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UFMT Universidade Federal de Mato Grosso Curso: Engenharia Florestal Disciplina: Citologia Discente.....................................................................Turma....................

. MANUAL DE AULA PRTICA CITOLOGIA Cuiab 2010/2 AULA PRTICA: MICROSCOPIA PTICA I Microscpio ptico (MO) pode ser conceituado como um instrumento que produz imagens ampliadas de objetos que no podem ser vistos a olho nu. Ao se estudar os seres vivos, ao nvel celular, deve-se empregar vrias tcnicas visando superar trs principais limitaes destes estudos: as pequenas dimenses celulares, a grande espessura da maioria dos tecidos e a transparncia (falta de contraste). Em conseqncia, o estudo da organizao celular depende do uso de microscpios e o emprego de tcnicas bsicas de preparao do material a ser analisado. OBJETIVOS: Identificar as partes mecnicas e pticas do microscpio ptico Manusear corretamente o microscpio MATERIAL: Microscpio ptico de luz comum Lmina permanente Roteiro que se segue abaixo DESCRIO DO MICROSCPIO Parte mecnica P ou BASE: o suporte do microscpio, pea que sustenta todas as outras.

BRAO ou COLUNA: pea que liga o p parte superior do microscpio. Sustenta o tubo do microscpio, onde se encontram as lentes. PLATINA: pea de apoio da lmina contendo o material para estudo (preparao). O centro possui um orifcio para a passagem da luz. PARAFUSO MACROMTRICO: localiza-se em ambos lados da coluna e serve para ajustar o foco. Permitem grandes avanos ou recuos da platina em relao objetiva. PARAFUSO MICROMTRICO: localiza-se em ambos os lados da coluna encaixados sobre o parafuso macromtrico. Ajusta o foco finamente, atravs de pequenos avanos ou recuos da platina. CANHO: parte superior do microscpio constituda por uma pea semi-esfrica ligada a um tubo oco. Internamente, abriga um prisma e sustenta as lentes objetivas e oculares. REVLVER: pea em que se encaixam as lentes objetivas. Nela existe um disco com ranhuras por onde se faz o giro do revlver para a mudana das objetivas. CHARRIOT: pea ligada platina para movimentar a lmina no plano horizontal. Possui uma presilha que prende a lmina sobre a platina. O charriot permite o deslizamento da lmina da esquerda para a direita e vice-versa e de trs para frente e vice-versa. Parte ptica SISTEMA DE ILUMINAO: todos os seus elementos esto abaixo da platina FONTE DE LUZ: acoplada ao p do microscpio (embutida). Opcionalmente pode receber filtros. CONDENSADOR: conjunto de lentes. Concentra a luz e fornece iluminao uniforme ao material. O condensador permite maior ou menor incidncia de raios luminosos no material a ser observado. Fornece tambm possibilidades de contraste da imagem principalmente no caso de observao de preparao a fresco. O parafuso localizado lateralmente permite a movimentao do condensador. DIAFRAGMA: dispositivo que regula a intensidade de luz que atinge a preparao, comandado atravs de uma alavanca de abertura e fechamento da pea, localizada no condensador. A sua regulagem adequada evita os raios luminosos marginais, obtendo-se imagem mais ntida. Alguns microscpios so dotados ainda de um outro tipo de diafragma, chamado diafragma de campo, constitudo de um anel giratrio sobre a fonte de luz, no p do microscpio. FILTROS: em geral so de vidro, os quais absorvem parte das radiaes luminosas permitindo usar faixas estreitas de luz, de comprimento de onda selecionados de acordo com a colorao destes filtros.

SISTEMA PTICO DE OBSERVAO LENTE OCULAR: formado por um sistema de lentes cuja posio est sempre prxima ao olho do observador. Sua funo recolher a imagem aumentada, vertical e direta. Como a imagem que a objetiva oferece invertida, a imagem final do microscpio ser tambm invertida. As oculares so formadas por duas lentes convergentes que ampliam e corrigem defeitos da imagem dada pela objetiva. Traz gravado o aumento que proporciona. Pode ter 1 (mono-ocular) ou 2 (binoculares) LENTE OBJETIVA: cada objetiva um conjunto de 4 ou mais lentes superpostas. O microscpio possui geralmente 4 objetivas, proporcionando aumentos diferentes. O valor do aumento est gravado na prpria objetiva. O segundo nmero gravado corresponde abertura numrica da lente. Na objetiva de imerso utiliza-se um leo transparente entre a lmina e o material a ser examinado. O leo utilizado o leo de cedro (ou sinttico) com a finalidade de tornar mais claro o campo do microscpio, o que acontece quando o leo homogeneiza o meio ptico entre esses dois elementos. As objetivas trazem inscries que especificam suas caractersticas Exemplo: 10/0,22 160/0,17 10 = aumento de 10x 0,22 = valor da abertura numrica 160 = distncia da rosca da objetiva at a ocular em mm 0,17 = espessura da lamnula para a qual formar-se- imagem ntida O AUMENTO DA IMAGEM no diz respeito riqueza de detalhes da imagem obtida. O aumento refere-se ao tamanho aparente da imagem em relao ao objeto e conseguido pelo produto: Aumento final = aumento da objetiva x aumento da ocular DATA: TTULO: CONHECENDO O MICROSCPIO

