Você está na página 1de 41

Metabolismo de Protenas

Julio Tirapegui Marcelo Macedo Rogero

INTRODUO
O estudo das protenas tem importncia fundamental na rea da nutrio, uma vez que constitui um nutriente relevante para a sntese de protenas funcionais e estruturais no organismo. As protenas corporais esto constante e simultaneamente sendo sintetizadas e degradadas, processo este denominado turnover protico. O constante turnover r de protenas fornece o pool de aminocidos plasmticos l que esto em constante equilbrio com o mecanismo de sntese protica. Alm disso, os aminocidos que so os constituintes das protenas podem, isoladamente, atuar como precursores de cidos nuclicos, hormnios e outras molculas de importncia fisiolgica. No entanto, necessrio salientar que a funo principal dos aminocidos diz respeito ao mecanismo de sntese protica. Os aminocidos liberados em excesso oriundos da protelise tecidual intensa so reutilizados e tm numerosos destinos. Alm da sntese protica j citada, que a prioridade do organismo, a cadeia carbnica pode ser utilizada como fonte de energia ou convertida em glicose (gliconeognese). Por outro lado, o grupo amino, que txico para o organismo, convertido em uria no fgado e, posteriormente, eliminado na urina. No organismo no existe reserva de aminocidos livres ou de protenas, sendo que uma ingesto protica superior s necessidades do organismo ser metabolizada. Por outro lado, na deficincia protica, em casos extremos de desnutrio protica ou em estados catablicos, o organismo recorre a mecanismos adaptativos, os quais so regulados pela presena de nutrientes ou de hormnios tanto anablicos quanto catablicos , com a finalidade

de preservar a massa protica. Quando esse processo muito intenso, ocorrem alteraes bioqumicas, fisiolgicas e morfolgicas, especialmente nos grupos populacionais denominados vulnerveis, como crianas pr-escolares, gestantes, nutrizes e idosos. As recomendaes de ingesto diria de protenas indicam uma quantidade especfica para a manuteno da sade em indivduos normais. Contudo, uma condio fundamental para se garantir as necessidades de protena de um organismo que estejam satisfeitas as suas necessidades energticas, uma vez que a deficincia calrica faz com que o organismo desvie as protenas de suas funes plsticas ou reparadoras normais para a produo de energia. A necessidade de ingesto de protenas e de aminocidos depende das condies fisiolgicas dos indivduos. Por exemplo, em relao ao exerccio fsico, h maior necessidade de ingesto protica na dieta, que influenciada por alguns fatores, dentre os quais destacam-se a intensidade, a durao e o tipo de exerccio; o contedo de glicognio; o balano energtico; o gnero; a idade; e o tempo de treinamento. Neste captulo sero abordados aspectos bsicos e fundamentais sobre o metabolismo protico e de aminocidos e seus respectivos mecanismos de controle. Tambm so enfocados aspectos metablicos em situaes fisiolgicas especiais, tais como jejum, estados catablicos, desnutrio protica e exerccio de fora. Todos esses aspectos so discutidos com a finalidade de contribuir com informaes atualizadas do papel relevante de protenas e de aminocidos no organismo, visando, desse modo, propiciar uma melhor compreenso da atuao desses nutrientes no estado nutricional do indivduo.

DeAngelis06.indd 69

CAPTULO
18/5/2007 10:13:23

70

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

AMINOCIDOS
O primeiro aminocido a ser descoberto foi a asparagina, em 1806, e o ltimo aminocido foi a treonina, em 1938. Os aminocidos apresentam nomes triviais ou comuns, em alguns casos derivados da fonte a partir da qual foram inicialmente isolados. A asparagina foi primeiramente isolada do aspargo; o glutamato do glten de trigo; a tirosina do queijo (do grego tyros, que significa queijo); e a glicina, do grego glycos, que significa doce, devido ao seu sabor adocicado1. Aminocidos so formados por carbono, hidrognio, oxignio, nitrognio e, ocasionalmente, por enxofre; so as unidades estruturais bsicas de todas as protenas. Os aminocidos que so incorporados nas protenas de mamferos so -aminocidos, com exceo da prolina, que um -iminocido. Um -aminocido consiste de um grupo amino, um grupo carboxila, um tomo de hidrognio e um grupo R (cadeia lateral), sendo que todos esto ligados a um tomo de carbono, denominado carbono . Embora existam muitos aminocidos na natureza (> 300), apenas 20 esto presentes na composio das protenas, sendo que cada aminocido apresenta uma cadeia lateral diferente ligada ao tomo do carbono . Os mesmos 20 L--aminocidos ocorrem vrias vezes nas protenas, incluindo aquelas produzidas em bactrias, plantas e animais, sendo que para cada um desses aminocidos existe ao menos um cdon no cdigo gentico. Apesar da escolha desses 20 aminocidos ter ocorrido provavelmente ao acaso no curso da evoluo, a versatilidade qumica que os mesmos fornecem vital. Por exemplo, cinco dos 20 aminocidos possuem cadeias laterais que podem apresentar uma determinada carga, enquanto os demais no so carregados, porm so reativos de uma maneira especfica. Cabe ressaltar que as propriedades das cadeias laterais dos aminocidos, quando agregadas, determinam as propriedades das protenas

constitudas por esses aminocidos, e so a base de todas as funes diversas e complexas das protenas1,2. Aminocidos em solues com pH neutro so predominantemente ons dipolares; apenas ocasionalmente so molculas no ionizadas. Na forma dipolar de um aminocido, o grupo amino est protonado (NH3+) e o grupo carboxila est dissociado (COO). O estado de ionizao de um aminocido varia com o pH. Em soluo cida (por exemplo, pH = 1), o grupo carboxila est no ionizado (COOH) e o grupo amino est ionizado (NH3+). Em solues alcalinas (por exemplo, pH = 11), o grupo carboxila est ionizado (COO) e o grupo amino est no ionizado (NH2) (Fig. 6.1). Em protenas, quase todos estes grupos carboxila e amino combinam-se por ligao peptdica e no esto disponveis para reao qumica (exceto para a formao de pontes de hidrognio). Desse modo, a natureza das cadeias laterais que fundamentalmente determina o papel que um aminocido desempenha em uma protena3,4,5. Para representar seqncias de aminocidos em protenas, abreviaes de uma e de trs letras para aminocidos tm sido estabelecidas. Cabe ressaltar que as abreviaes de trs letras do cido asprtico (Asp) e do cido glutmico (Glu) no devem ser confundidas com aquelas referentes aos aminocidos asparagina (Asn) e glutamina (Gln), respectivamente. A determinao experimental de aminocidos presentes em uma protena por procedimentos qumicos no consegue facilmente diferenciar entre Asn e Asp, ou entre Gln e Glu, devido aos grupos amida presentes na Asn e na Gln serem hidrolisados e gerarem Asp e Glu, respectivamente. Os smbolos Asx para Asp ou Asn, e Glx para Glu ou Gln indicam esta ambigidade. Um similar esquema utilizado com abreviaes com uma letra para Asp ou Asn, e Glu ou Gln (Tabela 6.1)4.

NH3+ H C R
Forma predominante em pH = 1

NH3+ COOH
H+

NH2 COO
H+

C R

C R

COO

Forma predominante em pH = 7

Forma predominante em pH = 11

FIG. 6.1 Estados de ionizao de um aminocido de acordo com o pH.

DeAngelis06.indd 70

18/5/2007 10:13:24

Metabolismo de Protenas

71

TABELA 6.1 Abreviaes de Aminocidos com Uma e Trs Letras. Adaptado de DEVLIN 4
Abreviao Aminocido Alanina Arginina Asparagina Aspartato Asparagina ou Aspartato Cistena Glicina Glutamina Glutamato Glutamina ou Glutamato Histidina Isoleucina Leucina Lisina Metionina Fenilalanina Prolina Serina Treonina Triptofano Tirosina Valina Trs letras Ala Arg Asn Asp Asx Cys Gly Gln Glu Glx His Ile Leu Lys Met Phe Pro Ser Thr Trp Tyr Val Uma letra A R N D B C G Q E Z H I L K M F P S T W Y V

Os aminocidos cistena, tirosina e prolina so sintetizados no organismo a partir dos aminocidos metionina, fenilalanina e glutamato, respectivamente. O aminocido arginina designado como dispensvel em humanos. Evidncias sugerem que este aminocido sintetizado no organismo a partir do aminocido glutamato. O grupo carboxila terminal do glutamato inicialmente fosforilado e, em uma etapa subseqente, reduzido, o que gera glutamato -semialdedo e fosfato. Esta etapa seguida por uma reao de transaminao, acarretando a formao de ornitina, que convertida para arginina por meio das enzimas do ciclo da uria1,3,6. A enzima glutamina sintetase catalisa a sntese dependente de ATP do aminocido glutamina, a partir do glutamato e da amnia. Nessa reao, o ATP convertido em ADP mais fosfato inorgnico (Pi). A enzima asparagina sintetase catalisa a sntese dependente de ATP do aminocido asparagina a partir do aspartato, utilizando a glutamina como fonte de grupo amino. Sendo assim, ao doar o grupo amino, a glutamina convertida para glutamato. Nessa reao, o ATP convertido em AMP mais pirofosfato inorgnico (PPi)8-10.

Aminocidos: Funes e Classificao Nutricional


Alm de participarem na sntese protica e no metabolismo energtico, quase todos os aminocidos apresentam funes especficas no organismo. O triptofano, por exemplo, um precursor da vitamina niacina e do neurotransmissor serotonina; a metionina o principal doador de grupos metlicos para a sntese de determinados compostos, tais como colina e carnitina. A metionina tambm um precursor de cistena e de outros compostos que contm enxofre. A fenilalanina precursora da tirosina, a qual responsvel pela formao de tiroxina e epinefrina. Arginina e citrulina esto envolvidas especificamente na sntese da uria no fgado. A glicina, o mais simples dos aminocidos, se combina com alguns tipos de compostos txicos, convertendo essas substncias em compostos no txicos, que so excretados pela urina. tambm usada na sntese do ncleo porfirnico da hemoglobina e constituinte de um dos cidos biliares. A histidina essencial para a sntese de histamina, composto que causa vasodilatao no sistema circulatrio. Arginina, glicina e metionina se unem a um grupo fosfato para formar o fosfato de creatina, um importante reservatrio de ligao fosfato de alta energia na clula. A glutamina o aminocido livre mais abundante no plasma e no tecido muscular, e utilizada em altas taxas por clulas de diviso rpida, incluindo leuccitos e entercitos, para fornecer energia e favorecer a biossntese de nucleotdeos. Alm disso, o cido

Biossntese de Aminocidos Dispensveis


Os aminocidos dispensveis podem ser sintetizados no organismo por vias que so compartilhadas, em parte, pelo catabolismo de aminocidos. Glutamato, aspartato e alanina so sintetizados por meio de reaes de transaminao. O aminocido serina sintetizado a partir de um intermedirio da via glicoltica, o 3-fosfoglicerato, que oxidado para 3-fosfoidroxipiruvato, por uma enzima que utiliza NAD. O 3-fosfoidroxipiruvato ento transaminado para gerar 3fosfoserina que, por meio de uma fosfatase, hidrolisado para produzir serina. A glicina sintetizada a partir da serina pela ao da enzima serina hidroximetiltransferase3,6-8.

DeAngelis06.indd 71

18/5/2007 10:13:24

72

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

glutmico precursor do neurotransmissor denominado cido gama-amino butrico (Fig. 6.2)6,11,12. Aminocidos podem ser classificados nutricionalmente em dois grupos: indispensveis (essenciais) e dispensveis (no-essenciais). Os nove aminocidos indispensveis so aqueles cujos esqueletos de carbono no podem ser sintetizados pelo organismo, necessitando ser obtidos pela dieta. Contudo, os diversos dados reportados recentemente sobre o metabolismo intermedirio e as caractersticas nutricionais dos aminocidos dispensveis tm contribudo para uma discusso acerca da definio desses compostos13-17.

Segundo Laidlaw e Kopple18, os aminocidos dispensveis podem ser divididos em duas classes: verdadeiramente dispensveis e condicionalmente indispensveis (Tabela 6.2). Cinco aminocidos (alanina, cido asprtico, asparagina, cido glutmico e serina) so denominados dispensveis, uma vez que esses podem ser sintetizados no organismo a partir de outros aminocidos ou de outros metablitos de complexos nitrogenados. Alm disso, seis aminocidos (arginina, cistena, glutamina, glicina, prolina e tirosina) so considerados condicionalmente indispensveis, uma vez que so sintetizados a partir de outros aminocidos e/ou sua sntese limitada sob condies fisiopatolgicas especiais.

FIG. 6.2 Formao de compostos fisiologicamente importantes derivados de aminocidos.

DeAngelis06.indd 72

18/5/2007 10:13:25

Metabolismo de Protenas

73

Portanto, a designao aminocido condicionalmente essencial caracteriza que em condies normais o organismo pode sintetizar estes aminocidos para alcanar a necessidade metablica. De outra parte, em condies fisiolgicas ou fisiopatolgicas especficas ocorre a necessidade de ingesto desses aminocidos, necessidade esta que ainda no foi determinada com exatido e que, presumivelmente, varie em grande extenso de acordo com a condio especfica. Alm disso, a designao condicionalmente indispensvel indica, em princpio, que esses aminocidos podem ser necessrios na dieta, a menos que quantidades suficientes de seus precursores estejam disponveis e/ou as atividades de enzimas envolvidas em vias metablicas relevantes sejam suficientes para promover a sntese desses aminocidos em uma taxa metablica significativa19-23.

peptdeo bradicinina representado da seguinte maneira: Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg. A extremidade lateral direita da cadeia representa o terminal carboxila enquanto a extremidade esquerda representa o grupo amino terminal. A seqncia de aminocidos de um determinado polipeptdeo ou protena pode apresentar variaes, as quais so controladas geneticamente1,3,24.

PROTENAS
No ser humano, as informaes genticas esto contidas na estrutura do DNA, que determina o tipo e a quantidade de protenas sintetizadas em cada clula do organismo. Por sua vez, as protenas so responsveis pela sntese de todos os outros componentes celulares, enquanto o

TABELA 6.2 Aminocidos Indispensveis, Dispensveis e Condicionalmente Indispensveis na Dieta Humana. (Modificado de Laidlaw e Kopple18)
Indispensveis Histidina Isoleucina Leucina Lisina Metionina Fenilalanina Treonina Triptofano Valina
aAminocidos condicionalmente indispensveis so definidos como aqueles que necessitam ser ingeridos por meio de uma fonte diettica quando a sntese endgena no alcana a necessidade metablica.

Dispensveis Alanina Acido asprtico Asparagina cido glutmico Serina

Condicionalmente Indispensveisa Arginina Cistena Glutamina Glicina Prolina Tirosina

Precursores de Condicionalmente Indispensveis Glutamina/glutamato, aspartato Metionina, serina cido glutmico, amnia Serina, colina Glutamato Fenilalanina

PEPTDEOS
Dois aminocidos unidos formam um dipeptdeo; a unio de trs aminocidos resulta na formao de um tripeptdeo e assim sucessivamente. Cada aminocido em uma cadeia polipeptdica denominado como um resduo de aminocido. Uma cadeia com at 100 aminocidos unidos denominada polipeptdeo, enquanto valores superiores caracterizam uma protena9,24. A seqncia de aminocidos de uma determinada protena representada por um arranjo seqencial de abreviaes de cada aminocido. Por exemplo, o poli-

material gentico apenas codifica as protenas com as suas respectivas seqncias de aminocidos. DNA e RNA so cadeias de nucleotdeos muito similares quimicamente. Em contraste, protenas so formadas por uma variedade de 20 aminocidos diferentes, cada um com uma caracterstica qumica prpria. Esta variedade permite enorme versatilidade nas propriedades qumicas de diferentes protenas, o que poderia explicar a escolha por protenas ao longo do processo evolutivo ao invs de molculas de RNA para catalisar a maioria das reaes celulares2,25. Protenas so as mais abundantes macromolculas biolgicas e representam o principal componente estrutural

DeAngelis06.indd 73

18/5/2007 10:13:29

74

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

e funcional de todas as clulas do organismo, sendo que aproximadamente metade do peso seco de uma clula corresponde protena. Alm disso, no organismo humano, aproximadamente 18% da massa corporal est na forma de protena. Apesar da enorme diversidade de enzimas e de outras protenas no organismo, quase 50% do contedo protico total do ser humano est presente em apenas quatro protenas (miosina, actina, colgeno e hemoglobina). O colgeno, em particular, compreende aproximadamente 25% do total2,24.

Estrutura Protica
Protenas so molculas complexas que apresentam estruturas primria, secundria, terciria e quaternria. A estrutura primria diz respeito ao tipo e seqncia de aminocidos na molcula protica, que determinada geneticamente. A secundria formada por associao de regies prximas da cadeia polipeptdica e mantida custa das pontes de hidrognio. Na terciria, a molcula protica se arranja em estruturas globulares utilizando diversos tipos de ligaes, como co-valentes, hidrofbicas, inicas, eletrostticas e pontes de hidrognio. Essas ltimas so representadas pelas pontes de dissulfetos entre os resduos de cistena. Finalmente, a forma como diversas estruturas tercirias ou subunidades se associam a chamada estrutura quaternria26,27.

Intracelularmente, a correta conformao de muitas protenas obtida apenas com o auxlio de um grupo diverso de protenas, denominadas chaperonas, que no alteram o resultado final do processo de dobramento, mas previnem a agregao prvia de protenas recm-sintetizadas, antes que assumam sua forma ativa final. Exemplos bem conhecidos incluem as protenas de choque trmico, que so produzidas pelas clulas como resultado de um estresse trmico. Os exemplos clssicos so as protenas da classe hsp-70 (Heat Shock Protein), assim nomeadas em funo de uma protena de 70 kD que aparece no citossol de clulas de mamferos aps um choque trmico (Fig. 6.3). As chaperonas tambm esto envolvidas na insero de protenas em membranas e no transporte de protenas atravs de membranas. Alm disso, a hidrlise de ATP necessria durante o dobramento das protenas pelas chaperonas. Um subgrupo de chaperonas, conhecido como chaperoninas, tambm chamadas de hsp-60 por causa de seus pesos moleculares de 60 kD, so estruturas tubulares, com mltiplas subunidades, que participam do processo de dobramento de uma protena. As chaperoninas formam um envoltrio de subunidades de 60 kD em torno da protena nascente, para proteg-la durante o processo de dobramento1,3. Todas essas atividades podem auxiliar na funcionalidade de uma protena; contudo, a falha no dobramento correto de uma protena geralmente acarreta em rpida degradao da protena em questo, e o acmulo de protenas com

FIG. 6.3 Chaperonas (HSP 70 = protenas de choque trmico de 70 kD). (Fonte: Nelson e Cox1.)

DeAngelis06.indd 74

18/5/2007 10:13:29

Metabolismo de Protenas

75

conformaes errneas pode resultar em agregao de protenas e em doenas graves28.

