Inserir o nome do Laboratrio

Procedimento Operacional Padro DOSAGEM DA GLICOSE

Pgina 1 de 4 POPBIO 045 Reviso: 00

GLICOSE-PP
PRINCPIO DO TESTE A glicose oxidase (GOD) catalisa a oxidao da glicose para cido glicnico e perxido de hidrogenio. Atravs de uma reao oxidativa de acoplamento catalisada pela peroxidase (POD), o perxido de hidrogenio formado reage com 4-aminoantipirina e fenol, formando um complexo de cor vermelha (quinoneimina), cuja absorbncia medida em 500 nm, diretamente proporcional concentrao de glicose na amostra.

Gli cos e + 1/2 H2O cido Glicnico + H2O2

2 H2O2 + 4 a min oantipirin a + Fenol Quinonei min a + 4 H2O
POD

GOD

APLICAO CLNICA A dosagem da Glicose no sangue empregada na avaliao do metabolismo da glicose (controle de produo, consumo e armazenamento), diagnosticando os diversos estados de hiper e hipoglicemias. AMOSTRA Preparo do Paciente Colher sangue pela manh aps jejum 8 horas, salvo orientaes mdicas. Amostras utilizadas Soro, plasma, lquor e outros lquidos biolgicos. Anticoagulantes como heparina, oxalato, fluoreto ou EDTA, no interferem. Estabilidade e armazenamento da amostra O analito estvel por 7 dias a 2-8 C. Separar o soro ou plasma dos elementos celulares no prazo mximo de 1 hora. Adicionando um inibidor de glicolise como o fluoreto, melhora a preservao da amostra. Volume ideal utilizado para anlise (Definir o volume ideal a ser encaminhado para anlise). Volume mnimo utilizado para anlise (Definir o volume mnimo a ser encaminhado para anlise). Critrios para rejeio da amostra No utilizar amostras fortemente hemolisadas. Fazer referncia ao manual ou POP de coleta, separao e distribuio de material. REAGENTE UTILIZADO GLICOSE PP CAT. 434 GOLD ANALISA DIAGNSTICA LTDA CNPJ 03.142.794/0001-16 Av. Nossa Senhora de Ftima, 2363 MS 80022230067

Belo Horizonte MG Brasil CRF MG - 2010

Farmacutico Responsvel: Homero Jackson de Jesus Lopes

Componentes do kit Conservar entre 2-8C. 1- Padro - Contm Glicose 100 mg/dL. 2- Reagente de Cor - Contm tampo pH 7,5 de fosfato 70 mmol/L, fenol 5,0 mmol/L, glicoseoxidase > 10000 U/L, peroxidase > 1000 U/L, e 4-aminoantipirina 0,4 mmol/L. Cuidados e Precaues Especiais 1- O kit destina-se somente para uso diagnstico in vitro. 2- Aplicar os cuidados habituais de segurana na manipulao dos reagentes e amostra biolgica. Fazer referncia ao manual ou POP de segurana. 3- Os reagentes utilizados em condies tcnicas adequadas e armazenados nas condies especificadas so estveis at a validade citada na embalagem. 4- O reagente uma vez usado, contm soro, plasma ou urina, eventualmente infectado, e deve ser tratado como material potencialmente infeccioso. Fazer o descarte em lugar apropriado. 5- Os reagentes no contm substncias perigosas nas quantidades reportadas. Em caso de vazamento acidental, lavar o local com gua corrente.

