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Escola Superior de Tecnologia da Sade de Lisboa

Licenciatura em Anlises Clnicas e Sade Pblica Unidade Curricular: Estgio em Anlises Clnicas e Sade Pblica IV 2 Semestre

Estgio em Anlises Clnicas e Sade Pblica IV: Sade Pblica - Anlise do Ar

Docentes Responsveis: Maria do Cu Leito e Fernando Bellm

Discente: Ana Margarida Lana, n 526908 Abril de 2012

ndice
1. 2. Introduo ...................................................................................................................................... 5 Exposio ao chumbo no ar ....................................................................................................... 7 2.1 2.2 2.3 3. Abordagem terica ............................................................................................................... 7 Mtodo .................................................................................................................................... 9 Resultados e discusso .......................................................................................................... 11

Exposio a solventes orgnicos no ar ................................................................................... 13 3.1 3.2 3.3 Abordagem terica ............................................................................................................. 13 Mtodo.................................................................................................................................. 14 Resultados e discusso .......................................................................................................... 16

4.

Contaminao microbiolgica do ar ........................................................................................ 18 4.1 4.2 4.3 Abordagem terica ................................................................................................................ 18 Mtodo.................................................................................................................................. 21 Resultados e discusso .......................................................................................................... 22

5. 6. 7. 8. 9.

Concluso .................................................................................................................................... 24 Bibliografia ................................................................................................................................... 25 Anexo 1 ........................................................................................................................................ 26 Anexo 2 ........................................................................................................................................ 28 Anexo 3 ........................................................................................................................................ 34

ndice de ilustraoes
Ilustrao 1 Distribuiao do chumbo pelo organismo. Retirado de (Moreira & Moreira, 2004) 7 Ilustrao 2: Bomba de Amostragem e cassete fechada............................................................... 9 Ilustrao 3:Exemplo de colocao da bomba para amostragem pessoal. ................................ 9 Ilustrao 4: Esquema de uma lmpada de ctodo oco. ............................................................. 10 Ilustrao 5: Esquema geral de um espectofotometro de absoro atmica de chama ....... 10 Ilustrao 6: Bomba de amostragem e tubo adsorvedor. ............................................................ 14 Ilustrao 7: Esquema de um cromatgrafo a gs. ...................................................................... 14 Ilustrao 8: Diferentes tipos de colunas e suas caractersticas. ............................................... 15 Ilustrao 9: cromatograma do padro 2. Pico 1- sulfureto de carbono; pico 2- benzeno; pico 3- tricloroetileno; pico 4- tolueno; picos 5 e 6- impurezas; pico 7- meta xileno; pico 8impureza. ............................................................................................................................................. 16 Ilustrao 10: Branco de amostra. O primeiro pico corresponde ao sulfureto de carbono e o segundo pico a uma impureza-benzeno. ........................................................................................ 16 Ilustrao 11: Exemplo de cromatograma de amostras da 1 seco. A ordem dos compostos igual ao do padro. ..................................................................................................... 16 Ilustrao 12: Exemplo de cromatograma de amostras da 2 seco. Os picos correspondem aos do branco de amostra................................................................................................................. 16 Ilustrao 13: Amostrador MAS-100. .............................................................................................. 21

ndice de tabelas
Tabela 1: resultados obtidos. ............................................................................................................ 11 Tabela 2: concentraes obtidas atravs das reas dos picos, com recurso a folhas de calculo do Excel . ................................................................................................................................ 17 Tabela 3: os parmetros a ter em conta na avaliao da qualidade do ar interior e seus valores de concentrao mxima de referncia. Retirado de (Santos, 2010). ......................... 19 Tabela 5: Bacterias mais frequentes no ar interior. ...................................................................... 20 Tabela 4: fungos mais comuns no ar interior de acordo com os nveis de humidade. Retirado de (Santos, 2010). .............................................................................................................................. 20 Tabela 6: Identificao dos pontos de colheita.............................................................................. 22 Tabela 7: UFCS das mdias dos duplicados. ............................................................................... 22

1. Introduo
O presente estgio em Anlise do Ar insere-se no mbito da unidade curricular de Estgio em Anlises Clnicas e Sade Pblica IV, sob a superviso do professor Fernando Bellm. Este teve lugar no Instituto Nacional de Sade Dr. Ricardo Jorge (INSA), sob a orientao da Dr. Maria do Carmo Quintas. Fundado em 1899 pelo mdico e humanista Ricardo Jorge (Porto, 1858 Lisboa, 1939), como brao laboratorial do sistema de sade portugus, o INSA desenvolve uma tripla misso como laboratrio do Estado no sector da sade, laboratrio nacional de referncia e observatrio nacional de sade. O INSA um organismo pblico integrado na administrao indirecta do Estado, sob a tutela do Ministrio da Sade, dotado de autonomia cientfica, tcnica, administrativa, financeira e patrimnio prprio. O INSA est organizado, em termos tcnico-cientficos, em seis grandes departamentos:

