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UNIVERSIDADE FEDERAL DE CAMPINA GRANDE CENTRO DE SADE E TECNOLOGIA RURAL CAMPUS DE PATOS-PB CURSO DE MEDICINA VETERINRIA

AVALIAO ENZIMTICA MUSCULAR EM EQINOS (Equus caballus, Linnaeus, 1758) EM TREINAMENTO PARA VAQUEJADA, SOB REPOUSO E POS - ATIVIDADE FSICA

MAX BRUNO MAGNO BACALHAO Graduando

PATOS - PB 2008

UNIVERSIDADE FEDERAL DE CAMPINA GRANDE CENTRO DE SADE E TECNOLOGIA RURAL CAMPUS DE PATOS-PB CURSO DE MEDICINA VETERINRIA

AVALIAO ENZIMTICA MUSCULAR EM EQINOS (Equus caballus, Linnaeus, 1758) EM TREINAMENTO PARA VAQUEJADA, SOB REPOUSO E POS - ATIVIDADE FSICA

Max Bruno Magno Bacalhao Graduando

Prof . MSc. Snia Maria de Lima Orientadora

Patologia e Clnica Mdica de Eqinos

Patos - PB
Setembro/ 2008

FICHA CATALOGADA NA BIBLIOTECA SETORIAL DO CAMPUS DE PATOS - UFCG

B116a 2008
Bacalhao, Max Bruno Magno. Avaliao enzimtica muscular em Eqinos (Equus caballus, Linnaeus, 1758) em treinamento para vaquejada, sob repouso e pos atividade fsica, Max Bruno Magno Bacalhao - Patos PB: CSTR/UFCG, 2008. 79p. Orientador (a): Snia Maria de Lima. Monografia (Graduao em Medicina Veterinria) Centro de Sade e Tecnologia Rural, Universidade Federal de Campina Grande. 1 Miologia Clnica Eqina. 2 Avaliao Enzimtica Muscular - Monografia . I Ttulo CDU: 616.74:636.1

UNIVERSIDADE FEDERAL DE CAMPINA GRANDE CENTRO DE SADE E TECNOLOGIA RURAL CAMPUS DE PATOS CURSO DE MEDICINA VETERINRIA

MAX BRUNO MAGNO BACALHAO Graduando

Monografia submetida ao Curso de Medicina Veterinria como requisito parcial para obteno do grau de Mdico Veterinrio.

APROVADO EM...... /...... /........

BANCA EXAMINADORA

___________________________________________ Prof. MSc. Snia Maria de Lima (Orientadora)

___________________________________________ MV. MSc. Josemar Marinho de Medeiros (Examinador)

___________________________________________ MSc. Francisco Roserlndio Boto Nogueira (Examinador)

DEDICATRIA...

Aos meus pais, Marcos e Ivete (in memoria), pela confiana compreenso, carinho e amor sem limite e, ao meu tio, Carlos Alberto Bacalhao, por acreditar que conseguiria passar e terminar meu curso.
Dedico!

MENSAGEM

O que a pessoa leva da vida a vida que se leva!. (Autor Desconhecido)

AGRADECIMENTOS...

Agradeo a DEUS, por ter me dado foras para persistir na luta por meus sonhos, quando eles pareciam to distantes de mim! Aos AMIGOS, Lucas Bastos (Caruaru), Jos Matias (Coxinha), Otvio Lamartine (Bolinha), Ar Venncio, Carlos Eduardo (Piruka), Rafael da Rocha, Fernando (Grosso), Flvio (Urso), Gabriela, Giuliana, Maiza, Luclia, Thiago Nery, Bruno Leite, Mateus (Pai) Rodolfo (Alemo), Francisco Heitor (Macaiba) e a rico (Salsicha), pelos momentos de companheirismo, dividindo as alegrias, as tristezas e as bombas; Aos AMIGOS conquistados em Patos, Xanxinha, Mand, Humberto, Dellayne, Bervan, Fernandinha, Bila, Catarina, Evelyn, Laninha, Michely, Cristina, Tayz e Camila, por terem me acolhido com tanto carinho nesta cidade que vai deixar muitas saudades; A SAYONARA, pelos momentos maravilhosos que passamos juntos e dedicao a mim; Aos AMIGOS do Laboratrio de Ing e de Patologia Clnica do Hospital Veterinrio do CSTR-UFCG, Dad, Valtenir, Elaine (Plim) e todos que l trabalham, por terem me cedido o laboratrio e o tempo, com o qual, passaram comigo centrifugando o material e fazendo as anlises bioqumicas;

Ao Centro de Treinamento Joames Bacalhau, por ter cedido os animais para que fosse realizado esse trabalho. E a todas as pessoas que l trabalham por terem me ajudado a fazer as coletas do material; A todos os PROFESSORES, pela vasta transmisso de conhecimentos, que se Deus permitir, possa pratic-los com sabedoria e preciso; A meu TIO, por acreditar que eu conseguiria, enquanto que outros afirmavam que no tinha futuro. Agradeo pelas mereciadas broncas, por ter cuidado da nossa famlia com tanta dedicao e carinho, por ser pra mim, no s um Tio, mas tambm um Pai. As PESSOAS que no acreditavam em mim, por me darem mas motivos para estudar e ficar mais forte, para enfrentar as dificuldades passada por todo esse curso e pela vida. A minhas tias e tios, Verinha, Ritinha, Paulinho, Valdete e todos que me deram fora e incentivo pra continuar e buscar ser algum na vida. A prof. Snia Maria de Lima, mais que uma orientadora, uma pessoa que me ajudou e deu muita fora durante o Curso. E por ter passado um grande conhecimento no apenas na rea da eqdeocultura e sim, em todos os ramos da Medicina Veterinria. A meu PAI, por ter acreditado e me dado fora nos momentos que pensei que no conseguisse, e pelos esforos que ele fez pra poder me manter em outra cidade e terminar meu curso. E em especial, a minha ME (in memoria),

por ter me dado a Luz, por ter ficado ao meu lado quando mais precisei, ter chorado por mim quando no acreditavam que eu iria conseguir, ter tido um dos seus maiores sonhos sendo realizado, e principalmente por ter existido...

TE AMO ME E NUNCA VOU TE ESQUECER!

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SUMRIO

LISTA DE TABELAS LISTA DE FIGURAS RESUMO ABSTRACT 1. INTRODUO 2. REVISO DE LITERATURA

2.1. Fundamentao geral 2.1.1. Generalidades: espcie eqina 2.1.2. Fundamentos anatmicos 2.1.3. Classificao muscular 2.1.4. Anatomia torcica 2.1.5. Anatomia plvica 2.1.6. Componentes da musculatura esqueltica 2.1.7. Fundamentos fisiolgicos

2.1.8. Fundamentos bioqumicos


2.2. Fundamentos especficos 2.2.1. Enzimologia 2.2.2. Aspectos patolgicos enzimticos correlatos ao manejo 3. MATERIAIS E MTODOS 3.1. Metodologia da execuo 3.1.1. Local da Pesquisa 3.1.2. Animais avaliados 3.1.3. Metodologia da execuo 3.1.4. Mecanismos de avaliao e acompanhamento 4. RESULTADOS E DISCUSSO 4.1. Determinaes enzimticas absolutas 4.2. Determinaes enzimticas relativas e absolutas 4.3. Determinaes enzimticas dos eqinos do Grupo I 4.4. Determinaes enzimticas dos eqinos do Grupo II 4.5. Determinaes enzimticas dos eqinos do Grupo III 4.6. Correlao entre os grupos de eqinos avaliados 5. CONCLUSO 6. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
7. Anexo

08 09 10 11 12 14 14 14 16 17 18 18 19 22 22 24 24 33 34 34 34 35 36 37 37 37 39 40 41 42 43 46 47 54

11 LISTA DE TABELAS

Tabela 1.

Valores mdios e intervalos limtrofes enzimticos sricos referenciados como parmetros normais de Creatina fosfoquinase (CPK), AspartatoAminotransferase (AST) e Lactato Desidrogenase (LDH) em eqinos. Valores mdios absolutos e desvio padro da determinao enzimtica srica da Creatina fosfoquinase (CPK), Aspartato Aminotransferase (AST) e Lactato Desidrogenase (LDH) dos animais avaliados, sob repouso e pos atividade fsica, registrados no Centro de Treinamento Joames Bacalhau, Ing-PB, no perodo de agosto setembro/ 2008.

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Tabela 2.

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Tabela 3.

Demonstrativo dos valores relativos por animal e mdios/ desvio padro absolutos da determinao enzimtica srica da Creatina fosfoquinase (CPK), Aspartato Aminotransferase (AST) e Lactato Desidrogenase (LDH) dos animais avaliados, sob repouso e pos - atividade fsica, a intervalos de 12 horas, registrados no Centro de Treinamento Joames Bacalhau, Ing-PB, no perodo de agosto setembro/ 2008. 39

Tabela 4.

Demonstrativo dos valores mdios e desvio padro da determinao enzimtica srica Creatina fosfoquinase (CPK), Aspartato Aminotransferase (AST) e Lactato Desidrogenase (LDH) dos eqinos do Grupo I, sob repouso e pos - atividade fsica, a intervalos de 12 horas, registrados no Centro de Treinamento Joames Bacalhau, Ing-PB, no perodo de agosto setembro/ 2008. 40

Tabela 5.

Demonstrativo dos valores mdios e desvio padro da determinao enzimtica srica Creatina fosfoquinase (CPK), Aspartato Aminotransferase (AST) e Lactato Desidrogenase (LDH) dos animais do Grupo II, sob repouso e pos - atividade fsica, a intervalos de 12 horas, registrados no Centro de Treinamento Joames Bacalhau, Ing-PB, no perodo de agosto setembro/ 2008. 42

Tabela 6.

Demonstrativo dos valores mdios e desvio padro da determinao enzimtica srica da Creatina fosfoquinase (CPK), Aspartato 42

Aminotransferase (AST) e Lactato Desidrogenase (LDH) dos animais do Grupo III, sob repouso e pos - atividade fsica, a intervalos de 12 horas, registrados no Centro de Treinamento Joames Bacalhau, Ing-PB, no perodo de agosto setembro/ 2008. Tabela 7. Correlao entre os valores mdios e desvio padro da determinao enzimtica srica da Creatina quinase (CK), Aspartato Aminotransferase (AST) e Lactato Desidrogenase (LDH) sricas, dos animais dos Grupo I, II, III, sob repouso e pos - atividade fsica, a intervalos de 12 horas, registrados no Centro de Treinamento Joames Bacalhau, Ing-PB, no perodo de agosto setembro/ 2008.

