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1. EMPRESA

1.1. HISTRIA

A empresa One Cosmticos, foi fundada no ano de 2006, por um grupo de cinco profissionais (Elisete S. Amparo, Mayana Bonilha, Michele Yamada, Thiago A. Gonalves e Washington Maniero) com formao tecnolgica em Cosmtico, que acreditam e esto comprovando que a rea de cosmtico tem um futuro promissor. A indstria est localizada em Caapava, possui aproximadamente 90.000 m, com 500 profissionais especializados em atividades. A One Cosmticos uma empresa cosmtica brasileira de alta tecnologia, que lanar uma linha de cosmtico corporal denominada Seven Sin, cujo slogan Extravaze! Libere suas emoes. Prioriza o marketing com apelo religioso, para desenvolver seus produtos,

empregando os princpios ativos da biodiversidade brasileira, de forma sustentvel. Os produtos so desenvolvidos a partir de pesquisas e estudos, que comprovam a eficcia e segurana dos cosmticos, com a finalidade de melhorar a qualidade do produto. Os objetivos da One Cosmticos vo alm da fabricao dos produtos, pois tem como compromisso no apenas a excelente qualidade dos mesmos, mas principalmente melhorar a qualidade de vida dos seus consumidores.

1.2. MISSO

A One Cosmticos tem como misso criar, desenvolver, atender e vender seus produtos com excelente qualidade, com a finalidade, de agradar e superar as expectativas de seus consumidores.

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1.3. VISO

O prprio nome da empresa (One em ingls representa o nmero 1) simboliza a sua viso, que tem como pretenso ser a nmero 1 no mercado de vendas nacional e se destacar no internacional. Com o propsito de instigar as pessoas aos ideais de beleza, para promover uma fidelizao marca, sempre se dispondo de forma tica e correta com os seus consumidores e colaboradores.

1.4. VALORES

A empresa tem um forte valor humano praticado nas relaes interpessoais e a conduta tica em relao aos seus parceiros. Esta postura tambm se reflete no contato com o consumidor, que reconhece a integridade da empresa pela qualidade do atendimento e dos produtos comercializados.

1.5. MERCADO DE COSMTICOS

Nos ltimos 13 anos a indstria Brasileira de higiene Pessoal, Perfume e Cosmticos apresentou um crescimento mdio deflacionado composto de 10,6%, tendo passado de um faturamento, lquido de imposto sobre vendas, de R$ 4, 9 bilhes em 1996 para R$ 21,7 bilhes em 2008. O crescente aumento motivado pela valorizao do real e a desvalorizao do dlar (Abihpec, 2009).

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Grfico 1: Crescimento lquido de imposto sobre vendas de cosmtico, em reais e dlares, no ano de 1996 at 2008. Fonte: Abihpec, 2009. Segundo dados do mercado de cosmtico brasileiro retirados da Abihpec (2009), o canal de distribuio que possui mais venda em reais, em 2007, o de atacado e varejo

correspondendo 68,2%, em segundo lugar o canal de vendas diretas com 27,6%, e por fim a franquia com 4,2%. Recentemente, o Euromonitor divulgou dados preliminares de sua pesquisa mundial do mercado cosmtico em 2008. O Brasil o 3 colocado no ranking, atrs de Estados Unidos e Japo. Considerado o primeiro mercado em desodorante; segundo mercado em produtos infantis, produtos masculinos, higiene oral, produtos para cabelos, proteo solar, perfumaria e banho; quarto em cosmticos cores; sexto em pele e oitavo em depilatrio (Santos, 2008); (Abihpec, 2009). Vrios fatores tm contribudo para este excelente crescimento do Setor, dentre os quais destacamos: Participao crescente da mulher brasileira no mercado de trabalho;

A utilizao de tecnologia de ponta e o conseqente aumento da produtividade, favorecendo os preos praticados pelo setor, que tem aumentos menores do que os ndices de preos da economia em geral;

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Lanamentos constantes de novos produtos atendendo cada vez mais s necessidades

do mercado; Aumento da expectativa de vida, o que traz a necessidade de conservar uma impresso de juventude (Abihpec, 2009). O consumidor brasileiro est mais vaidoso e consome, cada vez mais, produtos de higiene, perfumaria e cosmticos. O mercado cosmtico supera a crise econmica atual, por no depender de crdito, o aumento no consumo desses produtos se deve, principalmente, ao aumento da renda da populao. Alm disso, o mercado est em ascenso, devido os fatores citados no texto acima. Essa constatao do presidente da Abihpec (Associao Brasileira da Indstria de Higiene Pessoal, Perfumaria e Cosmticos), Joo Carlos Baslio, de acordo com a Agncia Brasil (Info Money, 2009). Sob o aspecto empregatcio, o setor tambm apresentou resultados importantes, quando comparado com o crescimento do emprego no pas. Desde 1994 a 2008, houve um crescimento mdio de 8,2%, e essas oportunidades de trabalho esto localizadas em indstrias, franquias, consultoria de venda direta e sales de beleza (Abihpec, 2009).

1.5.1. Estudo de Mercado para Produtos Corporais da Empresa One Atualmente, os cuidados com o corpo vm se tornando to importantes quanto os cuidados com o cabelo e rosto, e segundo dados da Euromotor, o Brasil esta em segundo lugar de vendas mundial nos mercados de perfumaria e banho, o sexto mercado mundial em venda de cremes e loes para pele. Baseados nos excelentes dados citados a cima, a One cosmticos desenvolveu sua linha corporal neste mercado (Abihpec, 2009). A equipe da empresa constatou atravs de pesquisas, que principalmente nos ltimos dez anos, as mulheres conquistaram um importante espao no mercado de trabalho. Ascenderam tanto no plano hierrquico quanto no financeiro e se tornaram responsveis pelo sustento de

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famlias (segundo o Instituto Brasileiro de Geografia e Estatstica, IBGE elas j bancam 25% dos domiclios do Pas). E as jovens solteiras, esto em maior nmero, pois casamentos e filhos esto sendo postergados em funo da busca por melhores carreiras, estas so um forte e novo perfil de consumidoras que podem gastar, portanto, novos produtos esto sendo desenvolvidos para este pblico (Grinover, 2004). O marketing de luxo nasce com a nobre misso de dissecar os desejos muitas vezes subversivos de um pblico especfico (abastados financeiramente) para transformar este desejo em procura, ofertando-lhe o produto correto, e, posteriormente, transformando-o em demanda, concretizando o consumo, garantindo a satisfao e todos os elementos ps-consumo envolvidos na transao (Nascimento; Ladeira, 2008). Um estudo sobre o mercado de luxo foi realizado entre setembro de 2006 e janeiro de 2007, pela MCF Consultoria e Conhecimento, relatou que em 2006, o segmento cresceu 17%, enquanto o pas amargou 3,7%. No mesmo ano, o faturamento declarado do mercado de luxo foi de US$ 3,9 bilhes apenas no Brasil, o que representa 1% do mercado equivalente global. Comparado ao ano anterior, houve um crescimento de 32%. Em termos de investimento houve injeo de US$ 680 milhes, 62% mais que em 2005 (Nascimento; Ladeira, 2008).

1.5.2. Estudo da Concorrncia Os profissionais de marketing da empresa One, analisaram quatro produtos de diferentes marcas do mercado de cosmticos, perfumaria e alimentcio. de grande valia, analisar a linha de sorvete Magnum da empresa Unilever, que atua em varejo, possui como apelo principal os sete pecados capitais implcitos, por tempo limitado, a linha contm sete sabores de sorvetes, cada um representando um pecado capital. A promoo foi um exemplo bem sucedido de como campanhas que integram colees que so distribudas

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em varejo, com linhas de produtos limitados, e produtos temticos atraem a ateno e o desejo dos consumidores (Thimteo; Thimteo; Pedrini, 2008). A empresa Boticrio apresenta um canal de distribuio de franquia e internet, que investiu 2 milhes de reais, para a linha edio limitada de Fun Ice Cream, coleo inspirada em tipos de sorvetes foi desenvolvida especialmente para a poca mais quente do ano. Estudos apontaram duas fortes tendncias no mercado internacional, sobretudo asitico, americano e europeu: os produtos com perfil denominado Gourmand e Fun. Os itens se diferenciam pelo apelo divertido, ldico e irreverente (Adnews, 2008). Por meio de pesquisas, o Boticrio ouviu mulheres entre 18 e 35 anos, consumidoras regulares de produtos cosmticos. A marca identificou que elas so abertas s tendncias, desde que sejam diferentes e inovadoras, e que tragam experincias sensoriais, com agradveis fragrncias. A pesquisa revelou ainda, que a fragrncia inspirada nas tendncias Gourmand e Fun, tiveram 100% de aprovao das entrevistas e referiram que os produtos remetem ao resgate da infncia (Adnews, 2008). Somente a diviso de cosmticos da marca Victorias Secret fatura cerca de US$ 1 bilho. Dos 20 perfumes mais vendidos nos Estados Unidos, cinco so da empresa multinacional americana. Entre eles, o Dream Angels, perfume lder de vendas nos Estados Unidos (Victoria Secret, 2007). O perfume mais famoso do mundo foi criado por Ernest Beaux, famoso perfumista da poca, a pedido de Coco Chanel, empresa que tem origem na Frana, sugeriu: "Um perfume de mulher com cheiro de mulher". Dentro de um frasco art dco, que foi incorporado coleo permanente do Museu de Arte Moderna de Nova York em 1959, o Chanel n 5 foi o primeiro perfume sinttico a levar o nome de um estilista. Revolucionando o mundo das fragrncias, o perfumista utilizou em sua frmula corpos sintticos em propores inditas at ento: eram mais de 65 substncias em sua composio entre elas rosas, jasmins de Grasse, flores raras do

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oriente e sndalo, alm da luxuosa essncia do pau-rosa, rvore tropical ameaada de extino e que encantou os europeus desde o sculo XVIII por sua fragrncia. O cinco era o seu nmero da sorte, tanto que Coco apresentou o perfume no dia 5 de maio de 1921, at hoje o perfume mais vendido em todo o mundo, atingindo cerca de 140 pases.. O perfume alavancou seus negcios e se tornou legendrio. Mas foi Marilyn Monroe quem tornou o perfume um verdadeiro sucesso. Ao ser entrevistada, perguntaram o que vestia para dormir. Marilyn respondeu: "Apenas algumas gotas de Chanel n 5". Recentemente, em 2004, foi lanada a nova campanha do perfume estrelada pela atriz Nicole Kidman, o novo rosto do Chanel n 5 para encarnar a elegncia e modernidade do produto (Chanel, 2007).

1.5.2.1. Anlises de custos e caractersticas das concorrncias Realizar anlises de produtos de empresas concorrentes de suma importncia para o desenvolvimento de produtos diferenciados, e tambm, auxiliar nas boas decises de preos. Portanto, a empresa pesquisou preos e caractersticas de dez produtos de diferentes marcas e empresas (Anexo 1).

1.5.3. Sete Pecados Capitais Os pecados foram criados para conter a violncia e tornar saudvel a conflituosa sociedade medieval. Foram utilizados para vetar os comportamentos sociais agressivos, ou seja, era uma forma de advertir sobre o que poderia acontecer com quem se deixasse levar pelo desejvel (Thimteo, Thimteo e Pedrini, 2008).

1.5.3.1. Histria Com o passar dos sculos, os conceitos religiosos dos sete pecados capitais, sofreu algumas reformulaes. O seu princpio vem dos ensinamentos do catolicismo para a educao

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e proteo dos seguidores crentes ( apesar de no haver nenhum registro na Bblia ), para que estes pudessem controlar seus instintos bsicos (Thimteo, Thimteo e Pedrini, 2008). Thimoteo, Thimoteo e Pedrini (2008), relataram que o telogo e monge Evgrio do Ponto (345-399), no sculo IV, criou uma lista de oito crimes e paixes humanas, em ordem crescente de importncia. No final do sculo VI, o papa Gregrio reduziu a lista para sete itens e estabeleceu sua hierarquia atravs de uma ordem decrescente dos pecados que mais ofendiam o amor. A lista que temos hoje foi estabelecida por So Toms de Aquino, que ser descrita a seguir:

1.5.3.1.1. Vaidade (Soberba) So Toms de Aquino considerou a soberba um pecado especfico, embora possa ser encontrado em todos os outros pecados. Pode se dizer, que a forma bsica ou me de todos os pecados. Teria sido a responsvel pela desobedincia de Ado, que provou o fruto proibido com a ambio de se tornar Deus. A soberba leva o homem a desprezar os superiores e a desobedecer s leis. Ela nada mais que o desejo distorcido de grandeza (Costa; Silva, 2007).

1.5.3.1.2. Inveja A inveja requer comparao entre o Eu e o Outro e implica o desejo de suprimir as diferenas. uma maneira de nivelar por baixo: se eu no posso ter, no suporto conviver com algum que tenha. A cobia, ao contrrio, nivela por cima: se o outro tem, eu tambm quero ter (Costa; Silva, 2007).

1.5.3.1.3. Ira

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A ira algo diferente de ns, no inerente ao ser humano normal, fazendo nos perder a capacidade de controle e uso da razo, com o objetivo de criar expresses e ditos muitas vezes jocosos. Por ter componentes irracionais, a ira no deve ser confundida com o dio, que pode atingir seus objetivos destrutivos somente pela racionalidade. A agressividade gerada pela ira demonstra a incapacidade de racionalizar quando se deixa dominar pela emoo. uma exploso forte de um sentimento ruim, proveniente de uma contrariedade, de uma desiluso, de um acontecimento inesperado e ruim, de uma inconformidade ou de uma culpa (Costa; Silva, 2007).

1.5.3.1.4. Preguia Segundo Toms de Aquino, a preguia (acdia) um tdio ou tristeza em relao aos bens interiores e aos bens do esprito. O ser humano recebe um dom e uma tarefa e seu dever empenhar com louvor todas as suas capacidades, e a omisso a esse empenho torna-se um pecado, que descrito por essas caractersticas (Costa; Silva, 2007)

1.5.3.1.5. Avareza A avareza, no latim avaritia, designa o apego exagerado aos objetos e bens que possui. Est intimamente relacionada cobia, que significa a sede do possuir, de ter sempre mais. Juntas, conjugam o impulso de obter, conquistar, trazer para si bens de todo tipo e a inclinao a guard-los, preserv-los, ret-los para si. Num sentido mais geral, a avareza pode ser vista como um trao universal do Humano (Costa; Silva, 2007).

1.5.3.1.6. Gula

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Est ligada aos prazeres do comer e do beber, sem os quais no possvel a vida humana e por isso que, em relao a esses prazeres, freqentemente se transgride. Mas sobre esses prazeres podemos analisar dois aspectos: a necessidade e o desejo, num exerccio de compreenso dessas ordens de apetites no mundo. No campo do desejo, podemos considerar a

gula como o excesso de apetite e o apetite, como fome de viver (Costa; Silva, 2007).

1.5.3.1.7. Luxria A luxria uma palavra formada a partir de luxus que significa excesso, que vem de oposio moderao: o vcio oposto castidade (Costa; Silva, 2007).

1.6. SEGMENTAO DOS NOVOS PRODUTOS

O pblico alvo da linha Seven Sin so mulheres, de aproximadamente 25 a 35 anos, apresentando classe econmica A e B, com diversos nveis de escolaridades (predomnio do segundo grau completo e terceiro completo).

1.7. BRIEFING DOS PRODUTOS

A seguir ser ilustrado os 4Ps dos Novos produtos da linha Seven:

1.7.1. Produto

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1.7.1.1. Marca Em dezembro de 2009, a empresa One, lanar por todo o Brasil, a linha de cosmtico corporal Seven Sin, que utiliza como conceito principal as imagens e a simbologia implcita nos sete pecados capitais e de todo desdobramento histrico e psicolgico que deles advm. A linha de cosmtico Seven Sin ser constituda por sete produtos de cosmtico, cada um representando um pecado capital. Os produtos iro apresentar caractersticas independentes entre si, ou seja, as cores dos produtos e das embalagens esto ligadas ao tema de cada pecado. Esta ser por tempo limitado. O objetivo da linha destacar o tema da campanha e o apelo persuasivo a compra de todos os produtos desta linha. Os consumidores podero cometer todos os pecados de uma forma aparentemente inofensiva e sem provocar mal algum, s o bem, nem que seja apenas pra eles. A linha Seven Sin serve pra liberar todas as tenses particulares, sinta esses prazeres, atravs do cheiro e do toque: Luxria Flerte! Sacie seus desejos mais profundos. Vaidade Assuma! Entre no prazer dessa alegria. Gula Abuse! Mata-me de prazer. Inveja Caia! Nesse encanto. Avareza Entregue-se! Satisfaa suas vontades. Preguia Deleite-se! No prazer do nada. Ira Libere! Exploso de prazeres. Libere seus desejos reprimidos, neste caso os pecaminosos. Seven Sin, algo possvel de ser consumido e no praticado!

1.7.1.2.

Caractersticas e embalagens

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1.7.1.2.1.

Creme hidratante corporal de fondue de chocolate com amora (gula) O produto desenvolvido por alta tecnologia, sua frmula no oleosa de fcil absoro,

seus ativos deliciosos, apresentam aes de alto nvel de hidratao e de proteo para a pele. Proporciona tambm a ao de desodorizar e perfumar (hum... vai dar vontade de morder), sua textura cremosa semelhante ao de um foundue de chocolate branco e contm micro partculas roxas representando a amora, promovendo uma facilidade de assimilar o contedo do produto com seu nome. um neurocosmtico, pois quando entra em contato com a pele apresenta um sensorial quente. O resultado de uma pele hidratada protegida, saudvel e equilibrada por meio de um produto delicioso. A embalagem para o pecado da gula caracterizada por um pote, que lembra um pote de doce. Apresenta tom bege que simbolizam a cor de um chocolate branco, e a tampa roxa, que representa a amora. No seu rtulo, h uma imagem de chocolate derretido caindo em cima de amoras vistosas, estimulando o desejo do consumidor sobre a imagem, e como associado ao nome e ao contedo do produto, conseqentemente o consumidor ter o mesmo desejo para adquirir o produto.

1.7.1.2.2.

Perfume de morango com pimenta (inveja) O perfume (lquido transparente) apresenta uma fragrncia de causar inveja, devido

essncia do morango que remete ao produto um aroma afrodisaco, estimulante de desejos, e a pimenta um acesso para inveja entrar. O produto esta acondicionado em um refil (vermelho vivo), o qual encaixado em uma embalagem de plstico transparente (transmite um sentimento de indiferena ou neutro). Portanto esta embalagem pode ser comparada a uma pessoa invejosa, ou seja, no deixa

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transparecer que esta com desejos ou vontades de algo que outras pessoas possuem, mas no seu ntimo est ardendo de inveja.

1.7.1.2.3.

Sabonete lquido de cappuccino (avareza) Este produto limpa a pele, retirando as impurezas e o excesso de oleosidade, possuem

ativos que ajudam a manter a hidratao natural da pele. Evitando o ressecamento. Apresenta uma boa viscosidade, para conseguir controlar a quantidade que sair do produto. No existe nada igual, possua! A embalagem de fcil manuseio, prtica, pet colorida (marrom), com tampa disctop (dourada, lembrando ouro), que facilita o controle de sada do produto.

1.7.1.2.4.

Loo cremosa de maracuj e hortel (relaxante e refrescante) (preguia) Hidrata e cuida da pele, tudo ao mesmo tempo. Possui ativos de extratos passiflorina, que

tem propriedades sedativas sobre a pele tem efeito calmante e relaxante, e tambm apresenta extrato de hortel que d uma sensao de refrescncia. Aps utilizar o produto, s ter vontade de sentir essa sensao. uma embalagem simples, colorida (clara) cores que transmitem tranqilidade e de fcil manuseio.

1.7.1.2.5.

leo corporal luminoso de macadmia e baunilha (vaidade) leo Macadmia e baunilha uma combinao de puros leos vegetais especiais,

selecionados com alta qualidade, que amaciam ajudando a manter a hidratao e a elasticidade da pele, portando tambm uma excelente fragrncia de baunilha com macadmia. Sua frmula enriquecida com leo macadmia, e mica, que permite uma luminosidade a sua pele, deixandoa mais luminosa em frente ao seu espelho.

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Possui ma embalagem com designer moderno, colorida e brilhante, que ir chamar ateno de todos, com sua bela aparncia.

1.7.1.2.6.

Sabonete esfoliante corporal lichia com semente de damasco (Ira) O Sabonete lquido esfoliante lichia com semente de damasco proporciona esfoliao

suave durante o banho, retirando as impurezas e clulas mortas da pele. Sua frmula, enriquecida com extrato de lichia e agente de limpeza de origem vegetal, limpa a pele com suavidade, proporcionando uma deliciosa sensao de maciez. Sinta a espuma leve e a envolvente fragrncia. Apresenta uma boa fixao e uma exploso de aroma durante e aps o banho. A cor da embalagem preta (fria) remetendo o pecado da ira, com a rotulagem coloridas, sendo esta pet, com tampa plstica de bico de presso, expelindo o produto rapidamente e com fora, como se fosse uma exploso.

1.7.1.2.7.

Banho de espuma cereja com champagne (Luxria) O Banho de Espuma cereja com champagne limpa, perfuma e deixa a pele macia. Favorece a limpeza da pele, removendo a sujeira e resduos. A cereja exprime uma sensualidade e o champagne transmite uma idia romntica. Pode ser usado tambm em banheiras e ofurs, perfeito para usar a dois. A embalagem para o pecado da luxria tem como base a cor rosa e suas nuances. Em sua rotulagem apresenta imagens de cerejas gigantes envolta destas, bolhas de champagne, remetendo assim, uma idia de afrodisaco, sensual e romntico, instigador de desejos. O formato da embalagem remete uma silhueta de um corpo de mulher. 1.7.1.3. Garantia

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Todos os produtos so produzidos com ativos de eficcia reconhecida, sendo testados e aprovados cientificamente nos laboratrios da Faculdade Oswaldo Cruz. A empresa One, no utiliza mtodos de testes que envolvam o uso de animais e procura estabelecer parcerias com fornecedores e institutos que tambm no os utilizem. Ento, a empresa apia a utilizao de tcnicas de cultura de clulas, tecidos e rgos, chamadas in vitro, e tambm testes com pessoas (in vivo). Esses mtodos so validados pelo ECVAN (Centro Europeu para validao de Mtodos Alternativos) e reconhecidos internacionalmente por entidades como FDA e SCCNFP (Comit Cientfico para Produtos).

1.7.2. Ponto 1.7.2.1. Canais de Distribuio A empresa One comercializa seus produtos em atacado, varejo e site. A linha Seven Sin, ser facilmente encontrada em lojas de perfumarias de shopping e lojas luxuosas em bairros, na extenso de todo o Brasil. O site da One moderno, atualizado diariamente, atrativo, instiga o consumidor a comprar os produtos, encontra-se uma Loja virtual, onde os clientes escolhem os produtos, a forma de pagamento e a data e horrio de entrega. Para este servio no sero cobradas taxas de entregas.

1.7.3. Preo

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Os preos dos produtos so accessveis para o pblico alvo escolhido. Tabela 1: Valores de preos aproximados dos produtos da linha Seven Sin. Valores leo Corporal Luminoso de Macadmia e Baunilha- 100 ml Loo Cremosa de Maracuj e hortel ( relaxante e refrescante)- 150 ml Banho de Espuma de Cereja com Champagne-150 ml Sabonete Esfoliante Corporal de Lichia com Semente de Damasco- 100 ml Creme Hidratante Corporal de Fondue de Chocolate com Amora- 200 ml Sabonete Lquido de Cappuccino- 100 ml Perfume de Morango com Pimenta- 100 ml Fonte: Alunos do grupo 2, do 3ano Oswaldo Cruz (2009) Preos R$ 48,00 R$ 63,00 R$ 39,00 R$ 42,00 R$ 68,00 R$ 34,00 R$ 148,00

1.7.3.1. Formas de pagamento Possuem diversas formas de pagamentos: A vista (dinheiro ou carto); Carto de credito- aceita vrios tipos de cartes - em 3X sem juros; *parcela minima de R$ 30,00 A Loja Virtual ONE oferece aos seus consumidores vrias opes de pagamento para seu conforto e facilidade: Carto de crdito - Autorizao do pagamento online (automtica).

Visa- 3x sem juros. Mastercard - 3x sem juros Dinners - 3x sem juros

*parcela mnima de R$ 30,00 Boleto BancrioValidao do pagamento no 1 dia til seguinte.

s imprimir e pagar em seu banco ou atravs da Internet Home Banking.

1.7.4. Promoo

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Os produtos da marca Seven Sin, so divulgados em mdia, atravs de propagandas em televiso, revistas, outdoors, eventos e site. Como forma de promoo os profissionais de marketing da empresa desenvolveram pequenos folders (Apndice 1) ilustrativos e explicativos, com formato de livro antigo. Estes apresentam instrues de utilizaes dos produtos da marca, de forma criativa, divertida e ldica. Tem por finalidade, induzir o consumidor a sentir o desejo de conhecer novas experincias e sensaes. Por ser uma empresa cosmtica que fabrica protetor solar, apresenta uma conscincia sobre alta incidncia e a gravidade do cncer de pele. A empresa se preocupa com a sade e bem estar de seus funcionrios (e de seus familiares) e tambm da populao em geral. Ento implantou a doao mensal de protetores solares de sua prpria fabricao, juntamente com panfletos explicativos sobre cncer de pele e possveis prevenes desta patologia para seus funcionrios e para a prefeitura de Caapava (para os moradores rurais). Esta ao foi divulgada em seu site como uma forma de promoo. Por esta conduta, outras empresas e prefeituras esto entrando em contado com a One, para comprar os protetores solares, e implantar as doaes. A empresa d muita nfase sade e bem estar das pessoas, pensando nisso, fez parceria com outras empresas e esto colaborando com os Doutores da Alegria, tornando- se, co-responsveis pelo sorriso de milhares de crianas. Com isso ajuda a ampliar a quantidade de visitas a crianas hospitalizadas e expandir os seus trabalhos para novos hospitais pblicos e cidades. Pensando nessa mesma linha, criou o Cantinho da beleza no Hospital da Mulher, em Santo Andr, onde se faz doaes de kits de higiene para bebs (fabricados pela One), e quando as mes recebem alta, ganham um tratamento de beleza (com produtos da One),

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realizados por profissionais especializados, com a finalidade de melhorar a auto-estima dessas mes, acentuando a sua felicidade.

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2.