MATERIAL: Microscpio PROCEDIMENTO: Indique no esquema abaixo os nomes das partes que compem o microscpio. MICROSCPIO PTICO

Aqualidade de um microscpio est ligada ao seu PODER DE RESOLUO, que pode ser inferido indiretamente atravs do LIMITE DE RESOLUO do sistema ptico. PODER DE RESOLUO: capacidade de um sistema ptico de revelar detalhes de estrutura.

LIMITE DE RESOLUO: refere-se menor distncia que pode existir entre dois pontos para que apaream individualizados na imagem formada pelo sistema ptico utilizado. calculado pela frmula: LR = k /AN K = constante com valor 0,61 = comprimento de onda da luz empregada (luz branca = 0,55m) AN = abertura numrica da lente em uso (vem gravada na objetiva logo aps o valor do aumento) A AN proporcional ao ngulo mximo dos raios que atingem a lente e ao ndice de refrao do meio entre o objeto e a lente. Esta relao pode ser representada como: AN = .sen Sendo que = ndice de refrao do meio =ngulo que forma o raio externo captado pela lente O LR diretamente proporcional ao comprimento de onda da fonte de iluminao. Pode-se diminuir o LR e consequentemente aumentar o poder de resoluo do microscpio, utilizando-se microscpios com fontes de menor comprimento de onda , com a luz UV ou um feixe de eltrons (microscpio eletrnico). Quanto maior a AN da lente, menor o LR e consequentemente mais ntida a imagem formada. Pode-se provocar um aumento da AN utilizando-se objetivas com maior abertura angular ou, variando-se o meio (ndice de refrao) que separa a objetiva da lmina. vidro = 1,52 ar = 1 A diferena de ndice de refrao entre os dois meios levam a desvios do feixe luminoso. Como resultado, uma menor quantidade de luz participa na formao da imagem. O uso do leo de imerso ( = 1,52) contorna este problema. Objetivas de imerso

Denomina-se de imerso a tcnica pela qual coloca-se um fluido entre a objetiva e o preparado, com a melhoria do poder de resoluo do microscpio e da qualidade de imagem. As objetivas de 100x so sempre de imerso. Geralmente, vem escrito imerso na prpria objetiva. Manuseio correto para observao ao MO 1. Gire o revlver, encaixando a objetiva de menor aumento (objetiva panormica)

2. Abra a presilha do charriot e coloque a lmina sobre a platina, sempre com o material
voltado para cima. 3. Levante a platina movimentando o parafuso macromtrico, VAGAROSAMENTE, com as duas mos, at o final. 4. Coloque o condensador em sua posio mais elevada. 5. Acenda a luz do microscpio 6. Certifique-se de que o diafragma est aberto, olhando se h passagem de luz atravs da lmina

7. Centralize o material no orifcio da platina, utilizando os parafusos do charriot


8. Olhando atravs das oculares, com os DOIS OLHOS ABERTOS, abaixe lentamente a platina, utilizando o parafuso macromtrico, at que o material possa ser visto. 9. Observando o material, corrija a distncia entre as duas oculares, de tal forma que passe a enxergar um s campo de imagem. Essa distncia varia entre as pessoas, pois depende da distncia inter-pupilar de cada um. 10. Neste momento, refine o ajuste de foco utilizando o parafuso micromtrico.

11. Explore o material da lmina utilizando os parafusos do charriot.


12. A preparao pode ser observada com as demais objetivas, RESPEITANDO SEMPRE A ORDEM CRESCENTE DE SEUS AUMENTOS, e ajustando o foco somente com o parafuso micromtrico. Antes de passar para a objetiva de aumento superior, coloque sempre a parte do material a ser observada no centro do campo de observao. OBS: A postura correta, alm dos dois olhos abertos, inclui o fato de a mo direita ficar nos parafusos do charriot e a mo esquerda no micromtrico.