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12 LISTA DE FIGURAS Figura 1. Ilustrao esquemtica da musculatura esqueltica do eqino (Equus caballus, LINNAEUS, 1758). Fonte: Dyce, 1996 Ilustrao esquemtica da musculatura esqueltica torcica e plvica do eqino (Equus caballus, LINNAEUS, 1758). Fonte: Dyce, 1996. Ilustrao esquemtica da diviso da fibra muscular. Fonte: Cristina Pinto - CCB/ UFSC. 2008.] Ilustrao do Sistema Sarcotubular. Fonte: Cristina Pinto - CCB/ UFSC. 2008. Ilustrao da juno neuromuscular e sua ao. Fonte: Cristina Pinto - CCB/ UFSC. 2008. Esquema representativo dos filamentos de actina, tropomiosina, troponina (A) e miosina (B). Fonte: Cristina Pinto - CCB/ UFSC. 2008. Vista panormica Centro de Treinamento Joames Bacalhau, Municpio de Ing-PB (A); Aspecto parcial dos boxes de baias individuais (B). Fonte: Arquivo Pessoal Eqinos da raa Quarto de Milha avaliados nos Centro de Treinamento Joames Bacalhau Municpio de Ing-PB. Agosto/2008. Fonte: Arquivo Pessoal ] Coleta das amostras sangneas Centro de Treinamento Joames Bacalhau-Municpio de Ing-PB. Fonte: Arquivo Pessoal Laboratrio de Analises Clnicas do Municpio de Ing-PB. Fonte: Arquivo Pessoal Amostras sangneas de eqinos coaguladas Fonte: Arquivo Pessoal Analisador Bioqumico - Bioplus 2000/ Laboratrio de Patologia Clnica do Hospital Veterinrio/CSTR /UFCG,Patos/PB. Fonte: Arquivo Pessoal 17

Figura 2.

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Figura 3.

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Figura 4.

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Figura 5.

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Figura 6.

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Figura 7.

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Figura 8.

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Figura 9.

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Figura 10.

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Figura 11.

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Figura 12.

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RESUMO
BACALHAO, M. B. M. AVALIAO ENZIMTICA MUSCULAR EM EQINOS (Equus caballus, Linnaeus, 1758) EM TREINAMENTO DE VAQUEJADA, SOB REPOUSO E POS - ATIVIDADE FSICA. Patos, UFCG, 56p. (Trabalho de Concluso de Curso em Medicina Veterinria, Patologia e Clnica Mdica de Eqinos). Estudo realizado no Centro de Treinamento Joames Bacalhau, Municpio de Ing-PB e no Laboratrio de Patologia Clnica do Hospital Veterinrio/ CSTR /UFCG, Patos PB, no perodo de agosto a setembro/ 2008, objetivando-se avaliar a atividade srico-enzimtica muscular de eqinos utilizados em vaquejadas, sob condio de repouso e pos - atividade fsica. Foram utilizados dez eqinos em faixa etria de dois a 13 anos de idade, da raa Quarto de Milha e mestiagens, sob sistema de criao semi-intensivo, dieta alimentar base de forragem, constituda de pastagem nativa e gramnea - Brachiara spp e capim grama (Cynodon spp) e, ofertas de concentrado industrial peletizado, de acordo com o regime de preparao. A experimentao foi realizada com delineamento inteiramente casualizado, em etapas pr-experimental e definitiva, segundo agrupamentos dos eqinos, constitudos de acordo com a etapa preparatria dos treinamentos dirios. As amostras sangneas para as dosagens bioqumicas, coletadas a intervalos de 12 horas e, mensuradas as taxas sricas enzimticas atravs de kits comerciais (LABTEST), em Analisador semiautomtico - Bioplus 2000. Verificando-se sob condio de repouso, valores mdios e desvio padro de Creatina fosfoquinase (CPK), Aspartato aminotransferase (AST), Lactato desidrogenase (LDH), respectivamente, de 267.50 U/L 45.14, 164.75 U/L 111.23 e 609.50 U/L 216.18; enquanto que, as verificaes de CPK (489.2 U/L 180.47), AST (190.1 U/L 168.28) e de LDH (814.85 U/L 215.77) registradas pos - atividades fsicas foram marcadamente superiores. Conclui-se que os valores srico-enzimticos musculares de eqinos utilizados em vaquejada so mais elevados em contingncias preponderantes pos - atividade fsica, com marcante interao entre dieta alimentar e atividade fsica intensa.

Palavras-chave: eqinos, miopatias, srico-enzimticas, enzimas.

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ABSTRACT AVALIATION ENZYMATIC MUSCULAR IN HORSES (Equus caballus, Linnaeus, 1758) IN REST AND POS - PHYSICAL ACTIVITY. Patos, UFCG, 55p. (Work Completion of Course in Veterinary Medicine, Pathology and Clinical Medicine of Horses). A study conducted at Training Center Joames Bacalhau, Ing-PB and the Laboratory of Clinical Pathology of the Veterinary Hospital / CSTR / UFCG, Patos - PB, from August to September / 2008, to determine the serum-enzyme activity of muscular horses used in vaquejadas on the condition of rest and groups - physical activity. Were used tem horses in age from two to 13 years old, race of Fourth Mile and Mestiagens, under system of creating semi-intensive, diet based on forage, consisting of native grassland and grassy Brachiara spp and Grass (Cynodon spp) and, offers of concentrated industrial pelleting, in accordance with the rules of preparation. The experiment was done with randomized design in pre-trial stages and final, the second group of horses, constituted under the preparatory stage of training daily. The blood samples for biochemical measurement, collected at intervals of twelve hours and measured the rates of serum enzyme through commercial kits (LABTEST), in Analyzer semi-automatic - Bioplus 2000. It suffers from the condition of rest, mean values and standard deviation of Creatine phosphokinase (CPK), Aspartate aminotransferase (AST), Lactate dehydrogenase (LDH), respectively, of 267.50 U/L 45.14, 164.75 U/L 111.23 and 609.50 U/L 216.18; while, the findings of CPK (489.2 U/L 180.47), AST (190.1 U/L 168.28)and of LDH (814.85 U/L 215.77) registered pos - physical activities were markedly higher. It follows that the values of serum muscle enzyme-horses used in vaquejada are higher in contingencies predominant groups physical activity, with significant interaction between diet and intense physical activity.

Key words: horses, myopathy, serum-enzyme, enzymes.

15 1. INTRODUO

O exerccio da medicina esportiva eqina requer no apenas capacitao especfica, assim como, vastos conhecimentos pertinentes a morfo-fisiologia e particularidades inerentes aos diferentes sistemas orgnicos, fundamentais a explorao e o desempenho das potencialidades atlticas dessa espcie, especialmente, quanto integridade do aparelho locomotor. Neste contexto, deve ser considerada a similaridade de sinais clnicos em distintas afeces musculares, por conseguinte inespecficos e, portanto, quando isolados, representa limitado valor diagnstico, o que demanda na necessidade de exames complementares. A eqinocultura praticada no Brasil assumiu patamares que repercutem de forma preponderante nos trabalhos de trao, esporte, produo de carne, entre outros. Adquirindo essa relevncia, mediante a adoo de prticas desportivas em todas as regies, especialmente, as vaquejadas no nordeste brasileiro e as prticas de rodeios nas regies sul e sudeste do pas (ABIDU, 1995). Alteraes da funo muscular podem ser verificadas atravs da aferio da atividade srica da Creatinafosfoquinase (CPK), Aspartato Aminotransferase (AST) e da Lactatodesidrogenase (LDH). Essa avaliao possibilita um perfil, na maioria das vezes, confivel da condio funcional muscular quanto diminuio ou queda do desempenho durante treinamento ou competio e, especialmente, concernente a miopatia (GARCIA, 2000; GARCIA-NAVARRO, 2005). Neste contexto, considera-se que eqinos de vaquejada so extremamente exigidos, realizando esforo fsico de alta intensidade e de curta durao em rpidas largadas, com mudanas de direo e paradas abruptas, alm de exigir elevada fora fsica durante a derrubada do boi comum, participando geralmente de vrias provas em uma mesma competio, todos os fins de semana (XAVIER, 2002). Estando essas exigncias comumente associadas a esforo muscular intenso, conforme freqentemente ocorre em animais utilizados em esporte ou trao, com grande demanda para utilizao de fontes de energia, exigindo metabolismo anaerbico (LEAL et al., 2006). Constitui-se preponderante o conhecimento mdico de parmetros de normalidade em eqinos explorados para prticas eqestres, sobretudo o discernimento precoce de

16 alteraes musculares que impliquem em danos irreversveis. Por conseguinte, visando atualizao de informaes pertinentes ao tema exposto, foi delineado o tema, formulado o problema e fundamentado atravs de prvia definio e identificao dos objetivos e variveis, para a posterior coleta de dados, conforme estabelece Cervo (2002). Portanto, objetivou-se com a realizao do trabalho, avaliar a atividade sricoenzimtica muscular de eqinos utilizados em vaquejadas, sob condio de repouso e pos atividade fsica, tendo em vistas, analisar os efeitos do incremento metablico muscular em parmetros habituais e correlatos a esforo fsico exaustivo. Por conseguinte, estabelecer o perfil enzimtico e identificar variveis pertinentes de interao entre o desempenho e demanda srica, como respaldo elucidativo para intervenes clnicas promissoras.

17 2. REVISO DE LITERATURA

2.1. Fundamentao geral 2.1.1. Generalidades: espcie eqina Taxonomia (DE CICCO, 2008) Filo: Chordata; Classe: Mammalia; Ordem: Perissiodactyla; Sub-Ordem: Hippoidea; Famlia: Equidae; Gnero: Equus; Nome Cientfico: Equus caballus; Nome Comum: cavalo domstico

Apesar dos eqinos pertencerem a uma mesma espcie (Equus caballus), com a interveno do homem ocorreu modificao dos caracteres raciais, tendo em vistas, a sua utilizao e beleza. Existindo na atualidade, mais de 100 diferentes raas eqinas em todo o mundo. Para tanto, se faz necessrio o adestramento, seguido da doma, para que se possa montar. Histrico (DE CICCO, 2008)

Na maior parte da idade glacial, o Equus passou das Amricas para a Europa e para a sia. O processo chegou ao fim h cerca de 10 mil anos, quando o cavalo desapareceu do continente americano. Quatro cavalos primitivos se desenvolveram na sia e na Europa, influenciados pelo meio em que viviam. Na sia, o Cavalo das Estepes, Equus przehevalski, hoje, conhecido como Cavalo Selvagem da sia ou Cavalo de Przehevalski, que pode ser considerada uma subespcie do atual cavalo domstico; mais para ao oeste apareceu o Tarpan, um cavalo com ossatura mais fina e membros mais afilados que os da estepes; e, ao norte da Europa, surgiu o Cavalo das Florestas ou Diluvial, pesado e vagoroso. No noroeste da Sibria h evidncia de outro primitivo, o Cavalo da Tundra. Acredita-se que o eqino foi domesticado h mais de cinco mil anos, no Perodo Neoltico ou da Idade da Pedra Polida; seus vestgios foram encontrados (ossadas, gravuras e pinturas rupestres) nas grutas de Lascaux, de Madaleine e de Altamira.