Desnaturao Protica
Umas das caractersticas especficas das protenas a resposta para calor, lcool e outros tratamentos que afetam as suas estruturas quaternrias, tercirias e secundrias. Esta resposta caracterstica denominada desnaturao. A desnaturao resulta do desdobramento de uma molcula protica, o que promove a clivagem das pontes de hidrognio e das associaes entre os grupos funcionais; como resultado, a estrutura tridimensional perdida. A desnaturao afeta diversas propriedades da molcula de protena, dentre as quais destacam-se: i. alterao da forma fsica; ii. diminuio da solubilidade em gua; iii. possvel perda da reatividade com outras protenas24. Quando desnaturadas, as protenas perdem a suas funes biolgicas, sendo que o calor promove a desnaturao da maioria das protenas. Grande parte das protenas presentes nos alimentos so desnaturadas a 60C. Um exemplo de desnaturao protica a coagulao da clara de ovo quando aquecida. A desnaturao, a menos que extrema, no afeta a composio de aminocidos de uma protena e, de fato, pode tornar esses aminocidos mais disponveis para o organismo, uma vez que o aquecimento provoca o desdobramento ou desnovelamento da protena, o que aumenta a exposio da cadeia polipeptdica para a ao das enzimas proteolticas digestivas. Por esse motivo, muitas protenas aquecidas apresentam maior valor biolgico em relao s mesmas protenas quando consumidas sem tratamento trmico prvio. O processo de desnaturao moderado pode ser revertido fenmeno denominado renaturao , ou seja, a protena renaturada adquire sua forma e sua atividade originais24.

protenas, que combinam a protena com polissacardeos complexos, tais como a mucina, encontrada nas secrees gstricas, e a albumina (clara do ovo); as lipoprotenas, encontradas no plasma, que se unem com lipdios, trigliacilgliceris, colesterol e fosfolipdios. Tm-se ainda como protenas conjugadas as fosfoprotenas, formadas pela ligao ster entre o cido fosfrico e as protenas (como, por exemplo, na casena do leite); e as metaloprotenas, tais como a ferritina e a hemosiderina, que apresentam metais unidos s suas estruturas6,26,27. As protenas tambm podem ser divididas em fibrosas e globulares. As fibrosas incluem a queratina, que a protena do cabelo e das unhas; a fibrina do sangue; a miosina do msculo; e o colgeno, principal componente do tecido conjuntivo. As protenas globulares so solveis e facilmente desnaturadas, sendo encontradas principalmente nos fluidos orgnicos e nos tecidos. As protenas globulares de interesse em nutrio so as casenas do leite, a albumina no ovo e as albuminas e globulinas no sangue, no plasma e na hemoglobina, bem como as globulinas de leguminosas, como as do feijo e da soja9,11,26,27. As protenas tambm podem ser classificadas de acordo com o seu valor nutricional. As protenas que contm aminocidos indispensveis nas propores necessrias ao organismo so denominadas protenas completas, as quais so principalmente as de origem animal (ovos, leite e derivados, carnes, pescados). Protenas que apresentam deficincia em um ou mais aminocidos indispensveis so denominadas protenas incompletas ou desbalanceadas. Essas protenas so geralmente de origem vegetal, apesar de algumas protenas animais serem tambm incompletas. A protena do tecido conectivo denominada colgeno, a partir da qual preparada a gelatina, tem deficincia do aminocido triptofano; zena, a protena do milho, baixa em lisina e triptofano. Quando a seleo de alimentos limitada e h uma escassez de alimentos ricos em protenas de alto valor biolgico, as protenas de origem vegetal incompletas podem ser combinadas de tal modo que todos os aminocidos indispensveis sejam fornecidos. Por exemplo, protenas de cereais (arroz) combinadas com aquelas presentes nas leguminosas (feijo) podem estar na mesma refeio para que todos os aminocidos indispensveis sejam ingeridos. Quando essas protenas so combinadas e consumidas em quantidades suficientes, as necessidades individuais de aminocidos so atendidas. Esta combinao de protenas incompletas deve ser consumida dentro de um perodo de tempo relativamente curto (< 4 horas) para a obteno das quantidades apropriadas e necessrias de aminocidos. O mximo benefcio alcanado quando a combinao de protenas consumida ao mesmo tempo24,27.

Classificao das Protenas


As protenas, devido sua complexidade estrutural, so difceis de serem rigorosamente classificadas. Podem ser agrupadas em: simples, quando por hidrlise fornecem apenas aminocidos; e conjugadas, quando do origem a outros compostos alm dos aminocidos. As protenas conjugadas so combinaes de uma molcula no protica unida a uma molcula protica. Entre as primeiras pode-se citar como exemplo: albuminas, globulinas, glutelinas, prolaminas, entre outras. Em relao s conjugadas, tm-se as nucleoprotenas, encontradas nos cidos ribonuclico (RNA) e desoxirribonuclico (DNA); as mucoprotenas e as glico-

DeAngelis06.indd 75

18/5/2007 10:13:34

76

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

Funes das Protenas


Alm do sistema de classificao de protenas descrito, as protenas podem ser classificadas bioquimicamente, de acordo com as suas funes. As protenas desempenham funes vitais em praticamente todos os processos biolgicos. A relevncia e o escopo das funcionalidades das protenas podem ser exemplificados como segue4,7,25,28: 1. Catlise enzimtica: praticamente todas as reaes qumicas em sistemas biolgicos so catalisadas por macromolculas denominadas enzimas. Algumas dessas reaes, como hidratao do dixido de carbono, so relativamente simples. Contudo, outras reaes, como a replicao de um cromossomo completo, so altamente complexas. Enzimas exibem um enorme poder cataltico. Geralmente aumentam as taxas de reaes ao menos em um milho de vezes. Alm disso, as reaes qumicas in vivo raramente ocorrem em taxas perceptveis na ausncia de enzimas. Cabe destacar que praticamente todas as enzimas conhecidas so protenas. Desse modo, as protenas so fundamentais na determinao do padro de transformaes qumicas em sistemas biolgicos. 2. Transporte e estoque: muitas pequenas molculas e ons so transportados por protenas especficas. Por exemplo, hemoglobina transporta oxignio em eritrcitos, enquanto a mioglobina transporta oxignio no tecido muscular. O ferro transportado no sangue pela protena transferrina e estocado no fgado na forma de um complexo com outra protena denominada ferritina. 3. Contrao muscular: as protenas so o principal componente do tecido muscular. A contrao muscular realizada por meio do movimento de deslizamento de dois tipos de filamentos de protenas (actina e miosina). 4. Proteo imunolgica: anticorpos so protenas altamente especficas que reconhecem e ligam-se com antgenos, como vrus e bactrias. 5. Gerao e transmisso do impulso nervoso: a resposta da clula nervosa para um estmulo especfico mediada por protenas denominadas receptores, que podem ser estimulados por molculas pequenas e especficas, como acetilcolina, que atua na transmisso do impulso nervoso nas sinapses. 6. Regulao hormonal: muitos hormnios so protenas ou peptdeos. Dentre os hormnios proticos incluemse a insulina, o hormnio do crescimento, a prolactina, o hormnio luteinizante, o hormnio folculo estimulante e a tireotropina. Muitos hormnios polipeptdicos apresentam baixo peso molecular (< 5.000) e so

designados como peptdeos. Importantes hormnios peptdicos incluem adrenocorticotrpico, antidiurtico, glucagon e calcitonina. 7. Expresso gnica: protenas controlam e regulam a transcrio e a traduo gnicas. Esse fato ocorre por meio de histonas que esto intimamente associadas ao DNA , ou por meio de fatores de represso ou de fatores que aumentam a transcrio gnica, ou tambm por protenas que formam parte das partculas de RNA heteronuclear e dos ribossomos. 8. Estrutural: dentre as protenas que participam da funo estrutural do organismo destacam-se o colgeno e a elastina, que formam a matriz de ossos e ligamentos, fornecendo fora e elasticidade estrutural para os rgos e o sistema vascular.

Qualidade da Protena
A qualidade de uma protena refere-se sua capacidade de fornecer os aminocidos necessrios para o organismo. Alguns alimentos contm altos teores de protena, enquanto outros contm baixos teores. O fato de um alimento especfico ser uma fonte rica de protenas no implica que seja suficiente para sustentar o crescimento ou a manuteno do organismo. A gelatina, por exemplo, uma protena que pode ser obtida pura e na forma de p; contudo, a utilizao de gelatina como alimento e nica fonte de protena no fornece os aminocidos necessrios ao organismo. Conseqentemente, uma dieta baseada em gelatina como nica fonte de protena, excluindo outras fontes proticas, no permite a manuteno da vida devido gelatina ser uma protena de baixa qualidade, uma vez que deficiente no aminocido triptofano6,17,29-33. A qualidade de uma protena pode ser expressa de acordo com o escore qumico, a razo de eficincia protica (PER), o valor biolgico (VB) e o saldo de utilizao protica (NPU). Esses parmetros referem-se a diferentes testes utilizados para definir a qualidade de uma protena. O escore qumico refere-se somente a propriedade da protena em questo, enquanto a PER, o VB e o NPU referem-se a relao entre a protena da dieta e o consumidor. Os valores de PER, VB e NPU dependem das propriedades tanto da protena em questo quanto da necessidade do indivduo29,30,34,35. A determinao do valor do escore qumico dependente da comparao entre o contedo de aminocidos indispensveis presentes na ovalbumina (ovo), que utilizada como protena de referncia, e da protena do alimento em questo. A ovalbumina considerada ideal e nutricionalmente completa. O teste apresenta diversas etapas. As protenas devem ser purificadas e hidrolisadas em aminocidos, sendo

DeAngelis06.indd 76

18/5/2007 10:13:35

Metabolismo de Protenas

77

estes submetidos anlise por meio de um analisador de aminocidos. Sendo assim, o contedo dos vrios aminocidos presentes nas duas protenas ento comparado. O aminocido na protena teste que est presente na menor concentrao, em uma base percentual, denominado aminocido limitante da protena. O valor da porcentagem o escore qumico. Por exemplo, a quantidade de lisina presente na protena da aveia 51% daquela presente na protena do ovo. Portanto, o escore qumico da protena da aveia de 516,31,36. As condies para a determinao da PER devem ser padronizadas. Estudos para a determinao da PER exigem animais em fase de crescimento. Os animais utilizados devem ser recm-desmamados; a protena utilizada em uma concentrao de 10% do peso seco da rao. A PER da protena teste deve ser sempre comparada com aquela da ovolbumina, a qual deve ser utilizada na rao dos animais do grupo controle. O ganho de peso e o consumo de rao so verificados durante o perodo de trs semanas. Por exemplo, a PER para a protena do ovo (3,92) aproximadamente duas vezes aquela da protena da soja (2,32). Cabe ressaltar que um dos problemas relativos determinao da PER a impossibilidade de distinguir entre o peso ganho como gordura e como massa magra 37-39. A PER definida pela frmula:
PER = ganho de peso quantidade de protena consumida

NPU =

N retido N consumido

[N ingerido] [N fecal] [N urinrio] [N ingerido]

O VB representa a frao de aminocidos absorvidos pelo intestino que retida no organismo. O VB de uma protena determinado pela medida da quantidade de nitrognio consumido e aquele excretado. Inicialmente, as perdas obrigatrias de nitrognio pela urina e fezes devem ser determinadas, o que necessita de um ensaio biolgico envolvendo dietas isentas de nitrognio. Posteriormente, realizada a determinao da quantidade de nitrognio urinrio e fecal com o consumo da protena teste. As diferenas no nitrognio excretado entre as duas condies dietticas expressa como o [ nitrognio (N) fecal] e o [ N urinrio], sendo que a letra maiscula grega delta () convencionalmente significa variao35,40. A frmula do VB :
N retido N absorvido [N ingerido] [N fecal] [N urinrio] [N ingerido] [N fecal]

aceito que o valor nutricional de protenas possa diferir substancialmente de acordo com a composio de aminocidos (indispensveis) e a digestibilidade. Por muitos anos ensaios biolgicos, principalmente com ratos, foram os mtodos de escolha para avaliar o valor nutricional de protenas. Este valor foi expresso como PER, VB e NPU. Em 1989, a FAO/OMS41 concluiu que a qualidade da protena poderia ser avaliada adequadamente por meio da avaliao do contedo do primeiro aminocido indispensvel limitante das protenas a serem testadas, que expresso como uma porcentagem do contedo do mesmo aminocido em um modelo de referncia de aminocidos indispensveis. Este modelo de referncia foi baseado nas necessidades de aminocidos indispensveis de crianas pr-escolares conforme publicado pela FAO/OMS (1985)42. Subseqentemente, esta porcentagem corrigida de acordo com a digestibilidade verdadeira da protena-teste, conforme avaliao realizada por ensaio biolgico realizado com ratos. Esse mtodo de escore, conhecido como digestibilidade protica corrigida pelo escore aminoacdico (do ingls, Protein DigestibilityCorrected Amino Acid Score [PDCAAS]) foi adotada como mtodo preferencial para a avaliao do valor protico na nutrio humana. Protenas com valores da PDCAAS que excedem 100% no contribuem com benefcios adicionais em humanos e, desse modo, os valores so truncados em 100%38-40,43,44. A frmula da PDCAAS demonstrada abaixo:

PDCAAS(%) =

mg do AA limitante em 1 g da protena teste digestibilidade verdadeira (%)

mg do mesmo AA em 1 g da protena de referncia AA = aminocidos

100

VB =

Em humanos, a digestibilidade aparente corresponde diferena entre o nitrognio ingerido (NI) e o nitrognio fecal (NF), enquanto a digestibilidade verdadeira corresponde a NI (NF Nitrognio Endgeno Metablico [NEM]), onde NEM corresponde a perda obrigatria, a qual da ordem de 20 mg de nitrognio/kg/dia30,35,40. A Tabela 6.3 apresenta os valores para PER, digestibilidade fecal real, escore de aminocidos e PDCAAS (no truncado) para algumas protenas, enquanto a Tabela 6.4 apresenta todas as etapas envolvidas no clculo da PDCAAS de uma protena alimentar43.

O NPU visa avaliar a reteno de nitrognio em relao quantidade de nitrognio consumida. Isto difere do BV, uma vez que verifica a quantidade de nitrognio retida em relao quela absorvida40. A frmula do NPU :

DeAngelis06.indd 77

18/5/2007 10:13:35

78

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

TABELA 6.3 Razo de Eficincia Protica (PER), Digestibilidade Verdadeira, Escore Aminoacdico (AAS) e Digestibilidade Protica Corrigida pelo Escore Aminoacdico (PDCAAS)
Protena Ovo Leite de vaca Carne de vaca Soja Trigo PER 3,8 3,1 2,7 2,1 1,5 Digestibilidade 98 95 98 95 91 AAS 121 127 94 96 47 PDCAAS 118 121 92 91 42

sejam encontrados nas fezes, o que equivale a cerca de 6 a 12 g de protena24,45-48. O objetivo da digesto de protenas liberar aminocidos, dipeptdeos e tripeptdeos a partir da protena consumida na dieta. Com exceo de um perodo relativamente curto aps o nascimento, o entercito no consegue absorver protenas intactas. Dentre as protenas que o neonato consegue absorver, destacam-se as imunoglobulinas (leite materno), que fornecem a imunizao passiva para o neonato. Posteriormente a esse perodo, apenas aminocidos, dipeptdeos e tripeptdeos so absorvidos pelos entercitos46-49. As enzimas responsveis pela digesto das protenas da dieta so denominadas peptidases e so classificadas em duas categorias: i. endopeptidases, que atuam sobre ligaes internas e liberam grandes fragmentos de peptdeos para a subseqente ao de outras enzimas; ii. exopeptidases, que atuam sobre as extremidades da cadeia peptdica e liberam um aminocido em cada reao. As exopeptidases so subdivididas de acordo com a posio que atuam, ou seja, aquelas que agem na extremidade carboxila (COOH) so denominadas carboxipeptidases, enquanto aquelas que atuam sobre a extremidade amino (NH2) so denominadas aminopeptidases. Inicialmente, as endopeptidases agem sobre a protena intacta ingerida, enquanto as exopeptidases atuam no processo final da digesto24,46-49. Diferentemente da digesto de lipdios e carboidratos que iniciada na boca pela lipase lingual e amilase salivar, respectivamente a digesto das protenas inicia-se no estmago, onde o alimento acidificado com o cido clordrico (HCl), o qual apresenta diversas funes, como morte de alguns organismos potencialmente patognicos e desnaturao de protenas, que permite que essas se tornem mais vulnerveis ao da pepsina (endopeptidase). A enzima pepsina liberada dentro da cavidade gstrica na forma de pepsinognio (enzima inativa). No momento em que o alimento entra no estmago ocorre a estimulao da liberao de HCl pelas clulas parietais, e a conseqente diminuio do pH intragstrico para cerca de 2, o que provoca a perda de 44 aminocidos da estrutura do pepsinognio. Uma vez que esses 44 aminocidos atuam como um fragmento inibidor da pepsina, por meio da sua ligao ao stio cataltico da enzima, a clivagem desse fragmento de 44 aminocidos, alm de propiciar a ativao da pepsina, tambm atua como um peptdeo sinalizador para a liberao de colecistocinina (CCK) no duodeno. A CCK estimula a liberao de enzimas digestivas tanto pelo pncreas excrino quanto pelas clulas da mucosa intestinal. A ativao da pepsina tambm pode

TABELA 6.4 Clculo para Obteno da Digestibilidade Protica Corrigida pelo Escore Aminoacdico (PDCAAS). (Adaptado de De Angelis40)
1. Analisar o contedo de nitrognio (N) da amostra; 2. Calcular o contedo de protena (N 6,25 ou um fator de converso especfico da AOAC); 3. Analisar o perfil de aminocidos indispensveis (AI); 4. Determinar o escore aminocdico (EA) (no corrigido): EA = mg do AI em 1 g da protena teste mg de AI em 1 g da protena de referncia Referncia de perfil de AI de uma protena = FAO/OMS (1985) recomendao para crianas pr-escolares (2-5 anos de idade) 5. Analisar a digestibilidade (D) 6. Calcular o PDCAAS = menor EA no corrigido D

Digesto de Protenas
A protena ingerida diariamente somada protena proveniente do intestino na forma de enzimas digestivas, clulas descamadas e mucinas quase completamente digerida e absorvida. Esse processo muito eficiente e garante o contnuo fornecimento de aminocidos para o pool de aminocidos corporal. Menos de 10% da protena total que passa atravs do trato digestrio aparecem nas fezes. Sendo assim, se a alimentao contribuir com cerca de 70 a 100 g de protena e a protena endgena contribuir com aproximadamente 100 g (variao entre 35 a 200 g), ento esperado que aproximadamente de 1 a 2 g de nitrognio

DeAngelis06.indd 78

18/5/2007 10:13:36

Metabolismo de Protenas

79

ocorrer por meio do processo denominado autocatlise, que ocorre quando a pepsina atua sobre o pepsinognio, ativando-o24,45-49. Uma das importantes caractersticas da digesto pela pepsina reside na sua capacidade de digerir o colgeno, um albuminide que pouco afetado por outras enzimas digestivas. O colgeno um importante constituinte do tecido conjuntivo intercelular das carnes. Para que as enzimas digestivas do trato digestrio penetrem nas carnes e possam digerir as protenas celulares necessrio que as fibras de colgeno sejam inicialmente digeridas. Por conseguinte, nas pessoas com deficincia de atividade pptica no estmago, as carnes ingeridas no sofrem tanto a ao das enzimas digestivas e, conseqentemente, podem ser mal digeridas. Contudo, cabe ressaltar que a ao da pepsina responsvel por cerca de 10% a 20% da digesto total das protenas. A atividade da pepsina termina quando o contedo gstrico se mistura com o suco pancretico alcalino no intestino delgado26,50. O quimo no intestino estimula a liberao de secretina e CCK, que acarretam na secreo de bicarbonato e de enzimas pelo pncreas, respectivamente. No suco pancretico verifica-se a presena de proteases pancreticas, que so secretadas dentro do duodeno como precursores inativos (zimognios). O tripsinognio, que no apresenta atividade proteoltica, ativado pela enteropeptidase, uma enzima localizada na membrana apical de entercitos da regio duodenal. A atividade da enteropeptidase estimulada pelo tripsinognio, enquanto a sua liberao da membrana apical dos entercitos provocada pelos sais biliares. A enteropeptidase ativa o tripsinognio por meio da liberao de um hexapeptdeo a partir do N-terminal dessa molcula. Posteriormente, a tripsina, alm de atuar sobre as protenas alimentares, tambm ativa outras pr-proteases liberadas pelo pncreas excrino, ou seja, a tripsina atua sobre o quimiotripsinognio, liberando a quimiotripsina; sobre a prelastase, liberando a elastase; e sobre a pr-carboxipeptidase, liberando a carboxipeptidase. Tripsina e quimiotripsina clivam as molculas de protenas em pequenos peptdeos; a seguir, a carboxipeptidase cliva os aminocidos das extremidades carboxila dos polipeptdeos. No obstante, posteriormente ativao das proteases pancreticas no intestino, estas sofrem rpida inativao devido ao processo de autodigesto, sendo a tripsina a enzima primariamente responsvel por essa inativao24,45,46,47,48,49. Os produtos finais da digesto de protenas da dieta no lmen intestinal no so exclusivamente aminocidos livres, mas uma mistura de aminocidos livres (40%) e pequenos peptdeos (60%), os quais consistem principalmente de 2 a 8 resduos de aminocidos. Esses peptdeos so, posteriormente, hidrolisados por enzimas (aminopeptidases, dipeptidil

aminopeptidase e dipeptidase) presentes na superfcie luminal, o que acarreta na liberao de aminocidos livres, dipeptdeos e tripeptdeos47,49.

