UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE ESCOLA DE QUÍMICA E ALIMENTOS CURSO DE ENGENHARIA QUÍMICA DISCIPLINA DE BIOQUÍMICA INDUSTRIAL LABORATÓRIO DE ENGENHARIA

DE BIOPROCESSOS PROFESSOR: ANDRÉ BURKERT

Determinação de Coliformes Termotolerantes e Coliformes Totais

Andressa Silva Leonardo Costa

40754 37227

Melissa de la Rocha 40750 Priscila Campelo Sabrina Farias 42754 42758

Rio Grande, outubro de 2011.

Sumário 1. Introdução............................................................................................................................. 3 2. Objetivo..................................................................................................................................4 3. Revisão Bibliográfica ........................................................................................................................5 3.1 Organismos indicadores ................................................................................................... 5 Coliformes Totais ...................................................................................................... 6 Coliformes Fecais ...................................................................................................... 6 Estreptococos Fecais ................................................................................................. 7

3.1.1 3.1.2 3.1.3 3.2

Padrões de Qualidade ....................................................................................................... 7 Potabilidade ............................................................................................................... 7 Balneabilidade ........................................................................................................... 7

3.2.1 3.2.2 3.3

Exame de Laboratório ...................................................................................................... 8 Técnicas Bacteriológicas ........................................................................................... 8 Provas da presença de bactérias coliformes .............................................................. 9

3.3.1 3.3.2

3.3.3 Determinação do número mais provável de coliformes totais e fecais – Técnica da Fermentação em Tubos Múltiplos ......................................................................................... 13 4. Materiais e Métodos..............................................................................................................17 4.1 4.2 Materiais ......................................................................................................................... 17 Métodos .......................................................................................................................... 17 Teste Presuntivo ...................................................................................................... 17 Contagem de coliformes fecais ............................................................................... 17

4.2.1 4.2.2

5. Resultado e Discusão..........................................................................................................18 6. Conclusão..............................................................................................................................20 7. Perguntas.................................................................................................................................21 8. Referências Bibliograficas.......................................................................................................24

quando apropriado. visto que sua contaminação por excretas de origem humana e animal pode torná-las um veículo de transmissão de agentes de doenças infecciosas e parasitárias. utilizando-se organismos e/ou comunidades aquáticas. nascentes.1. A pesquisa de coliformes é baseada nas características do grupo bastonete que produzem ácidos e gás a partir da lactose. fazendo com que seja identificada ou não a presença de coliformes. que exige atenção por parte das autoridades sanitárias e consumidores em geral. os quais influenciam diretamente à saúde da população. os coliformes totais e os coliformes termotolerantes (fecais). . minas. destinados ao consumo humano. No presente trabalho foi utilizado como microrganismos indicadores. Introdução A preservação da qualidade da água é uma necessidade universal. entre outros. particularmente no que se refere à água dos mananciais como poços. A avaliação da qualidade microbiológica da água pode ser realizada através da identificação de indicadores de contaminação fecal e indicadores biológicos. lagos. devido a presença de gás no tubo de Duran após 24 horas na estufa bacteriológica á 35° C.

. Objetivo Determinar coliformes totais e termotolerantes utilizando a técnica de tubos múltiplos e expressar os resultados em termos de NMP.2.

se faz por contagem de microrganismos não patogênicos. 3. Por esta razão é difícil isolar e identificar diretamente qualquer organismo de doença presente na água de consumo. As bactérias patogênicas não se multiplicam e nem se desenvolvem na água.3. ele é visto como uma indicação de poluição com esgoto e provável presença de bactérias patogênicas. tais como sais de chumbo. como bactérias tifóides e paratifóides. ao invés de uma contagem verdadeira de patógenos. quer aeróbica ou anaeróbica. Revisão Bibliografica As doenças de origem hídrica geralmente vem de organismos vivos e não de matéria orgânica morta ou sais minerais dissolvidos. sendo uma referência. classe que inclui o homem e todos os mamíferos. então se recorre a um método que permite identificar a presença de organismos pertencentes ao “Grupo Coliforme” de origem intestinal.1 Organismos indicadores A qualidade de uma água de abastecimento é avaliada usando organismos indicadores. São encontrados apenas nas fezes de animais de sangue quente ou homeotermos. facilmente cultiváveis. produzidos em grande número no intestino. com grande probabilidade de serem encontrados na água. As bactérias coliformes são Gram Negativas. capazes de se desenvolverem em presença de sais de bile. eles se debilitam e tendem a morrer por terem perdido seu alimento e as condições ideais de vida. se distinguem de um grande grupo que incluem organismos patogênicos. que necessita de tratamento de desinfecção. etc. mas a presença de coliformes indica uma água potencialmente perigosa. A probabilidade de existência das doenças na água passadas a ela por fezes de indivíduos doentes. zinco. Por sua habilidade em fermentar a lactose produzindo gás e ácido. em grande número (100 a 1000 milhões/g). bilhões produzidos por dia/individuo. É universalmente conhecido que os excrementos dos homens e animais contêm bactérias coliformes. mais difíceis de identificar. Quando o grupo coliforme está presente na água. Um curso d’água pode ser poluído com esgoto e não ter organismos patogênicos. nitratos. Essa característica é importante. fermentadoras da lactose com formação de gás. pois uma vez . em forma de bastão não formadores de esporo. Segue abaixo as principais razões para o uso de organismos indicadores:   Aparecem em grande quantidade nas fezes humanas.

