoscopa, y la palpacin transrectal del cuello uterino, el tero y los ovarios. La descarga uterina se clasific como: moco claro, moco con manchas de pus, mocopurulento, o purulento. La definicin de caso para la endometritis fue la presencia de secrecin purulenta uterina o cervical de dimetro > 7,5 cm durante todo el perodo de inscripcin, o secrecin muco-purulenta

despus del 26 de DIM. En estos criterios diagnsticos fue visible (LeBlanc et al., 2002) identificar las vacas con una disminucin significativa de las tasas de embarazo. Haba 316 vacas con endometritis de un total de 1.865 vacas examinadas (16,9%). Despus del diagnstico, los animales fueron asignados aleatoriamente para recibir de inmediato ya sea 500 mg de benzatina cefapirina en base de pomada de 19.6 g (Metricure, Intervet, Boxmeer, Pases Bajos) por infusin transcervical IU, 500 mg (2 ml) de cloprostenol (un anlogo sinttico de PGF2a) por inyeccin IM (Estrumate, Schering-Plough Animal Health, Pointe Claire, Quebec, Canad), o ningn tratamiento. Debido a la diferente naturaleza y vas de administracin de los tratamientos de prueba, el cegamiento no fue posible. Por lo tanto, no se utiliz placebo para los controles negativos. Los productos fueron almacenados y manipulados de acuerdo a instrucciones de la etiqueta. Ambos productos de prueba tuvieron cero retencin en leche y 2 das de abstinencia de carne despus del tratamiento. Los tratamientos fueron asignados dentro del hato, con una lista de nmeros aleatorios generados por computadora para producir un grfico de la asignacin al tratamiento secuencial. Dentro de cada rebao, cada grupo consecutivo de tres tratamientos fue equilibrado para el grupo experimental. Exmenes de seguimiento Cada animal fue reexaminado 14 das despus del diagnstico y tratamiento (entre 34 y 47 DIM), exactamente como en la inscripcin. La curacin clnica se defini inicialmente como la ausencia de pus en el examen de seguimiento. Los animales que no se curaron clnicamente recibieron una segunda dosis del mismo tratamiento inicialmente administrado. Estos animales fueron examinados por tercera y ultima vez despus de 14 das adicionales (entre 48 y 61 DIM, 28 das despus de la inscripcin inicial). Cualquier animal que todava tena pus en el tercer examen se registra como un fracaso clnico y recibi cefapirina IU y PGF2a al mismo tiempo. Para los animales que fueron tratados inicialmente y todava tenan alguna secrecin purulenta 14 das ms tarde, ambos cefapirina IU y PGF2a fueron administradas simultneamente, y el protocolo termin como un fracaso clnico. El efecto de la resolucin clnica (y, por tanto, el nmero de tratamientos) fue controlado por la inclusin en los modelos de comportamiento reproductivo. Por lo tanto, todas las vacas se mantuvieron en el anlisis de la tasa de embarazo, pero ninguno fue excluido en la base de fracaso clnico. Basndose en la definicin de caso de la endometritis derivada anteriormente, la resolucin clnica se defini posteriormente como la ausencia de descarga mucopurulenta o peor y el dimetro de cuello uterino 7,5 cm en el segundo examen. Esto dio lugar a 42 vacas que tuvieron moco con manchas de pus en el segundo examen y recibieron un segundo tratamiento, aunque no tena la endometritis clnica. Estas vacas no fueron incluidas en el presente anlisis. Despus de la terminacin del protocolo de tratamiento, todas las vacas siguieron las practicas de manejo reproductivo normal del hato en el perodo de cra. Esto incluye varios tratamientos individuales o de programas sistemticos de rebao de una o ms inyecciones de PGF2a y / o GnRH para la deteccin de celo o sincronizacin, o la sincronizacin de la ovulacin. No se recogieron datos sobre el nmero de inyecciones de PGF2a que una vaca puede haber recibido tras el protocolo de tratamiento. Datos de inseminacin y fechas de sacrificio y embarazo se obtuvieron utilizando la grabacin de datos en fincas formas y los registros de DHI. Comportamiento reproductivo y los datos de sacrificio de todos los animales fueron conseguidas hasta 7 meses despus de que la ltima vaca fue registrada. Observaciones del tiempo de

embarazo de las vacas que fueron sacrificadas durante la prueba antes del embarazo fueron censurados en la fecha de sacrificio. Para las vacas que no estaban embarazadas en la terminacin de la recopilacin de datos, las observaciones fueron censuradas en esa fecha. Los siguientes resultados se midieron para evaluar el desempeo reproductivo: intervalo desde el parto hasta la primera inseminacin (de das a primer servicio), el riesgo de embarazo en el primer servicio (%), intervalo de parto con el embarazo (dias abiertos), riesgo acumulado durante el embarazo (%), el nmero de inseminaciones por preez en vacas preadas, y el riesgo de remocin para reproducciones fallidas (%). Se detect la gestacin por palpacin transrectal del tero por lo menos 35 das post-reproduccion. El riesgo acumulativo de embarazo fue la proporcin de vacas inscritas en la prueba que eventualmente quedaron embarazada en la lactancia. El riesgo de remocin para reproducciones fallidas fue la proporcin de vacas inscritas en la prueba