Departamento da Alimentao e Nutrio; Departamento de Doenas Infecciosas; Departamento de Epidemiologia; Departamento de Gentica; Departamento de Promoo da Sade e Doenas Crnicas; Departamento de Sade Ambiental. O Departamento de Sade Ambiental (DSA) desenvolve actividades nas reas de

qualidade do ar e sade ocupacional e gua e solos. A Unidade de Ar e Sade Ocupacional (UASO) tem a sua esfera de competncias em matria de qualidade do ar e sade ocupacional. O Laboratrio de Sade Ocupacional tem como objectivo analisar as condies de trabalho, avaliando a exposio dos trabalhadores a agentes qumicos, fsicos e biolgicos, identificar condies de risco e propor medidas de controlo e preveno. O Laboratrio de Qualidade do Ar tem como objectivo estudar e avaliar a qualidade do ar em espaos interiores e exteriores de modo a identificar fontes de contaminao que possam pr em risco a sade pblica. O Laboratrio de Toxicologia Ambiental e Ocupacional tem como objectivo avaliar a exposio ambiental e ocupacional a agentes qumicos e fsicos, atravs da monitorizao biolgica com recurso a indicadores de dose, de efeito e de susceptibilidade.

Este relatrio tem como objectivo dar a conhecer as actividades desenvolvidas durante o estgio, quem se dividiram em duas categorias principais: sade ocupacional exposio ao chumbo no ar e exposio a solventes orgnicos no ar; e qualidade do ar contaminao microbiolgica do ar. Cada tema conter uma abordagem terica sobre o mesmo, mtodo utilizado e discusso dos resultados obtidos.

2. Exposio ao chumbo no ar

2.1 Abordagem terica


O chumbo um metal de cor cinza, macio, malevel e encontra-se na natureza sob a forma de um minrio chamado galena, sendo amplamente utilizado h milhares de anos. um elemento especialmente importante em sade ocupacional, devido sua ampla utilizao em processos industriais, tais como: Fundies de chumbo e zinco; Fabrico de xidos de chumbo; Cristalaria; Fabrico e reciclagem de acumuladores; Artesanato de chumbo e estanho; Indstria de plstico utilizando aditivos base de chumbo; Fabrico de tintas, esmaltes e betumes com chumbo. .Actualmente um dos contaminantes mais comuns do ambiente, e como consequncia casos de intoxicao ocupacional causados pelo chumbo so bastante frequentes, denominando-se intoxicao profissional pelo chumbo (IPCH). Este metal no possui nenhuma funo fisiolgica conhecida no organismo, e os seus efeitos txicos j so conhecidos h muito tempo por afectarem praticamente todos os rgos e sistemas do corpo humano,

nomeadamente: hematopoitico, nervoso

gastrointestinal e renal. A relacionada aos sistemas toxicidade est

principalmente nervoso e

hematopoitico, sendo este ltimo de grande importncia na monitorizao biolgica exposio a este metal. .

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Ilustrao 1 Distribuiao do chumbo pelo organismo. Retirado de (Moreira & Moreira, 2004)

