Se denominan bacterias Gram negativas a aquellas bacterias que no se tien de azul oscuro o violeta por la tincin de gran, y lo hacen

de un color rosado tenue: de ah el nombre de ``Gram negativas``. Esta caractersticas esta ntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular, por lo que refleja un tipo natural de organizacin bacteriana. Las bacterias gram-negativas presentan dos membranas lipidicas entre las que se localiza una fina pared celular de pptidoglicano, mientras que las bacterias Gram-positivas presentan solo una membrana lipidica y la pared de peptidoglicano es mucho mas gruesa. Al ser la pared fina, no retiene el colorante durante la tincin de Gram. El aspecto de las bacterias en frotis teidos con Gram no permite identificar las especies. En el presente trabajo describiremos a las bacterias anaerobias Gram Negativas y las enfermedades que producen dichas bacterias. Las bacterias anaerobias no requieren oxigeno para su crecimiento y metabolismo, si no que obtienen su energa de reacciones de fermentacin. Este tipo de bacterias mueren por oxigeno o por sus radicales toxicos. La mayora de los gramnegativos anaerobios se tien dbilmente con la tincin de Gram, por lo que las muestras teidas se deben examinar cuidadosamente. Aunque las especies incluidas en el gnero Bacteroides crecen con rapidez en condiciones in vitro, los dems bacilos gramnegativos anaerobios son exigentes desde el punto de vista nutricional y sus cultivos se deben incubar durante al menos 3 das antes poder detectar el crecimiento de las bacterias Los anaerobios gramnegativos ms importantes que colonizan las vas respiratorias superiores, el aparato genitourinario y el aparato digestivo de los humanos son los bacilos de los gneros Bacteroides, Fusobacterum, Porphyromonas y Prevotella, y los cocos del gnero Veillonella. Los anaerobios son las bacterias predominantes en cada una de estas localizaciones, sobrepasando el nmero de bacterias aerobias de 10 a 1000 veces. La diversidad de las especies anaerobias es amplia, y se cree que hasta 500 especies diferentes colonizaran el bolsillo periodontal y que muchas de ellas son anaerobias. A pesar de la abundancia y de la diversidad de estas bacterias, la mayora de las infecciones estn producidas por un grupo

relativamente pequeo de especies Entre estos patgenos, el ms importante es Bacteroidesfragilis, prototipo del patgeno anaerobio endgeno.

Las

bacterias

anaerobias

gramnegativas

se

consideran

factores

que

contribuyen a la causa de la vaginosis bacteriana, un sndrome caracterizado por una profusa secrecin maloliente y un mayor nmero de bacterias en la vagina, entre ellas Gardnerellavaginalis, especies de Prevotella, especies de Mobiluncus, peptostreptococos y micoplasmas genitales. Se piensa que las bacterias anaerobias tienen una participacin importante en el origen de la enfermedad inflamatoria plvica, y en varios estudios se ha demostrado relacin entre el desarrollo de esta ltima y la vaginosis bacteriana

a. Bacilos gramnegativos anaerobios. 1- Bacteroides: las especies de bacteroides son anaerobios muy importantes causantes de infecciones en los humanos. Forman un vasto grupo de bacilos gramnegativos y pueden presentarse como bacilos delgados o cocobacilos. Muchas especies incluidas antes en el gnero Bacteroides se han reclasificado a los gneros Prevotella o en los gneros Porphiromonas.

Las especies de Bacteroides son habitantes normales del intestino y otros sitios. Los miembros aislados con mas frecuencia pertenecen al grupo b. fragilis, en particular en las infecciones asociadas con la contaminacin, por el contenido del colon donde pueden causar supuracin; por ejemplo peritonitis despus de lesin intestinal.

Bacteroides

fragilis:

los

microorganismos aparecen como bacilos

pleomorfos y dbilmente teidos.