PRODUTOS

2.1. MATERIAIS

Tabela 2 Descrio das matrias primas utilizadas na produo dos produtos cosmticos Matrias primas INCI Name Funo gua Aqua Veculo lcool de Cereais Alcohol ethyl Veculo EDTA Dissdico Disodium EDTA Sequestrante Propilenoglicol Propylene Glicol Umectante Cosmowax J Cetearyl Alcohol (and) Steareth-20 Base auto emulsionante Eumulgin B2 Ceteareth 20 Emulsionante Tinogard TTDD (Tetradibutil Pentaerithityl Antioxidante Hydroxy-hydrocinnamate) Phenova (Phenoxyethanol, Methylparabeno Conservante Ethylparaben, Butylparaben, Isobutyparaben) Polymol ADP Dibutyl Adipate Emoliente DC 1501 Fludo Ciclopentasiloxano (e) Formador de filme Dimeticonol Sorbitol Sorbitol Emoliente Glicerina Gliceryn Emoliente Glicina de soja Glycine soja (soy bean)Oil Emoliente leo Mineral Paraffinum Liquidum Emoliente leo de Maracuj Passiflora Edulis Seed Oil Emoliente leo de Macadmia Macadmia Temifolia Nut Oil Emoliente Plantarem 2000 Decyl glucoside Tensoativo Extrato Gliclico Lichia Litchi Chinensis Extract Ativo Extrato Gliclico Cacau Thebroma Cacao Ativo (Cocooa) Extract Extrato de Amora Monus Nigra Fruit Extract Ativo Extrato de Cereja Prumus Cerasus (Bitter Cherry)Extract Ativo Extrato de Maracuj Incarnata) Fruit Extract) Essncia Silica Cloreto de Sdio Diestearato de etilenoglicol Amido de milho Salcare SC 91 Passionflower (Passiflora Parfum Silice Sodium Chloride Ethylenoglycol distearate Zea mays Sodium Acrylates Copolymer (and) Ativo Perfume Agente espessante Espessante Espessante Regulador de Viscosidade Espessante

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Dietanolamina de Apricot Kermel Aucar cristal Euperlan PK 771

Parraffinum liquidum (and) PPG-1 Trideceth-6 Cocomide DEA

Sementes de damasco Sodium laureth sulphate(and) Agente Perolizante Glycol distearate (and) Cocomide MEA (and) Laureth -10 Poliquatrnio 10 Polyquarternium-10 Condicionamento Lauril ter Sulfato Sodium Laureth Tensoativo aninico de sdio Surfate/Dissodium Cocoamido Propilbetaina CocoamidopropylBetaine Estabilizante/espuma cido Citrico Citric Acid Acidulante (pH 5,5 6,5) Zonem MI Methychlotoisothizolinone/ Conservante Methylisothiazolinone Corante CI 42090 Cor Corante CI 14720 Cor Corante CI 13015 Cor Mica Mica Decorativa Fonte: Dados coletados por fichas tcnicas dos produtos qumicos disponvel em sites de empresa 2.2. FORMULAES Tabela 3 - Frmula Creme Hidratante - Fondue de Chocolate com Amora - Gula Fase Matria prima Funo Qtde (%) A gua Veiculo 70,85 A EDTA Sequestrante 0,10 A Propilenoglicol Umectante 2,00 B Cosmowax J Base auto emulsionante 10,00 B Polymol ADP Emoliente 2,00 B Eumulgin B2 Emulsionante 1,00 B Tinogard TTDD Antioxidante 0,05 C Phenova Conservante 0,50 C Extrato de Cacau Ativo 0,50 C Extrato de Amora Ativo 0,50 C Essncia Perfume 0,50 C DC 1501 (Fluido) Formador de filme 2,00 E Dry Flo Pure Espessante 10,00 F Pigmento Marron Corante qs F Pigmento Preto Corante qs

Sobreengordurante cido graxo de coco Esfoliante

Tabela 4 - Frmula Esfoliante Hidratante - Lichia com Semente de Damasco - Ira Fase Matria prima Funo Qtde (%)

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A A B C D D F F F

leo mineral Tinogard TTDD Salcare SC 91 Aucar Cristal Extrato de Lichia Essncia Sementes de Apricot CI 14720 CI 13015

Veculo Antioxidante Espessante Esfoliante Ativo Perfume Esfoliante Corante Corante

97,45 0,05 1,50 qsp 0,50 0,50 qs qs qs

Tabela 5 - Frmula Loo Cremosa Hidratante - Maracuj com Hortel - Preguia Fase Matria prima Funo Qtde (%) A gua Deionizada qsp Veculo 94,35 A EDTA Sequestrante 0,10 A DC1501 (Fluido) Formador de filme 1,00 A Sorbitol Emoliente 1,00 B Salcare (91) Espessante 2,00 C Phenova Conservante 0,50 C Extrato de Maracuj Ativo 0,50 C leo de Maracuj Emoliente 0,50 D Tinogard TTDD Antioxidante 0,05 E CI 42090 Corante qs E CI 13015 Corante qs Tabela 6 - Frmula Sabonete Liqudo Cappucino -Avareza Fase Matria prima Funo A gua Deionizada Veculo A EDTA Sequestrante A Poliquartrnio 10 Condicionamento B Lauril ter Sulfato de Tensoativo Sdio B Plantarem 2000 Tensoativo B Cocoamidopropilbetaina Estabilizador de espuma C Dietanolamina de Sobreengorduraante cido graxo de coco D Euperlan PK 771 Agente Perolizante E cido Citrico Acidulante (pH 5,5 6,5) F Cloreto de Sdio Espessante D Essncia Perfume G Zonen MI Conservante H CI 14720 Corante H CI 13015 Corante H CI 42090 Corante

Qtde (%) 63,02 0,10 0,30 22,00 3,00 3,00 3,00 5,00 qsp 0,50 0,08 qs qs qs

Tabela 7 - Frmula Banho de Espuma Champagne com Cereja Luxria Fase Matria prima Funo Qtde (%) A gua Deionizada Veculo 60,39 A Lauril ter Sulfato de Tensoativo 27,00 Sdio

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A A A B C C D E F G H H

EDTA Dissodium Glicerina Poliquartnio 10 Plantarem 2000 Dietanolamina de cido graxo de coco Cocoamidopropilbetaina Zonem MI cido Citrico Diestearato de Etilenoglicol Essncia Extrato de cereja CI 14720

Sequestrante Emoliente Condicionamento Tensoativo Sobreengordurante Estabilizador de espuma Conservante Acidulante Espessante Perfume Ativo Corante

0,10 2,00 0,30 3,00 3,00 3,00 0,08 qsp 0,20 0,50 0,50 qs

Tabela 8 - Frmula - leo Corporal Luminoso - Macadmia e Baunilha - Vaidade Fase Matria prima Funo Qtde (%) A leo Mineral Usp Emoliente 91,44 A leo de Macadmia Emoliente 5,00 A Silica Agente suspensor 0,50 A Glicina de soja Emoliente 2,00 B Tinogard TTDD Antioxidante 0,05 C Corante Cor qs C Essncia de Baunilha Perfume qs C Micas Decorativa qs Tabela 9 Frmula - Perfume - Morango e Pimenta -Inveja Fase Matria prima Funo A lcool de Cereais qsp Veculo A Fragrncia Perfume A Propilenoglicol Umectante A gua Deionizada A Tinogard TTDD Antioxidante A CI 14720 Corante 3. EXTRATOS

Qtde (%) 84,95 10,00 2,00 3,00 0,05 qs

Os leos essncias so a forma mais concentrada de principio ativo natural extrado de plantas aromticas. Muitas vezes so necessrios centenas de quilos de plantas para a obteno de um nico quilo de leo. Eles formam um grupo de valiosas matrias-primas de excelente eficcia para a produo de cosmticos e frmacos.

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3.1. CACAU Theobroma Cacao L / Sterculiaceae Extrato vegetal tipo hidrogliclico (HG) uso tpico cosmtico Parte da planta utilizada: fruto (polpa) INCI: Theobroma Cacao (Cocoa) Extract CAS 84649-99-0 EINECS 283-480-6

3.1.1. Princpios Ativos A polpa do Cacau contm pequeno teor de gorgura. Possui carboidratos (ramnose, arabinose, galactose), mucilagem, cidos orgnicos (galacturnico, glucornico, ctrico), pequeno teor de vitaminas (cido ascrbico, riboflavina, niacina, tiamina), sais minerais e traos de protena. (F.S.Bioextract)

3.1.2. Caractersticas Fsico-Qumicas do Extrato Aparncia Cor Odor Solubilidade pH (25C) Densidade (25C) ndice de refrao (25C) Resduo seco (105C) Preservao Identificao (F.S.Bioextract) : lquido fluido de baixa viscosidade : amarelo ocre : suave, caracterstico : Solvel em gua, etanol, glicerina e propilenoglicol : 4,5 6,5 : 1,015 1,075 : 1,385 1,445 : mnimo 1% : parabenos a 0,3% : de acordo com espetro ultravioleta padro

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3.1.3. Informaes Sobre a Composio Denominao qumica: produto composto por solventes e derivado vegetal. Frmula: propilenoglicol, gua, lcool, glicerina, parabenos e derivados do cacau. (F.S.Bioextract)

3.1.4. Propriedades e indicaes Hidratante (ons minerais, polissacardeos), umectante, emoliente, demulcente,

condicionador, cicatrizante, refrescante, regenerador dos tecidos. Indicado como agente de combate desidratao e queratinizao dos tecidos. Recomendado em cremes e loes para peles secas e para uso dirio; em bronzeadores e produtos aps sol; em shampoos para cabelos normais e secos; shampoos e condicionadores para melhorar a textura e o volume dos cabelos; em desodorantes, loes aps barba, sabonetes e formulaes de banho. (F.S.Bioextract)

3.1.5. Dosagem Sugerida Entre 2 e 5% em cremes, gis, leites e loes. Em shampoos e condicionadores, de 1 a 5% (F.S.Bioextract)

3.1.6. Estocagem e Validade Deve ser estocado hermeticamente fechado, ao abrigo da luz e calor.

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Validade: 24 meses a partir da data de fabricao (n do lote). (F.S.Bioextract)

3.1.7. Observao Poder ocorrer turbidez durante a estocagem, sem alterar as propriedades. (F.S.Bioextract)

3.1.8. Cultivo do cacau O cacaueiro uma planta estimulante, tropical, pertencente a famlia das Esterculiceas, encontrada em seu habitat, nas Amricas, tanto nas terras baixas, dentro dos bosques escuros e midos sob a proteo de grandes rvores, como em florestas menos exuberantes e relativamente menos midas, em altitudes variveis, entre 0 e 1.000 m do nvel do mar. Do fruto do cacaueiro se extraem sementes que, aps sofrerem fermentao, transformam-se em amndoas, das quais so produzidos o cacau em p e a manteiga de cacau. Em fase posterior do processamento, obtm-se o chocolate, produto alimentcio de alto valor energtico. Envolvendo as sementes, encontra-se grande volume de polpa mucilaginosa, branca e aucarada, com a qual se produzem sucos, refrescos e geleias. Da casca extrai-se a pectina, que aps simples processamento mecnico, se transformam em rao animal, ou ainda, por transformaes biolgicas, pode ser usada como fertilizante orgnico. (IAC-SP) 3.1.8.1. Cultivares Clones selecionados em regies cacaueiras do Estado de So Paulo, introduzidos de outras regies cacaueiras, nacionais ou estrangeiras, adaptados s condies de solo e clima paulistas. (IAC-SP)

3.1.8.2. Hbridos

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Provenientes de cruzamentos interclonais entre cacaueiros dos grupos Amaznico e Trinitrio. (IAC-SP)

3.1.8.3.Clima Latitude entre 22 N e 22 S. Adapta-se bem regies com temperaturas mdias superiores a 21C. Tolera por curto espao de tempo, temperaturas mnimas prximas a 7C, durante os meses mais frios do ano, porm pode ocorrer injria nas sementes, resultando em um produto final de qualidade inferior. Exige precipitaes pluviomtricas superiores a 1.300 mm anuais, bem distribudos ao longo do ano, como na regio litornea e Vale do Ribeira e grande parte do planalto paulista. Regies com deficincia hdrica superior a 100 mm anuais no so indicadas explorao econmica da cacauicultura. (IAC-SP)

3.1.8.4. Solos Devem ser profundos e bem drenados. Na regio litornea, os mais indicados so os latossolos vermelho-escuro, o prodizlico vermelho-amarelado e solos aluviais de boa fertilidade natural. No planalto paulista, os prodizolizados de Lins e Marlia var. Marlia, e os latossolos roxos. (IAC-SP)

3.1.8.5. poca de Plantio Sementes em viveiro - setembro a abril. Mudas no campo - praticamente o ano todo, na regio litornea e vale do Ribeira. No planalto paulista, de outubro a maro. (IAC-SP)

3.1.8.6. Espaamentos

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Diversos, em funo da fertilidade do solo e dos objetivos da explorao econmica, podendo variar entre 1.000 a 2.000 plantas/hectare. (IAC-SP)

3.1.8.7. Controle da Eroso Plantio em nvel, nas encostas. (IAC-SP)

3.1.8.8. Mudas Necessrias Entre 1.000 e 2.000, em funo dos espaamentos adotados. (IAC-SP)

3.1.8.9. Calagem De acordo com a anlise de solo, elevar o ndice de saturao por bases para 50%.(IACSP)

3.1.8.10. Adubao de Plantio 60 dias antes do plantio, incorporar por cova, 2 a 4 litros de esterco de galinha ou 10 a 20 litros de esterco de curral curtido, 1 Kg de calcrio dolomtico ou magnesiano, 100 g de P2O5, 02 a 60 Kg/ha de K2O e at 4 Kg/ha de Zn. Acrescentar, em cobertura, 4 aplicaes de 10 g de N/planta, de dois em dois meses. (IAC-SP)

3.1.8.11. Adubao de Formao Aplicar em cobertura ao redor das plantas, em trs parcelas no perodo das chuvas, de acordo com a idade das plantas e a anlise de P e K no solo em gramas por planta: no 1 ano,40 g de N, 20 a 60 g de P2O5 e 20 a 60 g de K2O; no 2 ano, 80 g de N, 30 a 90 g de P2O5 e 30 a 90 g de K2O; no 3 ano, 120 g de N, 40 a 120 g de P2O5 e 40 a 120 g de K2O. (IAC-SP)

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3.1.8.12. Adubao de Produo Aplicar de acordo com a anlise de solo, 50 Kg/ha de N, 30 a 90 Kg/ha de P2O5, 20 a 60 Kg/ha de K2O e at 4 Kg/ha de Zn, parcelados em trs vezes, e aplicados em cobertura, nos meses de outubro, dezembro e maro. (IAC-SP)

3.1.8.13. Outros Tratos Culturais Roadas, para manter a cultura limpa; desbrotas, para eliminar ramos ladres; podas, para dar forma a planta e facilitar os tratos culturais e as colheitas.

3.1.8.14. Arborizao Em matas virgens, proceder ao raleamento parcial da rea deixando as espcies arbreas desejveis para apropriar 40% de sombra plantao. Em terrenos desbravados, arborear com as seguintes espcies de utilizao temporria prpria como bananeira-prata, bananeira-nanico, Thephrosia candida DC ou Leucaena glauca Benth., em associao com as espcies permanentes, com farinha-seca (Ptecellobium edwallii), para sombreamento, e Grevillea robusta A. Cunn. ou jaqueira (Artocarpus integrifolia L. f. Moraceae) para quebra vento. (IAC-SP)

3.1.8.15. Controle de Pragas e Doenas Efetuar controle sistemtico s formigas quenqum e sava, com produtos especficos. No controle a outros insetos, principalmente tripes, vaquinhas, percevejos e lagartas, empregar deltamethrin, malathion, trichlorfon ou carbaryl. Controle preventivo das doenas fngicas: podrido-parda (Phytophthora spp.) - acefato de trifenil estanho, hidrxido de trifenil e estanho e fungicidas cpricos; podrido-morena (Botryodiplodina theobromae) - fungicidas cpricos; e antracnose (Colletotrichum gloeosporioides) - mancozeb e cpricos. (IAC-SP)

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3.1.8.16. Colheita Inicia-se a partir do 2 ano. Do 2 ao 4 ano, os frutos podem ser colhidos praticamente durante o ano todo. A partir do 5 ano, as colheitas so feitas em dois perodos: safra (novembro a fevereiro) e temporo (abril a agosto). (IAC-SP)

3.1.8.17. Produtividade Normal A partir do 7 ano, 1.200 a 1.500 Kg/ha. (IAC-SP)

3.2. AMORA

Morus Nigra / Morceas Extrato vegetal tipo hidrogliclico (HG) uso tpico cosmtico Parte da planta utilizada: fruto INCI: Morus Nigra Fruit Extract International Cosmetic Dicitionary 10 Edio, pg. 1097

3.2.1. Princpios Ativos A Amora contm acares redutores, alfa hidroxicidos (mlico, ctrico), substncias pcticas, salicilato de metila, antociansido (crisantemsido) e cido ascrbico. (F.S.Bioextract)

3.2.2. Caractersticas Fsico-Qumicas do Extrato Aparncia Cor Odor : lquido fluido de baixa viscosidade : rosa avermelhado : agradvel, caracterstico

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Solubilidade pH (25C) Densidade (25C) ndice de refrao (25C) Resduo seco (105C) Preservao Identificao (F.S.Bioextract)

: Solvel em gua, glicerina e propilenoglicol : 5,0 +- 1,0 : 1,030 +- 0,030 : 1,400 +- 0,030 : mnimo 1% : parabenos a 0,3% : de acordo com espetro ultravioleta padro

3.2.3. Informaes Sobre a Composio Denominao qumica: produto composto por solventes e derivado vegetal. Frmula: propilenoglicol, gua, lcool, glicerina, parabenos e derivados do cacau. (F.S.Bioextract)

3.2.4. Propriedades e Indicaes Refrescante, hidratante, antioxidante, suavizante. Renovador do epitlio. Indicado em cremes e loes de tratamento; em shampoos para uso dirio e anticaspa; em sabonetes e banho de espuma. (F.S.Bioextract)

3.2.5. Dosagem Sugerida Em shampoos e sabonetes, de 2 a 5%. Em cremes e loes para o corpo e rosto, de 3 a 7%. (F.S.Bioextract)

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3.2.6. Estocagem e Validade Deve ser estocado hermeticamente fechado, ao abrigo da luz e calor. Validade: 24 meses a partir da data de fabricao (n do lote). (F.S.Bioextract)

3.2.7. Observao Poder ocorrer turbidez durante a estocagem, sem alterar as propriedades. (F.S.Bioextract)

3.2.8. Cultivo da amora Planta arbustiva, de porte ereto, semi-ereto ou rasteiro, pertencente famlia Rosaceae. O gnero Robus, do qual faz parte, engloba mais de 400 espcies, fato que, somado ao elevado ndice de cruzamentos naturais, dificulta a identificao das espcies. Bastante rstica e de fcil manejo, com exigncias climticas semelhantes s do morangueiro, constitui-se em opo para explorao intensiva de pequenas propriedades rurais. A maioria das variedades recomendadas para cultivo apresentam hastes recobertas por espinhos. Seus frutos se prestam para o consumo in natura e para a elaborao de gelias, sucos, doces de massa, tortas e fermentados, podendo tambm ser congelados ou utilizados como polpa para uso em iogurtes e sorvetes. (IAC-SP)

3.2.8.1. Cultivares Sem espinhos: bano (porte rasteiro); com espinhos: Brazos (porte semi-ereto), Comanche, Cherokee, Tupy, Guarani, Negrita e Caigangue (porte ereto). (IAC-SP)

3.2.8.2. Plantio

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Deve ser realizado, de preferncia, nos meses mais frios do ano. Podem ser usadas estacas de raiz (10 a 15cm de comprimentos e dimetros de um lpis) ou mudas produzidas em viveiros, atravs de estacas herbceas (20 a 25cm de comprimento), perfilhos e mergulhos. (IAC-SP)

3.2.8.3. Espaamento Para conduo das plantas em renque, no sistema de espaldeira, o espaamento entre linhas pode variar de 2,5 a 4 m, dependendo dos equipamentos que sero usados na cultura. Na linha, as estacas de raiz devem ser espaadas de 50 cm e as mudas de 70 cm. (IAC-SP)

3.2.8.4. Calagem Dever ser feita, de acordo com a anlise de solo, para elevar a saturao por bases a 70%.(IAC-SP)

3.2.8.5. Adubao As covas no devem ser adubadas. Aps o estabelecimento da cultura, ainda no primeiro ano, aplicar 20 a 40 kg/ha de N, 40 a 80 kg/ha de P2O5 e 20 a 40 kg/ha de K2O, dependendo do nmero de plantas por rea e da anlise de solo. A partir do segundo ano, aplicar 180 a 400 kg/ha de N, 80 a 160 kg/ha de P2O5 e 40 a 80 kg/ha de K2O, de acordo com o nmero de plantas por rea; o N deve ser parcelado em trs aplicaes, logo aps o inverno, nos meados da primavera e aps a colheita. (IAC-SP)

3.2.8.6. Outros Tratos Culturais

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Controle das plantas invasoras ou uso da cobertura morta; podas de vero e de inverno; controle de pragas e doenas, quando necessrio. (IAC-SP)

3.2.8.7. Colheita Novembro a Fevereiro, dependendo da variedade e da regio onde se localiza a cultura. Fazer a colheita a cada dois ou trs dias, somente dos frutos completamente pretos, e coloc-los em recipientes rasos, para evitar o amassamento. No devem ser expostos ao sol para que no se tornem avermelhados. (IAC-SP)

3.2.8.8. Produtividade 8 a 16t/ha de frutos, por ano; em plantaes bem conduzidas, a produo se mantm econmica por um perodo de 12 a 15 anos. (IAC-SP)

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4.

AVALIAO E EFICCIA DE PRODUTOS COSMTICOS

De acordo com a definio conferida pela Legislao vigente, Cosmticos, Produtos de Higiene e Perfumes so preparaes constitudas por substncias naturais ou sintticas, de uso externo nas diversas partes do corpo humano, pele, sistema capilar, unhas, lbios, rgos genitais externos, dentes e membranas mucosas da cavidade oral, com o objetivo exclusivo ou principal de limp-los, perfum-los, alterar sua aparncia e/ou corrigir odores corporais e/ou proteg-los ou mant-los em bom estado. A avaliao da segurana deve preceder a colocao do produto cosmtico no mercado. A empresa responsvel pela segurana do produto cosmtico, conforme assegurado pelo Termo de Responsabilidade, onde a mesma declara possuir dados comprobatrios que atestam a eficcia e segurana de seus produtos (Resoluo 79/00). Uma vez que o produto cosmtico de livre acesso ao consumidor, o mesmo deve ser seguro nas condies normais ou razoavelmente previsveis de uso (a). A busca dessa segurana deve incorporar permanentemente o avano do estado da arte da cincia cosmtica. Tem como finalidade atender as necessidades de mercado e assegurar a sade dos consumidores a Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria ANVISA. Independentemente do tamanho da empresa e do tipo de produto fabricado, devem seguir as normas sanitrias que abrangem desde o projeto para a instalao da fbrica at o lanamento de um novo produto no mercado. Esses cuidados so necessrios, no s para assegurar a qualidade do produto, como tambm para preservar a sade do consumidor e garantir a proteo do meio ambiente. (BARBOSA 2006).

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4.1. COSMETOVIGILNCIA

A partir de 31 de dezembro de 2005, as empresas fabricantes e/ou importadoras de Produtos de Higiene Pessoal Cosmticos e Perfumes, instaladas no territrio nacional, ficaram obrigadas a implementar um Sistema de Cosmetovigilncia, conforme determinado pela Resoluo RDC n. 332, de 01 de dezembro de 2005. A Cosmetovigilncia um novo instrumento para a vigilncia sanitria estruturado para suprir as necessidades de maior controle e garantia de qualidade desses produtos, e que, se praticada com o rigor necessrio, proporcionar significativos benefcios para a indstria e para o consumidor, a partir da disponibilizao de produtos com a qualidade necessria para garantir a sua segurana e eficcia.

4.1.1. Desenvolvimento A grande preocupao com a segurana dos produtos cosmticos decorre principalmente do fato desses produtos serem considerados de venda livre, ou seja, o consumidor pode adquirilos quando desejar, de acordo com suas preferncias pessoais, sem a interferncia de um profissional da sade, devendo-se considerar tambm o crescente consumo mundial desses produtos. O Sistema de Cosmetovigilncia de Produtos de Higiene Pessoal, Cosmticos e Perfumes, visam facilitar a comunicao, por parte do usurio, sobre problemas decorrentes do uso, defeitos de qualidade ou efeitos indesejveis e o acesso do consumidor. Se do resultado da avaliao dos relatos forem identificadas situaes que impliquem em risco para a sade do usurio, as empresas fabricantes e/ou importadoras dos Produtos de Higiene Pessoal, Cosmticos e Perfumes instalados no territrio nacional devero notificar ANVISA e aos Estados Partes do MERCOSUL envolvidos. (CRQ IV, 2008).

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O Cdigo de Defesa do consumidor, Lei n 8.078/90, objetiva atender s necessidades dos consumidores, respeitar a dignidade, sade e segurana, proteger seus interesses econmicos, melhorar a qualidade de vida, assim como manter a transparncia e harmonia nas relaes de consumo. (CRQ IV, 2008). O princpio bsico do Cdigo de Defesa do Consumidor est relacionado com a vulnerabilidade, j que este no possui conhecimento tcnico do produto. Por isso a importncia de estabelecer critrios e normas, para assegurar um controle, resultando em qualidade e segurana. Outro ponto importante do Cdigo assegurar como fornecedora responsabilidade caso necessrio medidas cabveis de reparo ao dano, e preveno para que o fato se repita. (CRQ IV, 2008). A portaria n 348, de 18/08/97, do ministrio da sade, determina que as empresas de Produtos de Higiene Pessoal, Cosmticos e Perfumes cumpram as diretrizes estabelecidas no regulamento Tcnico Manual de Boas Prticas de Fabricao. (CRQ IV, 2008). Na fase de desenvolvimento do projeto arquitetnico, o futuro empresrio deve estar atento s especificaes exigidas pela Portaria n. 348, de 18 de agosto de 1997/SVS/MS, que determina a todos os estabelecimentos produtores de Produtos de Higiene Pessoal, Cosmticos e Perfumes, o cumprimento das Diretrizes estabelecidas no Regulamento Tcnico - Manual de Boas Prticas de Fabricao para Produtos de Higiene Pessoal, Cosmticos e Perfumes. (CRQ IV, 2008). A Portaria 348/SVS/MS um guia para fabricao de Produtos de Higiene Pessoal, Cosmticos e Perfumes no sentido de organizar e seguir a produo dos mesmos de forma segura para que os fatores humanos, tcnicos e administrativos que influem sobre a qualidade dos produtos sejam efetivamente controlados. Principais pontos a serem observados na implantao da indstria de cosmticos:

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Lay out o projeto arquitetnico deve prever a correta disposio de todos os setores e laboratrios de forma a obedecer a um fluxo lgico de produo, evitando o contra-fluxo de insumos e produtos acabados e o risco de ocorrncia de contaminao cruzada. (CRQ IV, 2008). Equipamentos devem ser adequados ao volume e ao tipo de produto que se pretende fabricar, e estar em boas condies de operao. O equipamento de produo de gua deve garantir a sua pureza, para assegurar a conformidade do produto acabado com os requisitos especificados. Pessoal - o pessoal a ser contratado deve ter conhecimentos, experincia e competncia adequada ao seu posto e receber treinamentos contnuos. Matrias-primas devem ser adquiridas de fornecedores qualificados e serem acompanhadas dos respectivos Certificados de Anlises que atestem sua qualidade. Limpeza e sanitizao as instalaes devem ser projetadas de forma a manter os ambientes, equipamentos, mquinas e instrumentos, assim como matrias-primas, componentes, granis e produtos acabados, em boas condies de higiene. O projeto arquitetnico dever ser submetido anlise prvia pela autoridade sanitria local ou estadual e as obras de construo da indstria somente devero ser iniciadas aps a sua aprovao. (BARBOSA 2006). O sistema de Cosmetovigilncia foi implantado para garantir a qualidade final dos produtos cosmticos, tendo em vista, principalmente a segurana, eficcia, e informao ANVISA, ao fabricante e ao consumidor. Esse sistema poder proporcionar inmeros benefcios ao setor de cosmticos como um todo. Os benefcios sero decorrentes da implantao de um canal especfico para o registro dos eventos adversos e queixas tcnicas sobre produtos de higiene pessoal, cosmticos e perfumes,

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e principalmente pelo banco de dados que poder ser gerado a partir de tal procedimento. Essas informaes, anteriormente, se perdiam pela inexistncia de um sistema prprio para o seu registro. Contudo, esse novo instrumento precisa alcanar e ser incorporado pelo setor industrial, pelos profissionais de sade e tambm pelo consumidor. Do total de 5064 notificaes sobre todos os produtos sujeitos vigilncia sanitria, efetuados no perodo de dezembro de 2006 a agosto de 2007, 16 notificaes referem-se a eventos adversos ou queixas tcnicas decorrentes de produtos cosmticos (ANVISA, 2007). O curto perodo de tempo de implantao do sistema de cosmetovigilncia e o nmero de notificaes efetuadas, ainda no so significativos para permitir uma avaliao segura do quadro geral a respeito da qualidade dos produtos de higiene pessoal, cosmticos e perfumes no Brasil.

