Universidad del Magdalena Biologa Facultad de ciencias bsicas

DETERMINACIN DE LA CALIDAD MICROBIOLGICA EN MUESTRAS DE BIVALVOS Argopecten nucleus (PECTINIIDAE) CULTIVADOS EN EL CENTRO DE DESARROLLO PESQUERO Y ACUICOLA DE LA UNIVERSIDAD DEL MAGDALENA Ospina J*; Ospino K* Villarruel G.Y.*
*Estudiantes Facultad de Ciencias Bsicas, Programa de Biologa, Universidad del Magdalena. jefryvg@hotmail.com.

RESUMEN Se realiz un anlisis microbiolgico de bivalvos de la especie Argopecten nucleus, cultivados en el centro de desarrollo pesquero y acucola de la Universidad del Magdalena, con el fin de determinar su calidad microbiolgica, los parmetros que se midieron fueron Escherichia coli y Staphylococcus aureus, Salmonella y Vibrio cholerae. E. coli y S. aureus se determinaron por el mtodo de diluciones seriadas con su posterior siembra en medios de cultivos; Salmonella y V. cholerae, se determinaron por el mtodo de Enriquecimiento - aislamiento selectivo se encontraron colonias de E. coli en el medio de cultivo sembrado con la dilucin a la -1, no se encontr presencia alguna de S. aureus, Salmonella y V. cholerae resultaron negativos, sin embargo se encontraron otras especies de bacterias patgenas, como las del gnero Proteus y Vibrio parahaemolyticus por lo que se determin que el alimento es calidad meda, Pero teniendo en cuenta la normativa colombiana para la calidad microbiolgica de este tipo de alimentos, la calidad es buena. Palabras clave: Argopecten nucleus, calidad microbiolgica, medios de cultivo, patgenas ABSTRACT Microbiological analysis was performed on the species of bivalves Argopecten nucleus, grown in the center of fisheries and aquaculture development at the University of Magdalena, in order to determine their microbiological quality parameters measured were Escherichia coli and Staphylococcus aureus, Salmonella and Vibrio cholerae. E. coli and S. aureus were determined by serial dilution method with subsequent seeding in culture media, Salmonella and V. cholerae were determined by the method of "enrichment - selective isolation" found colonies of E. coli in the culture medium inoculated with the dilution to -1, not found any presence of S. aureus, Salmonella and V. cholerae were negative, however, other species were found pathogenic bacteria such as Proteus and Vibrio parahaemolyticus was determined so that the food is average quality, but given the Colombian legislation for the microbiological quality of these foods, the quality is good. Keywords: Argopecten nucleus, microbiological quality, culture media, pathogenic

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INTRODUCCIN El comercio de pectnidos a gran escala se ha llevado a cabo mediante la pesca comercial y el manejo de organismos en cautiverio. Estas actividades poseen caractersticas y cualidades propias que los diferencian una de otra, de acuerdo a sus niveles de produccin, tipo de instalaciones, equipo, mercado, etc. el desarrollo de la pesquera a gran escala y la acuicultura, han evidenciado la relevancia que tienen las enfermedades en esta actividad econmica. [1] Las bacterias forman parte de la flora autctona de los organismos marinos y su ecosistema, representando hasta un 60% de la poblacin de microorganismos totales en lagunas costeras. Los hongos marinos se encuentran ampliamente distribuidos en el medio acutico. Sin embargo, no estn incluidos entre los principales patgenos de los moluscos bivalvos [1] Los microorganismos pueden estar presentes en el lugar donde se cultivan los animales, hasta el lugar donde son puestos en venta. Existen diversos factores que explican el importante papel que juegan los bivalvos como agentes transmisores de microorganismos que producen enfermedades en el hombre [2] La prdida de calidad microbiolgica de los alimentos puede ocasionar infecciones e intoxicaciones alimentarias, por un lado, y alteraciones de los alimentos, por otro [3] Evidentemente, las estadsticas que abarcan las enfermedades transmitidas

