No ciclo ltico, o vrus invade a bactria, onde as funes normais desta so interrompidas na presena de cido nuclico do vrus No ciclo

lisognico, o vrus invade a bactria ou a clula hospedeira, onde o DNA viral incorpora-se ao DNA da clula infectada. Isto , o DNA viral torna-se parte do DNA da clula infectada

Ciclo lisognico - O DNA do vrus incorpora no DNA da bactria mas no interfere no metabolismo da bactria, que continua reproduzindo normalmente, transmitindo o DNA viral s bactrias descendentes. Ciclo ltico - O DNA viral passa a comandar o metabolismo bacteriano e a fazer vrias cpias que se transcrevem em RNAm virais. Com essa reproduo exagerada ocorre uma lise na clula, liberando os novos vrus que podem infectar outras bactrias e assim sucessivamente.

BACTERIOLOGIA CAPTULO SETE BACTERIFAGO

I. INTRODUO Bacterifagos (fagos) so parasitas intracelulares obrigatrios que se multiplicam dentro da bactria fazendo uso de algumas ou de tda a maquinria biossinttica do hospedeiro (i.e., vrus que infectam bactrias.). Existem muitas similaridades entre bacterifagos e vrus celulares animais. Assim, bacterifagos podem ser vistos como sistema-modlo para vrus de clulas animais. Alm disso, um conhecimento do ciclo de vida do bacterifago necessrio para compreender um dos mecanismos pelo qual genes bacterianos podem ser transferidos de uma bactria para outra. Houve uma poca em que se pensava que o uso de bacterifagos poderia ser uma maneira eficiente de tratar infeces bacterianas, mas logo ficou conhecido que fagos so rapidamente removidos do corpo e assim, eles teriam pouco valor clnico. Entretanto, bacterifagos so usados no laboratrio de diagnstico na identificao de bactrias patognicas (tipagem fgica). Embora a tipagem fgica no seja usada rotineiramente no laboratrio clnico, usada em laboratrios de referncia com fins epidemiolgicos. Recentemente, novo interesse tem se desenvolvido no possvel uso do bacterifago para o tratamento de infeces bacterianas e em profilaxia. No se sabe se o bacterifago ainda vai ser usado em medicina clnica. II. COMPOSIO E ESTRUTURA DO BACTERIFAGO A. Composio Embora diferentes bacterifagos possam conter material diferente, eles todos contm cidos nuclicos e protena. Dependendo do fago, o cido nuclico pode ser DNA ou RNA, mas no ambos e ele pode existir em vrias formas. Os cidos nuclicos dos fagos frequentemente contm bases modificadas no

usuais. Essas bases modificadas protegem o cido nuclico do fago contra nucleases que degradam cidos nuclicos alheios durante a infeco pelo fago. O tamanho do cido nuclico varia dependendo do fago. Os fagos mais simples tm cido nuclico o suficiente para codificar para 3-5 produtos gnicos de tamanho mdio, enquanto fagos mais complexos podem codificar para mais de 100 produtos gnicos. O nmero de protenas de diferentes tipos e a quantidade de cada tipo de protena na partcula fgica varia dependendo do fago. O fago mais simples tem muitas cpias de uma ou duas protenas diferentes, enquanto que fagos mais complexos podem ter muitos tipos diferentes. As protenas funcionam na infeco e para proteger o cido nuclico contra nucleases no ambiente. B. Estrutura Bacterifagos existem em muitos tamanhos e formas diferentes. As caractersticas bsicas estruturais dos bacterifagos esto ilustradas na Figura 1, que mostra o fago chamado T4. 1. Tamanho - T4 est entre os maiores fagos; mede aproximadamente 200 nm de comprimento e 80-100 nm de largura. Outros fagos so menores. A maioria dos fagos varia de tamanho de 24-200 nm de comprimento. 2. Cabea ou Capsdeo Todos os fagos contm uma estrutura em cabea que pode variar de tamanho e forma. Algumas so icosadricas (20 lados) outras so filamentosas. A cabea ou capsdeo composta de muitas cpias de uma ou mais protenas diferentes. Dentro da cabea est o cido nuclico. A cabea age como cobertura protetora do cido nuclico. 3. Cauda Muitos mas no todos os fagos tm caudas ligadas cabea do fago. A cauda um tubo co atravs do qual o cido nuclico passa durante a infeco. O tamanho da cauda pode variar e alguns fagos no tm a estrutura em cauda. Nos fagos mais complexos como o T4 a cauda envolvida por uma bainha contrtil que contrai durante a infeco da bactria. No fim da cauda, os fagos mais complexos como o T4 tm uma placa-base e uma ou mais fibras da cauda ligadas a ela. A placa-base e fibras da cauda esto envolvidas na ligao do fago clula bacteriana. Nem todos os fagos tm placa-base e fibras da cauda. Nesses casos outras estruturas esto envolvidas na ligao da partcula fgica bactria. III. INFECO DAS CLULAS HOSPEDEIRAS A. Adsoro A primeira etapa no processo de infeco a adsoro do fago clula bacteriana. Esta etapa mediada pelas fibras da cauda ou por algumas estruturas anlogas nos fagos que no tm essas fibras e isso reversvel. As fibras se ligam a receptores especficos na clula bacteriana e a especificidade do hospedeiro do fago (i.e. a bactria que pode ser infectada) normalmente determinada pelo tipo de fibras da cauda que o fago tem. A natureza do receptor bacteriano varia em bactrias diferentes. Entre os exemplos se incluem protenas na superfcie externa da bactria, LPS, pili, e lipoprotena. Esses receptores esto na bactria para outras finalidades e fagos se desenvolveram capazes de usar esses receptores para a sua infeco. B. Ligao irreversvel