4.1.1.1. Servio de Atendimento ao Consumidor um canal de comunicao entre o consumidor e a empresa, sendo a principal fonte de informaes para a prtica de Cosmetovigilncia. Tambm utilizado por profissionais distribuidores ou qualquer outra pessoa envolvida com produto.

4.1.1.2. Coleta de dados e Reclamaes A coleta de dados deve ser feita de modo criterioso, para no levar a uma interpretao errada das informaes transmitidas pelo consumidor. Recomenda se que seja elaborado um formulrio do SAC ( anexo). importante obter se o nmero do lote do produto reclamado de iemdiato, para que a empresa possa tomar as providencias de verificao.

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Sempre que possvel, a empresa deve solicitar ao reclamante o envio do produto que gerou a queixa, para realizao de testes de comparao, ou mesmo para troca ou reembolso. O problema, detectado pode referir se a vrias causas.

4.1.2. Alvar Sanitrio Aps o trmino das obras, contratao de colaboradores e instalao dos equipamentos, o empresrio dever solicitar uma vistoria pela autoridade sanitria local ou estadual para verificao do atendimento s normas de Boas Prticas de Fabricao. A vistoria ser realizada por fiscais da Vigilncia Sanitria local e/ou estadual de acordo com o Anexo II - Regulamento Tcnico - Roteiro de Inspeo para Indstria de Produtos de Higiene Pessoal, Cosmticos e Perfumes, constante da Portaria 348/SVS/MS. Durante esta vistoria, o Responsvel Tcnico dever apresentar o Manual de Boas Prticas de Fabricao da empresa e os Procedimentos Operacionais Padro (POPs) para a fabricao e controle de qualidade dos seus produtos. Estando todos os itens atendidos, a Secretaria Vigilncia Sanitria local emitir o Alvar Sanitrio da empresa. ( BARBOSA 2006).

4.1.3. Autorizao de Funcionamento de Empresas A Autorizao de Funcionamento de Empresas AFE um ato privativo do rgo competente do Ministrio da Sade (Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria ANVISA), incumbido da vigilncia sanitria dos produtos de que trata o Decreto n. 79.094/77, contendo permisso para que as empresas exeram as atividades sob regime de Vigilncia Sanitria, mediante comprovao de requisitos tcnicos e administrativos especficos. (CRQ IV, 2008). Para requerer a AFE, a empresa que pretende exercer atividades de extrair, produzir, fabricar, transformar, sintetizar, embalar, reembalar, importar, exportar, armazenar, expedir, distribuir, constantes da Lei n. 6.360/76, Decreto n. 79.094/77 e Lei n. 9.782/99, Decreto n.

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3.029/99, correlacionadas a Produtos de Higiene, Cosmticos e Perfumes, dever apresentar ANVISA a seguinte documentao: Formulrio de Petio de Autorizao adotado pela ANVISA/MS; Guia de Recolhimento da Taxa ANVISA/MS; Procurao de representante legal se for o caso; Cpia do Contrato Social registrado na Junta Comercial; Cpia do documento de Inscrio no Cadastro Geral de Contribuintes/CGC ou Cadastro Nacional de Pessoa Jurdica /CNPJ; Declarao de vinculao de tcnicos emitida pelo Conselho Regional de Classe, indicando o nome do responsvel tcnico; Fichas de Autgrafos do representante legal e do responsvel tcnico; Relatrio tcnico de aparelhagem, maquinrios e equipamentos que a empresa dispe para as atividades pleiteadas dando suas especificaes; Relatrio tcnico contendo descrio da aparelhagem de controle de qualidade ou cpia de contrato firmado com instituio, entidade pblica ou privada, respeitada a natureza do servio prestado; Relatrio das instalaes que a empresa dispe; Lista sucinta da natureza e espcie dos produtos (com a forma fsica de apresentao); Lista contendo os endereos (rua, n, CEP, telefones, FAX) de todas as filiais, depsitos distribuidoras e representantes; Relatrio de Inspeo com parecer tcnico conclusivo, expedido pela Vigilncia Sanitria (ANVISA) local. A documentao ser analisada pela ANVISA e, estando de acordo, a Autorizao de Funcionamento de Empresa - AFE ser publicada no Dirio Oficial da Unio. (BARBOSA 2006). 4.1.4. Registro de cosmticos junto a ANVISA

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A Resoluo da Diretoria Colegiada - RDC N. 211, de 14 de julho de 2005, da ANVISA estabelecem a definio e a classificao de Produtos de Higiene Pessoal, Cosmticos e Perfumes, os requisitos tcnicos especficos e os requisitos para a rotulagem obrigatria geral e especfica para Produtos de Higiene Pessoal, Cosmticos e Perfumes: DEFINIO: Produtos de Higiene Pessoal, Cosmticos e Perfumes, so preparaes constitudas por substncias naturais ou sintticas, de uso externo nas diversas partes do corpo humano, pele, sistema capilar, unhas, lbios, rgos genitais externos, dentes e membranas mucosas da cavidade oral, com o objetivo exclusivo ou principal de limp-los, perfum-los, alterar sua aparncia e ou corrigir odores corporais e ou proteg-los ou mant-los em bom estado. (CRQ IV, 2008) CLASSIFICAO: os critrios para a classificao dos Produtos de Higiene Pessoal, Cosmticos e Perfumes foram definidos em funo da probabilidade de ocorrncia de efeitos no desejados devido ao uso inadequado do produto, sua formulao, finalidade de uso, reas do corpo a que se destinam e cuidados a serem observados quando de sua utilizao. (CRQ IV, 2008) CLASSIFICAO DOS PRODUTOS GRAU 1: so produtos de higiene pessoal cosmticos e perfumes cuja formulao cumpre com a definio adotada no item 1 do Anexo I da Resoluo RDC N. 211/2005 e que se caracterizam por possurem propriedades bsicas ou elementares, cuja comprovao no seja inicialmente necessria e no requeiram informaes detalhadas quanto ao seu modo de usar e suas restries de uso, devido s caractersticas intrnsecas do produto. (CRQ IV, 2008). Para iniciar a fabricao de produtos de grau 1, a empresa deve atender Resoluo da Diretoria Colegiada - RDC N. 343, de 13 de dezembro de 2005 que instituiu novo procedimento totalmente eletrnico para a Notificao de Produtos de Higiene Pessoal, Cosmticos e Perfumes de Grau 1, em substituio ao disposto na Resoluo N. 335, de 22 de julho de 1999. As Notificaes passam a ser realizadas e

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protocoladas exclusivamente na forma eletrnica atravs do Sistema de Atendimento e Arrecadao Eletrnicos do stio eletrnico da ANVISA (www.anvisa.gov.br). A publicao da Notificao fica assegurada por meio de divulgao em pgina eletrnica da internet, no stio eletrnico da ANVISA e se dar automaticamente ao final do procedimento de PROTOCOLO ON-LINE que uma das etapas do Peticionamento Eletrnico. (CRQ IV, 2008).
CLASSIFICAO DOS PRODUTOS GRAU 2: so produtos de higiene pessoal,

cosmticos e perfumes cuja formulao cumpre com a definio adotada no item 1 do Anexo I da Resoluo RDC N. 211/2005 e que possuem indicaes especficas, cujas caractersticas exigem comprovao de segurana e/ou eficcia, bem como informaes e cuidados, modo e restries de uso. (CRQ IV, 2008). A fabricao e comercializao de produtos de grau 2 pela empresa ser liberada pela ANVISA aps a publicao do deferimento dos registros no Dirio Oficial da Unio. Para requerer este registro, a empresa dever elaborar o peticionamento eletrnico disponvel no Sistema de Atendimento e Arrecadao on line (peticionamento eletrnico) da ANVISA. (BARBOSA 2006).

4.1.5.

Normas para rotulagem A Resoluo RDC N. 211/2005 tambm estabelece as informaes indispensveis que

devem figurar nos rtulos dos Produtos de Higiene Pessoal, Cosmticos e Perfumes, concernentes a sua utilizao, assim como toda a indicao necessria referente ao produto. (BARBOSA 2006).

4.1.5.1. Embalagem Nome do produto e grupo/tipo a que pertence no caso de no estar implcito no nome.

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Marca Primria e Secundria Nmero de registro do produto Secundrio Lote ou Partida Primria Prazo de Validade Secundria Contedo Secundrio Pas de origem Secundria Fabricante/Importador/Titular Secundria Domiclio do Fabricante/Importador/Titular Secundria Modo de Uso (se for o caso) Primrio ou Secundrio Advertncias e Restries de uso (se for o caso) Primrio e Secundrio Rotulagem Especfica (1) Primria e Secundria Ingredientes/Composio Secundria A adoo da Nomenclatura Internacional de Ingredientes Cosmticos (INCI) nos rtulos dos produtos, instituda pela Resoluo RDC N. 211/2005, assim, as empresas no precisam mais adequar as embalagens ao idioma de cada pas, uma vez que a nomenclatura permite rastrear informaes de forma simples e precisa. O International Nomenclature of Cosmetic Ingredient - INCI um sistema internacional de codificao da nomenclatura de ingredientes cosmticos, reconhecido e adotado mundialmente, criado com a finalidade de padronizar os ingredientes na rotulagem dos produtos cosmticos (CRQ IV, 2008). Visto que existem mais de 12 mil ingredientes utilizados em produtos cosmticos e uns muitos possuem, alm da denominao qumica, mais de um nome comercial, o INCI permite designar de forma nica e simplificada a composio dos ingredientes no rtulo dos produtos cosmticos. Dessa forma, o objetivo do uso da nomenclatura INCI facilitar a identificao de

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qualquer ingrediente, proveniente de qualquer pas, por ser uma codificao universal, com um sistema para todos os pases sem distino de idioma, caracteres, nem de alfabeto. (BARBOSA 2006).

4.2. TERMO DE RESPONSABILIDADE

4.2.1.

Consideraes Gerais na Avaliao de Segurana de Produtos Cosmticos de inteira responsabilidade do fabricante, do importador ou do responsvel pela

colocao do produto no mercado, garantir sua segurana para os consumidores nas condies normais ou razoavelmente previsveis de uso. (ANVISA, 2003). Cabe empresa a responsabilidade de avaliar a estabilidade e segurana de seus produtos, antes de disponibiliz-los ao consumo, requisito fundamental qualidade dos mesmos. (CRQ IV, 2008). Produtos expostos ao consumo e que apresentem problemas de estabilidade organolptica, fsico-qumica e/ou microbiolgica, alm de descumprirem os requisitos tcnicos de qualidade podem, ainda, colocar em risco a sade do consumidor, configurando infrao sanitria. A apresentao dos dados de estabilidade e de segurana, exigida no ato da regularizao do produto ou pela autoridade sanitria quando das inspees, est estabelecida na legislao vigente. Alm disso, deve ser cumprido o estabelecido no Termo de Responsabilidade firmado pela empresa, por meio do qual declara possuir dados que atestam a eficcia e a segurana do seu produto. (CRQ IV, 2008). O responsvel por um produto cosmtico deve empregar recursos tcnicos e cientficos suficientemente capazes de reduzir possveis danos aos usurios, ou seja:
Formulando o produto com ingredientes referenciados, ingredientes constantes em

Compndios e Legislao, que sejam os mais seguros possveis;

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Deixando uma margem de segurana entre o nvel de risco e o nvel de uso do produto; Informando o consumidor, da maneira mais clara possvel, a fim de evitar mau uso do produto;
Seguindo as Boas Prticas de Fabricao e Controle, Normas que estabelecem

padronizao, procedimentos, mtodos de controle de qualidade e mtodos de fabricao. Em razo da grande complexidade que envolve parmetros relacionados s avaliaes de risco, algumas consideraes se tornam necessrias para um maior entendimento do assunto. Os ingredientes para uso em produtos cosmticos devem ser avaliados em termos de risco e no de dano, conseqentemente a avaliao do risco deve relacionar o dano com o nvel de exposio; A avaliao de segurana deve atender o conhecimento dos parmetros toxicolgicos de interesse dos ingredientes com base em dados correntes, observadas as condies de uso do produto cosmtico e o perfil do consumidor alvo; A avaliao de segurana de um produto cosmtico, certamente, exige o pleno conhecimento nas reas de farmacotcnica, toxicologia, farmacocintica, fases clnica, regulatria, entre outras. (ANVISA, 2003).

4.2.1.1. Estabilidade Pelo perfil de estabilidade de um produto possvel avaliar seu desempenho, segurana e eficcia, alm de sua aceitao pelo consumidor. O estudo da estabilidade de produtos cosmticos fornece informaes que indicam o grau de estabilidade relativa de um produto nas variadas condies a que possa estar sujeito desde sua fabricao at o trmino de sua validade. (CRQ IV, 2008). O estudo da estabilidade de produtos cosmticos contribui para:

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Orientar o desenvolvimento da formulao e do material de acondicionamento adequado; Fornecer subsdios para o aperfeioamento das formulaes; Estimar o prazo de validade e fornecer informaes para a sua confirmao; Auxiliar no monitoramento da estabilidade organolptica, fsico-qumica e microbiolgica, produzindo informaes sobre a confiabilidade e segurana dos produtos. Cada componente, ativo ou no, pode afetar a estabilidade de um produto. Variveis relacionadas formulao, ao processo de fabricao, ao material de acondicionamento e s condies ambientais e de transporte podem influenciar na estabilidade do produto. (CRQ IV, 2008). Conforme a origem, as alteraes podem ser classificadas como extrnsecas, quando determinadas por fatores externos; ou intrnsecas, quando determinadas por fatores inerentes formulao. (CRQ IV, 2008). Fatores extrnsecos: referem-se a fatores externos aos quais o produto est exposto, tais como: Tempo Temperatura Luz e Oxignio Umidade Material de Acondicionamento Microrganismos Vibrao Fatores intrnsecos: so relacionados prpria natureza das formulaes e, sobretudo, interao de seus ingredientes entre si e ou com o material de acondicionamento. Resultam em

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incompatibilidades de natureza fsica ou qumica que podem, ou no, ser visualizadas pelo consumidor. Incompatibilidade fsica: ocorrem alteraes, no aspecto fsico da formulao observado por: precipitao, separao de fases, cristalizao, formao de gretas, entre outras. Incompatibilidades qumicas: pH, reaes de xido-reduo, reaes de hidrlise, interao entre ingredientes da formulao, interao entre ingredientes da formulao e o material de acondicionamento. (CRQ IV, 2008).

4.2.1.2. Segurana Uma vez que o produto cosmtico de livre acesso ao consumidor, o mesmo deve ser seguro nas condies normais ou razoavelmente previsveis de uso. A avaliao da segurana deve preceder a colocao do produto cosmtico no mercado. (CRQ IV, 2008). Considerando que a ausncia de risco no existe e dadas s dificuldades para estabelecer conceitos relativos a uma condio razoavelmente previsvel de uso, o fabricante de cosmticos deve empregar recursos tcnicos e cientficos suficientemente capazes de reduzir possveis danos aos usurios, ou seja:
Formular o produto com ingredientes referenciados que sejam os mais seguros

possveis; Deixar uma margem de segurana entre o nvel de risco e o nvel de uso do produto; Informar o consumidor, da maneira mais clara possvel, a fim de evitar mau uso do produto; Seguir as Boas Prticas de Fabricao e Controle. A avaliao de segurana de um produto cosmtico pressupe uma abordagem caso a caso, observando-se, preliminarmente, todas as informaes disponveis que contribuam para o

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conhecimento do risco potencial, em condies normais ou razoavelmente previsveis de uso. Devem-se considerar tambm os seguintes parmetros: Condies de uso: Categoria de produto e finalidade de uso; Modo de aplicao; Quantidade de produto por aplicao; Freqncia de uso; Tempo de contato; rea e superfcie de aplicao; Consumidor alvo; Advertncias e restries de uso.
Composio do produto: Frmula qualitativa; Concentrao dos ingredientes; Dados

toxicolgicos sobre ingredientes desconhecidos, de uso restrito ou regulamentados; Existncia de restries ou regulamentaes especficas para algum ingrediente; Possveis interaes entre ingredientes; Nvel de exposio (capacidade de absoro); Margem de segurana para os ingredientes mais crticos. Histrico e conhecimento do produto: Dados disponveis sobre o prprio produto e/ou sobre produtos semelhantes; Dados experimentais existentes sobre o prprio produto e/ou sobre produtos semelhantes, em relao avaliao de risco; Literaturas especializadas, rgos regulatrios, entidades do setor privado e entidades afins, de reconhecido valor cientficos. Os riscos a serem avaliados para ingredientes e produtos cosmticos so do tipo irritativo, alergnico e sistmico, este ltimo, essencialmente por meio de sua absoro oral ou permeao. Para as avaliaes de risco, animais de laboratrio devero ser utilizados sempre que no existam mtodos alternativos validados que os substituam ou, em casos especficos, aps screening com mtodos in vitro e/ou matemticos vlidos, precedendo dessa forma, os estudos clnicos. (CRQ IV, 2008). Produtos cosmticos necessitam de ensaios clnicos em humanos para que possam oferecer aos consumidores o mximo de segurana com o menor risco, garantindo as melhores condies de uso do produto. A partir das informaes pr-clnicas coletadas, deve haver a comprovao de segurana de uso por humanos. A avaliao do produto cosmtico em humanos no ocorre no sentido de investigar o potencial de risco, mas e confirmar a segurana

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do produto acabado. Assim, os produtos cosmticos sob avaliao devem seguir, quando aplicvel, as recomendaes das Boas Prticas Clnicas (BPC) e adotar algumas medidas bsicas como: Dados pr-clnicos consistentes que garantam a segurana nas avaliaes clnicas; Termo de consentimento pr-informado; Infra-estrutura de atendimento mdico para o caso de intercorrncia; Cuidados na construo de delineamentos de amostras sob metodologia cientfica. O Conselho Nacional de Sade regulamentou as pesquisas envolvendo seres humanos pela Resoluo 196/96 e constituiu a Comisso Nacional de tica em Pesquisa CONEP, responsvel, entre outros, pelo registro dos Comits de tica em Pesquisas Institucionais. Todos os projetos de pesquisa envolvendo seres humanos devem obedecer s recomendaes dessa Resoluo. A realizao das avaliaes de segurana deve considerar as caractersticas de uso de cada produto cosmtico (por exemplo, a eficcia da proteo solar para protetores solares) e so constitudas basicamente pelos seguintes testes: Ensaios pr-clnicos: Teste de Comedogenicidade; Teste de irritao drmica primria e cumulativa; Irritao Ocular Primria; Sensibilizao Drmica; Determinao da DL50 oral; Irritao da mucosa oral; Fotoalergenicidade; Fototoxicidade; Irritao da mucosa genital; Carcinogenicidade; Teratogenicidade Ensaios de Compatibilidade: Irritao Cutnea Primria e Acumulada; Fotoirritao; Soap Chamber Test (avaliao de produtos enxaguveis); Comedogenicidade; Sensibilizao Drmica; Fotossensibilizao: Ensaios de Aceitabilidade: Ensaios de Acnegenicidade e Comedogenicidade em uso

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Para oferecer ao consumidor maior garantia em relao segurana de seus cosmticos, o fabricante pode optar por inserir na rotulagem certos atributos especiais. Para tal, dever proceder a avaliaes especficas condizentes com o especificado. (CRQ IV, 2008).

4.2.2. Noo de risco cosmtico H uma diversidade no risco do produto cosmtico, devendo avaliar por diferentes abordagens, entre elas: Condies de uso: Aplicao regular e prolongada, como por exemplo, os produtos para cuidados pessoais (desodorantes, condicionadores, cremes de tratamento, etc); Aplicao ocasional, geralmente os produtos com funo especfica, utilizados em determinado perodo, (tintura capilar, depilatrio, esfoliantes, etc); Aplicao regular, durante um tempo limitado, de acordo com a freqncia de uso, como no caso dos produtos enxaguava. rea de contato: Aplicao em reas especficas e limitadas da pele, por exemplo perfumes, esmaltes, e outros; Aplicao extensa sobre a pele, como os produtos para cuidado de rosto e corpo; Aplicao sobre mucosas (lbios, cavidade bucal, orgos genitais externos), como por exemplo, batom, dentifrcios, sabonetes ntimos, etc; Aplicao na rea dos olhos (sombras, delineadores, cremes); Aplicao no cabelo, com ou sem enxge (xampus, condicionadores, tinturas capilares, etc). Deve-se tambm contemplar aqui o caso dos produtos que, devido as condies de uso ou a sua forma cosmtica, podem ser parcialmente inalados ou ingeridos, como por exemplo aerossis e produtos para higiene bucal. (ANVISA,2003). Por anos tem se buscado mtodos apropriados para a avaliao dos produtos cosmticos e suas matrias primas com relao aos riscos que estes podem representar sade humana. A preocupao pertinente, pois alm de pertencerem a um mercado notoriamente crescente em todo o mundo, algumas substancias contidas em suas formulaes podem causar irritaes na

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pele, mucosas e olhos, efeitos adversos que vo de alergias leves a queimaduras graves, queda de cabelo, ou mesmo asma. Deste modo, pode ser observar trs tipos principais de reao (ANVISA). Irritao , que a intolerncia local, corresponde reaes de desconforto menores, mas tambm a reaes mais ou menos agudas, variando sua intensidade desde ardor, coceira e pinicao, podendo chegar at a corroso e destruio do tecido. Todas as reaes se restringem rea em contato direto com o produto.( COSTA, 2006; ANVISA 2003).

Sensibilizao, que corresponde a um processo alrgico, podendo ser de efeito

imediato (de contato ou, urticria) ou tardio ( hipersensibilidade). Envolvendo mecanismos imunolgicos e pode aparecer em outra rea, diferente da rea de aplicao. Portanto importante insistir que no campo da imunologia deve se, no apenas verificar se um podeuto pode desencadear uam resposta alrgica em pessoas prsensibilizadas, mas tambm verificar se o prprio produto no capaza de induzir uma reao alrgica ao consumidor; ( COSTA 2003, ANVISA 2006). Efeito sistmico, resultante da passagem de quaisquer ingredientes do produto para circulao geral, diretamente por via oral, inalatria, transcutnea ou transmucosa, metabolizados ou no. V se aqui a necessidade de avaliar o risco dos ingredientes que constituem a frmula.( COSTA, 2006; ANVISA, 2003)

4.2.3. Critrios a serem observados na avaliao de segurana Conforme mencionado, a avaliao de segurana de um produto cosmtico pressupe uma abordagem caso a caso, observando-se, preliminarmente, todas as informaes disponveis que contribuam para o conhecimento do risco potencial, em condies normais ou razoavelmente previsveis de uso. Deve-se considerar tambm os seguintes parmetros:

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Condies de uso: Categoria de produto e finalidade de uso; Modo de aplicao; Quantidade de produto por aplicao; Freqncia de uso; Tempo de contato; rea e superfcie de aplicao; Consumidor alvo; Advertncias e restries de uso.

Composio do produto: Frmula qualitativa; Concentrao dos ingredientes; Dados

toxicolgicos sobre ingredientes desconhecidos, de uso restrito ou Regulamentados, Ingredientes que apresentam restries ( limitaes de concentrao e/ou campo de aplicao) previstas na legislao vigente; Existncia de restries ou regulamentaes especficas para algum ingrediente; Possveis interaes entre ingredientes; Nvel de exposio (capacidade de absoro); Margem de segurana para os ingredientes mais crticos. Histrico e conhecimento do produto: Dados disponveis sobre o prprio produto e/ou sobre produtos semelhantes; Dados experimentais existentes sobre o prprio produto e/ou sobre produtos semelhantes, em relao avaliao de risco; Literaturas especializadas, rgos regulatrios, entidades do setor privado e entidades afins, de reconhecido valor cientficos. Deve-se atentar, ainda, aos dados que foram resultantes de pesquisas ou experimentaes especficas necessrias, para obter ou completar as informaes. ( ANVISA, 2003). De maneira geral, deve-se considerar que: Na grande maioria dos casos, o risco sistmico avaliado a partir dos dados relativos s matrias primas. No se conhece efeitos toxicolgicos sistmicos em produtos acabados que no sejam causados pelos prprios ingredientes. Portanto, importante prever este tipo de risco para os produtos que eventualmente possam ser ingeridos ou inalados, ou aqueles destinados a uma populao em particular (crianas, gestantes, etc.); Ao contrrio, as reaes de irritao, decorrentes da penetrao cutnea ou de mucosa dos ingredientes, esto relacionadas s concentraes de uso no produto final e sua formulao cosmtica;

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Entre estas duas situaes extremas, o risco de alergia pode decorrer tanto em funo dos ingredientes quanto do produto final. Na realidade, a reao basicamente atribuda a algum ingrediente cuja reatividade pode ser desencadeada ou potencializada pela frmula do produto acabado. (ANVISA, 2003). Assim, com base nas informaes obtidas, pode-se chegar a alguma das seguintes concluses: Os dados so suficientemente claros para assegurar o uso do produto cosmtico avaliado por parte dos consumidores, respeitadas as condies normais ou razoavelmente previsveis de uso; Os dados disponveis permitem a comercializao do produto em condies restritas de uso, claramente expressas na rotulagem; Os dados no so suficientes para atestar a segurana do produto e necessita-se empreender novas pesquisas ou testes adicionais para avaliar a ausncia de risco para os consumidores alvo; Os dados so suficientes para desaconselhar a comercializao do produto. Para qualquer uma das premissas acima referidas, o relatrio final deve ser apresentado de forma clara, objetivo, devidamente documentado e conclusivo, devendo o mesmo ser preparado por profissional habilitado, ficando, no entanto, passvel das sanes previstas, o responsvel tcnico e responsvel legal. (ANVISA, 2003).