por alimentos no son fiables, los datos publicados slo representan una parte del nmero verdadero de casos [4] El control sanitario en la preparacin de alimentos es determinante para reducir los factores de riesgo que influyen en la transmisin de enfermedades por alimentos para proteger la salud del consumidor [4] METODOLOGA Se midieron los siguientes parmetros microbiolgicos: Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Salmonella y Vibrio cholerae. Se tomaron muestras de bivalvos congelados de la especie Argopecten nucleus cultivados en el centro de desarrollo pesquero y acucola de la Universidad del Magdalena, fueron transportados al laboratorio de microbiologa de la Universidad del Magdalena en nevera de icopor mantenindose congelados. Se extrajo la parte muscular de cada organismo con una esptula estril y se pesaron 10 g de las muestras para la determinacin de E. coli y S. aureus, 25 g para la determinacin de Salmonella y 25 g para la determinacin de Vibrio cholerae La determinacin y el recuento de E. coli y de S. aureus se realiz por el mtodo diluciones seriadas de -1, -2, -3, -4 y -5 con la posterior siembra en superficie sobre el medio EMB para E. coli, y Baird Parker para S. aureus, luego se incubaron a 37C durante 24 horas, realizando posteriormente el recuento

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de colonias en UFC/g. la determinacin de Salmonella y V. cholerae se realiz por el mtodo de Enriquecimiento aislamiento selectivo con una etapa de pre-enriquecimiento utilizando Caldo Salmosyst, una etapa de enriquecimiento adicionando una pastilla de suplemento Salmosyst y una etapa de aislamiento diferencial sobre medio selectivo, sembrando por estria por agotamiento sobre Agar SS, reportando los resultados como ausente o presente.[7] RESULTADOS En el anlisis de E. coli, se encontraron 5 colonias de las mismas en el medio de cultivo sembrado con la dilucin que se encontraba a la -1, en el resto de los medios de cultivo sembrados con las otras diluciones se encontr un valor de 0 colonias.

embargo estaba presente otra especie de bacteria del gnero Proteus. Las bacterias del gnero Proteus son Gramnegativas pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae son comunes en los intestinos de animales y humanos. Sin embargo, en condiciones favorables, que causan infecciones en ojos, piel, odos, nariz y garganta, as como las infecciones del tracto intestinal y urinario, que puede conducir a complicaciones graves, como la pielonefritis aguda o crnica y la formacin de clculos de vejiga y rin.[5]

Ilustracin 2: Medio de cultivo con agar SS con ausencia de Salmonella pero presencia de Proteus

Ilustracin 1: Medio de cultivo EMB con colonia de E. coli, se observa de color brillante en la imagen

En el anlisis de S. aureus se encontr un valor de 0 colonias en los medios de cultivo para todas las diluciones. Para el anlisis de Salmonella, se encontr que estaba ausente sin

Para el anlisis de V. cholerae, se encontr que estaba ausente pero estaba presente otra especie del mismo gnero llamada Vibrio parahaemolyticus. El V. parahaemolyticus se ha establecido como causa de gastroenteritis en nmeros y lugares que se acercan a proporciones globales. Se ha aislado en reas marinas y estuarinas casi todo el mundo y pese a su carcter halfilo, V. parahaemolyticus se ha aislado de solucin salina libre de las aguas. La relacin de este organismo con el

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medio ambiente pone de manifiesto una estrecha asociacin con otros organismos marinos[6].