1.2 Coliformes Fecais Pertencem a esse subgrupo os microorganismos que aparecem exclusivamente no trato intestinal.1. Sua identificação na água permite afirmar que houve presença de matéria fecal. isto é. requer técnicas simples e econômicas. Se fossem menos suscetíveis (sobrevivessem por mais tempo). ao contrário daquelas necessárias à identificação dos microorganismos patogênicos. Em laboratório. pode-se afirmar que a água teve contato com excretas desses animais. não é possível afirmar categoricamente que uma amostra de água com resultado positivo para coliformes totais tenha entrado em contato com fezes. do ponto de vista laboratorial. Eriterobacter e Klebsiella. embora não exclusivamente humana. poderia aparecer em águas já livres dos patogênicos. de origem exclusivamente fecal e que dificilmente se multiplica fora do trato intestinal. Estas bactérias são bacilos gram negativos.1 Coliformes Totais Reúne um grande número de bactérias. Os organismos usados como referência pertencem a um grupo de bactérias chamados Coliformes dividido em três sub-grupos: coliformes totais. Tratase de uma característica importante. capazes de crescer na presença de sais bilhares ou outros compostos com propriedades similares de inibição de crescimento e. Desta forma. O problema é que outras bactérias dos gêneros Citrobacter. coliformes fecais e estreptococos fecais. não formadores de esporos. . entre elas a Eschrichia coli. aeróbios ou anaeróbios facultativos. que fermentam a lactose com produção de gás e ácido a 35°C em 48 horas. 3. a diferença entre coliformes totais e fecais é feita através da temperatura (os coliformes fecais continuam vivos mesmo a 44ºC.  Do ponto de vista da resistência às condições ambientais (temperatura e outros agentes desinfetantes). 3. podem existir no solo e nos vegetais. pois se fossem mais suscetíveis (sobrevivessem menos tempo que os patogênicos). enquanto os coliformes totais têm crescimento a 35ºC).  Sua identificação. igualmente identificadas pelas técnicas laboratoriais como coliformes totais. não poderiam ser identificados.identificada a sua presença. são muito semelhantes aos microrganismos patogênicos intestinais. não seriam indicadores.

como os Coliformes Fecais. A água potável deve estar em conformidade com o padrão microbiológico. descrito pela vigilância sanitária. Normalmente empregada em cursos de água. ou seja. Quando da utilização de mais de um indicador biológico as águas terão as suas condições avaliadas de acordo com o critério mais restritivo. própria para o consumo humano. químicos e radioativos atendam a um padrão que não ofereça riscos à saúde.2 Padrões de Qualidade Dependendo da finalidade que a água terá.1 Potabilidade Indica se a água analisada é potável. A balneabilidade é feita conforme a Resolução CONAMA 274 de 29 de novembro de 2000. 3. os quais medem a quantidade de coliformes na água.2 Balneabilidade Balneabilidade é a medida das condições sanitárias das águas destinadas à recreação de contato primário. Existe uma correlação entre a ocorrência de Coliformes Fecais e Estreptococos Fecais.3. nos dias e locais de maior afluência do público.3 Estreptococos Fecais Embora sua identificação não seja rotina em laboratórios de análise de água. já que fazem parte dele as espécies do gênero Streptococcus spp. diz-se que a amostra apresenta contaminação fecal predominantemente humana. após 5 semanas de coletas e análises microbiológicas para Coliformes Fecais.2. Se a relação CF/EF resultar maior que 4. físicos. trata-se de um subgrupo importante. Dentre diversas medidas de qualidade da água temos a potabilidade e a balneabilidade.2. consiste em quantificar o número de microorganismos de cada um dos subgrupos existentes em uma amostra. Escherichia coli e/ou Enterococos. 3. Ressalta-se que os padrões referentes aos .1. Se essa relação for menor que 1 a contaminação fecal predominante será de animais de sangue quente. que ocorrem apenas no trato intestinal do homem e de animais de sangue quente. cujos parâmetros microbiológicos. ela deverá apresentar uma qualidade mínima prevista pela legislação. Os resultados que se encontrarem entre esses dois valores não permitem inferir nada a respeito da origem da contaminação fecal. 3.