4.2.4. Sugesto para avaliao de segurana de produtos acabado 4.2.4.1. Avaliao do potencial irritante 4.2.4.1.1. Produto com risco desconhecido

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Triagem com mtodos in vitro ou, in vivo em animais, seguido de teste clnico.

4.2.4.1.2.

Produto com ausncia presumida de risco Teste clnico. (ANVISA, 2003).

4.2.4.2. Avaliao do potencial alergnico 4.2.4.2.1. Nvel de absoro dos ingredientes desconhecido
Teste in vivo, em animais.

4.2.4.2.2. Produto com ausncia presumida de risco Teste clnico Presume-se ento que as avaliaes sugeridas sejam aplicadas caso a caso, no que couber. (ANVISA, 2003).

4.2.5. Metodologias 4.2.5.1. Ensaios pr-clnicos Devido evoluo tcnico-cientfica, na dcada de 80 iniciou-se o desenvolvimento de modelos experimentais alternativos para a rea cosmtica, em substituio ao uso de animais de laboratrio. Metodologias foram desenvolvidas, inicialmente, para responder corretamente as necessidades de pesquisa em farmacologia, onde se sabe que o comportamento animal pode ser diferente do humano. Os mtodos alternativos tambm foram contemplados para a avaliao de efeitos toxicolgicos. (ANVISA, 2003). Alguns destes mtodos vm sendo utilizados desde tempos remotos, em particular na rea da mutagenicidade onde numerosos testes foram desenvolvidos, validados e integrados nas

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diretivas internacionais tais como a OCDE (Organizao para Cooperao e Desenvolvimento Econmico). Tambm foram utilizados com sucesso para a demonstrao de mecanismo de ao especfico, sugerindo serem teis e preditivos no que se refere a sistemas biolgicos simples, como por exemplo, nos estudos feitos em microorganismos, clulas, tecidos e/ou rgos de animais ou humanos. (ANVISA, 2003). A dificuldade no emprego de tais mtodos alternativos, hoje, reside na avaliao da reatividade de sistemas mais complexos o que , na prtica, o caso da avaliao de risco toxicolgico. necessrio o acesso a uma bateria de testes que sejam complementares, de maneira que o conjunto destes oferea um resultado com os mesmos nveis cientficos e de informao, em relao aos obtidos, anteriormente, com os modelos em animais. Tais modelos alternativos devem ser, portanto, validados, de acordo com os procedimentos internacionais na rea de aplicao para que sejam reconhecidos pelo meio cientfico e pelos rgos regulamentadores. (ANVISA, 2003). Vrios esforos tm sido efetuados para a diminuio do uso e do sofrimento de animais. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.1.

Os 3 Rs

A idia de ensaios alternativos muito mais abrangente do que a substituio do uso de animais, incluindo tambm a questo da reduo e refinamento na utilizao dos mesmos. Este princpio est baseado no conceito dos 3Rs, o qual foi definido por William Russell e Rex Burch, em 1959, no livro Principles of Human ExperimentalTechnique. Os 3Rs representam o refinamento, reduo e substituio (Refine, Reduction e Replacement) tm como estratgia, uma pesquisa racional minimizando o uso de animais e o seu sofrimento, sem

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comprometer a qualidade do trabalho cientfico que est sendo executado visualizando, futuramente, a total substituio de animais por modelos experimentais alternativos. (ANVISA, 2003)

4.2.5.1.1.1. Refinamento O Termo refinamento significa a modificao de algum procedimento operacional com animais, objetivando minimizar a diminuio da dor e o estresse. A experincia da dor e do estresse tem, como resultado, mudanas psicolgicas que aumentam a variabilidade experimental dos resultados. O interesse dos cientistas assegurar que as condies ambientais para os animais sejam as melhores possveis. Os testes considerados menos invasivos podem ser utilizados para diminuir a angstia causada durante o estudo. Alm disto, importante que toda a equipe envolvida seja bem treinada e competente no que se refere a correta atitude em relao aos animais. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.1.2. Reduo A concepo de reduo como alternativa estratgica, resulta em menor nmero de animais sendo utilizados para obter a mesma informao, ou maximizao da informao obtida por animal. Existem vrias possibilidades para reduo do uso de animais. Alguns laboratrios alertam todos os pesquisadores quando as pesquisas levam o animal a morte. Assim, dado preferncia para pesquisas que utilizem os vrios rgos de um mesmo animal, associadas aos dados apropriados e princpios estatsticos. Em outros casos, pode-se executar um estudo piloto indicando se o procedimento ser apropriado para um estudo maior. Para tanto possvel a utilizao de estudos preliminares in

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vitro, os quais podem indicar novos caminhos, utilizando tcnicas no invasivas. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.1.3. Substituio Um sistema experimental que esteja vinculado totalidade da condio de vida animal, pode ser considerado como substituto alternativo. Pode-se citar a proposta de obteno de clulas, tecidos ou organismos para subseqentes estudos in vitro ao invs da matana de animais. Portanto, verifica-se que alguns mtodos alternativos, podem ser utilizados na total substituio em estudos animais e outros, podem complementar dados, auxiliando na reduo de utilizao de animais empregados em todo projeto. O maior mpeto de desenvolvimento para testes alternativos tem sido determinado pela indstria farmacutica. Este investimento tem conduzido para o desenvolvimento adequado da triagem dos componentes para avaliao de potencial toxicolgico e eficcia. A utilizao da informtica, as informaes sobre matrias-primas, tcnicas fsico-qumicas, cultura de clulas, tecidos e rgos, contribuem para um banco de informaes, evitando a duplicao desnecessria de trabalho com animais. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.2.

Problemas referentes ao produto

Os produtos podem causar problemas: no danosos sade, relacionado m perfomance, ou baixa qualidade; ou danosos sade, manifestados por efeitos adversos e indesejveis. (CRQ IV, 2008). Problemas do tipo danosos a sade podem ter origem:

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Uso inadequado ou indevido do produto, entre eles, incompreenso do rtulo. Produto em si, matrias primas, formulaes, estabilidade, entre outros. Recall: um processo de retirada do mercado dos produtos no conformes ou que tenham demonstrado, durante sua comercializao e uso em larga escala, efeitos indesejveis ou que comprometam a sade do consumidor.

4.2.5.1.2.1.

Potenciais irritantes para a pele

Diversos ingredientes de uso cosmticos, dependendo do modo de uso, aplicao e concentrao na formulao, podem apresentar em certas pessoas, maior ou menor grau de irritao na pele. (CRQ IV, 2008). Desta forma necessrio controle na escolha de matrias primas e sua concentrao segura de uso. (CRQ IV, 2008). Muito importante o PH do produto, pois devem ser evitados valores extremos de alcalinidade ou acidez, devendo ajustar a formulao para que resulte PH compatvel ao PH da pele. (CRQ IV, 2008). Outro exemplo refere se ao uso de alguns agentes detergentes e solventes, que, dependendo de sua concentrao na formulao, podem remover a proteo oleosa da pele e couro cabeludo, causando excessivo ressecamento, rachaduras e descamaes. (CRQ IV, 2008).

4.2.5.1.2.2. Hipoalergnicos

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Estes produtos testados contra alergia, so produtos desenvolvidos e comercializados pelas empresas com a finalidade de minimizar a incidncia de reaes alrgicas. (CRQ IV, 2008). Todas as exigncias so controladas e normatizadas pela ANVISA, que baseou se nas legislaes pertinentes, e nas normas especiais de sua Cmara Tcnica de Cosmticos (CETAC Portaria n 485 de 07/07/04). As matrias primas necessitam no possuir nenhum tipo de impureza, pois tais so as maiores causas de irritaes em indivduos com sensibilidade. (CRQ IV, 2008). Os emulsionantes so historicamente relatados como possveis agentes irritantes da pele e possveis alergnicos. (CRQ IV, 2008). So encontradas nas literaturas especializadas a informao e a descrio de ingredientes cosmticos possivelmente alergnicos, mas elas so sempre contraditrias, de autor para autor. (CRQ IV, 2008). Muitos autores publicam relaes de ingredientes possivelmente sensibilizantes para produtos cosmticos. Entre eles os componentes das fragncias aparecem em maior nmero, razo pela qual os produtos cosmticos classificados como hipoalergnicos ou no alergnicos so desenvolvidos sem o uso dessas substncias. (CRQ IV, 2008). Abaixo relao de algumas matrias primas reportadas como possveis causadoras de reaes alrgicas: 1,2 benzisothiazoline 3 one Aldedo cinamico Blsamo peru Benzaldeido Cloridrxido de alumnio e compostos Etil cinamato

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Eugenol Formaldedo Geraniol Hidroquinona Imidazolinidylurea Lanolina umectante Linalol Metildibromoglutano leo de amndoa leo de bergamota leo de citronela leo de cravo leo de ylang ylang Parabenos e derivados Os ingredientes sob suspeita de alergenicidade podem ter seu potencial alergnico alterado para mais ou menos, o que depende muito da concentrao de uso e reao com os demais componentes da composio aromtica. (CRQ IV, 2008).

4.2.5.1.2.3. Pele Sensvel H vrias definies para este termo, referentes s reaes de irritao de pele ou reaes alrgicas observadas na populao. Alguns mtodos de avaliao so muitos subjetivos e os formuladores e tcnicos devem conhecer as matrias primas potencialmente causadoras de reaes adversas. (CRQ IV, 2008). Alguns tipos de reaes da pela que podero ser considerados:

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Dermatite de contato por irritao Dermatites de contato alrgicas Urticrias de contato Acnegencicos e comedogenicos. (CRQ IV, 2008).

4.2.5.1.2.4. Reaes Alrgicas A fragrncia apontada como o principal suspeito. Ocasionalmente em algumas formulaes impossvel evitar o uso destas substncias. Assim os formuladores devem ser criteriosos na escolha das matrias primas. (CRQ IV, 2008). As empresas tm a obrigao de conhecer seus produtos e definir prazos de validades, seus pontos fracos e deficincias. (CRQ IV, 2008).

4.2.5.1.3.

Critrios a serem avaliados

Os riscos a serem avaliados para ingredientes e produtos cosmticos so do tipo irritativo, alergnico e sistmico, este ltimo, essencialmente por meio de sua absoro oral ou permeao. (ANVISA, 2003). Vrios testes desenvolvidos foram aceitos e utilizados na avaliao do risco irritativo. Entretanto, nem todos esto validados at o presente momento, uma vez que os resultados obtidos foram divergentes entre os laboratrios. Baseando-se num banco de dados consistente qualquer pesquisador treinado pode, no entanto, interpretar os resultados obtidos para a comparao entre produtos da mesma categoria. Esses modelos citados, a seguir, s podem ser contemplados como modelos experimentais de triagem, ou seja, de carter preliminar. Avaliao do potencial de irritao ocular Atravs de um conjunto de mtodos in vitro (HET-CAM, BCOP, Citotoxicidade pela difuso em gel de agarose, Citotoxicidade pelo mtodo do Vermelho Neutro, Citotoxicidade pelo mtodo do MTT, RBC), agrupam-se informaes que

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oferecem subsdios para garantir a segurana do produto a nvel ocular. Como h mais de um mecanismo de irritao ocular apenas um ensaio in vitro no suficiente para uma completa avaliao. O ideal obtermos dados relacionados vascularizao (Het-Cam), opacidade / permeabilizao (BCOP) e citotoxicidade (MTT, RBC). (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.3.1. Avaliao do potencial de irritao cutnea A utilizao do teste de corrosividade com modelo de pele reconstituda j considerado uma metodologia validada. No entanto, este modelo mais utilizado em ensaios com ingredientes mas no atende s necessidades de avaliao de produtos acabados. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.3.2. Avaliao do potencial fototxico O teste de fototoxicidade, atravs da metodologia (3T3 NRU), definido como uma resposta txica clara depois da primeira exposio da clula com agentes qumicos, e posterior exposio irradiao. No que se refere avaliao do risco alergnico e fotoalergnico ainda no existem testes in vitro, dispondo-se apenas de um teste, que embora no seja considerado como metodologia in vitro, contribui na reduo do nmero de animais de laboratrio. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.4.Ensaios in vitro 4.2.5.1.4.1. HET-CAM (membrana corioalantide) O objetivo do ensaio avaliar semi-quantitativamente o potencial irritante de um produto (produtos solveis, emulses, gis e leos), sobre a Membrana Crio-Alantide de ovo embrionado de galinha, no dcimo dia de incubao. O ensaio baseado na observao dos

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efeitos irritantes (hiperemia, hemorragia e coagulao), aps 5 minutos da aplicao do produto, puro ou diludo, sobre a membrana crio-alantide. Obtm-se uma escala que considera os fenmenos observados. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.4.2. BCOP (Permeabilidade e opacidade de crnea bovina) O objetivo do ensaio avaliar quantitativamente o potencial irritante de um produto ou de uma substncia qumica aps aplicao sobre a crnea isolada de bezerro. O ensaio baseado na medida da opacidade e da permeabilidade da crnea de bezerro aps o contato com o produto teste. (ANVISA, 2003). Medida da opacificao crnea - realizada com o auxlio de um opacitmetro, aparelho que determina a diferena de transmisso do fluxo luminoso entre a crnea a ser avaliada, fixando um valor numrico de opacidade. (ANVISA, 2003). Medida da permeabilidade crnea - realizada conforme o tempo de contato, adicionando fluorescena e a densidade ptica medida em 490 nm. Obtm-se uma escala que considera os fenmenos observados. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.4.3. Citotoxicidade pelo mtodo MTT A citotoxicidade avaliada com a ajuda de um corante vital, MTT ou 3-(4,5 dimethyl thiazole-2yl)-2,5 diphenyl tetrazolium bromide. Os parmetros de avaliao observados so a porcentagem de morte celular e a IC50 (concentrao do produto que inibe 50% do crescimento celular). No aplicvel a produtos insolveis em gua. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.4.4. Citotoxicidade pela difuso em gel de agarose Indicado para emulses e gis com fase contnua aquosa. Aplicao dos mesmos superfcie de um gel de agarose em contato com clulas de tecido conjuntivo de camundongo da

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linhagem NCTC clone 929 (ATCC CCL1) onde, a citotoxicidade avaliada com a ajuda de um corante vital, o MTT ou Vermelho Neutro, observando- se o dimetro mdio do halo de lise celular revelado pela colorao. O halo reflete a citotoxicidade de um produto testado e a sua capacidade em se difundir no gel de agarose. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.4.5.

Citotoxicidade pela mtodo de vermelho neutro (NRU)

Utiliza-se uma cultura de clulas SIRC CCL 60 ou outras, adicionadas do corante vital vermelho neutro ou MTT. A captao do corante pelas clulas viveis quantificada por espectrofotometria, atravs de um leitor automtico de microplacas. Mtodo empregado para todo tipo de formulao, exceto aquelas que possuam propriedades fixadoras, como as formulaes alcolicas. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.4.6.

RBC - Red Blood Cell System

Este ensaio permite quantificar e avaliar os efeitos adversos dos tensoativos empregados em xampus, sabonetes lquidos e produtos de higiene sobre a membrana plasmtica das hemcias e a conseqente liberao da hemoglobina (hemlise) e ainda, o ndice de desnaturao da hemoglobina, avaliado atravs de sua forma oxidada, ambos quantificados por espectrofotometria. A relao entre a hemlise e oxidao da hemoglobina fornece um parmetro de caracterizao dos efeitos dessas substncias in vitro. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.4.7.

Teste de corrosividade

O teste de corrosividade consiste em aplicar o produto sobre uma unidade de epiderme humana reconstruda. A viabilidade celular avaliada pela medida da atividade mitocondrial, atravs do corante MTT que forma um precipitado azul (formazan) sobre as clulas viveis, quantificado por espectrofotometria. (ANVISA, 2003).

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4.2.5.1.4.8.

Teste de fototoxicidade

A base deste teste a comparao da citotoxicidade de um agente qumico testado com ou sem exposio adicional a doses no txicas de luz UVA. A citotoxicidade expressa na determinao da dose dependente que reduz o crescimento celular utilizando-se um corante vital, vermelho neutro. A concentrao de um agente qumico testado reflete a inibio da viabilidade celular em 50%, calculada usando-se um modelo adequado de curva que expressa a resposta da curva de concentrao. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.5.Ensaios em animais A experimentao animal tem servido, ao longo de muitos anos, como um meio de se determinar a eficcia e a segurana de diversas substncias e produtos, em diversas reas. (ANVISA, 2003). A princpio, qualquer animal pode servir experimentao, entretanto, tem-se procurado utilizar um modelo que apresente melhor resposta a um determinado estmulo, seja por sua maior sensibilidade, facilidade de manejo e evidenciao do efeito ou por sua similaridade anatmica, fisiolgica ou metablica com o Homem. (ANVISA, 2003). Na rea cosmtica, os animais podem ser utilizados para avaliar todos os riscos potenciais envolvidos, seja irritao, alergia ou efeitos sistmicos a curto e longo prazo. Os animais de laboratrio devero ser utilizados sempre que no existam mtodos alternativos validados que os substituam ou, em casos especficos, aps screening com mtodos in vitro e/ou matemticos vlidos, precedendo dessa forma, os estudos clnicos. (ANVISA, 2003). Cabe ressaltar que a utilizao de animais deve, obrigatoriamente, seguir os preceitos do rigor cientfico e da tica que norteiam os desenhos experimentais com modelos biolgicos, bem como, as normas de bioterismo preconizadas internacionalmente. (ANVISA, 2003).

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4.2.5.1.5.1.

Aspectos ticos na realizao de ensaios em animais Atualmente, apesar de todos os esforos para a reduo e substituio de animais de

laboratrio na experimentao biolgica, ainda no nos possvel abandonar a utilizao desses animais na avaliao da segurana de produtos, nos seus mais diversos aspectos. (ANVISA, 2003). Entretanto, desde que sejamos obrigados a utilizar animais nos ensaios, devemos zelar para que os mesmos no sofram dores ou vivenciem angstias durante o perodo experimental. (ANVISA, 2003). A caracterizao da dor ou desconforto nas diversas espcies animais nem sempre acompanha a realidade humana, dessa forma o experimentador dever estar bem treinado e, conseqentemente, familiarizado com os diversos sinais indicativos de sofrimento para a espcie com a qual est trabalhando. Outro aspecto importante diz respeito s condies ambientais a que so submetidos os animais, variando desde o parmetro macro (sala, temperatura, umidade, ausncia de rudo, ciclo claro-escuro, etc) at o micro (dimenso das caixas/gaiolas, troca de cama, nmero de animais, etc). Todas as regras bsicas de bioterismo e manipulao de animais devem, obrigatoriamente, ser observadas. (ANVISA, 2003). Embora parea paradoxal, o uso de anestsicos nem sempre recomendado, pois pode interferir com a resposta animal. Porm, parmetros para a finalizao humanitria de experimentos, onde os animais demonstram sinais de angstia e desconforto, devem ser observados. Dessa forma, evita-se o sofrimento desnecessrio e j torna possvel uma avaliao do desfecho do teste, com base no conhecimento da evoluo do quadro objeto de anlise. (ANVISA, 2003). De uma forma geral, recomenda-se que os animais de laboratrio utilizados em experimentao sejam manuseados dentro dos preceitos ticos preconizados pelos Guias Internacionais, de forma a contribuir para o refinamento dos ensaios e a diminuio do

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sofrimento a que possam ser submetidos durante a realizao de ensaios biolgicos. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.5.2.

Teste de Comedogenicidade Segue a metodologia de Kligman e Fulton em 6 coelhos albinos Nova Zelndia de 2,0 a

3,0 Kg. As amostras so diludas na proporo de 1,0 a 10,0 g. Efetuam-se 15 aplicaes (trs semanas com cinco aplicaes cada) de 1,0 mL da soluo teste na parte interna da orelha direita (esquerda controle). Leituras dirias e 24 horas aps a ltima aplicao, de eritema, edema e presena ou ausncia de comedes. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.5.3.

Teste de irritao drmica primria e cumulativa Consiste na aplicao nica do produto a ser testado no dorso de coelhos. aplicado um

patch oclusivo por 4 horas e, aps esse perodo o produto retirado. Procede-se a graduao das leses (eritema e edema), 24 e 72 horas aps a aplicao, seguindo a escala de Draize. No caso do ensaio para irritao cumulativa, as aplicaes so feitas por um perodo de 10 dias consecutivos e as graduaes so feitas 24 e 72 horas aps a ltima aplicao.(ANVISA, 2003).

4.2.5.1.5.4.

Irritao Ocular Primria Consiste na aplicao nica do produto no saco conjuntival de coelhos, com observaes

da evoluo das leses em 24, 48, 72 horas e 7 dias aps a instilao. So graduadas as alteraes de conjuntiva (secreo, hiperemia e quimose), ris (irite) e crnea (densidade e rea de opacidade). (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.5.5.

Sensibilizao Drmica

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So realizadas aplicaes tpicas da menor dose no irritante por um perodo de trs semanas (fase de induo). Aps um perodo de repouso, procede-se aplicao tpica da maior dose no irritante (fase de desafio). As reaes so graduadas segundo escala especfica, com a finalidade de avaliar o potencial de sensibilizao. Para ensaios de sensibilizao drmica maximizada, segue-se o mesmo procedimento, porm, com aplicaes subcutneas de adjuvante completo de Freund, para exacerbar a resposta imune. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.5.6.

Determinao da DL oral Visa verificar a toxicidade produzida por uma substncia quando administrada por via

oral, geralmente forada, por meio de entubao gstrica (gavage). De uma forma geral, os ensaios se baseiam na contabilidade do percentual de animais que so levados a bito em determinadas faixas de doses. Recomenda-se, tambm, observar a ocorrncia de sinais e sintomas indicativos de toxicidade (ambulao, piloereo, etc). (ANVISA, 2003). Os ensaios de toxicidade aguda esto sendo revistos pelo Comit Tcnico da OECD, no sentido de serem substitudos por avaliaes tambm fidedignas, mas que reduzam o sacrifcio ou mesmo o nmero de animais empregados. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.5.7.

Irritao da mucosa oral Aplicao do produto na bolsa bucal de hamsters, com lavagem subseqente, durante um

determinado perodo. So feitas observaes macroscpicas da mucosa da bolsa e, ao final do ensaio, os animais so sacrificados para exame histopatolgico das alteraes da mucosa. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.5.8.

Fotoalergenicidade

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Os ensaios so feitos em cobaias albinas. Se iniciam com uma fase de induo onde o produto aplicado de maneira repetida em duas reas do mesmo flanco dos animais, expondose radiao UVA e UVB, em seguida. Aps um perodo de repouso, procedese nova aplicao, em outro flanco, em duas reas, sendo uma delas o controle, sem exposio radiao. Aps 48 horas, so feitas as observaes, comparando-se com a rea controle, para confirmar que se trata de uma reao fotoalergnica. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.5.9.

Fototoxicidade Os ensaios so realizados em cobaias albinas. O produto aplicado na pele do animal,

seguido por exposio radiao UVA e UVB, sendo uma rea, controle. Aps 48 horas, so feitas observaes macroscopicas e, quando necessrio, microscopicas, comparando-se com o controle, sem exposio, para correlacionar uma resposta fototxica. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.5.10.

Irritao da mucosa genital So utilizados coelhos albinos machos (irritao de mucosa peniana) ou fmeas (irritao

de mucosa vaginal). O produto aplicado sobre a mucosa com observaes macroscpicas e microscpicas das alteraes teciduais. So feitas graduaes de forma a determinar o potencial de irritao. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.6.Ensaios em animais Produtos cosmticos necessitam de ensaios clnicos em humanos, para que as empresas possam oferecer aos consumidores, o mximo de segurana com o menor risco, garantindo as melhores condies de uso do produto. A partir das informaes pr-clnicas coletadas, deve haver a comprovao de segurana de uso por humanos. Estas informaes so importantes

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para determinao do modo e local de uso, advertncias de rotulagem e orientaes para o servio de atendimento ao consumidor. (ANVISA, 2003). Os ensaios de compatibilidade tm por objetivo comprovar a inocuidade dos produtos em pele humana. So realizados de modo geral com apsitos oclusivos ou semi-oclusivos (patch tests) ou em modelos abertos (open tests). Representam o primeiro contato do produto acabado com um ser humano, e por isso devem seguir premissas de ordem tica (levantamento prvio de dados pr-clnicos segundo Resoluo 196/96 do MS) e de boas prticas clnicas. H vrias metodologias e critrios de avaliao na literatura. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.6.1. Ensaios de Compatibilidade 4.2.5.1.6.1.1. Irritao Cutnea Primria e Acumulada Os ensaios devem contemplar um nmero mnimo de voluntrios (50) com critrios de incluso e excluso previamente padronizados. O produto aplicado de forma aberta, semioclusiva ou oclusiva, de acordo com o produto a ser avaliado. A durao do contato e periodicidade das leituras padronizada. A interpretao dos resultados deve ser feita considerando o ICDRG (international Contact Dermatitis Research Group). A avaliao deve ser feita por dermatologista. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.6.1.2. Fotoirritao Os ensaios devem ter um mnimo de 25 voluntrias com critrios de excluso e incluso previamente definidos. Deve haver uma irradiao no stio de aplicao localizado no antebrao ou no dorso e a interpretao dos resultados tambm dever seguir as normas do ICDRG. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.6.1.3. Soap Chamber Test

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Este ensaio se destina avaliao de produtos enxaguveis com durao de contato e periodicidade previamente padronizados, utilizando-se 15 voluntrios com pele sensvel. (ANVISA, 2003). A escala para interpretao das leituras a de Frosch & Kligman, 1979. A avaliao tambm deve ser feita por dermatologista. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.6.1.4. Comedogenicidade A avaliao de comedogenicidade deve ser realizada em voluntrios negros (fototipos 5 e 6) com aplicao no dorso, de forma padronizada, por um tempo de 28 dias, em no mnimo 5 voluntrios, para ento se proceder com a bipsia com cola de cianoacrilato e a leitura dos achados em microscopia ptica.(ANVISA, 2003).

