Morfologia e Estrutura de Microrganismos

Eucariotos Procariotos Esfriamento da crosta Cianobactrias : grandes quantidades de O2 na atmosfera Plantas e animais

Bilhes de anos a partir do presente

Estrutura de Clulas de Microrganismos Reflete as Diferentes Etapas do Processo de Evoluo Biolgica de Organismos

Morfologia e Estrutura de Microrganismos

As Trs Estruturas Bsicas de Clulas esto Associadas a Trs Reinos Distintos de Organismos

Tamanhos de Clulas

Tamanhos de Clulas

A vantagem de ser pequeno Raio (m) 1 10 100 1000 Volume (m3) 4,2x101 4,2x103 4,2x106 4,2x109 Superfcie (m3) 1,3x101 1,3x103 1,3x105 1,3x107 Superfcie/Volume 0,31 0,31 0,03 0,003

Morfologia bacteriana

Sprillum

Leptospirillum

Pseudomonas

Staphilococcus

Streptococcus

Vibrio cholerae

Morfologia bacteriana

Treponema Hyphomicrobium

Thiopedia

Fusobacterium

Beggiatoa

Bactrias filamentosas lodo de esgoto

O formato e o tamanho da clula dependem de seu estado nutricional

Vibrio sp. marinho recm cultivado

Aps 1 semana em meio sem fonte de carbono

Aps 1 ms em meio sem fonte de carbono

Clula Procaritica Padro:

Citoplasma Corpos de incluso Nucleide Ribossomo Flagelo Cpsula Parede Membrana Fmbria

Estrutura bsica encontrada em organismos do filo Eubacteria

Glicoclix ou Cpsula
Exudatos compostos de polissacardeos que se acumulam na superfcie de clulas, formando uma camada espessa na parte externa da clula. Composio extremamente varivel, podem ser espessas ou delgadas, rgidas ou flexveis; Aderncia, resistncia dessecao, estabilidade estrutural de consrcios microbianos (biofilmes, grnulos de bactrias).

Colorao de Gram
A tcnica de colorao mais importante da bacteriologia. Permite classificar eubactrias em dois grupos, com base na estrutura da superfcie: Gram+ e Gram-

Gram+

Gram-

Hans Christian Gram

Camada externa de bactrias GramProtena Porina

LPS Membrana externa

Periplasma

Membrana citoplasmtica

Fosfolipdeos

Camada externa de bactrias Gram+

cido lipoteicico cido teicico Protena associada parede

Parede

Membrana citoplasmtica

Terminologia
Ateno: neste curso a terminologia de descrio das estruturas da camada externa ao protoplasma ser a terminologia empregada na literatura internacional: Conjunto de estruturas que conferem forma clula e separam o ambiente interno (plasma) do ambiente externo: camada externa (envelope) Estruturas responsveis pela estabilidade mecnica da superfcie da clula: parede (cell wall)

Peptidoglicano
Estrutura rgida ou semi-rgida, que garante a estabilidade mecnica da parede de eubactrias; Ponto de ancoramento de estruturas de impulsionamento da clula (flagelos) e de outras estruturas rgidas com funes variadas (pilos e fmbrias) Define o volume da clula
Constituda de cadeias de peptidoglicano (murena), um heteropolissacardeo dos acares Nacetilglicosamina (NAM) e Nacetilgalactosamina (NAG) A rigidez da estrutura decorre do intertravamento entre polmeros de peptidoglicano atravs de cadeias tetrapeptdeos A camada de peptidoglicano de bactrias formada por uma nica molcula!