. período de maior procura por parte das pessoas para banho e recreação. com atenção.Deve-se evitar a contaminação da amostra durante e após a coleta. quando amostras de água forem submetidas à análise bacteriológica: 1.havendo a necessidade de uma demora na realização da análise. os métodos são padronizados e os detalhes técnicos devem ser rigorosamente seguidos. A categoria própria pode ser subdividida em classes: excelente. muito boa e satisfatória. O monitoramento da balneabilidade é realizado nos meses de verão. preparado e publicado. A amostra deve ser guardada a uma temperatura entre 0 e 10°C. O aumento populacional e as chuvas intensas influenciam negativamente na qualidade das águas. Essas classificações estão relacionadas com a quantidade de coliformes presentes na água.3.Enterococos aplicam-se. 2. Torna-se indispensável seguir. A partir dos resultados das análises de Coliformes Fecais das 5 semanas consecutivas.3 Exame de Laboratório 3. são emitidos resultados na forma de boletins semanais. pois incrementam o lançamento direto ou indireto de esgotos. Tal como se indica no título.A amostra deve ser examinada logo após sua obtenção. Americam Water Works associatiom e Federation of Sewage and Industrial wastes Associations. os seguinte detalhes.1 Técnicas Bacteriológicas Os métodos de exame bacteriológico da água são apresentados no livro Standard Methodos for the Examination of Water and Wastewater. 5. 3.A amostra deve ser representativa do universo do qual foi colhida. pelas associações Americam public Health Association. 3. 4. que pode ser enquadrada nas categorias "própria" ou "imprópria" para recreação de contato primário. O boletim informa a qualidade das águas quanto à balneabilidade. conjuntamente. somente às águas marinhas. Os processos bacteriológicos rotineiros consistem em uma contagem em placa para determinação do número de bactérias presentes na amostra e em provas que revelam a existência de bactérias do grupo coliforme. a fim de haver significação oficial nos resultados obtidos.A amostra deve ser colhida em recipiente estéril.

3. 3.1 Determinação do número total de bactérias por mililitro de água Cada colônia desenvolvida se considera como representando uma única bactéria existente na amostra de água utilizada.1 Teste Presuntivo Consiste na semeadura em Caldo Lauryl Sulfato Triptose (LST).3.2 Provas da presença de bactérias coliformes Diversos tipos de meios seletivos e diferencias aceleram o processo de exame das águas para comprovar a presença de organismos coliformes. a partir da fermentação da lactose no meio de cultura empregado nesse ensaio é prova presuntiva para a presença de bactérias do grupo coliforme.3.3.1. inibindo o crescimento das outras bactérias fermentadoras da lactose.2. A produção de gás. Se a amostra for diluída a imprecisão será maior.3. Os resultados obtidos não podem ser considerados absolutamente certos. O exame compreende três etapas sucessivas: o teste presuntivo.2 Determinação da presença ou ausência do grupo coliforme É o mais importante. o teste de confirmação e o teste completo.3. porque a amostra representa uma fração muito pequena da água cuja qualidade está sendo investigada. Esse método apenas indica o grau de contaminação das águas. 3.1. 3. onde ocorre enriquecimento de organismos fermentadores da lactose.2. Um outro meio que é usado e o Ágar Eosina . com despejo de origem humana ou animal.2 Teste de Confirmação Verifica a veracidade do teste presuntivo. O teste é dito presuntivo porque outras bactérias não pertencentes ao grupo coliforme podem fermentar a lactose e produzir gás. no qual a formação de gás será a confirmação da presença de coliformes totais. 3. não é permitido isolar. pois as bactérias não se distribuem uniformemente na água e duas porções de água igualmente diluídas podem apresentar conteúdo total muito diferente. identificar ou enumerar as bactérias patogênicas existentes na água. consiste em inocular uma fração do caldo lactosado fermentado em um meio seletivo que só permite o desenvolvimento do grupo coliforme. Qualquer possibilidade na presença do grupo coliforme indica que a água não é satisfatória e nem de qualidade sanitária segura. Um dos meios que pode ser utilizado é o Caldo Lactosado Verde Brilhante (VB).