No organismo humano, o chumbo no metabolizado, e sim, complexado com macromolculas, sendo diretamente absorvido, distribudo e excretado (Ilustrao 1). Os compostos de chumbo inorgnico entram no organismo por inalao (rota mais importante na exposio ocupacional) ou ingesto (via predominante para a populao em geral). Somente os compostos orgnicos de chumbo so capazes de penetrar atravs da pele ntegra. Uma vez absorvido, o chumbo se distribui entre o sangue, os tecidos moles (rins, medula ssea, fgado e crebro) e os tecidos mineralizados (ossos e dentes). excretado por vrias vias, porm s a excreo renal e a gastrointestinal so de importncia prtica. O organismo acumula chumbo durante toda a vida e o liberta de forma extremamente lenta, devido sua grande afinidade pelo sistema sseo, onde substitui o clcio e o fosforo, dando origem a descalcificaes sseas. Consequentemente, aps uma nica exposio, o nvel de chumbo no sangue de uma pessoa pode retornar ao normal e, no entanto, o contedo corporal total pode ainda ser elevado. Mesmo doses pequenas por um tempo determinado,podem causar intoxicao. Assim, grandes exposies agudas no precisam ocorrer para que uma intoxicao por chumbo se desenvolva. O contedo total de chumbo no corpo que est relacionado com o risco de efeitos adversos. Os sintomas de uma intoxicao por chumbo so: fraqueza e dor nos membros inferiores ao nvel do joelho, insnias, clicas abdominais, diarreias, m digesto e rigidez muscular do abdmen. Uma alterao muito citada como sinal da intoxicao por chumbo a paralisia corporal como consequncia da leso das clulas medulares e do sistema muscular provocada por distrbios da fosfo- creatina. tambm hipertensor por alteraes enzimticas que levam vasoconstrio. A exposio ao chumbo determina, tambm, no organismo alguns efeitos ao nvel da sntese de hemoglobina: o principal efeito neste sistema a reduo dos nveis do grupo prosttico heme, causado pela inibio de alguns enzimas utilizados na sntese da hemoglobina, devido a ligao do metal enzima cido delta aminolevulnico desidratase (ALA-D), causando a acumulao do cido delta aminolevulnico (ALA) no sangue e na urina (ALA-U). O carcter preventivo em sade ocupacional faz com que existam duas orientaes importantes e inseparveis no controlo da exposio: a vigilncia ambiental (determinao da concentrao de chumbo no ar) e vigilncia biolgica. O artigo 22. do Decreto- Lei n.24/2012 de 6 de fevereiro estabelece que o controlo biolgico1 compreende a determinao de chumbo no sangue (plumbmia, PbB) e, sempre que o mdico responsvel pela vigilncia da sade o prescreva, a determinao da 8

protoporfirina de zinco no sangue (ZPP), do cido delta aminolevulinico na urina (ALAU) e da desidratase do cido delta aminolevulinico no sangue (ALAD).

2.2 Mtodo
O artigo 18. do Decreto- Lei n.24/2012 de 6 de fevereiro determina que: A colheita de amostras para a determinao da concentrao de chumbo no ar deve ser individual, de modo a permitir a avaliao da exposio do trabalhador, tendo em conta o trabalho efectuado, as condies em que prestado e a durao da exposio.
Ilustrao 2: Bomba de Amostragem e Assim, para a recolha das amostras so usadas bombas de cassete fechada.

amostragem (Ilustrao 2), que possuem vlvulas para ajustar o caudal do ar aspirado ao valor desejado, devendo funcionar com um caudal de amostragem constante durante toda a colheita. Estas bombas so ligadas a cassetes fechadas que permitem a amostragem pessoal de partculas. Esta cassete usada com um filtro de ster de celulose de 0,8 m. Este conjunto fixo ao vesturio do trabalhador de modo a efectuar a colheita na zona respiratria. (Ilustrao 3). Os filtros contendo amostra colhida so digeridos por uma Ilustrao 3:Exemplo de mistura de cido clordrico e cido ntrico a 1:4, em placa para aquecida para destruir a matria orgnica e dissolver o chumbo a pessoal.
colocao da bomba amostragem

analisar. Seguidamente as amostras so diludas com uma soluo de cido ntrico 0,5% V/V. A soluo resultante analisada por espectofotometria de absoro atmica de chama. Os brancos de amostra e os filtros e padres adicionados tambm foram processados da mesma forma que as amostras. A concentrao de chumbo na amostra determinada relativamente a uma curva de calibrao preparada em condies idnticas s amostras. Em 1860, Kirchhoff estabeleceu a relao entre emisso e absoro e enunciou a seguinte lei: em condies especiais, todos os corpos podem absorver radiaoes que eles prprios so capazes de emitir- princpio fundamental da espectofotometria de absoro atmica.

A espectofotometria de absoro atmica , hoje em dia, uma tcnica analtica bem estabelecida e largamente utilizada nos laboratrios de pesquisa, de aplicaes e de controlo de qualidade para a

determinao de elementos metlicos, semimetlicos e no metlicos em

diversos tipos de amostras. uma tcnica de execuo rpida e fcil com uma sensibilidade extremamente alta, especialmente para elementos como

chumbo, cdmio, cobre e crmio). A amostra lanada numa chama Ilustrao 4: Esquema de uma lmpada de ctodo oco. que atinge temperaturas que variam entre os 2100-2300 C (a mistura mais comum acetileno/ar). Durante a combusto, os tomos da amostra so reduzidos ao estado fundamental por um feixe de radiao emitido por uma lmpada de ctodo oco, sendo que o mesmo feito mesmo material que o elemento a ser determinado

(Ilustrao 4). A radiao, aps atravessar a chama passa por um monocromador (que separa a linha espectral de interesse das outras linhas emitidas pela fonte de radiao, atravs da Ilustrao 5: Esquema geral de um espectofotometro utilizao de um prisma ou rede de
absoro atmica de chama de

difrao).e atinge o detector (vlvulas fotomultiplicadoras que amplificam o sinal). Os tomos livres no estado fundamental absorvem radiao a comprimentos de onda caractersticos de cada elemento. A reduo de energia da radiao no comprimento de onda caracterstico do analto uma medida da quantidade desse elemento na amostra, ou seja, a quantidade de radiao absorvida uma medida quantitativa da concentrao do elemento a ser analisado.