A ligao do fago bactria via fibras da cauda fraca e reversvel. A ligao irreversvel do fago uma bactria mediada por um ou mais dos componentes da placa-base. Fagos que no tm placa-base tm outras maneiras de se ligarem firmemente clula bacteriana. C. Contrao da Bainha A ligao irreversvel do fago bactria leva contrao da bainha (daqueles fagos que tm uma bainha) e a fibra ca da cauda empurrada atravs do envoltrio bacteriano (Figura 2). Fagos que no tm bainhas contrteis usam outros mecanismos para fazer a partcula do fago atravessar o envoltrio bacteriano. Alguns fagos tm enzimas que digerem vrios componentes do envoltrio bacteriano. D. Injeo do cido Nuclico Quando o fago passa pelo envoltrio bacteriano o cido nuclico da cabea passa atravs da cauda ca e entra na clula bacteriana. Normelmente, o nico componente do fago que entra na clula o cido nuclico. O restante do fago permanece do lado de fora da bactria. H algumas excees a esta regra. Isso diferente de virus celulares de animais em que a maioria das partculas virais penetram na clula. Esta diferena provavelmente devida inabilidade da bactria de englobar materiais. IV. CICLO DE MULTIPLICAO DO FAGO A. Fagos Lticos ou Virulentos 1. Definio Fagos lticos ou virulentos so os que s podem se multiplicar em bactria e matam a clula por lise no final do ciclo de vida. 2. Ciclo de vida O ciclo de vida de um fago ltico est ilustrado na Figura 3 . a. Perodo de eclipse Durante a fase de eclipse, nenhuma partcula fgica infecciosa pode ser encontrada dentro ou fora da clula bacteriana. O cido nuclico do fago se apossa da maquinria biossinttica do hospedeiro e RNAm e protenas especificadas pelo fago so produzidas. Ocorre uma expresso ordenada de sntese macromolecular dirigida pelo fago, tal como se v em infeces por vrus animais. Os primeiros RNAm codificam para as primeiras protenas que so necessrias para a sntese de DNA do fago e para desligar o DNA, o RNA e a biossntese protica do hospedeiro. Em alguns casos as primeiras protenas na verdade degradam o cromossoma do hospedeiro. Depois que o DNA do fago feito, novos RNAm e novas protenas so feitas. As novas protenas so as protenas estruturais que compreendem as protenas do fago e tambm as protenas necessrias para a lise da clula bacteriana. b. Fase de Acmulo Intracelular Nesta fase o cido nuclico e protenas estruturais que foram feitas so montadas e partculas de fago infecciosas se acumulam dentro da clula. c. Lise e Liberao do Fago Aps certo tempo a bactria comea a lisar devido ao acmulo da protena de lise do fago e

fagos intracelulares so liberados no meio. O nmero de partculas liberadas por bactria infectada de cerca de 1000. 3. Ensaio do Fago Ltico a. Ensaio de placa Fagos lticos so enumerados em um ensaio de placa. Uma placa uma rea clara que resulta da lise da bactria (Figura 4). Cada placa formada por um nico fago infeccioso. A partcula infecciosa que produz uma placa chamada de unidade formadora de placa (ufp, ou em Ingls upf). B. Fago Lisognico ou Temperado 1. Definio Fagos lisognicos ou temperados so aqueles que podem se multiplicar pela via do cclo ltico ou podem entrar em um estado quiescente na clula. Neste estado quiescente a maior parte dos genes no so transcritos; o genoma do fago existe em um estado reprimido. O DNA do fago neste estado reprimido chamado de profago porque no um fago mas tem o potencial de produzir um fago. Na maioria dos casos o DNA do fago se integra no cromossomo do hospedeiro e replicado junto com o cromossoma e transmitido s clulas-filhas. A clula que contm o profago no afetada pela presena do profago e este estado lisognico pode persistir indefinidamente. A clula que abriga o profago chamada de lisgeno. 2. Eventos Que levam Lisogenia O Fago Prototipo: Lambda a. Circularizao do cromossomo do fago O DNA de lambda uma fita dupla linear com pequenas regies de fita simples nos terminais 5'. Esses terminais de fita simples so complementares (extremidades coesivas) e assim eles podem parear base a base e produzir uma molcula circular. No interior da clula as extremidades livres do crculo podem ser ligadas para formar um crculo covalentemente fechado como ilustrado na Figura 5. b. Recombinao stio-especfica Um evento recombinacional, catalizado por uma enzima codificada por um fago, ocorre entre um local especfico no DNA do fago circularizado e um local especfico no cromossomo do hospedeiro. O resultado a integreao do DNA do profago no cromossomo do hospedeiro como ilustrado na Figura 6. c. Represso do genoma do fago Uma protena codificada pelo fago, chamada de repressor, produzida, que se liga a um local especfico no DNA do fago, chamado de operador, e desliga a transcrio da maioria dos genes do fago EXCETO do gene repressor. O resultado um genoma do fago estavelmente reprimido, que est integrado no cromossomo do hospedeiro. Cada fago temperado vai reprimir apenas o seu prprio DNA e no o do outro fago, de forma que a represso muito especfica (imunidade superinfeco pelo mesmo fago). 3. Eventos que Levam ao Trmino da Lisogenia