La clasificacin se basa en las caractersticas bioqumicas, y en las colonias, y en los patrones de los cidos de cadena corta en la cromatografa de gases. En la infeccin (por ejemplo: absceso intraabdominal) , las especies de Bacteroides con frecuencia se acompaan de otro microorganismos anaerobios, en especial cocos anaerobios (peptoestreptococos), bacilos anaerbicos gran positivos (clostridios) y eubacterias, as como anaerobios facultativos

grampositivos que forman parte de la flora normal.

2- Prevotella:

las

especies bacilos y pueden bacilos

dePrevotellason gramnegativos presentarse

como

delgados o cocobacilos. Las aisladas con mas frecuencia son: Prevotellamelaninogenia,

Prevotellabivia y Prevotelladisiensse aslan del aparato genital femenino. Las especies de prevotella se aslan de los abscesos cerebrales y pulmonares, en el empiema, en las enfermedades inflamatorias plvicas y en los abscesos tubo ovrico. En estas infecciones, las prevotella frecuentemente se asocian con otros microorganismos anaerbicos que forman parte de la flora normal (en particular peptoestreptococo, bacilos anaerobios

grampositivos y especies de fusobacterium), as como de anaerobios facultativos grampositivos y gramnegativos que no son parte de la flora normal. Bacilos cortos, pleomrficos, generalmente de 0,4um por 0,6 a 1um de longitud, inmviles, no esporulados.

Capaces de producir pigmentos, moderadamente fermentativos, sensibles a la bilis y resistentes a la vancomicina. Al igual que Porphyromonas, son exigentes en cuanto a Vitamina K, hemina y sangre para su crecimiento.

3- Porphiromonas: las especies de porphiromonastambin son

basilos gramnegativos de la flora normal de la boca y se presentan en otros sitios anatmicos. Las especies deporphiromonaspueden cultivarse gingivales de y in fecciones periapicales

dentarias y ms comnmente, de

infecciones mamarias, axilares, perianales y de los genitales masculinos.

4- Fusobacterias:

las

fusobacterias son basilos gramnegativos pleomrficos la mayor parte de las especies producen cido butrico y convierten la treonina en cido

propinico.

El grupo de

fusobacterias incluye varias especies frecuencia aisladas de con las

infecciones bacterianas mixtas causada por la flora normal de las mucosas. Algunas veces una fusobacterium es la nica especie bacteriana en una infeccin.Las fusobacterias forman parte de la flora normal del tracto respiratorio superior. Una especie,

denominada Fusobacteriumnecrophorum, fue reconocida como patgeno importante en la medicina veterinaria a finales del siglo XIX. Debido a los abscesos necrticos producidos por el agente, la entidad se hizo conocida como necrobacilosis. Bacterias anaerobias gramnegativas responsables de enfermedades en el humano.

Infeccin Cabeza cuello y

Bacteria Bacteroides ureolyticus Fusobacteriumnucleatum Fusobacteriumnecrophorum Porphyromonasasaccharolytica

Porphyromonasgingivalis Prevoteila intermedia Prevoteilamelaninogenica Veillonella prvula

Bacteroides fragilis Intraabdominal Bacteroides thetaiotaomicron P. melaninogenica

Bacteroides fragilis Ginecolgica Prevoteilabivia Prevoteiladisiens Bacteroides fragilis Piel y tejidos blandos Bacteroidesfragilis

Bacteroides thetaiotaomicron Bacteriemia Fusobacteriumspp.