Absoro Intestinal de Aminocidos, Dipeptdeos e Tripeptdeos


At o incio da dcada de 1950, os produtos da digesto de protenas foram simplesmente aceitos como aminocidos livres, para os quais foram designados diversos mecanismos de transporte. Porm, a partir de estudos de digesto protica em intestino delgado de humanos, concluiu-se que os principais produtos da digesto de protenas no lmen intestinal no so aminocidos, mas dipeptdeos e tripeptdeos. Subseqentemente, estudos de absoro de aminocidos, de dipeptdeos e de tripeptdeos demonstraram que o transporte de pequenos peptdeos intactos ocorria no intestino delgado. Doses orais de glicina nas formas de glicina, glicil-glicina e glicil-glicil-glicina apresentaram mais rpida absoro nas formas de dipeptdeo e de tripeptdeo quando comparadas absoro do aminocido livre. Estudos de perfuso jejunal em humanos demonstraram que a competio entre aminocidos livres durante o processo de captao foi evitada ou reduzida quando os mesmos aminocidos estiveram na forma de dipeptdeos, sendo que em muitos estudos verificou-se aumento da absoro de aminocidos a partir de solues de dipeptdeos quando comparadas a solues contendo aminocidos livres de equivalente composio. A existncia de mecanismos distintos de transporte para aminocidos e dipeptdeos foi observada em patologias associadas a defeitos no transporte de aminocidos (cistinria e doena de Hartnup), devido aos aminocidos afetados serem pouco absorvidos quando estavam na forma livre, mas de absoro normal quando estavam presentes na forma de pequenos peptdeos. Desse modo, foi sugerida a existncia de um sistema de transporte exclusivo para a absoro de dipeptdeos e tripeptdeos. Esta hiptese foi validada em estudos realizados em animais experimentais e humanos, por meio da clonagem do transportador de oligopeptdeos intestinal51-58. Estudos moleculares e fisiolgicos tm demonstrado que o transportador de oligopeptdeos intestinal, o qual foi designado PepT-1, est presente na membrana apical (ou luminal) de entercitos, sendo ausente na membrana basolateral dessas clulas. Cabe ressaltar que o PepT-1 um transportador exclusivo de dipeptdeos e tripeptdeos, que so os principais produtos da digesto de protenas no lmen intestinal.51,52,59-67 Diferentemente de outros transportadores, o PepT-1 apresenta enorme extenso de substratos, que inclui 400

DeAngelis06.indd 79

18/5/2007 10:13:37

80

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

dipeptdeos e 8.000 tripeptdeos, que podem ser produzidos a partir da digesto das protenas da dieta. Alm disso, o PepT-1 apresenta uma caracterstica singular, que se refere a sua dependncia pelo gradiente de prtons no momento da absoro dos oligopeptdeos pelo entercito, enquanto outros transportadores comumente dependem de um gradiente de sdio. De fato, o PepT-1 um co-transportador de peptdeos e de ons H+, pertencendo a uma famlia de transportadores de oligopeptdeos encontrada em todas as espcies, desde bactrias a humanos52,61,68-70. Os processos celulares envolvidos no transporte de dipeptdeos e tripeptdeos atravs das clulas epiteliais intestinais incluem as seguintes caractersticas (Fig. 6.4): i. ii. um trocador Na+/H+ localizado na membrana luminal, que mantm o pH intracelular alcalino; presena da enzima Na +/K + ATPase localizada na membrana basolateral, que mantm o potencial de membrana negativo no interior celular;

convertem a maioria dos dipeptdeos e tripeptdeos para aminocidos, que so utilizados pelos entercitos ou so liberados dentro da circulao portal por meio de transportadores de aminocidos presentes na membrana basolateral dessas clulas. Os dipeptdeos e tripeptdeos que escapam da hidrlise pelas peptidases citoplasmticas so transportados atravs da membrana basolateral para dentro da circulao portal por meio de um transportador de oligopeptdeos, o qual difere caracteristicamente do PepT-151,67. A utilizao de duas foras motrizes, gradiente de Na+ e gradiente de H+, para a absoro ativa de aminocidos e dipeptdeos, respectivamente, vantajosa para o organismo por manter uma nutrio protica adequada, devido ausncia de competio entre aminocidos e dipeptdeos pela origem de energia e por permitir que estes processos absortivos ocorram paralelamente54. Em relao absoro de aminocidos na membrana luminal, verifica-se que alguns aminocidos so absorvidos por meio de mecanismos mediados por carreadores em um

iii. diversas peptidases citoplasmticas, que previnem o acmulo dos peptdeos absorvidos. Estas enzimas

FIG. 6.4 Transportador de dipeptdeos e tripeptdeos intestinal (PepT-1). (Modificado de YANG et al.67.)

DeAngelis06.indd 80

18/5/2007 10:13:37

Metabolismo de Protenas

81

processo sdio (Na+) dependente. A transferncia do Na+ para o compartimento extracelular caracteriza-se, dessa forma, como um transporte ativo secundrio. Outros aminocidos e alguns daqueles absorvidos por transporte ativo podem tambm ser absorvidos por difuso facilitada, que no necessita de Na+. Certos aminocidos competem entre si, durante a absoro, pelos transportadores presentes na membrana luminal54,71. Dentro do intestino delgado existem variaes regionais das capacidades absortivas de aminocidos, dipeptdeos e tripeptdeos. A capacidade absortiva de dipeptdeos e tripeptdeos maior no intestino delgado proximal em relao ao intestino delgado distal. Aliado a este fato observa-se que peptidases citoslicas, que atuam sobre dipeptdeos e tripeptdeos, apresentam mais alta atividade no segmento proximal do intestino delgado, local onde a capacidade absortiva desses peptdeos muita elevada. Por outro lado, a capacidade absortiva de aminocidos maior no intestino delgado distal do que no intestino delgado proximal51,54,56. Na membrana basolateral dos entercitos verifica-se a presena de sistemas de transportes de aminocidos, que so responsveis pela sada de aminocidos para a corrente sangnea. Ao menos cinco sistemas de transporte de aminocidos na membrana basolateral foram identificados, sendo dois dependentes de sdio (Na+) e trs independentes de Na+. Os mecanismos independentes de Na+ so responsveis pelo transporte de aminocidos da clula para a circulao sangnea, caracterizando a absoro transcelular de aminocidos a partir do lmen intestinal, enquanto que os sistemas dependentes de Na+ apresentam um papel relevante no fornecimento de aminocidos para as clulas intestinais47,54,71. Em sntese, dentre os mecanismos de absoro de aminocidos e de dipeptdeos e tripeptdeos provindos da dieta, destacam-se45,51,58,72,73: i. aminocidos livres liberados pela digesto no trato digestrio ou na membrana luminal so absorvidos via sistemas de transporte especficos para aminocidos livres; ii. hidrlise de oligopeptdeos na membrana luminal com subseqente liberao de aminocidos livres, que so transportados por diferentes sistemas especficos de transporte de aminocidos. Dipeptdeos e tripeptdeos que permanecem aps a digesto por peptidases luminais e ligados membrana luminal, ou seja, que no foram clivados em aminocidos livres por hidrolases de peptdeos presentes nesta membrana, podem ser absorvidos ntegros pelo intestino delgado, sendo clivados por peptidases intracitoplasmticas (dipeptidases e tripeptidases) de entercitos. Peptidases localizadas no

citosol de entercitos so capazes de hidrolisar somente dipeptdeos e tripeptdeos; iii. peptdeos com quatro ou mais aminocidos necessitam ser hidrolisados pela membrana luminal previamente ao processo de absoro de seus produtos hidrolisados. Cabe ressaltar que estudos em animais e humanos tm demonstrado que a oferta por via oral, a partir de uma mistura de aminocidos livres, difere em relao mistura de dipeptdeos de composio aminoacdica equivalente55,65,66,74-78. Algumas razes so apresentadas a seguir: a. absoro mais rpida de aminocidos quando fornecidos na forma de dipeptdeos do que na forma livre; b. maior aparecimento de aminocidos no sangue aps absoro de dipeptdeos do que a partir de aminocidos livres; c. ausncia de competio entre a absoro de aminocidos livres e de dipeptdeos; d. conservao de energia metablica no transporte de aminocidos na forma de dipeptdeos em relao forma monomrica; e. relativa manuteno do transporte de dipeptdeos comparado ao transporte de aminocidos em diversas situaes, tais como jejum, desnutrio protico-calrica, deficincia de vitaminas e doenas intestinais; f. vantagens fsico-qumicas pela substituio de aminocidos instveis e pouco solveis em soluo por dipeptdeos altamente estveis e solveis em soluo; g. dipeptdeos estimulam seu prprio transporte por meio da induo da expresso de PepT-1.

REGULAO HORMONAL DA CONCENTRAO DE AMINOCIDOS PLASMTICOS


Muitos dos hormnios sintetizados no organismo regulam a concentrao de aminocidos no plasma. Alguns dos efeitos produzidos so sumarizados na Tabela 6.5. A discusso sobre as aes hormonais pode ser simplificada pela diviso dos mesmos em duas categorias: os hormnios anablicos e os hormnios catablicos. Os hormnios anablicos, como o hormnio do crescimento, tendem a promover a incorporao de aminocidos plasmticos na protena muscular. A insulina pode ser includa nesse grupo, embora sua ao parea ser mediada principalmente por meio da inibio da protelise muscular preferivelmente do que pela promoo do aumento da captao. De fato, um dos efeitos principais da glicose da dieta a liberao da insulina, a qual, por sua vez, inibe a degradao protica muscular79-82.

DeAngelis06.indd 81

18/5/2007 10:13:39

82

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

Os hormnios catablicos, particularmente os hormnios esterides catablicos, como o cortisol, atuam antagonicamente em relao aos anablicos. A liberao desses hormnios causa a degradao da protena muscular, aumento da oxidao de aminocidos no tecido muscular e liberao de aminocidos para o plasma. O glucagon exerce um papel relevante por estimular a sntese das enzimas hepticas que atuam no catabolismo de aminocidos79,81. Portanto, a concentrao de aminocidos no plasma dependente em grande parte do balano preciso entre esses dois grupos de hormnios anablicos e catablicos e do controle da liberao dos mesmos.

quando essas so estimuladas a sintetizar novas protenas para uma determinada funo (Fig. 6.5)83,84. O conceito de turnover protico surgiu inicialmente a r partir dos trabalhos de SCHOENHEIMER, nos Estados Unidos da Amrica na dcada de 1940. Por meio da avaliao das taxas de incorporao de aminocidos marcados com istopos estveis (15N) em protenas e de perda de 15N a partir da protena, SCHOENHEIMER demonstrou que todas as protenas corporais estavam em constante estado de fluxo, sendo constantemente sintetizadas e degradadas. Esse pesquisador foi o primeiro a sugerir que existe um pool de aminocidos nas clulas, em equilbrio dinmico l com os aminocidos formados a partir da degradao da protena corporal e com aqueles obtidos a partir da dieta, e que as perdas a partir desse pool ocorriam quando nenhum l aminocido era ingerido79. O turnover protico elevado na infncia e diminui com r a idade (Tabela 6.6). Alm disso, o turnover difere entre os r tecidos: o msculo esqueltico, que responde por aproximadamente 50% do contedo de protena corporal, responsvel apenas por cerca de 25% do turnover, enquanto o fgado e o intestino, que respondem por menos de 10% do contedo protico do organismo, contribuem com 50% do turnover. O turnover protico tambm difere dentro dos r tecidos e igualmente dentro das clulas26,27.

METABOLISMO PROTICO
No organismo no h reserva de protena ou de aminocidos livres, sendo que qualquer quantidade acima das necessidades para a sntese protica celular e para a de compostos no-proticos nitrogenados metabolizada. No entanto, na clula, existe um pool metablico de aminocidos em estado de equilbrio dinmico que pode ser utilizado quando for necessrio. O contnuo estado de sntese e degradao de protenas, fenmeno denominado turnover protico, necessrio para manter esse pool r metablico e a capacidade de satisfazer a demanda de aminocidos nas vrias clulas e tecidos do organismo,

TABELA 6.5 Regulao Hormonal da Concentrao de Aminocidos Plasmticos. (Adaptado de GILLHAM et al.79)
Tecido Afetado Hormnio INSULINA Fgado Estimula a captao de aminocidos e a sntese protica Msculo Estimula a sntese protica, inibe a protelise e promove a captao de aminocidos no estado alimentado Outros 1. Facilita a transferncia de glutamato a partir dos eritrcitos para o msculo 2. Ativa a desidrogenase de -cetocidos de cadeia ramificada no tecido adiposo Estimula a oxidao de ACR no corao no estado ps-absortivo Estimula a oxidao de ACR no corao

GLUCAGON

Estimula a protelise e inibe a sntese protica

ADRENALINA

Diminui a sntese protica e a concentrao plasmtica de ACR. Aumenta a oxidao de ACR e a liberao de alanina e glutamina

CORTISOL

Promove a sntese de glutamina Promove a protelise e inibe a sntese no estado de jejum. Induz enzimas protica. Inibe a captao de relacionadas ao catabolismo de aminocidos, como tirosina aminotransferase aminocidos. Promove o euxo de glutamina

DeAngelis06.indd 82

18/5/2007 10:13:40

Metabolismo de Protenas

83

FIG. 6.5 Troca entre os pools de protena corporal e de aminocidos livres (Modificado de Lemon85).

TABELA 6.6 Sntese Protica Corporal em Humanos em Diferentes Estgios de Vida. (Adaptado de NRC22)
Estgio de vida Recm-nascido (pr-termo) Criana Adulto Idoso Sntese protica (g/kg/dia) 17,4 6,9 3,0 1,9

Grupo C: as protenas desse grupo apresentam uma taxa r de turnover muito lenta e uma meia-vida muito longa. O colgeno um exemplo de protena desse grupo. Aproximadamente 300 g de protena so sintetizados e degradados diariamente em um indivduos adulto, contudo, esta quantidade representa apenas um valor mdio, porquanto a meia-vida das protenas endgenas apresenta uma enorme variao. Esse valor aproximadamente 210 g maior do que o saldo de ingesto, 90 g, e esta diferena enfatiza a grande contribuio realizada pelo turnover protir co corporal para o pool de aminocidos livres. Os conceitos l de um pool de aminocidos e de um estado dinmico de l protenas corporais reforam o papel relevante que a sntese e a degradao proticas exercem, em diferentes tecidos, na regulao da natureza e da concentrao de vrios aminocidos no sangue. Os aminocidos ingeridos contribuem para esse pool e para o turnover protico, mas adicionam l r apenas uma proporo do total de aminocidos envolvidos no turnover protico corporal dirio10,26,27,80,85-90. r Dentre as principais variveis que afetam o turnover protico no organismo humano diariamente destacamse 80-82,85-88,91: a. alimentao e as subseqentes alteraes na disponibilidade de aminocidos na circulao sangnea (Tabela 6.7); b. concentrao de hormnios anablicos (especialmente a insulina) e de hormnios catablicos (especialmente glucagon e cortisol); c. exerccio fsico.

Geralmente, o padro do turnover protico pode ser estudado em trs diferentes grupos (Fig. 6.6)79: Grupo A: protenas que so rapidamente sintetizadas; apresentam um tempo de vida limitado e, posteriormente, so rapidamente degradadas. Exemplo dessas protenas a hemoglobina, que normalmente estvel durante os 120 dias de vida de um eritrcito humano; Grupo B: protenas que so rapidamente sintetizadas e degradadas. Exemplos dessas protenas so as enzimas, as quais regulam as vias metablicas. Tais enzimas so geralmente encontradas em baixa concentrao nas clulas; sua concentrao varia rapidamente em resposta tanto ao aumento quanto diminuio das taxas de sntese e de degradao proticas;

DeAngelis06.indd 83

18/5/2007 10:13:41

84

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

FIG. 6.6 Diferentes padres do turnover protico. (Adaptado de GILLHAM et al.79) r TABELA 6.7 Taxas de Turnover de Protenas Corporais e o Efeito da Ingesto Protica sobre o Turnover Protico. r r (Adaptado de Gillham et al.79.)
Meia-vida (dias) de Total de Protenas corporais Rato Humanos 17 158 Efeito da Dieta (ratos) Dieta Isenta de protena 25% de protena 65% de protena Meia-vida das protenas do plasma (dias) 17 5 2,9 Protenas sricas/plasmticas 6a7 10 a 20

Os tecidos mais ativos do organismo, responsveis pelo turnover protico, so: plasma, mucosa intestinal, pncrer as, fgado e rins. Por outro lado, o tecido muscular, pele e crebro so os menos ativos. A velocidade do turnover protico depende da funo da protena e do tipo do tecido

ou rgo. A taxa mdia diria do adulto, de protena renovada, da ordem de 3% do total protico do organismo. Na pele, perdem-se e renovam-se 5 g de protenas por dia; no sangue, 25 g; no trato intestinal, cerca de 70 g; e no tecido muscular, ao redor de 75 g/dia27.

DeAngelis06.indd 84

18/5/2007 10:13:43

Metabolismo de Protenas

85

Metabolismo Protico no Tecido Heptico


As funes mais relevantes do fgado no metabolismo protico, de modo sucinto, so: i. formao das protenas plasmticas; ii. formao de uria para a remoo da amnia dos lquidos corporais; iii. desaminao dos aminocidos; iv. interconverses entre os diferentes aminocidos, bem como entre os aminocidos e outros compostos importantes para os processos metablicos do organismo2,4,6,11,22. Aps a absoro intestinal, os aminocidos so transportados diretamente ao fgado por meio do sistema porta.

Esse tecido exerce um papel importante como modulador da concentrao de aminocidos plasmticos e regulador do catabolismo de aminocidos indispensveis, com exceo dos aminocidos de cadeia ramificada, que so degradados principalmente pelo msculo esqueltico. No fgado, parte dos aminocidos usada na sntese de protenas que so secretadas (por exemplo, albumina e fibrina) e na sntese de protenas de vida mdia mais curta (como enzimas, necessrias ao catabolismo dos aminocidos que ficam na prpria clula heptica) (Fig. 6.7)9,10,26,50. Praticamente todas as protenas plasmticas, com exceo de parte das gamaglobulinas, so formadas pelas clulas hepticas. Essa sntese responsvel por cerca de 90% de todas as protenas plasmticas. As gamaglobulinas

FIG. 6.7 Participao do fgado no metabolismo protico.