Inserir o nome do Laboratrio

Procedimento Operacional Padro DOSAGEM DA GLICOSE

Pgina 2 de 4 POPBIO 045 Reviso: 00

6- Recomenda-se o uso de luvas descartveis durante o manuseio das substncias. Em caso de contato com os olhos ou pele, lavar abundantemente com gua corrente. Em caso de ingesto, procurar atendimento mdico. 7- Aconselhamos no pipetar diretamente do frasco Reagente de Cor (2) para evitar contaminao. 8- O Reagente de Cor poder apresentar uma colorao rsea, mas isso no interferir no resultado do teste. A leitura da absorbncia do reagente branco dever ser inferior a 0,150 durante toda a sua utilizao ou at a expirao da data de validade do mesmo. EQUIPAMENTOS Procedimento Tcnico Manual Banho-Maria a 37C Espectrofotmetro ou fotmetro para leituras em 500 nm Pipetas automticas Cronmetro Procedimento Tcnico Automatizado Citar nome, modelo e o local onde se encontra o equipamento; Fazer referncia ao manual ou POP para utilizao do mesmo. Procedimento Tcnico Alternativo Citar o equipamento alternativo e os procedimentos para medio dos ensaios. Indicar as possveis diferenas quando os procedimentos manuais substiturem os procedimentos automatizados. PROCEDIMENTO Procedimento Manual 1- Deixar os reagentes atingirem a temperatura ambiente ou a do banho-maria antes da realizao do teste. 2- Identificar 3 tubos de ensaio com "Branco", "Teste" e "Padro" e proceder: Tubos Amostra Padro (1) Branco Teste 10 L Padro 10 L

Reagente de Cor (2) 1000 L 1000 L 1000 L 3- Homogeneizar bem e incubar os tubos durante 10 minutos temperatura ambiente (15-30C) ou durante 5 minutos a 37C . 4- Ler a absorbncia (A) do Padro (Ap) e do Teste (At) zerando o aparelho com o Branco em 500 nm. 5- A cor estvel durante 2 horas . Procedimento em Analisadores Automticos Mencionar o manual ou POP para utilizao do equipamento analtico. Anexar o guia de aplicao dos reagentes para o sistema automtico. CLCULOS Ver Linearidade. Como a metodologia obedece lei de Lambert-Beer, a concentrao dos testes pode tambm ser calculada atravs do Fator de Calibrao (FC). Concentrao do Padro = Cp = 100 mg/dL Concentrao do Teste = Ct Absorbncia do Padro = Ap Absorbncia do Teste = At Exemplo: Cp = 100 mg/dL Ap = 0,222 At = 0,208 Fc = Cp = 100 Ap 0,222 FC = 450 Ct = At x FC = 0,208 x 450 = 94 mg/dL

RESULTADOS Unidade de Medida mg/dL Fator de Converso de Unidades (mg/dL para SI) mg/dL de Glicose x 0,0555 = mmol/L de Glicose

