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06/03/2012

MORFOLOGIA E ULTRA
ESTRUTURA DA CLULA PROCARITICA
Professor: Dr. Ricardo Guerra

A CLULA PROCARITICA
Organizao Bsica
Parede celular Membrana plasmtica Citoplasma
gua (80%), protenas, carboidratos, lipdeos, ons orgnicos e inorgnicos - no possui citoesqueleto.

rea Nuclear ou Nucleide


DNA circular de fita dupla (cromossomo bacteriano), fixado membrana plasmtica Plasmdeo: Plasmdeo pequeno DNA circular de fita dupla - replicao independente.

Ribossomos
Confere aspecto granular ao citoplasma. 70S 2 Subunidades (30S+50S); sensvel ao de antibiticos.

Grnulos de Incluses

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MATERIAL GENTICO

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RIBOSSOMOS
Compostos por RNAr + Protenas Caracterizados pelo coeficiente de sedimentao, expresso em unidades Svedberg (S). Procariotos: 70S Procariotos: 70S
contm uma subunidade grande (50S) e uma pequena (30S)

Eucariotos: 80S Eucariotos: 80S


contm uma subunidade grande (60S) e uma pequena (40S)

PLASMDEOS
DNA circular pequeno, de dupla fita, que se replica independentemente do cromossomo bacteriano So elementos genticos extracromossmicos: conectados ao cromossomo bacteriano principal.
replicam replicamse independentemente do DNA cromossmico

no

esto

Podem ser ganhos ou perdidos sem lesar as clulas.

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PLASMDEOS
Contm de 5 a 100 genes no cruciais para a sobrevivncia da bactria em condies ambientais normais. Transferncia de genes: genes:
resistncia aos antibiticos, tolerncia aos metais txicos, produo de toxinas e sntese de enzimas.

Podem ser utilizados para a manipulao gentica. gentica.

MORFOLOGIA CELULAR
Coco Bacilo ou Bastonete

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MORFOLOGIA CELULAR
Espirais Forma de estrela: Stella

Forma quadrada e plana: Haloarcula

TAMANHO DAS CLULAS

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MYCOPLASMA AS MENORES
Familia Mycoplasmataceae
2 gneros: Mycoplasma e Ureaplasma So os menores procariotos capazes de se multiplicar de modo independente (0,2 0,3 m). No possui parede celular
Pleomrficos no possuem forma definida

Membrana possui colesterol


Caracterstica de membranas celulares animais

Genoma pequeno (580 2200 kpb) kpb)

PAREDE CELULAR
Estrutura complexa, semirgida que confere forma clula.
Visualizao individualizada somente em microscopia eletrnica. eletrnica. Importncia clnica e taxonmica. taxonmica.

Previne a ruptura da clula fornece rigidez contra a presso osmtica. meio intracelular geralmente mais concentrado em solutos que o meio externo

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PAREDE CELULAR COMPOSIO

E ESTRUTURA

Peptideoglicano (ou murena) principal componente da camada rgida da parede celular s encontrado no Domnio Bacteria Unidades repetidas de um dissacardeo
1- N-acetilglicosamina (NAG) 2- cido N-acetil-murmico (NAM) acetil-

Molculas alternadas de NAM e NAG so ligadas formando grandes filas com 10 a filas 60 unidades formando um esqueleto de esqueleto carboidratos.
NAG NAM NAG NAM NAG NAM

PAREDE CELULAR COMPOSIO

E ESTRUTURA

Filas adjacentes de carboidratos (NAM e NAG) so ligadas por cadeias laterais de tetrapeptdeos
Sempre composta por 4 aminocidos unidos ao NAM da fila de carboidratos

Os aminocidos ocorrem em um padro alternado de ismeros D e L


Ismero D - forma incomum na natureza encontrado nas paredes celulares e em alguns antibiticos

Cadeias laterais de tetrapeptdeos


Podem se ligar diretamente maioria das Gram (-) Ligao por uma ponte cruzada peptdica (cadeia curta de aminocidos) - Gram (+)

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PAREDE CELULAR - COMPOSIO E ESTRUTURA


Lisozima lgrima, saliva, bacterifagos Quebra as ligaes glicosdicas 1-4 entre a NAGNAG-NAM Penicilina antibitico Impede a formao da ponte cruzada enfraquece a parede celular e produz lise osmtica. osmtica.

