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A importncia do controle microbiolgico em raes para frangos de corte frente contaminao por Clostridium perfringens

Publicado o: 01/11/2010 Qualificao: Autor : Marcio Andr Lanzarin (Controle de Qualidade - Btech)
1 INTRODUO

A sustentao do mercado de carnes de aves e seus produtos industrializado sesto associados com a garantia de qualidade e o fornecimento dos alimentos seguros sem riscos a sade do consumidor. As restries diante presena de microrganismos patognicos na cadeia de produo avcola abrangente e consolidada atravs de legislaes prprias. O controle microbiolgico de alimentos destinados as aves avanam com regulamentaes e estudos prprios que apontam os impactos sanidade, a produtividade animal e principalmente sobre a segurana dos alimentos.Dados do FDA (Food and Drug Administration EUA), publicados em 2009,apontam que ocorrem anualmente cerca de 82 milhes de casos de toxi-infeces alimentares, as quais 350 mil casos necessitam de internaes hospitalares,promovendo cerca de 8 mil mortes. Nesse levantamento estatstico verificou-se quase800 tipos diferentes de alimentos como fontes de transmisso, entre eles os produtosde carne de frango, ovos e derivados. LONGO et al (2010) destacou em reviso que,dos tipos e incidncia de doenas alimentares em humanos, quase 66% soprovocadas por microrganismos como as bactrias. JAY (2005) menciona que em 1985foram registrados 8 surtos nos EUA, envolvendo 882 pessoas e duas mortes porgastroenterite alimentar causada por C. perfringens. Em estudo realizado nos EstadosUnidos em 1987, estimouse que em 10 mil casos causados pelas toxinas desse tipo debactria, poderse-ia contabilizar cerca de 100 mortes e o envolvimento de custos emtorno de US$ 1 milho (BUZBY e ROBERTS, 1995). Dentre as diferentes vias de transmisso de bactrias para as aves, as raesapresentam-se como uma via comum para entrada de diferentes bactrias patognicasque podem causar desde efeitos clnicos e/ou subclnicos, com prejuzos nodesempenho das aves e consequentemente perdas econmicas. Observa-se que oprincipal fator est relacionado com a segurana dos alimentos elaborados paraconsumo humano a partir de animais potencialmente infectados. Muitas dessasbactrias desenvolvem-se ou habitam normalmente o contedo intestinal das aves,tornando-as portadoras sintomticas ou assintomticas como o caso da Salmonellasp e o C. perfrigens (LONGO et al, 2010).

Na literatura so encontradas diversas comprovaes entre a presena demicrorganismos na rao e consequentemente nos animais, como em frangos de corte(DAVIES et al 1995 e 2001). A relao entre os altos nveis de contaminao porbactrias em raes tem cito reportada com perdas de produtividade em aves e comoum vetor de bactrias, como a Salmonella (CORRY et al, 2002; SHIROTA et al, 2001;BASTIANELLI e LE BAS, 2002;) e o Clostridium perfringens (SCHOCKEN-ITURRINO &ISHI, 2000). Dessa forma, observa-se a necessidade de estudo do levantamento do nveldessa contaminao e avaliao das diferentes estratgias adotadas pelas fbricas deraes para controle de C. perfringens em alimentos destinados a alimentao defrangos de cortes.
2 IMPORTNCIA DO CLOSTRIDIUM PERFRINGENS NA AVICULTURA

O C. perfringens um microrganismo em forma de bastonete, grampositivo emculturas jovens, medindo de 2 a 6 m de comprimento por 0,8 a 1,5 m de largura.Normalmente ele pode ser encontrado isolado ou em pares, e algumas vezes,formando cadeias curtas. Trata-se de um microrganismo anaerbio que no requercondies de anaerobioses to estritas como os outros clostrdios para crescer,apresentando bom desenvolvimento em meios de laboratrio a temperaturas entre37C e 47C, e tima em 43C. O C. perfringens produz esporos com forma oval naposio central e subterminal da bactria; em meios artificiais a esporulao favorecida pela adio de amido solvel (SCHOCKENITURRINO & ISHI, 2000).As bactrias denominadas por C. perfringens so classificadas como tipostoxignicos A, B, C, D ou E com base na produo de quatro toxinas principais: alfa,beta, psilon e iota. Os tipos A e C so responsveis pelo quadro de infeco entrica,conhecida como enterite necrtica aviria (ENA), manifestandose nas formas clnica ousubclnica, em aves domsticas e silvestres, comprometendo principalmente animaisjovens (SCHOCKEN-ITURRINO & ISHI, 2000). Algumas estirpes de C. perfringenspossuem propriedades de serem menos enterotoxignicas. Alm disso, cepas mutantesou no patognicas, de baixa virulncia, podem fazer parte da microbiota normal dointestino. O isolamento de C. perfringens em amostras de fezes de frango nem sempreest relacionado com a ocorrncia da doena clnica e subclnica de enterite necrtica.GIL de los SANTOS et al (2007) mencionou que o C. perfringens classificadoem cinco sorotipos em funo das toxinas maiores, sendo os sorotipos A e C,produtores de toxina alfa e beta, respectivamente, sendo considerados os agentescausadores da doena enterite necrtica aviria, no entanto sua participao ainda no totalmente esclarecida. Diversos autores (ENGSTRM et al., 2003; NAUERBY et al.,2003; JOHANSSON et al., 2004; HEIKINHEIMO e KORKEALA, 2005;GHOLAMIANDEKHORDI et

