UNIVERSIDADE FEDERAL DO PAMPA CURSO DE FARMCIA DISCIPLINA DE METODOLOGIA DA PESQUISA PROFESSORA FABIANE FERREIRA

Ao antagonistica de Lactobacillus plantarum AJ2 em relao a micro-organismos associados toxi infeces alimentares e outras doenas infecciosas

Autores: Taciane Maia Barbosa Gabriel Gollino Mariana Freitas Orientador: Maristela

Uruguaiana, 03 de Janeiro de 2012

SUMRIO

SUMARIO

RESUMO

Bacteriocinas so compostos antimicrobianos, produzidos por determinadas bactrias cido lcticas (BAL), os quais podem antagonizar o crescimento de micro-organismos deteriorantes e/ou patognicos. As bacteriocinas, por serem de natureza peptdica, geralmente so inativadas por enzimas proteolticas. Lactobacillus plantarum AJ2, BAL objeto deste estudo, foi isolada a partir da microbiota natural de salames artesanais, e apresentou propriedades tecnolgicas como culturas starter, assim como, atividade antagonstica contra os patognos Listeria monocytogenes ATCC 7644, Staphylococcus aureus ATCC 13565, Salmonella enteritidis ATCC 16028, Escherichia coli O157:H7 ATCC 12900, Micrococcus luteus ATCC 9341 e Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, espcies associadas a intoxicao alimentar e hospitalar. Neste sentido, realizouo estudo tem com o objetivo de identificar a natureza protica da ao antagonstica e assim, a possibilidade de presena de bacteriocina produzida pela cepa L. plantarum AJ2.

INTRODUO

Bactrias cido lcticas (BAL) constituem um grupo de micro-organismos amplamente distribudos na natureza, produtores de uma variedade de compostos antimicrobianos, incluindo: cidos, diacetil, perxido de hidrognio, dixido de carbono, lcool, aldedo e bacteriocinas. Dentre estes, as bacteriocinas tm atrado grande interesse na indstria de alimentos, enquanto potencial de biopreservao. As bacteriocinas so geralmente inativadas por enzimas proteolticas, incluindo as de origem pancretica (tripsina e a-quimiotripsina). Lactobacillus plantarum AJ2, BAL objeto de estudo no presente trabalho, foi isolada a partir da microbiota natural de salames artesanais, que apresentou propriedades tecnolgicas como culturas starter e tambm atividade antagonstica contra os patognos Listeria monocytogenes ATCC 7644, Staphylococcus aureus ATCC 13565, Salmonella enteritidis ATCC 16028, Escherichia coli O157:H7 ATCC 12900, Micrococcus luteus ATCC 9341 e Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, cuja as espcies esto associadas a intoxicao alimentar ou hospitalar. Considerando os referidos estudos, o presente estudo ser realizado com o objetivo de identificar a natureza protica e possibilidade de presena de bacteriocina produzida pela cepa L. plantarum AJ2.

JUSTIFICATIVA

Realizando-se o devido estudo tem-se por objetivo de identificar a natureza protica e possibilidade de presena de bacteriocina produzida pela cepa L. plantarum AJ2. Como esta certeza, o uso desta bacteriocina aplica-se a um amplo espectro de possibilidades, desde sua utilizao na industria alimentcia, at mesmo na elaborao de antibiticos potentes e com meio de ao diferenciado.

OBJETIVOS

O objetivo principal do estudo a identificao da natureza protica e possibilidade de presena de bacteriocina produzida pela cepa L. plantarum AJ2.

PRSSUPOSTOS TERICOS

Estrutura terica da pesquisa e seus aspectos tem como base artigos e resumos publicados por nossa orientadora e parceiros de pesquisa da mesma.

METODOLOGIA Utilizou-se o protocolo spot-on-the-lawn, onde 2,0 L de cultura overnight de L. plantarum AJ2 foi inoculado sobre placas contendo gar MRS, em trs diferentes regies das mesmas. Em outra regio, foi colocado um cilindro vazado, de ao inoxidvel (6,0 mm de dimetro), ao qual foi adicionado 200 L de soluo Doripenem a 3,0 g. mL-1. Em seguida, junto a uma das regies de cultura L. plantarum foi adicionado 10 L da tripsina (enzima proteoltica), em outra regio, 10 Lde gua destilada como controle. Ento, a superfcie das placas foi coberta com 15 mL de gar TSB (0,8%) inoculado previamente com cada uma das culturas patognicas citadas acima (cada cultura com a populao em torno de 109 UFC/mL). As placas foram novamente incubadas a 36C por 24 horas. As bactrias M. luteus ATCC 9341 e S. epidermidis ATCC 12228, sensveis ao inibitria do antibitico Doripenen, foram utilizadas como controle positivo. Um halo de inibio formado ao redor do crescimento do micro-organismo teste indicou a atividade antagonista s linhagens patognicas e o dimetro do mesmo foi expresso em milmetros (mm). L. plantarum AJ2 manifestou efeito antagonstico frente s seis linhagens patognicas testadas, inclusive com as duas culturas Gram negativas. Observou-se tambm a no inibio das culturas patognicas prximas a regio de cultura de AJ2 com a enzima, verificando-se a natureza protica da ao antagonstica. As medidas dos halos de inibio corresponderam a semelhante resultados, em relao ao medicamento antibitico Doripenen o que sugere estudos adicionais quanto a medida da atividade antagonstica promovida pela BAL.

RECURSOS

Os recusos a serem utilizados so basicamente de origem de empresas como EMBRAPA, as quais possuem interesse assduo no desenvolvimento e resultado de pesquisas com o carter desta.

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