com o centro escuro. A Escherichia coli forma colônias pequenas. . A produção de gás é prova confirmativa para Coliformes Fecais.Azul de Metileno (EMB) no qual os germes do grupo coli-aerógenes formam colônias características. Figura 1: Inoculação de amostra em placa de petri. A presença de colônias típicas confirma a ocorrência de coliformes fecais. A Figura 2 mostra o procedimento para realização do teste presuntivo e o teste confirmativo. com um brilho metálico esverdeado. já a Enterobacter forma colônias grandes mucóides e róseas. Para a confirmação de coliformes fecais pode ser utilizada também a transferência de um inoculo de cada cultura com resultado positivo em LST para tubos contendo Caldo EC. A Figura 1 mostra o método de inoculação da amostra em placa de Petri com Ágar Eosina Azul de Metileno. raramente demonstrando brilho metálico. escuras com centro quase negro.

A fermentação do caldo lactosado e a demonstração de bacilos gram-negativos nãoesporulados constituem um teste positivo para a presença de algum membro do grupo coliforme de Água examinada.2. os coliformes são Gram-negativos e não formam esporos). o crescimento é previamente plaqueado em EMB) e inoculadas em Caldo Lactosado (os coliformes produzem gás) e em Ágar em Bisel (fazer o método de Gram. .Figura 2: Procedimento para realização dos testes presuntivo e confirmativo.3. 3.3 Teste Completo As colônias mais típicas são selecionadas da placa de Ágar Eosina Azul de Metileno (sendo utilizado o Caldo Lactose verde Brilhante no teste de confirmação.

a reação de Voges-Proskauer e o teste do citrato. Figura 3: Procedimento para realização do teste completo. . A Figura 3. mostra o procedimento para realização do ensaio completo.Outros testes que podem ser realizados são a reação do vermelho de Metila.

resultando em uma suspensão de células bacterianas individuais. A técnica consiste na inoculação de volumes decrescentes da amostra (diluições decimais consecutivas) em um meio de cultura adequado. Através do decréscimo dos volumes inoculados obtém-se uma determinada diluição em que pelo menos um tubo da última série forneça resultado negativo. O método do NMP é o mais útil quando se utiliza o crescimento em um meio líquido diferencial para identificar a bactéria (como o caso das bactérias coliformes em análise de águas).3. . sendo cada volume inoculado em uma série de cinco tubos. A combinação de resultados positivos e negativos permite a obtenção de uma estimativa de densidade original das bactérias pesquisadas – NÚMERO MAIS PROVÁVEL (NMP).3 Determinação do número mais provável de coliformes totais e fecais – Técnica da Fermentação em Tubos Múltiplos Esta técnica esta baseada no princípio de que as bactérias presentes em uma amostra podem ser separadas uma das outras por agitação. O método do NMP estabelece que há limite de confiança de 95% de probabilidade de que a medida da população bacteriana esta dentro de uma determinada margem. Figura 4: Diluições sucessivas.3. já que o NMP é o número estatisticamente mais provável. através da aplicação de cálculos de probabilidade. A Figura 4 mostra o método das diluições sucessivas.

constata-se o número de tubos positivos em cada uma das séries e registra-se o algarismo correspondente na linha identificada como “POS”.1ml + + 2 0. Exemplo: 55210 PORÇÃO DA AMOSTRA TUBOS 10ml 1 2 3 4 5 POS + + + + + 5 1ml + + + + + 5 0. cinco serão os algarismos que caracterizarão o resultado numérico total.3. O resultado numérico total será composto por tantos algarismos quantas forem as séries de diluições. considerando-se “zero” para a série totalmente negativa. O número assim formado é o “Resultado Numérico Total”.3. . No exemplo a seguir.1 Estimativa do número mais provável de coliformes Para estimativa do número mais provável de coliformes se deve registrar os algarismos correspondentes ao número de tubos positivos para cada série (devemos considerar positivo todo tubo que apresentar gás).3.001ml 0 RESULTADO NUMÉRICO TOTAL: 55210 Após encontrar o resultado numérico total se deve estabelecer o resultado em número mais provável de coliformes em 100mL de amostra também chamado de Índice colimétrico por 100mL.01ml + 1 0. considerando-se “zero” para a série totalmente negativa. Para este fim se utiliza o índice do NMP que é mostrado na Tabela 1. Como no exemplo as séries são em número de cinco.