18 Em 1967, encontrou-se um esqueleto numa rocha da poca Eocena, no sul dos Estados Unidos, referente ao Eohippus, que tinha o tamanho aproximado de uma raposa, com quatro dedos nos ps torcicos e trs nos plvicos. A partir do qual, o desenvolvimento dos eqinos pode ser traado por um perodo de 60 milhes de anos, at surgir, h cerca de um milho de anos, o Equus caballus. O Cavalo no Brasil A introduo do eqino na Amrica atribuda ao navegador Cristvo Colombo, em sua segunda viagem em 1493, realizada ilha de So Domingos. Sendo introduzido no Brasil em 1534, na capitania de So Vicente, por D. Ana Pimentel, esposa de Martim Affonso de Souza (DE CICCO, 2008). A importncia dos eqinos para o desenvolvimento do pas pode ser notada desde os tempos do Brasil - Colnia, quando permeou por todos os ciclos extrativistas, agrcolas e de minerao. Em seguida, participou das incurses do homem no interior do territrio brasileiro, serviu como aparato armamentista para o exrcito e utilizado em diversas outras funes. Possuindo o terceiro maior rebanho eqino do mundo, com 5,9 milhes de eqinos, inferior apenas ao do China e Mxico, o que propicia uma movimentao de R$ 7,5 bilhes por ano, gerando 3,2 milhes de empregos diretos e indiretos (PIO GUERRA, 2005). Esses animais so utilizados no trabalho rural, lazer, turismo, esportes e outras prticas como na equoterapia. Como meio de transporte, sempre merece destaque especial, uma vez que, o sculo XXI o primeiro da histria em que o eqino no o principal meio de transporte do homem. (SIMEQUI, 2007; DE CICCO, 2008).

Importncia da explorao eqina: modalidades desportivas, lazer, trabalho e terapia (SIMEQUI, 2007) O esporte eqestre est difundido no Brasil h longa data, constituindo-se as prticas de corrida uma importante atividade econmica, participando da pauta de exportaes de diversos pases da Europa, Amrica do Sul e Amrica do Norte. Bem como, de grande interesse econmico no Brasil, tornando-se um poderoso mercado de trabalho, uma vez que, milhares de pessoas dependem direta ou indiretamente dessa atividade.

19 No mbito militar - Exrcito Brasileiro e Polcia Militar - a criao de eqinos destinada fora terrestre para emprego em cerimonial militar, patrulhamento, instruo e desporto. Utilizado como apoio s diferentes atividades agropecurias, especialmente na lida do gado bovino. No obstante a importncia do eqino quanto explorao no trabalho, existe uma tendncia crescente da participao em modalidades de lazer, indicada pelo nmero de eventos esportivos. O espao rural permite o desenvolvimento de diversas atividades como turismo cultural, ecolgico, rural e turismo esportivo, dentre outras. Atualmente as atividades de turismo rural no Brasil esto concentradas nas regies Sul e Sudeste, devido a forte influncia do tropeirismo. Somando-se a essas demandas da eqinocultura, observa-se a utilizao desses animais na equoterapia, um mtodo teraputico e educacional que utiliza o eqino dentro de uma abordagem interdisciplinar, nas reas de Sade, Educao e Equitao, buscando o desenvolvimento biopsico-social de pessoas portadoras de deficincia e/ou de necessidades especiais. Segundo Wickert (1999), na realizao da prtica equoterpica, o eqino imprescindvel atuando como agente de educao e reabilitao, apesar de ter um grande porte e portar grande fora, muito dcil, deixa-se manusear e montar, portanto, estabelecendo vnculo afetuoso. Dado a caracterstica dos movimentos, pode-se dizer que o eqino age como um instrumento cinesio-teraputico (terapia atravs do movimento). Todas essas funes so decorrentes de um aporte anatmico e fisiolgico da musculatura bem estruturada e desenvolvida do eqino, promovendo-o como de melhor

desenvolvimento corpreo dentre os animais domsticos.

2.1.2. Fundamentos anatmicos

A descrio anatmica de um msculo esqueltico algumas vezes refere-se a sua origem e insero, sendo a origem a extremidades pouco mvel e a insero a extremidade mais mvel. A contrao de um msculo esqueltico faz a origem e a insero aproximarem-se e, quando os ancoramentos envolvem dois ossos ou ambos movimentam-

20 se. As adaptaes na musculatura esqueltica ocorrem a nveis macroscpico, microscpico e bioqumico, durante e aps um perodo de exerccio. A musculatura esqueltica constitui 52% do peso corpreo total no Puro-Sangue, comparada com 42% em outros cavalos (DUKES, 1993; REECE, 1996).

FIGURA 1. Ilustrao esquemtica da musculatura esqueltica do eqino (Equus caballus, LINNAEUS, 1758). Fonte: Dyce, 1996

2.1.3. Classificao muscular (GETTY, 1986; DYCE, 1996; REECE, 1996). Musculatura Lisa Leva este nome devido ausncia de estrias visveis. As clulas individuais tm forma de fuso e o ncleo est localizado ao centro. So regulados pelo sistema nervoso autnomo e esto localizados em estruturas viscerais que requerem movimentos de natureza automtica. Musculatura Cardaca Somente encontrada no corao. controlada pelo sistema nervoso autnomo,com a musculatura lisa. Ao contrrio dessa, entretanto, ao exame microscpio, a musculatura cardaca apresenta estrias caracterizadas por bandas alternadas claras e escuras. Musculatura Esqueltica So classificadas em trs tipos: (1) vermelhas ou escuras (Tipo I), (2) brancas ou plidas (Tipo II) e (3) intermedirias (Tipo III), com caractersticas intermedirias entre as vermelhas e brancas. Todos os msculos so provavelmente uma mistura dos trs tipos, porm, em alguns animais predomina um dos tipos. As fibras musculares vermelhas normalmente contraem-se mais lentamente e levam mais tempo para chegar fadiga que as fibras brancas. As fibras do tipo II podem ser subdivididas em seguida em subtipos IIA, IIB e IIC. O tipo IIA, representa fibras mais oxidativas, ao passo que o tipo IIB mais glicoltico e o tipo IIC parece ser intermedirio em capacidade oxidativa e glicoltica.

21 As diferenas na composio das fibras de msculos dos membros podem ser vistas entre raas de ambas as espcies. Essas diferenas esto relacionadas s caractersticas de desempenho, para as quais a raa em questo foi selecionada. No cavalo, essa diferena mais evidente no msculo glteo mdio, um dos maiores e mais importantes msculos para a produo de fora propulsora. Existindo variaes na rea das fibras e na capacidade oxidativa intra e inter racial. Os cavalos de resistncia apresentam porcentagens mais altas de fibras do tipo I e IIA e porcentagens mais baixas de fibras do tipo IIB em seus msculos glteos mdios que os competidores comuns.

2.1.4. Anatomia torcica

Os membros do eqino apresentam adaptaes extremas corrida rpida, com uma concomitante perda da versatilidade. Independentemente do fato de que a funo quase exclusiva tanto dos membros torcicos (Figura 2 A) quanto dos plvicos sustentar o corpo em repouso ou desloc-lo para frente quando em movimento, observa-se uma diviso significativa do trabalho entre eles. So os membros torcicos que suportam a maior parte do peso (55 a 60% do corpo em repouso), servem de amortecedores principais, necessrios nos passos mais rpidos e especialmente nos pousos dos saltos. Todavia, a distribuio da diviso de carga que suportada por cada membro poder modificar-se pela variao da postura, para alterar o centro de gravidade (GETTY, 1986; DYCE, 1996).

2.1.5. Anatomia plvica

Embora os membros plvicos (Figura 2 B) sustentem apenas pouco mais de 40% do peso do corpo, sem dvida, fornecem a maior parte do impulso para frente durante locomoo. O impulso transmitido pelas articulaes coxo-femural e sacro-ilaca, intrinsecamente mais estveis que o ombro e a sinsarcose escapulo-torcica, as articulaes correspondentes do membro torcico. A articulao sacro-ilaca fornecida por ligamentos firmes, tanto ela quanto a articulao coxo-femural so bem suportadas pelos msculos da garupa e da coxa. Estes msculos so particularmente macios no

22 eqino, em que arredondam os contornos de maneira distinta. Em conseqncia, mais difcil apreciar as caractersticas e a orientao da pelve nesta espcie que em outras domsticas. Os membros plvicos esto menos comprometidos com as tarefas da execuo do passo rpido e especialmente nos pousos dos saltos (GETTY, 1986; DYCE, 1996).

FIGURA 2 (A/B). Ilustrao esquemtica da musculatura esqueltica torcica e plvica do eqino (Equus caballus, LINNAEUS,1758). Fonte: Dyce, 1996

2.1.6. Componentes da musculatura esqueltica (GETTY, 1986; DYCE, 1996; REECE, 1996). Os componentes das fibras musculares esquelticas so compostos de elementos de tecido conjuntivo (epimsio, perimsio e endomsio) que so contnuos, desde a fibra muscular individual at o tecido conjuntivo da estrutura em que o msculo se liga e na qual exerce sua trao quando se contrai. Freqentemente o tecido conjuntivo da estrutura qual est ligado, um tendo. Uma bainha de tecido conjuntivo frouxo que efetua uma trao similar chama-se aponeurose. Microestrutura muscular esqueltica

Uma fibra muscular varia consideravelmente em comprimento e freqentemente to longa quanto o msculo do qual faz parte. Dependendo do dimetro da fibra muscular, cada uma pode conter de vrias centenas a milhares de miofibrilas, constitudas de estrias ou bandas.

23 Diviso da Fibra Muscular A diviso das miofibrilas em unidades repetidas chamada de sarcmeros. Os sarcmeros contm os miofilamentos proticos, actina e miosina, que pelo seu arranjo do origem s estrias. evidente que os sarcmeros de uma miofibrila estejam em alinhamento com os sarcmeros de todas as outras miofibrilas da fibra muscular (Figura 3). A linha Z est localizada em cada extremidade de um sarcmero e dos seus adjacentes. Projetando-se destes, os filamentos de actina de cada extremidade dos sarcmeros em direo ao seu centro. A actina de dois sarcmeros comuns mesma linha Z compreende a uma banda I. Os filamentos de miosina esto localizados ao centro, dentro de um sarcmero e, emparelhados com a superposio de filamentos de actina; produzem a banda escura (banda A) das estrias caractersticas. Os filamentos de actina e miosina tm um arranjo especial regular em relao ao outro, que tem uma razo de 2:1 de actina para miosina. Uma seco longitudinal dos miofilamentos arranjados, apresenta ligaes cruzadas estendendo-se dos filamentos de miosina em direo aos de actina. Durante o encurtamento das fibras musculares, os filamentos de actina parecem deslizar profundamente por entre os de miosina.