que fueron criadas por lo menos tres veces, pero no quedaron embarazadas y fueron sacrificadas. Gestin de Datos y Anlisis estadstico Todos los anlisis se realizaron con SAS, versin 8.0 (1999). asociaciones simples de tratamiento con los resultados binarios se analizaron mediante la estadstica de chicuadrado. Si una frecuencia de clulas se espera menos de cinco, de Fisher prueba exacta fue sustituido por chi-cuadrado. Los modelos finales de variables cualitativas, como covariables, se generaron mediante regresin logstica multivariable (el procedimiento GENMOD en SAS, con la distribucin binomial, y la funcin de enlace logit). El total de las inseminaciones en vacas gestantes fue modelada tambin con el procedimiento GENMOD en SAS, pero especificando una distribucin de Poisson distribucin, enlace de registro, y el desplazamiento igual al logaritmo natural del nmero de vacas en cada estrato. El efecto de la correlacin de las vacas en un hato (clustering) se ajust en tanto los modelos binarios y contar, usando ecuaciones de estimacin generalizada con la estructura del compuesto correlacin simetra para producir slidos errores estndar (McDermott et al, 1994;. Shoukri y pausa, 1999). Kaplan-Meier (lmite del producto) las estimaciones de supervivencia de funcin (el procedimiento LIFETEST en SAS) se utilizaron para calcular las asociaciones de crudo de tratamiento con la mediana del tiempo hasta la primera inseminacin y el embarazo, y para generar grficos de riesgo de embarazo acumulativo en el tiempo utilizando la tira de ajuste de curva enSigma-Plot (versin 5.0, SPSS Inc., 1999). Los efectos del tratamiento en el tiempo hasta la primera inseminacin y el embarazo se analizaron con anlisis de supervivencia multivariante mediante regresin de riesgos proporcionales de Cox (el procedimiento PHREG en SAS). Ambos procedimientos de anlisis de supervivencia son no paramtricos, por lo que no depende de ninguna especificacin de la distribucin subyacente de los datos. Ajuste por correlacin dentro de hatos se realiz mediante la aplicacin de la macro de riesgos proporcionales de apalancamiento (PHLEV) en SAS para producir errores estndar robustos para la regresin de riesgos proporcionales (Bergstralh et al, 1993;. Therneau, 1993). Aunque el anlisis de la supervivencia de los modelos de tiempo de un evento, en el modelo de Cox, la salida se expresa como un hazard ratio (HR), el riesgo relativo de embarazo entre los grupos en un intervalo de tiempo muy pequeo (es decir, la "probabilidad diaria de la concepcin"; Fourichon et al., 2000). Real de la mediana de das abiertos, ajustado por covariables, se tomado de la funcin de supervivencia estimaciones facilitadas por la opcin de base PHREG, en el punto donde las estimaciones estabilizado la funcin de supervivencia por debajo de 0,5. El efecto principal de inters fue el impacto del tratamiento en tiempo de gestacin, en vacas con endometritis clnica.

Categrica variables ficticias creadas para infusin y PGF2a, con las vacas no tratadas con endometritis como referente. Las comparaciones entre cefapirina y PGF2a en modelos de supervivencia se hicieron con la "prueba" la declaracin en la regresin de riesgos proporcionales de principal. La prueba de la igualdad de efecto entre la dos tratamientos positivo fue ajustado por covariables en el modelo, pero no para el efecto de correlacin dentro de hatos debido a que la prueba de contraste no est disponible en thePHLEV macro. La estructura dominante de ovario palpable en el examen inicial se ha codificado con variables dummy para cuerpo lteo (CL), folculo o quiste, sin estructuras como el referente. En el anlisis multivariable de la funcin reproductora, el ajuste para la correlacin dentro de hatos se hizo en todos los modelos mediante la inclusin de hato como efecto aleatorio. Adems del efecto principal del tratamiento, los efectos de antes trastornos de la reproduccin, el grupo de la paridad, la estructura ovrica en el tratamiento y la curacin clnica fueron ofrecidos a los modelos covariables. Estos modelos fueron construidos por el manual de eliminacin hacia atrs paso a paso, la eliminacin de la covariable con el mayor valor de p en cada paso hasta que todas las covariables fueron significativas a P <0,10. Si un nivel de una variable ficticia fue significativa, todos los niveles se mantuvieron. Involucin estaba en curso durante el perodo de inscripcin, y porque estos cambios se espera que influyen en la respuesta al tratamiento, se decidi, a priori, para examinar los resultados estratificados en anteriores (20-26 DIM) y ms tarde (27 a 33 DIM) mitades de la perodo de inscripcin, as como en general. RESULTADOS De 316 vacas con endometritis, 89 (28%) fueron aleatoriamente asignados a no recibir tratamiento inicialmente, 111 (35%) recibieron cefapirina IU, y 116 (37%) recibieron PGF2a. La desigualdad evidente de las asignaciones de tratamiento se debi a la reclasificacin post-hoc de las vacas basada en la definicin de casos de endometritis a partir de los datos (LeBlanc et al., 2002). No hubo asociacin entre la asignacin del tratamiento y el grupo de paridad (P = 