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2.3 Resultados e discusso


Uma vez que esta tcnica se encontra em processo de acreditao, necessrio obedecer aos seguintes critrios de aceitao: Controlo do branco: Abs<0.002 Controlo estabilidade: 10x em replicado o padro 5,0g/ml. RSD<3,5 com Abs 0,06946-0,08490 Coeficiente de correlao: >0,995 Declive: 0,01432-0,01744 1 controlo amostra EIL: Erro 10% e RSD individuais <3,5% Ensaio recuperao: 80%-120% Ensaio filtro adicionado: 80-120% Analise das amostras: RSD individuais <5,% Verificao do equipamento: Abs branco <0.002

O procedimento foi efectuado apenas at ao ensaio de filtro adicionado, uma vez que no dispnhamos de amostras verdadeiras para ensaiar. Todas as determinaes foram efectuadas em duplicado. Os resultados obtidos foram os seguintes:

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Tabela 1: resultados obtidos.

Como se pode observar os seguintes critrios no foram cumpridos (destacados a vermelho): controlo de estabilidade, declive da recta e ensaio de recuperao. Numa situao real no seria possvel prosseguir com a anlise das amostras, sendo necessrio efectuar uma nova curva de calibrao e recomear as determinaes do incio, assim como efectuar de novo os ensaios de recuperao. Neste caso, a curva de calibrao pode ter sado dos valores de referncia devido ao valor do branco, que apesar de dentro do valor aceitvel, demasiado baixo. A vigilncia ambiental e biolgica devem ser efectuadas em conjunto pois complementam-se, e juntas fornecem informaes importantes acerca das condies de trabalho a que os trabalhadores esto sujeitos. Segundo o artigo 22. do Decreto-Lei n. 24/2012 de 6 de fevereiro, a vigilncia da sade dos trabalhadores expostos ao chumbo deve ser efectuada: Anualmente: se plumbmia< 40g/100 ml de sangue e concentrao chumbo no ar < 0,075mg/m3 Trimestralmente: se plumbmia>60g/100 ml de sangue ou concentrao no ar > 0,1 mg/m3 Valor limite de exposio ao chumbo (VLE)- 0,15g/m3. Relativo a um perodo de referncia de 8h Limite biolgico de exposio - 70g/100ml de sangue Nota: As curvas de calibrao obtidas encontram-se no anexo 1.

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3. Exposio a solventes orgnicos no ar

3.1 Abordagem terica


Os solventes orgnicos so compostos qumicos, relativamente volteis e estveis, que quimicamente se classificam em: Hidrocarbonetos alifticos; Hidrocarbonetos aromticos (benzeno, m-xileno, tolueno); Hidrocarbonetos halogenados (tricloroetileno), lcoois; Cetonas; steres; teres; Glicis e seus derivados steres e teres. A sua enorme capacidade para dissolverem gorduras, leos, resinas, borrachas, lacas, faz destes compostos uma ferramenta indispensvel no dia-a-dia. As exigncias impostas pelo desenvolvimento tecnolgico levaram ao aparecimento de inmeros produtos industriais e de uso domstico que contm estes compostos, em maior ou menor percentagem, na sua composio diluentes, tintas, vernizes, desengordurantes, desmoldantes, aerossis, ceras, produtos para tratamento de madeiras, etc. Se por um lado a sua lipossolubilidade leva ao seu emprego generalizado tambm ela associada sua volatilidade, o que os torna uma preocupao constante em sade ocupacional. Como so lipossolveis a sua absoro pelo tracto respiratrio, aco sobre o SNC e a dissoluo das gorduras da pele esto facilitadas. A toxicidade influenciada por factores como a idade, sexo e dose de exposio, e pode resultar em efeitos irritantes para o tracto respiratrio, depresso do SNC (podendo levar ao coma e morte), cardiotoxicidade (o tricloroetileno um dos mais cardiotoxicos) e depresso da contractilidade do miocrdio, efeitos cancergenos (benzeno), necrose dos tecidos (estireno), aplasia da medula ssea ( clorofrmio), efeitos mutagnicos (tetracloreto de carbono). O conhecimento da toxicidade destes produtos levou ao estabelecimento de valores limite de exposio, que devem ser usados como guia em sade ocupacional. Estudos epidemiolgicos tm demonstrado que ocorrem sintomas psicofisiolgicos difusos (dores de cabea, fadiga anormal, perda de memria, dificuldade de concentrao, 13

mudanas de comportamento e personalidade) em trabalhadores expostos por longos perodos de tempo, mesmo em concentraes mais baixas do que os limites propostos. H assim uma grande necessidade de reduzir ao mnimo a poluio gerada por solventes orgnicos nos locais de trabalho.