FIGURA 3. Ilustrao esquemtica da diviso da fibra muscular. Fonte: Cristina Pinto - CCB/ UFSC. 2008.

Sistema Sarcotubular (REECE, 1996) As fibras musculares esquelticas contm uma rede de tbulos conhecida como sistema sarcotubular (Figura 4). Esses tbulos esto localizados dentro das fibras musculares, mas externamente s miofibrilas. O sistema sarcotubular composto por dois compartimentos separados, cada um apresentando um arranjo diferente entre as miofibrilas. Os tbulos que esto arranjados paralelamente s miofibrilas so conhecidos como retculo

24 sarcoplasmtico. Os que esto arranjados transversalmente s miofibrilas so conhecidos como tbulos T. Os tbulos T extendem-se transversalmente de um lado a outro da fibra. Eles se abem para o exterior da fibra e, portanto, contm fluido extracelular. As aberturas dos tbulos T esto colocadas em espaos regulares ao longo do comprimento da fibra muscular devido sua orientao para cada sarcmero. Da mesma forma, suas aberturas esto regularmente espaadas ao longo da circunferncia da fibra, de forma que todas as miofibrilas sejam intimamente servidas pelo sistema sarcotubular.

FIGURA 4. Ilustrao do Sistema Sarcotubular. Fonte: Cristina Pinto/ CCB-UFSC. 2008.

Juno Neuromuscular (REECE, 1996) Cada fibra muscular esqueltica inervada por uma rea especializada, conhecida com juno neuromuscular. Essa uma ntima associao do ramo terminal de uma fibra nervosa fibra muscular. A terminao da fibra nervosa no contnua fibra muscular h um espao entre a juno neuromuscular e a fibra. Esse espao est localizado ao centro da superfcie da fibra muscular (Figura 5). A fibra nervosa pode ter um nmero de ramos terminais, com cada um dirigindo-se a uma fibra muscular separada. Uma unidade motora consiste de uma fibra nervosa e a fibra muscular que ela inerva.

FIGURA 5. Ilustrao da juno neuromuscular e sua ao. Fonte: Cristina Pinto/ CCB-UFSC. 2008.

25 2.1.7. Fundamentos fisiolgicos (DUKES, 1993; REECE, 1996). Fisiologia da contrao muscular

Mediante a capacidade contrtil muscular ocorre mobilidade ou movimentao de partes e contedos corpreos ou fornecem resistncia a diferentes componentes. Dessa forma, a clula muscular pode ser arranjada em lminas, lminas enroladas em tubos, feixes, esfncteres e cones ou manter-se como clulas ou agrupamentos discretos para aes mais precisas ou menos foradas. Os movimentos do esqueleto, alteraes no aporte de sangue para todas as partes do corpo, transporte de ingesta atravs do trato intestinal, gerao de calor para o aquecimento do corpo e circulao do sangue so exemplos das funes dos msculos. Devido a essas diversas funes orgnicas, e devido ao considervel trabalho requerido para desempenhlas, no surpresa que 45 a 50% do peso corpreo seja representado por componentes do sistema muscular. Na contrao muscular somente cerca de 25% eficiente em relao ao total do trabalho, a poro que no produz dissipada como calor, sendo essa fonte importante para manuteno da temperatura corprea. Cujo esfriamento, resulta em calafrios, como tentativas do corpo em gerar calor pela contrao muscular. O encurtamento ou processo de contrao envolve uma interao entre os filamentos de actina e miosina. H uma atrao natural entre as molculas de actina e miosina envolvendo stios ativos na molcula de actina. A atrao inibida durante o relaxamento porque os stios ativos so encobertos, mas, quando os ons clcio penetram nas miofibrilas, estes stios so descobertos. As projees das molculas de miosina ligamse aos stios ativos e inclinam-se em direo ao centro, causando o deslizamento da actina em direo ao centro molecular da miosina.

2.1.8. Fundamentos bioqumicos (REECE, 1996)

A energia imediata para a contrao muscular derivada do Trifosfato de Adenosina (ATP), formando Difosfato de Adenosina (ADP) + Pi. A quantidade de ATP na

26 fibra muscular limitada e a refosforilao do ADP deve ocorrer para que a contrao possa continuar. Isso conseguido pela transferncia da creatinina fosfatase (CPK), que cerca de cinco vezes mais abundante que o ATP. Sendo necessria a presena deste, para o relaxamento ou desligamento da miosina e da actina, bem como, para o retorno dos ons de clcio para o retculo sarcoplasmtico. O ADP formado pela hidrlise do ATP e como resultado, a energia utilizada pela elevao das cabeas das pontes transversais da molcula de miosina. O filamento de actina tem trs componentes maiores (todos proticos) actina, tropomiosina e troponina (Figura 6). A actina e tropomiosina esto arranjadas em padro helicoidais entrelaados um ao outro. A troponina est localizada a intervalos regulares ao longo do padro, contendo trs protenas, duas das quais mantm a actina e tropomiosina juntas e a terceira apresenta afinidade aos ons clcio. Os stios ativos esto localizados na hlice da actina e normalmente cobertos pela hlice da tropomiosina. Quando os ons de clcio se ligam ao complexo troponina, acredita-se que ocorra uma alterao conformacional entre as hlices de actina e a tropomiosina, causando a exposio dos stios ativos; ocorre ento, inmeras alteraes na cabea das pontes transversais da miosina o que provoca a contrao muscular.

Figura 6. Esquema representativo dos filamentos de actina, tropomiosina, troponina (A) e miosina (B). Fonte: Cristina Pinto/ CCB-UFSC. 2008.

A xido-reduo um processo normal, em diversos graus nos diferentes tecidos. A produo excessiva de perxido pode ocorrer freqentemente sob condies de stress, conforme se constitui atividades fsicas exaustivas, bem como, mediante a ingesto excessiva de cidos graxos poliinsaturados provenientes de uma dieta altamente energtica. Enquanto que, a vitamina E um antioxidante que reage contra radicais livres originados da peroxidao dos lipdeos das membranas celulares, por conseguinte, a falta desta

27 vitamina causada pela peroxidao excessiva dos lipdeos resulta em ampla e grave leso morfolgica e funcional dos tecidos (RIET-CORREA et al., 2007). O Selnio um componente importante da enzima glutationa peroxidase que atua no citoplasma celular neutralizando os radicais livres. Em episdios de deficincias nestes mecanismos, a leso da membrana lipoprotica celular poder permitir a entrada de clcio no citoplasma com acmulo deste nas mitocndrias danificando-as, impedindo portanto, o fornecimento de energia para manter os padres normais de metablitos da clula, culminando em necrose. Assim sendo, leso das fibras musculares, sob a forma de necrose segmentar, resulta na liberao de mioglobina e enzimas musculares como a creatinafosfoquinase (CPK) para o plasma (SMITH, 1993; LEAL et al., 2006; RIETCORREA et al., 2007).

2.2. Fundamentos especficos

2.2.1. Enzimologia

As enzimas plasmticas ou sricas podem ser enquadradas em duas classes distintas; a primeira, composta por enzimas plasma-especficas, que possuem funo definida e especfica no plasma, estando presentes em nveis mais elevados nesse meio do que na maior parte das clulas teciduais. A segunda classe, no se constituem plasma-especficas, sem funo fisiolgica conhecida nesse meio, esto presentes em concentraes extremamente mais baixas que a sua concentrao em certos tecidos. Esse grupo compe-se de dois tipos enzimticos: (1) enzimas associadas ao metabolismo celular (localizadas dentro das clulas tissulares, em concentraes relativamente altas, enquanto a clula permanecer sadia e com a membrana intacta; o nvel dessas enzimas normalmente baixo, tanto no fludo extracelular como no plasma) e as (2) enzimas de secreo. As elevaes na atividade srico-enzimtica ocorrem mediante um ou mais dos mecanismos seguintes: (1) aumento na permeabilidade da membrana celular, (2) morte celular, (3) produo enzimtica aumentada, (4) obstruo de uma rota excretora normal e (5) circulao deficiente. A permeabilidade da membrana celular pode ser ampliada mediante o efeito de agentes infecciosos. Esses organismos podem provocar dano funcional

28 membrana plasmtica, fazendo com que as enzimas intracelulares extravasem at ao compartimento extracelular, e da aumentam no sangue. Os distrbios da respirao celular podem determinar disfuno da membrana, permitindo com isso a sada de enzimas e assim sucessivamente (COLES,1984; CORREIA & CORREIA, 1985). A enzimologia tem sido o campo de desenvolvimento mais acelerado na qumica clnica. A demonstrao de que a atividade srico-enzimtica especfica aumenta com a enfermidade, estimulou os investigadores a avaliar diversos sistemas enzimticos, na procura daqueles rgos ou tecido-especficos (CORREIA & CORREIA, 1985). O soro sanguneo contm normalmente uma srie de enzimas, cuja concentrao pode ser medida atravs de meios adequados. Estas enzimas chegam ao sangue proveniente de vrios rgos. Podem encontrar-se no sangue hidrolases (esterases, carboidrases, proteases, desaminases), transferases e transdesidrogenases (desidrogenase lctica), que so caracterizadas por serem catalizadores proticos sintetizados por todos os organismos vivos. Como agentes catalizadores, sua atividade biolgica principal consiste em alterar a velocidade pela qual se estabelece o equilbrio entre reagentes e seus produtos. No animal vivo, as enzimas esto sempre sendo constante e rapidamente degradadas; o suprimento total realimentado por nova sntese (CORREIA & CORREIA, 1985; DUKES, 1993). A morte celular e a ruptura da membrana resultam num aumento significativo da atividade srico-enzimtica. Esse incremento maior do que o notado em casos de alterao da permeabilidade da membrana. Isto particularmente ocorre com aquelas enzimas associadas com organelas subcelulares particuladas, porm no h, at ento, casos de produo enzimtica ampliada. Normalmente este fenmeno pode, entretanto, ser observado nos casos de crescimento celular acelerado, particularmente nos episdios de hiperplasia, taxa metablica aumentada, certos tipos de neoplasias, crescimento acelerado de animais jovens e durante a regenerao de tecido doente. No entanto, os valores das enzimas so menos elevados nos animais jovens do que nos adultos (CORREIA & CORREIA, 1985; SMITH, 1993). Esses fundamentos so utilizados como recurso auxiliar diagnstico, com uma tradio estabelecida em Medicina Veterinria h mais de cinqenta anos. No sendo imprescindvel ter um amplo conhecimento de bioqumica para se usar na prtica os resultados das determinaes enzimticas. Necessrio se torna apenas o conhecimento da

