Introduccin a la Bacteriologa LUNES 20 DE NOVIEMBRE DE 2006 Bacterias: estructura y morfologa Las bacterias son los organismos ms pequeos que

poseen toda la maquinaria requerida para su crecimiento y replicacin, son procariotas y presentan formas celulares caractersticas. Sor organismos relativamente simples y algunos son fciles de manipular en el laboratorio, son importantes en la ecologa de la tierra ya que participan en la fijacin del nitrgeno, son eje central del ciclo del carbono debido a su habilidad para degradar muchos polmeros naturales como la celulosa y otros compuestos. Morfologa: Principales grupos morfolgicos: Cocos: forma esfrica u ovoide, pueden existir como clulas individuales o en agrupaciones:

Diplococos: se forman cuando dos cocos se dividen y permanecen juntos formando pares. (Neisseria sp.) Cadenas: formacin de largas filas (Streptococcus sp.) Racimos: agrupaciones en forma de racimos de uva (Staphylococcus sp.) Bacilos: forma cilndrica, varan en longitud y anchura, el extremo puede ser plano, redondeado o bifurcado. Pueden formar parejas o cadenas. Algunos pueden ser curvos.

Espirilios: bacilos que se curvan en forma espiral

Espiroquetas: en forma de sacacorchos

Filamentosas: clulas largas y delgadas, o cadenas de clulas.

Los procariotas presentan tamaos que van desde 0.1-0.2 m de ancho y 50 m de dimetro. Para efectos comparativos, una clula eucariota tpica puede variar de 2 a ms de 200 m de dimetro, por lo tanto la mayora de los procariotas son muchos ms pequeos que los eucariotas y el tamao pequeo determina algunas de sus propiedades biolgicas. Por ejemplo la velocidad con la que los nutrientes penetran al interior de la clula y salen de esta las sustancias de desecho constituye un factor clave porque influye en los ritmos metablicos celulares y en la velocidad de crecimiento. La relacin es inversamente proporcional al tamao celular. Las velocidades de transporte son en parte dependientes de la superficie de membrana disponible respecto al volumen. Con relacin a su tamao, las clulas pequeas tienen ms superficie relativa disponible que las grandes, por lo que puede llevar a cabo un intercambio de nutrientes con el medio en condiciones ms ventajosas. Las clulas pequeas manifiestan velocidades de crecimiento ms rpidas y la formacin de poblaciones celulares ms grandes respecto a las clulas de mayor tamao. Estructuras internas:

Membrana citoplasmtica: Se localiza alrededor del citoplasma por debajo de la pared celular. Constituye una barrera diferencial selectivamente permeable que separa el lado interno del externo, por lo que regula el transporte de materiales hacia adentro o hacia afuera de la clula. Est constituida por: - Fosfolpidos 20-30% - Protenas 60-70% Las molculas de fosfolpidos tienen terminaciones polares (hidroflicas) y terminaciones no polares (hidrofbicos) por lo que se denominan antipticos. Se organizan de una manera tal que forman una bicapa fosfolipdica con sus extremos polares hacia el exterior y los no polares hacia el interior. Esta bicapa provee una barrera hidrofbica que es solamente permeable al agua y a pequeas molculas hidrofbicas.

En las Eubacterias los fosfolpidos son fosfoglicridos en donde las cadenas de cidos grasos se unen al glicerol por enlaces tipo ster (-CO-O), en las Arquibacterias existen lpidos compuestos por dos cadenas de hidrocarburos unidos por un enlace ter (-O-) con el glicerol, lo que conforma un diter compuesto de glicerol y dos molculas de alcohol (fitanol). Las membranas bacterianas se diferencian normalmente de las eucariotas en que carecen de esteroles como colesterol (a excepcin de los Mycoplasma). Sin embargo, muchas membranas contienen molculas pentacclicas, similares al esterol, denominadas hopanoides. Estas sustancias, del mismo modo que los esteroides en los eucariotas, probablemente estabilicen la membrana bacteriana. El modelo ms aceptado actualmente es el modelo de Mosaico Fluido, que puede presentar cambios reversibles de estado dependiendo de la temperatura y la composicin. Existen dos tipos de protenas: - Integrales 70-80% - Perifricas 20-30% Las protenas integrales estn unidas firmemente a la membrana por lo que, no se extraen fcilmente. Las protenas perifricas se encuentran asociadas a la superficie y pueden se removidas por choque osmtico. El tipo de protenas presentes en la membrana varan de acuerdo a las condiciones de crecimiento del organismo (aerobias o anaerobias). La principal funcin de la membrana citoplasmtica es la de regular el flujo de