4.2.5.1.6.1.5. Sensibilizao Drmica Estes ensaios tm as mesmas premissas de compatibilidade, e deve constar de 3 etapas: Induo, Repouso e Desafio realizado com apsitos oclusivos ou semi-oclusivos, em antebrao ou dorso, em no mnimo 50 voluntrios e deve ser realizado, por dermatologista, segundo a escala do ICDRG. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.6.1.6. Fotossensibilizao A avaliao de fotossensibilizao deve tambm seguir as 3 etapas para induo de sensibilizao, mas deve haver irradiao de luz ultravioleta (faixa A) para avaliar seu papel na induo de alergia. O nmero mnimo de voluntrios de 25, e os ensaios so sempre oclusivos, podendo ser realizados em dorso ou antebrao. A escala de avaliao segue o ICDRG, e deve ser elaborada por dermatologista. (ANVISA, 2003). 4.2.5.1.6.2. Ensaios de Aceitabilidade

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Os protocolos de aceitabilidade devem obedecer s condies de uso determinadas pelo fabricante, com critrios de incluso e excluso padronizados, onde a nica varivel o uso do produto. O nmero de voluntrios deve ser de no mnimo 30, com avaliao dermatolgica e conforme o caso, subjetiva. Pode haver acompanhamento de outro profissional mdico de acordo com a categoria de produto (pediatra, ginecologista, oftalmologista, etc.). A durao do ensaio e o nmero de aplicaes podero variar de acordo com a categoria do produto. (ANVISA, 2003).

4.2.5.1.6.3. Ensaios de Acnegenicidade e Comedogenicidade em uso Esta avaliao deve ser realizada em indivduos de pele oleosa e/ou com tendncia a acne, com critrios de excluso e incluso padronizados. O uso do produto deve ser padronizado de acordo com as orientaes do fabricante. A anlise inicial e final das condies da pele deve constar da avaliao clnica, cujos critrios so delineados antecipadamente, assim como a contagem das leses comednicas e acneicas. (ANVISA, 2003).

4.2.6. Avaliao de segurana baseado na semelhana de produtos Para ser considerado como semelhante, o produto deve ser da mesma empresa que o produto de referncia e correspondente mesma categoria de produto cosmtico. So exemplos especficos de casos de semelhana que podem ser considerados: Reduo ou eliminao de qualquer ingrediente da formulao; Possuir uma base comum e corantes diferentes, desde que estes corantes sejam

aceitos legalmente, com exceo das tinturas capilares; Mudana de proporo de ingredientes em uma formulao, desde que haja

informao toxicolgica (banco de dados da prpria empresa) para corroborar a segurana do novo produto, excetuando-se fragrncias, conservantes e tensoativos.

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Um exemplo desta situao a proporo de pigmentos em maquilagens. (ANVISA, 2003).

4.2.7. Critrios ticos na avaliao de segurana de produtos cosmticos em humanos De acordo com as premissas da legislao brasileira sobre Biotica, todo e qualquer produto, equipamento ou procedimento aplicvel em humanos, que esteja sob desenvolvimento dever seguir os preceitos ticos de forma igual. Assim sendo, produtos cosmticos sob avaliao devem seguir, quando aplicvel, as recomendaes das Boas Prticas Clnicas (BPC) e, algumas destas medidas so bsicas, como por exemplo: Dados pr-clnicos consistentes que garantam a segurana nas avaliaes clnicas; Termo de consentimento pr-informado; Infra-estrutura de atendimento mdico para o caso de intercorrncia; Cuidados na construo de delineamentos de amostras sob metodologia cientfica

(grupos pequenos demais, delineamentos cujas respostas no sero realmente teis, etc.). A avaliao do produto cosmtico em humanos no ocorre no sentido de investigar o potencial de risco, mas sim, de confirmar a segurana do produto acabado. (ANVISA, 2003). No Brasil, o Conselho Nacional de Sade, regulamentou as pesquisas envolvendo seres humanos atravs da Resoluo 196/96 e, constituiu a Comisso Nacional de tica em Pesquisa CONEP, responsvel, entre outros, pelo registro dos Comits de tica em Pesquisa Institucionais. Todos os projetos de pesquisa envolvendo seres humanos devem obedecer s recomendaes dessa Resoluo. Para uso de uma nova formulao em humanos, importante que o fabricante rena as informaes de segurana pertinentes. A Resoluo 196/96 prev que a pesquisa em qualquer rea do conhecimento, envolvendo seres humanos dever observar as seguintes exigncias:

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Ser adequada aos princpios cientficos que a justifique e com possibilidades

concretas de responder a incertezas; Estar fundamentada na experimentao prvia realizada em laboratrios, animais ou

em outros fatos cientficos. Isto significa que os fatos pr-clnicos levantados que garantem a segurana de uso devem ser reunidos previamente s avaliaes. Ensaios cujas metodologias no tem validao do ponto de vista cientfico e seus resultados no trazem nenhum tipo de informao til, so inaceitveis. (ANVISA, 2003). Vale pena frisar que os ensaios em humanos no substituem os ensaios em animais. (ANVISA, 2003). As avaliaes de produtos cosmticos devem tambm obedecer aos critrios ticos e tcnicos das normas de BPC, quando aplicveis, pois tambm se tratam de produtos em desenvolvimento, que no devem trazer malefcio ou prejuzo ao indivduo. (ANVISA, 2003).

4.2.8. Avaliao dos ingredientes a serem utilizados em formulaes cosmticas Apesar de numerosos, os produtos cosmticos so formulados com um nmero razoavelmente restrito de ingredientes. (ANVISA, 2003). Os efeitos observados resultantes do produto acabado so, em boa parte, dependentes dos seus componentes, o conhecimento do perfil toxicolgico dos mesmos permite avaliar o perfil das pesquisas em produtos acabados, desde que respeitada a sua forma cosmtica, especialmente, a associao de ingredientes. Desta maneira, necessita-se dispor do melhor conhecimento possvel para cada ingrediente utilizado, tanto no que diz respeito s suas caractersticas, bem como, a seus dados toxicolgicos, levando-se em conta os vrios riscos potenciais ligados ao uso cosmtico. (ANVISA, 2003).

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Esta medida com certeza a melhor maneira de evitar problemas posteriores quanto ao comportamento do produto final, seja durante seu desenvolvimento ou mesmo aps sua colocao no mercado. (ANVISA, 2003). At o presente tem sido mais acessvel a busca de informaes tcnicas, de ordem cientfica e normativa para a maioria dos ingredientes qumicos, enquanto que para as substncias obtidas de extratos naturais, vrios fatores esto associados desde o seu plantio at o seu preparo farmacognstico, fatores estes que podem conferir s substncias presentes um grau enorme de contrastes, cujos valores sem dvida alguma podem interferir na avaliao toxicolgica do produto acabado. (ANVISA, 2003).

4.2.8.1. Parmetros a serem observados na avaliao dos ingredientes Os ingredientes de produtos cosmticos podem ser substncias qumicas, extratos de origem botnica ou animal, ou associao de ingredientes, como por exemplo, as fragrncias. (ANVISA, 2003). Esta considerao leva a pensar que os parmetros a serem contemplados na avaliao da segurana de uso de tais componentes, dependem de sua categoria. (ANVISA, 2003).

4.2.8.1.1.

Caracterizao

desejvel a disponibilizao dos seguintes dados, para qualquer ingrediente:


Nome comercial; Codificao INCI, quando houver; Nmero CAS ou EINECS; Especificaes fsico-qumicas, microbiolgicas e de estabilidade; Mtodo de identificao; Restrio de uso;

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Condies particulares de estocagem e manuseio. (ANVISA, 2003).

4.2.8.1.2.

Aplicao cosmtica Concentrao de uso indicada pelo fornecedor; Restries regulamentares de uso; Outros usos. (ANVISA, 2003).

4.2.8.1.3.

Dados toxicolgicos

O produto cosmtico deve ser seguro para o usurio nas condies normais ou razoavelmente previsveis de seu uso. Isto significa que os ingredientes devem ser incorporados na frmula do produto cosmtico num nvel de concentrao que apresente uma margem de segurana adequada. (ANVISA, 2003). A margem de segurana (MS) definida como a relao entre a dose experimental mais elevada, que no produz qualquer efeito sistmico adverso depois de um mnimo de 28 dias de ingesto oral, em espcie(s) animal (is) seguindo as recomendaes internacionais, (NOAEL), e a dose diria absorvida, a qual o consumidor pode ser exposto por via cutnea (DS). ( ANVISA, 2003). Para fins de avaliao da margem de segurana de produtos cosmticos esta relao no deve ser menor que 100. No entanto, este valor estimado no deve ser utilizado quando a toxicidade no est relacionada concentrao de uso do ingrediente, a exemplo de substncias potencialmente mutagnicas, carcinognicas ou que apresentem efeitos na reproduo. (ANVISA, 2003). Por esta razo, alm do conhecimento do nvel de absoro cutnea e de toxicidade subaguda, certo nmero de informaes complementares necessrio para o conhecimento do risco de uso dos ingredientes utilizados em preparaes cosmticas. (ANVISA, 2003).

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A lista de pesquisas que se segue, de carter indicativo, considera os trs tipos possveis de riscos cosmticos potenciais e deve ser contemplada, caso a caso, em funo do conhecimento j adquirido pelo formulador e pelo avaliador de segurana, e tambm em funo da categoria do produto em considerao: a) Dados bsicos teis para qualquer ingrediente:

Absoro cutnea: Como indicado previamente, o conhecimento desta informao d uma boa idia da previsibilidade e tambm permite o clculo da margem de segurana. Quando no se pode ou no se deseja fazer a pesquisa, deve-se ento, considerar que 100% da substncia absorvida. Estudo do potencial de efeito sistmico: Toxicidade aguda (por via oral, em uma espcie sensvel); Teste de mutagenicidade.

Estudo do potencial de efeito alergnico: Teste de alergenicidade. Estudo do potencial de risco irritativo: Irritao primria da pele; Irritao primria

da mucosa (ou ocular). (ANVISA, 2003). b) Dados complementares teis em situaes particulares: Estudo do risco sistmico potencial: Toxicidade subaguda: desejvel quando o ingrediente destinado ao uso dirio, sem enxge; tambm necessrio para o clculo da margem de segurana; Estudo do efeito na reproduo (fertilidade, teratogenicidade peri/psnatal): somente necessria quando o ingrediente pertence a uma famlia qumica com suspeita de risco ou se utilizado em produtos indicados para gestantes; Fotomutagenicidade: somente para ingredientes que absorvem os raios ultravioleta entre 290 e 400 nm. Estudo do risco irritativo potencial: Irritao por efeito cumulativo (desejvel quando o ingrediente destinado a ser utilizado em produtos de uso regular, sem enxge). Avaliao de riscos particulares: Pesquisas de carter particular podem ser necessrias, caso a caso, para complementar a informao toxicolgica quando se suspeita, por

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exemplo, de qualquer risco devido ao conhecimento de efeito adverso de um ingrediente cuja estrutura qumica seja semelhante (teratogenicidade, carcinogenicidade, genotoxicidade, toxicidade reprodutiva. (ANVISA, 2003). Para que qualquer teste possa ser utilizado na avaliao de segurana de um produto cosmtico, deve ser elaborado protocolo de estudo segundo recomendado pela legislao vigente e reconhecidas as boas prticas de laboratrio. (ANVISA, 2003). Na falta de disponibilizao de mtodos substitutivos in vitro adequados e vlidos, e por razes ticas evidentes, a maioria destes testes feitos com ingredientes s pode ser razoavelmente avaliada, hoje, em animais. No entanto, da responsabilidade do pesquisador, bem como, dos avaliadores dos dados, a reduo mxima do nmero de animais de laboratrio utilizados e tambm, a mxima reduo de seu sofrimento. (ANVISA, 2003).

4.2.8.1.4.

Informao disponvel sobre os ingredientes

Os fornecedores de ingredientes constituem a maior fonte de informao, uma vez que os ingredientes devem satisfazer a legislao nacional em termos de condies de manuseio, de transporte e de rotulagem. Vrios compndios podem ser utilizados para completar a informao. Entretanto, nem todas fornecem o mesmo nvel de conhecimento sobre o risco de uso. Algumas listas apresentam a indicao de uso do ingrediente e, algumas vezes, informaes quanto s suas restries. o caso, por exemplo, do INCI, do Inventrio publicado pela Comisso Europia e do IFRA (Assossiao Internacional de Fragncia) index. Outras listas trazem informao toxicolgica de ingredientes com relao ao uso cosmtico. (ANVISA, 2003). o caso, por exemplo, do CIR ( reviso de ingredientes cosmticos) e das opinies dadas pelo Comit Cientfico de Cosmetologia da Comisso Europia, que fornecem avaliaes

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toxicolgicas de ingredientes cosmticos feitas por painis de cientistas independentes. (ANVISA, 2003). Outras referncias do uma informao de carter mais geral, porm, teis para obteno de dados sobre as caractersticas fsico-qumicas dos ingredientes, como por exemplo, o Merck Index e o The Martindale Extra Pharmacopeia. Em funo do pas, ou dos pases, onde se pretende comercializar um produto cosmtico deve-se tambm verificar na legislao se os ingredientes utilizados so aceitos ou submetidos restries de uso. Alm de casos particulares, sempre necessrio conferir a possibilidade e nvel de uso aceitvel para trs categorias de ingredientes: corantes, conservantes e filtros solares. (ANVISA, 2003). Alm das fontes acima referidas, ainda esto disponveis bancos de dados que podem ser utilizados para se obter informaes teis quanto s caractersticas e ao perfil toxicolgico dos ingredientes. Mesmo contando com meios para a busca de dados necessrios para segurana de produtos cosmticos, deve-se observar o mximo rigor cientfico na anlise dos dados fornecidos pelas fontes utilizadas, os quais devem ser apropriados para o ingrediente e sua utilizao no produto acabado (ANVISA, 2003).

4.2.9. Avaliao do risco potencial de produtos Cosmticos Como citado acima, a maioria das informaes necessrias na avaliao do risco potencial de um produto cosmtico resulta do conhecimento dos ingredientes que compem sua frmula. So eles que podem, diretamente, serem os responsveis por qualquer efeito sistmico e por boa parte do risco alergnico. Contudo, a frmula do produto acabado pode interferir, medida que facilita a absoro total ou parcial dos ingredientes sendo responsvel, tambm, por possveis sinergismos, resultantes da associao de ingredientes. (ANVISA, 2003).

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Portanto, o conhecimento disponvel dos ingredientes pode no ser suficiente para prevenir um efeito indesejvel ao consumidor alvo. Alm dos componentes, deve-se avaliar outros parmetros envolvidos tais como: o uso do produto, rea de aplicao, se o produto enxaguvel, se o uso prolongado e repetido, dirio ou no, entre outros. Dessa forma, o risco potencial pode ser diferente, em cada caso. (ANVISA, 2003). O avaliador deve observar todos estes parmetros, garantindo, da melhor maneira possvel, a segurana do consumidor em condies normais ou razoavelmente previsveis de uso de um produto cosmtico. (ANVISA, 2003).

4.2.9.1. Parmetros a serem considerados na avaliao de produtos cosmticos Embora os produtos cosmticos sejam aplicados topicamente, um ou mais de seus ingredientes pode permear a barreira cutnea, sendo parcial ou totalmente absorvidos. (ANVISA, 2003). Na avaliao de segurana deve ser considerado o modo de uso do produto, uma vez que esta varivel pode determinar diretamente a quantidade que pode ser absorvida, ingerida ou inalada. (ANVISA, 2003). Os primeiros parmetros a serem contemplados so os seguintes: Categoria do produto; Condies de uso; Concentrao de cada ingrediente na formulao; Quantidade de produto em cada aplicao; Freqncia de uso; Local de contato direto com o produto; Superfcie total de pele ou de mucosa onde o produto aplicado; Durao do contato;

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Possveis desvios no emprego do produto (uso inadequado ou acidental). (ANVISA, 2003). Conhecendo-se a frmula do produto, pode-se calcular de maneira adequada, a concentrao de cada ingrediente que est em contato com a pele. Neste clculo, deve-se considerar a quantidade total de cada ingrediente includo, ou constituinte de outro componente (ex: conservantes). Com o conhecimento da absoro dos ingredientes mais crticos possvel ento prever, sem nenhum estudo adicional, o risco potencial de exposio do produto. (ANVISA, 2003). Uma vez que no h um risco previsvel decorrente do uso do produto, pode-se avaliar a frmula per si para determinar a aceitabilidade dos ingredientes nas condies de uso do produto acabado. (ANVISA, 2003). Por razes ticas, quando o risco previsvel no pode ser suficientemente conhecido prefervel recorrer, segundo o nvel de conhecimento, a mtodos experimentais in vitro ou in vivo. (ANVISA, 2003). De maneira geral, melhor privilegiar a avaliao dos riscos irritativos e alergnicos em testes clnicos que apresentam uma melhor idia da resposta dos consumidores alvo. (ANVISA, 2003).

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5.

BOAS PRTICAS DE FABRICAO

A grande nfase s Boas Prticas de Fabricao foi iniciada nos Estados Unidos da Amrica (USA), diretamente interligada e decorrente da ao regulatria do FDA. Sabe-se que nos anos 50 o FDA era um rgo ineficiente, pobre, quer em regulamentaes, quer em pessoal qualificado para inspees ou em laboratrios que o respaldassem. Entretanto, a constatao de eventos de conseqncias graves em pacientes, particularmente associados administrao medicamentosa, fez com que este rgo se fortalecesse, ganhando maior autonomia e recursos. A dcada de 1960 j contava com prticas extremamente rgidas e respeitadas, graas no apenas seriedade dos produtores, mas s graves conseqncias de punio em casos de desobedincia, quer seja no aspecto penal aos dirigentes da empresa ou de pesadas multas, sistema ainda vigente. A abrangncia das Boas Prticas de Fabricao, a nvel nacional ou internacional, est direcionada no apenas s instituies da rea da sade, tais como hospitais e congneres, mas tambm atividade industrial dos produtores de medicamentos, correlatos, cosmticos, domissanitrios e alimentos. As Boas Prticas de Fabricao foram, tambm, introduzidas com a Norma Tcnica no 567, da Organizao Mundial da Sade, em 1975. A presena marcante de empresas multinacionais da rea farmacutica instaladas no Brasil respondeu em grande parte pela disseminao local das Boas Prticas de Fabricao, a partir da dcada de 1970. Inspees efetuadas por representantes das casas-matriz ou por agentes do prprio FDA constituam-se em desafios no sentido da adoo de tais prticas. Posteriormente, a Portaria no 14 da Secretaria de Vigilncia Sanitria do Ministrio da Sade, de 08 de outubro de 1981, estabeleceu seqncia de inspees objetivando avaliar atendimento s prticas no Brasil. Recentemente o assunto foi revisto pela Vigilncia Sanitria, instalando-se um sistema efetivo de inspees indstria farmacutica, decorrente da Portaria no 16, de 06 de

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maro de 1995, publicada no Dirio Oficial da Unio (DOU) de 09 maro de 1995. Esta Portaria provocou, particularmente nas indstrias nacionais mais incipientes, impacto bastante positivo no sentido da busca da qualidade, tambm restaurando credibilidade aos rgos de fiscalizao. Deve ser ainda lembrada, no estgio evolutivo e cronolgico, a Portaria SVS/MS no 17, de 03 de maro de 1995, que institui o programa Nacional de Inspeo em Indstrias Farmacuticas e Farmoqumicas PNIF com o objetivo de executar inspees para avaliar a qualidade do processo de produo de produtos farmacuticos e farmoqumicos, de acordo com a legislao vigente, como um dos mecanismo fundamentais na garantia da qualidade dos medicamentos, para outorgar, ratificar e/ou cancelar a autorizao de funcionamento, subsidiar o processo de registro de produtos e efetuar vigilncia sanitria em nvel nacional e no mbito do Mercosul. Retornando Portaria de 16 de maro de 1995, ela foi revogada pela Resoluo da Diretoria Colegiada RDC no 134 de 13 de julho de 2001, da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA), com teor e impacto ainda mais positivos. Em seu Anexo I, Regulamento Tcnico das Boas Prticas para a Fabricao de Medicamentos, incluem-se: gerenciamento da qualidade na fabricao de medicamentos: filosofia e elementos essenciais; boas prticas na produo e controle de qualidade, bem como diretrizes suplementares. As Normas Recomendadas para a Fabricao e Inspeo da Qualidade dos Medicamentos, tendo como anexo o Roteiro para Inspeo em Estabelecimentos da Indstria Farmacutica, so coincidentes com aquelas adotadas pelas Normas Tcnicas MERCOSUL. De forma semelhante, as Boas Prticas de Fabricao para outros grupos de produtos que no medicamentos continuam em distintos estgios evolutivos no processo de harmonizao. Diferentes motivos, de ordem tcnica, mercadolgica ou poltica, tm levado atividade de regulamentao na rea de sade, com maior intensidade, porm no restritiva rea farmacutica. Tambm a rea cosmtica no se manteve esquecida, tendo sido publicada no

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DOU de 19 de agosto de 1997 a Portaria no 349, de 18 de agosto de 1997, determinando que todos os estabelecimentos fabricantes de produtos de higiene pessoal, cosmticos e perfumes devam cumprir as diretrizes estabelecidas no Regulamento Tcnico Manual de Boas Prticas de Fabricao e Controle (BPF e C) para tais produtos (Anexo I), assim como Regulamento Tcnico e Roteiro de Inspeo para Indstria de Produtos de Higiene Pessoal, Cosmticos e Perfumes. Na rea farmacutica, decorrente de problemas graves provocados em nosso pas, particularmente pelos produtos parenterais de grande volume, publicou-se a Portaria no 500, de 09 de outubro de 1997, no DOU de 13 de outubro de 1997, apresentando o Regulamento Tcnico Solues Parenterais de Grande Volume (SPGV) e seus anexos: A Boas Prticas de Fabricao; B Roteiro para Inspeo; C Especificaes e Controle de Matrias-Primas; D Recipientes de Vidro; E Recipientes de Plstico; F Especificaes e Controle de Produto Acabado; G Transporte; H Recebimento, Armazenamento e Distribuio; I Validao do Processo de Esterilizao pelo Vapor; J Tampas de Elastmero; L Estabilidade; M Ensaios Biolgicos. O material, conforme pode ser avaliado, bastante abrangente e apresenta inestimvel valor orientativo e normativo. A ttulo de esclarecimento, deve-se esclarecer o escopo distinto da Resoluo RDC no 9 de 02 de janeiro de 2001 (DOU de 19 de janeiro de 2001), que aprova o Regulamento Tcnico de Solues Parenterais de Pequeno Volume, tendo por escopo padronizar embalagem e rotulagem das solues parenterais, acondicionadas em recipientes com capacidade inferior a 100 ml, objetivando maior segurana na sua utilizao. Em se considerando o mbito farmacutico, agora de forma abrangente, deve-se mencionar a Portaria no 440, de 17 de setembro de 1997, publicada no DOU de 19 de setembro de 1997, que, respeitando a Resoluo GMC (Grupo de Mercado Comum) no 14/96, do

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MERCOSUL Verificao do Cumprimento das Boas Prticas de Fabricao e Controle em Estabelecimentos da Indstria Farmacutica , e a Resoluo GMC no 20/93, que determina a internalizao das resolues GMC/MERCOSUL, complementa e retifica o Anexo II Roteiro para Inspeo em Estabelecimentos da Indstria Farmacutica, da Portaria no 16, de 06 de maro de 1995, publicada em 09 de maro de 1995, com itens relativos gua para injetveis, organizao e rea da pesagem e medida. Ainda mais abrangente, a Portaria no 450, de 19 de setembro de 1997, publicada no DOU de 29 de setembro de 1997, que considerando em adio Portaria n o 15 de 04 de abril de 1995, que internaliza as Guias de Boas Prticas de Fabricao para Indstrias Farmoqumicas e o Roteiro para Inspees de Indstria Farmoqumica, ambas decorrentes das respectivas Resolues do MERCOSUL, alm do Regime de Inspees, harmonizado no MERCOSUL sob a Resoluo GMC no 23/96, aprova o regulamento tcnico sobre regime de inspees aplicvel realizao no pas ou inter-pases no mbito do MERCOSUL, relacionadas com Produtos para a Sade Produtos Farmacuticos e Farmoqumicos, Sangue e Hemoderivados, Cosmticos, Saneantes e Correlatos. Os anexos envolvidos abrangem: I Regime Geral de Inspeo; II Regulamentos para a rea Farmacutica; III Regulamentos para a rea Farmoqumica; IV Solicitao de Inspeo de Estabelecimento Farmacutica; V Solicitao de Inspeo de Estabelecimentos Farmoqumicas, VI Modelo de Certificado de BPF e C. Mais recentemente, a Portaria no 792, de 07 de outubro de 1998, publicada no DOU de 09 de outubro de 1998, submete consulta pblica o Regulamento Tcnico que institui as Boas Prticas de Manipulao (BPM) em farmcias, o que se fazia necessrio para um padro mnimo de qualidade que contemplasse os requisitos mnimos exigidos para a manipulao, fracionamento, aditivao, conservao, transporte, dispensao de frmulas magistrais e oficiais, e de outros produtos de interesse da sade. Esta Portaria foi revogada pela RDC no 33

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de 19 de abril de 2000, atualizada em 08 de janeiro de 2001, que aprova o Regulamento Tcnico sobre Boas Prticas de Manipulao em Farmcias e seus anexos. Contempla Boas Prticas de Manipulao em Farmcias (BPMF), Boas Prticas de Manipulao de Produtos Estreis (BPMPE), Boas Prticas de Manipulao de Preparao Homeopticas (BPMPH), considerando conceitos de controle e garantia de qualidade, incluindo aspectos inerentes a estudos de estabilidade e validaes. Abrange em seus anexos Condies Gerais (Responsabilidades e atribuies; Treinamentos; Sade, Higiene, Vesturio e Conduta); Infra-estrutura Fsica (Condies Gerais e Especficas; rea de Manipulao; rea de Dispensao); Equipamento, Mobilirios e Utenslios) (Localizao e Instalao; Calibrao e Verificao; Manuteno; Limpeza e Sanitizao); Materiais (Aquisio; Recebimento; Armazenamento; gua); Controle do Processo (Avaliao Farmacutica da Prescrio; Manipulao; Rotulagem e Embalagem; Conservao e Transporte; Dispensao), e apresenta em anexo Roteiro de Inspeo para Farmcia. Em termos gerais, a poltica da empresa farmacutica, de correlatos e cosmticos, assim como os procedimentos devem obrigatoriamente induzir a que suas diretrizes bsicas sejam contempladas com os pontos fundamentais, a saber: As instalaes das fbricas devem ser projetadas com a finalidade de proporcionar a fabricao adequada e facilidades de armazenagem; O pessoal responsvel pela produo e garantia de qualidade deve ser devidamente qualificado pela educao, experincia, histrico de competncia e perfil de confiabilidade para assegurar a integridade do produto; Os insumos devem ser apropriadamente estocados e testados antes do uso; os recipientes claramente identificados e os registros de cada lote indicando sua origem, controle e disposio;

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Ordens de fabricao devem ser mantidas, com instrues claras de todos os itens na preparao dos produtos, com as execues obedecidas e registradas lote a lote; Equipamentos usados nos processos devem ser limpos entre os diferentes lotes; Todos os materiais em processo e equipamentos envolvidos devem ser devidamente identificados; A unidade de garantia de qualidade deve ter instalao adequada para avaliao e reavaliao necessrias quanto identidade, eficcia, pureza e atributos de qualidade a cada lote do produto, bem como de todos os materiais direta ou indiretamente integrantes do processo de fabricao; Manter arquivos de documentao pertinente a todos os lotes fabricados, bem como de amostras de todos os produtos, com os respectivos registros de distribuio. Alguns dos tpicos, conforme maior necessidade de abordagem, sero a seguir detalhados. A j mencionada RDC no 134 de 13 de julho de 2001 (DOU de 16 de julho de 2001) determina a todos os estabelecimentos fabricantes de medicamentos, o cumprimento das diretrizes estabelecidas no Regulamento Tcnico das Boas Prticas para a Fabricao de Medicamentos, conforme Anexo I da Resoluo (abrangendo: garantia da qualidade, boas prticas de fabricao para medicamentos, controle de qualidade, sanitizao e higiene, validao, reclamaes, recolhimentos de produtos, contrato de fabricao e/ou de anlise, auto inspeo e auditoria da qualidade, pessoal, instalaes, equipamentos, materiais, documentao, boas prticas de produo, boas prticas de controle da qualidade, produtos estreis, produtos biolgicos, validao dos processos de fabricao), institui e aprova a classificao e critrios de avaliao de itens constantes do Roteiro de Inspeo para Empresas Fabricantes de Medicamentos, conforme Anexo II desta Resoluo; institui como norma da inspeo para fins da verificao do cumprimento das Boas Prticas de Fabricao de

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Medicamentos, para os rgos de Vigilncia Sanitria do Sistema nico de Sade, o Roteiro de Inspeo para Empresas Fabricantes de Medicamentos, conforme Anexo III desta Resoluo. A RDC determina ainda que as empresas procedam a auto inspeo, cujos relatrios devem ser enviados at 31 de dezembro de cada ano, ANVISA. Aspectos de qualidade so contemplados adicionalmente pela Resoluo RE no 475, de 19 de maro de 2002 da ANVISA, que apresenta o Guia para Validao de Mtodos Analticos A j mencionada RDC no 134 de 13 de julho de 2001 (DOU de 16 de julho de 2001) determina a todos os estabelecimentos fabricantes de medicamentos, o cumprimento das diretrizes estabelecidas no Regulamento Tcnico das Boas Prticas para a Fabricao de Medicamentos, conforme Anexo I da Resoluo (abrangendo: garantia da qualidade; boas prticas de fabricao para medicamentos; controle de qualidade; sanitizao e higiene; validao; reclamaes; recolhimento de produtos, contrato de fabricao e/ou de anlise; auto inspeo e auditoria da qualidade; pessoal; instalaes; equipamentos; materiais; documentao; boas prticas de produo; boas prticas de controle de qualidade; produtos estreis; produtos biolgicos; validao dos processos de fabricao); institui e aprova a classificao e critrios de avaliao dos itens constantes do roteiro de Inspeo para Empresas Fabricantes de Medicamentos.

