Estudo cintico da Catalase isolada a partir de batata

A catalase, tambm denominada por hidroperoxidase, uma enzima encontrada na maioria dos organismos, sendo a sua funo decompor o perxido de hidrognio (H2O2) de acordo com a seguinte reaco qumica: 2 H2O2 2 H2O + O2. O oxignio libertado sob a forma de gs. Esta enzima encontra-se nos peroxissomas de animais e plantas, nos glioxissomas (apenas em plantas) e no citoplasma de procariontes. Pertence subclasse das oxidorredutase, enzimas que usam o perxido como aceitador de electres e tambm como doador electrnico. A polpa da batata rica em catalase e o seu isolamento rpido e fcil, pelo que ser utilizada como fonte de catalase para este trabalho experimental. O objectivo deste trabalho estudar o efeito da concentrao de substrato, temperatura e um activador na actividade da catalase.

Faculdade de Cincias e Tecnologia Universidade Nova de Lisboa alice.pereira@dq.fct.unl.pt; ict@dq.fct.unl.pt; marcia.quilherme@dq.fct.unl.pt

Material

Batata gua destilada fria (4C) Gelo Faca Triturador/Varinha mgica Coador Perxido de hidrognio a 30 volumes gua destilada Sulfato de cobre (CuSO4) Pipeta graduada Pompete Proveta de 50 mL 8 Copos de 50 mL 2 Banhos Caixa de gelo Crculos de papel de filtro Tesoura Pina Cronmetro Pipeta de Pasteur Tetina Tubos de ensaio Suporte de tubos de ensaio Luvas Papel de limpeza

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Procedimento experimental

Descascar e cortar uma batata em pedaos pequenos. Colocar 55 g de batata num copo triturador, adicionar 50 ml de gua destilada fria e um pouco de gelo. Triturar at quase no se observarem pedaos de batata inteiros. Coar a mistura para um copo e coloc-la em gelo (4C). Fazer diluies do perxido de hidrognio a 0.6%, 3% e 6%, para um volume final de 50 ml e colocar num copo de 100 ml. Colocar um copo com cada concentrao de substato temperatura ambiente (aproximadamente 20C). Fazer mais quatro solues do perxido de hidrognio a 0.6%. Colocar um dos copos no gelo (4C), outro num banho a 30C e o outro num banho a 40C, de modo a estudar o efeito da temperatura na actividade de catalase. Ao restante copo adicionar 0.1 M de sulfato de cobre e deixar temperatura ambiente. Molhar um crculo de papel de filtro na polpa de batata coada e coloclo no fundo de um copo com perxido de hidrognio com o auxlio de uma pina. Cronometrar o tempo que o crculo de papel demora a subir at superfcie do lquido. Repetir este ensaio 4 vezes para verificar se os resultados so reprodutveis. Quanto mais rpida for a subida do papel de filtro, maior ser a actividade da catalase. Fazer o mesmo para cada copo com as diferentes concentraes de perxido de hidrognio, a diferentes temperaturas e com sulfato de cobre. Verificar de que modo a concentrao de substrato influencia a actividade da catalase. Verificar o efeito da temperatura na actividade da catalase. Estudar o efeito do sulfato de cobre na aco da catalase.

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Resultados obtidos
0.6% 20C 3% 20C 6% 20C 0.6% 4C 0.6% 30C 0.6% 40C 0.6% 20C CuSO4

Ensaios 1 2 3 4

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