EPIDEMIOLOGIA

Como ya se ha mencionado, los cocos y los bacilos gramnegativos colonizan el organismo humano en un nmero muy elevado. Entre sus mltiples y destacadas funciones en estas localizaciones se encuentran la estabilizacin de la flora bacteriana residente, la cual impide la colonizacin por microorganismos patgenos de origen exgeno y favorece en la digestin de la comida. Estos microorganismos protectores normales producen enfermedades graves cuando migran desde sus nichos endgenos a zonas que normalmente son estriles. Por tanto, los componentes de la microflora residente son capaces de diseminarse como consecuencia de un traumatismo o un proceso patolgico

desde las superficies mucosas que normalmente colonizan hasta tejidos o lquidos estriles. Como cabra esperar, estas infecciones endgenas se caracterizan por la presencia de una mezcla polimicrobiana de microorganismos. Sin embargo, es importante tener en cuenta que la mezcla de bacterias presente en las superficies mucosas sanas es diferente de la de los tejidos afectados. La diferencia se relaciona con el potencial de virulencia de los microorganismos patgenos, y su capacidad para aumentar desde un nmero relativamente bajo en las superficies mucosas hasta convertirse en los microorganismos predominantes en el foco de la infeccin. Por ejemplo, B.fragilisse suele asociar a infecciones pleuropulmonares, intraabdominales y genitales. Sin embargo, este microorganismo constituye menos del 1% de la microfloracolnica, y rara vez se aisla de la bucofaringe o del aparato genital de los individuos sanos a no ser que se usen tcnicas muy selectivas. Las dificultades para obtener cultivos apropiados, la contaminacin de estos cultivos por la microflora normal o por bacterias aerobias y la falta de tcnicas de cultivo fidedignas y de fcil ejecucin han hecho que no dispongamos de datos exactos sobre la incidencia o la prevalencia de las infecciones por anaerobios. Sin embargo, estas infecciones son comunes en los hospitales con servicios de ciruga, traumatologa, obstetricia y ginecologa.

PATOGENIA

Las infecciones por bacterias anaerobias suelen producirse cuando las barreras anatmicas se interrumpen y la microflora local penetra hasta zonas previamente estriles. Debido a las exigencias especficas de crecimiento de los anaerobios y a su presencia como comensales en la superficie de las mucosas, deben cumplirse ciertas condiciones para que puedan atravesar las barreras mucosas y penetrar en tejidos con una capacidad de oxidorreduccin disminuida. Por tanto, la isquemia hstica, los traumatismos, las intervenciones quirrgicas, la perforacin de las vsceras, el choque o la aspiracin proporcionan un ambiente propicio para la proliferacin de estos

microorganismos. En el caso de una vscera perforada, se vierten a la cavidad

peritoneal cientos de especies de bacterias anaerobias gramnegativas, pero muchas de ellas no sobreviven porque los tejidos muy

vascularizadossuministran oxgeno en cuanta suficiente. La llegada de oxgeno al medio provoca la seleccin de los microorganismos ms aerotolerantes. Para que se establezca la infeccin es importante la capacidad de adherencia de los microorganismos a los tejidos del hospedador. Algunas especies bucales se adhieren al epitelio de los espacios subgingivales de la cavidad bucal. En realidad, Prevotellamelaninogenicase une a otros microorganismos; P. gingivalises una cepa que a menudo se identifica en la enfermedad periodontal. Se ha demostrado que estas bacterias poseen elementos estructurales que favorecen su virulencia como: Fimbrias, que se comportan como adhesinas, que intervienen en el proceso de adhesin a tejidos del hospedero y en la coagregacin bacteriana; Hemaglutininas, que participan en la aglutinacin de hemates en los inicios de la colonizacin tisular; Residuos proteicos, glucdicos y de lipopolisacridos, que contribuyen a los procesos de adhesin a clulas epiteliales, y a la coagregacin con otras bacterias; Cpsula, cuya accin es fundamentalmente antifagoctica; Vesculas superficiales, que participan en la captacin de nutrientes. Esta bacteria, es capaz de producir una variedad de enzimas que causan alteraciones directamente en los tejidos del periodonto. Entre stas, se encuentran: la colagenasas que acta sobre el colgeno del ligamento periodontal y hueso alveolar; las enzimas trpsicas, que lo hacen sobre el colgeno alterado; hialuronidasa, que acta sobre el cido hialurnico del tejido favoreciendo la difusin del microorganismo; fosfatasa cida y alcalina, que determinan la prdida del hueso alveolar, y otras enzimas como fosfolipasa A, heparinasa, desoxirribonucleasa, condroitinsulfatasa, gelatinasa y queratinasa, que de alguna manera contribuyen a la destruccin tisular. Su poder patgeno depende de su propia virulencia y defactores favorecedores por parte del husped. Las infecciones se originan apartir de las localizaciones donde los anaerobios viven habitualmente.