Uso da objetiva de 100x 1. Aps focalizar com a objetiva de 40x, coloque o revlver em posio inicial intermediria, entre as objetivas de 40x e 100x. 2. Coloque uma gota de leo de imerso sobre a estrutura a ser observada. 3. Abaixe a objetiva de 100x (esta lente deve mergulhar na gota de leo) e focalize o material mexendo SOMENTE O MICROMTRICO. 4. Para retirar a lmina do microscpio proceda como no item 15 acima. Em adio, limpe a objetiva de imerso com um leno de papel macio. Pode-se fazer o uso de uma soluo de ter/clorofrmio (1:1), para melhor limpeza. NUNCA USE PAPEL GROSSO, POIS PODE DANIFICAR AS OBJETIVAS Ao terminar o uso do microscpio 1. No esquea a lmina na platina. 2. Para retirar a lmina do microscpio, gire o revlver at a objetiva panormica (menor tamanho). Abaixe a platina, girando o parafuso macromtrico. 3. Desligue a luz, retire o fio da tomada enrolando-o no p do microscpio e cubra-o com a capa. 4. Caso tenha molhado a platina, enxugue-a muito bem! No utilize substncias qumicas corrosivas para no danificar o aparelho. 5. Guarde a lmina na caixa de lminas ou entregue pessoa responsvel. Exerccios 1. Observe as objetivas do microscpio, anotando os nmeros referentes ao aumento e abertura numrica de cada uma delas. 1. Na tabela abaixo, anote o aumento da ocular e o aumento e abertura numrica (AN) das objetivas. Calcule o aumento final da imagem ao microscpio com cada uma das objetivas e o LR que as lentes objetivas podem fornecer. k = 0,61

da luz branca = 0,55m

Ocular

Objetiv Aumento AN da objetiva a final

L R

1. Que relao existe entre o aumento total de cada objetiva e o limite de resoluo? 1. Por que deve-se utilizar leo de imerso na objetiva de 100x? 5. Esquematize e identifique as partes do microscpio: AULA PRTICA: MICROSCOPIA PTICA II OBJETIVOS: Familiarizar-se com as partes pticas e mecnicas do microscpio ptico e a manipulao do mesmo. Reconhecer as diferenas de um material observado a olho nu e ao MO. MATERIAIS: Microscpio ptico de luz Papel de filtro/gua/pipeta Pasteur Lminas e lamnulas Texto de jornal Cola Cartolina PROCEDIMENTOS: MONTAGEM DA LMINA E OBSERVAO DO MATERIAL 1. Recorte uma palavra do jornal e coloque-a sobre uma lmina (na posio de leitura), adicione uma gota de gua .

2. Apoie a lamnula sobre a lmina em ngulo de 45, encoste a borda da lamnula na borda da gota de gua at que forme um fio e abaixe-a vagarosamente, procurando evitar a formao de bolhas de ar. Caso estas se formem, com a ponta de um lpis, aperte suavemente sobre a lamnula procurando remov-las. 3. Retire o excesso de gua encostando um pedao de papel de filtro na borda externa da lamnula, na linha de contato entre esta e a lmina. 4. Examine o material a olho nu, escolha uma letra (exceto a letra O, l e H) e esquematize-a, respeitando seu tamanho original. (ESQUEMA 1) 5. Coloque a lmina sobre a platina, com a lamnula voltada para cima. Conforme instrues da aula anterior, examine o material ao MO. 6. Na objetiva panormica, focalize a mesma letra observada no item 4. Centralize-a no campo de observao do MO e observe sua imagem formada. Esquematize a letra, respeitando o tamanho e posio observados. (ESQUEMA 2) 7. Mude para a objetiva de 40x, ajustando o foco no MICROMTRICO. Faa o esquema do que est sendo observado. (ESQUEMA 3) 8. Focalize novamente a letra na objetiva panornica, mas agora deixe-a situada na borda do campo de observao. Em seguida, mude para a objetiva de 40x ajustando o foco no MICROMTRICO, observe e responda a questo 3. 9. Para finalizar, cole a letra de jornal na cartolina. Observe-a novamente ao MO na objetiva panormica e responda a questo 4. ESQUEMAS:

Aumento final: Ponto: Aumento final: Ponto: EXERCCIOS: 1. Que diferenas voc observou entre a posio das letras a olho nu e na imagem ao MO? 2. O que voc notou quanto ao tamanho da imagem observada nas diferentes objetivas? 3. Porque a letra do jornal escolhida no coube no campo de observao quando voc utilizou a objetiva de 40x? 4. Porque recomendvel centralizar o material no campo a cada mudana de objetiva? 5. Porque o papel carto dificultou a observao do material ao MO? 6. Quais as caractersticas que a folha de jornal apresenta que facilita sua observao direta ao MO?