Peptidoglicano: Intertravamento entre cadeias por ligaes peptdicas cruzadas Bactrias GramConexo direta entre cadeias de tetrapeptdeos de molculas adjacentes de peptidoglicano

Bactrias Gram+
Conexo entre cadeias de tetrapeptdeos de molculas adjacentes de peptidoglicano ocorrer atravs de pontes interpeptdicas de poliglicina

Paredes de clulas Gram+

As paredes de clulas Gram+ possuem polmeros formados pela conexo de molculas do acar ribitol atravs de pontes de fosfato, os cidos teicicos, que atravessam toda a parede. Os grupos hidroxila das molculas de ribitol so ligados a aminocidos ou acares. Quando no ligados a molculas de peptidoglicano por ligaes covalentes, os cidos teicicos ficam conectados a lipdios da membrana citoplasmtica (cidos lipoteicicos).

cido teicico

Lisozima
A lisozima uma enzima encontrada freqentemente em secrees de animais, que quebra as ligaes glicosdicas entre as molculas NAM e NAG do peptidoglicano de bactrias Gram+. Dependendo da concentrao de sal do ambiente no qual ocorre a ao da lisozima, a clula pode lisar ou formar um protoplasto, que uma estrutura formada pelo citoplasma e a membrana citoplasmtica.

Algumas bactrias no possuem parede: Micoplasma e Thermoplasma

Paredes celulares de Archea

Organismos do filo Archea no possuem paredes celulares compostas de peptidoglicano. A diversidade de materiais empregados nas paredes deste grupo muito grande e inclui: Pseudopeptidoglicano: polmero composto de NAG e cido Nacetiltalosaminurnico, reforado por ligaes peptdicas (algumas espcies) Polissachardeos espessos (Methanosarcina)
Polissachardeos espessos com grande nmero de grupos sulfato (Arqueas halfilas, Halococcus) Camadas S como parede celular (amplamente distribuda por todos os subgrupos do filo Archea)

Camadas S
Arranjos bidimensionais de protenas ou glicoprotenas altamente regulares com simetria hexagonal, tetragonal ou trimrica, localizadas na superfcie externa de bactrias e arqueas. Em bactrias Gram+, as protenas da camada S so conectadas ao peptidoglicano, enquanto que em bactrias Gram- estas camadas so conectadas com a membrana externa.

Thermoanaerobacter thermohydrosulfuricus

camada S de Bacillus sphaericus

Membrana Citoplasmtica de Eubactrias: Estrutura

Estrutura delgada que envolve o citoplasma; Formada principalmente por uma bicamada de fosfolpdeos; Contm protenas integrais com domnios hidrofbicos para ancoramento na membrana; Protenas perifricas so permanentemente associadas membrana, do lado do citoplasma ou do lado do periplasma (Gram-) ou do meioambiente (Gram+);

Fosfolipdeos: Principal Componente Estrutural das Membranas de Clulas

apolar

polar

Fosfolipdeos so molculas anfiflicas, ou seja, possuem uma extremidade polar e outra apolar.

Fosfolipdeos: Principal Componente Estrutural das Membranas de Clulas

gua cidos graxos excluem gua gua

Mobilidade de Fosfolipdeos na Membrana Rpida Muito lenta

Lipdios de Membranas de Arquias

Unidades de isopreno Difitanilgliceroltetrater:

Membranas de Arquias

Fosfolipdeos passantes na Membrana

Outros Lipdeos de Membranas

Colesterol: somente na membrana de eucariotos: 5% a 25% dos lipdeos de membranas, Reforo estrutural

Hopanides: assumem o papel do colesterol nas membranas de procariotos

Reforo da estrutura de membranas em bactrias que no possuem paredes Modulao da fluidez bidimensional nas membranas (reduo em temperaturas mais elevadas, aumento nas temperaturas mais baixas)

Membrana Citoplasmtica: Funo

Barreira altamente seletiva; Stio de regulao de acesso de compostos para a clula; Stio de regulao de eliminao de compostos para a clula; Gerao de energia metablica atravs do estabelecimento de um gradiente de concentrao de prtons Localizao de muitas enzimas metablicas.
Substncia gua Glicerol Triptofano Glicose Cloreto (Cl-) Potssio (K+) Sdio (Na+) Permeabilidade relativa 100 0,1 0,001 0,001 0,000001 0,0000001 0,00000001