3.2 Mtodo
A colheita efectuada com bombas como descrito no ponto 2.2, contudo, em vez de cassetes fechadas so utilizados tubos adsorvedores que contm no seu interior duas seces de carvo activado (1 seco 100 mg e 2. seco 50 mg) (Ilustrao 6). A bomba calibrada para um caudal de 0,2 L/min. Os tubos de carvo activado so utilizados para reter e concentrar compostos presentes nas atmosferas dos locais de trabalho. Esta tcnica Baseia-se no princpio de que os solventes retidos podem ser quantificados com recurso tcnica de cromatografia gasosa, usando o detector de ionizao de chama (FID).
Ilustrao 6: Bomba de amostragem e tubo adsorvedor.

Foram analisadas as amostras provenientes do PICC- programa internacional de control de qualidad, com vista identificao e quantificao dos seguintes compostos: benzeno, tolueno, meta-xileno e tricloroetileno. As amostras foram tratadas com sulfureto de carbono para desadsorver os solventes, sendo que cada seco dos tubos foi colocada em vials separados. Das quatro amostras enviadas, cada estagirio analisou duas. Foi preparada uma curva de calibrao para cada composto a analisar, nas mesmas condies das amostras. A cromatografia gasosa uma tcnica de separao e anlise de misturas por interao diferencial dos seus componentes entre uma fase estacionria (lquido ou slido) e uma fase mvel. A amostra injectada e arrastada pela fase mvel (ou gs de arraste), atravs da coluna, que contm a fase estacionria, onde ocorre a separao da mistura.

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Ilustrao 7: Esquema de um cromatgrafo a gs.

As colunas podem ser de dois tipos (Ilustrao 8): Empacotadas: recheada s com um slido pulverizado (fase estacionria slida ou fase estacionria lquida depositada sobre as partculas do recheio) Capilares: Paredes internas cobertas com um filme fino de fase
Ilustrao 8: Diferentes tipos de colunas e suas caractersticas.

estacionria lquida ou slida. A cromatografia gasosa separa misturas capazes de se dissolverem no gs de arraste, o que significa que separa misturas cujos seus constituintes sejam volteis ou semivolteis. As substncias separadas saem da coluna dissolvidas na fase mvel e passam por um detector que gera um sinal elctrico proporcional quantidade do material separado. O detector FID gera sinais para os compostos com ligaes C-H, o que faz dele um detector universal, ou seja, gera um sinal para a maioria dos compostos. Quanto mais abundantes as ligaes, maior ser o sinal.

A fase mvel deve apresentar as seguintes caractersticas: Inerte: apenas transporta a amostra atravs da coluna; Pura: sem impurezas que possam contaminar a amostra ou gerar ruido no sinal; Compatvel com o detector

A fase estacionria deve possuir as seguintes caractersticas: Semelhante aos solutos a serem separados; Selectiva: separao adequada dos constituintes da amostra; Quimicamente inerte em relao amostra Volatilidade baixa Estabilidade trmica Pouco viscosa Pura

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Caractersticas dos detectores: Resposta lnear e rpida Altamente sensvel Boa estabilidade durante grandes intervalos de tempo Responder a uma grande variedade de compostos

3.3 Resultados e discusso

Ilustrao 10: Branco de amostra. O primeiro pico corresponde ao sulfureto de carbono e o segundo pico a uma impureza-benzeno.

Ilustrao 9: cromatograma do padro 2. Pico 1- sulfureto de carbono; pico 2- benzeno; pico 3- tricloroetileno; pico 4tolueno; picos 5 e 6- impurezas; pico 7- meta xileno; pico 8impureza.

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Ilustrao 11: Exemplo de cromatograma de amostras da 1 seco. A ordem dos compostos igual ao do padro. Ilustrao 12: Exemplo de cromatograma de amostras da 2 seco. Os picos correspondem aos do branco de amostra

Amostra 1 Amostra 2 VLE

Tricloroetileno 31,36 ppm 22,40 ppm 50 ppm

Benzeno 0,64 ppm 0,91 ppm 0,5 ppm

m-xileno 82,61 ppm 40,09 ppm 100 ppm

Tolueno 43,77 ppm 101,75 ppm 50 ppm

Tabela 2: concentraes obtidas atravs das reas dos picos, com recurso a folhas de calculo do Excel .