0,61), o el momento de la inscripcin (primera o segunda semana del perodo, p = 0,59). No hubo diferencias aparentes entre los grupos de tratamiento en bruto de la involucin del tero y cuello uterino despus del tratamiento (Tabla 1). Aunque no hubo vacas sin endometritis con el cual comparar a los exmenes de la segunda y tercera, las vacas con endometritis lograron involucin bruta (cuello uterino <7,5 cm de dimetro y los cuernos uterinos de aproximadamente 4 cm de dimetro), en promedio, en el momento del segunda examen. Las estructuras de ovario fueron ms variables, pero no hubo tendencias claras por diferencias entre los grupos de tratamiento. La resolucin clnica fue definida como la ausencia de descarga muco-purulenta o descarga uterina peor y el dimetro de cuello uterino 7,5 cm en el segundo examen (Tabla 2). Hubo 223 animales disponibles para evaluar la resolucin de los signos clnicos. 93 vacas (29%) no disponen de datos adecuados para esta evaluacin. De estas, 15 vacas fueron eliminadas antes del examen de seguimiento, pero el resto no fueron examinadas por omisin, en la mayora de los casos atribuibles a la cancelacin de las visitas programadas al rebao. Otras 19 de 51 vacas (37%) que recibieron un segundo tratamiento no se sometieron al tercer examen. En el caso de las vacas que fueron inicialmente no tratadas, pero no se curaron y recibieron ambos tratamientos en el segundo examen, aparentan haber causado confusin entre los mdicos sobre la necesidad de realizar la tercera evaluacin. A pesar de estas omisiones, las tasas brutas de la resolucin de los signos clnicos fueron altas (aproximadamente 77%) tanto para el tratamiento inicial como para tratamientos secundarios y no fue diferente (P> 0,9) entre los grupos de tratamiento o a travs de los tiempos de inscripcin. Por otra parte, la resolucin clnica no fue un efecto

significativo en los modelos posteriores de la funcin reproductora. Por lo tanto, en esos modelos, las vacas no fueron estratificadas en el estado de repetir el tratamiento. No hubo asociaciones significativas entre el tratamiento simple y cualquier medida absoluta de la funcin reproductora en las vacas con endometritis (Tabla 3). Sin embargo, despus de 26 DIM, las vacas no tratadas tendieron (P = 0,07) a tener una mediana mayor de das para el embarazo que las vacas tratadas con antibiticos o la infusin de PGF2a. En general, no hubo un efecto significativo de cualquiera de los tratamientos a tiempo para el embarazo, en comparacin con los controles (Tabla 4). Sin embargo, cefapirina tendido a reducir el tiempo de embarazo en un 29%, en relacin a las vacas no tratadas (P = 0,14), y fue significativamente mejor en general que PGF2a (P = 0,04). Hubo varios modificadores biolgicamente estimables de los efectos del tratamiento, incluyendo el intervalo en el tratamiento despus del parto y si la vaca tenia un CL palpable en el momento del tratamiento. El efecto del tratamiento, la infusin, en particular, tienden a depender del momento del tratamiento despus del parto (interaccin de cefapirina y la semana del perodo de estudio, p = 0,12). Por lo tanto, los resultados fueron estratificados en la semana del perodo de estudio, y dentro de estos estratos, segn la situacin del ovario de la vaca (Tabla 4). Para las vacas con tratamientos iniciados entre 20 y 26 DIM, en general no hubo diferencias significativas en la tasa de embarazo entre los tres grupos de tratamiento. A pesar de que endometritis en este perodo se asocia con alteracin de la fertilidad, ni el tratamiento acorto el tiempo para la gestacin en relacin a las vacas no tratadas con endometritis. En todos los sustratos, no hubo beneficio significativo de cualquiera de los tratamientos administrados entre 20 y 26 de DIM (Tabla 4). Adems, en este marco de tiempo, entre las vacas que no tuvieron un CL palpable, la administracin de PGF2a tuvo un aparente efecto significativo mortal sobre la tasa de embarazo. Para las vacas con tratamientos iniciados entre el 27 y 33 DIM, los tratados con la cefapirina IU tuvieron una tasa de embarazo del 63% mayor (P = 0,01) que las vacas no tratadas con endometritis, aunque esto no fue estadsticamente diferente (p = 0,19) a partir de la mejora del 18% en vacas tratadas con PGF2a (Tabla 4). El efecto de cefapirina fue significativamente mejor que ningn tratamiento en las vacas con un CL palpable, pero no en vacas sin un CL. En la segunda semana del perodo de estudio, uno de los tratamientos tuvo un efecto ms beneficioso en las vacas con CL que en las vacas sin. Las vacas tratadas con cefapirina consistentemente tuvieron una tasa de embarazo numricamente mayor que aquellas tratadas con PGF2a, pero esas diferencias no fueron estadsticamente significativas. El efecto de la resolucin clnica de exmenes de seguimiento no ha contribuido (P = 0,75) a los modelos de los efectos del tratamiento sobre la tasa de embarazo (Tabla 4). Del mismo modo, las vacas con endometritis que tuvieron una secrecin purulenta tuvieron una tasa de embarazo similar (P = 0,63) a las vacas con descarga mucopurulenta, cuando el tratamiento se incluy en el modelo. El grupo de paridad (igualdad) y de las estructuras ovricas fueron covariables significativas en los modelos de tiempo de embarazo, la curacin clnica, el intervalo hasta la primera inseminacin y el riesgo de embarazo a primer servicio. Por ejemplo, por cada aumento de la paridad de un grupo, las vacas tenan una reduccin del 15% en la tasa de embarazo (HR = 0,85, p = 0,02).Sin embargo, no hubo interaccin del tratamiento con la paridad (P = 0,83). Las vacas con un folculo palpable como la estructura dominante de ovario tenan una