29 distribuio das enzimas nos rgos e tecidos e, aquilatar seu comportamento no soro em determinadas patologias. Assim, por exemplo, certas enzimas podem no existir no mesmo tecido em outra espcie (SILVEIRA, 1988). de fundamental importncia se entender as alteraes bioqumicas relacionadas a vrios tipos de exerccios, por refletirem alteraes na funo de diferentes sistemas e no tipo de energia utilizada (ROSE, 1992). Diversos fatores que podem alterar os resultados das anlises, entre os quais, idade, sexo e raa (MESSER, 1995) e, segundo Stockham (1995), o exerccio pode liberar quantidades de enzimas suficientes para aumentar os valores sricos de AST e LDH. A aspartato aminotransferase (AST) e a lactato desidrogenase (LDH) so enzimas com atividade nos hepatcitos e fibras musculares e tm sido utilizadas associadas creatinoquinase (CPK) para a avaliao das leses musculares, entre elas, as provocadas pelo exerccio (KANEKO, et al., 1997). Afirmando Siciliano et al. (1995) e Lfstedt & Collatos (1997) que o treinamento dirio diminui os efeitos provocados pelo exerccio, incluindo a elevao das concentraes sricas das enzimas CPK e AST . Conforme Garcia-Navarro & Pachaly (1998), os exames bioqumicos so geralmente feitos a partir do soro embora o plasma possa ser usado em vrios testes. Para obter o soro, colher sangue sem anticoagulante. Em geral, a quantidade a ser colhida depende, em ltima anlise, do nmero de testes e de quanto soro cada mtodo necessita, sendo que o uso de micropipetas tem diminudo em muito essa exigncia. Os sinais clnicos presentes em distintas alteraes musculares so semelhantes e bastante inespecficos; por isso, quando isolados, eles tm limitado valor diagnstico, o que requer, freqentemente, o uso de exames laboratoriais complementares (Da CS et al., 2000). Dentre as enzimas, cujas concentraes sricas devem ser dosadas para confirmao de disfunes musculares, esto aspartato aminotransferase (AST) e a Creatina fosfoquinase (CPK), sendo mais informativas para avaliao da funo muscular comparativamente LDH, porm, apresentam ampla variao que na maioria das vezes esses exames so confiveis como indicativos de alteraes musculares (Da CS et al., 2000). Citando Garcia (2000) e Garcia-Navarro (2005).

30 Creatina fosfoquinase (CPK) Creatina quinase (CK)

A Creatina fosfoquinase catalisa a desfosforilao da creatina fosfato para produzir adenisina trifosfato (ATP), a qual reage com a glicose na presena da hexoquinase (HK) formando glicose-6-fosfato. A glicose-6-fosfato, na presena de glicose-6-fosfato desidrogenase (G-6-PDH) oxidada a 6-fosfogluconato (6-PG) e reduz o NAD a NADH. Consiste num dmero composto de subunidades B e M e ocorre em trs formas de isoenzimas: MM (CPK3), MB (CPK2) e BB (CPK1). encontrado em concentraes elevadas na musculatura esqueltica e cardaca, crebro e no trato gastrointestinal (LABTEST, 2006). Creatina fosfoquinase (CPK) indicador altamente sensvel e especfico da leso muscular em animais domsticos. Embora CPK seja encontrada tanto no msculo cardaco, quanto esqueltico, elevaes desta enzima esto mais comumente associadas miopatias por esforo e manifestaes de molstias sistmicas, sendo considerada um indicador altamente sensvel e especfico de leses muscular, uma vez que, os principais tecidos fontes dessa enzima so as fibras musculares. O vigoroso exerccio ou prolongado embarque podem resultar em modestas elevaes (de at quatro vezes os valores em repouso) de CPK na circulao, sem que seja produzida evidncia histolgica de leses musculares. A meia-vida desta enzima na circulao muito curta (2 horas em eqinos, e 4 horas em ruminantes), e mesmo marcantes elevaes na CPK podem retornar ao normal dentro de 12 a 24 horas aps a agresso muscular isolada. Embora marcante elevao da CPK possa ser uma diretriz para a extenso das leses musculares (DUNCAN et al., SMITH, 1993). A breve meia-vida e o potencial desta enzima para contnua mionecrose, exerce marcante influncia sobre a atividade enzimtica observada em qualquer momento, no tempo. Uma persistente elevao na CPK sugere resultado de processo em ativa e contnua leso muscular, propiciando um campo para o trabalho com cavalos atlticos em repouso. Contudo, embora uma CPK elevada seja a clara indicao de leso muscular, esta enzima no fornece informao acerca dos fatores responsveis pela rabdomilise. Hemlise pode produzir valores falsamente elevados de CPK (SMITH, 1993).

31 Ao analisar enzimas musculares e hepatobiliares, o aumento nos valores sricos de AST, com atividade normal de CPK, sugere que o aumento da AST ocorre em razo de doena hepatobiliar e no em razo do dano muscular, entretanto, deve-se ter cautela nessa concluso, j que a meia-vida da CPK circulante menos que a da AST (STOCKHAM, 1995). Os valores no pico mximo podem chegar a mais de 19 vezes o limite superior dos valores de referncia (KANEKO et al., 1997). Embora a CPK seja mais especfica para a necrose muscular do que AST, Perez et al. (1996) e Cardinet In: Kaneko et al., (1997) salientam que a determinao simultnea de AST e CPK em eqinos representa valioso potencial diagnstico e ajuda no prognstico, em razo das diferentes taxas de desaparecimento de suas atividades no soro ou no plasma. A elevao da atividade srica da CPK indica se a necrose muscular ativa ou ocorreu recentemente. A persistente elevao de CPK indica que a necrose muscular continua ativa e, AST elevada sugere necrose muscular se acompanhada por atividade crescente de CPK; se decrescente ou normal, a necrose muscular no mais ativa (Cardinet In: Kaneko et al., 1997). Relatando Frape (1998) que a CPK tem meia-vida in vitro de menos de 24 horas, enquanto a AST, de sete a oito dias. Os estudos de distribuio tissular indicam que o msculo esqueltico quase que completamente composto da isoenzima MM com quantidades mnimas de isoenzima MB. O crebro e o trato gastrointestinal contm primariamente a isoenzima BB enquanto que o msculo cardaco consiste aproximadamente de 80% da isoenzima MM e 20% da MB. A CPK total comea a se elevar seis horas aps o incio da leso tanto no miocrdio, quanto na musculatura esqueltica e chega a um pico mximo aps 12 24 horas, permanecendo elevada at 72 horas quando no ocorre um novo infarto (LABTEST, 2006). Aspartato aminotransferase (AST) Tambm conhecida como Transaminase glutmico-oxaloactica (TGO) uma enzima citoplasmtica e mitocondrial, presente em vrios tecidos como fgado, msculos esqueltico, cardaco, nos eritrcitos e rins, em grandes concentraes alguns (DUNCAN & PRESSE, 1982; TENNANT, 1997; FRAPE, 1998 CORREA, 2007). Esta enzima indicador inespecfico de necrose tecidual, tendendo a ser menos sensvel nas leses brandas, que as enzimas tecido-especficas como SDH (sorbitol

32 desidrogenase) ou CPK. Quando comparada com as enzimas tecido-especficas, conforme fica determinado seqencialmente ao longo do transcurso de processo patolgico. Elevaes de CPK e AST indicam leses musculares, enquanto que elevaes de SDH e AST indicam leses hepticas. A meia-vida da AST na circulao relativamente longa, e as elevaes podem persistir por at 10 dias, aps um episdio de mionecrose ou leso heptica. Como regra geral, a extensa necrose muscular tende a produzir elevaes maiores de AST, que a grave necrose heptica (SMITH, 1993). Cardiomiopatias diversas podem causar aumento da AST, assim como, endocardites bacterianas, trombose artica e infarto do miocrdio. Associada a congesto heptica decorrente de insuficincia cardaca (BUSH, 1991), Observando-se ainda, aumento da AST srica por patologias no sistema nervoso central, sugestivo de grande leso do parnquima heptico e mau prognstico (NAZIFI et al., 1997). Elevaes marcantes, mas transitrias de CPK e SDH esto associadas a um insulto isolado dos msculos e fgado, respectivamente, enquanto AST aumenta gradualmente e permanece elevada por perodo muito mais longo. Assim, um aumento moderado e marcante em AST num animal com SDH ou CPK em progressivo declnio indica que alguma leso tecidual ocorreu dentro dos ltimos sete a dez dias; esse freqentemente um indicador de prognstico favorvel, porm o processo pode estar ativo (SMITH, 1993; CARDINET In: KANEKO et al., 1997). Tennant (1997) salienta que em todas as espcies domsticas a atividade da AST alta no fgado, portanto, na leso heptica aguda ou crnica, a atividade srica de AST est elevada. Segundo Cardinet In: Kaneko et al. (1997), essa enzima tem sido usada como auxlio diagnstico em alteraes musculares dos animais domsticos. Na avaliao da leso muscular, ocorrem aumentos menores de AST do que da CPK, mas que se estende por um perodo de tempo maior; sendo a AST, bastante expressiva para avaliar leso heptica e deve ser includa na monitorao de problemas musculares (PEREZ et al., 2000). A utilizao desta enzima em conjunto com a CPK pode oferecer informaes mais precisas sobre o perodo em que se encontra a leso (TADICH et al., 2000). A AST, por ser uma enzima mitocondrial e citoslica, necessita uma leso maior para ser liberada na corrente sangnea. Por outro lado CPK e LDH, por serem citoslica e de tamanho pequeno, conseguem ultrapassar a membrana celular mesmo que no exista um

33 dano tecidual muito grande. Na realidade, um simples aumento de permeabilidade de membrana suficiente para que ocorra o extravasamento dessas enzimas (PEREZ et al., 2000). A AST catalisa especialmente a transferencia do grupo amina do cido asprtico para o cetoglutarato com formao de glutamato e oxalacetato. O oxalacetato reduzido malato por ao da malato desidrogenase (MDH), enquanto a coenzima NADH oxidada NAD (LABTEST, 2006). Normalmente utilizada para avaliar leso muscular em conjunto com a creatinafosfoquinase (CPK) e Lactato desidrogenase (LDH); utilizada ainda, para investigar doenas hepticas de qualquer etiogenia (KERR, 1989), assim como, a avaliao srica da AST, na suspeita necrose heptica causada por plantas como o Cestrum parqui e Xanthium cavalinesii e necrose muscular por Senna ocidentalis, que causa leso extensiva (RIETCORREA et al., 2007). Desidrogenase ltica (LDH) O estudo da LDH teve um grande impulso com Hunter & Markert (1957), pela combinao da tcnica de eletroforese em gel de amido, desenvolvida por Smithies (1955), com mtodos histoqumicos (zimograma). Com isso foi possvel verificar que a LDH um tetrmero que, na maioria dos vertebrados, existe como cinco formas moleculares resultantes da associao ao acaso de duas subunidades, A e B, codificadas por dois locos gnicos diferentes (CAHN et al., 1962; SCHWANTES, 1970). O loco LDH-A*, codifica a subunidade A, predominante em msculo esqueltico e o loco LDH-B* codifica a subunidade B, predominante em msculo cardaco. Essa associao ao acaso leva a formao dos diferentes tetrmeros: A4, A3B, A2B2, AB3, B4 com peso molecular de aproximadamente 140.000 (DARNALL & KLOTZ, 1975) apresentando diferentes pontos isoeltricos. O homopolmero B4 carregado mais negativamente sendo, portanto, andico. J o homopolmero A4 carregado menos negativamente, constituindo-se na isozima catdica e os heteropolmeros, conseqentemente, apresentam mobilidade intermediria a estes (PICPKLES et al. 1964).