Membrana pouco permevel para compostos polares e/ou com carga eltrica

Tipos de energia utilizados pela clula: 1. Energia potencial gradientes naturais de nutrientes Gradientes sintticos: H+, Na+, etc. 2. Energia metablica ATP 3. Eltrons NADH2 (produo de energia metablica na cadeia de transporte de eltrons) FADH2 (produo de energia metablica na cadeia de transporte de eltrons) NADPH2 (fornecimento de eltrons para reaes de xido-reduo)

Membrana Citoplasmtica: Gerao de Energia

www.genome.ad.jp

Membrana Citoplasmtica: Transporte Transporte

mediado

No-mediado: Difuso simples

Ativo: Uniport Symport Antiport Translocao em grupo

Passivo: Difuso facilitada

Transporte no mediado (Difuso simples) Ocorre ao longo de um gradiente de concentrao, no requer energia externa. Ocorre sempre em direo do gradiente de concentrao. No permite acumulao de substncia no interior da clula: Compostos transportados por este mecanismo: gua, nutrientes gasosos (O2, CO2, CH4, etc.), poluentes hidrofbicos (benzeno, PCB, etc.) Transporte mediado Depende de um componente estrutural nas membranas externa ou citoplasmtica (porinas) Transporte mediado passivo (Difuso facilitada) Transporte de soluto de ambiente de alta concentrao para ambiente de baixa concentrao. Depende de estruturas na membrana celular que permitam a passagem do nutriente (glicerol, por exemplo). No necessita de fonte de energia metablica. No permite acumulao de componente transportado no interior da clula.

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Transporte mediado ativo Permite concentrar solutos no interior da clula em fatores de at 1000x a sua concentrao no meio-ambiente. Depende de uma fonte de energia metablica, pois ocorre contra um gradiente de concentrao Exterior

Interior Uniportador Antiportador Simportador

Uniport Fonte de energia: freqentemente ATP Substncias transportadas: aminocidos, peptdeos, alguns acares, cidos orgnicos, nions e ctions inorgnicos Symport Fonte de energia: Gradientes de H+ ou Na+ Substncias transportadas: Gradiente de H+: lactose, K+; Gradiente de Na+: glutamato. Antiport Fonte de energia: Gradientes de H+ Substncias transportadas: Transporte de Na+ de dentro para fora da clula, sistemas de detoxificao.

Classes de Sistemas de Transporte

Transporte simples

Translocao de grupo

Sistema ABC (ATP binding cassete)

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Sistemas de transporte de carboidratos em bactrias

Sistema Propriedades cinticas Km Vmax
>10mM 0,1-10mM 1000 250

Funo

Porina Facilitador Symport (H+)

Transporte atravs da membrana externa de organismos GramAltas concentraes de substratos, crescimento rpido concentraes mdias de substratos, crescimento aerbio em ambientes neutros ou cidos, crescimento rpido concentraes mdias de substratos, crescimento em ambientes anerbios ou alcalinos, crescimento rpido transporte de precursor ativa excreo de produto, detoxificao concentraes baixas de substratos. Crescimento aerbio, crescimento entre lento a rpido concentraes baixas de substratos, crescimento anaerbio, crescimento entre lento a rpido

Symport (Na+)

0,1-10mM

100

Antiport (precursores/ produtos)

0,1-10mM

130 10-50

Sistemas dependentes de 0,1-10M receptores Translocao de grupo (Fosfotransferase) 0,1-10M

10-50

Sistemas de transporte na Membrana Externa de Organismos Gram-: Porinas

A membrana externa permevel para molculas pequenas (oligossacardeos ou oligoprotenas com at 7 monmeros, ons, monmeros, mas totalmente impermevel para molculas grandes (protenas, polisacardeos, ligninas, etc.); Estas molculas atravessam a membrana externa por canais denominados porinas; As porinas podem ser especficas (seletivas para certos compostos) ou no-seletivas (maioria).