5.1. EDIFCIOS E INSTALAES

A natureza de construo do edifcio para fins de manufatura de produtos farmacuticos, correlatos e cosmticos deve obedecer s exigncias legais dos rgos sanitrios locais; a edificao deve ser acompanhada da orientao de tcnico especializado, o qual deve conhecer os requisitos pertinentes a diferentes graus de pureza exigidos para cada forma farmacutica. Basicamente deve respeitar requisitos de distribuio adequada de rea til para cada tipo de

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produo ou equipamento a ser instalado, de modo a reduzir ao mnimo o risco de contaminao cruzada entre diferentes componentes ou medicamentos, fundamentado em estudo racional de fluxo de material e pessoal. Neste aspecto, deve haver a verificao da necessidade ou no do tratamento de ar insuflado para cada rea produtiva, ou mesmo edifcios distintos, compatibilizando as distintas operaes de fabricao. Convm no esquecer caractersticas de construo no que diz respeito higiene e sanitizao da indstria, recursos antipoluentes e tratamentos de descartes para no quebrar o equilbrio do ecossistema, bem como prover a fbrica com barreiras, compatveis com o grau de exigncia de cada caso. Para o bom andamento das atividades industriais, devem ser consideradas as reas administrativas e tcnica, sendo esta ltima compreendida de: Armazenamento de insumos, produtos em processo e acabados, por sua vez subdivididas ou no em quarentena, aprovados ou rejeitados. Cuidados adicionais dizem respeito ao armazenamento de substncias higroscpicas ou termosensveis e livres de contaminao microbiana vivel, as quais devem ser segregadas, de modo que mantenham tais caractersticas, o que impe a construo de salas especiais climatizadas ou providas de barreiras comprovadamente eficientes; Produo, subdividida em funo da natureza dos produtos de cada empresa, podendo ou no ser linha contnua abrangendo as etapas de manipulao e embalagem, incluindo, tambm, a fase de envase; Controle de qualidade, subdividida em funo do envolvimento de testes biolgicos, e conseqentemente com rea destinada ao biotrio (em edifcio separado da planta de produo); Manuteno, com reparo de equipamentos e aparelhos, procurando, cada vez mais, a implantao de engenharia de manuteno preditiva; Pesquisa e desenvolvimento, tanto de produtos como de mtodos analticos.

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5.2. FLUXO DE MATERIAIS

Durante todas as etapas, desde o recebimento de todo e qualquer tipo de insumo, alm de materiais de acondicionamento e embalagem, at a expedio de produtos terminados, devem existir reas segregadas especficas nas quais os materiais, identificados e adequadamente manuseados, permanecem durante tempos que se faam necessrios e prossigam de acordo com fluxo planejado. fundamental, por exemplo, que as matrias-primas recebidas sejam mantidas numa rea de quarentena, assim denominada, at que disposio emitida pela Unidade de Controle de Qualidade as considere aprovadas ou rejeitadas. Sinalizao a cores, seja nas etiquetas ou mesmo nas demarcaes de reas, como aquelas empregadas nos sinais de trnsito de veculos recurso til, sendo freqentemente adotado. Apenas itens aprovados podem ser transferidos ao almoxarifado, onde ainda assim, na dependncia do tempo que permaneam devem merecer avaliaes peridicas, seja para definir perda de atividade, contaminao por impurezas ou mesmo desenvolvimento de contaminante microbiano. Estes materiais devem ser empregados de maneira que seja respeitada a ordem de utilizar primeiro os que tambm primeiro entraram no estoque. Qualquer matria-prima que no atenda s especificaes deve ser isolada dos materiais aceitveis, identificada como rejeitada e retornada ao fornecedor ou destruda prontamente. Os contratos com fornecedores qualificados facilitam a base de entendimento. O fracionamento de matrias-primas conforme a demanda, seguindo o programa de fabricao, deve respeitar as mesmas exigncias, devendo ser adequadamente acondicionadas e encaminhadas s reas de produo. O fluxo de materiais e insumos durante a fase de manipulao, envase e embalagem deve ser acompanhado de documentao pertinente que especifique qualitativamente e

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quantitativamente cada item envolvido em determinado produto. Igualmente, o fluxo de amostras deve ser considerado em funo da etapa e ensaio analtico a que devem ser submetidos. A quarentena dos produtos em processo deve ser em rea destinada para este fim, respeitados todos os cuidados j mencionados para os insumos, at que no final o destino do lote aprovado para distribuio e comercializao seja encaminhado para o setor de armazm de embarque. Mesmo em relao comercializao dos produtos aprovados, o fluxo dos mesmos deve ser devidamente anotado, a fim de permitir o acompanhamento da distribuio geogrfica e eventual necessidade de recolhimento dos mesmos por razes diversas. Como no caso de insumos rejeitados, os produtos recolhidos ou devolvidos, imprprios para uso, seja pela expirao do prazo de validade ou por alguma avaria que tenha quebrado a integridade dos mesmos devem ser prontamente destrudos, conforme os procedimentos legais vigentes. Cuidado especial merece tambm a agregao de itens distintos envolvidos na fabricao de um determinado lote, de forma a minimizar probabilidade de erros na formulao, contaminao cruzada ou mesmo inverso de componentes. salutar a dupla conferncia, por funcionrios distintos, no momento da pesagem, em rea especfica e empregando balana de sensibilidade adequada e preferivelmente com etiqueta registradora. No caso de produtos estreis o fluxo deve ser unidirecional, de forma a impedir a eventual mistura entre itens submetidos ou no ao processo esterilizante, e ainda assim preferivelmente empregando indicadores qumicos que identifiquem com cores a submisso ao processo. Os produtos j embalados, porm aguardando aprovao, seja no caso de produtos estreis, com maior envolvimento de tempo ou mesmo de no estreis, devem ser mantidos em rea de quarentena, fisicamente segregada, at que a Unidade de Controle Farmacutico proceda liberao formal dos produtos, quando sero transferidos ao estoque de produtos terminados. Ou, em caso de rejeio, encaminhados para reprocesso ou destruio conforme pertinente.

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5.3. DOCUMENTAO

Dentro da filosofia de Boas Prticas de Fabricao a documentao inerente a todos os procedimentos envolvidos na fabricao de produtos farmacuticos, cosmticos e correlatos deve ser adequadamente preparada, padronizada aps validao, usada e arquivada, a fim de garantir a qualidade dos itens produzidos, cujo perfil pode ser verificado posteriormente.

5.3.1. Limpeza e Sanitizao de reas Seja no que tange limpeza ou sanitizao, as metas, procedimentos operacionais, profundidade de estudo e detalhamentos devem considerar o tipo de produo envolvida, seja quanto exigncia de pureza qumica ou microbiana, riscos envolvidos na contaminao cruzada, forma e formulao ou grau de automatizao, diagramas e fluxogramas, identificao de equipamentos, vlvulas, tubulaes, tempo entre final de uso e operaes de limpeza. A constatao de que a limpeza efetuada tenha sido eficaz na remoo total ou parcial, seja de excipientes, princpios ativos, produtos de decomposio e sub-produtos, outros produtos, microrganismos (eventualmente decorrentes da proliferao em limpezas mal planejadas) e mesmo detergentes empregados na prpria limpeza merece comprovao empregando metodologias descritas durante a validao do processo. Os processos de limpeza devem considerar aspectos inerentes classificao da rea, ao tipo de produto estril ou no estril, formas lquidas ou ps higroscpicos, contaminaes cruzadas, entre outras variveis. A limpeza das reas produtivas assim como dos equipamentos, sendo neste caso crucial o nvel de contato entre estes e o produto em questo, deve ser comprovadamente eficaz. O procedimento, sempre escrito, deve considerar este contato, o tipo de superfcie e de

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acabamento. Deve tambm descrever a metodologia analtica de deteco dos resduos e amostragem, se obtida por contato direto de superfcie (swabs), por enxagues ou monitorao indireta. Deve haver limites aceitveis previamente estabelecidos, assim como controles negativos. A validao do processo de limpeza deve abranger aspectos qumicos e microbiolgicos.

5.4. CONTROLE DAS ETAPAS DE FABRICAO

Dentre os aspectos de controle, com maior participao para a qualidade final do produto, pois as caractersticas nele desejveis so obtidas durante a fase de fabricao propriamente dita. Para isto, pode-se definir a fabricao (produo, elaborao) como o conjunto de todas as etapas que intervm na obteno de um produto. Este conceito necessariamente implica na compreenso quanto ao nmero de lote do produto. Lote a quantidade total de unidades de um determinado produto obtido atravs de um ciclo de fabricao, cuja identidade se faz atravs de um nmero ou combinao nmero-letra, conforme critrio de cada empresa. Isto implica em dizer que a homogeneidade inerente a cada uma das unidades caracterstica fundamental. A importncia das especificaes padronizadas, j mencionada, para que todos os lotes sejam igualmente eficazes e seguros, implica na necessidade de padronizao das operaes produtivas de modo que as unidades pertencentes a diferentes lotes sejam sempre equivalentes entre si. Portanto, os procedimentos de produo devem ser devidamente estudados e padronizados, resultando no que se chama de ficha de fabricao (ou ordem de fabricao, relatrio de produo etc.).

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5.4.1. Controle de Matrias-Primas Especificaes de matrias-primas devem ser escritas em terminologia precisa, devem ser completas, fornecer detalhes especficos dos mtodos do teste, tipo de instrumentos, e estabelecer a tcnica de amostragem. As amostras e as prprias matrias-primas devem, por sua vez, ser adequadamente identificadas. As etapas operacionais envolvem o fabricante para que inspecione fisicamente o material recebido e registre o nmero de lote para todas as matrias-primas recebidas e as mantenha em quarentena at serem aprovadas para uso. Cada matria-prima amostrada de acordo com procedimentos-padro de amostragem e encaminhada ao laboratrio de controle de qualidade para testes. Se aceitvel, ser transferida para a rea de estocagem de aprovados, e adequadamente identificada com nmero do item, nome do material, nmero do lote, data de liberao, data de reteste, e assinatura do inspetor responsvel. O reteste efetuado, conforme necessrio, para garantir que no momento do uso ainda haja conformidade do item especificao. O departamento de garantia de qualidade deve manter retidas amostras de matriasprimas ativas em quantidades correspondentes ao menos a trs vezes a quantidade necessria para execuo de todos os testes exigidos. Estas amostras devem ser retidas pelo menos 5 anos, e conforme a legislao brasileira, ao menos at um ano aps decorrido o prazo de validade do produto. Qualquer matria-prima que no atenda s especificaes deve ser isolada dos materiais aceitveis, identificada como rejeitada, e retornada ao fornecedor ou destruda prontamente. Para verificar a conformidade a especificaes do fabricante, inspees peridicas so pertinentes ao controle total de matrias-primas. Este procedimento permite detectar contaminao cruzada decorrente de ms prticas de amostragem, de falhas no house keeping

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ou de outra origem. No geral, as matrias-primas podem ser classificadas em dois grupos: ativas ou teraputicas e inativas ou inertes.

5.4.2. Controle em Processo Conformidade aos padres dos compndios como base nica para julgar a qualidade de uma forma final de dosagem pode conduzir a concluso errnea. Obviamente, estas especificaes no podem cobrir todas as possibilidades de afetar adversamente a qualidade de um produto. Esta dificuldade advm em parte do fato que as formas finais de dosagem so freqentemente produzidas em lotes de centenas ou milhares de unidades. H uma real e significativa diferena entre um produto terminado conforme especificao de compndio e a garantia de qualidade conferida durante o processo de fabricao. As normas de Boas Prticas de Fabricao enfatizam fatores ambientais para minimizar contaminao cruzada de produtos, erros na rotulagem e embalagem, e a integridade dos registros de produo e controle de qualidade; porm nem sempre so suficientes para minimizar variaes lote a lote na produo. Portanto, funo fundamental do programa em processo da garantia de qualidade certificar que formas finais de dosagem apresentem pureza e qualidade uniformes num lote e entre lotes. Isto obtido identificando as etapas crticas no processo de fabricao e controlando-as dentro de limites definidos.

5.4.2.1. Garantia de Qualidade Antes do Incio da Produo 5.4.2.1.1. Controle Microbiolgico e Sanitizao Ambiental

Para garantir que formas finais de dosagem sigam padres elevados de qualidade e pureza, necessrio um programa efetivo de sanitizao na planta, alm do programa bem elaborado de combate a insetos e roedores na planta e seus arredores. Limpeza, vestimenta e proteo aos cabelos do pessoal envolvido devem ser exigidas. Pisos, paredes e tetos devem ser

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isolados do meio externo, proporcionar fcil limpeza e estar em bom estado de conservao. Ventilao adequada, temperatura e umidade adequadas devem ser proporcionadas. Filtros de ar assim como sistemas adicionais de reteno de poeiras, necessrios em reas produtivas, devem ser, assim como o prprio ar, monitorados num esquema de rotina. Tambm a gua fornecida, seja potvel, destilada ou deionizada deve apresentar fluxo adequado, alm de adequao aos aspectos de pureza qumica e microbiolgica.

5.4.2.1.2.

Matrias-Primas

O pessoal da Garantia de Qualidade deve verificar os recipientes originais de matriasprimas liberadas quanto limpeza antes de serem recebidas pelo departamento de produo. A maioria das matrias-primas, porm, pesada em uma rea especfica e transferida para recipientes secundrios que circulam apenas no departamento de produo. As matrias-primas destinadas fabricao de um lote de produto especfico, aps a pesagem devem ser armazenadas juntas, em local especificamente designado. 5.4.2.1.3. Equipamento de Produo

Elementos da Garantia de Qualidade devem assegurar que os equipamentos de fabricao esto planejados, localizados e mantidos de forma tal a facilitar a limpeza, que so adequados para o uso e que minimizam o potencial de contaminao durante a fabricao. Equipamentos e utenslios de fabricao devem ser cuidadosamente limpos e mantidos de acordo com instrues escritas especficas. Sempre que possvel, o equipamento deve ser desmontado e completamente limpo para impedir transferncia de resduos das operaes anteriores. Registros adequados de tais procedimentos e testes, se apropriados, devem ser monitorados por funcionrios da Garantia de Qualidade. Anteriormente ao incio de qualquer operao de produo, o pessoal da Garantia de Qualidade deve se certificar de que equipamentos e utenslios adequados para cada estgio de

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fabricao estejam sendo empregados. Equipamentos devem ser identificados por etiquetas contendo o nome, formas de dosagem, e nmero de lote do produto a ser processado. Equipamento usado para lotes especiais de produo deve ser completamente separado no departamento de produo, e todas operaes que produzam poeiras devem ser protegidas com sistema de exausto adequado para impedir contaminao cruzada e recirculao do ar contaminado. Medidas mais drsticas se fazem necessrias no caso de antibiticos, hormnios e produtos citostticos, exigindo plantas dedicadas e sistemas de ventilao autnomos para os funcionrios, entre outros itens. Equipamentos de pesagem e outros usados nos processos produtivos e de controle de qualidade, tais como termmetros e balanas, devem ser calibrados e verificados a intervalos adequados por mtodos apropriados; registros de tais testes devem ser mantidos pelo pessoal da Garantia de Qualidade e da produo.

5.4.2.1.4.

Garantia de Qualidade na Produo

5.4.2.1.4.1. Matrias-Primas Somente matrias-primas liberadas, adequadamente etiquetadas, podem ser transferidas para a rea produtiva. Dependendo da natureza do produto, elementos da Garantia de Qualidade devem verificar que a temperatura e umidade na rea estejam nos limites especificados para o produto. Se a temperatura e/ou umidade relativa estiverem fora dos limites especificados, a produo deve ser informada e tomadas aes corretivas. Representante da Garantia de Qualidade deve verificar e documentar o equipamento adequado, adio de ingrediente, tempo de mistura, tempo de secagem, filtrao e tamanho de tamises usados, quando pertinente.

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A certos momentos, so tomadas amostras para o laboratrio de controle de qualidade para ensaio de potncia e qualquer outro teste que seja necessrio para garantir uniformidade e pureza do lote. Recipientes de matrias-primas em processo so rotulados com nome do produto, nmero de lote, e peso lquido do contedo.

5.4.2.1.4.2. Processo A responsabilidade por assegurar identificao adequada de todos os recipientes de matrias-primas e equipamentos, sua limpeza e permanncia na rea especfica, assim como adequada execuo das etapas do processo produtivo so atribuies da Garantia de Qualidade. O processo de fabricao inicia com o ajuste do equipamento de produo para a elaborao da forma final de dosagem com os limites especificados para um determinado produto. A cada passo significativo no procedimento, o pessoal da Garantia de Qualidade verifica que o processo ocorra de acordo com instrues por escrito e em conformidade a padres exigidos. Um grupo varivel de testes geralmente usado para medir caractersticas de controle em processo incluindo aparncia fsica, cor, odor, espessura, dimetro, friabilidade, dureza, variao de peso, tempo de desagregao, volume, viscosidade e pH. Tais testes em processo so planejados para impedir o surgimento de problemas durante a fabricao de formas finais de dosagem. Conceitos de Boas Prticas de Fabricao requerem que a garantia de qualidade em processo seja adequadamente documentada atravs de todos os estgios de fabricao. Nessas etapas, amostras so retiradas e testadas, e os resultados registrados em formulrios prprios. Ocorrendo desvios dos limites especificados, as aes corretivas so tomadas e registradas; ento feita nova amostragem e testes para determinar se a qualidade do produto passou a atender os limites. Em algumas circunstncias, como no caso de variao de peso segundo o

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compndio, o desvio deve dirigir a que unidades produzidas antes da ao corretiva sejam isoladas, contadas e rejeitadas. Adicionalmente, pores de amostra inicial, intermediria e final do processo so usadas para fornecer amostras mdias para o controle laboratorial, para anlise final e liberao do produto.

5.4.2.1.4.3. Controle de Materiais de Acondicionamento Define-se como material de acondicionamento o recipiente que contm ou que est em contato direto com o produto. O dispositivo de fechamento considerado parte do acondicionamento. Apesar de tendncias distintas de padronizao de nomenclatura, inclusive ao nvel de MERCOSUL, tratam-se ainda de terminologias no sedimentadas, atendo-se portanto adotada pela farmacopia americana (USP). Materiais de acondicionamento no devem interagir fisicamente ou quimicamente com o produto terminado, no interferindo com a sua qualidade, particularmente a sua potncia e pureza. As suas especificaes so planejadas na dependncia do produto a ser acondicionado. As caractersticas a serem planejadas numa especificao de material de acondicionamento so de natureza mecnica (dureza, flexibilidade), fsica (hermeticidade, permeabilidade) e qumica, devendo os materiais ser atxicos e compatveis com o produto contido.

5.4.2.1.4.4. Controle de Materiais de Embalagem e Informativos O controle de produo envolve um formulrio de embalagem que contm o nome do produto, nmero de lote, nmero ou cdigo de rtulos, insertos (bulas e outros), materiais de embalagem (cartonagem) a serem utilizados, operaes a serem executadas e a quantidade total terica a ser embalada. Como eventualmente podem ocorrer danos com os rtulos durante a operao de embalagem, um nmero definido em excesso quele realmente requerido deve ser

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emitido; todos os rtulos devem ser contabilizados no final da produo, e os no usados devem ser contados antes de sua destruio, uma vez que a identificao inerente data e lote de fabricao est nele impresso, no servindo para outro ciclo de embalagem. O pessoal da Garantia de Qualidade inspeciona e verifica todos os componentes e equipamentos a serem usados na operao de embalagem, garantindo identificao adequada, limpeza correta, e que todo o material de rotulagem e embalagem da operao anterior tenha sido completamente removido. Reconciliao adequada e disposio sobre rtulos no usados e desprezados deve ocorrer no final da operao de embalagem.

5.4.2.1.4.5. Controle do Produto Testes finais do produto terminado so feitos no laboratrio de controle de qualidade, e planejados para determinar conformidade com especificaes. Ento, os testes do produto terminado quanto conformidade com padres pr-estabelecidos antes da liberao do produto para embalagem e subseqente distribuio consiste em fator crtico para a garantia de qualidade. Quando efetuados ao longo do processo, garantem que cada unidade contenha a quantidade de frmaco conforme declarado no rtulo, que o mesmo seja estvel na formulao em seu acondicionamento final durante o perodo de vida til, e que as unidades de dosagem no contenham substncias estranhas txicas. Normalmente, o planejamento dos parmetros de teste, procedimentos e especificaes feito durante o desenvolvimento do produto. Posteriormente, os resultados dos estudos feitos durante lotes-piloto e de produo devem ser submetidos anlise estatstica, para avaliar a preciso e exatido de cada procedimento quanto a cada caracterstica. Cada lote de produto na fase de granel (bulk) deve ser testado para garantir que o produto esteja de acordo com as especificaes (identidade, qualidade, potncia e pureza). Elemento da

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Garantia de Qualidade autoriza a liberao para processamento posterior tendo por base testes laboratoriais fsicos, qumicos e/ou biolgicos. Testes exigidos pelos compndios oficiais aplicam-se a todos os fabricantes de medicamentos. Entretanto, no exigido do fabricante empregar procedimentos analticos oficiais para avaliar a conformidade de seus produtos com os requisitos do compndio. Pode-se empregar mtodos alternativos que sejam mais especficos, exatos ou econmicos que aqueles oficiais. No caso de uma ao legal, porm, o procedimento do compndio o de referncia para determinar a conformidade.

5.4.2.1.4.6. Garantia de Qualidade Durante Operao de Embalagem Se a anlise do laboratrio de controle de qualidade confirmar que o produto apresenta conformidade com as especificaes, e se a auditoria de Garantia de Qualidade indicar que operaes de fabricao so satisfatrias, o produto bulk liberado para embalagem. Deve-se certificar da segregao frente embalagem de outros lotes, periodicamente inspecionar as linhas de embalagem e verificar o atendimento quanto conformidade com especificaes escritas. Equipamentos automatizados podem ser providos de dispositivos de teste para controlar enchimento das unidades. Alternativamente, um tcnico pode inspecionar visualmente todas as embalagens. Em ambos os casos, o pessoal da Garantia de Qualidade deve efetuar uma inspeo independente alm de aleatoriamente amostrar unidades a serem retidas em cada lote. As amostras retidas de cada lote devem consistir de ao menos trs vezes a quantidade necessria para efetuar todos os testes exigidos para atendimento s especificaes. Estas amostras devem ser retidas por ao menos um ano aps a data de expirao e devem ser estocadas em sua embalagem original sob condies consistentes com a rotulagem do produto.

5.4.2.1.4.7. Procedimentos Gerais

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Os procedimentos gerais, tais como sanitizao, operaes manuais ou automatizadas, devem sempre merecer validao e estar devidamente documentados.

5.4.3. Controle de Produtos Terminados Considera-se que, tendo sido produzido em obedincia aos conceitos de qualidade, com atendimento a Boas Prticas de Fabricao, no final do processo o produto estar certamente atendendo s especificaes planejadas. Ainda assim, para cada produto dever haver uma especificao para esta etapa, definindo ensaios e limites a serem considerados para o produto embalado. So no geral efetuados doseamentos do princpio ativo, por mtodo fsico-qumico ou microbiolgico, ensaios de pureza microbiana, entre outros. A especificao deve contemplar os aspectos legais inerentes a cada grupo de produto, respeitando o tipo de utilizao, seja do medicamento, cosmtico ou correlato. Embalagens individuais e mltiplas devem estar com as caractersticas de hermeticidade necessrias, e inscries de nmero de lote, fabricante, endereo, nmero de registro no Ministrio da Sade, data de fabricao e data ou prazo de validade do produto, alm do nome do tcnico responsvel e o seu nmero de registro no Conselho de Classe. Instrues de uso ou bula devem estar disponveis nas embalagens individuais. O produto apenas dever receber a aprovao final aps obtidos resultados satisfatrios em todos os itens da especificao, o que implica, para produtos estreis, em perodo de no mnimo 7 a 14 dias de espera aps o processo esterilizante.