DeAngelis06.indd 85

18/5/2007 10:13:44

86

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

restantes so anticorpos formados principalmente por plasmcitos no tecido linftico do organismo. O fgado tem a capacidade de sintetizar as protenas plasmticas em uma velocidade de cerca de 30 g/dia9,10,26,50,79. O fgado apresenta uma taxa elevada de turnover de r enzimas que regulam a homeostasia de substratos energticos, permitindo que a regulao ocorra rapidamente em resposta alimentao e ao jejum de curta durao. Sendo assim, alteraes na quantidade dessas enzimas hepticas representam um fator relevante no controle de suas atividades e, por essa razo, uma taxa alta de turnover essencial quando o tecido deve ser responsivo s alteraes das necessidades metablicas4,7,26.

partir dos aminocidos excretada principalmente como uria e no reincorporada em protenas. O balano nitrogenado positivo ocorre em crianas em fase de crescimento, que esto aumentando sua massa corporal e incorporando mais aminocidos em protenas do que os degradando. Cistena e arginina so essenciais em crianas, todavia no so essenciais em adultos, uma vez que so sintetizados a partir da metionina e ornitina, respectivamente. Estes aminocidos esto prontamente disponveis em adultos, porm so limitados em crianas devido elevada utilizao de todos os aminocidos durante essa fase da vida. O balano nitrogenado positivo tambm ocorre na gravidez e durante a realimentao aps jejum10,16,22,26,41. Em adio a quantidade de protena da dieta, diversos outros fatores devem ser considerados, como a quantidade de aminocidos indispensveis presentes na dieta em relao ao balano nitrogenado. Uma vez que aminocidos indispensveis no podem ser sintetizados pelo organismo, se apenas um dos aminocidos indispensveis no ingerido ou a quantidade ingerida insuficiente, o organismo no pode sintetizar protenas novas para repor protenas perdidas decorrente do turnover protico normal e, conseqenr temente, verifica-se a ocorrncia de balano nitrogenado negativo, uma vez que protenas corporais so degradadas para fornecerem o aminocido indispensvel deficiente, ao mesmo tempo em que os demais aminocidos liberados so metabolizados. Outro fator que determina a necessidade protica a ingesto de lipdios e carboidratos. Se esses nutrientes esto presentes em quantidades insuficientes, uma parte da protena da dieta ser utilizada para a produo de energia e, desse modo, torna-se indisponvel para a sntese e reparao tecidual. Se, nesse caso, ocorre um aumento da ingesto de carboidratos e lipdios, verifica-se uma menor necessidade de protenas na dieta. Este fato referido como efeito poupador de protenas, sendo que os carboidratos so mais eficientes do que lipdios quanto a esse efeito, uma vez que carboidratos podem ser utilizados como fonte de energia por quase todos os tecidos do organismo, o que no ocorre com os lipdios6,13,41,92.

Balano Nitrogenado
O balano nitrogenado representa a diferena entre a quantidade de nitrognio consumida por dia e a quantidade de nitrognio excretada por dia. Esta definio pode ser expressa pela frmula:
(gramas de nitrognio ingerido gramas de nitrognio perdido)

Balano Nitrogenado =

A razo mdia protena:nitrognio, de acordo com o peso, de 6,25 para a protena ingerida habitualmente na dieta. Esse nmero utilizado como um fator de converso para expressar a quantidade de protena da dieta, ou seja, o consumo de 1 g de nitrognio na forma de protena equivale ao consumo de 6,25 g de protenas26. Cabe ressaltar que a avaliao do balano nitrogenado no pode ser determinada pela anlise da coleta de alimentos e de excrees durante 1 dia. Devido variabilidade biolgica intrnseca de experimentos envolvendo animais e humanos, amostras devem ser coletadas durante diversos dias. Um indivduo adulto ingerindo uma dieta adequada e balanceada est geralmente em balano nitrogenado, ou seja, um estado onde a quantidade de nitrognio ingerida diariamente est equilibrada com a quantidade excretada, o que resulta em um saldo zero em relao alterao da quantidade de nitrognio corporal. No estado alimentado, o nitrognio excretado proveniente principalmente do turnover normal ou do excesso de protena ingerida. Sob algumas r condies o organismo est ou em balano negativo ou em balano positivo de nitrognio. Na condio de balano nitrogenado negativo, mais nitrognio excretado do que ingerido. Este fato pode ser observado durante o jejum ou em determinadas doenas. Durante o jejum, as cadeias de carbono dos aminocidos derivados das protenas so necessrias para a gliconeognese; e a amnia liberada a

Sntese Protica
O processo por meio do qual as protenas so sintetizadas fornece a base para a compreenso das diferenas genticas. E tambm a base para a compreenso de como as propriedades prprias de cada tipo celular so mantidas, uma vez que as caractersticas que diferenciam as clulas so geralmente conferidas pelas protenas celulares2-4. A seqncia de aminocidos de uma protena em particular geneticamente controlada. Este controle exercido por meio de um polinucleotdeo, o cido desoxirribonuclico

DeAngelis06.indd 86

18/5/2007 10:13:47

Metabolismo de Protenas

87

(DNA). O DNA composto de quatro bases nitrogenadas: adenina, guanina, timina e citosina, as quais so condensadas para formar a cadeia de DNA. A seqncia de bases no DNA nica para cada protena que sintetizada no organismo. Sendo assim, a seqncia de aminocidos de cada protena sintetizada no organismo determinada a partir de uma regio da molcula de DNA, denominada gene, que consiste de milhares de bases1-4. As molculas de cido ribonuclico (RNA) apresentam diferentes funes na transferncia da informao celular. A maioria do RNA celular ribossomal (rRNA). Ribossomos so grandes complexos de protenas e RNA, que podem realizar o processo de traduo. O RNA mensageiro (mRNA) serve como molde para a sntese de protenas e transmite a informao a partir do DNA para o ribossomo. O RNA de transferncia (tRNA) transporta aminocidos especficos, a partir do pool intracelular de aminocidos livres, para os l ribossomos. Cabe ressaltar que a sntese protica dependente da simultnea presena de todos os aminocidos necessrios para a sntese de uma determinada protena e do fornecimento de energia. Se h uma insuficincia em qualquer um desses fatores, as etapas da biossntese de protenas no ocorrem de maneira normal24,93.

se que 61 codificam aminocidos e os trs restantes so sinais de terminao1,2. Antes que um aminocido possa ser incorporado na cadeia protica nascente, o mesmo deve ser ativado. Uma ligao covalente formada entre o aminocido e o tRNA, o que forma um aminoacil-tRNA. A formao da cadeia polipeptdica ocorre em trs etapas: iniciao, alongamento e terminao. Na etapa de iniciao, o primeiro aminoacil-tRNA liga-se ao ribossomo e ao mRNA. O segundo aminoacil-tRNA forma um complexo com o ribossomo e com o mRNA. O stio de ligao do segundo aminoacil-tRNA prximo ao do primeiro aminoacil-tRNA e uma ligao peptdica forma-se entre os aminocidos (alongamento da cadeia). O processo de alongamento da cadeia envolve a translocao do ribossomo ao longo do mRNA at que a cadeia polipeptdica esteja completa. Finalmente ocorre a etapa de terminao da sntese protica, sendo os cdons UAA, UAG e UGA sinais de terminao. Esses cdons no so reconhecidos por nenhum tRNA, mas so reconhecidos por protenas denominadas fatores de liberao, que bloqueiam a ligao de um novo aminoacil-tRNA como tambm afetam a atividade da peptidiltransferase enzima que catalisa cada ligao peptdica , de modo que a ligao entre o terminal carboxlico do peptdeo e o tRNA seja hidrolisada4,7,25. No processo de traduo comum que vrios ribossomos estejam ligados ao mesmo mRNA, formando um complexo denominado polissomos. Cada ribossomo em um polissomo tem um polipeptdio em um estgio diferente da traduo, o qual depende da posio do ribossomo medida que esse se move ao longo do mRNA e traduz a mensagem gentica. Alm disso, quimicamente, a polimerizao dos aminocidos em protenas uma reao de desidratao entre dois aminocidos (Fig. 6.8)3,25,94. Aps a traduo, algumas protenas emergem a partir do ribossomo prontas para o seu funcionamento, enquanto outras sofrem uma variedade de modificaes ps-traducionais. Estas alteraes podem resultar em: i. converso para uma forma funcional; ii. direcionamento para um compartimento subcelular especfico; iii. secreo a partir da clula; iv. alterao na atividade ou estabilidade. A informao que determina o destino ps-traducional de uma protena reside na sua estrutura94. A partir do ponto de vista nutricional e metablico, relevante reconhecer que a sntese protica um processo contnuo realizado nas clulas do organismo. Em estado de equilbrio, ou seja, quando no h um saldo de aumento ou de diminuio de protena corporal, verifica-se que a sntese

Transcrio
A sntese de mRNA a partir do DNA no ncleo celular denominada transcrio. O mRNA utilizado para carrear a informao a partir do DNA dos cromossomos para a superfcie dos ribossomos, que esto presentes no citosol. O RNA, particularmente o mRNA, uma molcula muito menor e significativamente menos estvel em comparao ao DNA, ou seja, o RNA apresenta uma meia-vida muito curta (minutos a horas) comparada quela do DNA nuclear (anos). Devido meia-vida curta do RNA, as bases que o compem devem ser continuamente ressintetizadas7,9.

Traduo
O processo de traduo representa a sntese da protena, a qual ocorre no citosol e necessita de ribossomos, mRNA, tRNA e vrios fatores proticos. O ribossomo o local onde ocorre a sntese de protenas. O mRNA e o tRNA, que se ligam ao ribossomo durante o curso da sntese protica, so responsveis pela ordenao correta dos aminocidos na protena nascente3. Um cdon uma srie de trs bases adjacentes umas s outras na seqncia especifica um determinado aminocido, sendo que vrios cdons podem especificar o mesmo aminocido. Dentre os 64 cdons possveis, verifica-

DeAngelis06.indd 87

18/5/2007 10:13:48

88

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

FIG. 6.8 Ligao peptdica com perda de uma molcula de gua.

protica balanceada por igual quantidade de degradao protica. A ingesto inadequada de protenas, tanto em dietas hipoproticas quanto em dietas com ausncia ou baixa concentrao de um ou mais aminocidos indispensveis (denominados nesta situao de aminocidos limitantes), tem como principal conseqncia a alterao do balano protico, uma vez que a taxa de sntese de algumas protenas corporais diminui enquanto a degradao protica continua, o que propicia o fornecimento desses aminocidos a partir de protena endgena95.

conseqentemente, a velocidade das reaes anablicas e catablicas das protenas. Em doses fisiolgicas, e com adequada ingesto energtica e de aminocidos, a tiroxina aumenta a sntese protica. No entanto, em situaes de deficincia energtica ou em grandes doses no fisiolgicas, a tiroxina tem um efeito contrrio, ou seja, catablico, no metabolismo protico27,96,97.

Catabolismo Protico Diferentes Vias de Catabolismo Protico

Regulao Hormonal da Sntese Protica


Tanto a sntese quanto a degradao de protenas so controladas por hormnios. O hormnio de crescimento estimula a sntese protica, aumentando assim a concentrao de protena nos tecidos. No perodo de intenso crescimento em crianas, o hormnio de crescimento regulado pelo IGF-1, que sintetizado por vrios rgos, especialmente pelo fgado. A insulina tambm estimula a sntese protica, acelerando o transporte de aminocidos atravs da membrana celular, sendo que a ausncia de insulina diminui a sntese protica. A testosterona outro hormnio que estimula a sntese protica durante o perodo de crescimento. Os glucocorticides estimulam a degradao protica muscular fornecendo substrato para a gliconeognese e cetogneses. A tiroxina, indiretamente, afeta o metabolismo protico, aumentando a sua velocidade em todas as clulas e, assim,

Clulas morrem sob uma base regular e programada, denominada apoptose, e seus componentes moleculares so metabolizados. Protenas individuais tambm sofrem turnover regular sob condies normais. A meia-vida de r uma protena pode ser 1 hora, tais como ornitina descarboxilase, fosfoquinase C e insulina; ou ser de diversos meses, tais como hemoglobina e histonas, ou ser equivalente vida do organismo, como os cristalinos oculares. Contudo, a maioria das protenas sofre turnover a cada r 98. poucos dias A heterogeneidade no turnover de diferentes protenas, r igualmente na mesma clula, sugere que o processo seletivo. Protenas so degradadas intracelularmente por vrios sistemas, incluindo a via dependente de ubiquitina, macroautofagia e microautofagia. Quando uma protena sofre algum tipo de leso (alterao), essa marcada

DeAngelis06.indd 88

18/5/2007 10:13:48

Metabolismo de Protenas

89

pela protena ubiquitina (76 aminocidos), em uma reao enzimtica dependente de ATP. A molcula de ubiquitina serve como um marcador que direciona a protena alterada para ser hidrolisada pelo proteossoma, que uma partcula em forma cilndrica presente no interior celular (Fig. 6.9). Em mamferos, o proteossoma consiste de 28 polipeptdios e apresenta um peso molecular de 2.000.000. As protenas dessa partcula constituem aproximadamente 1% do total das protenas celulares. O proteossoma utilizado na degradao de protenas, resultando na formao de pequenos peptdeos. Alm disso, essencial na degradao de protenas sinalizadoras, tais como fatores de transcrio, que, em algumas circunstncias, necessitam estar presentes na clula por perodos limitados de tempo6,98-100. Na superfcie citosslica do retculo endoplasmtico verifica-se a ocorrncia da ligao da molcula de ubiquitina a uma protena alterada. Posteriormente, a protena ligada a ubiquitina reconhecida e desdobrada por protenas especiais presentes na entrada (em ingls gate = porto)

do proteossomo. A protena desdobrada no interior do proteossomo sofre a ao de uma variedade de proteases, que catalisam a degradao da protena marcada para peptdeos de 7 a 10 aminocidos. Cinco tipos de proteases esto presentes no proteossomo de mamferos. Durante o jejum, a via dependente de ubiquitina ativada, estimulando a degradao de protenas e auxiliando no aumento da neoglicognese6,79. Contudo, a adio de ubiquitina para protenas de membrana (como aquelas presentes na membrana plasmtica) tambm marca essas protenas para a protelise. Porm, nessa situao, a molcula de ubiquitina serve para direcionar a protena para a via endolisossomal e a degradao ocorre nos lisossomos. Em relao degradao de protenas citoplasmticas, esta no realizada de maneira indiscriminada. Protenas cujos aminocidos localizados na posio NH2-terminal so metionina, serina, treonina, alanina, valina, cistina, prolina ou glicina, so resistentes protelise, enquanto protenas que apresentam outros aminocidos na posio NH2-terminal podem ser desesta-

FIG. 6.9 A molcula de ubiquitina serve como um marcador que direciona a protena alterada para ser hidrolisada pelo proteossoma. (Fonte: Nelson e Cox1.)

DeAngelis06.indd 89

18/5/2007 10:13:53

90

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

bilizadas e marcadas com a molcula de ubiquitina. Outro sinal para a degradao de protenas a presena de seqncias PEST em protenas. Estas seqncias contm prolina (P), cido glutmico (E), serina (S) e treonina (T), sendo que protenas ricas nestas seqncias apresentam meias-vidas curtas98-100. Macroautofagia e microautofagia so processos que envolvem pequenas vesculas ou vacolos e ocorrem no citoplasma. Macroautofagia envolve a captura de partes do citoplasma por uma membrana, seguida da hidrlise das protenas capturadas dentro de uma vescula. Microautofagia envolve a captura de pores menores do citoplasma por vesculas de pequeno tamanho. Essas vesculas ofertam seus contedos para os lisossomos, que so organelas que contm uma grande variedade de enzimas hidrolticas. Alm desses sistemas intracelulares de degradao de protenas, verifica-se no tecido muscular a presena de proteases dependentes de clcio, as quais so utilizadas para a degradao de protenas contrteis6.

Estudos com animais demonstraram que o jejum de curta durao provoca uma diminuio substancial da protena heptica, mas no muscular. Mais especificamente, o retculo endoplasmtico rugoso heptico degradado neste perodo. No tecido muscular, as protenas no-contrteis so prontamente degradadas, porm durante o jejum prolongado tambm ocorre degradao das protenas contrteis6.

CATABOLISMO DE AMINOCIDOS Transaminao


A transaminao o primeiro passo no catabolismo da maioria dos aminocidos e consiste na transferncia do grupo -amino de um aminocido para o -cetoglutarato (Fig. 6.10). Os produtos resultantes dessa reao so um -cetocido (derivado do aminocido original) e glutamato. Desse modo, o -cetoglutarato desempenha um papel fundamental no metabolismo, por aceitar os grupos amino de outros aminocidos, tornando-se assim glutamato. Por sua vez, o glutamato que um produto comum s reaes de transaminao representa um reservatrio temporrio de grupos amino, provenientes de diferentes aminocidos. O glutamato produzido por transaminao pode ser oxidativamente desaminado ou pode ser utilizado como um doador de grupo amino na sntese de aminocidos dispensveis9,92,102-104. A transferncia de grupos amino de um esqueleto de carbono a outro catalisada por uma famlia de enzimas denominadas aminotransferases (ou transaminases). Todos os aminocidos, com exceo da lisina e da treonina, sofrem transaminao em algum ponto de seu catabolismo. Nas reaes catalisadas por aminotransferases que esto presentes no citosol e na mitocndria h a participao da piridoxal-fosfato como coenzima, que derivada da vitamina B6, a qual pode ser encontrada na natureza sob trs formas: piridoxina, piridoxal e piridoxamina. As aminotransferases so denominadas em relao aos seus doadores de grupos amino especficos, porque o aceptor do grupo amino quase sempre o -cetoglutarato. As duas mais importantes reaes de aminotransferase so catalisadas pelas enzimas alanina aminotransferase (ALT) e aspartato aminotransferase (AST)10,102,103. A enzima ALT, tambm denominada transaminase glutmicopirvica (TGP), est presente em muitos tecidos. A enzima catalisa a transferncia do grupo amino presente no aminocido alanina para o -cetoglutarato, resultando na formao de piruvato e glutamato, respectivamente. A reao facilmente reversvel; entretanto, durante o catabo-

Regulao do Catabolismo Protico


Estudos demonstram aumento da taxa de catabolismo de aminocidos quando a ingesto protica excede a necessidade do organismo, uma vez que no existe no organismo um mecanismo de armazenamento do excesso de protenas ingeridas. Assim, todo aminocido consumido acima da necessidade imediata oxidado e o nitrognio excretado. Esse procedimento um dos principais mecanismos regulatrios do metabolismo protico durante o consumo de dietas hiperproticas. Verifica-se o aumento da atividade das enzimas relacionadas ao catabolismo de aminocidos, o que corrobora a ao do mecanismo regulatrio. Estudos com animais submetidos a dietas com diferentes concentraes de protenas, durante 10 dias, demonstram que a atividade in vitro da enzima heptica serina desidratase aps esse perodo aumenta substancialmente e progressivamente proporo que a concentrao de protena aumenta na dieta6,101. A regulao do metabolismo de protenas tambm permite o catabolismo seletivo de protenas no vitais para o organismo durante o jejum, disponibilizando, desse modo, aminocidos para a gliconeognese. Os mecanismos de regulao atuam durante o jejum prolongado para permitir o saldo de degradao de protenas no vitais, enquanto ocorre a conservao daquelas que so mais relevantes para a sobrevivncia do indivduo, por exemplo, as protenas do sistema nervoso central. Dentre as protenas que podem ser consideradas menos vitais, inclui-se aproximadamente metade da massa muscular corporal4.