al., 2006), analisando por meio de deteco por reao emcadeia da polimerase (PCR) em amostras onde foram isolados o gene codificador datoxina (alfa) do sorotipo A em amostras de frangos de cortes, fgado e instetino, concluram que o agente causador da enterite necrtica aviria (ENA) a bactria C.perfringens sorotipo A. A bactria C. perfringens produz esporos com forma oval na posio central esubterminal, seus sorotipos tipos A e C sobrevivem temperatura de 100C por maisde uma hora. Estes esporos em ambiente resistem s radiaes solares, ao calor e desidratao durante anos. Para garantir sua destruio necessria a exposio auma temperatura de 115C por 4 minutos sob atmosfera de presso (JAY, 2005).C. perfringens pode ser encontrado em contedo intestinal, fezes, solo, raocontaminada, cama do avirio etc. Porm, na maioria dos surtos de ENA, a rao ecama do avirio foram s fontes principais de infeco, sendo que SCHOCKENITURRINO& ISHI (2000) observaram desde a ausncia de contaminao em farinhasde origem animal e at mesmo contagens maiores que 104 UFC/g. Acredita-se que,mesmo as farinhas de origem animal apresentando um baixo nvel de contaminao porC. perfringens, podem servir de inculo (ponto de partida) no intestino das aves paradar incio a um quadro de ENA, dependendo dos fatores de predisposio a que essasaves estejam expostas. Portanto, manter um programa de anlises microbiolgicas emmatrias-primas de raes, tais como farinhas de origem animal (principalmente depenas e de carnes), so necessrias para o monitoramento do perfil de contaminao eo estabelecimento de padres mnimos de qualidade desses ingredientes.ZANOTTO et al (2007) evidenciaram que o processo de cozimento do digestorde fbrica de farinhas de carnes em temperatura de 133C por durante 20 minutos, foieficaz na eliminao da contaminao por C. perfringens, quando foi adicionado em suacomposio 10% de flotado industrial contaminadas com esta bactria. No entanto, asfbricas de farinhas nem sempre atendem os parmetros mnimos de controle e seusrespectivos limites crticos para eliminao da contaminao por esporos e clulasvegetativas. Mesmo respeitando todos os parmetros de controle do processo deproduo, principalmente tempo e temperatura para o cozimento de farinhas de origemanimal, ainda assim, existem os riscos de re-contaminao quando no cumpridosrequisitos estabelecidos na Instruo Normativa n 34 do MAPA (BRASIL, 2008).As drogas antimicrobianas, mais conhecidas como promotores de crescimento,que so adicionadas s frmulas das raes na avicultura intensiva de corte no Brasil constituam a principal ferramenta na preveno da ENA. Entretanto, a partir de 2006,os pases importadores de carne passaram a exigir a retirada dos antibiticos dasdietas dos frangos, com base em opinies que apontam para os efeitos deletrios sade humana,

advindos dos resduos destas substncias na carne, que poderiamestimular a seleo de bactrias multiresistentes nas aves e ainda causar sriosproblemas para a sade pblica mundial (SOUZA, 2006). A bactria C. perfringens pode multiplicar, colonizar o epitlio intestinal e causarenterite necrtica em frangos de corte que no foram submetidos a umaantibioticoterapia profiltica adequada, principalmente quando as aves so submetidasaos fatores predisponentes para o surgimento da doena, dentre eles a alimentaocom elevadas contaminaes dessa bactria ou associao com outros fatoresinvasivos como a presena de eimerias causadores de cocidiose. Ademais, o carter dealta disseminao do C. perfringens pode constituir uma constante ameaa sanidadedos criatrios comerciais de aves em todo o mundo. Para que a exportao de frangocorte do Brasil continue expressiva, principalmente visando pases da Unio Europia,as medidas de preveno da enterite necrtica devero ir ao encontro das recentesnormas de comrcio internacional para a retirada dos antimicrobianos das raes dosfrangos (VIEIRA, 2001) e utilizao de ferramentas complementares para esse controle.
2.1 ENTERITE NECRTICA AVIRIA