Local de ao da penicilina

Organizao das unidades repetitivas formando acamada de peptideoglicano. peptideoglicano.


a) Ligao cruzada em bactrias gramnegativas (E. coli). gram coli). b) Ponte interpeptdica de glicina em bactrias grampositivas (S. aureus). gram aureus). c) Vrias fitas de peptdeoglicano unidas por ligaes cruzadas.
(Fonte: Madigan et al., 2004).

PAREDES CELULARES DE BACTERIA

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PAREDE CELULAR GRAM (+)


Muitas camadas (at 25) de peptideoglicano 25)
corresponde a 90% da parede.

Apresentam cido Teicico (polissacardeo cido, com resduos de glicerol fosfato ou ribitol fosfato),
confere carga negativa superfcie celular, regulando o movimento de ons + na clula. responsveis pela especificidade antignica da parede tornando possvel a identificao de bactrias em testes laboratoriais

PAREDE CELULAR GRAM (-)


Membrana externa
composta de lipopolissacardeo (LPS) lipoprotenas e fosfolipdeos

Periplasma espao entre a MP e a ME


fluido com alta concentrao de enzimas, protenas de transporte e quimiorreceptores.

Uma ou poucas camadas de peptideoglicano (no contm cido teicico) no teicico

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PAREDE CELULAR GRAM (-)


O LPS uma molcula formada por 3 regies diferentes: diferentes:
Lipdeo A, Polissacardeo Interno e Polissacadeos O-especfico.

Lpdeo A liga-se aos fosfolipdeos da ME formando uma biligabicamada


Propriedade txica Gram (-): associada ao lipdeo A (endotoxina) do LPS.

Exemplos de gneros patognicos: Escherichia, Salmonella e Shigella.

Polissacardeos O do LPS atuam como antgenos


utilizados para diferenciar espcies de bactrias gramnegativas.

PAREDE CELULAR GRAM (-)


Membrana externa
Permevel a gua e pequenas molculas pela presena de porinas porinas: permitem a passagem de molculas hidroflicas de baixa massa molecular (nucleotdeos, dissacardeos, peptdeos, aminocidos, vitamina B12 e ferro). barreira para certos antibiticos (penicilina), enzimas digestivas (lisozima), metais pesados, detergentes detergentes.

Porina protena associada membrana

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COLORAO DE GRAM
Hans Christian Gram 1884 Mtodo de colorao diferencial, permitindo a distino entre bactrias Gram + ou Fixao do esfregao

COLORAO DE GRAM
Procedimentos

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O mecanismo da colorao de Gram se refere composio da parede celular:


Cristal Violeta
Se infiltra na parede celular e cora as clulas de roxo

Soluo de Iodo (Lugol) - Mordente (Lugol)


Substncia que fixa o corante no interior da clula Forma um complexo com o Cristal Violeta e se fixam na camada de peptideoglicano.

O tratamento com lcool Bactrias Gram (-)


extrai os lipdeos da ME resultando em uma porosidade ou permeabilidade aumentada da parede celular complexo Cristal Violeta Iodo (CV-I) retirado com a lavagem: As bactrias so descoradas.

Bactrias Gram (+)


parede celular de composio diferente: se desidrata durante o tratamento com lcool, diminuindo a porosidade e o complexo CV-I no pode ser extrado. As bactrias permanecem violetas

Colorao pela Safranina


Contra-corante cora as Gram (-) de vermelho, facilitando sua visualizao. visualizao Gram (+) permanecem coradas de violeta

COLORAO DE GRAM

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COLORAO DE GRAM
GRAM + GRAM -

ESTRUTURAS EXTERNAS PAREDE CELULAR F


Glicoclice
cpsulas e camadas limosas
Maior parte de natureza polissacardica (exopolissacardeos EPS). Composio varivel nas diferentes espcies. espcies Proporcionam aderncia entre a bactria e superfcies tecido superfcies: hospedeiro (clulas do pulmo, dentes, implantes)
Formao de Biofilme Bacteriano

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ESTRUTURAS EXTERNAS PAREDE CELULAR


Cpsula
Camada viscosa de polissacardeos - forma uma camada compacta ao redor da clula Dificultam o reconhecimento do sistema imune sistema imune relacionado virulncia
Streptococcus pneumoniae com e sem cpsula Streptococcus pyogenes capsula contendo cido hialurnico em sua composio, em casos raros produz a Febre Reumtica (autoimune)

e fagocitose do

Oferecem resistncia dessecao


muitas molculas de gua associadas.