materiales dentro y fuera de la clula. Los mecanismos por los cuales se llevan a cabo estos procesos son la difusin pasiva, el transporte activo, la translocacin de grupos y la citosis. La membrana plasmtica bacteriana es tambin el lugar donde se desarrollan numerosos procesos metablicos: respiracin, fotosntesis, sntesis de lpidos y de constituyentes de la pared celular. Mesosomas: Invaginaciones de la membrana plasmtica para formar vesculas, tmulos o lamelas y se observan tanto en bacterias Gram negativas como en Gram positivas, siendo ms prominentes en estas ltimas. Se desconoce su funcin exacta, pero como suelen situarse a continuacin de los septos o tabiques que dividen las bacterias y a veces parecen estar unidas al cromosoma bacteriano se cree que pueden estar involucrados en la formacin de la pared celular durante la divisin o desarrollar un papel en la replicacin del cromosoma y su distribucin en las clulas hijas. Tambin, pueden estar involucrados en procesos secretorios. Citoplasma: A diferencia del citoplasma eucariota, este carece de organelas provistas de membranas. Constituido principalmente por agua (por lo menos el 70% de la masa bacteriana es agua), tiene la apariencia semejante a un gel y se encuentra englobada en la membrana citoplasmtica. Su funcin es la de retener componentes celulares donde se llevan a cabo muchas de las funciones de crecimiento, metabolismo y replicacin. Existen regiones de inters como: - Regin cromatdica que es rica en ADN - Regin granular formada por los ribosomas - Regin fluida donde estn disueltas las sustancias. Cuerpos de Inclusin: Son grnulos de material orgnico o inorgnico en el citoplasma que son usualmente visibles al microscopio. Poseen una composicin variada algunas de naturaleza protenica y otras pueden contener lpidos. Su importancia es que en condiciones favorables sirve de almacenaje de sustancias que posteriormente le sirven como reservas nutritivas.

Cuerpos de inclusin orgnicos: - Glucgeno: polmero de unidades de glucosa Reserva de carbono - Poli--hidroxibutirato: molculas de -hidroxibutirato para energa y biosntesis - Grnulos de cianomicina: producidas por las cianobacterias, compuestos de grandes polipptidos con partes iguales arginina y cido asprtico. Almacenan nitrgeno extra para la bacteria. - Carboxisomas: cianobacterias, bacterias nitrificantes y tiobacilos. Son inclusiones polidricas que contienen la enzima ribulosa-1,5-bifosfato carboxilasa, y sirve como reserva de la misma o como sitio para la fijacin de CO2. - Vacuolas de gas: cianobacterias, otras bacterias fotosintticas y formas acuticas (Holobacterium). Estas bacterias pueden flotar en o cerca de la superficie porque estas vacuolas les da flotabilidad. Cuerpos de inclusin inorgnicos: - Grnulos de polifosfato: Polmero lineal de ortofosfatos que sirven como fuente de energa. - Grnulos de Volutina: reserva de fosfato. Ribosomas: Los ribosomas son pequeos y aunque parezcan partculas sin ninguna caracterstica importante son muy complejos. De composicin proteica (35%) y de cido ribonucleico (65%) son el sito de sntesis de protenas. Son ms pequeos que los ribosomas eucariotas y se denominan comnmente ribosomas 70S (subunidades 50S y 30S). Nucleoide: El material gentico no se encuentra delimitado por una membrana nuclear, el cromosoma procaritico (ADN doble banda circular) est localizado en una regin de forma irregular llamada nucleoide. Anlisis qumicos han revelado que est compuesto de 60% de ADN, algo de ARN y una pequea cantidad de protena.

