-Amylase is an enzyme EC 3.2.1.

1that hydrolyses alpha-bonds of large alpha-linked polysaccharides, such as starch and glycogen, yielding glucose and maltose.[2] It is the major form of amylase found in humans and other mammals.[3] It is also present in seeds containing starch as a food reserve, and is secreted by many fungi.

Chloride and bromide most effective Iodide less effective Sulfate and phosphate least effective [edit] Genetic variation in human salivary amylase The salivary amylase gene has undergone duplication during evolution, and DNA hybridization studies indicate that many individuals have multiple tandem repeats of the gene. The number of gene copies correlates with the levels of salivary amylase, as measured by protein blot assays using antibodies to human amylase. Gene copy number is associated with apparent evolutionary exposure to high-starch diets.[7] For example, a Japanese individual had 14 copies of the amylase gene (one allele with 10 copies, and a second allele with four copies). The Japanese diet has traditionally contained large amounts of rice starch. In contrast, a Biaka individual carried six copies (three copies on each allele). The Biaka are rainforest hunter-gatherers who have traditionally consumed a low-starch diet. Perry and colleagues speculated the increased copy number of the salivary amylase gene may have enhanced survival coincident to a shift to a starchy diet during human evolution. [edit] Pancreatic amylase Pancreatic -amylase randomly cleaves the (1-4) glycosidic linkages of amylose to yield dextrin, maltose, ormaltotriose. It adopts a double displacement mechanism with retention of anomeric configuration. [edit] In pathology The test for amylase is easier to perform than that for lipase, making it the primary test used to detect and monitor pancreatitis. Labs will usually measure either pancreatic amylase or total amylase. If only pancreatic amylase is measured, an increase will not be noted with mumps or other salivary gland trauma. However, because of the small amount present, timing is critical when sampling blood for this measurement. Blood should be taken soon after a bout of pancreatitis pain, otherwise it is excreted rapidly by the kidneys. Salivary alpha-amylase has been used as a biomarker for stress that does not require a blood draw.[8]

[edit] In human physiology Although found in many tissues, amylase is most prominent in pancreatic juice and saliva, each of which having its own isoform of human -amylase. They behave differently on isoelectric focusing, and can also be separated in testing by using specific monoclonal antibodies. In humans, all amylase isoforms link to chromosome 1p21 (see AMY1A). [edit] Salivary amylase (ptyalin) Amylase is found in saliva and breaks starch down into maltose and dextrin. This form of amylase is also called "ptyalin" /taln/.[4] It will break large, insoluble starch molecules into soluble starches (amylodextrin,erythrodextrin, and achrodextrin), producing successively smaller starches and ultimately maltose. Ptyalin acts on linear (1,4) glycosidic linkages, but compound hydrolysis requires an enzyme that acts on branched products. Salivary amylase is inactivated in the stomach by gastric acid. In gastric juice adjusted to pH 3.3, ptyalin was totally inactivated in 20 minutes at 37C. In contrast, 50% of amylase activity remained after 150 minutes of exposure to gastric juice at pH 4.3.[5] Both starch, the substrate for ptyalin, and the product (short chains of glucose) are able to partially protect it against inactivation by gastric acid. Ptyalin added to buffer at pH 3.0 underwent complete inactivation in 120 minutes; however, addition of starch at a 0.1% level resulted in 10% of the activity remaining, and similar addition of starch to a 1.0% level resulted in about 40% of the activity remaining at 120 minutes.[6] [edit] Optimum conditions for ptyalin Optimum pH - 5.66.9 Human body temperature +37C Presence of certain anions and activators:
[citation needed]

[edit] Interpretation Increased plasma levels in humans are found in: Salivary trauma (including anaesthetic intubation) Mumps due to inflammation of the salivary glands Pancreatitis because of damage to the cells that produce amylase Renal failure due to reduced excretion

Several methods are available for determination of alpha-amylase activity, and different industries tend to rely on different methods. The starch iodine test, a development of the iodine test, is based on colour change, as alpha amylase degrades starch and is commonly used in many applications. A similar but industrially produced test is the Phadebas amylase test, which is used as a qualitative and quantitative test within many industries, such as detergents, various flour, grain, and malt foods, and forensic biology. [edit] Domain architecture Alpha-amylases contain a number of distinct protein domains. The catalytic domain has a structure consisting of an 8-stranded alpha/beta barrel that contains the active site, interrupted by a ~70-amino acid calcium-binding domain protruding between beta strand 3 and alpha helix 3, and a carboxyl-terminal Greek key betabarrel domain.[13] Several alpha-amylases contain a beta-sheet domain, usually at the C terminus. This domain is organised as a five-stranded anti-parallel beta-sheet.[14][15] Several alpha-amylases contain an all-beta domain, usually at the C terminus.[16]