34 A LDH catalisa a converso do piruvato a lactato na presena de NADH, est presente em praticamente todos os rgos e tecidos do organismo e sua atividade cataltica no soro devido presena de vrias isoenzimas, que podem formar padres diferentes dependentes da origem da LDH presente no soro. Nveis sricos elevados de desidrogenase lctica so observados em uma variedade de condies. Os valores mais elevados so encontrados em animais com anemia megaloblstica, carcinomas e choque grave. Elevaes moderadas ocorrem em animais com infarto do miocrdio, infarto pulmonar, anemia hemoltica e distrofia muscular progressiva (LABTEST, 2006). Em sntese, elevaes sricas destas enzimas podem ser determinadas pelas seguintes causas: Elevao na creatina fosfoquinase - CPK (Smith, 1993) Causas comuns: rabdomilise de esforo, miodegenerao nutricional (deficincia de vitamina e, selnio), distrbio sistmico ps - corrida de prova de resistncia, sndrome da vaca caideira, hipertermia maligna e edema maligno; Causas raras: modesta elevao normal p-exerccio, miocardiopatia aguda, prpura hemorrgica, influenza eqina, sarcosporidiose e leso focal por injees. Ressaltando Cardinet In: Kaneko, et al. (1997), elevao da CPK conseqente necrose ou atrofia aguda do msculo estriado por distrofia muscular progressiva, traumas, queimaduras e rabdomilise extensa. Elevao da aspartato aminotransferase - AST (SMITH, 1993) Causas comuns - Molstia muscular: rabdomilise de esforo, miodegenerao nutricional (deficincia de vitamina e, selnio), distrbio sistmico ps - corrida de prova de resistncia,, sndrome da vaca caideira, hipertermia maligna e edema maligno; - Molstia heptica: insuficincia heptica aguda e crnica, colngiohepatite, colelitase, fasciolose e hemlise in vitro; Causas raras: anemia hemotica, miocardiopatia aguda, prpura hemorrgica, influenza eqina, sarcosporidiose, irritao local por injees intramusculares e fgado adiposo.

35 Elevao da lactato desigrogenase - LDH (SMITH, 1993) Causas comuns - Doena muscular: rabdomilise de esforo, miodegenerao nutricional (deficincia de vitamina E, selnio), sndrome davaca caideira, hipertermia maligna e edema maligno; - Molstia heptica: insuficincia heptica aguda e crnica, colngiohepatite, colelitase, fasciolose e hemlise in vitro; Causas raras: anemia hemotica, miocardiopatia aguda, prpura hemorrgica, influenza eqina, sarcosporidiose, leso focal por injees e fgado adiposo. Na Tabela 1, esto representados valores enzimticos da CPK, AST e LDH referenciados em literaturas especializadas.

Tabela 1. Valores mdios e intervalos limtrofes enzimticos sricos referenciados como parmetros normais de Creatina fosfoquinase (CPK), AspartatoAminotransferase (AST) e Lactato Desidrogenase (LDH) em eqinos.
AUTORES Coles, 1984 Correia & Correia, 1985 Doxey, 1985 Duncan & Prasse, 1982 Kaneko Et Al., 1997 MerCPK F. C.; et al. 2001 Medway et al., 1973 Meyer, 1995 Radostits, et al., 2002 Pardini, 2005 Silveira, 1988 Thomassian, 2005 UNESP- Botucatu/SP 2005 Intervalos limtrofes/ mdia CPK-U/L <196 <200 <200 <200 <196 34-165,6 <200 <200 100-300 (UI/L) 86-140 <200 <196 24-234 (UI/L) 2,4-200/ 101,2 AST- U/L 162-294 133-216 90-374 0-150 226-366 27-205 121-195 226-366 200-400 226-366 58-94 50-150 226-366 0-400/ 200 DLH-U/L 80-600 0-199 162-412 102,3-340,6 291 162-412 162-412 162-412 162-412 162-412 0-412/ 206

AST= Aspartato aminotransferase; CPK= Creatina fosfoquinase; LDH= Lactato desidrogenase

36 2.2.2. Aspectos patolgicos enzimticos correlatos ao manejo

Atividades desportivas e de recreao, costuma exigir muito dos animais em termos de velocidade e resistncia, expondo os seus membros a tenso contnua e riscos constantes de leses. Mesmo incapacidades relativamente pequenas podem tornar um eqino inapto para essas modalidades de trabalho e, a importncia das boas condies dos membros bem clara no antigo provrbio: No anda, no cavalo (DYCE, 1996). Segundo Rose & Hodgson (1994) e Kaneko et al. (1997), a elevao da atividade destas enzimas pode ser conferida em eqinos com sinais de rabdomilise e, associada prtica de exerccios intensos, como estabelecem alguns estudos. Na explorao desportiva, para que o eqino atinja um bom desempenho em pistas como um atleta, todos os sistemas do corpo necessitam est funcionando a contento. Quando ocorre falha em um desses sistemas, o cavalo no consegue atingir seu potencial mximo, levando a baixa ou queda de performance durante treinamento ou competio (CARNEIRO, 2002). Nos eqinos, o manejo apropriado pode reduzir a incidncia de muitas alteraes patolgicas, mediante a adoo de controle das condies ambientais de explorao, da dieta e natureza alimentar (MERCK, 2001), propiciando bom desenvolvimento muscular e sseo, com a necessria solidez e resistncia, para as funes que desempenham, quer no trabalho ou esporte (ANDRIGUETTO et al., 2003). Como atletas de alto desempenho, quase sempre so compelidos a se exercitarem no limiar mximo de esforo suportvel pelo seu organismo e exposto, dentre inmeros outros fatores, ao fornecimento de alimentos e gua fora da sua rotina normal e, a variveis ambientais desfavorveis s condies de vida do animal que favorecem ao surgimento de leses fsicas e psicolgicas (ANGELI, 2005). Miopatia por esforo tem sido observada em eqinos submetidos a exerccios, no importando a intensidade deles, aps perodos de descanso ou inatividade, em que rao com excesso de gros for oferecida vontade (RIET-CORREA et al., 2007). Afirmando que no Rio Grande do Sul essa afeco freqente em eqinos utilizados para rodeios ou desfiles de fim de semana, que ingerem pastagens e so submetidos a esforos prolongados aps longos perodos de descanso.

37 Esforo muscular intenso provoca desenvolvimento de acidose metablica, pelo acmulo na corrente sangunea de lactato liberado durante a atividade fsica, como produto do metabolismo muscular em qualquer tipo de exerccio, sendo o aumento de sua concentrao decorrente da limitada disponibilidade de oxignio para oxidao do piruvato na mitocndria (PETER, 2002; THOMASSIAN et al, 2007). Ressaltando Barros (2001) apud Riet-Correa, et al. (2007) que a deficincia de vitamina E e selnio pode causar necrose segmentar dos msculos esquelticos incrementando a atividade de AST srica, avaliando-se conjuntamente a CPK, que especfica para a leso muscular e a glutation peroxidase (GSH. PX), como avaliativo da carncia de selnio.

3. MATERIAIS E MTODOS O experimento foi realizado no perodo de agosto setembro de 2008, mediante a avaliao da funo muscular de eqinos atletas, sob condies de repouso e pos atividade fsica, atravs da bioqumica srico-enzimtica. Sendo a pesquisa subsidiada por literaturas especializadas, mediante reviso bibliogrfica em livros didticos, peridicos, sites tcnicocientficos e publicaes diversas pertinentes. Os dados foram catalogados segundo raa, sexo e faixa etria.

3.1. Metodologia da execuo

3.1.1. Local da Pesquisa Fundamentao terica, efetuada na Biblioteca Central - CSTR /UFCG /Patos - PB, bem como, a utilizao de acervo didtico pessoal e de docentes da Instituio. A execuo experimental procedida no Centro de Treinamento Joames Bacalhau, Municpio de Ing-PB (Figura 7) e no Laboratrio de Patologia Clnica do Hospital Veterinrio/ CSTR /UFCG, Patos - PB.

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Figura 7. Vista panormica Centro de Treinamento Joames Bacalhau, Municpio de Ing-PB (A); Aspecto parcial dos boxes de baias individuais (B). Fonte: Arquivo pessoal.

3.1.2. Animais avaliados Dez eqinos atletas em faixa etria de dois a 13 anos de idade, da raa Quarto de Milha e mestiagens, submetidos s mesmas condies de manejo sanitrio, condicionados e diariamente treinados para vaquejadas (Figura 8). Os treinamentos eram realizados no perodo da manh e tarde, consistindo em aquecimento inicial de 5 a 10 minutos em marcha leve a passo e andadura intermediria entre passo e trote; a seguir, condicionados a treinos especficos, de esteira, alinhamento e derrubada do boi na pista por uma distncia de 100 metros, com cavalgadas de mdia e alta velocidade. Explorados sob sistema de criao semi-intensivo, manejo alimentar base de concentrado com rao peletizada industrial em duas ou trs ofertadas dirias, de conformidade com o regime de preparao (manuteno plena dos eqinos preparados para vaquejada, fase inicial de treinamento e de adestramento) e forragem, constituda de pastagem nativa e oferta intensiva de gramneas Brachiara spp e capim grama (Cynodon spp) - administradas em cestas suspensas e, desedao com gua de poo artesiano.

Figura 8. Eqinos da raa Quarto de Milha avaliados nos Centro de Treinamento Joames Bacalhau Municpio de Ing-PB. Agosto/2008. Fonte: Arquivo pessoal.