A alta capacidade de produo da cadeia avcola foi conquistada em partes pelautilizao de antibiticos na rao animal. A utilizao desses antibiticos de maneiraindiscriminada ficou marcado pela responsabilidade de provocar resistncia bacteriana,incluindo o Clostridium perfringens (JOHANSSON et al., 2004; MARTEL et al., 2004).Alm disso, o C. perfringens oriundo de frangos de corte tambm pode ser transmitido ahumanos por meio da cadeia de produo dos alimentos (VAN IMMERSEEL et al.,2004), como foi observado e comprovado por SINGH et al. (2005), que isolaram abactria de 70,4% de amostras de carne de frango obtidas em lojas de varejo na ndia.Esses fatos, entre outros, levaram a Unio Europia a banir, a partir de 2006, ouso de antibiticos como promotores de crescimento nas raes animais (COUNCIL OF EUROPEAN UNION, 2003), comprometendo a eficincia dos sistemas intensivos deproduo animal, sustentada em grande parte na utilizao de antibiticos comopreventivos de doenas infecciosas. Uma das doenas mais afetadas por essa medida a enterite necrtica aviria (KALDHUSDAL & LOVLAND, 2002), um problemafreqente (HOFACRE et al., 1998) e economicamente importante (ENGSTRM et al.,2003) em vrios pases. A ENA uma enterotoxemia aguda, que se apresenta em forma clnica ousubclnica (VAN IMMERSEEL et al., 2004), causada por C. perfringens A e C.Caracteriza-se por leses ulcerativas e necrose confluente da mucosa do intestinodelgado e debilidade que se apresenta rapidamente.

Afeta principalmente animaisjovens, entre duas e cinco semanas de idade, aparecendo subitamente, geralmenteassociada imunossupresso, provocando morte rpida com elevada prevalncia(SCHOCKEN-ITURRINO & ISHI, 2000). Embora, os casos de ENA no sejamreportados s autoridades sanitrias, conhecido seu impacto negativo na produoavcola. Estima-se que nos Estados Unidos o custo dessa doena seja de mais de U$0.05 por animal (VAN DER SLUIS, 2000), podendo provocar prejuzos de at 33% naproduo, principalmente devido ao prejuzo na converso alimentar das aves, reduo do peso vivo e ao aumento na condenao de carcaas. O C. perfringens um patgeno oportunista (FIORENTIN, 2006) presente nointestino das aves e no ambiente, inclusive na gua (SARTORI et al., 2006). Coloniza oanimal nos primeiros dias de vida e causa doena principalmente em animais de duas acinco semanas de idade. Coccidiose tem sido considerada como um importante fatorpredisponente da ENA (VAN IMMERSEEL et al., 2004). CRAVEN et al. (2001)encontraram as maiores concentraes da bactria em fezes de animais com duas equatro semanas de vida, decaindo na sexta semana e o isolaram, em trabalhosubseqente, de paredes de avirios, ventiladores, comedouros, bebedouros,armadilhas para insetos e botas de operadores, com maior freqncia na primavera eno vero, demonstrando que a estrutura do avirio e seus equipamentos, assim como oincubatrio, podem ser fontes de infeco de C. perfringens para aves (CRAVEN et al.,2001). Fatores ambientais, tais como qualidade da cama, densidade populacional elocal de criao, tm grande importncia na multiplicao da bactria e, conseqentemente, so considerados fatores de risco para a ENA. OMEIRA et al.(2006) avaliaram as caractersticas microbiolgicas de camas em diferentes sistemasde produo e observaram que poedeiras (0,25m2 ave-1) e frangos de corte (0,1m2ave-1) em sistema intensivo apresentaram concentraes menores de C. perfringensque criaes no-confinadas (0,33m2 ave-1), sugerindo que animais em contato com osolo ingerem com maior nmero de esporos da bactria que animais criadosexclusivamente sobre cama em ambiente controlado. McDEVITT et al. (2006)relacionaram o aumento da incidncia de ENA maior densidade animal, devido aoaumento da concentrao de esporos na cama, associado a sua baixa qualidade(umidade e altos nveis de compostos nitrogenados), alm do risco de disperso porcontato direto ou aerossol.Ingredientes da rao tambm foram relacionados doena. DEKICH (1998)aponta que o milho atuou como fator de proteo, e a cevada e o trigo como fatores derisco para a doena. Observaes semelhantes foram feitas por ANNETT et al. (2002),ao comprovarem in vitro que as concentraes da bactria em meio tioglicolatocontendo sobrenadantes no digeridos de cevada e trigo foram maiores que com milho,sugerindo que raes