5.4.4. Auditoria Auditoria interna, tambm denominada de auto-inspeo, exigncia para o atendimento s Boas Prticas de Fabricao. Atribuio da Garantia de Qualidade, envolve a inspeo de todas as etapas produtivas, procedimentos e instalaes envolvendo a rea industrial, assim

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como de suprimentos e distribuio dos produtos terminados. Exige que o processo de fabricao seja adequadamente documentado atravs de todos os estgios de operao: o histrico de cada tarefa, incluindo os materiais iniciais, equipamento usado, pessoal envolvido na produo e controle at a embalagem estar encerrada. Ainda, investiga a rastreabilidade, da matria-prima ao produto, e este at o local de consumo. Efetuada peridicamente, detecta eventuais falhas e investiga a implementao de aes corretivas, preparando a estrutura para inspees externas.

5.5. BOAS PRTICAS DE FABRICAO NO CONTROLE DA CONTAMINAO

Boas Prticas de Fabricao (BPF), tambm freqentemente evocadas no idioma de sua origem como current Good Manufacturing Practice (cGMP), enfatizam o princpio de que os produtos sejam fabricados de forma consistente com a qualidade apropriada ao uso tencionado do produto. ento uma filosofia que se estende a servios, equipamentos, processos, documentao, compras, distribuio e pessoal. O controle de contaminao microbiana um aspecto importante das BPF e deve ser parte integrante do programa. Tradicionalmente, o controle microbiolgico do processo era associado fabricao dos produtos estreis. Porm, a experincia mostrou que a contaminao microbiana pode tambm acarretar problemas em uma ampla abrangncia de produtos, como comprimidos, cremes, pomadas e lquidos orais ou tpicos. Embora exista a presena de conservantes nessas formulaes, atualmente h presso no sentido da sua eliminao ou reduo de sua concentrao. Portanto, tem sido crescente o nvel de controle e monitorao do processo. Um risco desta nova posio que o controle microbiolgico se torne apenas um modismo caro e no eficaz. A atitude alternativa e prefervel que se proceda reavaliao completa da formulao, simultaneamente com avaliao criteriosa do sistema de fabricao e

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do nvel de qualificao e treinamento do pessoal envolvido no processo produtivo. Desta forma se obtm um programa de custo-compatvel, que permite elevado nvel de adequao do produto sua finalidade. Entre muitas das interpretaes dadas a BPF, a mais sucinta : faa certo na primeira vez, sempre. A maior parte das empresas incorpora verificaes ou testes aps ocorrerem falhas. Isto no atende a BPF, cuja correta aplicao leva a prever a falha e incorporar a verificao anteriormente sua ocorrncia, ainda que isto exija muito mais esforos e dedicao.

5.5.1. Princpios de Zoneamento Esta prtica muito comumente aplicada a reas limpas, as quais so mantidas sob acesso restrito a funcionrios treinados e adequadamente paramentados. O nmero de renovaes de ar, seu fluxo laminar ou turbulento e complexidade de barreiras so alguns dos parmetros que refletem a exigncia da condio mais restrita. Este conceito pode ser estendido s demais reas, pois exemplificativamente, uma rea de fabricao de lquidos orais pode exigir um controle de sanitizao mais freqente e rigoroso que uma rea de pomada no aquosa. De forma coerente, filtrao do ar e vestimentas devem refletir o distinto grau de proteo necessrio exigido pelo produto.

5.5.2. Vestimenta Todos os funcionrios a adentrar numa rea de produo farmacutica devem estar devidamente paramentados. As vestimentas devem ser recentemente lavadas. Por vezes, no interesse da economia, as vestimentas so usadas sem troca por toda uma semana: isto conflita com a meta de obteno de baixos nveis de bioburden, e pode se constituir em um contra-

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senso; investir recursos na determinao do bioburden, e paralelamente no propiciar condies para que o resultado seja adequado. Outro aspecto fundamental relativo vestimenta, que no caso aplicado s salas limpas, deve recobrir todo o corpo, alm de ser constituda de material sinttico, com trama suficientemente fechada e principalmente que no libere fibras. No que diz respeito caracterstica de reteno de partculas, a vestimenta se assemelha a um filtro, entretanto tendo internamente um operador, o que leva a certas exigncias adicionais. Dentre os tipos de tecelagem mais eficientes esto o tafet ou tela, por apresentarem a maior quantidade de cruzamentos e ser, tambm, o mais resistente e durvel. Nesta padronagem um fio de ordume (constitudo pelos fios que se encontram no sentido longitudinal do tecido, e representado pela unidade de comprimento) passa por cima da trama (constituda pelos fios que se encontram no sentido transversal do tecido, e representada pela unidade de largura), o outro fio de ordume por baixo da mesma trama e assim sucessivamente, sempre mantendo a perpendicularidade entre eles. No processo de escolha de um tecido, as informaes devem ser baseadas num mesmo processo de medida, permitindo parmetro de comparao. Com o intuito de no liberar partculas, tornando-se fontes de contaminao, os tecidos constituem-se de fios ou fibras que no se partam com facilidade. Para os propsitos de reas limpas, os tecidos so obtidos pela tecelagem de filamentos contnuos de fibras sintticas, normalmente polister, com ou sem a introduo de fios de composio distinta, geralmente carbono, para permitir propriedades anti-estticas. Fibras de Nylon tm sido menos empregadas, por estarem associadas a reaes do tipo alergnico e condio de menor conforto ao operador. Aspecto tambm a considerar a resistncia esterilizao, geralmente via autoclavao. Embora outros processos de esterilizao possam ser adotados, apresentam limitaes como o xido de etileno que pode ser mantido como resduo indesejvel, txico, e a irradiao que

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tende a ocasionar quebra de zper plstico, e inclusive influencia no sentido da abertura dos poros do tecido. H tambm aspectos de confeco a considerar, como detalhes de costuras rebatidas, ausncia de bolsos, ajustes de punhos e tornozelos (lycra, botes de presso em ao inoxidvel), assim como fecho (zper de nylon, bronze ou sistema velcro). Capuz, sapatos/botas e luvas permitem opes distintas, sempre tendo em vista a classificao de rea, a durabilidade do material e o conforto do operador. Opo adicional o emprego de macaces com capuz em Tyvek um material no tecido em fibras de polietileno de alta densidade. excelente como barreira, apresenta bom nvel de conforto e elimina as preocupaes quanto lavanderia, por se tratar de material No caso do material reusvel h que se manter o objetivo das vestimentas, de reduzir a liberao de microrganismos assim como de partculas no viveis ao ambiente. Os procedimentos de lavagem e esterilizao (ou sanitizao) aplicados s mesmas tendem a danific-las, tornando-as no mais adequadas ao uso tencionado. H mtodos disponveis para testar as roupas com relao adequao ao uso, devendo ser aplicados na avaliao da vida mdia das vestimentas, permitindo reposio planejada.

5.5.3. Limpeza e Desinfeco Devem ser preparados procedimentos escritos sobre a limpeza e desinfeo de reas e equipamentos, com esquemas incluindo nome e concentrao dos produtos empregados, qualidade da gua usada nas preparaes e meia vida dos produtos diludos. Deve ainda ser desenvolvida a respectiva validao, incluindo avaliao das propriedades desinfetantes dos produtos empregados e resultados obtidos com o seu emprego. Devem ser considerados aspectos como contaminao das solues, irritabilidade durante o seu uso e ataque a superfcies.

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5.5.4. Treinamento O treinamento, parte integrante de um protocolo de auditoria, deve ser criativo e refletir condies reais da planta em questo. Programas comercialmente disponveis devem ser evitados, pois, em geral, nada tm a ver com a situao real, alm de normalmente apresentarem uma linguagem no acessvel ao nvel cultural dos funcionrios. Felizmente, o controle microbiolgico uma rea em que teoria e prtica so simultaneamente interessantes e educacionais. Os efeitos de prticas inadequadas podem facilmente ser demonstrados pelo uso de placas, swabs e contadores de partcula. importante lembrar que a visualizao das colnias bacterianas que se desenvolvem sobre meio nutriente recurso interessante para que os funcionrios entendam a importncia dos treinamentos. Os programas devem ser documentados, com controle de freqncia e nveis de aproveitamento observados. Quando bem sucedido, um programa de treinamento incute no operador sentido de envolvimento, comprometimento e domnio de seu trabalho. Toda a estrutura gerencial da planta deve tambm estar comprometida com o treinamento.

5.5.5. Motivao fundamental que se crie um ambiente, no qual a motivao seja cultivada. Entretanto, numa rea limpa o escopo do trabalho limitado e restrita a possibilidade de promoo. Assim, deve-se oferecer ao trabalhador a identificao com o produto, de forma a obter o seu envolvimento e orgulho pelas realizaes. Estas necessidades bsicas podem ser preenchidas na maioria das reas limpas e ambientes controlados. Fatores ergonmicos tambm vo influenciar na motivao e moral dos operadores. O rudo uma das principais causas de desconforto. O isolamento e confinamento contribuem tambm para a insegurana. Independentemente de quanto moderna seja uma fbrica, deve-se

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dar nfase interao humana. Um grupo motivado e treinado estar alerta quanto a possveis fontes de contaminao do produto e ir informar pessoa responsvel. A no motivao tender a fazer com que filtros no sejam trocados conforme o cronograma, que equipamentos no sejam devidamente limpos, que danos fbrica no sejam comunicados, e que outros pequenos pontos extremamente importantes passem desapercebidos.

5.5.6. Procedimentos Os procedimentos escritos tm duas principais funes: permitem que todas as atividades sejam feitas de maneira reprodutvel, devendo ser escritos seguindo etapas, em linguagem fcil e no imperativo. Devem conter freqncia de execuo quando for o caso, e definir responsabilidade; o uso de diagramas muito efetivo. Adicionalmente, desvinculam tarefas de elemento nico, permitindo que na sua ausncia haja continuidade do trabalho. Uma regra simples para avaliar se um procedimento foi bem escrito solicitar sua execuo por pessoa experiente, porm que no trabalhe no setor; se a execuo for correta sem a necessidade de perguntas, ento o procedimento claro. Se formuladas questes, elas estaro indicando etapas esquecidas, ou mal redigidas.

5.5.7. Monitorao Consiste em acessar ou dimensionar parmetros no sentido de estimar as condies da rea, produto ou processo, objetivando confirmar ou no o atendimento dos parmetros aos padres estabelecidos, assim permitindo definir as aes necessrias, dependendo de se atingir limites de alerta ou de ao. Os resultados do programa de monitorao devem ser documentados com agilidade, de maneira que as tendncias possam ser detectadas nos primeiros momentos. Resultados no usuais devem ser investigados imediatamente.

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5.5.8. Documentao O ser humano no tem, no geral, afinidade por leituras e registros, de forma que por muitas vezes, embora o trabalho seja efetuado, falta a sua documentao. Em momentos posteriores, torna-se difcil reconstruir os dados na incidncia de problemas similares; os primeiros princpios devem ser retomados, perdendo-se em histrico e em tempo despedido. atualmente prtica comum introduzir os resultados da monitorao em programa de computador, facilitando e agilizando a anlise de tendncias.

5.5.9. Influncia do Projeto na rea Produtiva

O ambiente das reas de fabricao e estocagem pode ter impacto sobre a qualidade microbiana do produto terminado. A extenso deste impacto depender tambm do projeto dos equipamentos, prticas operacionais, processos e adequao das vestimentas. Uma variedade de pontos-chave deve ser considerada na questo da edificao, tais como: acabamento das superfcies; sistemas de aquecimento, ventilao, exausto e condicionamento de ar; drenos e equipamentos. Aspecto inicial a ser considerado quanto ao local de instalao da planta, que dever ser escolhido em funo de seu baixo nvel de contaminao ambiental, poluentes atmosfricos, vibraes do solo, inundaes etc. O revestimento de paredes, pisos, forros e outros componentes no podem ser porosos nem gerar partculas, devendo apresentar superfcies lisas, isentas de salincias e reentrncias, lavveis e impermeveis, resistentes a eroso e aos agentes de limpeza e desinfeo. Normalmente os materiais usados so: resinas epoxi ou poliuretano; ao inoxidvel; alumnio

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anodizado; laminado melamnico. Tudo deve ser concebido para facilitar a limpeza dos cantos arredondados, das portas desmontveis, dos visores, das luminrias e dos acessrios de circulao do ar. As tubulaes de fluidos e eletrodutos devem ser embutidas ou internas a dutos tcnicos desmontveis. Ao configurar a planta, o arquiteto deve reservar espaos suficientes para o acesso das pessoas e dos produtos (vestirios e antecmaras), para o corredor de circulao, a fim de que no interfiram na produo, para os equipamentos de tratamento de ar e dutos de insuflao e retorno dos mesmos.

5.5.10. Processo de Fabricao O processo de fabricao exerce grande influncia sobre os nveis de contaminao microbiana do produto. fundamental que se defina os estgios de fabricao que podem causar alteraes significantes, garantindo controle adequado nesses estgios. Dentre os vrios aspectos a considerar esto as matrias-primas, a gua, a natureza dos produtos (secos, lquidos, cremes ou pomadas, estreis), reatores ou tanques, processos esterilizantes (filtrao, trmico ou qumico) e de enchimento, alm do bioburden.

5.6. MONITORAMENTO AMBIENTAL

O monitoramento ambiental uma importante ferramenta para a administrao dos recursos naturais. Este oferece conhecimento e informaes bsicas para avaliar a presena de contaminantes, para compreender os sistemas ambientais e para dar suporte as polticas ambientais.

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O monitoramento consiste em observaes repetidas de uma substncia qumica ou mudana biolgica, com um propsito definido de acordo com um planejamento prvio ao longo do tempo e espao, utilizando mtodos comparveis e padronizados. Os cinco mtodos de monitoramento ambiental que devem ser seguidos para avaliar o risco de contaminantes para os organismos e classificar a qualidade ambiental dos ecossistemas so:
Monitoramento qumico avalia a exposio medindo os nveis de contaminantes bem

conhecidos nos compartimentos ambientais;


Monitoramento da bioacumulao avalia a exposio medindo os nveis de

contaminantes na biota ou determinando a dose crtica no local de interesse (bioacumulao);


Monitoramento do efeito biolgico avalia a exposio e o efeito determinando as

primeiras alteraes adversas que so parcial ou totalmente reversveis (biomarcadores);


Monitoramento da sade avalia o efeito atravs do exame da ocorrncia de doenas

irreversveis ou danos no tecido dos organismos;


Monitoramento dos ecossistemas avalia a integridade de um ecossistema atravs de

um inventrio de composio, densidade e diversidade das espcies, entre outros. Quando organismos vivos so usados no monitoramento ambiental para avaliar mudanas no meio ambiente ou na qualidade da gua o monitoramento chamado de monitoramento biolgico ou biomonitoramento. Para que um biomonitoramento seja bem sucedido importante a escolha do biomonitor que atenda as seguintes caractersticas. Capacidade de acumulao mensurvel da substncia qumica de interesse; Distribuio generalizada na rea de estudo; Ausncia de variaes sazonais na quantidade disponvel para amostragem; Capacidade de acumulao diferenciada do poluente, relacionando a intensidade de exposio ao fator ambiental. Esta relao deve poder ser descrita de uma forma quantitativas ou semi-quantitativas;

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Ausncia de variaes sazonais na capacidade de acumulao; Acumulao da substncia qumica apenas pela via que se quer avaliar; Identificao taxonmica fcil; Que tenha sua fisiologia, ecologia e morfologia suficientemente estudada. Assim, durante o biomonitoramento so utilizados biomarcadores (celulares, tecido, fluidos corporais, mudanas bioqumicas, entre outros) para indicar a presena de poluentes ou como sistema de aviso de efeitos iminentes.

5.6.1. Biomarcadores O biomarcador uma caracterstica que pode ser: bioqumica, fisiolgica, morfolgica ou histolgica, utilizada para indicar a exposio ou o(s) efeito(s) de uma substncia sobre o organismo de um ser vivo. A qualidade de um biomarcador est relacionada a capacidade de uma mudana ser medida antes que alguma consequncia adversa significativa ocorra no organismo de interesse. Um biomarcador ideal deve ser especfico para um composto ou classe de compostos, podendo ser utilizado em diferentes espcies. Convm salientar que necessrio que o sistema envolvido seja bem conhecido para que se possa interpretar a influncia que o meio ambiente exerce sobre ele. A ordem seqencial de resposta ao estresse causado por um poluente em um sistema biolgico visualizado na figura abaixo. O efeito em nvel hierrquico superior sempre precedido por mudanas no processo biolgico. Desta forma, o biomarcador utilizado como um sinal prvio refletindo a resposta biolgica causada por uma toxina.

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Figura 1 - Representao esquemtica da ordem seqencial de respostas ao estresse causado por poluentes em um sistema biolgico.

Os biomarcadores podem ser divididos em trs classes:


Biomarcadores de exposio: so aqueles que detectam e mensuram a quantidade de

uma substncia exgena, seus metablitos ou o produto da interao entre o xenobitico e a molcula ou clula alvo em um compartimento do organismo;
Biomarcadores de efeito: so aqueles que incluem alteraes bioqumicas, fisiolgicas

ou outra alterao nos tecidos ou fluidos corporais de um organismo que podem ser reconhecidos e associados com uma doena ou possvel prejuzo a sade;
Biomarcadores de suscetibilidade: so aqueles que indicam a habilidade adquirida ou

inerente de um organismo a responder a exposio a um xenobitico especfico, incluindo fatores genticos e mudanas nos receptores que alteram a suscetibilidade de um organismo a uma dada exposio. Os biomarcadores de exposio podem ser usados para confirmar ou estimar a exposio de indivduos ou de uma populao a uma determinada substncia ou grupo de substncias fornecendo uma relao entre a exposio externa e a dose interna. De acordo com a definio, a bioacumulao de certos contaminantes persistentes em tecido de animais pode ser considerada com um biomarcador de exposio.

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Os biomarcadores de efeito podem ser usados para documentar alteraes pr-clnicas ou efeitos adversos a sade devido a exposio externa e absoro de determinada substncia. Os biomarcadores de suscetibilidade ajudam a elucidar a variao no grau de resposta da exposio a substncias txicas observadas em diferentes indivduos.

5.6.2. Controle Ambiental Mtodo aplicado nas reas de processamento de bateladas, linha de envase, controle de embalagem e fabricao.

5.6.2.1. Amostragem de superfcies Teste que avalia a condio microbiolgica de superfcies, preferencialmente tratada por processo de sanitizao. O mtodo consiste em esfregar swabs (zaragotoa) estreis previamente umedecidos em soluo de tampo fosfato pH 7,2 ou cloreto de sdio 0,85 a 0,9% esterilizado, em superfcie delimitada de equipamento, objeto ou superfcie. Aps coleta do material, transferir o swab para um tubo contendo 5 ml de soluo de tampo fosfato pH 7,2, esterilizado ou meio de cultura de escolha, como DE Neutralizing, TSB e outros. Homogeneizar vigorosamente com um agitador de tubos tipo vortex. Transferir 1 ml da suspenso obtida para a placa de Petri previamente identificada e acrescentar 25 ml de meio para contagem de microrganismos (gar casena soja, para bactrias e gar sabouraud-dextrose,para fungos) previamente fundido e resfriado a 45-60C. Homogeneizar o inculo e o meio movimentando a placa sobre a bancada em sentido horrio e anti-horrio, alternadamente. Incubar a 30-35C, de 24 a 48 horas. Aps a incubao, efetuar a contagem e expressar resultados de UFC/cm 2 da rea amostrada.

5.6.2.2. Lavagem de superfcies

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Este teste avalia a condio microbiolgica de embalagens ou de superfcies, preferencialmente tratadas por sanitizantes. O mtodo consiste em verter uma quantidade padronizada de soluo salina a 0,9% p/v esterilizada sobre a superfcie a ser testada (para embalagens empregar 20% de sua capacidade). Homogeneizar e transferir 1 ml da amostra para placa contendo meio de cultura e proceder contagem conforme a tcnica de semeadura em profundidade ou utilizar a tcnica por filtrao em membrana. Expressar os resultados UFC/frasco ou cm2 da superfcie analisada.

5.6.2.3. Amostragem do ar O mtodo consiste na exposio de placas de Petri, contendo meio de cultura adequado e esterilizado em diferentes pontos da rea de teste, por perodo de 15 minutos. Aps o perodo de exposio, incubar as placas em posio invertida, por 48 horas, sob uma temperatura de 3035C ou por um perodo de 48 horas a cinco dias. Aps a incubao, efetuar a contagem expressando resultados em UFC/placa. Procurar conduzir o teste comparativamente em locais e perodos de forte e fraca atividade operacional na rea de teste. Outra opo para a avaliao da quantidade microbiolgica do ar consiste na utilizao de equipamentos capazes de amostrar volume conhecido de ar. O mtodo apresenta como vantagem a determinao da contaminao microbiana do ambiente, pois possvel expressar os resultados em UFC/m3 de ar.

5.7. CONTAMINAO MICROBIANA EM PRODUTOS COSMTICOS

Os produtos submetidos vigilncia sanitria, respeitando as suas particularidades, devem ser produzidos, armazenados, transportados e dispensados de forma a apresentarem a segurana necessria para o seu uso ou consumo. Considera-se neste caso os medicamentos, os

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fitoterpicos, os insumos farmacuticos, correlatos, cosmticos, saneantes e outros produtos, os quais devem respeitar limites microbianos. O limite microbiano de medicamentos e seus insumos, cosmticos e seus adjuvantes, assim como correlatos pode se constituir em ausncia absoluta de formas viveis (estreis) ou sua presena em grandezas definidas, restritas ou no a determinadas cepas microbianas (no estreis). Os distintos critrios estaro sendo adotados, por exemplo, em produtos de uso invasivo (prtese e cateter), de administrao parenteral (injetvel e oftlmico), de produto em contato com epiderme (eletrodo externo e bolsa de ostomia) ou de administrao oral ou tpica (xarope e pomada). No caso de produtos cosmticos, a situao aceita de atendimento a valores mximos aceitveis de contaminante vivel, desde que somado ausncia de determinadas cepas microbianas. Adicionalmente existem exigncias, como para os medicamentos no estreis, de sistema de conservao adequado. Esta situao, hoje universalmente aceita com pequenas variaes em determinados limites, apenas foi atingida aps um longo histrico de problemas e investigaes. Durante a dcada de 1960, principalmente devido preocupao quanto ao crescente nmero de relatos de infeces atribudas a produtos farmacuticos, correlatos de uso mdicos e cosmticos contaminados, iniciaram-se estudos para acessar a extenso do problema e elaborar recomendaes. O objeto dos estudos era identificar a fonte dos contaminantes. Investigaes extensivas foram feitas na Europa, principalmente Sucia e nos Estados Unidos. Nas amostras onde houve identificao do contaminante, a maioria era de bacilos Gram (+) e micrococos, microrganismos geralmente no patognicos. Leveduras e bolores foram tambm comumente encontrados, principalmente em cremes e pomadas. Das espcies tidas como patognicas Pseudomonas aeruginosa e outras Pseudomonas foram freqentemente

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encontradas, alm de espcies de Alcaligenes, Flavobacterium, Acinetobacter, Serratia e Citrobacter.

5.7.1. Fontes de Contaminao Microbiana Para atingir bom nvel de qualidade microbiana nos produtos farmacuticos so fundamental que se conheam as fontes e os mecanismos responsveis por esta contaminao. Os contaminantes microbianos presentes nas matrias-primas sero invariavelmente transferidos ao produto, acrescidos dos oriundos de equipamentos e ambientes produtivos, dos operadores envolvidos e dos materiais de embalagem. No caso dos medicamentos e cosmticos as matrias-primas geralmente empregadas se constituem de ps sintticos, com baixa carga microbiana, porm aquelas de origem natural podem conter elevadas cargas microbianas. Exemplificando, soluo aquosa de menta pode estar altamente contaminada por organismos Gram (-), caso no adequadamente preparado ou estocado. Organismos Gram (-) originados da contaminao aquosa incluem espcies de Acinetobacter, Achromobacter, Enterobacter, Flavobacterium e Pseudomonas. Aqueles de origem entrica so a Escherichia coli e Salmonella spp., as quais podem sobreviver por algum perodo na gua poluda. No caso de correlatos de uso mdico, em grande parte de natureza polimrica, a matria-prima pouco propensa ao crescimento microbiano, e o prprio processo de moldagem a temperaturas elevadas age favoravelmente ausncia de microrganismos. A contaminao oriunda das diversas reas de produo, nas diferentes etapas de fabricao e para distintos produtos, entra tambm em contato com o produto e deve ser cuidadosamente controlada. A multiplicao de contaminantes, particularmente bactrias Gram (-), ocorre rapidamente nos espaos mortos como juntas e vlvulas, onde gua e resduos do produto se acumulam, ocasionando contaminao persistente e de difcil eliminao, resultando em distintos nveis de risco na dependncia do tipo de produto considerado. Situao especfica

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para a obteno de tubos de material polimrico, diz respeito qualidade microbiana de gua de resfriamento, assim como do ar insuflado, durante o processo de extruso, que podem contribuir para cargas microbianas elevadas, respectivamente nas superfcies externa e interna do tubo. A situao preocupante na dependncia do seu emprego, inclusive porque residuais de gua podem permanecer, em ambas as superfcies, propiciando o crescimento microbiano, e a subseqente contaminao endotxica. Esta contaminao ocorre mais freqentemente com ltex natural. Embora a contaminao ambiental seja s vezes considerada menos importante, desde que no em contato direto com o produto, h evidncias de que a transferncia ocorra quando inexistem condies adequadamente controladas. Contaminantes ambientais de paredes secas compreendem principalmente bacilos Gram (+), cocos e fungos. Bactrias Gram (-) so mais susceptveis aos procedimentos de secagem, porm nmeros reduzidos podem persistir por perodos considerveis de tempo. Em reas midas como pias e drenos, particularmente, ocorrem acmulo de Pseudomonas e Acinetobacter que no apenas sobrevivem, mas proliferam. Contaminao area principalmente associada poeira e s escamas da pele, por sua vez veculos de esporos bacterianos e cocos. A contaminao derivada dos operadores normalmente significante. Durante atividades normais, a perda de escamas da pele da ordem de 104 por minuto. Os contaminantes por elas transportados so micrococos no patognicos, difterides e estafilococos, mas tambm podem se constituir de Staphylococcus Aureus como parte da flora normal. Outros ainda, como Salmonella e Escherichia coli, embora no constituintes da flora residente, podem estar transitoriamente a ela associados, na dependncia dos hbitos de higiene dos operadores. Os materiais de acondicionamento devem ser limpos, alm de adequadamente planejados para efetivamente proteger o produto. Quer constitudos em vidro, em plstico ou elastmero, a sua qualidade microbiana estar totalmente na dependncia da qualidade do processo e do

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ambiente de sua obteno. Embora envolvendo no momento da moldagem temperaturas elevadas, a contaminao posterior sempre um risco. Outro aspecto a considerar a contaminao durante o uso ou estocagem do produto, difcil de prever. Produtos tpicos, especialmente aqueles em potes, envolvem risco particular. Alternativas possveis e interessantes consistem em remoo do creme com esptulas, sua aplicao com mos enluvadas e acondicionamento em bisnagas, conseguindo-se desta forma redues significativas de contaminao por Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus Aureus. No caso de produtos estreis, embora no se desconsidere o problema da contaminao durante a fabricao, ela tambm passvel de ocorrncia durante o uso clnico, particularmente nos parenterais de grande volume em que muitas vezes se perfura os frascos plsticos com agulhas, objetivando melhor escoamento de solues, ao invs de empregar dispositivos providos de filtro retentor de microrganismos.