.Tabela 1: Índice de NMP quando são utilizados inóculos de 10mL.01 mL em séries de 5 tubos. 0.1mL e 0.

Consultar a Tabela para cálculo do NMP por 100 ml. permanecerá o mesmo número encontrado na tabela. 3. terceira e quarta séries. Este é o caso de nosso exemplo portanto.3. quarta e quinta série. Localizar na tabela o número formado pelos três algarismos do código e verificar a que NMP corresponde. segunda e terceira séries. O NMP encontrado na tabela deverá ser multiplicado por 100. O NMP encontrado na tabela deverá ser multiplicado por 10. c) Emprega-se fator 100 (cem) quando o código for constituído da terceira. .Procurar o código (série crítica): o código deverá ser constituído de três algarismos. Observação : quando séries mais concentradas apresentarem menor número de tubos positivos. 1 e 0. algarismos estes relativos a cada série. o que raramente acontece.2 Regras para leitura na tabela do NMP Para estabelecimento do resultado em NMP é necessário usar os seguintes critérios: 1. No exemplo em questão o código será 521. b) Emprega-se fator 10 (dez) quando o código for constituído da segunda.Aplicar fatores de correção para NMP: a) emprega-se fator 1 (um) quando o código for constituído da primeira. seguida de duas séries abaixo”. devemos nos assegurar de que não houve falha técnica na execução do exame.3.1ml de amostra. Para isso observa-se o seguinte: “partir da série mais diluída e que apresenta maior número de tubos positivos. utilizando volumes de 10. No exemplo em questão o valor encontrado é de 70. o índice colimétrico por 100ml será de 700 e bastará acrescentar um 0 (zero) ao 70 encontrado na tabela.3. 2.

1 Materiais Segue abaixo os materiais utilizados para realizar o teste presuntivo. Em seguida levaram-se os tubos para uma estufa a 35 – 37°C por 48 horas. com o auxilio de uma alça de cromo-níquel. incubaram-se os tubos em um banho termostático com circulação de ar a 44. Materiais e Métodos: 4. 4. Após o . 4. a contagem de coliformes fecais e o isolamento da E.2 Métodos Serão descritos a seguir os procedimentos empregados no teste presuntivo.2 Contagem de coliformes fecais Primeiramente. na contagem de coliformes fecais e no isolamento da E.2.5°C por 24 horas. Após o período de incubação procedeu-se a leitura. coli. repetindo o mesmo procedimento nas demais diluições. coli (EC) com tubos de Durhan.4. inoculou uma alçada dos tubos positivos do teste presuntivo para os tubos com Caldo E.1 Teste Presuntivo Inoculou-se 1 mL da amostra em cada um dos 5 tubos de Caldo Lauryl Sulfato Triptose contendo tubos Durhan. identificando-os conforme a diluição feita no primeiro teste.2. 4.5 – 45. coli:           tubos de ensaio tubos de Durhan Caldo Lauryl Sulfato Triptose e EC Estufa Alça de cromo-níquel Bico de Bünsen Banho termostático placas de petri Ágar Azul de Metileno (EMB) Amostras de água: Açude Vila da Quinta. onde os tubos que apresentaram formação de gás foram identificados como contendo coliformes fecais. Em seguida.

2. Após o período de incubação.1 Isolamento da E.período de incubação procedeu-se a leitura.2. inoculou-se uma alçada de um dos tubos positivos do teste de coliformes fecais. incubaram-se as placas invertidas em estufa a 35 – 37°C por 24 horas. onde os tubos que apresentaram formação de gás foram identificados como contendo coliformes fecais. . 4. observou-se as colônias típicas formadas no Ágar. Em seguida. fazendo estrias em 2 placas de petri contendo Agar Eosina Azul de Metileno (EMB). coli Com o auxílio de uma alça de cromo-níquel.