Inserir o nome do Laboratrio

Procedimento Operacional Padro DOSAGEM DA GLICOSE

Pgina 3 de 4 POPBIO 045 Reviso: 00

CONTROLE DA QUALIDADE Materiais Identificar os materiais de controle interno e externo da qualidade, citando fabricante e nmero de catlogo. Descrever as Instrues de preparo e freqncia da utilizao dos mesmos. Referenciar POP para limpeza e secagem dos materiais utilizados. Controle Interno Descrever a calibrao peridica de pipetas, equipamentos utilizados, controle de temperatura ambiente e geladeiras para armazenamento dos kits. Citar a utilizao de soros controles (nvel normal cdigo --------- e patolgico cdigo -------) nas anlises realizadas juntamente com a freqncia da utilizao dos mesmos. Descrever o procedimento de verificao de novos lotes de controles e reagentes. Citar POP para controle interno. Controle Externo Descrever os procedimentos utilizados nas avaliaes de qualidade feitas por programas de comparao entre laboratrios ou outros controles de qualidade : PNCQ-SBAC e/ou PELM-SBPC Gerenciamento dos dados obtidos no Controle Interno e Externo Definir como os dados relativos ao controle da qualidade so arquivados e gerenciados. Fazer referncia ao manual ou POP de garantia da qualidade. VALORES DE REFERNCIA Plasma: 70 a 110 mg/dL ou 3,9 a 6,1 mmol/L. Lquor: 2/3 da glicemia Lquidos Corporais: > 60 mg/dL (ou diferena entre glicemia e concentrao de glicose no lquido, desde que no for > 40 mg/dL) SIGNIFICADO CLNICO A glicose a principal fonte de carboidrato do organismo e sua concentrao sangunea est intimamente ligada ao da insulina. Aps uma refeio rica em carboidratos, a glicose que absorvida para o sangue causa uma rpida secreo de insulina. Esta, por sua vez, provoca a captao, armazenamento e uso rpido da glicose por quase todos os tecidos corporais, porm especialmente pelos msculos, tecido adiposo e o fgado. Valores elevados de glicose ocorrem nos vrios tipos de diabetes primrias, nos estados de intolerncia glicose e nas diabetes secundrias a vrias doenas (hipertireoidismo, hiperpituitarismo, hiperadrenocorticismo, etc). Valores diminudos de glicose ocorrem nas hipoglicemias que tm vrias causas. Quando a ocorrncia de sintomas de hipoglicemia relacionada alimentao, duas formas de hipoglicemia podem ser definidas, hipoglicemia do jejum e hipoglicemia ps-prandial. As causas mais comuns de hipoglicemia do jejum so: hiperinsulinismo endgeno (insulinoma e sulfonilurea), hiperinsulinismo exgeno (factcio), tumores extra pancreticos, sndrome auto imune (formao espontnea de anticorpos para receptores da insulina), insuficincia supra renal e ou hipofisria, doena heptica grave e alcoolismo. A hipoglicemia ps-prandial, dependendo da histria clnica e da resposta ao teste oral de tolerncia a glicose, classificada em: 1) hipoglicemia alimentar; 2) hipoglicemia do diabtico tipo 2 e do paciente com intolerncia glicose; 3) hipoglicemia funcional ou reativa. VALORES CRTICOS Plasma: >400 mg/dL <40 mg/dL Incluir o procedimento a ser adotado diante de um resultado crtico. LINEARIDADE E LIMITE DE DETECO Linearidade A reao linear at 500 mg/dL (28 mmol/L). Para valores maiores diluir a amostra com gua destilada ou deionizada e repetir a determinao. Multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluio. Limite de deteco O Limite de deteco do kit foi verificado no comprimento de onda em 500 nm, sendo que a alterao mnima detectvel foi de 0,23 mg/dL. O intervalo de medida vai de 0,23 mg/dL at 500 mg/dL. LIMITAES DO MTODO

Inserir o nome do Laboratrio

Procedimento Operacional Padro DOSAGEM DA GLICOSE

Pgina 4 de 4 POPBIO 045 Reviso: 00

Os resultados devero ser usados em conjunto com informaes disponveis da avaliao clnica e outros procedimentos diagnsticos. Interferncias No utilizar amostras fortemente hemolisadas. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS 1- Bergmeyer HU. Methods of Enzimatic Analysis, Academic Press 2nd ed. 1205-1214. 2- Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. Philadelphia: W.B. Saunders Co. 1994: 932-958. 3- Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fundamento de Qumica Clnica, 4a Ed - Editora Guanabara Koogan; 1998. 4- Kaplan A, Szabo LL, Opheim KE. Clinical Chemistry: Interpretation and Techniques. Philadelphia: Lea & Febiger, 1988:288-293. 5- Trinder P. Ann Clin Biochem 1969;6:24. 6- Trivedi RC et al. Clin Chem 1978;24:1908-1911. 7- GLICOSE-PP, Instrues de Uso, Gold Analisa Diagnstica. Nome Elaborado por: Aprovado por: Implantado por: Substitui POP: Revisado por: Revisado por: Revisado por: Desativado por: Razo: Nmero Cpias Destino Assinatura Data ___/___/___ ___/___/___ ___/___/___ ___/___/___ ___/___/___ ___/___/___ ___/___/___