Flagelo
Mecanismos de movimento ativo de microrganismos: Flagelos Movimento rpido (at 60 comprimentos de bactria por segundo) Movimento aleatrio ou direcionado (movimentao ao longo de gradientes qumicos ou fsicos taxias) Energia fornecida pela fora prton-motiva (cerca de 1000H+/rotao) Deslizamento Movimentao que ocorre em contato com superfcie Muito mais lenta do que movimentao flagelar (10m/s) Vesculas de gs Permitem o deslocamento vertical de organismos em colunas de gua Movimentao no-ativa de microrganismos: Movimento Browniano

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Flagelo

peritrquio

lofotrquio

polar

Membrana externa de bactrias Gram-negativas

Membranas assimtricas Lipopolissacardeos na camada externa; Porinas atravessam esta membrana; Conectada parede celular; Barreira de proteo.

Protena

Porina

LPS

Membrana externa

Fosfolipdeos

Membrana externa de bactrias Gram-negativas: Lipopolisacardeos (Endotoxina)

Principal molcula da camada externa da membrana externa de bactrias Gram-; Constitudos de trs segmentos: lipdio A, polissacardeo interno e polissacardeo O-especfico; Lipdio A: ancoramento do LPS na membrana LPS a principal causa de reaes inflamatrias causadas por bactrias.

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Membranas Internas em Procariotos

Em alguns procariotos ocorre a formao de camadas internas na clula. Estas camadas, porm, no constituem organelas, pois as membranas permanecem ligadas membrana citoplasmtica. aumento da rea de membrana/volume de clula, aumentando a concentrao de protenas e enzimas localizadas na membrana; Em algumas bactrias fotossintticas estas invaginaes podem se desprender da membrana externa, formando ticalides.

Nitrosococcus

Nitrobacter

Organismo fotosintetizante

Espao Periplasmtico
o espao entre as membranas citoplasmtica e externa em organismos Gram-; A parede celular destas bactrias est localizada neste espao; Este espao contm grande variedade de protenas hidrolticas para degradao de polmeros transportados atravs das porinas, protenas para a biodegradao de compostos txicos, protenas que se ligam de maneira especfica a substncias que sero transportadas atravs da membrana interna e enimas para a sntese de peptidoglicano.

Citoplasma

Soluo concentrada de protenas, cidos nucleicos, monmeros e ons, dissolvidos em gua

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Nucleide

Zona onde se concentra o DNA genmico de procariotos

Vesculas de gs
Vesculas so formadas por uma membrana composta por duas protenas, uma hidrofbica, que repele gua e permite a passagem de gs, e uma segunda de reforo mecnico. Tamanho e nmero de vesculas de gs variam muito entre clulas.

Vesculas de gs

Fmbrias e Pili
Estruturas similares aos flagelos, mas sem envolvimento na locomoo celular. Fmbrias: consideravelmente mais curtas e mais numerosas do que flagelos: adeso, receptores. Pili: estruturalmente muito mais longos do que fmbrias: adeso, receptores, sexo.

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Estruturas de armazenamento interno na clula

Partculas geralmente envoltas por camada de lipdios Armazenamento de carbono (reservas de energia): Polihidroxialcanoatos (polmeros de cido poli- hidrxibutrico) bioplsticos Glicognio (polmeros de glicose) Polifosfatos Enxofre elementar Magnetossomos: partculas de magnetita (Fe3O4)

Magnetospirillum magnetotacticum

Ribossomos
Complexos formados de protenas ribossmicas e RNA ribossmico, onde ocorre a sntese de protenas a partir do RNA mensageiro.

Ribossomos

A sequncia de regies hipervariveis do RNA ribossmico 16S a base da taxonomia molecular de bactrias

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Endsporos
Estruturas metabolicamente inativas produzidas por alguns microrganismos no interior da clula com elevada resistncia trmica, qumica e a radiao.

Bacillus anthracis

Bacillus subtilis

Clostridium botulinum

Endsporos: Estrutura
Exosprio: envoltrio fino e delicado, composto por protenas; Capa: protenas especficas do esporo Crtex: peptidoglicano Protoplasto: parede celular, membrana citoplasmtica, citoplasma com elevada concentrao de pequenas protenas solveis de esporo (PPAS), nucleide em ambiente altamente desidratado. Todos os endsporos contm cido dipicolnico.

Endsporos: Formao

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Clulas de Eucariotos

Material para estudo: Captulo 4 Brock Captulos 14.1. a 14.5

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