Plmidos: Las bacterias pueden contener, adems del cromosoma, una o ms molculas circulares de ADN doble banda, llamada plsmidos que contienen una cantidad limitada de informacin gentica especfica. Pueden replicarse independientemente o pueden estar integrados en el cromosoma. No son necesarios para el crecimiento o reproduccin de la bacteria, pero pueden aportar genes que aportan una ventaja selectiva (resistencia a antibiticos, nuevas habilidades metablicas, patogenicidad). Endosporas:

Estructuras nicas de las bacterias (principalmente gram positivas), los principales gneros: Bacillus, Clostridium, Sporosarcina, Desulfotomoculum y Thermoactinomyces. Son cuerpos refrctiles que no se tien con los colorantes ordinarios y son resistentes al calor, a la desecacin, radiacin, agentes desinfectantes y otros agentes ambientales que puedan afectar el crecimiento bacteriano. Representan un avance selectivo para la supervivencia y la diseminacin de las especies que son capaces de originarlas. La forma y localizacin depende de la especie bacteriana, por forma pueden ser ovoides, esfricas o elipsoidales y por su localizacin pueden ser terminales, centrales o subterminales. La esporulacin se produce al cesar el crecimiento celular como consecuencia del gasto de nutrientes, existen diversos cambios en la expresin de genes de la clula (Bacillus al menos 200 genes estn implicados en el proceso). Requiere el

cese de la sntesis de algunas protenas implicadas en las funciones celulares y la produccin de protenas especficas de la espora.

Rodeada por una capa delicada y delgada de naturaleza proteica denominada exosporio. Debajo de este se encuentra la cubierta de la espora compuesta por varias capas de protenas. Bajo la cubierta descansa el crtex constituido por un peptidoglicano modificado (menor nmero de enlaces). Debajo la pared que rodea al protoplasto que contiene las estructuras celulares nomales. Las capas contienen murena y dipicolinato de calcio (15% del peso seco) que es el responsable de la resistencia al calor al estabilizar los cidos nucleicos. Esporulacin: - Fase 0: se duplica el material gentico - Fase I: formacin del filamento axial - Fase II: plegamiento interno de la membrana celular para englobar uno de los cromosomas y producir el septo de la preespora - Fase III: membrana contina creciendo y engloba la espora inmadura con una segunda membrana. - Fase IV: Se forma el crtex entra las 2 membranas, donde se acumula el dipicolinato de calcio. - Fase V: se forman las cubiertas - Fase VI: maduracin de la espora - Fase VII: enzimas lticas liberan la espora

Paso de espora a clula vegetativa: Activacin: proceso reversible, preparacin de la espora para la germinacin, se da por algn estmulo, por ejemplo el calor. Germinacin: es un proceso rpido, se hincha, la cubierta se rompe o se absorbe. Se pierde la resistencia al calor, radiacin, desecacin, etc. Se desencadena por ciertos metabolitos, por ejemplo los nutrientes del medio (aminocidos, azcares, etc.). Crecimiento: protoplasto fabrica nuevos componentes. Estructuras externas: Pared celular: Las bacterias, a excepcin de algunos micoplasmas y algunas arquibacterias, tienen una pares fuerte que les da forma y las protege de la lisis osmtica y sustancias txicas. En algunos microorganismos puede tener componentes que le confieren patogenicidad. En 1884 el investigador dans Christian Gram observ diferencias tintoriales relacionadas con la habilidad de ciertas clulas bacterianas de retener el colorante cristal violeta despus de la decoloracin con etanol al 95%, estas clulas fueron llamadas Gram positivas. Las clulas que se decoloraban y solamente son visibles al teirlas con un colorante de contraste son referidas como Gram negativas. Esto se deba a las diferencias existentes en la estructura de la pared celular: - Gram positiva: formada por una nica capa homognea de 20-80 nm de grosor, de peptidoglucano o murena situado por fuera de la membrana plasmtica.