base de cevada e trigo estimulariam a multiplicao do C.perfringens no trato gastrintestinal das aves. O tipo, a concentrao e as caractersticas das protenas das raes tambmforam consideradas fatores predisponentes da ENA. DREW et al. (2004) comprovaramum aumento da concentrao de C. perfringens A no leo e ceco de galinhas quando aconcentrao da farinha de peixe como fonte de protena bruta foi aumentada de 230para 400g x kg-1, no ocorrendo o mesmo em animais alimentados com rao basede protena de farelo de soja, sugerindo que tanto o nvel de protena quanto fonteprotica utilizados na composio de raes afetam a multiplicao de C. perfringensno intestino. DAHIYA et al. (2005) relacionaram os efeitos das concentraes de glicinana rao sobre a populao de C. perfringens no intestino e as leses de ENA emfrangos de 28 dias de idade desafiados com o microrganismo, constatando que asmaiores concentraes da bactria no ceco foram obtidas com raes contendo de 3,3a 3,9%, e que as leses intestinais variavam de grau zero a quatro nos grupos quereceberam 3 e 4% de glicina. Insetos tambm podem servir de veculo do agente. DHILLON et al. (2004)reportaram um surto de ENA em galinhas poedeiras de uma granja recm-construda.Durante investigao constataram a presena de moscas no contedo do papo dosanimais mortos e nos comedouros, alm de isolado a presena de C. perfringens nosmacerados de moscas capturadas nos galpes afetados. Os autores sugerem que osurto foi conseqncia da ingesto do C. perfringens presente nas moscas ou suassecrees, considerando esses insetos vetores mecnicos na transmisso da bactria.VITTORI et al. (2007) isolaram C. perfringens de 100% de 40 amostras de besourosadultos Alphitobius diaperinus ("Cascudinho") capturados em granjas avcolasindustriais de Descalvado e Sertozinho, SP, Brasil, sugerindo que o Cascudinho podeser um vetor potencial da veiculao do C. perfringens.A enterite necrtica subclnica em frangos est diretamente relacionada com adiminuio da taxa de crescimento e da eficincia alimentar (SCHOCKEN-ITURRINO &ISHI, 2000).
2.1.1 Patogenia

A ENA causada pela ao de toxinas produzidas quando, em condiesfavorveis, h rpida multiplicao de C. perfringens no intestino delgado (SCHOCKENITURRINO& ISHI, 2000). As leses caractersticas da ENA so produzidas pela toxinaalfa (WILLIAMS, 2005), a qual vem sendo associada com a doena, sendo consideradao principal fator de patogenicidade da bactria (GIL de los SANTOS et al, 2007) quedestri a membrana celular de entercitos devido a sua propriedade de fosfolipase, quepossui dois domnios, o C-terminal, que

penetra na membrana celular sendoresponsvel pela fixao da protena na clula, e o N-terminal, que desempenha afuno enzimtica propriamente dita e hidrolisa os fosfolipdios das membranascelulares separando as pores polar e apolar, formando di-acil-glicerol e cidofosfatdico, provocando a lise da membrana celular (SAKURAI et al., 2004).HOFSHAGEN & STENWIG (1992) demonstraram que C. perfringens isolados de casosde ENA produziram ttulos maiores de toxina a alfa que cepas isoladas de animais sadios. Reforando o conceito de que esta toxina o principal fator de patogenicidadena ENA.
2.2.2 Controle

Segundo Gil de los Santos (2007), o controle da ENA foi baseado nas ltimasdcadas pela administrao de antibiticos na rao, porm com as restries de usodecretada pela Unio Europia, foi necessrio uma busca de outras alternativas paracontrolar a doena, assim como o uso de prebiticos, enzimas, alimentos funcionais,probiticos e vacinas, esses dois ltimos sendo de grande interesse de estudo paracontrole da ENA.
2.2.3 Probiticos

Probiticos so suplementos alimentares compostos de microrganismos vivosque beneficiam a sade do hospedeiro por meio do equilbrio da microbiota intestinal(FULLER, 1989; KAUR et al., 2002). Sua aplicao na indstria avcola vem sendoamplamente estudada nos ltimos anos, tanto para o controle de doenas quanto porseu efeito na eficincia alimentar (GIL de los SANTOS & GIL-TURNES, 2005).HOFACRE et al. (1998) observaram que o produto comercial, constitudo pormicrobiota polibacteriana de aves, reduziu a incidncia de ENA em frangos de corte. LARAGIONE e WOODWARD (2003) comprovaram que a administrao de esporosviveis de Bacillus subtilis a aves livres de patgenos especficos desafiadas com C.perfringens reduziu o nmero de patgenos no bao, no duodeno, no clon e no ceco erelataram resultados similares com um probitico de Lactobacillus johnsonii (LARAGIONE et al., 2004). TEO e TAN (2005), por sua vez, demonstraram que B. subtilisinibiu o crescimento de C. perfringens em cultivo associado. HAGHIGHI et al. (2006)demonstraram que um probitico comercial contendo Lactobacillus acidophilus,Bifidobacterium bifidum, e Streptococcus faecalis estimulou a produo de IgA antitoxina de C. perfringens no intestino de pintos no-vacinados.
2.2.4 Vacinas