La contaminacin de los alimentos por E. coli significa riesgo de que uno o ms patgenos entricos puedan haber tenido acceso al alimento, a este punto sumamos la presencia de un representante del genero Proteus, Investigaciones recientes han demostrado que pueden encontrarse E. coli y bacterias coliformes fecales en aguas tropicales clidas no contaminadas y que la E. coli puede sobrevivir indefinidamente en este ambiente [9]. La resistencia de E. coli a condiciones fsicas y qumicas adversas es baja. As, est bien demostrado que los virus entricos sobreviven mucho ms tiempo que E. coli en el agua de mar y que E. coli es menos resistente que la Salmonella en los productos congelados [9]. Teniendo en cuenta este parmetro podemos decir que la contaminacin por E.coli y Proteus encontrada en el anlisis fue por transporte y manipulacin de las muestras hasta el laboratorio debido que no se observo crecimiento de Salmonella, Vibrio cholerae y de S. aureus, y estos dos tipos de bacterias son pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae, habitantes del intestino de animales y del hombre. Por otro lado se observo crecimiento de Vibrio parahaemolyticus, es una bacteria de hbitat marino. Tiene como reservorios: sedimento, partculas suspendidas, plancton, pescados y mariscos, se adhiere a las superficies de quitina (componente estructural de algunos mariscos) [8]. Crece en condiciones de salinidad entre el 3 al 8 %, mvil, con un tamao de 1.4

Ilustracin 3: Medio de cultivo con agar TCBS que muestra ausencia de Vibrio cholerae pero presencia de Vibrio parahaemolyticus

Dilucin

N de colonias de E. coli

N de colonias de S. aureus

Salmonella

Vibrio cholerae Presente + o Ausente -

-1 -2 -3 -4 -5

5 0 0 0 0

0 0 0 0 0

Ausente -

Ausente -

TABLA 1. Resultados obtenidos

DISCUSION Y CONCLUSIN En los resultados obtenidos para el anlisis de bivalvos congelados, se encontr la existencia de contaminacin fecal, ya que hubo crecimiento de cinco colonias de E. coli lo que es una indicacin del peligro potencial. Las colonias existentes se encontraron en el cultivo -1 procedente del enriquecimiento al que se sometieron los 10 mg de la muestra a examinar.

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2.6 m de longitud por 0.5 0.8 m de dimetro, Gram negativo, crece a temperatura entre 10C 44C con una ptima de crecimiento de 35C 37C [8]. Esta ltima caracterstica indica que la temperatura de almacenamiento de los bivalvos para restringir el crecimiento de este tipo de microorganismos no es la adecuada y esto se ratifica teniendo en cuenta que la temperatura de incubacin del cultivo donde fueron halladas las colonias era de 37c temperatura ptima de crecimiento segn la literatura reportada.

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BIBLIOGRAFA [1] Barbosa, V; Luna-Gonzalez, A; Aguirre-Guzman, G; Riquelme, C; & Ascencio-Valle, F. Enfermedades Microbianas de Pectnidos Cultivados en Iberoamrica. [2] Garca Corts, V; Sancho Madriz, M. F. Calidad Microbiolgica de Almejas Congeladas [3] Carbajal Mendoza, M. T; Rabelo Salva, P; Gonzales, C. S; & Ayala Galds M. E; 2003 Evaluacin Microbiolgica de Productos Adquiridos en el Mercado Mayorista Pesquero de Ventanilla Per; Rev Cubana Salud Pblica; 29(2):121-23 [4] Flix-Fuentes, A; Campas-Baypoli O & Meza-Montenegro M; 2005. Calidad Sanitaria de Alimentos Disponibles al Pblico de Ciudad Obregn, Sonora, Mxico; Revista salud pblica y nutricin RESPYN. Vol 6 (3). [5] Knirel, Y.A.; Kaca, W; Rozalski, A & Sidorczyk, Z.(1999) Structure of the OAntigenic Polysaccharides of Proteus Bacteria. Polish J. Chem; 73, 895-907 [6] Joseph SW, Colwell RR, Kaper JB; Vibrio parahaemolyticus and related halophilic Vibrios. [7] Luna J; manual de prcticas de microbiologa. [8] Zamora Pantoja, Diana; Quiroz Santiago, Carolina; Quionez Ramirez, Elsa; Vasquez Salinas, Carlos. 2005. Un enemigo marino silencioso. Revista UNAM, Revista digital universitaria. Vol. 6, No. 4 ISSN: 1607 6079. [9] http://www.fao.org/DOCREP/003/T176 8S/T1768S05.htm