Adems de polmeros aninicos (cidos teicoicos y teicournicos), polisacridos neutros, protenas y en algunos casos lpidos. Los cidos teicoicos se encuentran presentes en la pared de dos maneras, unidas covalentemente al peptidoglucano o a lpidos de membrana como cidos lipoteicoicos. Sus funciones son unir la pared celular con la membrana citoplasmtica y acumular cargan negativas para atrapar cationes como el Mg2+, que es esencial para la actividad normal de las enzimas de membrana. Existe un espacio periplsmico que no tiene tantas protenas como en las Gram negativas, pero secretan exoenzimas.

- Gram negativa: es ms compleja, posee una capa de 2-7 nm de grosor de peptidoglucano rodeada por una membrana externa de unos 7-8 nm. El espacio entre estas dos capas se denomina espacio periplsmico y la sustancia que ocupa ese lugar periplasma. En este espacio hay muchas protenas que participan en la captacin de nutrientes y protenas quelantes que participan en el transporte de materiales hacia el interior de la clula, contiene tambin enzimas que participan en la sntesis del peptidoglucano y en la modificacin de compuestos txicos que podran lesionar a la clula. Por fuera de la fina capa de peptidoglucano se encuentra una membrana externa que cumple la funcin de una membrana lisosomal, las enzimas hidrolticas del espacio periplsmico se mantienen separadas de la clula gracias a la membrana y al peptidoglucano para prevenir la autodigestin. El espacio periplsmico es isoosmtico con el citoplasma y fuertemente aninico con el medio externo, por lo que es en parte responsable de mantener la osmolaridad (afuera es hiposomtico). La membrana externa funciona como una barrera permeable para los solutos hidrofilicos. El componente ms importante de la membrana externa es el Lipopolisacrido (LPS) o endotoxina que es la principal toxina de las bacterias entricas patgenas. Los fosfolpidos y protenas se encuentran en menor concentracin que en la membrana plasmtica. Existe un tipo de protenas llamadas porinas que forman canales transmembrana y permiten el paso de solutos de acuerdo al peso molecular (nutrientes hidroflicos).

Peptidoglucano: Polmero constituido por residuos alternantes de Nacetilglucosamina y cido N- acetilmurmico (aminoazcares). Una cadena de 4 aminocidos D- y L- alternantes est conectada al cido N- acetilmurmico y vara de acuerdo a las especies.

Glicoclix: Polisacridos de origen bacteriano que se localizan alrededor de la membrana externa (Gram negativas) y del peptidoglucano Gram positivas). Se clasifican como: - Slime o tipo S: matriz difusa - Cpsula: matriz fibrosa bien organizada: rgida flexible integral perifrica La cpsula est formada por polisacridos y en algunos casos puede contener protenas, su componente principal es el agua lo que puede proteger a la bacteria

de la desecacin. Permite a las bacterias unirse a diferentes tipos de sustratos, previene la ingestin de la bacteria por las clulas fagocticas, evita virus bacterianos y puede dar patogenicidad.

Pilis y fimbrias: En la mayora de bacterias Gram negativas se encuentran apndices cortos, finos y ms delgados que un flagelo que no estn involucrados en la movilidad:

Fimbrias: Tubos delgados compuestos de subunidades proteicas ordenadas de forma helicoidal, dimetro de 3-10 nm y unos m de largo. Al menos 1 000 fimbrias, son nicamente visibles en un microscopio electrnico debido a su tamao. No se conoce con certeza su funcin, se ha observado que estas estructuras pueden servir para anclar a la bacteria a superficies slidas como rocas y tejidos.