Total amylase readings of over 10X the upper limit of normal (ULN) are suggestive of pancreatitis. Five to 10 times the ULN may indicate ileus or duodenal disease or renal failure, and lower elevations are commonly found in salivary gland disease. [edit] Genes salivary - AMY1A, AMY1B, AMY1C pancreatic - AMY2A, AMY2B

[edit] In grain Alpha-amylase activity in grain is measured by, for instance, the Hagberg-Perten Falling Number, a test to assess sprout damages.[9], or the Phadebas method. [edit] Industrial use Alpha-amylase is used in ethanol production to break starches in grains into fermentable sugars. The first step in the production of high-fructose corn syrup is the treatment of cornstarch with alphaamylase, producing shorter chains of sugars calledoligosaccharides. An alpha-amylase called "Termamyl", sourced from Bacillus licheniformis, is also used in some detergents, especially dishwashing and starchremoving detergents.[10] [edit] Buffer inhibition The tris molecule is reported to inhibit a number of bacterial alpha-amylases,[11][12] and, therefore, they should not be used in tris buffer. [edit] Determination

Dextrose equivalent From Wikipedia, the free encyclopedia Dextrose equivalent (DE) is a measure of the amount of reducing sugars present in a sugar product, relative to glucose, expressed as a percentage on a dry basis. For example, a maltodextrin with a DE of 10 would have 10% of the reducing power of dextrose (which has a DE of 100), while sucrose, with a DE of 120, would have 1.2 times the reducing power. For solutions made from starch, it is an estimate of the percentage reducing sugars present in the total starch product. In all glucose polymers, from the native starch to glucose syrup, the molecular chain begins with a reducing sugar, containing a freealdehyde. As the starch is hydrolysed, the molecules become shorter and more reducing sugars are present. Because different reducing sugars (e.g. fructose and glucose) have different sweetness, it is incorrect to assume that there is any direct relationship between DE and sweetness. The DE describes the degree of conversion of starch to dextrose: starch is close to 0, glucose/dextrose is 100 (percent), dextrins varies between 1 and 13, maltodextrins varies between 3 and 20 glucose syrups contain a minimum of 20% reducing sugars. The DE gives an indication of the average degree of polymerisation (DP) for starch sugars. The rule of thumb is DE DP = 120. The standard method of determining DE is the Lane-Enyon titration, based on

the reduction of copper(II) sulfate in an alkaline tartrate solution,[1]p.230 an application of Fehling's test.

^ Dziedzic, S. Z.; Kearsley, M. W. (1995). Handbook of starch hydrolysis products and their derivatives. London: Blackie Academic & Professional. ISBN 07514-0269-9. Indikator Redoks Metilen biru (CI 52015) merupakan heterosiklik aromatik senyawa kimia dengan rumus molekulC 16 H 18 N 3 S Cl . Ia memiliki banyak kegunaan dalam berbagai bidang yang berbeda, sepertibiologi dan kimia . Pada suhu kamar tampak sebagai bubuk, padat tidak berbau, berwarna hijau tua, yang menghasilkan solusi biru ketika dilarutkan dalam air . Bentuk terhidrasi memiliki 3 molekul air per molekul biru metilen. [1] Metilen biru tidak harus bingung dengan metil biru , lainhistologi noda, biru metilen baru , atau dengan metil violet sering digunakan sebagai indikator pH Biru metilen secara luas digunakan sebagai indikator redoks dalam kimia analitik . Solusi dari zat ini adalah biru ketika dalam lingkungan oksidasi, tetapi akan berubah berwarna jika terkena zat pereduksi. Sifat-sifat redoks dapat dilihat dalam sebuah demonstrasi klasik kinetika kimia secara umum kimia, " botol biru "percobaan. Biasanya, solusi terbuat dari glukosa (dekstrosa), biru metilen, dan natrium hidroksida . Setelah gemetar botol, oksigen mengoksidasi biru metilen, dan solusinya berubah biru. Dekstrosa secara bertahap akan mengurangi metilen biru untuk tidak berwarna bentuknya, berkurang. Oleh karena itu, ketika dekstrosa terlarut sepenuhnya dikonsumsi, solusi akan membiru lagi. ^ http://www.methylene-blue.com/substance.php

PEREAKSI FEHLING Perekasi Fehling adalah oksidator lemah yang merupakan pereaksi khusus untuk mengenali aldehida. Pereaksi Fehling terdiri dari dua bagian, yaitu Fehling A dan Fehling B. Fehling A adalah larutan CuSO4, sedangkan Fehling B merupakan campuran larutan NaOH dan kalium natrium tartrat. Pereksi Fehling dibuat dengan mencampurkan kedua larutan tersebut, sehingga diperoleh suatu larutan yang berwarna biru tua. Dalam pereaksi Fehling, ion Cu2+ terdapat sebagai ion kompleks. Pereaksi Fehling dapat dianggap sebagai larutan CuO. Dalam pereaksi ini ion Cu2+ direduksi menjadi ion Cu+ yang dalam suasana basa akan diendapkan sebagai Cu2O. Dengan larutan glukosa 1%, pereaksi Fehling menghasilkan endapan berwarna merah bata, sedangkan apabila digunakan larutan yang lebih encer misalnya larutan glukosa 0,1%, endapan yang terjadi berwarna hijau kekuningan.