DeAngelis06.indd 90

18/5/2007 10:13:57

Metabolismo de Protenas

91

lismo dos aminocidos, a enzima atua apenas na direo da sntese de glutamato, sendo este fato tambm observado na maioria das transaminases9,10,92.
ALT B6

Deaminao
A remoo do nitrognio dos aminocidos tambm ocorre por reaes de deaminao, que resultam na formao de amnia livre. Um nmero determinado de aminocidos pode ser deaminado diretamente (histidina), por desidratao (serina, treonina), pelo ciclo da purina nucleotdeo (aspartato), e por deaminao oxidativa (glutamato). Estas reaes ocorrem principalmente no fgado e no rim e fornecem -cetocidos (os quais podem entrar na rota central do metabolismo energtico) e on amnio (NH4+; que uma fonte de nitrognio na sntese de uria)3,5,9. Em relao reao catalisada pela enzima glutamato desidrogenase (GDH), que apresenta a caracterstica singular de ser capaz de utilizar tanto NAD+ ou NADP+, o on amnio formado a partir do glutamato por deaminao oxidativa3,5:
GDH

Alanina + -cetoglutarato

Piruvato + Glutamato

A enzima AST, tambm denominada transaminase glutmico-oxalactica (TGO), uma exceo regra de que as aminotransferases direcionam os grupos amino ao glutamato. Durante o catabolismo dos aminocidos, a AST transfere grupos amino do glutamato ao oxaloacetato, formando aspartato, que utilizado como uma das fontes de nitrognio no ciclo da uria1,2,25. Para a maioria das reaes de transaminao, a constante de equilbrio prxima de 1, permitindo reao funcionar tanto na degradao de aminocidos, por meio da remoo de grupos -amino (por exemplo, aps o consumo de uma refeio rica em protenas), quanto na biossntese, por meio da adio de grupos amino aos esqueletos de carbono de -cetocidos10,25.

Glutamato + NAD+ (ou NADP+) + H2O NADH (ou NADPH) + H+

-cetocido + NH4+ +

FIG. 6.10 Viso geral do metabolismo de aminocidos e o papel da transaminao. (Adaptado de MURRAY et al.7.)

DeAngelis06.indd 91

18/5/2007 10:13:57

92

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

Os D-aminocidos so encontrados em plantas e nas paredes celulares de microrganismos, porm no so utilizados na sntese de protenas em mamferos. Entretanto, esto presentes na dieta e so eficientemente metabolizados no fgado. A enzima D-aminocido oxidase dependente de flavina adenina dinucleotdeo (FAD) catalisa a deaminao oxidativa dos D-aminocidos. Os -cetocidos resultantes podem entrar nas rotas gerais do metabolismo de aminocidos, ser transaminados para ismeros L ou catabolizados para obteno de energia24.

cido rico, creatinina e alguns aminocidos livres. Uria e amnia surgem a partir da oxidao parcial de aminocidos, enquanto o cido rico e a creatinina so indiretamente derivados de aminocidos10,27,91. De acordo com a Fig. 6.11, verifica-se que o nitrognio que entra no ciclo da uria a amnia, na forma do on amnio (NH4+). O precursor imediato o glutamato, porm o nitrognio da amnia provm de diversas fontes, como resultado de reaes de transaminao. Uma condensao entre o on amnio e o dixido de carbono produz o fosfato de carbamoila, em uma reao que requer duas molculas de ATP para cada molcula formada. Segue-se a reao do fosfato de carbamoila com a ornitina para formar a citrulina. At esse ponto, as reaes do ciclo acontecem na mitocndria. A citrulina , em seguida, transportada para o citosol. Um segundo nitrognio entra no ciclo da uria quando o aspartato reage com a citrulina para formar o argininossuccinato em mais uma reao que requer ATP (so produzidos AMP e PPi). O grupo amino do aspartato a fonte do segundo nitrognio da uria formada nessa srie de reaes. O argininossuccinato clivado para originar fumarato e arginina. Posteriormente, a arginina hidrolisada pela enzima arginase para formar uria e regenerar a ornitina, que transportada novamente para a mitocndria. A sntese de fumarato no ciclo da uria um elo entre este ciclo e o ciclo de Krebs. O fumarato um intermedirio do ciclo de Krebs e pode ser convertido em oxaloacetato. Uma reao de transaminao pode converter o oxaloacetato em aspartato, estabelecendo outra ligao entre os dois ciclos. Cabe ressaltar que quatro fosfatos de alta energia so consumidos na sntese de cada molcula de uria3. Em resumo, um nitrognio da molcula de uria fornecido pela amnia livre, enquanto o outro nitrognio provm do aspartato. O glutamato o precursor imediato da amnia por meio da deaminao oxidativa catalisada pela enzima glutamato desidrogenase e do nitrognio do aspartato por meio da transaminao do oxaloacetato catalisada pela enzima aspartato aminotransferase. O carbono e o oxignio da uria so derivados do CO2. A uria sintetizada pelo fgado , posteriormente, transportada pela circulao sangnea at os rins, onde filtrada e excretada na urina. Uma parte da uria sintetizada no fgado difunde-se do sangue ao intestino e clivada a CO2 e NH3 pela urease bacteriana. Esta amnia parcialmente perdida nas fezes, enquanto outra parte reabsorvida pelo sangue50.

AMINOCIDOS: METABOLISMO DOS ESQUELETOS DE CARBONOS


O catabolismo dos 20 aminocidos encontrados nas protenas envolve a remoo dos grupos -amino, seguida pela degradao dos esqueletos de carbono resultantes. O catabolismo dos esqueletos de carbono converge para formar sete produtos: oxaloacetato, -cetoglutarato, piruvato, fumarato, acetil-CoA, acetoacetil-CoA e succinil-CoA. Estes produtos entram nas rotas do metabolismo intermedirio, resultando na sntese de glicose ou de lipdio ou na produo de energia, por meio de sua oxidao a CO2 e H2O pelo ciclo de Krebs9,22,105. Aminocidos que so degradados para acetil-CoA ou acetoacetil-CoA so denominados cetognicos (leucina e lisina), porque originam corpos cetnicos. Cabe ressaltar que em mamferos h ausncia de uma via metablica que sintetize glicose a partir de acetil-CoA ou de acetoacetilCoA. Diferentemente, aminocidos que so degradados para oxaloacetato, -cetoglutarato, piruvato, fumarato ou succinil-CoA so denominados glicognicos (alanina, asparagina, aspartato, cistena, glutamato, glutamina, glicina, prolina, serina, arginina, histidina, metionina, treonina e valina). A sntese de glicose a partir desses aminocidos possvel uma vez que os intermedirios do ciclo de Krebs e o piruvato podem ser convertidos em fosfoenolpiruvato e, posteriormente, em glicose. Alm disso, existem aminocidos que so glicognicos e cetognicos (tirosina, isoleucina, fenilalanina e triptofano)5,10,22,92,103.

CICLO DA URIA
A uria a principal forma de eliminao dos grupos amino derivados dos aminocidos e responde por mais de 90% dos componentes nitrogenados presentes na urina. Diariamente, cerca de 11 a 15 g de nitrognio so excretados na urina de um indivduo adulto saudvel que consome de 70 a 100 g de protena por dia. Alm da uria, existem outras formas de excreo de nitrognio na urina, como amnia,

Regulao do Ciclo da Uria


necessria uma regulao precisa para uma via que controla a concentrao plasmtica de um composto alta-

DeAngelis06.indd 92

18/5/2007 10:14:00

Metabolismo de Protenas

93

FIG. 6.11 Ciclo da uria.

mente txico amnia e que altamente dependente de energia. O principal passo regulatrio do ciclo da uria a sntese inicial do carbamoil-fosfato. A enzima carbamoil-fosfato sintetase I necessita do ativador alostrico N-acetilglutamato. Este composto sintetizado a partir do glutamato e do acetil-CoA pela N-acetilglutamato sintetase, a qual ativada pelo aminocido arginina. Acetil-CoA, glutamato e arginina so necessrios para fornecer intermedirios ou energia para o ciclo da uria, e a presena do N-acetilglutamato indica que esses compostos esto disponveis 79,92,98. O ciclo tambm regulado pela induo das enzimas envolvidas. A induo (10 a 20 vezes) das enzimas do ciclo da uria ocorre quando h aumento da oferta de amnia ou de aminocidos para o fgado. A concentrao dos intermedirios do ciclo tambm exerce um papel na sua regulao por meio do efeito de ao de massas. Uma dieta hiperprotica (excesso de aminocidos) e o jejum (necessidade de metabolizar a protena corporal para obter carbonos para a produo de energia) resultam em induo das enzimas do ciclo da uria4,6,92.

Induo das Enzimas que Catabolizam Aminocidos


Quando as concentraes de aminocidos que alcanam o tecido heptico so relativamente baixas, a principal proporo desses aminocidos incorporada como protena. Alm disso, os valores de Km para aminocidos de muitas das enzimas envolvidas alto, permitindo que aminocidos estejam presentes em excesso antes que um catabolismo significativo possa ocorrer. Em contraste, as enzimas que geram aminoacil-tRNAs apresentam valores de K m muito menores para aminocidos. Contudo, medida que as concentraes aumentam, uma proporo dos aminocidos catabolizada. O excesso de aminocidos pode ser oxidado completamente para CO2, uria e gua, ou intermedirios gerados podem ser utilizados como substratos para lipognese. Aminocidos que escapam do fgado so utilizados para a sntese protica ou como substratos energticos em outros tecidos. Conforme ilustrado na Fig. 6.12, os valores relativos de K m dos dois sistemas enzimticos so de

DeAngelis06.indd 93

18/5/2007 10:14:01

94

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

extrema relevncia na regulao do destino dos aminocidos, o que representa claramente um mecanismo para prevenir o desperdcio de aminocidos indispensveis por meio do catabolismo 1,79,92,98. Quando animais so alimentados com uma dieta hiperprotica, muitas das enzimas que catabolizam aminocidos, como triptofano pirrolase, fenilalanina hidroxilase, 2-oxocido desidrogenase e serina desidratase, so rapidamente induzidas. Este efeito ocorre principalmente no fgado, sendo muito menos marcante em outros tecidos, como rins e corao79. O mecanismo de induo dessas enzimas ainda no est totalmente elucidado. Contudo, tem sido verificado o aumento da quantidade de mRNA de algumas enzimas, indicando que o controle exercido em nvel transcricional dos genes para a enzima estudada, sendo esse processo controlado por diversos hormnios. A glicose inibe fortemente a induo deste processo, talvez devido estimulao da liberao de insulina, enquanto o glucagon um potente estimulador da induo de diversas enzimas que catabolizam aminocidos106.

METABOLISMO DE AMINOCIDOS NO MSCULO ESQUELTICO


A maioria da protena corporal e, conseqentemente, dos aminocidos, est contida no msculo esqueltico. No organismo de um humano com 70 kg, h cerca de 12 kg de protena e 200 a 230 g de aminocidos livres. O msculo esqueltico representa de 40% a 45% da massa corporal total, com cerca de 7 kg de protena, sendo aproximadamente 66% na forma de protenas contrteis e 34% na forma de protenas no contrteis. Cerca de 130 g de aminocidos livres esto no espao intramuscular, enquanto somente 5 g de aminocidos livres esto na circulao sangnea. As caractersticas dos sistemas de transporte de aminocidos presentes na membrana plasmtica da clula muscular (Tabela 6.8) explicam, em parte, a manuteno do gradiente de concentrao de aminocidos entre msculo e sangue. gua e protenas, em uma razo de aproximadamente 4:1, so os dois componentes dominantes do msculo esqueltico. Este fato sugere que o aumento de 1 kg de massa do msculo esqueltico vincula-se ao aumento de aproximadamente 200 g de protena muscular80,107-109.

(M)

FIG. 6.12 Destino dos aminocidos da dieta. (Adaptado de GILLHAM et al.79.)

DeAngelis06.indd 94

18/5/2007 10:14:04

Metabolismo de Protenas

95

TABELA 6.8 Caractersticas dos Sistemas de Transporte de Aminocidos Presentes no Sarcolema. (Modificado de Wagenmakers109)
Nome do transportador Sistema A AA transportados Transporta aminocidos neutros e pequenos, particularmente alanina e Glicina Caractersticas Sistema de alta afinidade, baixa capacidade, sdio dependente e responsivo estimulao por insulina. Alm disso, uma substancial parte do efluxo de alanina a partir do tecido muscular tambm ocorre atravs dos sistemas ASC e L. Sdio dependente, no responsivo estimulao por insulina, capacidade mdia e afinidade mdia. Sistema de baixa afinidade, alta capacidade, sdio dependente e no responsivo ao da insulina. A razo de distribuio entre o espao intramuscular e extracelular para ACR ou aminocidos aromticos de aproximadamente 1,2:1. Esse valor est relacionado ao acoplamento desse sistema com o gradiente de alanina, ou seja, influxo de ACR e efluxo de alanina. Alta capacidade, baixa afinidade, sdio dependente e responsivo ao da insulina. responsvel pela elevada diferena de concentrao (30 a 40 vezes) de glutamina entre o tecido muscular e o sangue, uma vez que exerce a funo de controlar a liberao de glutamina a partir do msculo para o sangue. A atividade do sistema Nm aumentada sob determinadas situaes, tais como acidose, tratamento com corticosterides, trauma, queimaduras e sepse, as quais acarretam em aumento da concentrao intracelular de sdio, o que favorece o efluxo de glutamina do msculo para o sangue. Alta afinidade, baixa capacidade e sdio independente, porm dependente de H+. Contudo, as caractersticas desse transportador no so totalmente esclarecidas, uma vez que um gradiente de concentrao > 50 vezes mantido entre o msculo e o sangue, apesar da captao significativa de glutamato a partir do sangue pelo tecido muscular ocorrer durante as 24 horas do dia.

Sistema ASC

Alanina, serina e cistena so os substratos principais Transporta principalmente ACR e aminocidos aromticos

Sistema L

Sistema Nm

Transporta basicamente os aminocidos glutamina, asparagina e histidina

Sistema XAG

Glutamato e aspartato

O msculo esqueltico de humanos, quando incubado in vitro, pode metabolizar apenas seis aminocidos: leucina, isoleucina, valina, aspartato, asparagina e glutamato, diferentemente do fgado, que pode metabolizar praticamente todos os 20 aminocidos que esto presentes nas protenas do organismo. Aps um jejum noturno, h um saldo de degradao protica muscular (sntese < degradao), o que determina que os aminocidos no metabolizados no tecido muscular sejam liberados em proporo a sua relativa ocorrncia na protena muscular, enquanto uma divergncia seria observada quando os aminocidos fossem transaminados, oxidados ou sintetizados. O msculo esqueltico humano no libera aminocidos de cadeia ramificada (ACR)

(19% de ocorrncia na protena muscular), glutamato (7%), aspartato e asparagina (juntos 9%) ou a liberao menor do que sua relativa ocorrncia. O aminocido glutamato constantemente captado a partir da circulao sangnea pelo msculo esqueltico. Por outro lado, no estado psabsortivo, 48% e 32% dos aminocidos liberados pelo msculo esqueltico correspondem a glutamina e alanina, respectivamente, sendo que a glutamina, com 2 tomos de nitrognio por molcula, a principal fonte de liberao de nitrognio a partir do msculo. As taxas de trocas de glutamina e alanina excedem os seus estoques corporais e sua ocorrncia na protena muscular de 7% e 9%, respectivamente, o que indica que h uma necessidade constante

DeAngelis06.indd 95

18/5/2007 10:14:08

96

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

da sntese de novo destes aminocidos no msculo. A taxa de sntese de glutamina no msculo esqueltico aproximadamente 50 mmol/h mais alta do que a de qualquer outro aminocido12,78,102,110-116. Os ACR, o glutamato, o aspartato e a asparagina, oriundos da degradao de protenas musculares, juntamente com o glutamato captado a partir da circulao sangnea, so metabolizados no msculo e utilizados para a sntese de novo de glutamina e alanina aps um jejum noturno. Quanto aos demais aminocidos, so liberados em proporo a sua relativa ocorrncia na protena muscular, o que implica que pouco ou nenhum metabolismo ocorre em relao aos mesmos77,117,108.

podem ser transferidos para o compartimento mitocondrial para serem oxidados. Porm, a atividade do complexo enzimtico desidrogenase de -cetocidos de cadeia ramificada (DCCR) no tecido muscular apresenta baixa atividade. Essa segunda etapa da oxidao de ACR no msculo esqueltico considerada a limitante desse processo. Nessa etapa, ocorre uma descarboxilao oxidativa no reversvel do cetocido de cadeia ramificada pelo complexo enzimtico DCCR, que est localizado na superfcie interna da membrana mitocondrial interna108,109,118. O contedo da enzima DCCR maior no fgado em relao ao tecido muscular. Sob condio de repouso, esto ativas no msculo esqueltico 4% da enzima DCCR. Por outro lado, sob a mesma condio, 97% da enzima DCCR presente no fgado esto na forma ativa. A atividade da DCCR regulada por fosforilao reversvel, uma vez que essa enzima inativada pela enzima DCCR quinase e ativada pela DCCR fosfatase. A atividade da enzima DCCR elevada em resposta ao aumento da concentrao de leucina, H+, ADP mitocondrial e, possivelmente, pela elevao da razo NAD+/NADH. Por outro lado, a atividade da enzima DCCR inibida pelo aumento da concentrao de ATP, acetilCoA, piruvato, cidos graxos livres e corpos cetnicos. A regulao da enzima DCCR sensvel tanto s alteraes em substratos e produtos intracelulares, quanto ao estado energtico da clula. Os -cetocidos de cadeia ramificada apresentam muitas vias metablicas; alguns podem ser liberados para a circulao sangnea a partir da clula muscular, enquanto outros podem ser oxidados em outros tecidos, particularmente no fgado118-120. No incio do estado de jejum, a glicogenlise heptica relevante para a manuteno da glicemia. A lipognese diminuda, e lactato (ciclo de Cori) e aminocidos so utilizados para a formao de glicose (gliconeognese). Cabe ressaltar que o ciclo glicose-alanina, no qual o carbono e nitrognio retornam ao fgado na forma de alanina, se torna uma via metablica importante121,122. Com o prolongamento do estado de jejum, uma vez que nenhum alimento ingerido, ao mesmo tempo em que ocorre uma diminuio acentuada da concentrao de glicognio heptico, o organismo torna-se dependente da gliconeognese heptica, primariamente a partir de glicerol, de lactato e de aminocidos. O ciclo de Cori e o ciclo alanina-glicose (Fig. 6.13) desempenham papel relevante, porm no fornecem carbonos para o saldo de sntese de glicose. Este fato devido glicose formada a partir de lactato e alanina pelo fgado meramente repor quela que foi convertida para lactato e alanina pelos tecidos perifricos. Na verdade, estes ciclos transferem energia a partir da oxidao de cidos graxos no fgado para tecidos perifricos que no conseguem oxidar o tria-

METABOLISMO PROTICO E DE AMINOCIDOS NO CICLO JEJUM-ALIMENTADO


Poderia se supor que a ingesto de uma refeio contendo protenas causasse um elevado e significativo aumento da concentrao de todos os aminocidos na circulao sistmica, porm, por diversas razes, este fato no ocorre. Aps a digesto e absoro das protenas da dieta no trato digestrio, a maioria dos aminocidos transportada por meio do sangue portal at o tecido heptico. Todavia, as clulas intestinais metabolizam os aminocidos aspartato, asparagina, glutamato e glutamina e liberam alanina, lactato, citrulina e prolina no sangue portal. Alm disso, as clulas da mucosa intestinal, que representam clulas de rpida diviso, necessitam de glutamina como um aminocido doador de nitrognio para a sntese de bases nitrogenadas, que so incorporadas nos cidos nuclicos110,113. Um segundo tecido que apresenta um papel relevante no controle da concentrao plasmtica de aminocidos o fgado. Aps uma refeio, cerca de 20% dos aminocidos que entram no tecido heptico so liberados para a circulao sistmica, enquanto que aproximadamente 50% dos aminocidos so catabolizados, com a concomitante liberao de uria, e 6% so incorporados em protenas plasmticas27,79. O fgado relativamente ineficiente em oxidar tirosina, lisina e ACR (leucina, isoleucina e valina). Em relao aos ACR, este fato devido baixa atividade cataltica da enzima aminotransferase de ACR, que transfere o grupo -amino desses aminocidos para o -cetoglutarato e, desse modo, inicia o catabolismo dos ACR. Portanto, os ACR so pouco metabolizados no fgado, sendo captados principalmente pelo msculo esqueltico, o qual apresenta a enzima aminotransferase de ACR tanto no compartimento citosslico quanto no mitocondrial. Alguns -cetocidos de cadeia ramificada formados a partir da enzima citosslica muscular

DeAngelis06.indd 96

18/5/2007 10:14:08

Metabolismo de Protenas

97

cilglicerol. O crebro oxida glicose completamente a CO2 e gua. Em conseqncia, o saldo de sntese de glicose a partir de alguma outra fonte de carbono obrigatrio no estado de jejum. Todavia, cidos graxos no podem ser utilizados para a sntese de glicose, porque no h uma via pela qual o acetil-CoA produzido a partir da oxidao de cidos graxos possa ser convertido em glicose. O glicerol, um subproduto da liplise no tecido adiposo, representa um substrato para a sntese de glicose. Contudo, em resposta ao jejum, verifica-se aumento da degradao protica no organismo que ocorre em alguns tecidos na fase inicial da privao alimentar , o que permite que os aminocidos liberados sejam utilizados para a oxidao ou para a gliconeognese. dentre as protenas corporais, especialmente as do msculo esqueltico, que se obtm a maioria do carbono necessrio para o saldo de sntese de glicose1,7,121-123. As protenas so hidrolisadas dentro da clula muscular e a maioria dos aminocidos parcialmente metabolizada. Alanina e glutamina so os aminocidos liberados em maiores quantidades a partir do tecido muscular para o sangue. Os demais aminocidos so, na sua maior parte,

metabolizados para a obteno de intermedirios (piruvato e -cetoglutarato), os quais podem gerar alanina e glutamina. ACR so a principal fonte de nitrognio para a sntese de alanina e glutamina no tecido muscular. Os -cetocidos de cadeia ramificada produzidos a partir dos ACR por transaminao so parcialmente liberados no sangue para a captao pelo fgado, que sintetiza glicose a partir do -cetocido da valina, corpos cetnicos a partir do -cetocido da leucina, e glicose e corpos cetnicos a partir do -cetocido da isoleucina. Estima-se que os aminocidos contribuam para a sntese de cerca de 60 g de glicose por dia na fase inicial do jejum. Igualmente importante a disponibilidade de aminocidos indispensveis, liberados pela degradao protica tecidual e potencialmente utilizveis para a manuteno da funo de outros tecidos. O msculo esqueltico e os tecidos intestinais so as principais fontes de aminocidos indispensveis durante os perodos de jejum. Se a privao alimentar perdurar alm de alguns dias, a taxa de degradao protica diminui rapidamente. Aps duas ou trs semanas sem ingesto alimentar, a gliconeognese dos aminocidos no fornece mais do que 15 a 20 g de glicose por dia3,4,9,75,79,102,105,108,109.