RESPOSTAS: AULA PRTICA: OBSERVAO DE CLULAS DA CORTIA A experincia da cortia est ligada a descoberta da clula. Em 1667, o ingls Robert Hooke, utilizando um microscpio ptico fez observaes que lhe deram o crdito de descobridor da clula. O que ele observara na verdade eram as paredes celulares que delimitavam as clula da cortia. As paredes celulares so resistentes e persistem mesmo aps a morte da clula (sber). OBJETIVOS: Identificar os espaos vazios, antes ocupados por clulas vivas. Observar os contornos da paredes celulares. MATERIAL: Lmina Lamnula Conta-gotas Cortia Lmina de barbear PROCEDIMENTOS: 1. Pegue um pedao de cortia e, com uma lmina de barbear, tire lasquinhas bem finas da mesma. 2. Escolha a lasquinha mais fina e coloque numa lmina com uma gota de gua. 3. Examine e desenhe. ESQUEMAS:

AULA PRTICA: OBSERVAO DE CLULAS DO FERMENTO OBJETIVOS: Identificar o fungo unicelularSacharomyces cerevisae e suas partes fundamentais como: membrana, citoplasma e ncleo. Observar a reproduo assexuada por brotamento. MATERIAL: Lmina Lamnula Conta-gotas Fermento Biolgico (Sacharomyces cerevisae) Placa de Petri Acar PROCEDIMENTOS: 1. Coloque uma pitada de fermento em uma placa de Petri e dissolva em pouco de gua. 2. Junte o acar comum e deixe descasar por uns 15 minutos. 3. Decorrido esse tempo, coloque uma gota da suspenso numa lmina, cubra com uma lamnula, examine e faa o desenho. ESQUEMAS:

AULA PRTICA: DIVERSIDADE CELULAR (CLULA DA CEBOLA E MUCOSA BUCAL) VISO GERAL DE CLULAS: ANIMAL E VEGETAL Embora as clulas procariontes se diferenciem das eucariontes por vrias caractersticas estruturais e funcionais, apenas a principal diferena entre elas pode ser detectada atravs da microscopia de luz. J entre as clulas eucariontes, encontram-se muitas caractersticas morfolgicas diferenciais detectveis, principalmente entre as clulas animais e vegetais. No entanto, para que sejam identificadas ao microscpio de luz, as estruturas de qualquer tipo celular devem ter cor prpria ou devem ser coradas com substncias corantes que lhes conferem diferentes graus de absoro de luz, acentuando os contrastes. OBJETIVOS: Identificar as parte fundamentais das clulas eucariontes: membrana, citoplasma e ncleo, comparando a diferena entre clula vegetal e animal. Comparar o tamanho das clulas procariontes e eucariontes. MATERIAIS: Lminas e lamnulas Esptula de madeira Cebola Fucsina

01 estilete 01 pina de ponta fina PROCEDIMENTOS: Clula animal: clulas descamadas da mucosa bucal 1. Com uma esptula de madeira, raspe a face interna da mucosa bucal. 2. Apoie a esptula contendo o material, sobre uma lmina limpa, formando um ngulo de 45. 3. Faa-a deslizar sobre a lmina, preparando assim um esfregao e deixe secar.

4. Pingue uma gota de azul de metileno (corante bsico) sobre o material.


5. Cubra com uma lamnula limpa e observe ao MO at a objetiva de 40x.

6. Esquematize na objetiva de 40x. Observe: limite celular, ncleo, citoplasma.


Clula vegetal: Cebola 1. Separe as camadas que formam o bulbo da cebola e, com a pina de ponta fina retirar uma pequena amostra da epiderme interior. 2. Coloque sobre a lmina, uma gota do corante azul de metileno e sobre esta, a amostra de cebola. 3. Cubra com lamnula e observe ao MO at a objetiva de 40x.