tasa de embarazo significativamente mayor (RR = 1.4, P = 0,01), mientras que aquellas vacas con un CL tendan a tener mayor tasa de embarazo (HR = 1,3, p = 0,11), en relacin con aquellas sin estructuras palpables en el momento del tratamiento. Debido a que la PGF2a ejerce su efecto primario a travs de lutelisis, a falta de datos sobre los niveles de progesterona, el efecto del tratamiento de las vacas con endometritis fue estratificada en funcin de la presencia de un CL palpable (Cuadro 4). En las vacas con un CL palpable, Los tratamientos con cefapirina IU y PGF2a incrementaron la tasa de embarazo en un 75% (P = 0,003) y 43% (P = 0,21), respectivamente, en relacin a las vacas no tratadas. Aunque slo la primera fue significativamente diferente de las vacas sin tratar, los efectos de los tratamientos no fueron diferentes entre s (P = 0,36). Por el contrario, en vacas sin un CL palpable, ni el tratamiento redujo el tiempo de gestacin en relacin con los controles, y la PGF2a tendi (P = 0,09) a prolongar los dias abiertos. La figura 1 muestra que las diferencias en la tasa de preez acumulada fueron leves hasta aproximadamente 130 DIM. Ajustando el efecto de la paridad del grupo, estimando la mediana de das abiertos y su 95% de intervalos de confianza fueron 172 (142 a 222), 134 (115 a 166), y 165 d (116 a 291) para no tratamiento, cefapirina y PGF2a respectivamente. En los modelos multivariables (no demostrado), no hubo diferencias significativas entre los grupos de tratamiento en: tiempo para la primera inseminacin, riesgo de embarazo en la primera inseminacin, nmero de inseminaciones por vaca preada, o riesgo de sacrificio de falla reproductiva. DISCUSIN Este estudio es uno de los ms grandes ensayos clnicos aleatorios del tratamiento de la endometritis post-parto en las vacas lecheras. Es el primero en usar una definicin de caso para la endometritis que se muestra para identificar las vacas con una reduccin significativa en la tasa de embarazo (LeBlanc et al., 2002). Es uno de los pocos que incluye un grupo control sin tratar con ambos grupos PGF2a y antibiticos IU, y es el primero en utilizar el anlisis de supervivencia multivariado, ajustado por la correlacin dentro de hatos, para medir el efecto del tratamiento a tiempo para el embarazo. A pesar del alcance de esta investigacin, no es concluyente para resolver la controversia y el conocimiento incompleto sobre los meritos de la PGF2a o los antibiticos IU para los tratamientos de endometritis. Sin embargo, surgieron varias mejoras prcticas del enfoque clnico para el tratamiento de la endometritis. Impacto del tratamiento sobre el comportamiento reproductivo En general, ninguno de los tratamientos produjo una tasa de embarazo significativamente mayor en relacin a las vacas no tratadas. Sin embargo, el poder estadstico fue menor al ideal. Adems, el efecto del tratamiento depende del intervalo post-parto, y la presencia de un CL en el tratamiento. Debido a que el intervalo desde el parto hasta el tratamiento se conoce con certeza, y porque se asocia con los procesos subyacentes de la involucin y la reanudacin del ciclo estral, los resultados fueron estratificados primero en: temprano (20 a 26 DIM, ambos inclusive) y tarde (incluido 27-33 DIM) mitades del perodo de estudio. Esta distincin no debe ser tomada como absoluta. En la primera mitad del perodo de inscripcin (20-26 DIM), no hubo beneficio significativo del tratamiento en el tiempo para el embarazo. Por otra parte, el uso de PGF2a para el tratamiento de vacas con endometritis en ese perodo en la ausencia de un CL se asoci con una reduccin significativa en la tasa de embarazo. A pesar de

que las vacas a los 20-26 DIM tenian anomalas clnicas asociadas con una reduccin en la tasa de embarazo en relacin a las vacas sin endometritis, ni el tratamiento redujo el tiempo del embarazo con respecto a no hacer nada. (LeBlanc et al. 2002) reportaron que las vacas con descarga muco-purulenta o peor descarga uterina o dimetro de cuello uterino > 7.5 cm que persiste ms all del 26 DIM tuvieron una reduccin ms pronunciada en la tasa de embarazo que las vacas con endometritis diagnosticadas entre 20 y 26 DIM. En conjunto, el estudio actual y compaero apoy la probabilidad de que una alta proporcin de vacas tienen una resolucin espontnea de la endometritis posparto hasta por lo menos 4 semanas. Por el contrario, si los signos clnicos asociados con un mayor tiempo de embarazo se presentan despus de 4 semanas, la condicin pueden ser ms sensibles al tratamiento. Entre el 27 y el 33 DIM, las vacas tratadas con cefapirina IU