FIG. 6.13 Ciclo alanina-glicose.

DeAngelis06.indd 97

18/5/2007 10:14:09

98

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

Igualmente no estado de jejum, as clulas da mucosa intestinal necessitam de glutamina para a sntese de nucleotdeos e, nessa condio, parte do glutamato formado pode ser oxidado para o fornecimento de energia, fato este que est relacionado com a concomitante liberao de alanina pelo entercito para o sangue portal heptico. Cabe ressaltar que, durante o jejum, o intestino remove aproximadamente 2/3 dos aminocidos circulantes, sendo que o aminocido glutamina responde por mais da metade do total dos aminocidos captados. Ao mesmo tempo, o intestino libera sete aminocidos, sendo o aminocido alanina responsvel por mais da metade do total de aminocidos liberados12,110. A sntese de glicose no fgado durante o jejum intimamente ligada sntese de uria. A maioria dos aminocidos pode doar o seu nitrognio amnico por transaminao com o -cetoglutarato, o que forma glutamato e o novo -cetocido, que freqentemente pode ser utilizado para a sntese de glicose122,123. No incio do perodo de realimentao, o fgado inicialmente capta pouca glicose, ou seja, o tecido heptico permanece ainda realizando gliconeognese por algumas horas aps o incio da realimentao. Preferivelmente do que fornecer glicose sangnea, a gliconeognese heptica fornece glicose-6-fosfato para a glicognese. Isto significa que o glicognio heptico no ressintetizado aps um jejum pela sntese direta a partir da glicose sangnea. De preferncia, a glicose catabolizada em tecidos perifricos para lactato, o qual convertido no fgado para glicognio, por meio da via indireta da sntese de glicognio (gliconeognese). A gliconeognese a partir de aminocidos especficos que so absorvidos pela mucosa intestinal tambm exerce um papel relevante em restabelecer a concentrao normal de glicognio heptico por meio da gliconeognese. Aps a taxa de gliconeognese declinar, o glicognio heptico mantido pela via direta de sntese, ou seja, a partir da glicose sangnea. Ao mesmo tempo, verifica-se que os aminocidos presentes no sangue oriundos da dieta so tambm utilizados para a sntese de protenas no fgado e nos demais tecidos do organismo1,7,122.

para a alimentao prejudicada. Conseqentemente, pacientes gravemente enfermos podem perder 20% da protena corporal, sendo grande parte oriunda do msculo esqueltico. Alm disso, a imobilidade dos pacientes causa atrofia do msculo esqueltico, contribuindo para um balano nitrogenado negativo. Embora o catabolismo de protenas musculares possa ser utilizado para fornecer substratos para a sntese de protenas no fgado (protenas de fase aguda) e para clulas do sistema imune (replicao celular), a depleo grave de massa magra corporal aumenta a morbidade e a mortalidade na fase aguda e retarda a recuperao do paciente. A Tabela 6.9 apresenta algumas conseqncias clnicas do estado catablico agudo protico. Tecidos caracterizados por clulas de rpida replicao, como entercitos e clulas do sistema imune, exibem alteraes precoces em situaes de diminuio da capacidade de sntese de protenas. A atrofia da mucosa intestinal e a perda de vilosidades no intestino delgado podem promover a translocao de bactrias intestinais a partir do lmen para dentro do sistema linfovascular atravs da parede intestinal. Alteraes na funo imune so importantes conseqncias clnicas do catabolismo protico. A funcionalidade de linfcitos T primariamente deprimida, enquanto alteraes na funcionalidade de linfcitos B so mais variveis. A atividade do sistema complemento e a funo granuloctica tambm so afetadas. No fgado, a condio de estresse agudo seletivamente aumenta a sntese de protenas de fase aguda, enquanto a sntese de outras diversas protenas diminuda aps o trauma. Estas incluem albumina, transferrina, pr-albumina, protena ligadora de retinol e fibronectina. O aumento da difuso de albumina a partir do plasma para dentro do compartimento intersticial tambm pode contribuir para a hipoalbuminemia de pacientes agudos. A atrofia e fraqueza da musculatura respiratria podem acarretar diminuio da ventilao alveolar122,124. Em alguns estados catablicos, como uremia e jejum, a perda de nitrognio resulta principalmente da diminuio da sntese protica. Em contraste, evidncias indicam que a perda de massa magra corporal em condies de estresse agudo decorrente principalmente do aumento da degradao protica no msculo esqueltico. Esta alterao metablica representa uma resposta comum em quase todas as doenas graves, incluindo trauma, sepse e acidose. Aps uma cirurgia eletiva, a taxa de degradao protica aumenta proporcionalmente ao grau do estresse cirrgico. A sntese protica diminuda tambm contribui para a resposta catablica. Contudo, apesar de se constatar diminuio substancial do contedo de RNA total muscular e de mRNA de protenas miofibrilares especficas em indivduos com trauma e sepse, estudos utilizando istopos estveis freqentemente tm reportado aumento das taxas de snte-

METABOLISMO PROTICO EM ESTADOS CATABLICOS


Em indivduos saudveis, a homeostase da protena corporal mantida por um ciclo no qual o saldo de perda de protenas no perodo absortivo igualado pelo saldo de incorporao de protenas no perodo ps-prandial. No estresse agudo, como cirurgia, trauma, queimadura e sepse, o saldo de catabolismo protico acelerado e a resposta metablica

DeAngelis06.indd 98

18/5/2007 10:14:11

Metabolismo de Protenas

99

TABELA 6.9 Algumas Conseqncias Clnicas do Catabolismo Protico. (Modificado de Biolo et al.124)
Prejuzo no processo de cicatrizao Prejuzo da resposta imune para infeces Hipoalbuminemia Aumento da sntese de protenas de fase aguda (por exemplo, protena C reativa, fibrinognio, e outras) Diminuio da capacidade de coagulao Reduo da funo intestinal Translocao bacteriana intestinal Degradao muscular Diminuio da funo dos msculos respiratrios

em pacientes com trauma e sepse. A interleucina 6 (IL-6) est envolvida na estimulao da sntese de protenas de fase aguda124. A glutamina o aminocido livre mais abundante no msculo esqueltico. Alm disso, a concentrao intracelular de glutamina pode influenciar na regulao das taxas de sntese e de degradao proticas. Contudo, a concentrao intramuscular de glutamina diminui substancialmente em muitas situaes catablicas, sendo que alteraes na concentrao tecidual de glutamina correlacionam-se com o turnover protico. Cabe ressaltar que estudos in vitro demonstram que a glutamina diminui a degradao protica e estimula a sntese protica. Alm disso, a diminuio da hidratao celular pode acarretar em catabolismo protico tecidual. Desse modo, postula-se que alteraes da hidratao celular podem representar a ligao entre o contedo de glutamina intracelular e o catabolismo protico durante estados catablicos12,104,124.

DESNUTRIO PROTICO-ENERGTICA
A desnutrio definida como um estado patolgico de diferentes graus de intensidade e variadas manifestaes clnicas. produzida pela deficiente assimilao dos componentes do alimento. A FAO/WHO definiu a desnutrio protico-energtica como o espectro de situaes patolgicas que provm da falta, em vrias propores, de protenas e calorias ocorrendo, mais freqentemente, em pr-escolares e comumente associadas a infeces. Neste conceito so compreendidas, alm das formas graves de desnutrio protico-energtica, como o marasmo e o kwashiorkor, suas formas intermedirias ou moderadas e a deficincia de outros nutrientes (vitaminas e minerais), muitas vezes associada ao dficit protico-energtico128. A desnutrio protico-energtica pode, quanto origem, ser primria (diettica) ou secundria (condicionada). Na desnutrio primria o consumo inadequado de nutrientes o determinante. A forma secundria causada por outros fatores, diferentes da ingesto alimentar deficiente, como a interferncia na ingesto, absoro e utilizao dos nutrientes devido a alguma afeco ou de necessidades nutricionais aumentadas11,129,130. A desnutrio protico-energtica muito menos comum e menos grave em adultos. J a sua ocorrncia em crianas compromete a velocidade de crescimento e desenvolvimento, muitas vezes com alteraes irreversveis se a deficincia nutricional ocorrer durante a gestao, lactao ou primeiros anos de vida.

se protica muscular e corporal em pacientes gravemente enfermos. Nessa situao, a hiptese que o aumento da disponibilidade de aminocidos intracelulares oriundos da protelise possa estimular diretamente a sntese protica, possivelmente por meio de mecanismos ps-transcricionais. O catabolismo irreversvel de aminocidos livres derivados da protelise tambm acelerado (ou seja, oxidao dos aminocidos de cadeia ramificada no tecido muscular e aumento da sntese de uria no fgado)104. Dentre os mediadores da resposta catablica protica ao trauma e sepse destacam-se: hormnios, citocinas, prostaglandinas e a concentrao intracelular de glutamina. Os hormnios denominados contra-regulatrios (glucagon, catecolaminas, glicocorticides) esto aumentados aps o trauma e a sepse. Estudos indicam que o glucagon estimula o catabolismo de aminocidos indispensveis no tecido heptico, enquanto os glicocorticides tm efeitos agudos proteolticos, possivelmente por meio da ativao do sistema ubiquitina-proteossoma. Por outro lado, a capacidade de a insulina estimular a sntese protica muscular parece ser prejudicada em indivduos com sepse grave. Alm disso, pacientes gravemente enfermos freqentemente apresentam reduo da concentrao plasmtica de GH e de IGF-1, fato este que pode contribuir para o catabolismo protico nesses pacientes99,100,125-127. Em relao s citocinas, verifica-se que essas podem mediar algumas das disfunes metablicas observadas

DeAngelis06.indd 99

18/5/2007 10:14:11

100

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

Na desnutrio protico-energtica, independentemente da forma clnica encontrada, h deficincia protica. Mesmo nos casos em que h ingesto protica adequada, a deficincia calrica faz com que as protenas sejam utilizadas para fins energticos11. O perodo entre a gestao e os cinco anos de idade nutricionalmente o mais vulnervel do ciclo da vida do ser humano. O crescimento rpido, a perda da imunidade passiva e o desenvolvimento do sistema imune determinam necessidades dietticas mais especficas e menor flexibilidade em relao a perodos mais tardios da vida. Estados patolgicos como infeco e parasitismo so situaes agravantes. O sinergismo entre desnutrio e infeco bem conhecido: a infeco acarreta desnutrio por vrios mecanismos sendo, talvez, o aumento do catabolismo o efeito mais importante26,27. A interao dos diferentes fatores ligados ao agente, ao hospedeiro e ao meio ambiente precipitam a passagem do perodo pr-patognico para o patognico.

Mtodos Utilizados na Avaliao do Estado Nutricional Protico


Os principais mtodos de avaliao do estado nutricional protico so: i. protena somtica; ii. protena visceral; iii. alteraes metablicas; iv. funo muscular e funo imune. Na avaliao da protena somtica so usadas a excreo urinria de creatinina (freqentemente expressa como ndice creatinina/altura) e a excreo de 3-metil histidina. Esta ltima utilizada para avaliar a depleo protica da massa muscular em crianas com marasmo e o grau de repleo aps longo perodo de recuperao nutricional. Este parmetro tambm utilizado em condies de sepse generalizada e traumas132,133. Para analisar o estado protico visceral, so avaliadas as concentraes de uma ou mais protenas plasmticas. As mais utilizadas so as protenas totais plasmticas, como albumina, transferrina, protenas transportadoras de retinol e pr-albumina unida tiroxina. As determinaes de albumina e transferrina so as mais freqentes em pacientes hospitalizados essas dosagens no so recomendadas para verificao das alteraes agudas do estado nutricional protico26,27. Para acompanhar as alteraes agudas da protena visceral, durante a convalescncia, utiliza-se a protena transportadora de retinol e pr-albumina unida tiroxina. Essas protenas sricas existem em pequena quantidade no organismo, tm uma meia-vida curta e uma especificidade relativamente alta, quando comparadas albumina e transferrina. Atualmente, est aumentando o uso de somatomedina-C ou insulin-like growth factor-1 (IGF-1) na r avaliao do estado nutricional protico. Existem evidncias de que seja um dos mtodos mais sensveis para determinar as alteraes agudas do estado nutricional protico quando comparado com as outras protenas plasmticas90,133-137. A restrio protica diminui as concentraes de insulina e IGF-1 no sangue, com conseqente aumento dos receptores celulares e de protenas transportadoras no msculo esqueltico, fenmeno que no ocorre no fgado. H ainda aumento da especificidade dos receptores, impedindo, por exemplo, que o IGF-1 se ligue aos receptores de insulina. Estes processos demonstram uma adaptao do organismo, restringindo a ao do IGF-1 e, provavelmente, tambm da insulina em tecidos perifricos135.

Mtodos de Avaliao da Desnutrio Protico-Energtica (DPE)


Utiliza-se, para avaliao da DPE, o inqurito nutricional que pode ser dividido em 4 etapas: i. inqurito socioeconmico e de hbitos alimentares; ii. inqurito alimentar ou diettico; iii. inqurito bioqumico; iv. inqurito clnico. Os inquritos socioeconmico e diettico analisam o problema no perodo pr-patognico, possibilitando a avaliao dos fatores de risco da populao para DPE. Esta metodologia apenas descreve o risco de essa populao estar desnutrida. necessrio complementar-se com os demais componentes do inqurito nutricional, ou seja, os inquritos bioqumicos e clnicos. Quanto ao metabolismo protico, o inqurito bioqumico particularmente til. Este mtodo pode indicar diferentes condies nutricionais, como valores de concentrao sangnea ou de excreo urinria de vrios nutrientes ou de seus metablitos, podendo assinalar a situao das reservas orgnicas. No entanto, a maior contribuio dos estudos bioqumicos tem sido observada para as carncias especficas de micronutrientes como, por exemplo, a hipovitaminose A e a anemia ferropriva. O inqurito clnico, incluindo a antropometria, objetiva demonstrar a existncia de alteraes anatmicas, ou seja, sinais clnicos bem definidos e caractersticos das doenas nutricionais131,132.

DeAngelis06.indd 100

18/5/2007 10:14:12

Metabolismo de Protenas

101

FIG. 6.14 Histria natural da desnutrio protico-calrica Mtodo de avaliao. (Modificado de Tirapegui27.)

O tratamento de suporte nutricional leva a um rpido retorno a concentrao normal de IGF-1, com rpida elevao nas primeiras seis horas e com total restabelecimento em 24 horas. Este fato ocorre anteriormente a modificaes na concentrao de albumina, de transferrina ou, ainda, de parmetros bastante sensveis como a protena transportadora de retinol (RBP) ou a protena transportadora de tiroxina e pr-albumina (TBPA). Desta forma, torna-se evidente a importncia do IGF-1 como um indicador do estado nutricional em casos de m nutrio. Em pacientes que apresentam doenas inflamatrias ou imunodeficincias tambm verifica-se baixa concentrao de IGF-1, que fortemente relacionada com a albumina plasmtica132. A obesidade parece diminuir a concentrao srica do de hormnio de crescimento (GH), apesar de crianas obesas crescerem acima da mdia. Tratamentos de perda de peso so de grande eficcia quando feito em conjunto com GH e dieta rica em carboidratos, diminuindo a perda de nitrognio e inibindo a perda de massa magra. Na obesidade, parece que os nveis de IGF-1 so menos variveis com a ingesto energtica, o que leva a supor que haja uma maior utilizao de gorduras como fonte de energia, preservando o IGF-1 para sntese protica27.

Na ingesto de dietas hiperproticas h aumento do IGF1 no plasma, porm sem alteraes em receptores e nem em protenas transportadoras. Esse mecanismo pode estar retratando uma forma do organismo manter constantes os valores plasmticos e teciduais de IGF-1. Ao se relacionarem diretamente as conseqncias das deficincias ou dos excessos alimentares e a concentrao plasmtica de IGF-1, verifica-se que os prejuzos ou benefcios so maiores ou menores dependendo do momento do desenvolvimento, da durao e da intensidade em que ocorreram as alteraes27. Para diferenciar kwashiorkor de marasmo, alguns parmetros bioqumicos podem ser usados. O ndice hidroxiprolina, em combinao com a razo de aminocidos essenciais e no essenciais no plasma (NE/E), tm sido utilizados, apesar de serem determinaes de baixa sensibilidade e especificidade. Assim, por exemplo, essa relao est aumentada significativamente em crianas com kwashiorkor, enquanto no marasmo no se observa aumento dessa relao. Esse aumento deve-se principalmente por deficincia dos aminocidos indispensveis. Como conseqncia essa relao aumenta at valores superiores a 4 (o valor normal 2).