4. Esquematize na objetiva de 40x. Observe: parede celular, ncleo, citoplasma.


ESQUEMAS:

AULA PRTICA: OSMOSE EM CLULA VEGETAL OBJETIVOS: Identificar o comportamento da clula vegetal quando submetida a meios de diferentes concentraes (material a fresco) MATERIAIS: Microscpio Papel absorvente Lminas e lamnulas gua destilada NaCl 5% Giletes Pinas de ponta fina Cebola PROCEDIMENTOS:

1. Retirar uma amostra de epiderme inferior de bulbo de cebola e colocar sobre uma lmina contendo uma gota de gua destilada. 2. Cobrir com lamnula e observar na objetiva de 40x 3. Substituir gradativamente a gua por NaCl a 5% e perceber o fenmeno da perda de gua pela clula vegetal. ESQUEMAS:

EXERCCIOS: 1. D o conceito de meio hipertnico e meio hipotnico. 2. Baseado no experimento realizado, explique porque a gua passou do meio interno da clula da cebola para o meio externo. 3. Como conhecido o fenmeno da perda de gua de uma clula vegetal? RESPOSTAS: AULA PRTICA: OBSERVAO DE INCLUSES SLIDAS (DRUSAS E RFIDES) As incluses so constituintes temporrios da clula e correspondem a formas de reservas de importantes componentes, como por exemplo, o glicognio (polmero de glicose) e as drusas e rfides que so cristais de oxalato de clcio.

OBJETIVOS: Identificar as incluses slidas (drusas e rfides). MATERIAIS: Lmina Lamnula Conta-gotas Folha de Stereasea purpurea Cactcea PROCEDIMENTOS: Rfides 1. Quebre ao meio uma folha de Stereasea e puxe a epiderme da folha. 2. Coloque-a sobre uma gota dgua entre a lmina e a lamnula. 3. Examine e desenhe. Drusas 1. Faa um corte transversal bem fino em uma cactcea. 2. Coloque-o sobre uma gota dgua entre a lmina e a lamnula. 3. Examine e desenhe.

ESQUEMAS: AULA PRTICA: PLASTOS Os plastos so organelas caractersticas das clulas vegetais e so e fcil observao microscopia ptica (MO), em funo do seu grande tamanho e muitas vezes de sua colorao prpria. Em funo desta ltima particularidade, existem dois tipos principais de plastos: os leucoplastos (plastos incolores) e os cromoplastos (plastos coloridos). OBJETIVO: Identificar cromoplastos ao MO. MATERIAIS:

M.O. Elodea sp.

Pipetas Gilete

Stereasea purprea Lminas gua Lamnula s

PROCEDIMENTOS: Coloque uma folha de Eldea sp e/ou a epiderme da folha de Stereasea sobre a lmina. Adicione uma gota de gua e cubra com lamnula. Observe os cloroplastos ao MO (objetivas de 4X, 10X e 40X).

Faa um esquema com a objetiva de 40X. ESQUEMAS:

EXERCCIOS 1. Quais os tipos de cromoplastos e que pigmentos cada um contm? 2. Qual a posio na clula, ocupada pelos cloroplastos? Porque? 3. Onde se localiza a clorofila nos cloroplastos? RESPOSTAS: AULA PRTICA: AMILOPLASTOS Os plastos so organelas caractersticas das clulas vegetais e so e fcil observao microscopia ptica (MO), em funo do seu grande tamanho e muitas vezes de sua colorao prpria. Em funo desta ltima particularidade, existem dois tipos principais de plastos: os leucoplastos (plastos incolores) e os cromoplastos (plastos coloridos). OBJETIVO: Identificar as diferentes formas da organela citoplasmtica caracterstica de clulas vegetais responsvel pelo armazenamento de amido. MATERIAIS:

Batata inglesa Banana madura

Pipetas Gilette

Farinha de trigo/ maisena Lminas e lamnulas Gros de feijo gua Microscpio ptico Soluo de Lugol

PROCEDIMENTOS: Batata Raspe delicadamente a polpa de batata e coloque o material sobre a lmina contendo uma gota dgua. Cubra com lamnula e observe ao MO na objetiva de 40x. Na mesma preparao, adicione uma gota de soluo fraca de lugol (soluo aquosa de iodeto de potssio com iodo metlico), cubra com lamnula e observe novamente ao MO. Esquematize na objetiva de 40X.