Aves que sobreviveram ENA ficaram imunes, sugerindo que a imunidade podecontrolar a doena (PRESCOTT, 2000). LOVLAND et al. (1999) demonstraram, pelaprimeira vez, que prognies de matrizes

imunizadas com um toxide de C. perfringensapresentaram ttulos de antitoxina significativamente superiores aos controles, assimcomo menor porcentagem de animais com leses de ENA. Porm, a produoindustrial de toxides de C. perfringens um processo laborioso (GIL de los SANTOSet al., 2007). A clonagem do gene da toxina em Escherichia coli e a produo devacinas contendo toxina recombinante abriram uma nova perspectiva de produoindustrial de antgenos de Clostridium.KULKARNI et al. (2006) vacinaram animais com a toxina nativa e comprotenas recombinantes secretadas de C. perfringens (piruvatoferridoxinaoxidoredutase;gliceraldeido-3-fosfato dehidrogenase; frutose 1,6-bifosfatoaldolase e uma protena hipottica), comprovando que todas as vacinas apresentaramefeito protetor frente a um desafio moderado, e que frente a um desafio severo a toxina apresentou o melhor resultado, reafirmando sua importncia tanto na patogenia do C.perfringens, quanto na imunidade a esse patgeno. Entretanto, ao tentarem produzir atoxina recombinante, concluram que a mesma pareceria ser txica para E. coli.Nosso grupo, porm, logrou produzir toxina recombinante em E. coli que protegeucamundongos frente ao desafio com mais de 10 DL50 de toxina nativa e imunizoupintos vacinados aos sete dias de idade (GIL de los SANTOS, 2007).
3 A PRESENA DE CLOSTRIDIUM PERFRINGENS EM INGREDIENTES E RAESDESTINADOS A ALIMENTAO DE FRANGO DE CORTES

Os ingredientes e raes animais apresentam frequentemente a contaminaopor Salmonella sp. Destaca-se como fonte principal para a contaminao dosingredientes, gros e sementes oleaginosas, o prprio p ambiental que provm do solode cultivo atravs do vento, da chuva e do processo de retirada mecnica no campo.Os insetos, roedores e aves selvagens tambm podem contaminar gros aps acolheita, durante o transporte e no armazenamento. Os ingredientes vegetais e cereaispodem entrar em contato direto com desafios ambientais durante o plantio, colheita,armazenagem e no prprio transporte (LONGO et al, 2010)No caso dos ingredientes de origem animal, que so compostos a partir derestos de animais e sangue que so considerados imprprios para o consumo humano,mas que detm alvo valor nutricional na composio de raes, apresentam altos nveisde contaminao por microrganismos. As condies timas de crescimento (i.e. tempoe temperatura) que so encontradas nas fbricas de farinhas, associado aoprocessamento inadequado das mesmas e a prpria contaminao presente noambiente da fbrica que passam a servir de fatores de risco de recontaminao doproduto final. Em estudo realizado em 2005 pela Unio Europia verificou-se que asfarinhas de origem animal estavam contaminadas por Salmonella, em nvel de 14,9%de positividade (ANON, 2007).Em estudo conduzindo na Espanha, PRI et al (2001) apontaram o nvel

decontaminao por Clostridium sp nos principais ingredientes para nutrio animal.(Tabela 1).Em amostras de farinhas de origem animal, sendo vsceras, penas e carnesutilizadas para composio de raes para aves, analisadas quanto contaminao porC. perfringens, encontrou-se contagens que podem chegar at 3,2 x 104 UFC/g(SCHOCKEN-ITURRINO & ISHI, 2000).Em um levantamento em que foram analisadas 2049 amostras entre ingredientesde origem vegetal e animal, utilizados na formulao de raes de frangos e sunos nos EUA, RICHARDSON (2008) observou a presena da bactria C. perfringens e emnveis variados de contaminao, entre 10 UFC/g at 2000 UFC/g (Tabela 2).
TABELA 1: Incidncia (%) de contaminao por Clostridium sp em

diferentes ingredientespresentes na Espanha.