DeAngelis06.indd 101

18/5/2007 10:14:12

102

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

Em pacientes hospitalizados, o valor de excreo de uria na urina de 24 horas, junto com os valores de ingesto de nitrognio, so necessrios para estimar o balano nitrogenado, permitindo avaliar a recuperao nutricional137. Os ndices funcionais do estado nutricional protico referem-se funo muscular e s determinaes imunolgicas. A funo muscular diz respeito determinao da contratibilidade muscular e velocidade de relaxamento. Testes de imunocompetncia so algumas vezes usados como ndices funcionais de estado protico, apesar de sua baixa especificidade e sensibilidade. Todos os parmetros do sistema imune podem ser prejudicados na deficincia nutricional. Essas determinaes imunolgicas incluem contagem de linfcitos, teste de hipersensibilidade cutnea, determinao de linfcitos timodependente etc138,139. Uma baixa ingesto protica pode ser bem tolerada por adultos e crianas, dependendo da qualidade da protena ingerida e do nvel da ingesto energtica. O nitrognio urinrio diminui significativamente com a ingesto de dietas hipoproticas, indicando um mecanismo de adaptao do organismo. Aps quatro a cinco dias de balano nitrogenado negativo, o equilbrio restabelecido a um nvel menor. Se continuado o balano nitrogenado negativo, o organismo no consegue adaptar-se e a deficincia protica acompanhada de edema, perda da massa muscular, fgado gorduroso,

dermatose, diminuio da resposta imune e debilidade geral. A deficincia protica atinge principalmente crianas, devido necessidade de protenas e de energia por quilograma de peso corporal estar aumentada, e existir uma grande suscetibilidade a fatores como infeco, o que aumenta as necessidades proticas, alm da incapacidade da criana obter o alimento por seus prprios meios132,137-139. A DPE provoca uma variedade de alteraes clnicas, comumente acompanhadas de alteraes fisiolgicas, trauma e estresse. Essas alteraes so geralmente agravadas por infeces e acompanhadas por outras deficincias nutricionais, tais como de vitamina A e de ferro137,138.

Formas Graves de Deficincia Protico-Energtica


As formas mais graves de DPE so o marasmo ou deficincia energtica; o kwashiorkor, caracterizado por deficincia protica; e o marasmo-kwashiorkor, com deficincias de protena e energia26,27,137,140. Marasmo uma deficincia crnica de energia. Em estados avanados caracterizado por perda da massa muscular e ausncia de gordura subcutnea. encontrado em crianas de todas as idades e, usualmente, devido deficincia de alimentao durante o perodo de lactao ou por uso de formulaes alimentares muito diludas140,141.

Tansporte Aminocidos

Sntese protica

Tecidos Protena corporal

Degradao protica

Produto final de protenas, catabolismo de aminocidos

Parmetros avaliados:

Aminocidos plasmticos

1. Protenas plasmticas 2. Enzimas 3. Sntese protica

1. Creatinina 2. Circuferncia mdia do brao 3. 3-metilhistidina 4. Parmetros imunolgicos

1. 2. 3. 4.

Uria Nitrognio/creatinina OH-prolina 3-metilhistidina

FIG. 6.15 Avaliao bioqumica do estado nutricional protico em diferentes etapas metablicas. (Adaptado de Lajolo e Tirapegui26.)

DeAngelis06.indd 102

18/5/2007 10:14:14

Metabolismo de Protenas

103

O kwashiorkor encontrado em crianas no ltimo perodo de lactao, desmame e ps-desmame, geralmente de 1 a 4 anos de vida. Est associado deficincia crnica de protenas, que leva a um quadro de hipoalbuminemia, edema e fgado gorduroso. A gordura subcutnea geralmente preservada; no entanto, a perda muscular mascarada pelo edema. O marasmo-kwashiorkor apresenta sintomas relacionados s duas doenas. Neste caso, a perda de gordura subcutnea acentuada, especialmente quando o edema reduzido nas primeiras etapas do tratamento26,27,141. A desnutrio protico-energtica pode ser encontrada em todas as partes do mundo e em todas as idades, ocorrendo, preferencialmente, em crianas pobres dos pases em desenvolvimento. No Brasil, segundo o Instituto Nacional de Alimentao e Nutrio (INAN), do Ministrio da Sade, em uma pesquisa realizada em 1989, comprovou-se que a prevalncia de desnutrio em crianas menores de 5 anos atingia 30,7%, sendo a desnutrio leve de 25,6% e o ndice de desnutrio moderada ou grave de 5,1%. Esse mesmo estudo demonstrou que crianas com desnutrio crnica se encontram em famlias com renda abaixo de dois salrios mnimos. O cenrio mais dramtico o da zona rural nordestina, onde 50,8% das crianas fazem parte de famlias chefiadas por trabalhadores com renda de at meio salrio mnimo27. As crianas brasileiras (na mdia geral) apresentam baixa estatura, sem, contudo, apresentarem magreza excessiva, fato que pode ser causado pela ingesto de alimentao desbalanceada. Os dados do INAN, para a populao infantil de zero a 5 anos, indicam que o dficit crnico de crescimento cumulativo, aliado ou no ao baixo peso, e o principal problema nutricional. Cerca de 2,5 milhes de crianas brasileiras nesta faixa etria tm altura abaixo do valor mnimo aceitvel para as respectivas idades26. A prevalncia de baixa estatura por idade maior no sexo masculino, entre crianas de famlias de rendas menores, e predomina na populao rural, principalmente no Nordeste. O dficit de estatura crnico gera alta prevalncia de nanicos entre os adultos jovens. Calcula-se que um em cada cinco brasileiros de 20 a 26 anos tenha altura inferior ao mnimo aceitvel para sua idade. A maior gravidade desse fenmeno encontra-se novamente nas regies Norte e Nordeste e nas populaes menos favorecidas economicamente dos grandes centros urbanos27. Na recuperao do desnutrido necessrio, em geral, tratar inicialmente o episdio agudo, suprimir outras doenas associadas como, por exemplo, infeco e, finalmente, uma dieta adequada. Com a recuperao nutricional geralmente desaparecem as leses anatmicas, h normalizao das

funes, correo das alteraes bioqumicas plasmticas e, por fim, o acmulo normal das reservas de nutrientes. Neste caso, todos os parmetros bioqumicos analisados voltam aos valores normais26.

METABOLISMO PROTICO E EXERCCIO DE FORA


Protenas esto constante e simultaneamente sendo sintetizadas e degradadas. A reparao de protenas lesadas e o remodelamento de protenas estruturais parecem ocorrer como resultado do estmulo induzido pelo exerccio de fora, que representa um potente estmulo para a ocorrncia de hipertrofia na fibra muscular em humanos. O processo de hipertrofia ocorre quando a taxa de sntese protica muscular excede a taxa de degradao, acarretando em um saldo positivo do balano protico muscular142. O exerccio de fora pode induzir alteraes no tipo de fibra muscular e aumentar o dimetro da fibra. Contudo, em humanos, o processo de turnover protico miofibrilar, r ao menos aquele induzido pelo exerccio de fora, relativamente lento. Este turnover lento de protenas musculares r demonstra que durante o treinamento de fora h a necessidade de sucessivos estmulos e de um perodo de tempo relativamente prolongado (seis a oito semanas) antes que alteraes visveis no fentipo, como alterao no tipo de fibra e hipertrofia, sejam observadas. Sendo assim, verificase que o exerccio de fora induz ao crescimento muscular aps semanas ou meses de treinamento como conseqncia das elevaes crnicas e transitrias na sntese protica, que supera a degradao protica, durante o perodo de recuperao entre as sesses consecutivas de treinamento. O exerccio de fora no induz aumento agudo no turnover ou na oxidao de protenas durante o exerccio. r Por outro lado, no perodo ps-exerccio que ocorrem as alteraes no turnover protico, mais especificamente r aumento na sntese protica muscular143-145. O balano protico muscular (sntese menos degradao) aps o exerccio de fora caracterizado por substancial aumento da sntese protica muscular (em alguns casos > 150% dos valores basais) concomitante a aumento de menor magnitude da degradao protica, o que resulta em balano protico muscular menos negativo quando comparado aos valores basais no estado no alimentado, o saldo do balano protico muscular negativo (Figs. 6.16, 6.17 e 6.18)143-146. Todavia, o balano protico muscular negativo tornase positivo por meio da ingesto de alimentos proticos que, posteriormente ao processo de digesto e absoro, fornecem aminocidos para o tecido muscular. Esta estimulao da sntese protica muscular induzida pela

DeAngelis06.indd 103

18/5/2007 10:14:15

104

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

alimentao tem sido demonstrada ser independente da insulina, sendo prioritariamente decorrente do aumento da oferta de aminocidos para o msculo. Contudo, cabe ressaltar o papel da insulina no balano protico muscu-

lar, uma vez que esse hormnio favorece a diminuio da degradao protica muscular, ao mesmo tempo em que estimula o influxo de aminocidos a partir do plasma para o tecido muscular. Portanto, pode-se concluir que a adequada hidratao e a ingesto de nutrientes (carboidratos e protenas) no perodo ps-exerccio colaboram para a obteno de um balano protico muscular positivo147-154. Diversos estudos demonstram que o exerccio de fora estimula a sntese de protenas musculares em indivduos treinados e no treinados. O perodo de durao da elevao da taxa de sntese protica no msculo exercitado aps uma sesso de exerccio de fora parece ser diferente em indivduos no treinados, nos quais as alteraes na taxa de sntese protica muscular persistem por at 48 horas ps-exerccio. Por outro lado, em indivduos treinados ocorre uma atenuao da resposta aguda da sntese protica muscular induzida por uma sesso isolada de exerccio de fora, o que indica uma adaptao geral em resposta ao treinamento. Desse modo, conclui-se que indivduos treinados necessitam de menos protena aps um perodo de treinamento para manter uma resposta de sntese protica mxima para um determinado exerccio147,155.

FIG. 6.16 Balano protico (sntese menos degradao) no msculo esqueltico. A rea sob a curva no estado alimentado (I) seria equivalente rea sob a curva no estado de jejum (II); conseqentemente, a massa muscular mantida pela alimentao. (Modificado de Phillips 2004145.)

FIG. 6.17 Balano protico muscular no repouso e trs horas ps-exerccio de fora em indivduos no treinados no estado
ps-absortivo. (Adaptado de Biolo et al.146.)

DeAngelis06.indd 104

Fenilalanina (volume da perna1)

18/5/2007 10:14:15

Metabolismo de Protenas

105

FIG. 6.18 Balano protico (sntese menos degradao) no msculo esqueltico: ganho induzido pelo estado alimentado e perda induzida pelo estado de jejum associados ao efeito induzido pelo exerccio de fora. Neste cenrio, o ganho a partir do estado de jejum aumentado pela estimulao da sntese protica induzida pelo exerccio de fora (III). Alm disso, as perdas no estado de jejum parecem ser menores (IV) devido a persistente estimulao da sntese protica nesse estado. (Modificado de Phillips 2004145.)

da insulina, foi verificado que o tratamento com esse hormnio melhorava o quadro de degradao protica muscular associado ao diabetes. Todavia, atualmente, no h um consenso sobre os mecanismos de ao da insulina sobre a sntese protica muscular in vivo. possvel, contudo, elucidar algumas aes da insulina se os resultados so observados no contexto da disponibilidade de aminocidos para a sntese protica. A infuso sistmica de insulina causa reduo significativa na concentrao sangnea de aminocidos, desse modo diminuindo a oferta de aminocidos para o tecido muscular e a disponibilidade de aminocidos para a sntese protica. Quando a concentrao sangnea de aminocidos no aumentada pela ingesto ou pela infuso durante a hiperinsulinemia, observa-se que a sntese protica muscular tambm no aumentada. Por outro lado, se aminocidos so fornecidos durante o quadro de hiperinsulinemia, a sntese protica aumenta. Alm disso, a sntese protica muscular tambm aumentada quando a insulina infundida localmente, de tal modo que a concentrao sistmica de aminocidos no afetada. Deste modo, parece que o aumento na concentrao srica de insulina promove o aumento da sntese protica muscular enquanto a disponibilidade de aminocidos mantida80,142,147.

Influncia Hormonal na Hipertrofia Muscular Induzida pelo Exerccio de Fora


O treinamento de fora, com elevado volume e intensidade, e que utiliza grandes grupamentos musculares, resulta em significativa liberao de GH. Alm disso, a maior demanda pela gliclise anaerbica promove aumento das concentraes sricas de GH. Estudos demonstram a ocorrncia de aumento agudo na concentrao srica de GH ps-exerccio de fora. Contudo, o modelo de resposta do IGF-1 no consistentemente segue aquele do GH. Esse fato sugere que o maior estmulo para a hipertrofia e aumento da potncia e da fora musculares ocorre por meio da sntese local de IGF-1, ou seja, no msculo esqueltico. Cabe ressaltar que a secreo de IGF-1 pode ser estimulada tanto pela contrao muscular per se, isto , localmente, ou pela estimulao induzida pelo GH na secreo heptica de IGF-1. Grande parte do estmulo para a sntese protica ocorre por meio do IGF-1, com menor contribuio decorrente da interao GH-receptor de GH na membrana celular, promovendo aumento da sntese de protenas intracelulares80,145,147. A influncia da insulina sobre o metabolismo protico muscular tem sido amplamente estudada, porm existem ainda algumas controvrsias. Posteriormente descoberta

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Nelson DL, Cox MM. Lehninger Principles of biochemistry. 3. ed. New York: Worth Publishers; 2000. p.1152 . 2. Bruce A, Bray D, Lewis J, Raff M, Roberts K, Watson JD. Molecular biology of the cell. 4. ed. New York: Garland Science; 2001. p.1649. 3. Campbell MK. Bioqumica. 3. ed. Porto Alegre: Artmed; 2000. p.752. 4. Devlin TM. Textbook of biochemistry: with clinical correlations. 5. ed. New York: Wiley-Liss; 2002. p.1216. 5. Rodwell VW. Amino acids. In: Murray RK, Granner DK, Mayes PA. et al. Harper: bioqumica. 6. ed. So Paulo: Atheneu; 1990. p.27-36. 6. Brody T. Nutritional biochemistry. 2. ed. San Diego: Academic Press; 1999. p.1006. 7. Murray RK, Granner DK, Mayes PA. et al. Harper: bioqumica. 6. ed. So Paulo: Atheneu; 1990. 8. RodwelL VW. Biosynthesis of the nutritionally noneesential amino acids. In: Murray RK, Granner DK, Mayes PA. et al. Harper: bioqumica. 6. ed. So Paulo: Atheneu; 2000. p.307-312. 9. Champe PC, Harvey RA. Bioqumica ilustrada. 2 ed. Porto Alegre: Artes Mdicas Sul; 1996. p.446. 10. Marzzoco A, Torres BB. Bioqumica bsica. Rio de Janeiro: Editora Guanabara Koogan; 1990. p.232. 11. Oliveira JED, Marchini JE. Cincias Nutricionais. So Paulo: Sarvier; 1998. p.403.

DeAngelis06.indd 105

18/5/2007 10:14:19

106

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

12. Rogero MM, Tirapegui J. Aspectos nutricionais sobre glutamina e exerccio fsico. Nutrire, 25:101-126, 2003. 13. Chipponi JX, Bleier JC, Santi MT, Rudman D. et al. Deficiences of essencial and conditionally essential nutrients. Am J Clin Nutr, 35:1112-1116. 14. Kriengsinyos W, RAFII M, Wykes LJ. Long-term effects of histidine depletion on whole-body protein metabolism in healthy adults. J Nutr, 132:3340-3348, 2002. 15. Millward DJ. Can we define indispensable amino acid requirements and assess protein quality in adult? J Nutr, 124: S1509-S1515, 1994. 16. Reeds PJ. Dispensable and indispensable amino acids for humans. J Nutr, 130:S1835-S1840, 2000. 17. Reeds PJ, Garlick PJ. Protein and amino acid requirements and the composition of complementary foods. J Nutr, 133: S2953-S2961S, 2003. 18. Laidlaw SA, Kopple JD. Newer concepts of the indispensable amino acids. Am J Clin Nutr, 46:593-605, 1987. 19. Griffiths RD. The evidence for glutamine use in the critically-ill. Proc Nutr Soc, 60: 403-410, 2001. 20. Harper AE. Dispensable and indispensable amino acid interrelationships. In: Blackburn GL, Grant JP, Young VR, eds. Amino acids. Metabolism and medical applications. Boston: John Wright-PSG; 1983. p.105-121. 21. Lacey JM, Wilmore DW. Is glutamine a conditionally essential amino acid? Nutr Rev, 48: 297-309, 1990. 22. NRC (National Academy Press). Dietary reference intakes for energy, carbohydrates, fiber, fat, protein and amino acids (macronutrients). Washington DC. National Academy Press 2002. 23. Smith RJ. Glutamine metabolism and its physiologic importance. J Parent Ent Nutr, 14:S40-S44, 1990. 24. Berdanier CD. Advanced nutrition: macronutrients. 2. ed. Boca Raton: CRC Press; 2000. p.327. 25. Stryer L. Bioqumica. 4. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan; 1996. p.1000. 26. Lajolo FM, Tirapegui J. Protenas e aminocidos. In: Oliveira JED, Marchini JS, eds. Cincias nutricionais, So Paulo: Sarvier;1998. p.41-69. 27. Tirapegui J. Nutrio: fundamentos e aspectos atuais. So Paulo: Atheneu; 2000. p.284. 28. Schultz RM, Liebman MN. Proteins I: composition and structure. In: Devlin TM. Textbook of biochemistry: with clinical correlations, 5. ed. New York: Wiley-Liss; 2002. p.93-157. 29. Mcdonough FE, Sarwar G, Steinke FH. In vitro assay for protein digestibility: interlaboratory study. J Assoc Off Anal Chem, 73:622-625, 1990. 30. Mcdonough FE, Steinke FH, Sarwar G. et al. In vivo rat assay for true protein digestibility:collaborative study. J Assoc Off Anal Chem, 73:801-805, 1990. 31. Millward DJ. The nutritional value of plant-based diet in relation to human amino acid and protein requirement. Proc Nutr Soc, 58:249-260, 1999. 32. Millward DJ, Price GM, Pacy PJH. e colbs. - Maintenance protein requirements: the need for conceptual re-evaluation. Proc Nutr Soc, 49: 473-487, 1990.

33. Proll J, Petzke KJ, Ezeagu IE. Low nutritional quality of unconventional tropical crop seeds in rats. J Nutr, 128:2014-2022, 1998. 34. Sarvar G, Mcdonough FE. Evaluation of protein digestibility-corrected amino acid score method for assesing protein quality of foods. J Assoc Off Anal Chem, 73:347-356, 1990. 35. Darragh AJ, Hodgkinson SM. Quantifying the digestibility of dietary protein. J Nutr, 130:S1850-S1856, 2000. 36. Sarwar G. Available amino acid score for evaluating protein quality of foods. J Assoc Off Anal Chem, 67:623-626, 1984. 37. Sarwar G, Blair R, Friedman M. et al. Inter- and intra-laboratory variability in rat growth assays for estimating protein quality of foods. J Assoc Off Anal Chem, 67:976-981, 1984. 38. Sarwar G. The protein digestibility-corrected amino acid score method overestimates quality of proteins containing antinutritional factors and of poorly digestible proteins supplemented with limiting amino acids in rats. J Nutr, 127:758-764, 1997. 39. Schaafsma G. The protein digestibility-corrected amino acid score. J Nutr, 130:S1865-S1867, 2000. 40. De Angelis RC. Valor nutricional das protenas: mtodos de avaliao. Cadernos Nutr, 10:8-29, 1995. 41. FAO/WHO EXPERT CONSULTATION. Protein quality evaluation. Food and Agricultural Organization of the United Nations, FAO Food and Nutrition Paper 51. Roma, 1990. 42. FAO/WHO/UNU EXPERT CONSULTATION. Energy and protein requirements. Technical report series 724. World Health Organization, Geneva, 1985. 43. Henley EC, Kuster JM. Protein quality evaluation by protein digestibility-corrected amino acid scoring. Food Technol, 48: 74-77, 1994. 44. Tome D, Bos C. Dietary protein and nitrogen utilization. J Nutr, 130:S1868-S1873, 2000. 45. Caspary WF. Physiology and pathophysiology of intestinal absorption. Am J Clin Nutr, 55:S299-S308, 1992. 46. Hopfer U. Digestion and absorption of basic nutritional constituents. In: Devlin, T.M. Textbook of biochemistry: with clinical correlations. 5. ed. New York: Wiley-Liss; 2002. p.1081-1115. 47. Johnson LR. Digestion and absorption. In: Johnson LR. Gastrointestinal physiology. 6. ed. St. Louis: A Harcourt Health Sciences Company; 2001. p.119-141. 48. Mayes PA. Digestion and absorption. In: Murray, R.K., Granner DK, Mayes PA, Rodwell VW. Harper: bioqumica. 6a ed. So Paulo: Atheneu; 2000. p.662-674. 49. Sanioto DL. Sistema digestivo: digesto. In: Aires MM. Fisiologia, 2. ed., Rio de Janeiro: Guanabara Koogan; 1999. p.681-688. 50. Guyton AC. Tratado de fisiologia mdica. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan; 2002. p.973. 51. Adibi SA. The oligopeptide transporter (pept-1) in human intestine: biology and function. Gastroenterology, 113:332-340, 1997. 52. Adibi SA. Regulation of expression of the intestinal oligopeptide transporter (Pept-1) in health and disease. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol, 285(5):G779-88, 2003.