tuvieron una tasa de embarazo significativamente mayor que las vacas no tratadas. Es probable que hubiera efectos no medidos en el ambiente uterino, tales como el alcance o grado de inflamacin (Bonnett et al., 1993) y el restablecimiento de la actividad hormonal normal del hipotlamo, la hipfisis, ovario, tero y que interactan con el tratamiento. Sin embargo, dado el mecanismo de accin de la PGF2a, por la ausencia de las mediciones de progesterona, las vacas con endometritis fueron estratificadas en la presencia o ausencia de un CL palpable en el momento del tratamiento. El efecto de ambos tratamientos fue mayor en vacas con un CL. Podra decirse que las vacas que han restablecido la ciclicidad (como lo demuestra un CL) estn avanzando en el proceso de involucin, es probable que la endometritis se resuelva espontneamente en el corto plazo, y no puede beneficiarse de la terapia exgena. Sin embargo, en vacas con un CL, la cefapirina aument significativamente la tasa de embarazo en relacin con los casos no tratados. Sera prudente no ignorar el aumento estimado del 45% en la tasa de embarazo entre las vacas con un CL que recibieron PGF2a, aunque este efecto no fue estadsticamente diferente de cualquiera de los otros dos grupos. Aunque no se espera que los antimicrobianos IU esterilicen el tero (Bretzlaff, 1987), puede reducir la carga bacteriana hasta un punto en el que las defensas uterinas ganan dominio del tero y los estimulos inflamatorios son reducidos. La prostaglandina F2 probablemente logra el mismo objetivo mediante la reduccin del nmero de bacterias a travs de la limpieza de los efectos de los cambios de cuerpo y cuello uterino estro-relacionados y la influencia favorable de la disminucin del nivel de progesterona en los fagocitos uterinos. Estos efectos, en particular de la cefapirina, parecen ser potenciados por la reanudacin de la ciclicidad. Curiosamente, las curvas de la tasa de embarazo (las funciones de superviviencia estimadas) no parece separarse entre los grupos de tratamiento hasta aproximadamente 130 DIM (Figura 1), lo que sugiere que la diferencia en la tasa de embarazo entre cefapirina y los otros dos grupos se debi en gran medida a los acontecimientos posteriores en la perodo de cra. No est claro cmo las diferencias en el efecto del tratamiento para la endometritis administrada aproximadamente a los 30 DIM deberia manifestarse ms de 100 das despus. Este perodo coincide con el retorno a un balance energtico positivo y el estado del cuerpo cada vez mayor en las vacas lecheras de alta produccin, que influye en el ciclo estral y la fertilidad (Butler y Smith, 1989; Butler, 2000) y meritoriamente pueden interactuar con un efecto residual de la endometritis. El tratamiento eficaz de la endometritis en el posparto puede reducir el nmero de vacas con deterioro persistente de la fertilidad en el periodo (endometritis subclnica crnica). Hay evidencia preliminar de que la endometritis subclnica es comn al comienzo del perodo de cra, y que puede ejercer un importante efecto perjudicial sobre la funcin reproductora (Gilbert et al., 1998). En las vacas con endometritis posparto pasado 4 semanas, pero sin un CL, tampoco el tratamiento acorto significativamente el tiempo de embarazo. La falta de efecto de la

PGF2a en vacas sin un CL no es compatible con un efecto directo uterotnico de PGF2a en vacas posparto, en contraste a las sugerencias repetidas con frecuencia en la literatura (Steffan et al, 1984;. Young et al, 1984.). Si el principal efecto de la PGF2a es para causar regresin (y por tanto inducir el estro), es lgico que este tratamiento no es diferente a ningn tratamiento en vacas sin un CL. Este hallazgo est de acuerdo con numerosos estudios que han evaluado el posible efecto teraputico de la PGF2a en las vacas "anormales"en el posparto primeras 5 semanas, todos los cuales han fracasado en encontrar beneficios estadsticamente significativos en el rendimiento reproductivo en comparacin con las vacas no tratadas (Benmrad y Stevenson , 1986; Stevenson y Call, 1988a; McClary et al, 1989;. Archbald et al, 1990;. Glanvill y Dobson, 1991; Risco et al, 1994). Sin embargo, como en el presente estudio, el nmero de vacas no proporcion el poder estadstico para detectar diferencias moderadas entre los grupos. El efecto negativo sobre la tasa de embarazo del tratamiento temprano (entre 20 y 26 DIM) con PGF2a de vacas que no tenan un CL fue inesperado. Es biolgicamente sensible que PGF2a no tendra ningn beneficio en la ausencia de un CL de respuesta, y no est claro cmo la droga produce un efecto aparentemente perjudicial sobre la fertilidad. Sin embargo, Gay y Upham (1994) inform que la administracin de PGF2a a aproximadamente 25 DIM para vacas clnicamente normales con un CL palpable redujo significativamente el riesgo de embarazo en el primer servicio. Se especula que el tratamiento podra haber tenido un inespecifico efecto perjudicial sobre el desarrollo folicular temprano. Del mismo modo, Tenhagen y Heuwieser (1999) encontraron que la administracin cada dos semanas de PGF2a 22-28 DIM hasta la primera cra de 50 a 60 DIM reduce el