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Biologia Microbiana 2011/12

Aula Prtica P4

Biologia Microbiana Tr. Comum 1 ciclo em Biologia Ano lectivo 2011/12

PLANO GERAL DO CURSO PRTICO Introduo geral ao curso prtico. P1 Critrios de avaliao da disciplina. Normas de funcionamento do laboratrio de Microbiologia. Preparao de meios de cultura. Observao e isolamento de microrganismos do solo e da rizosfera. P2 Meios selectivos e meios diferenciais. Mtodo de isolamento de bactrias formadoras de endsporos (Pasteurizao). Preparao de lminas de Cholodny & Rossi para observao directa dos microrganismos do solo. Anlise de resultados dos vrios isolamentos efectuados. Observao macroscpica e microscpica de colnias de bactrias e de fungos. Tcnicas de purificao de culturas. Caracterizao de Pseudomonas spp. e de Bacillus spp. (Coloraes de Gram e de endsporos, testes da catalase, oxidase e reaco ao KOH 3%). Fixao, colorao e observao microscpica de lminas de Cholodny & Rossi. P4 Exemplificao de testes utilizados na classificao e identificao de bactrias. Etapas do ciclo do azoto. Putrefaco 1 Etapa do ciclo do enxofre. Exemplificao de testes utilizados na classificao e identificao de bactrias. Anlise de resultados. P5 Etapas do ciclo do azoto. Anlise de resultados. Putrefaco 1 Etapa do ciclo do enxofre. Anlise de resultados. Problemas de nutrio e metabolismo (I). P6 Problemas de nutrio e metabolismo (II) | Revises P1 a P5 1 Avaliao Intercalar Estudo da cintica de crescimento microbiano. P7 Clculo da viabilidade de clulas de leveduras. Antibiograma (I). Estudo da cintica de crescimento microbiano. Anlise de resultados. P8 Clculo da viabilidade de clulas de leveduras. Anlise de resultados. Antibiograma (II). Anlise de resultados. Interaco fago-hospedeiro (I) e (II) P9 P10 P11 P12 Interaco fago-hospedeiro (III). Anlise de resultados. Fungos:estrutura somtica e reproduo assexuada (I). Fungos:estrutura somtica e reproduo assexuada (II). Reproduo sexuada em Fungos. Revises P7 a P11 2 Avaliao Intercalar

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Oxidase

Colorao de Gram -

Colorao de Gram +

NA + 1% amido

Lugol 5 g iodo 10 g iodeto de potssio 85 mL H2O destilada + c + +

NA + 7.5% NaCl Halotolerncia amilases +

esculetina

Meio com esculina 0,1%

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Desaminao Triptofanase

Reagente de Kovac: soluo de 4-(dimetilamino)benzaldedo e HCl em n-butanol

% amnia

Reagente de Nessler: 90 mM de tetraiodomercurato(II) de potssio (K2[HgI4]) em 2,5 M KOH

NH4+ + 2[HgI4]2 + 4OH HgOHg(NH2)I + 7I + 3H2O

Metabolismo oxidativo e/ou fermentativo

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Nitratao

Nitritao

Fixao de N2
Reagente de Difenilamaina: H2SO4 - 100 mL Sulfato de difenilamina 5% - 5 mL HCl 10% - 5 mL

Reagente de Girens - Illosvay: Nit 1 - cido sulfanlico 8 g cido actico 5 M - 1000 mL Nit 2 - dimetilnaftilamina 6 g cido actico 5 M - 1000 mL adicionar as duas solues

Desnitrificao

% amnia

indol

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Gram -

catalase +

oxidase -

(-)

Halotolerncia -

amilase -

esculina -

triptofanase +

desaminao +

metabolismo oxidativo e fermentativo

fermenta a glucose anaerobiose

fermenta a lactose

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Gram +

catalase +

oxidase varivel

(+)

Halotolerncia +

amilase +

esculina +

triptofanase -

desaminao +

metabolismo oxidativo O2

no fermenta a glucose anaerobiose

Oxidao da lactose varivel

Pseudomonas fluorescens

Gram -

catalase +

oxidase +

(-)

Halotolerncia -

amilase -

esculina -

triptofanase -

desaminao +

metabolismo oxidativo O2

no fermenta a glucose anaerobiose

no fermenta a lactose

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Bacillus megaterium

Gram +

catalase +

oxidase varivel

(+)

Halotolerncia varivel

amilase +

esculina +

triptofanase -

desaminao +

metabolismo oxidativo O2

no fermenta a glucose anaerobiose

oxida a lactose