Todas as vezes que uma bactria lisognica est exposta a condies adversas, o estado lisognico pode ser terminado. Este processo chamado de induo. Condies que favorecem o trmino do estado lisognico incluem: desecao, exposio a UV ou radiao ionizante, exposio a agentes mutagnicos qumicos, etc. Condies adversas levam produo de proteases (protena Rec A) que destri a protena repressora. Isso por sua vez leva expresso dos genes do fago, reverso do processo de integrao (exciso) e multiplicao ltica. 4. Ciclo Ltico vs Ciclo Lisognico A deciso de lambda sobre se entra no ciclo ltico ou lisognico quando ele entra na clula determinada pela concentrao do repressor e por outra protena do fago codificada pelo gene cro, no interior da clula. A protena Cro desliga a sntese do repressor e assim impede o estabelecimento da lisogenia. Condies ambientais que favorecem a produo de Cro ir levar ao ciclo ltico, enquanto que as que favorecem a produo do repressor ir favorecer a lisogenia. 5. Importncia da Lisogenia a. Modlo de transformao por virus animais Lisogenia um sistema modlo para a transformao viral de clulas animais. b. Converso lisognica Quando uma clula se torna lisogenizada, ocasionalmente genes extras carregados pelo fago se expressam na clula. Este processo chamado de converso lisognica ou converso fgica. Este fenmeno pode ter significado, clinicamente. Ex. Tem sido demonstrado que fagos lisognicos carregam genes que podem modificar o antgeno O de Salmonella, que um dos mais importantes antgenos para o qual a resposta imune dirigida. A produo de toxina pela Corynebacterium diphtheriae mediada por um gene que carregado por um fago. Somente aquelas linhagens que foram convertidas por lisogenia so patognicas.

O ciclo lisognico um dos dois ciclos usados por vrus para sua reproduo, sendo a outra o ciclo ltico. No ciclo lisognico, o vrus insere seu material gentico na bactria ou na clula hospedeira, onde o DNA viral incorpora-se ao DNA da clula infectada. Isto , o DNA viral torna-se parte do DNA da clula infectada. Uma vez infectada, a clula continua suas operaes normais, como reproduo e ciclo celular. Durante o processo de diviso celular, o material gentico da clula, juntamente com o material gentico do vrus que foi incorporado, sofrem duplicao e em seguida so divididos equitativamente entre as clulas-filhas. Assim, uma vez infectada, uma clula comear a transmitir o vrus sempre que passar por mitose e todas as clulas estaro infectadas tambm. Sintomas causados por um vrus que se reproduz desta maneira, em um organismo multicelular podem demorar a aparecer. Doenas causadas por vrus lisognico tendem

a ser incurveis. Alguns exemplos incluem a AIDS e herpes.Vale lembrar que a doena incorporada na clula pode se "despertar" por algum motivo como radiao, quimioterapia e etc. Caso a doena for grave, pode levar a bito. Aps a penetrao, o material gentico viral codifica enzimas que destroem o DNA da clula e passa a comand-la. O ciclo ltico utilizando-se dos recursos celulares, o vrus promove uma intensa duplicao do prprio material gentico e a produo de novos capsdios. O material gentico duplicado do vrus , ento, envolto dos capsdios e novos vrus ento completamente formados. Ocorre ruptura (lise)da clula, liberando uma imensa quantidade de vrus aptos a reiniciar um novo processo de infeco. No ciclo ltico, o vrus introduz seu material gentico na clula, que prontamente produz cpias do vrus. No ciclo lisognico, o material gentico viral incorporado ao material gentico bacteriano e no h, necessariamente, destruio celular. Esse ciclo tem sido usado como ferramenta molecular, permitindo que, por meio de vrus hbridos, os humanos introduzam os novos genes nas bactrias, que passam a produzir as protenas relacionadas a esses genes, como a insulina.