TABELA 2: Incidncia de C. perfringens em ingredientes utilizados em

raes

de

frangos

sunosnos

EUA.

A principal fonte de contaminao das raes pode estar associada com osprprios ingredientes, que podem abrigar uma grande variedade de microrganismos, osquais so extremamente resistentes a condies de baixa umidade e podem sobreviverpor um longo perodo de tempo, mesmo em condies de controle de temperatura e donvel de poeira ambiente (LONGO et al, 2010). Em levantamento conduzido em trs diferentes municpios do estado de SoPaulo, SCHOCKEN-ITURRINO (2008) observaram que dentre 90 amostras de rao defrango de corte analisadas, 42% estavam contaminadas por C. perfringens, sendo quea mdia de contagens foi de 3,69 x 102 UFC/g, associando as altas contagens com falhas de Boas

Prticas de Fabricao, falta de higiene na produo e poucos cuidadosno armazenamento das raes. LONGO et al (2010) aponta que a capacitao e aconscientizao dos operadores das fbricas so fundamentais para reduo dos riscose contaminao microbiolgica dos alimentos fornecidos para as aves.RICHARDSON (2007) analisou a presena de diferentes microrganismos nasraes em diferentes fbricas e observou que o nvel de contaminao das raescoletadas no silo da granja foi sempre maior que o nvel de contaminao de raescoletadas na fbrica (Tabela 3).O estudo aponta que as estratgias adotadas dentro das fbricas de rao paracontrole da contaminao microbiolgica no asseguram ausncia ou baixas contagensde bactrias e fungos at o comedouro da granja no momento da alimentao dasaves. Por isso, justifica-se a adoo de estratgias que tenham efeito de proteoresidual e at mesmo a extenso de estratgias de controle do nvel de contaminaoat o destino final da rao que o comedouro das aves.
TABELA 3: Contaminao microbiolgica de raes em quatro diferentes

fbricas de raesavaliadas na expedio e no silo da granja.

4 O CONTROLE DA BACTRIA CLOSTRIDIUM PERFRINGENS EM RAES DEFRANGO DE CORTE

As principais estratgias para a reduo e eliminao de microorganismos emraes de frango de corte consideram a Salmonella sp como a principal bactria a sercontrolada em raes atravs de programas de qualificao dos fornecedores dosingredientes, controle de processos atravs das ferramentas de BPF (Boas Prticas deFabricao) e APPCC (Anlises de Perigos e Pontos Crticos de Controle), tratamentotrmico raes e qumico aplicados durante o processo de produo. Deve-seconsiderar que todas as estratgias adotadas nas fbricas so semprecomplementares, ou seja, nenhuma ferramenta isoladamente 100% eficiente parapermitir um controle microbiolgico eficiente (WALES et al, 2010).

Os princpios do programa de Boas Prticas de Fabricao em alimentosdestinados para animais, de acordo com a Instruo Normativa n04 do MAPA(BRASIL, 2007) so considerados requisitos mnimos necessrios para controlemicrobiolgico. A Unio Europia avana em direo da proteo dos alimentos paraanimais, com a publicao do REGULAMENTO (CE) N 183/2005 que direciona adoodo programa APPCC em fbricas de raes visando garantir alimentos em nveismicrobiolgicos seguros protegendo a sanidade e produtividade do plantel animal eindiretamente contribuindo com a sade pblica.O tratamento trmico, como a peletizao, expanso e extruso, tem sidoapresentado por diversos autores como ferramenta para reduzir a incidncia de fungose bactrias em raes, incluindo a Salmonella (TABIB et al,1984; STOTT et al, 1975;VELDMAN et al, 1995; BEST, 2007; EFSA, 2008). A eficincia da peletizao questionvel, pois dependente do nvel de contaminao no incio do tratamentotrmico, alm do tempo, temperatura e a umidade da rao (Tabelas 4 e 5). Com isso,a peletizao no deve ser considerada como um mtodo absoluto para controle dacontaminao por microrganismos na rao. Efeito da temperatura de peletizao no nvel de contaminao por Enterobactrias eSalmonella sp em raes peletizadas.
TABELA 4:

TABELA 5. Efeito do tempo, temperatura e umidade na peletizao sobre

eliminao

deSalmonella

enteritidis

na

rao.