Para cada conjunto de condies usadas os tempos de reteno (tr) variam, nas condies usadas os tempos de reteno dos padres utilizados ( tolueno, m-xileno, tricloroetileno e benzeno) j haviam sido estudos, e de acordo com a ilustrao 10, os compostos foram eludos da coluna pela seguinte ordem: Tr: 2,9- Benzeno Tr:3,4- tricloroetileno Tr:4,0- tolueno Tr:5,6- meta-xileno O primeiro pico observado corresponde ao sulfureto de carbono. Os picos 5,6 e 8 correspondem a impurezas presentes no padro de meta-xileno (para-xileno, etilbenzeno, orto-xileno). Assim possvel indentificar os compostos presentes nas amostras, estabelecendo um paralelo entre os cromatogramas dos padres e os cromatogramas das amostras (Ilustraes 11 e 12). Apenas as primeiras seces continham solventes, pois como

se pode observar estas so iguais ao branco de amostra, que apenas contm sulfureto de carbono. O segundo pico observado corresponde a uma impureza do sulfureto de carbono Benzeno. Este valor de benzeno ser subtrado no final. O resultado de um cromatograma expresso em rea do pico cromatogrfico, sendo que os valores de concentrao so calculados atravs de uma folha de clculo do Excel, que utiliza as concentraes conhecidas dos padres. Quanto maior a rea do pico cromatogrfico maior ser a concentrao do composto presente. Os resultados, em partes por milho (ppm) esto expressos na tabela 2. Os valores de benzeno e tolueno encontram-se acima dos valores limite de exposio indicados, sendo que numa situao real cabe ao empregador tomar as medidas necessrias com vista sua correo, de modo a assegurar umas boas condies de trabalho para os seus trabalhadores. Sempre que possvel a avaliao ambiental pode ser complementada com a avaliao biolgica- indicadores biolgicos de exposio.

Nota: As curvas de calibrao dos compostos, o tempo de reteno e rea das amostras, assim como a ordem dos vials e as concentraes encontram-se no anexo 2.

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4. Contaminao microbiolgica do ar

4.1 Abordagem terica


Durante muito tempo, por poluio do ar, entendeu-se poluio do ar exterior. A crescente urbanizao, a alta concentrao industrial e a banalizao dos transportes mecanizados estiveram na origem de uma crescente emisso de poluentes com efeitos nefastos na qualidade do ar exterior. A poluio do ar exterior h muito encarada como um problema real e de preocupao mundial, enquanto por seu lado, a poluio do ar interior s mais recentemente passou a ser um problema com expresso a nvel da sade, da tecnologia e da economia, principalmente em pases desenvolvidos. Este interesse justificado por um conjunto de problemas do foro da sade e do conforto, com reflexos no bem-estar e produtividade da generalidade das pessoas. Tal situao pode ser causada pelo aumento do tempo que as pessoas permanecem em espaos interiores (cerca de 80% do seu tempo); pelo aumento da estanquecidade dos edifcios; pela utilizao da ventilao mecnica como nico processo de renovao do ar interior para o exterior; e pelo aparecimento de novas fontes de poluio interior associadas a materiais de construo, ao mobilirio, decorao, s actividades, aos equipamentos tais como fotocopiadoras e computadores e ao uso generalizado de uma vasta gama de produtos de higiene e de limpeza. De uma forma geral as fontes emissoras de poluentes que afectam a qualidade do ar interior podem ser agrupadas da seguinte forma: materiais de construo/decorao e equipamentos; sistemas de ventilao (os filtros de ar, componentes essenciais e sempre presentes em qualquer sistema de ar condicionado, tm vindo a ser apontados como uma das principais fontes de contaminao do ar em ambientes interiores, atravs da emisso de odor e de compostos orgnicos volteis, e pela libertao de fibras, de partculas e de esporos de fungos e bactrias que neles esto contidos); ocupantes e suas actividades; ar exterior. Todos estes factores contribuem com emisses de gases e partculas para o aumento da concentrao dos poluentes no ar interior, levando os seus ocupantes a apresentarem sinais de mal estar, tais como manifestaes alrgicas, irritaes das mucosas ocular, do nariz e garganta, dores de cabea e letargia. O conjunto destes sintomas designa-se por sindroma do edifcio doente Ssick Building Syndrome-SBS), 18