riesgo de concepcin al primer servicio desde 50% al 35%, en vacas con y sin endometritis vaginoscopicamente diagnosticadas. La primera ovulacin posparto se produce normalmente alrededor de 3 semanas despus del parto en las vacas lecheras y es seguido por una corta (<10 d) fase ltea (Stevenson, 1997). Se ha informado de que las condiciones incluyendo endometritis retrasan el proceso de reinicio de la ciclicidad (Stevenson y Call, 1988b). Es posible que la PGF2a exgena durante este perodo crtico de los ciclos de transicin pueda causar la lisis prematura de tejido luteal, privando al hipotlamo, la glndula hipfisis, ovarios de la progesterona necesaria para restablecer la sealizacin endocrina normal y la funcin ovrica. En la prctica, esto refuerza la conclusin de que las vacas no se benefician del tratamiento con PGF2a a menos que CL est presente. Dada la habilidad imperfecta para identificar CL por palpacin (Ott et al, 1986;.. Kelton et al, 1991), las vacas con o sin la endometritis no deben ser tratadas con PGF2a hasta despus del parto por lo menos 4 semanas. Es difcil comparar estos resultados con los dems, porque hay algunos informes que utilizan una definicin de caso reproductiva basada en el comportamiento de la endometritis, incluidos los controles negativos, y anlisis de supervivencia utilizados o de regresin logstica para analizar el tiempo de embarazo. Crudamente, los resultados son consistentes con la mayora de los informes publicados, que no han podido documentar mejoras significativas en el rendimiento reproductivo, asociado con el tratamiento de la endometritis, ya sea con antibiticos IU o PGF2a. Es particularmente sorprendente que, cuando se ajust para modificadores de efecto significativo, las nicas mejoras significativas en la tasa de embarazo se asociaron con los antibiticos IU. Sin embargo, otro estudio tambin reporto un efecto beneficioso de cefapirina IU sobre el comportamiento reproductivo de vacas con antecedentes de

retencin de la placenta, becerro muerto o secrecin vulvar (McDougall, 2001). Estos resultados contrastan con las conclusiones de varios estudios de terapia de endometritis que mostraron poco apoyo para el uso de antibiticos IU, y por lo menos evidencia circunstancial en favor de PGF2a (Gustafsson, 1984; Bretzlaff de 1987, Gilbert y Schwark, 1992; Olson, 1996). Si el presente estudio no incluy un grupo control sin tratamiento, se habra concluido, con pocas excepciones, que simplemente no haba diferencia significativa entre cefapirina IU y PGF2a. En un estudio de endometritis diagnosticada vaginoscopicamente tratada a los 13 o 21 DIM, no hubo efecto de infusin IU de una dosis baja de cualquier oxitetraciclina o penicilina en el tiempo para el embarazo, en relacin con los casos no tratados (Thurmond et al., 1993). Slo hay otros dos informes publicados que compararon los efectos de antimicrobianos IU, PGF2a o ningn tratamiento sobre el comportamiento reproductivo en vacas con endometritis (Steffan et al, 1984;. Callahan y Horstman, 1987). En ambos estudios, como se muestra, en general no hubo diferencias significativas en los das abiertos o los riesgos de embarazo acumulativos entre los grupos de tratamiento, aunque Steffan et al. (1984) inform que la combinacin de los grupos de las vacas tratadas tenan una tasa de embarazo ms altas que las vacas no tratadas con endometritis. En otros estudios en las vacas con endometritis, la PGF2a tienden a producir mayor riesgo de embarazo acumulado y bajar la media de das abiertos que los antimicrobianos IU (Steffan et al, 1984;. Vujosevic de 1984, segn lo informado por Bretzlaff, 1987). Sin embargo, en estos ensayos, la PGF2a fue dada a 37, o a 19 y 30 DIM respectivamente. Sin embargo, en el estudio de Steffan et al. (1984), el beneficio ms pronunciado de PGF2a fue en las vacas con progesterona en circulacin inferior a 1,5 ng / ml (es decir, sin CL funcional). En conjunto, estos resultados sugieren que el tratamiento de la endometritis despus de aproximadamente 30 DIM puede mejorar el desempeo reproductivo. Resolucin de signos clnicos La tasa de resolucin de los signos clnicos fue alta y no se ve afectado por el tratamiento. En otras palabras, fueron altas tasas de resolucin espontnea de secrecin purulenta cervical e involucin uterina. Estos resultados estn de acuerdo con otros estudios, que han fracasado para encontrar diferencias en la tasa de curacin clnica entre antibiticos IU y PGF2a (Callahan y Horstman de 1987, Murray et al, 1990; Sheldon y Noakes, 1998), o entre cualquiera de las terapias y el no tratamiento (Callahan y Horstman, 1987). Sin embargo, la ausencia de secrecion no implica un mejor desempeo reproductivo. En el presente estudio, la curacin clnica no fue asociada significativamente con la tasa de embarazo. La descarga purulenta puede ser un marcador de cambios inflamatorios en el tero que reduce la tasa de embarazo y que pueden persistir ms all de la misma descarga (Bretzlaff, 1987;. Gilbert et al, 1998). Slo el 4% de las vacas con endometritis tuvieron una secrecin purulenta uterina persistente de ningn carcter 4 semanas despus del diagnstico inicial, y despus de uno o dos tratamientos. Uso de la palpacin rectal para evaluar la situacin de ovario y su efecto sobre el tratamiento Es necesario tener precaucin en la interpretacin de los resultados de la palpacin