5. A tabela 3 apresenta os resultados obtidos para o teste de Coliformes Termotolerantes Tabela 3: Resultado para Coliformes Termotolerantes Diluição 100 10-1 10-2 10-3 1 2 3 4 5 Pos + + + + + 5 + + + 3 0 0 Resultado númerico: 5300 Nas condições para presença de coliformes termotolerantes notou-se a presença destes em duas das concentrações testadas. esse valor deve ser multiplicado por 2 indicando então que terá 160NMP/100ml. deixando as demais diluições mais concentradas do que o previsto. Resultados e Discussão: A tabela 2 apresenta os resultados para o Teste Presuntivo: Tabela 2: Resultados Teste Presuntivo Diluição 100 10-1 1 2 3 4 5 + + + + + + + + + + 10-2 + + + + + 10-3 + + - No teste presuntivo em todas as diluições notou-se a presença de coliformes. para a água analisada. A legislação vigente impõem um valor máximo de 250NMP/100ml para coliformes . sendo encontrados em 8 dos tubos do teste. chegou-se ao valor de 80NMP/100ml porém como foi usado 5 mL para a diluição de 100 e não 1 mL como indicado no roteiro. Através de tabela de NMP adequada. de coliformes termotolerantes.

.termotolerantes em água não-canalisada. sendo considerada como excelente. logo. a amostra está dentro dos padrões.

. Conclusão: Para a amostra de água do Poço da Vila da Quinta foi encontrado 160NMP/100 mL de coliformes termotolerantes.6. sendo assim o poço está dentro da legislação para coliformes termotolerantes em água não canalisada.

fácil de distinguir de outros microrganismos da microbiota do alimento.7. produção ou armazenamento. O que são micro-organismos indicadores? Quais as características desejadas para um micro-organismo indicador? São micro-organismos capazes de fornecerem informações sobre a ocorrência de contaminação de origem fecal. 2. se possível. deve ter velocidade de morte que seja ao menos semelhante à do patógeno e. (2) água para consumo humano em toda e qualquer situação. (3) a detecção de Escherichia coli deve ser preferencialmente adotada. dentre outras. nascentes. sobrevivência levemente superior a do patógeno. minas. ou estar presente em quantidades mínimas. deve estar ausente nos alimentos que estão livres do patógeno. necessariamente. Quais os padrões microbianos de qualidade para água potável estabelecidos pela legislação brasileira? E para água de recreação (água de contato primário)? Tabela 4: Padrão microbiológico de potabilidade da água para consumo humano PARÂMETRO VMP(1) Água para consumo humano(2) Ausência em 100ml Água na saída do tratamento Coliformes totais Ausência em 100ml Escherichia coli ou coliformes termotolerantes(3) NOTAS: (1) valor máximo permitido. condições sanitárias inadequadas durante o processo. presença de patógenos. pois assim sua detecção não indicará. deve estar presente quando o patógeno associado estiver. seu número deve correlacionar-se com o do patógeno. 1. Perguntas Quais os principais micro-organismos contaminantes de águas? Os principais micro-organismos contaminantes de água e outros alimentos são os coliformes fecais. incluindo fontes individuais como poços. Critérios que devem ser levados em conta quando se considera um grupo ou microrganismo como sendo indicador: deve ser de rápida detecção. deterioração potencial. . 3. a presença da matéria fecal ou dos patógenos. deve apresentar necessidades de crescimento e velocidade de crescimento semelhantes às do patógeno. não deve estar presente como contaminante natural do alimento. Essas bactérias geralmente causam infecções intestinais e em raros casos podem causar infecções extra-intestinais como meningite.

com contagens ≤ 250 coliformes termotolerantes ou ≤ 400 E.No Brasil. coli ou ≤ 25 enterococos por 100 mL de amostra. com contagens ≤ 250 coliformes termotolerantes ou ≤ 200 E. coli ou ≤ 50 enterococos por 100 mL de amostra. coli ou ≤ 100 enterococos por 100 mL de amostra. (CONAMA 274/200) . As águas caracterizadas em própria são subdivididas em categorias: a) Excelente. Excelente. c) Satisfatória. salobras de salinas destinadas a balneabilidade tem sua condição avaliada nas categorias própria e impropria. as águas doces. com contagens ≤ 1000 coliformes termotolerantes ou ≤ 800 E.

htm http://www. Introduccion a la Microbiologia. São Paulo.br http://www. INTERNET: http://www.. S. editora McGraw-Hill Ltda. Editorial Acribia S.com. volume 2..br/legislacao/agua/qualidade_agua. J. REID R.. L. TORTORA G..htm . 1980..8.com. Porto Alegre.. Referencias Bibliograficas PELCZAR M.A. Espanha. FUNKE B.ambientebrasil.br/UV. 1993. Corsan. R. C.com. Curso Básico de Tratamento de água e esgoto: Técnicas Bacteriológicas.. 1997. CHAN E. Microbiologia. CASE C.snatural.sabesp.

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