39 3.1.3. Metodologia da execuo O estudo foi realizado mediante delineamento inteiramente casualizado, com uma etapa pr-experimental, mediante o acompanhamento do manejo, treinamentos e monitoramento clnico dirio e na experimentao definitiva, a identificao dos eqinos em fichas e avaliao clnica criteriosa (conforme FEITOSA, 2004), sob repouso e pos atividade fsica, segundo agrupamentos constitudos de acordo com a etapa preparatria dos treinamentos: Grupo I: quatro eqinos adultos (trs, quatro, oito e treze anos) em plena atividade de treinamento e de explorao, recebendo dieta completa em trs ofertas dirias; Grupo II: quatro animais adultos (cinco, oito dez e dose anos), em fase inicial de preparao para a prtica de vaquejada, submetido dieta completa em duas ofertas dirias;

Grupo III: dois eqinos (dois e quatro anos de idade), em fase de adestramento, com dieta completa em duas ofertas dirias; As amostras sangneas para as dosagens bioqumicas foram coletadas sob condio de repouso e pos - atividade fsica, de acordo com a seguinte padronizao:

To (Tempo 0 ou inicial) = amostras coletadas (Figura 9) sob repouso, antes das T1, T2, T3, T4 e T5 = obtidas aps as atividades fsicas, respectivamente, no transcurso coleta de 10 ml de amostras sanguneas, atravs de venopuno jugular em seringas de

atividades fsicas;

de 12, 24, 36, 48 e 60 horas pos treinamentos;

polietileno, sem anticoagulante e mantidas em repouso durante duas a trs horas sob condies ambientais com temperatura mdia de 24C sombra e, posteriormente centrifugadas velocidade de 1500 rpm (Figura 10), durante cinco minutos, para a obteno do soro (Figura 11), em seguida armazenadas transitoriamente sob refrigerao ou congelamento;

dosagens enzimticas da Creatina fosfoquinase (CPK), Asparatato aminotransferase

(AST) e Lactato Desidrogenase (LDH), foram realizadas com kits comerciais (LABTEST), em Analisador Bioqumico semi-automtico - Bioplus 2000 (Figura 12), efetuadas no Laboratrio de Patologia Clnica - HV/ CSTR /UFCG, Patos - PB.

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Figura 9. Coleta das amostras sangneas Centro de Treinamento Joames BacalhauMunicpio de Ing-PB. Fonte: Arquivo pessoal

Figura 10. Laboratrio de Analises Clnicas do Municpio de Ing-PB. Fonte:Arquivo pessoal

Figura 11. Amostras sangneas de eqinos coaguladas Fonte: Arquivo pessoal

Figura 12. Analisador Bioqumico - Bioplus 2000/ Laboratrio de Patologia Clnica do Hospital Veterinrio/CSTR /UFCG,Patos/PB. Fonte: Arquivo pessoal

3.1.4. Mecanismos de avaliao e acompanhamento Os dados obtidos foram catalogados em tabelas especficas, efetuando-se a avaliao estatstica e anlise comparativa aos dados referenciados, tendo em vista a determinao de parmetros conclusivos. Por conseguinte, obtenes elucidativas pertinentes aos objetivos do trabalho. 4. RESULTADOS E DISCUSSO

4.1. Determinaes enzimticas absolutas A determinao enzimtica dos dez eqinos avaliados sob condio de repouso demonstrou valores mdios e desvio padro de (CPK), (AST), (LDH), respectivamente,

41 de 267.50 U/L 45.14, 164.75 U/L 111.23 e 609.50 U/L 216.18; enquanto que, as verificaes de CPK (489.2 U/L 180.47), AST (190.1 U/L 168.28) e de LDH (814.85 U/L 215.77) registradas pos - atividades fsicas foram marcadamente superiores. Perfazendo valores mdios absolutos e desvio padro total de CPK equivalente a 378.35 U/L 112.81, AST: 177.43 U/L 139.76 e de LDH: 712.18 U/L 215.98, como mostra a Tabela 2. TABELA 2. Valores mdios absolutos e desvio padro da determinao enzimtica srica da Creatina fosfoquinase (CPK), Aspartato Aminotransferase (AST) e Lactato Desidrogenase (LDH) dos animais avaliados, sob repouso e pos - atividade fsica, registrados no Centro de Treinamento Joames Bacalhau, Ing-PB, no perodo de agosto setembro/ 2008.
Parmetros de avaliao

Enzimas Sricas
CPK AST LDH

Repouso
267,5045,14 164,75111,23 609,50216,18

Pos - atividade
489,2180,47 190,1168,28 814,85215,77

TOTAL
378,35112,81 177,43139,76 712,18215,98

Por conseguinte, o valor mdio de CPK considerado como padro de normalidade dos eqinos avaliados, foi bastante superior aos valores estabelecidos pelos autores citados na Tabela 1, exceto ao estabelecido por Radostits et al. (2002). Enquanto que, os valores de AST foram compatveis aos valores registrados por Medway et al. (1973), Coles (1984), Correia & Correia (1985), Doxey (1985) e Merck F. C. et al. (2001) e, superiores as observaes de Duncan & Prasse (1982), Silveira (1988) e Thomassian (2005). Observaes estas, inferiores s determinaes de Meyer (1995), Kaneko et al. (1997) e Radostits, et al. (2002). No entanto, o valor mdio de LDH foi superior s consignaes de todos os autores referenciados. Portanto, constitui-se um achado de conotao o valor de CPK, quanto indicao de esforo muscular excessivo nos treinamento dos animais avaliados, por afirmar SMITH (1993) que marcante elevao da CPK possa ser uma diretriz para a extenso das leses musculares. Assim como, indicativa que os valores de AST e LDH aumentados sugerem

42 leso muscular provocadas pelo exerccio, conforme afirmam KANEKO et al. (1997) e LABTEST (2006). 4.2. Determinaes enzimticas relativas e absolutas

Conforme evidencia a Tabela 3, segundo as determinaes enzimticas relativas de todos os animais avaliados foram constatados valores mdios absolutos e desvio padro mais elevada de CPK nas primeiras 12 horas pos - atividade fsica (T1= 441.5 U/L 291.06), de AST nas primeiras 48 horas (T4= 143.7 U/L 159.51) e de LDH, 60 horas (T5= 931.7 U/L 209.68) aps as atividades fsicas. TABELA 3. Demonstrativo dos valores relativos por animal e mdios/ desvio padro absolutos da determinao enzimtica srica da Creatina fosfoquinase (CPK), Aspartato Aminotransferase (AST) e Lactato Desidrogenase (LDH) dos animais avaliados, sob repouso e pos - atividade fsica, a intervalos de 12 horas, registrados no Centro de Treinamento Joames Bacalhau, Ing-PB, no perodo de agosto setembro/ 2008.
Tempo (T) Animais/ Enzimas CPK AST LDH CPK AST LDH CPK AST LDH CPK AST LDH CPK AST LDH CPK AST LDH

T0=0h

T1=12h

T2=24h

T3=36h

T4=48h

T5=60h

1 170 52 320 315 57 456 242 62 328 242 57 561 212 57 662 364 62 649

2 218 83 352 242 115 569 119 110 360 170 62 408 485 120 841 534 115 777

3 364 78 825 267 68 937 412 78 1218 295 82 820 330 78 950 315 78 945

4 315 183 609 412 131 785 340 162 529 607 141 857 352 146 886 437 131 857

5 295 315 596 971 471 809 315 256 793 752 492 905 607 586 793 534 382 817

6 291 136 729 874 131 1267 315 125 1018 655 151 1299 350 162 1342 752 151 1331

7 242 68 841 218 62 745 242 68 881 534 73 929 250 68 957 388 73 913

8 170 52 601 242 62 737 242 52 961 291 68 809 256 78 845 315 68 825

9 250 68 601 194 62 817 412 62 1170 194 72 835 218 68 793 218 62 953

10 242 78 881 680 78 945 310 68 945 582 73 961 728 74 1210 607 89 1250

255,7 111,3 635,5 441,5 123,7 806,7 294,9 104,3 820,3 432,2 127,1 838,4 378,8 143,7 927,9 446,4 121,1 931,7

61,96 82,36 191,98 291,06 125,55 220,28 88,09 63,63 315,95 214,91 132,28 236,55 174,67 159,51 204,31 160,39 96,67 209,68

T = Tempo de coleta; T0= antes de atividade fsica; T1= 12h pos-atividade; T2= 24h pos-atividade; T3= 36h posatividade; T4= 48h pos-atividade; T5= 60h pos-atividade.

As observaes dos valores mais elevada de CPK nas primeiras 12 horas pos atividade fsica, so consonantes com as citaes de SMITH (1993) de StoCPKham (1995)

43 quanto curta meia-vida circulante desta enzima e, coincidente com os achados Duncan & Prasse (1982), Cardinet In: Kaneko et al. (1997) e de Labtest (2006) pela observao nesse transcurso aps exerccio e, portanto, de leso muscular ativa e/ou ocorrida recentemente como enfocam estes autores. Por conseguinte, a elevao de AST associada CPK, corrobora com a ocorrncia de alterao muscular como salientam Perez et al. (1996) e Cardinet In: Kaneko et al. (1997) e, a verificao mdia superior nas 48 horas, de acordo Duncan & Prasse (1982), Perez et al. (1996) e Tadich et al. (2000) que relatam se manter em concentrao srica por um perodo de tempo maior e por isso, mais precisa sobre o perodo da leso.

4.3. Determinaes enzimticas dos eqinos do Grupo I

Os valores das determinaes enzimticas por agrupamento dos eqinos avaliados demonstraram os seguintes resultados do Grupo I: CPK= 452.25 U/L 157.91, AST= 185.88 U/L 158.77 e LDH = 780.63 U/L 215.84; constatando-se o maior valor mdio de CPK (576.25 U/L 319.01) nas primeiras 12 horas (T1) e de AST (231.50 U/L 238.20) e (932.50 U/L 188.86) nas 48 horas (T4) pos-atividade fsica. TABELA 4. Demonstrativo dos valores mdios e desvio padro da determinao enzimtica srica Creatina fosfoquinase (CPK), Aspartato Aminotransferase (AST) e Lactato Desidrogenase (LDH) dos eqinos do Grupo I, sob repouso e pos - atividade fsica, a intervalos de 12 horas, registrados no Centro de Treinamento Joames Bacalhau, Ing-PB, no perodo de agosto setembro/ 2008.
Valores Enzimticos ( TEMPO (T) T0=0h T1=12h T2=24h T3=36h T4=48h T5=60h CPK 267,5045,14 576,25319,01 271,00102,18 527,75250,00 543,00161,42 528,0069,75 452,25157,91 AST 164,75111,23 198,75182,85 149,0081,03 192,00203,03 231,50238,20 179,25136,27 185,88158,77 ) LDH 609,50216,18 777,00155,54 656,75262,06 782,75253,42 932,50188,86 925,25218,95 780,63215,84

T = Tempo de coleta; T0= antes de atividade fsica; T1= 12h pos-atividade; T2= 24h pos-atividade; T3= 36h posatividade; T4= 48h pos-atividade; T5= 60h pos-atividade.