Principales factores de virulencia: Capacidad de adherencia a las mucosas.

Cpsula polisacrida que les protege de la fagocitosis y facilita la formacin de abscesos (especies de Bacteroides pertenecientes al grupo fragilis, y de Prevotella, Porphyromonas y Fusobacterium).

Endotoxina de Fusobacteriumnucleatum. Produccin de enzimas: enzimas extracelulares (lipasas, proteasas, heparinasas, hialuronidasas, colagenasas,etc.) y enzimas asociados a la membrana (-lactamasas, superxidodismutasa y catalasa).

Asociacin con bacterias facultativas y aerobias (consumen oxgeno o proporcionan metabolismo). a los anaerobios sustancias necesarias para su

Adhesinas

Bacteroides fragilisy las cepas de Prevotellamelaninogenicason capaces de adherirse a la superficie peritoneal de forma ms eficaz que otros anaerobios debido a que su superficie est recubierta de una cpsula de polisacridos. Bacteroides fragilisy otras especies del gnero Bacteroides, al igual que Porphyromonasgingivalis, se pueden adherir a las clulas epiteliales y molculas extra celulares (como fibringeno, fibronectina, lactoferrina) por medio de las fimbrias. Las fimbrias de P. gingivalistambin desempean una sealada funcin en la induccin de la expresin de citocinasproinflamatorias, como el factor de necrosis tumoral-a (TNF-a) y la interleucina-lp (IL-ip). Proteccin frente a la fagocitosis El polisacrido capsular de estos microorganismos tiene actividad

antifagoctica, al igual que otras cpsulas bacterianas. Adems, los cidos grasos de cadena corta (por ejemplo el cido succnico) que se generan durante el metabolismo anaerobio inhiben la fagocitosis y la destruccin intracelular. Finalmente, algunas especies de Porphyromonasy

Prevotellasintetizan proteasas que degradan las inmunoglobulinas. Proteccin frente a la toxicidad deloxgeno

Los anaerobios capaces de causar enfermedad suelen tolerar la exposicin al oxigeno. Muchas de las cepas patgenas poseen las enzimas catalasa y superxidodismutasa, las cuales inactivan el perxido de hidrgeno y los radicales libres de superxido (O2), respectivamente.

Destruccin tisular Se han asociado una gran variedad de enzimas a los anaerobios gramnegativos. Muchas de estas enzimas se encuentran tanto en las cepas virulentas como en las no virulentas. No obstante, la capacidad de estos microorganismos inmunoglobulinas, para as producir como destruccin resistir la tisular e inactivar del las

para

toxicidad

oxgeno

(superxidodismutasa), desempean con toda probabilidad un papel importante en la patogenia de las infecciones por anaerobios. Produccin de toxinas Las cepas de Bacteroides fraglisenterotoxignico que originan una

enfermedad diarreica sintetizan una toxina metaloproteasa termolbil de cinc (toxina de Bacteroidesfragilis[BFT]). Esta toxina induce cambios morfolgicos en el epitelio intestinal a travs de la organizacin de la actina-F, lo que estimula la secrecin de cloruro y la prdida de lquidos.

Circunstancias favorecedoras en el husped: Disminucin del potencial de oxidorreduccin (redox) normalmente estn bien oxigenados. Procesos malignos slidos o hematolgicos. Ciertas enfermedades subyacentes (diabetes, cirrosis, anemias, etc.). Empleo de antibiticos sin actividad frente a muchos anaerobios. en tejidos que