atribudo ao edifcio como um todo, exactamente porque as causas no so passiveis de uma identificao diferenciada em relao aos sintomas e tentem a melhorar aps a sada do edifcio. Um edifcio diz-se afectado pelo SBS quando um grupo de ocupantes apresentar pelo menos um dos cinco sintomas seguintes: Manifestaes nasais- irritao e entupimento do nariz; Manifestaes oculares- irritao da mucosa dos olhos bem como a secagem dos olhos; Manifestaes orais ou da garganta- irritao da garganta e garganta seca; Manifestaes cutneas - pele seca e irritada, ocasionalmente acompanhada por comicho nas partes expostas da pele; Manifestaes gerais- dores de cabea, letargia e cansao, que muitas vezes levam falta de concentrao. A Tabela 3 apresenta as concentraes mximas de referncia (CMR) para os agentes qumicos, biolgicos e fsicos do ar interior preconizadas no Decreto-Lei n. 79/2006, de 4 deAbril Anexo VII Concentraes Mximas de Referncia de poluentes no interior dos edifcios

Tabela 3: os parmetros a ter em conta na avaliao da qualidade do ar interior e seus valores de concentrao mxima de referncia. Retirado de (Santos, 2010).

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Como se pode constatar pela tabela 3, a contaminao dor ar interior deve-se a uma vasta variedade de parmetros, dentro dos quais constam os parmetros biolgicos, nomeadamente as bactrias e fungos. As tabelas 4 e 5 mostram quais os fungos e bactrias mais comuns no ar interior, respectivamente.

Tabela 4: fungos mais comuns no ar interior de acordo com os nveis de humidade. Retirado de (Santos, 2010).

Bactrias mais frequentes no ar interior Micrococcus spp Staphylococcus spp Streptococcus spp Corynebacteria spp Flavobacterium sp Bacillus subtilis Staphyloc. Aureus Staphyloc. Epidermidis
Tabela 5: Bacterias mais frequentes no ar interior.

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4.2 Mtodo
Foram recolhidas amostras de ar em diversos pontos do INSA, nomeadamente: exterior , sala de lavagens, biblioteca e gabinete pessoal. A amostragem de ar fez-se recorrendo ao amostrador MAS-100 (Ilustrao 13), no qual se coloca o meio de cultura (matriz de amostragem) adequado ao microorganismo que se predente colher. O princpio geral da tcnica consiste na inoculao directa sobre uma superfcie semi- solida (meio de agar), por efeito da inrcia das partculas em suspenso no ar, cujo escoamento acelerado atravs de um orifcio ou bucal. A incubao dever despelotar a multiplicao dos microorganismos ,
Ilustrao 13: Amostrador MAS-100.

dando origem a colonias directamente visveis no meio onde o ar foi colhido, podendo as mesmas ser posteriormente quantificadas e identificadas. Em cada ponto as colheitas foram efectuadas em duplicado: - duas placas tripticase soy agar (TSA) para cultura de bactrias totais; -duas placas de MacConkey para cultura de bactrias gram negaticas; - duas placas de extracto de malte (MEA) com cloranfenicol para cultura de fungos e inibio de bactrias. As placas de TSA e MacConkey foram incubadas a 37c1 durante 1-2 dias, enquanto que as placas de MEA foram incubadas a 25C3 durante 5 dias. Fi ndo o perodo de incubao as colnias bacterianas presentes nos meios de TSA e MacConkey foram contadas com recurso a um contador, enquando que as colonias fngicas presentes no meio de MEA foram tambm contadas e posteriormente identificadas. Para a identificao de fungos foram feitas lminas de todos os tipos de colonias diferentes presentas na placa e observam-se ao microscpio ptico com a objectiva de 10 ou 40. Os factores a ter em conta so as caractersticas macroscpicas da colonia (cor da frente e reverso da colonia, a sua topografia e textura, assim como a produo de pigmentos) e as suas caractersticas microscpicas (presena de macro e/ou

microconideos, tamanho dos esporos, presena/ausncia de septos nas hifas e tamanho e dimenso das mesmas, morfologia do conidiforo) As lminas foram efectuadas com recurso tcnica da fita-cola, na qual se faz aderir uma poro da fita-cola poro da colonia que se pretende estudar. Esta fica colada fita e de seguida montada na lmina com uma gota de azul de lactofenol.

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Uma vez identificados os fungos presentes nas lminas, as colonias com aspecto semelhante so agrupadas.

4.3 Resultados e discusso

Tabela 6: Identificao dos pontos de colheita.

Tabela 7: UFCS das mdias dos duplicados.