DeAngelis06.indd 106

18/5/2007 10:14:20

Metabolismo de Protenas

107

53. Cook GC. Comparison of intestinal absorption rates of glycine and glycylglycine in man and the effect of glucose in the perfusing fluid. Clin Sci, 43:443-453, 1972. 54. Ganapathy V, Brandsch M, Leibach FH. Intestinal transport of amino acids and peptides. In: Johson LR, ed. The physiology of the gastrointestinal tract. 3.ed. New York: Raven press; 1994. p.1773-1793. 55. Grimble GK. The significance of peptides in clinical nutrition. Annu Rev Nutr, 14:419-447, 1994. 56. Matthews DM, Adibi SA. Peptide absorption. Gastroenterology, 71:151-161, 1976. 57. Matthews DM, Craft IL, Geddes DM, Wise IJ, Hyde CW. Absorption of glycine and glycine peptides from the small intestine of the rat. Clin Sci, 35: 415-424, 1968. 58. Peters TJ, Macmahon MT. The absorption of glycine and glycine oligopeptides by the rat. Clin Sci, 39:811-821, 1970 59. Boyd CAR. Intestinal oligopeptide transport. Proc Nutr Soc, 54: 519-523, 1995. 60. Cook GC. Independent jejunal mechanisms for glycine and glycylglycine transfer in man in vivo. Br J Nutr, 30:13-19, 1973. 61. Fei YJ, Kanai Y, Nussberger S, Ganapathy V, Leibach FH, Romero MF e colaboradores. Expression cloning of a mammalian proton-coupled oligopeptide transporter. Nature, 368: 563-566, 1994. 62. Saito H, Inui K. Dipeptide transporters in apical and basolateral membranes of the human intestinal cell line Caco-2. Am J Physiol, 265:G289-G294, 1993. 63. Terada T, Saito H, Mukai M, Inui K. Characterization of stably transfected kidney epithelial cell line expressing rat H+/peptide cotransporter pept1: localization of pept1 and transport of -lactam antibiotics. J Pharmacol Exp Ther, 281:1415-1421, 1997. 64. Terada T, Sawada K, Saito H, Hashimoto Y, Inui K. Functional characteristics of basolateral peptide transporter in the human intestinal cell line Caco-2. Am J Physiol, 39:G1435-G1441, 1999. 65. Thamotharan M, Bawani SZ, Zhou X, Adibi SA. Functional and molecular expression of intestinal oligopeptide transporter (pept-1) after a brief fast. Metabolism, 48:681-684, 1999. 66. Thamotharan M, Bawani SZ, Zhou X, Adibi SA. Hormonal regulation of oligopeptide transporter pept-1 in a human intestinal cell line. Am J Physiol, 276:C821-C826, 1999. 67. Yang CY, Dantzig AH, Pidgeon C. Intestinal peptide transport systems and oral drug availability. Pharm Res, 16:1331-1343, 1999. 68. Frenhani PB, Burini RC. Mecanismos de ao e controle da digesto de protenas e peptdios em humanos. Arq Gastrenterol, 36:139-147, 1999. 69. Ganapathy ME, Huang W, Wang H, Ganapathy V, Leibach FH. Valacyclovir: a substrate for the intestinal and renal peptide transporters pept1 and pept2. Biochem Biophy Res Comm, 246:470-475, 1998. 70. Shiraga T, Miyamoto K, Tanaka H, Yamamoto H, Taketani Y, Morita K, e colaboradores. Cellular and molecular mechanisms of dietary regulation on rat intestinal H+/peptide transporter pept1. Gastroenterology, 116:354-362, 1999.

71. Sanioto SML. Absoro intestinal. In: In: Aires MM. Fisiologia, 2. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan; 1999. p.689-738. 72. Rrat A, Nunes S. Amino acid absorption and production of pancreatic hormones in non-anaesthetized pigs after duodenal infusions of a milk enzymic hydrolysate or of free amino acids. Br J Nutr, 60:121-136, 1988. 73. Sleisenger MH, Burston D, Dalrymple JA, Wilkinson S, Mathews DM. Evidence for a single common carrier for uptake of a dipeptide and a tripeptide by hamster jejunum in vitro. Gastroenterology, 71:76-81, 1976. 74. Adibi SA. Glycil-dipeptides: new substrates for protein nutrition. J Lab Clin Med, 113:665-673, 1989. 75. Friedman M. Absorption and utilization of amino acid. Volume I. Boca Raton: CRC Press; 1989. p.257. 76. Leibach FH, Ganapathy V. Peptide transporters in the intestine and the kidney. Annu Rev Nutr, 16:99-119, 1996. 77. Rogero MM. Efeitos do exerccio e da suplementao com L-glutamina e L-alanil-L-glutamina sobre as concentraes de glutamina no plasma, msculo e fgado em ratos. So Paulo: USP, 2002. 120p. Dissertao (Mestrado) Faculdade de Cincias Farmacuticas da Universidade de So Paulo, 2002. 78. Rogero MM, Tirapegui J, Pedrosa RG, Castro IA, Pires ISO. Plasma and tissue glutamine response to acute and chronic supplementation with L-glutamine and L-alanyl-L-glutamine in rats. Nutr Res, 24:261-270, 2004. 79. Gillham B, Papachristodoulou DK, Thomas JH. Wills biochemical basis of medicine. 3. ed. Oxford: Butterworth-Heinemann, 2000. 80. Houston ME. Gaining weight: the scientific basis of increasing skeletal muscle mass. Can J Appl Physiol, 24:305-316, 1999. 81. Tipton KD. Muscle protein metabolism in the elderly: influence of exercise and nutrition. Can J Appl Physiol, 26:588-606, 2001. 82. Wolfe RR. Regulation of muscle protein by amino acids. J Nutr, 132:S3219-S3224, 2002. 83. Lemon PWR. Beyond the zone: protein needs of active individuals. J Am Coll Nutr, 19:S513-S521, 2000. 84. Millward DJ. The nutritional regulation of muscle growth and protein turnover. Aquaculture, 79:1-28, 1989. 85. Lemon PWR. Is increased dietary protein necessary or beneficial for individuals with a physically active lifestyle? Nutr Rev, 54: S169-S175, 1996. 86. Lemon PWR. Dietary protein requirements in athletes. J Nutr Biochem, 8:52-60, 1997. 87. Lemon PWR. Do athletes need more dietary protein and amino acids? Int J Sport Nutr, 5:S39-S61, 1995. 88. Lemon PWR. Effects of exercise on dietary protein requirements. Int J Sport Nutr, 8:426-447, 1998. 89. Young VR. Adult amino acid requirements: the case for a major revision in current recommendations. J Nutr, 124:S1517S1523, 1994. 90. Young VR, Marchini JS. Mechanisms and nutritional significance of metabolic responses to altered intakes of protein and amino acids, with reference to nutritional adaptation in humans. Am J Clin Nutr, 51:270-89, 1990.

DeAngelis06.indd 107

18/5/2007 10:14:21

108

Fisiologia da Nutrio Humana. Aspectos Bsicos, Aplicados e Funcionais

91. Fouillet H, Bos C, Gaudichon C, Tome D. Approaches to quantifying protein metabolism in response to nutrient ingestion. J Nutr, 132:S3208-S3218, 2002. 92. Coomes MW. Amino acid metabolism. In: Devlin, T.M. Textbook of biochemistry: with clinical correlations, 5. ed. New York: Wiley-Liss; 2002. p.779-823. 93. Kimball SR. Regulation of global and specific mRNA translation by amino acids. J Nutr, 132:883-886, 2002. 94. Glitz D. Protein synthesis: translation and posttranslational modifications. In: Devlin, T.M. Textbook of biochemistry: with clinical correlations, 5a ed. New York: Wiley-Liss; 2002. p.233-277. 95. Rennie MJ, Bohe J, Wolfe RR. Latency, duration and dose response relationships of amino acid effects on human muscle protein synthesis. J Nutr, 132:S3225-S3227, 2002. 96. Jepson MM, Bates PC, Millward DJ. The role of insulin and thyroid hormones in the regulation of muscle protein in the rat. Br J Nutr, 59:397-415, 1988. 97. Rooyackers OE, Nair KS. Hormonal regulation of human muscle protein metabolism. Annu Rev Nutr, 17:457-485, 1997. 98. Rodwell VW. Catabolism of proteins and of amino acid nitrogen. In: Murray RK, Granner DK, Mayes, PA, Rodwell VW. Harper: bioqumica. 6. ed. So Paulo: Atheneu; 2000. p.313-322. 99. Lecker SH, Solomon V, Mitch WE, Goldberg AL. Muscle protein breakdown and the critical role of the ubiquitinproteasome pathway in normal and disease states. J Nutr, 129(1S Suppl):S227-S237, 1999. 100. Schnell JD, Hicke L. Non-traditional functions of ubiquitin and ubiquitin-binding proteins. J Biol Chem, 278:35857-35860, 2003. 101. Morens C, Gaudichon C, Metges CC, Fromentin G, Baglieri A, Even PC, e colaboradores. A high-protein meal exceeds anabolic and catabolic capacities in rats adapted to a normal protein diet. J Nutr, 130:2312-2321, 2000. 102. Brooks GA, Fahey TD, White TP. et al. Metabolism of proteins and amino acids. In: Brooks GA, Fahey TD, White TP. et al., eds. Exercise physiology: human bioenergetics and its applications. 3. ed. California: Mayfield Publishing Company; 2000. p.144-164. 103. Graham, TE, Maclean DA. Ammonia and amino acid metabolism in skeletal muscle: human, rodent and canine models. Med Sci Sport Exerc, 30:34-46, 1998. 104. Cynober LA. Amino acid metabolism and therapy in health and nutritional disease. New York: CRC Press; 1995. p.459. 105. Goldberg AL, Chang TW. Regulation and significance of amino acid metabolism in skeletal muscle. Fed Proc, 37: 2301-2307, 1978. 106. Rasmussen BB, Phillips SM. Contractile and nutritional regulation of human muscle growth. Exerc Sport Sci Rev, 31:127-131, 2003. 107. Rennie MJ, Tadros L, Khogali S, Ahmed A, Taylor PM. Glutamine transport and its metabolic effects. J Nutr, 124: S1503-S1508, 1994. 108. Wagenmakers AJ. Protein and amino acid metabolism in human muscle. Adv Exp Med Biol, 441:307-319, 1998.

109. Wagenmakers AJM. Muscle amino acid metabolism at rest and during exercise: role in human physiology and metabolism. Exerc Sport Sci Rev, 26:287-314, 1998. 110. Curi R. Glutamina: metabolismo e aplicaes clnicas e no esporte. Rio de Janeiro: Sprint; 2000. p.261. 111. Newsholme EA, Newsholme P, Curi R, Crabtree B, Ardawi MSM. Glutamine metabolism in different tissues: its physiological and pathological importance. In: Kinney JM, Borum PR. Perspectives in clinical nutrition. Munich:Urban and Schwarzenberg; 1989. p.71-98. 112. Rogero MM, Tirapegui J. Aspectos atuais sobre glutamina e exerccio. Nutr Pauta, 11:34-40, 2003. 113. Rogero MM, Tirapegui J. Aspectos atuais sobre glutamina, atividade fsica e sistema imune. Rev Bras Cin Farm, 36:201-212, 2000. 114. Rogero MM, Tirapegui J. Overtraining Excesso de treinamento. Nutr Pauta, 11:23-30, 2003. 115. Rogero MM, Tirapegui J, Pedrosa RG. et al. Efeito da suplementao com L-alanil-L-glutamina sobre a resposta de hipersensibilidade do tipo tardio em ratos submetidos ao treinamento intenso. Rev Bras Cin Farm, 38:487-497, 2002. 116. Williams BD, Chinkes DL, Wolfe RR. Alanine and glutamine kinetics at rest and during exercise in humans. Med Sci Sport Exerc, 30:1053-1058, 1998. 117. Snell K, Duff DA. Alanine and glutamine formation by muscle. Biochem Soc Trans, 8: 501-504, 1980. 118. Kasperek GJ, Dohm GL, Snider RD. Activation of branchedchain keto acid dehydrogenase by exercise. Am J Physiol, 248: R166-R171, 1985. 119. Jackman ML, Gibala MJ, Hultman E, Graham TE. Nutritional status affects branched-chain oxoacid dehydrogenase activity during exercise in humans. Am J Physiol, 272: E233-E238, 1997. 120. Suryawan A, Hawes JW, Harris RA, Shimomura Y, Jenkins AE, Hutson SM. A molecular model of human branched-chain amino acid metabolism. Am J Clin Nutr, 68:72-81, 1998. 121. Felig P. Amino acid metabolism in man. Annu Rev Biochem, 44:933-55, 1975. 122. Harris RA, Crabb DW. Metabolic interrelationships. In: Devlin TM. Textbook of biochemistry: with clinical correlations. 5. ed. New York: Wiley-Liss; 2002. p.861-902. 123. Borba-Murad GR, de Souza HM, Lopes G, Ferreira EB, Dambroso D, Bazotte RB. Changes in glycemia induced by exercise in rats: contribution of hepatic glycogenolysis and gluconeogenesis. Res Commun Molec Pathol Pharmacol, 102:113-123, 1998. 124. Biolo G, Toigo G, Ciocchi B, Situlin R, Iscra F, Gullo A, Guarnieri G. Metabolic response to injury and sepsis: changes in protein metabolism. Nutrition, 13:S52-S57, 1997. 125. Dardevet D, Sornet C, Savary I, Debras E, Patereau-Mirand P, Grizard J. Glucocorticoid effect on insulin-and IGF-I - regulated muscle protein metabolism during aging. J Endocrinol, 156: 83-89, 1998.

DeAngelis06.indd 108

18/5/2007 10:14:22

Metabolismo de Protenas

109

126. De Feo P. Hormonal regulation of human protein metabolism. Eur J Endocrinol, 135:7-18, 1996. 127. Garlick PJ, Mcnurlan MA, Bark T, Lang CHL, Gelato MC. Hormonal regulation of protein metabolism in relation to nutrition and diseases. J Nutr, 128:S356-S359, 1998. 128. Borelli P, Blatt SL, Rogero MM, Fock RA. Haematological alterations in protein malnutrition. Rev Bras Hematol Hemoter, 26:49-56, 2004. 129. Dutra De Oliveira JE, Cunha SFC, Marchini JS. A desnutrio dos pobres e dos ricos. Dados sobre a alimentao no Brasil. So Paulo: Sarvier; 1996. p.123. 130. Mahan LK,Escott-Stump S. Krauses food, Nutrition & Diet Therapy. 9. ed. Philadelphia: Saunders; 1996. p.63-76. 131. Crim MC, Munro HN. Protein and amino-acids, In: Shils, M.E.; Olson, J.A. & Shike, M., Modern Nutrition in Health and Disease. 8. ed. v.1 Philadelphia : Lea & Febiger; 1994. p.3-35. 132. Gibson RS. Principles of Nutritional Assessment. New York: Oxford University Press; 1990. 133. Tirapegui J, Fukushima S, Grimaldi O. Consideraciones sobre crecimiento, somatomedina y nutricion. Arch Latinoamer Nutr, 43:94-104, 1993. 134. Tirapegui J, Yahya ZAH, Bates P, Millward DJ. Dietary energy, glucocorticoids and the regulation of long bone and muscle growth in the rat. Clin Sci, 87:599-606, 1994. 135. Tirapegui J. Effect of insulin-like growth factor-1 on muscle and bone growth in experimental model. Int J Food Sci, 50:231-236, 1999. 136. Tirapegui J, Baldi M, Ribeiro SML. Effect of protein deficiency on plasma insulin-like growth factor-1 (IGF-1) level and protein and proteoglycan synthesis rates in skeletal muscle and bone. Nutr Res, 16:869- 879, 1996. 137. Torun B, Chew F. Protein-energy malnutrition, In: Shils, ME.; Olson JA, Shike M. Modern Nutrition in Health and Disease. 8. ed. v.2 Philadelphia: Lea & Febiger; 1994. p.951-976. 138. Waterlow JC. The requirements of adult man for indispensable amino acids. Eur J Clin Nutr, 50: S151-S179, 1996. 139. Waterlow JC, Garlick PJ, Millward DJ. Protein turnover in mammalian tissue and the whole body, Amsterdam: North Holland Biomedical Press/Elsevier, 1978. 140. Waterlow JC. Summary of causes and mechanisms of linear growth retardation. Eur J Clin Nutr, 48: S210-S222, 1994. 141. Cardoso MA, Tirapegui J. Alteraes metablicas na desnutrio protica-calrica. Cadernos Nutr, 3:27-40, 1991.

142. Tipton KD, Wolfe RR. Exercise-induced changes in protein metabolism. Acta Physiol Scand, 162:377-387, 1998. 143. Phillips SM. Short-term training: when do repeated bouts of resistance exercise become training? Can J Appl Physiol, 25:185-193, 2000. 144. Phillips SM, Parise G, Roy BD. et al. Resistance-traininginduced adaptations in skeletal muscle protein turnover in the fed state. Can J Physiol Pharmacol, 80: 1045-1053, 2002. 145. Phillips SM. Protein requirements and supplementation in strength sports. Nutrition, 20:689-695, 2004. 146. Biolo G Maggi SP, Williams BD, Tipton KD, Wolfe RR. Increased rates of muscle protein turnover and amino acid transport after resistance exercise in humans. Am J Physiol, 268: E514-E520, 1995. 147. Tipton KD, Wolfe RR. Exercise, protein metabolism, and muscle growth. Int J Sport Nutr Exerc Metab, 11: 109-132, 2001. 148. Borsheim E, Tipton KD, Wolf SE, Wolfe RR. Essential amino acids and muscle protein recovery from resistance exercise. Am J Physiol Endocrinol Metab, 283:E648-E657, 2002. 149. Gibala MJ. Nutritional supplementation and resistance exercise: what is the evidence for enhanced skeletal muscle hypertrophy? Can J Appl Physiol, 25:524-535, 2000. 150. Miller SL, Tipton KD, Chinkes DL, Wolf SE, Wolfe RR. Independent and combined effects of amino acid and glucose after resistance exercise. Med Sci Sports Exerc, 35:449-455, 2003. 151. Rasmussen BB, Tipton KD, Miller SL, Wolf SE, Wolfe RR. An oral essential amino acid-carbohydrate supplement enhances muscle protein anabolism after resistance exercise. J Appl Physiol, 88:386-392, 2000. 152. Wolfe RR. Effects of amino acid intake on anabolic processes. Can J Appl Physiol, 26:S220-S227, 2001. 153. Rennie MJ. Control of muscle protein synthesis as a result of contractile activity and amino acid availability: implications for protein requirements. Int J Sport Nutr Exer Metab, 11: S170-S176, 2001. 154. Rennie MJ, Tipton KD. Protein and amino acid metabolism during and after exercise and the effects of nutrition. Annu Rev Nutr, 20:457-483, 2000. 155. Phillips SM, Tipton KD, Ferrando AA, Wolfe RR. Resistance training reduces the acute exercise-induced increase in muscle protein turnover. Am J Physiol, 276:E118-E124, 1999.

DeAngelis06.indd 109

18/5/2007 10:14:22