O processo de irradiao foi aprovado pelo FDA (Food and Drug Administration)nos Estados Unidos em 1996 para controle de Salmonella em raes, apresentando100% de efetividade, porm o custo de aplicao dessa estratgia em rao inviveleconomicamente para a cadeia de produo de raes (HOUSTON et al 1992). Apesar das estratgias que utilizam o tratamento por calor reduzirem aincidncia de bactrias e fungos nas raes, essas prticas de processamento noapresentam nenhuma proteo residual contra recontaminaes em fases posterioresdo processo produtivo, assim como resfriamento e expedio das raes peletizadas(JONES e RICHARDSON, 2004; SHRIMPTON, 1989). PRI et al (2001) estudou a relao existente entre a contaminao presente emingredientes por Salmonella sp e Clostridium sp e a presena desses microrganismosna rao final, tanto na forma farelada ou peletizada. No caso da Salmonella sp,observou-se uma correlao positiva significativa entre a positividade nos ingredientese a rao farelada. Entretanto, para as raes peletizadas nenhuma correlao foiobservada, a peletizao foi eficiente para controlar a contaminao por Salmonella sp.Apesar de estudos apresentarem alguns serovares de Salmonella termo-tolerantes,parece que a contaminao encontrada nas raes peletizadas foi resultado darecontaminao em fases posteriores ao tratamento trmico.Quanto ao Clostridium sp no foi observada nenhuma correlao entre aincidncia de contaminao nos ingredientes com a contaminao na rao, tanto emraes fareladas quanto peletizadas. Ou seja, a contaminao por Clostridium sp podeestar associada capacidade de formao de esporos e sua resistncia a agressestrmicas, com as temperaturas encontradas no processo de peletizao em torno de 70 90 C (PRI et al, 2001). As fbricas de raes que no possuem processamento trmico das raes emantm estratgias de fornecimento de raes farelada comprometem a qualidademicrobiolgica das raes sendo uma fonte direta de transmisso de C. perfringenspara os animais. Para essas fbricas que mantm o fornecimento de raes fareladas,outra opo vivel para controle microbiolgico em raes a utilizao de agentesqumicos, como os produtos formulados a base de formaldedo e cidos orgnicos.Diversos produtos qumicos esto disponveis e so citados na literatura para ocontrole da contaminao por Salmonella sp e outros microrganismos indesejveis,desde cido actico, cido propinico e seus sais, cido ctrico, etanol, formaldedo,cido frmico, lcool, acetato de zinco e propionato de zinco (MARTIN e MARIS, 2005;RICKE, 2005). A eficincia desses compostos muito varivel (SKRIVANOVA et al,2006) e esses agentes bactericidas devem ser estveis at o momento

de consumopelo animal, mas devem ser metabolizados e no absorvidos evitando resduos emcarne e ovos dos animais que receberam o tratamento (EFSA, 2008). KAISER (1992) conduziu estudos com produtos base da mistura deformaldedo e cido propinico e verificou que a dosagem de 0,2% foi efetiva paraprevenir a recontaminao de farinha de peixe por Salmonella senftenberg. Estudoscientficos tm demonstrado que o formaldedo apresenta um alto nvel de atividadedesinfetante contra a maioria das bactrias e considerado o composto mais eficientepara ser utilizado em estratgias de desinfeco de granjas que foram contaminadaspor Salmonella sp (DAVIES e WRAY, 1995). Vrios estudos tm comprovado aeficincia maior do formaldedo para descontaminao de raes quando comparadosa produtos formulados a base de cidos orgnicos (MOUSTAFA et al, 2002).Algumas opes de produtos comerciais contm misturas de formaldedo, cidopropinico e outros agentes dispersantes, esse tipo de combinao tem apresentadoresultados muito satisfatrios para descontaminao de raes que foram inoculadasartificialmente com Salmonella sp, quando comparados com outros tipos de produtosqumicos (CARRIQUE MAS et al, 2007).Os produtos a base apenas de formaldedo possuem um fator limitante com avolatilizao, sendo que essa caracterstica de ser voltil e pode sofrer evaporaoaps a aplicao na rao (KHAN et al, 2003). Por isso, alguns produtos comformaldedo tambm contm cidos (cido propinico) e outros compostosantimicrobianos como os terpenos (CARRIQUE MAS et al, 2007). Esse tipo decombinao tem efeito sinrgico e permite que baixas doses de formaldedo e cidossejam aplicados para descontaminao das raes e minimizem problemas de perdasdesses princpios ativos para o ambiente e corroso dos equipamentos. Outra caracterstica dessa combinao de produtos a possibilidade de aplicao na formaliquida partir de equipamentos especiais instalados nas fbricas de rao, enquantoque misturas de produtos na forma de p necessitam de adaptaes na estrutura dafbrica para evitar a corroso e a adoo de procedimentos especiais de segurana,para um correto e seguro procedimento de manipulao e fracionamento para aincluso correta na rao (EFSA, 2008).Em um ensaio laboratorial, RICHARDSON (2008) observou que a utilizao de0,2% de um produto comercial a base de formaldedo e cido propinico reduziu acontaminao por clulas vegetativas de Clostridium sp em raes fareladas (Tabela 6). Tambm foi observada a reduo, mas no a eliminao total dos esporos de C.perfringens, devido a sua resistncia a agentes qumicos,

mesmo o formaldedo sendoapontado com o nico agente qumico com ao esporicida (JAY, 2005).
TABELA 6. Efeito do tratamento de raes fareladas com a combinao

formaldedo: cidopropinico sobre a contaminao por Clostridium sp.