struktur metilen biru

hilangnya warna indikator metilen biru. Titik akhir titrasi merupakan jumlah yang dibutuhkan untuk mereduksi semua tembaga. (Apriyanto, 1989). Titrasi eynon lane digunakan untuk menghitung kadar gula tereduksi. Melalui metode ini dapat diketahui sisa gula reduksi yang terdapat dalam larutan, sehingga dapat dihitung berapa konversi yang diperoleh. Titrasi ini menggunakan indikator metilen biru. Perubahan warna yang terjadi adalah dari biru hingga semua warna biru hilang berganti menjadi kemerahan yang menandakan adanya endapan tembaga oksida. Warna dapat kembali menjadi biru karena teroksidasi oleh udara. Untuk mencegah hal tersebut, titrasi dilangsungkan dengan mendidihkan larutan yang dititrasi sehingga uap dapat mencegah kontak dengan udara dan mencegah terjadinya oksidasi kembali. Metode ini didasarkan pada sifat aldehid dan keton yang dapat mereduksi larutan alkali, dalam hal ini digunakan tembaga tartrat yang dikenal sebagai larutan Fehling. Larutan Fehling yang digunakan merupakan campuran larutan tembaga sulfat dan laruta alkali tartrat. Gula reduksi merupakan reduktor kuat sedangkan Cu2+ merupakan oksidator lemah. Gula mereduksi Cu2+ membentuk endapan Cu2O yang berwarna merah bata. Metode Lane-Eynon digunakan untuk menentukan dekstrosa , maltose dan gula terkait yang terkandung dalam sirup glukosa dengan cara mereduksi tembaga sulfat (CuSO4) dalam larutan fehling (Pancoast, 1980). Dalam pereaksi fehling ion Cu++ direduksi menjadi Cu+ yang dalam suasana basa akan diendapkan sebagai Cu2O (Poedjiadi, 1994). Secara sederhana reaksi oksidasi-reduksi pereaksi Fehling dengan karbohidrat dapat dituliskan sebagai berikut : 4.2. Pembahasan

2.2. Pengujian Gula pereduksi Beberapa metode kimia untuk penentuan monosakarida dan oligosakarida dipisahkan berdasarkan banyaknya agen perduksi yang dapat bereaksi dengan senyawa lain untuk diendapkan atau membentuk warna secara kuantitatif . Konsentrasi dari karbohidrat dapat ditentukan dengan metode gravimetri , spektrofometri, dan titrasi volumetri.

Metode Lane-eynon adalah metode titrasi (volumetri) untuk penentuan gula pereduksi. Penentuan gula reduksi dengan metode ini didasarkan atas pengukuran standar yang dibutuhkan untuk mereduksi preaksi tembaga basa yang diketahui volumenya. Titik akhir titrasi ditunjukkan dengan

Metode Lane Eynon merupakan metode penentuan secara volumetri dengan pereaksi Fehling A dan Fehling B merupakan campuran garam saitgnette(C4H4KnaO6.4H2O) dan NaOH. Gula Reduksi dengan larutan Fehling B akan membentuk enediol,yang kemudian enediol ini akan

bereaksi dengan ion kupri (Fehling A) akan membentuk ion kupro dan campuran dan campuran asam-asam. Selanjutnya ion kupro dalam suasana akan membentuk kupro oksida yang dalam keadaan panas mendidih akan mengendap menjadi endapan kupro oksida (Cu2O). Terbentuknya endapan berwarna merah yaitu kupro oksida (Cu2O) akibat adanya reaksi reduksi oksidasi (redoks), gugus aldehid pada glukosa akan mereduksi ion tembaga (II) menjadi tembaga (I) oksida. Karena larutan bersifat basa, maka aldehid dengan sendirinya teroksidasi menjadi sebuah garam dari asam karboksilat yang sesuai. Persamaan untuk reaksireaksi ini selalu disederhanakan untuk menghindari keharusan menuliskan ion tartrat atau sitrat pada kompleks tembaga dalam rumus struktur. Persamaan setengah reaksi untuk larutan Fehling dapat digambarkan sebagai berikut : Menggabungkan persamaan di atas dengan persamaan setengah reaksi untuk oksidasi aldehid pada kondisi asam yakni akan menghasilkan persamaan lengkap : berdasarkan terbentuknya reaksi oksidasi-reduksi dan terbentuknya kompleks tembaga-tartrat (terbentuknya endapan kupro oksida (Cu2O)) ini yang digunakan untuk penentuan banyak sedikitnya dextrose (glukosa) yang terkandung dalam madu rasa hasil hidrolisis.