transrectal de estructuras ovricas. En el contexto de las vacas recin paridas en general, y el tratamiento de la endometritis, en particular, hay dos posibles efectos de la condicin de ovario. En primer lugar, ya sea que la vaca haya reanudado la ciclicidad en el momento del examen, o no. Si los ciclos estrales se estn llevando a cabo 3 a 4 semanas despus del parto, esto es favorable para la fertilidad en general (Thatcher et al., 1973), y la resolucin de la endometritis en particular. Esto es soportado por la observacin de que cualquiera de los tratamientos, pero sobre todo cefapirina, produjo mayor tasa de gestacin en vacas con endometritis que tenian un CL (Tabla 4). La evaluacin de si o no una vaca es cclica se ha hecho en entornos de investigacin sobre la base de mediciones seriadas de la progesterona (Benmrad y Stevenson, 1986). En la prctica clnica, la ciclicidad es crudamente estimada por la presencia de folculos palpables y CL que sean compatibles con la actividad ovrica. Los presentes resultados sugieren que esta tcnica tiene alguna capacidad de distinguir las vacas de una manera significativa, pero la sensibilidad y la especificidad de la palpacin para la evaluacin de la ciclicidad son desconocidos. En segundo lugar, si una vaca post parto realmente tiene un CL funcional, esto implica no slo que es cclica, sino que debe responder a la administracin de PGF2a. Sin embargo, la precisin de la palpacin rectal para determinar la presencia de un CL funcional es imperfecta. Un resumen de los cuatro informes encontraron que la precisin de la palpacin media fue de 76% con respecto al ensayo de la progesterona, con una tendencia ms al falso negativo que al falso positivo de la palpacin (Ott et al., 1986). Por el contrario, Kelton et al. (1991) encontraron que en comparacin con el estndar de oro de un radioinmunoanlisis para progesterona en la leche, la palpacin tenan una media de sensibilidad del 82,6% y una especificidad del 52,6%. En ese estudio, la prevalencia real de tejido luteal funcional fue de 77,4%. Tejido luteal sensible a prostaglandina se espera que est presente desde el dia 5 al 17 de un tpico ciclo estral de 21-d de la especie bovina, o aproximadamente el 62% del tiempo, en promedio. La verdadera prevalencia del CL sencible a prostaglandina en la poblacin del estudio actual se desconoce, pero la prevalencia aparente de CL en vacas de entre 20 y 33 DIM, con base a la palpacin, fue de aproximadamente 45%. En el perodo postparto temprano, el restablecimiento de un ciclo estral regular incluye ciclos cortos e irregulares con el crecimiento folicular, pero sin la ovulacin y la formacin de un CL normal (Stevenson, 1997). Por lo tanto, es sorprendente que la presencia de un folculo palpable como la estructura de ovario predominante durante el perodo de inscripcin fuera consistente y significativamente asociadas con mayor tasa de embarazo. Esta conclusin es apoyada por Bonnett et al. (1993), quienes encontraron que la presencia de un folculo palpable en 26 DIM se asoci significativamente con una mayor probabilidad de embarazo en un 120 DIM. Es posible que en las vacas se identifique un folculo ovrico como la estructura dominante en el periodo peri-estro, lo que indica que es cclica, con los beneficios consiguientes para la salud del tero asociadas con estro (Gilbert y Schwark, 1992). Dada una jerarqua en la que un CL es considerado dominante a un folculo concurrente, los folculos estrales slo se espera que sea la estructura predominante entre los das 18 y 21 del ciclo, o 14% del tiempo. En el presente estudio, los folculos

fueron identificados como la estructura dominante de ovario aproximadamente el 20% del tiempo, por lo que es poco probable que todas estas vacas se encontraran en proestro o estro. Por lo tanto, es posible que algunos CL fueran clasificados errneamente como folculos. Interpretacin y aplicacin de los resultados Los presentes resultados muestran una situacin en la que puede haber una diferencia entre la significacin estadstica y biolgica o la importancia de gestin (Galligan et al, 1991;. Stewart et al, 1994.). Rothman y Greenland (1998) hicieron el caso de que la adhesin de hiptesis estadsticas arbitrarias probando sin tener en cuenta que la estimacin del efecto puede conducir a errores de tipo II (Falso negativo) con respecto a la hiptesis biolgica que se trate. Hay muchos factores que influyen en el rendimiento reproductivo, lo que resulta en tiempos muy variables individuales con el embarazo en grandes grupos de vacas. Esto presenta un desafo considerable a la estimacin precisa de los efectos del tratamiento de la endometritis en el rendimiento reproductivo que es poco probable que se resuelva con un solo ensayo clnico. El tamao de la muestra se estim con base en la deteccin de una diferencia de 10 das de embarazo, con una desviacin estndar de 30 d. En general, las diferencias en la