Considerando amostras coletadas em condies de campo, verificou-se quenveis a partir de 0,3% so suficientes para eliminar a contaminao por Clostridium spem clulas vegetativas nas raes. No entanto, houve apenas reduo do nvel depresenas de esporos em Clostridium sp em cada um dos tratamentos que receberama incluso da mistura de formaldedo e cido propinico, sendo que a dosagem com0,3% em raes fareladas apontaram os melhores nveis esporicidas, com reduomaior que 88% em comparao ao tratamento controle (RICHARDSON, 2008).Aps o processamento atravs do tratamento qumico, RICHARDSON (2008),prosseguiu as avaliaes com raes que foram submetidas tambm aoprocessamento trmico visando um efeito combinado, os resultados so apontados naTabela 7. Este processo reconhecido na microbiologia de alimentos, como teoria outecnologias de barreiras, onde o controle de um determinado microrganismo alvo feitocom a combinao de dois ou mais mtodos intrnsecos e extrnsecos (JAY, 2005).
TABELA 7: Efeito do tratamento com a combinao formaldedo: cido

propinico sobre acontaminao por Clostridium sp em raes peletizadas coletadas sobcondies de campo.

A partir de contagens de clulas vegetativas de Clostridium sp, RICHARDSON(2008) observou a presena de contaminao mdia de 23,4%, ou seja 31 clulas(UFC/g) em 111 amostras de rao peletizada sem a incluso de produto a base damistura formaldedo: cido

propinico. Nos tratamento com aplicao dessa mistura emnveis de 1 e 2 kg/t, foi observada uma reduo significativa da positividade para 3,5%(9/258) e 1,6% (2/124), respectivamente. A ausncia de clulas vegetativas foiobservada a partir da incluso de 3 kg/t de rao.Quando nesse mesmo trabalho foi avaliado o nvel de contagem de esporos deClostridium sp, foi identificada a presena de esporos em 28,8% (32/111) das amostrasde rao peletizada sem o tratamento qumico. Nos tratamentos com 1 e 2 kg/t damistura de formaldedo: cido propinico, o nvel de presena de esporos foi reduzidopara 7,4% (19/258) e 1,6% (2/124), respectivamente. Com a dosagem de 3 kg/t derao foi observada uma reduo de esporos mais significativa, sendo verificadoapenas 1,5% (1/68) de presena nas amostras avaliadas, no sendo possvel observara eliminao total de esporos, diferentemente das clulas vegetativas, provavelmentedevido a resistncia dos esporos as agresses fsicas e qumicas (JAY, 2005).
4 CONCLUSO

O controle microbiolgico em raes para aves vem sendo considerado cada vezmais relevante devido s exigncias do mercado quanto segurana dos alimentos emtoda a cadeia de produo.A restrio a utilizao de antibiticos como promotores de crescimento naavicultura abriu espao para o surgimento de bactrias de interesse como o C.perfringens que alm das perdas econmicas como agente veiculador da enteritenecrticas em aves, tambm importante na sade pblica. possvel identificar a presena da bactria C. perfringens em alimentos paraanimais, sendo ainda pouco relatado na literatura, portanto necessrio um programade avaliao microbiolgica constante e abrangente em ingredientes, principalmenteem farinhas de origem animal (vsceras, penas e carnes/ossos) e em raes parafrango de corte. O tratamento trmico com temperaturas em torno de 70 90 C, utilizadoisoladamente com nica opo no controle microbiolgico para reduo de bactrias efungos, no se apresenta eficiente no controle de C. perfringens.O tratamento qumico com formaldedo e acido propinico e seus agentesdispersantes associado ao correto processamento trmico atravs da peletizao deraes elimina clulas vegetais e reduz a presena de esporos de C. perfringens nasraes.Neste sentido, devido as diversidade de ingredientes com fontes decontaminao por C. perfringens e sua caracterstica biolgica de formao deendsporos com resistncia a agresses fsicas e qumicas fundamental adoo deum rigoroso programa de controle de qualidade que assegurem ingredientes combaixas contagens, possibilitando assim que as fbricas utilizem estratgias de controlecomo a peletizao e tratamento qumico,

como alternativas eficientes em controlar acontaminao fornecimento de raes seguras aos frangos de cortes.