Pili: apndice similar que se encuentra en una menor cantidad en la clula (de 1-10 por clula) y es de mayor tamao (9-10 nm de dimetro). Estn genticamente determinados por factores sexuales o plsmidos conjugativos y son importantes para el apareamiento bacteriano.

Flagelos: La movilidad: requiere un gasto de energa y dentro de un hbitat tiene importantes consecuencias ecolgicas y diferencia entre la vida o la muerte de la clula. El movimiento a lo largo de superficies slidas por deslizamiento o por vesculas de gas en medios acuticos, no es un sistema de movilidad verdadera. La capacidad de movimiento independiente est dada por el flagelo. Es un apndice locomotor delgado y semirgido de 20 nm de dimetro y de 15-20 m de largo. Son tan delgados que no son visibles al microscopio de luz, pero pueden utilizarse tinciones especiales para as aumentar su dimetro. Su estructura detallada puede ser nicamente visible con un microscopio electrnico. Existen diversos patrones de distribucin flagelar, que son muy tiles para la identificacin bacteriana: - Monotrico: un solo flagelo colocado al final de la clula bacteriana y se denomina flagelo polar

- Anfitrico: un flagelo en ada polo celular

- Lofotrico: un grupo de flagelos en uno o varios polos celulares

- Peritrico: Falgelos por toda la superficie bacteriana

Utraestructura flagelar: El flagelo est compuesto por 3 partes fundamentales: -Filamento: porcin ms larga, cilindro rgido y hueco constituido de una nica protena llamada Flagelina. -Gancho: une el filamento con el cuerpo basal como una cubierta flexible, ligeramente ms ensanchado, constituido de subunidades proteicas diferentes. -Cuerpo Basal: embebido en la clula, es la parte ms compleja del flagelo: a.Gram negativas: cuerpo basal con 4 anillos conectados a un filamento central. Los anillos ms externos L y P se asocian con la capa de lipopolisacridos y peptidoglucano, respectivamente y los internos S y M con la membrana plasmtica. b.Gram positivas: cuerpo basal con nicamente 2 anillos, el ms interno asociado a la membrana plasmtica y el externo al peptidoglucano.

Sntesis Flagelar: Proceso muy complejo que involucra varios genes, al menos unos 20-30 genes: Genes que codifican para la flagelina, 10 o ms genes que codifican para las protenas del gancho y el cuerpo basal Otros genes estn involucrados con el control de la construccin o la funcin flagelar. An no se sabe cmo la clula regula o determina la localizacin exacta del flagelo. El crecimiento del flagelo no se produce a partir de la base sino de la punta Las molculas de flagelina formadas en la clula pasan a travs de un ncleo hueco del flagelo y se insertan en el extremo terminal, luego las subunidades espontneamente se agregan. El crecimiento del flagelo se produce ms o menos continuamente, aunque la velocidad de crecimiento disminuye a medida que aumenta el tamao del filamento. Si se rompe una parte de la punta, se regenera. Mecanismo de Movimiento Flagelar: Cada flagelo es una estructura semirrgida incapaz de flexionarse pero, se mueve por rotacin que parte del cuerpo basal que funciona como un motor. La energa que se necesita para la rotacin del flagelo proviene de la fuerza motriz generada por un gradiente de protones. Los flagelos no rotan a velocidad constante sino que la velocidad de rotacin aumenta o disminuye en relacin con la intensidad de la fuerza motriz del gradiente. La direccin de la rotacin flagelar determina la naturaleza del movimiento bacteriano. -Monotrico: el flagelo polar rota en sentido contrario a las manecillas del reloj para

un movimiento hacia adelante. Para detenerse o dar vuelta cambia la rotacin flagelar en sentido de las manecillas del reloj.

-Peritrico: la rotacin es parecida.

Publicado por Silvia Mau Inchausteguien 14:510 comentarios Pgina principal Suscribirse a: Entradas (Atom)