mediana de das abiertos entre grupos de tratamiento fueron 14 a 44 d. Sin embargo, la desviacin estndar en todo momento con el embarazo fue mayor de lo previsto (70 das), lo que redujo el poder del tamao de la muestra calculado para establecer diferencias estadsticamente significativas entre los tratamientos, incluso si es que existen. Con una gran variacin, la deteccin de una diferencia de 10 das con el embarazo se requieren aproximadamente 768 vacas por grupo de tratamiento (Martin et al., 1987). Con una prevalencia del 16%, esto requerira un examen de 14.000 vacas, que no era factible. Por lo tanto, el estudio se dio por concluido una vez que el tamao de la muestra prevista se haba alcanzado. El conjunto de datos actual tiene el poder para identificar una diferencia de aproximadamente 25 das abiertos entre los grupos de tratamiento, lo que explica por qu la mayora de las diferencias observadas entre ambos grupos no fueron estadsticamente significativas. Estas cifras estn destinadas a proporcionar un contexto general solamente, ya que los resultados de inters fueron la tasa de embarazo y la mediana de das con el embarazo, calculada por el anlisis de supervivencia. Dada una base de 205 das abiertos en las vacas sin tratar, una de recursos humanos para el embarazo de 1,18 (Cuadro 4) implica una reduccin de 37 d para el embarazo. Teniendo en cuenta una prdida econmica de CDN $ 4.70 / d abierta ltimos 85 DIM (Plazier et al., 1997), esta gestin tiene una importancia considerable. Sin embargo, los intervalos de confianza alrededor de estas estimaciones fueron amplios. Por otra parte, de recursos humanos son una medida relativa, y la conversin a las medidas absolutas de rendimiento depende del valor en el grupo de referencia. Al tratar a las vacas a principios del perodo post-parto, puede haber habido un sesgo en contra de un efecto beneficioso significativo del tratamiento con PGF2a, porque la mayora de las vacas no tienen un CL (lo mejor esto podra ser determinada por palpacin). Teniendo en cuenta los resultados observados aqu, es posible que el tratamiento tardo post parto pueden aumentar la eficacia

aparente de PGF2a en relacin con antibiticos IU y ningn tratamiento, para la mitigacin de la tasa de embarazo disminuy en vacas con endometritis. Este estudio no aborda directamente la cuestin de si el diagnstico individual y tratamiento de la endometritis produce tasas de embarazo superior a un programa sistemtico de ganado programado automticamente con inyecciones de PGF2a antes de la poca de cra, es decir, a travs de inyecciones de rutina cada dos semanas sin diagnstico de endometritis (Tenhagen y Heuwieser, 1999; Heuwieser et al. 2000). Debido al uso comn de los programas de manejo de cra, muchas vacas en este estudio han recibido una o ms inyecciones de PGF2a despus del perodo de estudio. Aunque esto podra confundir el efecto del tratamiento de la endometritis, cuando este tipo de intervenciones se realizaron, que fueron independientes de tratamiento para endometritis, y por lo tanto fueron efectivamente un efecto aleatorio a nivel de las vacas. En rebaos en los que hubo un programa sistemtico de las inyecciones de PGF2a en el perodo de reproduccin, esto se debi a un control estadstico para el efecto de hato. CONCLUSIONES No hubo mejoras significativas en la tasa de embarazos asociados con el tratamiento de la endometritis en determinadas condiciones. Sorprendentemente, esto representa la nueva informacin, porque ha habido muy pocos estudios publicados que incluyeron un grupo control sin tratamiento. No hubo beneficio en el tiempo hasta el embarazo de tratamiento de la endometritis posparto antes de 4 semanas. Por otra parte, la administracin de PGF2a entre 20 y 26 DIM a las vacas con endometritis que no tenan un CL palpable fue asociada con una reduccin significativa en la tasa de embarazo. Entre el 27 y 33 DIM, las vacas con endometritis tratados con cefapirina IU tuvieron un tiempo significativamente ms corto con el embarazo que las vacas no tratadas, pero la diferencia en la tasa de embarazo entre las vacas tratadas por infusin y las vacas tratadas con PGF2a no fue estadsticamente significativa. En las vacas con endometritis que haba un CL palpable, no hubo diferencia significativa en el tiempo con el embarazo entre los grupos tratados por infusin y los tratados con PGF2a. Ambos grupos tienden a tener una tasa de embarazo ms alta que en las vacas no tratadas. Las vacas deben ser seleccionadas para el tratamiento de la endometritis postparto despus de 4 semanas, utilizando criterios diagnsticos vlidos, incluyendo vaginoscopa. Se necesitan ms investigaciones sobre el momento ptimo y la necesidad de la administracin repetida de PGF2a como un tratamiento para la endometritis. En contraste con la opinin generalizada de los revisores (Gilbert y Schwark, 1992; Olson, 1996), hay un nicho, aunque limitado, en los que cefapirina IU es un tratamiento beneficioso para la endometritis. Est abierto a la pregunta de si alguna diferencia significativa existe entre cefapirina y PGF2a para el tratamiento de la endometritis ms all de 33 DIM.