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BIOSEPARACIONES

Objetivo 1: Identificar anaturaleza de problema de ruptura de clulas en bioseparaciones Diferenciar y describir diferentes tcnicas empleadas en ruptura de clulas}}seleccionar una tcnica adecuada de acuerdo a los rquerimientos de proceso y limitaciones de la tcnica. 1 se debe identificar lo que se esta rompiendo, si el metabolito es extracelular no debo romper nada, en bacterias debo identificar si son gran pos o gran neg, en levaduras hay que ver si el metabolito esta sociado a organelos

Ejemplod e algunos productos obtenidos de lisis celular: Protenas recombinantes Antibiticos }lpidos especializados Polisacridos de pared Pigmentos Enzimas Polmeros intracelulares

El mtodo industrial de rutura celular elegido depende de diversos factores Susceptibilidad de las clulas a la ruptura Estabilidad del producto Facilidad de e xtraccion del producto de lso fragmentos celulares Velocidad del mtodo Costo del mtodo Factores adveroso durante la ruptura celular Dao fsico (espuma) Dao mecanico (esfuerzos cortantes) Dao trmico Dao enzimtico (proteasas) Dao qumico (toxicidad metales pesados)

rupturas celulares

metodos mecanicos

metodos no mecanicos

esfuerzos cortantes

secado

ruptura

presion

enzimatica

esfuerzos cortantes en solido

HOMOGENIZADOR:

MATERIAL HOMOGENIZADO

MATERIAL HOMOGENIZADO

MECANISMOD DE RUPTURA CELULAR EN HOMOGENIZADOS CAVITACION ESFUERZOS CORTANTES IMPACTO NOTA: CUIADO CON LOS MATERIALES ABRASIBOS EN UN HOMOGENIZADOR.

VARIABLES D E DISEO DE HOMOGENIZADORES TIPO DE VALVULA N DE ETAPAS CONCETRACION DE LA SUPENSION CONDICONES D E OPERACIN (PRESION, TEMPERATURA) VISCOSIDAD (ALTA) TIPO Y CONCENTRACION DE SURFACTANTE

ALCOHOL DESHIDREGENASA

FUMARASA

TAMAO PARTICULA

TIEMPO EL DISEO DE LA VALVULA AFECTA LIBERACION DE PROTEINA LA RUPTURA MECANICA DE CELULAS EN HOMOGENIZADORES SIGUE UNA CENETICA DE 1 ORDEN. LA CONSTANTE CINETICA DEPENDE DEL DISEO Y CONDICIONES DE OPERACI{ON DEL HOMOGENIZADOR: K=K(P/d2 x w2 x p)2,9

MOLINOS COLOIDALES (RECORDAR EL MILLI FLOURS)

VARIABLES DE DISEEO DE MOLINO DE PERLAS VELOCIDA PERIFERICA TIENPK DE RESIDENCIA TAMAOY VOLUMEN DE PERLAS CARGADAS TIPO DE DISCO CONCENTRACION DE LA SUSPENSION }CONDICONES DE OPERACIN ETC.

SONICACION EL MECANISMO PRONCIPAL ES LA CAVITACION

RUPTURA NO MECANICA DE CELULAS


ES UNA METODOLOGIA SELECTIVA (SE LOGAR LA PERMEABILIZACION DE CELULA PRO MEDIOS FISICOS Y QUIMICOS. SOLUBILIZACION CON DETERGENTES UTILIZA LOS PRINCIPIOS DE LA QUIMICA DE DETERGENTES BAJANDO LA TENSION SUPERFICIAL HASTA EL PUNTO DE MICELA CRITICA. SE OCUPAN MOLECULS ANFIPATICAS (SULFONATO DE SODIO) QUE SE SOLUBILIZAN LA BICAPA LIPIDICA DE LA MB. SE PUEDEN UTILIZAR SALES CAOTROPICAS Y QUELANTES PARA POTENCIAR SU EFECTO. OTROS AGNETES QUIMICOS DE RUPTURA CELULAR SOLVENTES ORGANICOS: RUPTURA DE MB. POR SOLUBILIZACION DE FOSFOIPIDOS Y DESNATURALIZACION PROTEICA AGENTES CAOTROPICOS: MEDIADORES DE LISIS POR AUMENTAR HIDROFOBICIDAD DEL AGUA QUELANTES: DESETABILIZAN MB POR CAPTURAR IONES BIVALENTES. SE SULEN UTILIZAR A LOS AGNETS EN COMBINACION PARA UAMENTAR LA EFECTIVIDAD (EFECTO SINERGICO) TRATAMIENTO ENZIMATICO SE PRODUCE UNA PERFORACION EN LA PARED DE UN MO SHOCK OSMOTICO RUPTURA POR DIFERENCIAS DE PRESION (DEPENDE DE LA PAFRED CELULAR Y LA ELASTICIDADD E LA MB.

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