Banana Raspe delicadamente a polpa da banana madura e coloque o material sobre a lmina contendo uma gota dgua. Adicione uma gota de soluo fraca de lugol, cubra com lamnula e observe novamente ao MO. Esquematize na objetiva de 40X.

Gro de feijo Parta o gro de feijo, raspe a polpa e coloque o material sobre a lmina contendo uma gota dgua. Adicione uma gota de lugol e cubra com lamnula. Observe ao MO. Esquematize na objetiva de 40X.

Farinha de trigo e maisena Dilua a maisena e a farinha de trigo em frascos com gua, separadamente. Coloque uma gota de cada soluo em lminas separadas, adicione uma gota de lugol e cubra com lamnula. Observe ao MO e esquematize na objetiva de 40X.

ESQUEMAS:

EXERCCIOS: 1. Quais os tipos de leucoplastos existentes? 2. Na lmina preparada com polpa de batata, voc observou os amiloplastos com gua e depois com lugol. Em qual das preparaes ficou melhor? Porque? 3. O que o amido? Qual sua funo? RESPOSTAS: AULA PRTICA: MOVIMENTOS CELULARES Os movimentos que as clulas podem realizar so de diferentes tipos, envolvendo aqueles que modificam e os que no produzem modificaes na forma das clulas. Todos os tipos de movimentos exercidos pelas clulas eucariontes esto sempre relacionados ao de filamentos citoplasmticos, constitudos por protenas de diferentes tipos, que formam o chamado citoesqueleto. Clios e flagelos tambm so estruturas que objetivam a movimentao celular. Como nos demais casos, seu movimento est relacionado com elementos do citoesqueleto. OBJETIVOS: Observar diferentes movimentos celulares MATERIAIS: Preparao a fresco de protozorios ciliados e flagelados Elodea sp

Microscpio ptico (MO) Soluo NaCl 0,6% Pina Pincel ou estilete Placa de Petri Papel de filtro Lminas e lamnulas PROCEDIMENTOS: Ciclose 1. Coloque uma folhinha da Elodea sp na lmina com um pouco de gua e cubra com uma lamnula. 2. Observe ao MO. 1. Observe o movimento dos cloroplastos. 2. Esquematize a clula na objetiva de 40x. Movimento de protistas 1. Coloque sobre a lmina uma gota de cultura de protozorios e cubra com lamnula. 2. Tente identificar o clio ou flagelo do protozorio que encontrar e observe os movimentos. 3. Na objetiva de 40x, esquematize os protozorios que encontrar (pelo menos 1), identificando se um ciliado ou um flagelado. ESQUEMAS:

EXERCCIOS: 1. O que a ciclose? 2. A forma de deslocamento dos protozorios ciliados a mesma que a dos flagelados? Explique. 3. Qual a importncia da motilidade dos protistas? 4. Ao observar ao MO, qual a diferena no aspecto dos melanforos antes e depois da ao do gelo? 5. Cite as estruturas responsveis por cada um dos movimentos observados na aula: batimento de clios e flagelos, transporte de pigmentos e ciclose. RESPOSTAS: AULA PRTICA: MITOSE EM RAIZ DE CEBOLA CORADA PELA REAO DE FEULGEN OBJETIVOS Identificar o processo de diviso celular no qual uma clula se divide em duas outras exatamente iguais por terem o mesmo nmero de cromossomos da clula-me. MATERIAIS: Ponta de raiz de cebola gua destilada

cido actico 45% Orceina acetica PROCEDIMENTOS : Ponta de raiz de Allium cepa Dividir a raiz (ponta) ao meio obtendo uma delgada fatia. Fixar uma mistura de lcool 100% (3 partes) e cido actico (1 parte). Deixar de 15 a 20 minutos. Levar a um tubo de ensaio com orcena actica, deixar por 2 min. em banho-maria. Levar para uma lmina sobre uma gota de carmim actico recente. Colocar a lamnula, faa um bom esmagamento (com papel filtro faa presso sobe a lamnula) at que haja s uma camada de clulas. Procure observar clulas em diferentes estgios do ciclo celular. Desenhe. EXERCCIOS: 1. Explique a diferena entre os dois tipos de diviso celular: mitose e meiose 2. Para a anlise cariotpica de determinada espcie, necessrio um reagente para que a diviso celular pare em uma fase especfica. Qual este reagente e de qual fase estamos nos referindo? Por que? 3. Porque as clulas da raiz dividem-se por mitose ? 4. Porque foi possvel encontrar as diferentes fases da mitose em uma nica raiz ? ESQUEMAS:

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