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Depois de contadas as colonias, os dados so introduzidos em folhas de clculo do Excel e o resultado expresso em UFC3/m3. No ar interior as concentraes de microorganismos no excedem os valores mximos de referncia indicados no Decreto-Lei n. 79/2006, de 4 de Abril. Este edifcio dispe de sistema de ar condicionado, devendo nestes casos a concentrao de fungos presentes no interior ser inferior ou igual concentrao encontrada no exterior, facto que se verifica. Os gneros predominantes so Cladosporium e Penicillium , sendo estas espcies comuns no ar interior, e as suas concentraes esto dentro da normalidade. No existem espcies no interior que no tenham sido encontradas no exterior, o que significa que no h amplificao no interior. As concentraes de bactrias mais elevadas no interior do que no exterior esto relacionadas com a ocupao dos espaos, uma vez que as bactrias tm origem nas prprias pessoas: em ambientes interiores, a maioria das bactrias no ar so resultantes de descamao da pele humana e/ou provenientes do tracto respiratrio (coccus Gram(+)). Assim pode concluir-se que no existe contaminao microbiolgica do ar interior do INSA, sendo que os microorganismos observados e as suas respectivas concentraes esto dentro do considerado normal, tendo em conta que nenhum ambiente estril.

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5. Concluso
Este estgio abriu horizontes sobre um assunto pouco explorado na licenciatura em anlises clnicas e sade pblica, uma vez que a anlise do ar no faz parte do plano curricular. Todas as informaes constituram novidade e uma aprendizagem acerca do papel do tcnico de anlises clnicas ao nvel da sade ocupacional. As trs semanas de estgio demonstraram no ser suficientes para se alcanar todos os objectivos pretendidos, uma vez que os seguintes ficaram por concretizar: tcnicas de ultra violeta no visvel para quantificao de acido d-aminolevulnico na urina; Cromatografia Inica, para determinao de cloraminas no ar; Potenciometria, para determinao de compostos de cloro no ar; Microscopia de Contraste de Fase para identificao e quantificao no ar, de fibras de amianto e fibras minerais artificiais; Gravimetria para quantificao de poeiras em suspenso no ar.

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6. Bibliografia

(s.d.). Obtido em 1 de Maro de 2012, de http://www.insa.pt/sites/INSA/Portugues/AreasCientificas/SaudeAmbiental/AreasTrabalho/ArSaude Ocupacional/Paginas/inicial.aspx (s.d.). Obtido em 1 de Maro de 2012, de http://www.insa.pt/sites/INSA/Portugues/QuemSomos/Paginas/INSA.aspx Caldeira, C., Mattos, R. d., Meyer, A., & Moreira, J. C. (2000). Limites de aplicabilidade da determinao do cido -aminolevulnico urinrio como teste screening na avaliao daintoxicao profissional pelo chumbo. Cad. Sade Pblica, Rio de Janeiro, 16(1):225-230 , 225-230. Cano, M. M. (s.d.). Qualidade do ar interior, contaminaao microbiologica do ar. Cerdeira, R. (s.d.). Cromatografia gasosa. Mtodos experimentais em energia e ambiente . Correia, P. R., Nomura, C. S., & Oliveira, P. V. (2003). ESPECTROMETRIA DE ABSORO ATMICA MULTIELEMENTAR: DESAFIOS E PERSPECTIVAS. Revista Analytica , 52-59. Couto, J. M. (1999). Impacto dos filtros na qualidade do ar interior. Porto. Emprego, M. d. (6 de Fevereiro de 2012). Decreto-Lei n.24/2012 de 6 de fevereiro. Dirio da Repblica . Grande, M. D. (s.d.). Cromatografia Gasosa Princpios Bsicos. Krug, F. J., Nbrega, J. A., & Oliveira, P. V. (Junho 2004). Espectrometria de Absorao Atmica Parte 1:Fundamnetos e atomizaao com chama. MINISTRIO DAS OBRAS PBLICAS, T. E. (4 de Abril de 2006). Decreto-Lei n.o 79/2006 de 4 de Abril. DIRIO DA REPBLICAI SRIE-A . Moreira, F. R., & Moreira, J. C. (2004). A cintica do chumbo no organismo humano e sua importncia para a sade. Cincia & Sade Coletiva, 9(1):167-181 , 167-181. Quintas, M. d., Aguiar, F., & Pinhal, H. (2012). Manual de Estgio. Santos, J. C. (Outubro de 2010). AVALIAO DA QUALIDADE DO AR INTERIOR EM JARDINS-DEINFNCIA. FACULDADE DE ENGENHARIA DA UNIVERSIDADE DO PORTO .

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7. Anexo 1

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8. Anexo 2

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9. Anexo 3

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