Aplicao industrial: espessantes goma xantana


Xanthomonas campestris.

ESTRUTURAS EXTERNAS PAREDE CELULAR


Cpsula

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ESTRUTURAS EXTERNAS PAREDE CELULAR


Flagelos
Associado locomoo da clula oferece vantagem na explorao clula, dos recursos dos ambientes. Apndices longos e finos (~20 nm de espessura). nico ou vrios, em diferentes arranjos.

ESTRUTURAS EXTERNAS PAREDE CELULAR


Estrutura do flagelo procaritico Semirgida helicoidal (no fica reto). Composio: motor, gancho e filamento. Motor (Corpo Basal)
ancorado na MP e parede (basto + anis) protenas Mot. (rotao) e Fli (reverso do sentido de rotao).

Gancho
base mais rgida curvatura do flagelo.

Filamento
formado por subunidades de flagelina.

Energia para rotao


movimento de prtons na membrana, passando membrana pelo complexo Mot (fora prton motiva) passagem de 1.000 prtons para cada rotao Velocidade at 60 comprimentos celulares/ segundo (guepardo 25)

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ESTRUTURAS EXTERNAS PAREDE CELULAR


O Corpo Basal do flagelo formado pelo basto central inserido em uma srie de anis proticos. proticos Bactrias gram (-) apresntam 2 pares de anis (anis externos esto acorados parede celular anis internos esto ancorados membrana plasmtica

Bactrias gram (+) apresentam apenas o par interno

ESTRUTURAS EXTERNAS PAREDE CELULAR


Fmbria
Microfibrilas proticas presentes em muitas espcies de Gram (-) Mais curtas e mais numerosas que flagelos Funo:
ancoramento da bactria (adeso patogenicidade)

Neisseria gonorrhoeae agente causador da gonorria: fmbrias ajudam a colonizao das membranas mucosas.

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ENDSPOROS
Estruturas de resistncia aos ambientes desfavorveis, carncia de nutrientes. nutrientes.
Proteo: calor, agentes qumicos, dessecao e radiao

Geralmente em bactrias do solo, Gram(+) Gram(+)


Descritos em cerca de 20 gneros de Bacteria No se observou em Archaea.

Bem estudados nos gneros Clostridium e Bacillus Bacillus.


Podem permanecer dormentes por tempos longos Clostridium aceticum: 34 anos, frasco perdido em depsito da aceticum Universidade da Califrnia. Thermoactinomyces: Thermoactinomyces 2.000 anos fragmentos de runas de stio arqueolgico romano.

Esporos em: Bacillus anthracis

ENDSPOROS
Estrutura do Endsporo
Camadas adicionais e externas PC que protegem o DNA
formadas por protenas e cido dipicolnico.

Ncleo: Ncleo: parcialmente desidratado


contm 70-90% menos gua do que a clula inativa as enzimas aumenta a termoresistncia. vegetativa

Apresenta altas [ ] de PPASs


pequenas protenas de cido solveis de esporo esporo: ligase ao DNA, protege de danos causados por radiao, calor seco e dessecamento. pode ser utilizado como fonte de energia e carbono na germinao do esporo.

cido dipicolnico: exclusivo dos esporos, dipicolnico:


corresponde a 10% do peso seco do esporo.

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ENDSPOROS

(a)

(b)

Posio dos endsporos: (a) Endosporo central de endsporos Bacillus megaterium (40.500x); (b) Endosporo sub-terminal de B. antrhacis (38.000x); (c) Endosporo terminal, na extremidade de uma clula de Clostridium tetani (14.000x).

(c)

FORMAO DO ENDSPORO
Condio de limitao de um ou mais nutrientes essenciais sinal ambiental Em B. subtilis, ~ 200 genes envolvidos no processo de esporulao.
Processo completo pode levar 8 horas. horas.

Interrupo da sntese de protenas envolvidas nas funes da clula vegetativa Ativao da sntese das protenas especficas do esporo

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GERMINAO DO ENDSPORO
Ativada por leso fsica (aquecimento) ou qumica no revestimento do esporo. Enzimas do endsporo rompem as camadas extras extras. Intumescimento devido entrada de gua sntese de novas gua; molculas de RNA, protenas e DNA (se as condies nutricionais se forem favorveis favorveis).

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