44 Como as amostras estudadas foram de eqinos explorados em vaquejadas e na maioria das vezes, abusivamente forados sem o devido condicionamento e nesta experimentao, por se tratar de animais em plena atividade de treinamento e de explorao, recebendo dieta completa em trs ofertas dirias. Portanto, passveis de leso muscular, de acordo com Rose & Hodgson (1994), Stockham (1995) e (KANEKO, et al., 1997), decorrente de grande demanda para utilizao de fontes de energia, exigindo metabolismo anaerbico, como afirma Leal et al. (2006). Consequentemente, elevaes sricas de CPK, AST e LDH, provavelmente conseqentes de leso muscular por esforo, em consonncia com Rose & Hodgson (1994) e Kaneko et al. (1997) por afirmarem que a elevao da atividade destas enzimas pode ser conferida em eqinos, associada prtica de exerccios intensos. 4.4. Determinaes enzimticas dos eqinos do Grupo II

As determinaes do Grupo II: CPK= 345.04 U/L 157.39, AST= 85.21 U/L 39.46 e LDH = 851.46 U/L 305.10; com taxa mdia mais elevada de CPK (436.5 U/L 211.60) e de AST (110.75 U/L 53.07) nas 60 horas (T5) e LDH (1078.25 U/L 264.55) nas primeiras 36 horas (T3). Provavelmente as elevaes verificadas neste grupo, decorram de leso muscular persistente, devido condies abusivas de treinamento e, especialmente em fase inicial preparatria, sem o adequado aquecimento das estruturas locomotoras. Assim como, associadas a fatores predisponente como a deficincia de vitamina E e/ou selnio; fatos de ocorrncia presumvel nesta regio e, em consonncia com as citaes de PEREZ et al. (2000), TADICH (2000) e de BARROS (2001) apud RIET-CORREA (2007).

45 TABELA 5. Demonstrativo dos valores mdios e desvio padro da determinao enzimtica srica Creatina fosfoquinase (CPK), Aspartato Aminotransferase (AST) e Lactato Desidrogenase (LDH) dos animais do Grupo II, sob repouso e pos - atividade fsica, a intervalos de 12 horas, registrados no Centro de Treinamento Joames Bacalhau, Ing-PB, no perodo de agosto setembro/ 2008.
Valores Enzimticos ( TEMPO (T) T0=0h T1=12h T2=24h T3=36h T4=48h T5=60h CPK 248,7595,69 424,50301,19 302,7580,55 370,75191,03 287,0064,30 436,5211,60 345,04157,39 AST 62,5012,79 69,7512,12 67,5012,79 98,0041,29 102,7542,93 110,7553,07 85,2139,46 ) LDH 416,25114,87 768,25138,09 983,25167,66 1078,25264,55 1002,75389,39 860,0068,93 851,46305,10

T = Tempo de coleta; T0= antes de atividade fsica; T1= 12h pos-atividade; T2= 24h pos-atividade; T3= 36h posatividade; T4= 48h pos-atividade; T5= 60h pos-atividade.

4.5. Determinaes enzimticas dos eqinos do Grupo III As avaliaes do Grupo III (fase de adestramento, dieta completa, duas ofertas dirias de concentrado) revelaram as seguintes verificaes: CPK= 280 U/L 87.68, AST= 67.17 U/L 2.12 e LDH = 869.58 U/L 105.95; com valor mdio mais elevado de CPK (364.00 U/L 240.42) e AST (72.50 U/L 0.71) nas 36 horas (T3) e LDH (1025.50 U/L 204.35) nas primeiras 24 horas (T2). TABELA 6. Demonstrativo dos valores mdios e desvio padro da determinao enzimtica srica da Creatina fosfoquinase (CPK), Aspartato Aminotransferase (AST) e Lactato Desidrogenase (LDH) dos animais do Grupo III, sob repouso e pos - atividade fsica, a intervalos de 12 horas, registrados no Centro de Treinamento Joames Bacalhau, Ing-PB, no perodo de agosto setembro/ 2008.
Valores Enzimticos ( Tempo (T) T0=0h T1=12h T2=24h T3=36h T4=48h T5=60H CPK 230,0016,97 222,0039,60 327,00120,21 364,00240,42 234,0022,63 303,00120,21 AST 68,000,00 62,000,00 65,004,24 72,500,71 68,000,00 67,507,78 ) LDH 721,00169,71 781,0050,91 1025,50204,35 882,0066,47 875,00115,97 933,0028,28

28087,68 67,172,12 869,58105,95 T = Tempo de coleta; T0= antes de atividade fsica; T1= 12h pos-atividade; T2= 24h pos-atividade; T3= 36h pos-atividade; T4= 48h pos-atividade; T5= 60h pos-atividade.

46 Os valores mdios observados no referido grupo indicam disfuno e/ou leso muscular ativa e, considerando que apesar da preparao desses eqinos constitui-se de treinamento com durao curta, porm os resultados enzimticos da atividade muscular ps atividade, demonstram exerccios fsicos forados ou exaustivos, com alimentao rica em carbohidratos e consequentemente grande demanda energtica muscular. Logo, consensual com as afirmaes de Rose & Hodgson (1994), Stockham (1995), Kaneko, et al. (1997), Peter (2002) e Thomassian et al, (2007).

4.6. Correlao entre os grupos de eqinos avaliados Dentre os critrios avaliativos considerados quanto possibilidade de interao de variveis, a anlise das determinaes enzimticas sricas por grupo de animais revelou resultados preponderantemente diferenciados quanto correlao dieta alimentar versus atividade fsica e, provavelmente pertinente ao condicionamento fsico para as atividades desenvolvidas. Desta forma, as verificaes obtidas revelaram que os valores de CPK (452.25 U/L 157.91) e de AST (185.88 U/L 158.77) foram mais elevados no Grupo I, em contrapartida, obtendo-se maior valor mdio de LDH (869.58 U/L 105.95) no Grupo III, como mostra a Tabela 7.

47

TABELA 7. Correlao entre os valores mdios e desvio padro da determinao enzimtica srica da Creatina fosfoquinase (CPK), Aspartato Aminotransferase (AST) e Lactato Desidrogenase (LDH) sricas, dos animais dos Grupos I, II, III, sob repouso e pos - atividade fsica, a intervalos de 12 horas, registrados no Centro de Treinamento Joames Bacalhau, Ing-PB, no perodo de agosto setembro/ 2008.
Grupo 1 TEMP O (T) T0 = 0h T1=12h T2=24h T3=36h T4=48h T5=60H CPK(U/L) 267,5045,14 576,25319,01 271,00102,18 527,75250,00 543,00161,42 528,0069,75 452,25157,91 AST(U/L) 164,75111,23 198,75182,85 149,0081,03 192,00203,03 231,50238,20 179,25136,27 185,88158,77 LDH(U/L) 609,50216,18 777,00155,54 656,75262,06 782,75253,42 932,50188,86 925,25218,95 780,63215,84 CPK(U/L) 248,7595,69 424,50301,19 302,7580,55 370,75191,03 287,0064,30 436,5211,60 345,04157,39 Grupo 2 AST(U/L) 62,5012,79 69,7512,12 67,5012,79 98,0041,29 102,7542,93 110,7553,07 85,2139,46 LDH(U/L) 416,25114,87 768,25138,09 983,25167,66 1078,25264,55 1002,75389,39 860,0068,93 851,46305,10 CPK(U/L) 230,0016,97 222,0039,60 327,00120,21 364,00240,42 234,0022,63 303,00120,21 28087,68 Grupo 3 AST(U/L) 68,000,00 62,000,00 65,004,24 72,500,71 68,000,00 67,507,78 67,172,12 DLH(U/L) 721,00169,71 781,0050,91 1025,50204,35 882,0066,47 875,00115,97 933,0028,28 869,58105,95

T = Tempo de coleta; T0= antes de atividade fsica; T1= 12h pos-atividade; T2= 24h pos-atividade; T3= 36h pos-atividade; T4= 48h pos-atividade; T5= 60h pos-atividade.

48

Como as taxas de CPK e AST foram mais elevadas nos eqinos do Grupo I, manejados com dieta completa em maior oferta e serem mais intensivamente forados, sobretudo no perodo inicial das atividades, portanto, sendo estas alteraes, presumivelmente atribuveis a intensa alterao nos efeitos do incremento metablico muscular por esforo fsico exaustivo, face a evidncia de elevados valores de Creatina fosfoquinase (CPK) nas primeiras 12 horas, com elevaes mais bruscas nos valores sricos, conforme evidencia as verificaes de CPK em T1 (576.25 U/L 319.01); contudo varivel quanto a taxa mdia de AST (231.50 U/L 238.20), com maior elevao em T4. Consonantes com as descries de PEREZ et al. (2000) quanto s peculiaridades de extravazamento mitocondrial e citoslica da AST e, citoslica da CPK e LDH, nas circunstncias de leses celulares correlacionadas, conforme as miofibrilas. No transcurso pos-treinamento admite-se a hiptese de esforo demasiado ou falha no condicionamento, face idntica elevao de CPK neste grupo. Correlacionado ainda, a interao de variveis, como condio ambiental ou descedao pr-prandial e antes dos exerccios, observaes compatveis com as citaes de Rose & Hodgson (1994) e Kaneko et al. (1997). Enquanto que, com maior valor mdio de LDH no tempo T3 (1078.25 U/L 264.55) do Grupo II; possivelmente relacionado condio tardia de leso leve extensiva por exigncias prolongadas, consonantes com as descries de Kaneko et al. (1997) e Labtest (2006) e de conformidade s atividades dessa explorao e como normalmente transcorrem em fase de inicial de treinamentos preparatrios. .

49 5. CONCLUSO

Com base nos resultados desse experimento, pode-se concluir que os valores sricoenzimticos musculares de eqinos utilizados em vaquejada so superiores aos referenciados, em contingncia preponderante pos - atividade fsica, conferida pelos elevados valores de Creatina fosfoquinase (CPK) nas primeiras 12 horas e, que a interao entre dieta alimentar e atividade fsica intensa, acarreta elevao nos valores sricos de Creatina fosfoquinase (CPK), Aspartato aminotransferase (AST) e de Lactato desidrogenase (LDH), aparentemente significativa.

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57 7. ANEXO ANEXO 1. Identificao dos eqinos submetidos avaliao das enzimas musculares antes e pos atividade fsica. Centro de Treinamento Joames Bacalhau/ Ing-PB. ANIMAL Equino 01 Equino 02 Equino 03 Equino 04 Equino 05 Eqino 06 Eqino 07 Eqino 08 Eqino 09 Eqino 10 NOME Ternal Nick Tor Paloma Dara Palomino Lili Dach Arizona Huck Eternaly Rojo Jr PELAGEM Tordilho Alaz Castanho Alaz Alaz Palomino
Alaz Castanho Alaz Alaz Tostado

SEXO Macho Macho Macho Femea Femea Macho


Femea Macho Macho Macho

IDADE 12 anos 8 anos 10 anos 4 anos 13 anos 8 anos


4 anos 8 anos 2 anos 3 anos

PESO (kg) 420 400 380 500 450 450


350 400 350 450