5.7.2. Fatores que Afetam a Sobrevivncia e o Crescimento dos Organismos em Produtos A qualidade microbiana dos produtos farmacuticos e cosmticos afetada no apenas pelos tipos e grandeza de organismos introduzidos durante a fabricao, estocagem e uso, mas tambm depende da interao dos mesmos com a formulao. Muitos fatores fsico-qumicos so fundamentais, assim como o sistema conservante que pode atuar minimizando os contaminantes a nveis no detectveis durante a estocagem do produto. Como os microrganismos apresentam absoluta exigncia quanto presena de gua, a atividade de gua exerce efeito fundamental, embora tambm formas slidas de dosagem possam se deteriorar em decorrncia de contaminantes. Outro aspecto a considerar envolve a condio ideal de crescimento microbiano a pH na faixa da neutralidade, tornando formulaes cidas ou alcalinas menos propensas

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deteriorao. Acrescem consideraes pertinentes disponibilidade de nutrientes e de oxignio, presso osmtica e tenso superficial.

5.7.3. Deteriorao Microbiana de Produtos A capacidade do microrganismo em promover o processo de deteriorao depende da sua capacidade em produzir enzimas adequadas, e o risco maior no caso de produtos farmacuticos e cosmticos reside na extrema versatilidade de caminhos bioqumicos dos microrganismos, possibilitando a sntese de enzimas degradativas. Na dependncia de natureza das molculas, caractersticas do produto, nmero e tipo de organismos, o processo degradativo pode demandar horas, meses ou mesmo anos. Substncias de baixo peso molecular como acares, aminocidos e glicerol so degradadas pelos caminhos metablicos primrios. J a quebra de protenas, polissacardeos e lipdeos exigem enzimas especficas. Aquelas capazes de hidrolizar o amido, gar e celulose so produzidas por muitos organismos incluindo Bacillus, Pseudomonas e Clostridium. A produo de alfa-amilase particularmente relevante em Bacillus spp. Estes microrganismos, juntamente com Aspergillus e Penicillium spp., so as fontes mais comuns de proteinase e peptidase que quebram compostos como a gelatina. A produo de lpase largamente distribuda e ocorre mais comumente entre os fungos, da a associao da deteriorao ao desenvolvimento de fungos em cremes e emulses. Conseqncias distintas, porm sempre nefastas, advm da degradao enzimtica, podendo ser a queda da potncia, reduo da biodisponibilidade, formao de pigmentos e odores que tornam o produto inaceitvel pelo usurio. A atividade microbiana pode tambm resultar na produo de toxinas ou na degradao do prprio sistema conservante. Exemplos de conservantes susceptveis de degradao so a clorhexidina, cetrimida, fenlicos, cido benzico entre outros.

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5.7.4. Infeces Decorrentes de Produtos A experincia tem demonstrado que produtos que no apresentam alteraes sensoriais evidentes podem ser portadores de populaes microbianas. Nos adultos saudveis o contato com produtos contaminados no representa problema srio a menos que o organismo seja um patognico primrio. Entretanto, pode ocorrer infeco em se tratando de paciente com sistema imunolgico compromissado de alguma forma, ou se o produto se destinar a introduo em rea normalmente estril, pele lesada, membrana mucosa ou olhos. O risco de infeco depende de fatores como caractersticas qualitativa e quantitativa envolvendo o microrganismo, resistncia do hospedeiro e via de administrao. Dentre microrganismos que tm sido isolados de produtos farmacuticos podem ser mencionados os patognicos primrios, como a Salmonella, os quais no apresentam condies de sobrevivncia quando externos ao organismo vivo. Os organismos mais freqentemente encontrados so os patognicos oportunistas, os quais se tornam agentes infecciosos quando da falha do sistema imunolgico. Tais oportunistas incluem Pseudomonas, enterobactericeas e espcies de Flavobacterium e Staphylococcus. As enterobactericeas de vida livre (Enterobacter, Klebsiella, Serratia) so encontradas como constituintes da flora normal do corpo, podendo ocorrer como contaminantes de produtos farmacuticos. Espcies como Escherichia coli, Proteus sp. e algumas espcies de Klebsiella, embora tambm comumente encontradas como constituintes da flora normal, quando transferidas a reas distintas podem ser causadoras de doenas. Estes organismos apresentam limitada possibilidade de sobrevivncia fora do corpo, e menos freqentemente so encontrados como contaminantes em medicamentos. A Pseudomonas aeruginosa um organismo de vida livre. Embora presente na flora normal em aproximadamente 4 6% da populao causam rpida infeco de feridas ou

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queimaduras. Tambm a Burkholderia cepacia e Flavobacterium meningosepticum tm conduzido a septicemia generalizada em crianas. Mais de 30% da populao portadora persistente ou intermitente de Staphylococcus Aureus; embora este organismo esteja normalmente associado ao corpo, resistente secagem e pode permanecer em produtos por longos perodos de tempo. Outras espcies oportunistas freqentemente associadas a infeces hospitalares incluem Acinetobacter antratus, Staphylococcus epidermidis e Streptococcus pyogenes, porm no tm sido detectadas em produtos farmacuticos.

5.7.4.1. Carga Microbiana No Efetiva A quantidade de microrganismos a induzir uma infeco depende de vrios fatores. Quando da administrao oral, nmero elevado ser necessrio para induzi-la, dependendo, porm da espcie microbiana. 5.8. SISTEMA CONSERVANTE

A cincia de conservao dos produtos farmacuticos e cosmticos relativamente nova, e somente nos ltimos 60 anos tem sido tratada de maneira cientfica. Nos momentos iniciais, a conservao foi obtida com agentes germicidas, apesar das conseqncias envolvendo riscos. Hoje, grande importncia dada ao assunto, devido preocupao no apenas do aspecto microbiolgico, mas de potencial de irritao e toxicidade ao consumidor. Encontrar um produto que atenda s necessidades da indstria no tarefa facilmente conduzida. Nos Relatos da Federao Internacional Farmacutica (FIP) de 1972 e de 1975 foi enfatizada a importncia de sistema antimicrobiano efetivo para garantir a estabilidade e segurana de preparaes farmacuticas no estreis com relao pureza microbiana. Entre estas preparaes, formas lquidas e semi-slidas em base aquosa so particularmente

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importantes. Estas formulaes tambm constituem, respectivamente, a maioria das preparaes estreis injetveis e oftlmicas, em que o principal objetivo do conservante manter a esterilidade inicial quando de repetidas remoes de recipientes multidose. Embora no pertencendo classe de medicamentos, a grande maioria dos cosmticos formulada com base aquosa necessitando, portanto, um sistema conservador adequado. Fabricantes bem como autoridades em sade reconhecem a necessidade de demonstrar a eficcia de conservantes antimicrobianos. Esta efetividade no pode ser testada por uma simples metodologia qumica que demonstre atendimento especificao. A incluso desse teste deu-se na USP XVIII, que descreveu um mtodo microbiolgico e na BP 73 que estipulou um requisito para efetividade antimicrobiana em um caso especfico. Estas abordagens, bem como uma larga variedade de sistemas-teste, encontrados na literatura e usados em vrios laboratrios induziram um grupo de trabalho da FIP a elaborar um mtodo que pudesse ser til para fabricantes e autoridades de controle oficial ou instituies independentes. H inmeros fatores envolvidos na escolha do conservante sendo suas caractersticas ideais apresentadas a seguir: Largo espectro de atividade, em ampla faixa de pH, durante a meia vida do produto; Ser efetivo sobre cepas especficas com nmero de ATCC, assim como sobre organismos da flora natural; Distribuir-se de forma apropriada em sistemas emulsionados; Ser compatvel com componentes da frmula, sem interferir com a cor, sabor ou fragrncia do produto ou da embalagem primria; Ser atxico e no irritante; Ser de custo aceitvel.

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O conservante deve ainda manter sua atividade antimicrobiana na presena de outros insumos da frmula, no deve se decompor durante esterilizao trmica e deve apresentar, preferencialmente, ao biocida. A probabilidade de um conservante agregar todos esses requisitos baixa. Conseqentemente, o microbiologista se depara com a dificuldade da seleo de um ou mais insumos que de forma conjunta aos componentes da frmula constituam um sistema conservante efetivo. O objetivo primrio do sistema conservante que, quando incorporado formulao, possa eliminar todos os microrganismos que alteram a estabilidade do produto ou que podem ocasionar infeces. Paralelamente capacidade conservante,o sistema no deve apresentar caracterstica txica ou irritante. Partindo do princpio que a toxicidade consiste em problema devido similaridade do metabolismo celular de diferentes seres vivos, de distinta complexidade, um composto que mostra toxicidade a clulas microbianas, de forma semelhante pode ser txico a clulas humanas. H porm caractersticas que tornam cada clula particular. Esta propriedade pode ser usada como ponto importante na seleo de agentes que produzem efeitos primrios seletivamente na membrana do microrganismo. importante que a frmula se constitua em ambiente hostil, no qual os microrganismos no possam crescer ou sobreviver, preferencialmente conferindo caractersticas microbicidas a microbiostticas. Ainda, a atividade conservante deve ser suficientemente rpida para garantir que qualquer contaminao introduzida pelo consumidor seja eliminada no perodo entre os usos. Assim, a seleo do agente antimicrobiano a ser incorporado em produtos farmacuticos ou cosmticos tarefa bastante difcil, devendo ser feita, primariamente, sob a luz do conhecimento tcnico especfico disponvel sobre sua estrutura qumica, aspectos microbiolgicos e legais pertinentes ao conservante ou a suas combinaes.

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Entre os muitos produtos potencialmente indicados para este emprego, apenas uma parte tem sido efetivamente usada na indstria, e dentre estes, trs quartos so representados por parabenos. Embora seja o grupo mais popular de conservantes, eles podem apresentar falhas em proporcionar os requisitos necessrios para grande parte das formulaes, quando aplicados individualmente. Em uma frmula proposta pelo Microbial Preservation Subcommittee da Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association como modelo de loo, houve falha na letalidade da P. aeruginosa, que permaneceu a altos nveis no perodo de 28 dias. Foi ento estabelecida a necessidade de substituir ou de somar aos parabenos outros conservantes. O nmero de opes disponveis ao formulador geralmente restrito, particularmente devido a consideraes de toxicidade. Recentemente, alguns novos e aparentemente promissores produtos tm surgido, porm quando adicionados a formulaes, s vezes, os resultados deixam a desejar. Devido grande disparidade entre resultados de testes laboratoriais e aqueles nos produtos terminados, existe a necessidade de sempre testar os produtos nas formulaes especficas. A tarefa de escolha do sistema conservante para formulaes complexas farmacuticas e cosmticas extremamente difcil. Assim, a escolha no pode ser aleatria, tendo por base exclusivamente a economia aparente. Acredita-se que o conservante ideal nunca ser encontrado, devendo-se estipular certos compromissos de aceitao de caractersticas no ideais.

5.8.1. Conseqncias da Falha na Conservao Nos ltimos 30 anos, adjuvantes diversos que surgiram no mercado se constituem, por vezes, em excelente substrato para o crescimento microbiano, em inativadores dos conservantes ou ainda como ambos. Assim, no h dvidas quanto existncia de problemas relacionados contaminao microbiana de produtos de uso tpico no geral. Diversos investigadores apresentam informaes que revelam a capacidade de sobrevivncia de alguns microrganismos

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em determinados meios considerados anteriormente como no metabolizveis, como em parafina lquida. Justificam-se preocupaes com a sobrevivncia microbiana mesmo em preparaes de anticpticos para a pele. Efeitos adversos decorrentes do crescimento microbiano em produtos podem ser citados como a descolorao, formao de odores e gases, alteraes nas propriedades reolgicas dos compostos, e estabilizao de emulses (quebra). A evidncia visual do crescimento superficial de um fungo pigmentado pode ser a situao mais desconcertante para um consumidor que tenha comprado um dispendioso pote de creme facial. A decomposio pode no se revelar por diversos meses, perodo necessrio para adaptao do organismo quele ambiente. Alteraes qumicas durante a estocagem, com modificao gradual do pH, podem ser importantes para adaptao biolgica, acarretando problemas retardatrios de deteriorao. Talvez o produto contaminado que no demonstre evidncia visvel de deteriorao microbiolgica envolva risco maior ao consumidor, uma vez que sua utilizao pode causar infeco, particularmente se aplicado em queimaduras ou no epitlio lesado. H portanto duas principais razes para controlar o nmero e o tipo de microrganismo em produtos tpicos, de carter farmacutico ou cosmtico. A primeira proteger o consumidor de qualquer dano sade decorrente do uso de preparaes contendo microrganismos, enquanto a segunda proteger o prprio produto, embora no menos importante seja a preservao da reputao da empresa que fabrica o produto.

5.8.2. Contaminao do Produto No h dvida que os contaminantes estejam largamente distribudos nos produtos fabricados, e quando se considera o nmero abundante de organismos do ar, em matriasprimas de origem natural ou no, e em particular a gua e associados ao pessoal, no surpreendente que no perodo de trs anos o FDA tenha isolado 3.400 microrganismos de

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ambientes de fabricao de medicamentos estreis; entre 1968 e 1971 isolou 1.550 Gram (-) de matrias-primas e produtos terminados de uso tpico. Destes, o isolamento de Pseudomonas representava 50%. A extenso da contaminao que ocorre durante o uso do produto em comparao quela durante a fabricao no fcil de acessar, pois o ambiente em que o produto empregado tambm deve ser considerado. Foi estimado em 1970, que dos 30 milhes de pacientes admitidos nos hospitais norte americanos, 10%, ou 3 milhes foram expostos a um ambiente hospitalar infectado. Foi reportado que na Inglaterra entre os meses de junho e setembro cada metro cbico de ar no ambiente externo ao hospital continha 12 a 15 mil esporos de fungos, e nas reas agrcolas este nmero se eleva assustadora quantidade de 3 bilhes de esporos. Adicionalmente, 68 cepas foram identificadas em infeces fngicas oculares, incluindo patognicos aos humanos e saprfitas raramente causadores de doena no homem, seno nos olhos. O fato de no ser necessrio estar em regio agrcola para incorrer em risco de contaminao ocular bvio, segundo uma pesquisa, pois foi revelado que de 327 cosmticos para a rea dos olhos (mscara, delineador, sombra), 61% evidenciaram contaminao microbiana, sendo 46% por fungos. Sabe-se que cosmticos em uso apresentam nveis de contaminao mais altos que aqueles ainda no usados. Antes de o fabricante contemplar o fato, por estar atendendo a Boas Prticas de Fabricao, a seguinte questo deve ser colocada: de quem deve ser o nus de adequao das caractersticas do produto, se do consumidor ou do produtor. Na dcada de 60, vrios problemas de infeco em pacientes foram relacionados com a qualidade sanitria de produtos oftlmicos. Localizou-se o relato, em 1966, de 8 casos na Sucia em que a pomada oftlmica industrializada contendo hidrocortisona e neomicina foi responsvel por leso da crnea e diminuio da acuidade visual de pacientes em funo da

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presena de Pseudomonas aeruginosa nestes produtos. O microrganismo foi isolado do globo ocular infectado, das embalagens em uso e de embalagens no abertas de vrios lotes da pomada. Em 1983, pesquisadores avaliaram 72 lotes de 53 especialidades oftlmicas do mercado nacional quanto esterilidade, eficcia de conservantes, inocuidade ocular, hemlise e pH. Duas especialidades, correspondendo a um lote de cada, estavam contaminadas, sendo que um deles por Pseudomonas aeruginosa. Num outro estudo avaliaram-se 44 lotes de colrios comercializados quanto esterilidade, pH e eficcia de conservantes. Nos 8 lotes com resposta positiva ao crescimento microbiano, procedeu-se contagem e pesquisa de Pseudomonas aeruginosa. Os autores, embora a identificao propriamente dita dos contaminantes no tenha sido investigada, comprovaram a ausncia de Pseudomonas aeruginosa em todos os lotes contaminados. Pela comparao da incidncia de contaminao bacteriana em todos os tipos de cosmticos, observou-se que os nveis foram maiores para aqueles avaliados aps o uso (49% de 222 amostras) do que para os no usados (12% de 165 amostras). Os dados relativos aos aplicadores de produto merecem preocupao, pois embora 27,5% dos no usados apresentassem contaminao bacteriana, a totalidade dos utilizados se encontravam contaminados,o que leva concluso de que este material o responsvel pela infeco e reinfeco durante o consumo do produto, sugerindo que os aplicadores sejam descartveis. A contaminao microbiana pode ocorrer durante a fabricao do produto, durante estocagem em condies inadequadas,ou em decorrncia do manuseio, sem cuidados de higiene, pelo usurio ou consumidor. Contaminao durante a fabricao pode ocorrer de diferentes maneiras em locais diversos da planta, a saber: material de embalagem como fonte de contaminao na rea de recebimento; poeira, material residual e insetos em reas de fabricao so fontes conhecidas de contaminao; reas de fabricao indevidamente planejadas,

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propiciando a condensao do vapor dgua nas paredes e no teto, induzem contaminao, particularmente fngica; sistemas de fornecimento de gua e vias de drenagem ineficientes, recipientes no adequadamente limpos com resduos do produto; material de embalagem; armazenamento imprprio de matrias-primas; fluxo e qualidade de ar incompatvel com as operaes de fabricao. A contaminao decorrente de tais problemas pode ser minimizada pela adoo das Boas Prticas de Fabricao (BPF), enquanto que o controle sobre os aspectos que dependem do consumidor, ao longo da utilizao do produto mais difcil. Certos cosmticos, assim como medicamentos, so usados no banheiro, onde as condies para a invaso e desenvolvimento dos microrganismos so timas. Ainda, alguns produtos so mais vulnerveis que outros a organismos que promovem a deteriorao. Xampus lquidos, por exemplo, so susceptveis contaminao por espcies bacterianas Gram (-), especialmente Pseudomonas, Aerobacter, Klebsiela, Achromobacter e Alcaligenes. Bactrias Gram (-), especialmente Pseudomonas, tm sido encontradas em loes infantis; espcies de Serratia tm sido isoladas da mesma fonte. Sabonetes, de outro lado, tm sido colonizados por Pullularia pullulans, Stachybotry atra, Scopulariopsis brevicaulis e Trichoderma virida. Colnias fngicas tm tambm sido encontradas em mscara, delineador e sombra de olhos; talco pulverizado apresentou Clostridium tetani e Clostridium sporogenes. Dentre os contaminantes considera-se os seguintes gneros como causadores de danos sade: Pseudomonas, Proteus, Staphylococcus, Streptococcus, Serratia, Penicillium,

Aspergillus, Candida e Monilia. Outra classificao tem sido proposta de acordo com riscos envolvidos para epitlio danificado: Pseudomonas aeruginosa, Serratia marcescens, Klebsiella sp, Pseudomonas multivorans, Pseudomonas putida, Staphylococcus aureus, Clostridium perfringens, Clostridium tetani e Clostridium novyi. Para produtos oculares, a Pseudomonas

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aeruginosa sempre problema, enquanto ocasionalmente, Pseudomonas sp e Staphylococcus aureus.

5.8.3. Contaminao Microbiana A soluo para problemas de contaminao consiste em medidas preventivas, mais que no reprocessamento dos produtos contaminados. Esterilizao final de um produto grosseiramente contaminado seria proibitiva, inclusive ao nvel legal, devendo o limite reduzido de contaminao microbiana decorrer do atendimento a Boas Prticas de Fabricao. Isto no exclui da frmula o conservante antimicrobiano que visa controlar nmero limitado e aceitvel de microrganismos que tenha acesso ao produto antes ou aps o produto ter alcanado o consumidor. Adicionalmente, a cuidadosa obedincia aos nveis de higiene dos procedimentos desde o momento de recebimento das matrias-primas, nos diferentes estgios de fabricao at a linha de embalagem e o valor de testes microbiolgicos em amostras no deve ser subestimado. Se o produto terminado apresentar nmero inaceitvel de microrganismos, indicar falha na condio do fabricante em atender aos requisitos de reas potenciais de contaminao no processo produtivo, merecendo investigao para sanar o problema. Certas matrias-primas, particularmente aquelas de origem natural, como a gua, se constituem em fonte de contaminao, assim como a permanncia de resduos do produto em partes do equipamento, de difcil limpeza e portanto material que atua como substrato adequado ao crescimento. A higiene do pessoal pode ser fator adicional de importncia no controle da contaminao. Quando o processo produtivo bem planejado, com as operaes unitrias bem definidas, isto permite detectar os problemas, localizando momentos e locais envolvidos com a contaminao. importante considerar cuidadosamente o potencial intrnseco de cada frmula em atuar como substrato de contaminao. Certos produtos com maior proporo de ingredientes no aquosos

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base de petrolalos sero menos propensos contaminao, comparativamente queles contendo aminocidos e protenas em base aquosa. A reduo de tempo envolvido na formulao e na embalagem pode diminuir consideravelmente o risco de contaminao, desde que mantida ateno criteriosa ao padro de higiene. Adicionalmente, a incluso de conservante na formulao ir influenciar intensamente o controle de microrganismos no produto, isto na dependncia da escolha adequada do antimicrobiano. Esta escolha deve considerar a interrelao dos vrios aspectos de infuncia que podem afetar a eficcia do sistema conservante.

5.8.4. Fatores de Influncia sobre Formulaes com Sistemas Conservantes Com a variedade de conservantes disponveis e o grande nmero de adjuvantes em uso nas formulaes farmacuticas e cosmticas, interaes de diferentes naturezas so possveis no sentido de inativar a ao antimicrobiana do sistema conservador. Com relao caracterstica fsica do produto, se soluo, suspenso ou emulso, diversos fatores podem interferir nesta inativao, dependendo da complexidade da frmula. Observando primariamente os tipos de reao que podem ocorrer, pode-se ponderar que numa frmula complexa como emulso, uma srie de fatores podem anular a atividade do sistema conservante. Porm, pode adicionalmente haver a influncia de fatores envolvidos na dinmica de desinfeco, como tempo, temperatura e concentrao. Outros fatores importantes que devem ser considerados na seleo de um sistema conservante so esclarecidos como entendimento de um documento emitido h duas dcadas pelo Council of the Society of Cosmetic Chemists of Great Britain. Abrange os aspectos mltiplos de recipiente, temperatura de estocagem, partio, compatibilidade e outros. Eles

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reforam que a escolha de um agente conservante no pode ser com base exclusivamente terica. Os seguintes aspectos devem ser considerados durante o desenvolvimento do produto: O conservante deve apresentar largo espectro de atividade em baixa concentrao e a temperaturas provveis de estocagem; Conhecer as caractersticas de partio no sistema bifsico, por sua vez em funo do pH; Estabilidade, toxicidade e potencial sensibilizante do composto devem ser examinados; Considerar os componentes da frmula com nvel significante de contaminantes, assim como aqueles que podem atuar como substrato para desenvolvimento microbiano; A embalagem deve ser planejada para evitar o acesso de contaminantes e tambm inativao do agente conservante devido soro ou complexao. A palavra inativao, comumente empregada no expressa adequadamente o fenmeno que ocorre entre os conservantes e os outros ingredientes da frmula. Estes compostos podem se apresentar parcialmente ionizados, solubilizados, adsorvidos, em estado reversvel ou no, conferindo eventualmente atividade adicional. Os fatores que influenciam a efetiva concentrao do conservante na fase aquosa so: Dissociao como funo do pH; Partio do conservante na fase oleosa do produto; Solubilizao; Ligaes s macromolculas; Ligaes ao material de acondicionamento. Nesta linha, sabe-se de srios erros cometidos no desenvolvimento de produtos devido incorporao de conservante incompatvel com o pH da frmula. Conservantes de natureza cida tais como os cidos srbico, benzico e dehidroactico so normalmente mais eficazes em

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pH abaixo de 6. So, em princpio, ativos na forma no dissociada e, portanto, tendem a perder sua atividade em pH neutro a alcalino. Na prtica, possvel detectar contaminao de produtos cosmticos em faixa extensa de pH (3 a 11). Existe relato da sobrevivncia e crescimento de Pseudomonas cepacia em frmula cosmtica apresentando pH abaixo de 3,2, fenmeno bastante significativo para o formulador. Pode-se ponderar que a conservao de produtos com conservantes no depende somente do pH do meio, mas tambm da frao ionizada do antimicrobiano. Os amnios quaternrios, por exemplo, so mais ativos em pH alcalino, enquanto que conservantes cidos fracos, como os cidos benzico e srbico so ativos na forma no ionizada, que ocorre em pH baixo. Entretanto, conforme anteriormente discutido, o equilbrio entre a forma dissociada e no dissociada funo do pH. A frao da concentrao total do conservante no ionizada para cidos fracos pode ser representada pela equao a seguir, cujo desenvolvimento evidencia a interdependncia com a concentrao hidrogeninica, portanto como pH.

5.8.5. Eficcia do Sistema Conservante A efetividade da conservao antimicrobiana em preparaes farmacuticas e cosmticas depende de muitos fatores: composio, recipiente (tipo, material, vedao), grau inicial de pureza microbiana requerida, forma de aplicao, meia vida e do prprio sistema conservante. Mesmo com requisitos rgidos de higiene durante a fabricao, controle de qualidade e uso de matrias-primas com nmero permissvel de microrganismos, ainda h que considerar a possibilidade de contaminao secundria. Devido ao contedo de gua da preparao, alguns microrganismos podem se desenvolver usando alguns componentes como fontes de carbono. De outro lado, alguns componentes ou sistemas, sem serem substncias antimicrobianas tpicas, podem evitar a proliferao microbiana. Eles podem ser letais aos microrganismos ou aumentar a efetividade dos conservantes.

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Quando um agente antimicrobiano includo na preparao, ele pode causar, alm da sua prpria atividade, problemas de incompatibilidade, com perda de potncia pela interao com outros componentes ou distribuio entre fases diferentes, em funo do coeficiente de partio. Absoro pelo recipiente ou sistema de fechamento deve tambm ser considerada. Finalmente, deve ser considerada a resistncia de alguns microrganismos, e sua capacidade em decompor o agente antimicrobiano. Estudando as particularidades das preparaes farmacuticas ou cosmticas, da mesma forma que a atividade da gua,o potencial de xido-reduo da frmula tambm pode influir no crescimento e na sobrevivncia de microrganismos. Geralmente,os microrganismos so classificados quanto sua exigncia de oxignio em aerbicos, anaerbicos e facultativos. Assim, aerbicos crescem somente em faixas positivas de potencial de xido-reduo e anaerbicos em potenciais de reduo baixos. Trabalhando com Pseudomonas fluorescens a pH 7,0, pesquisadores determinaram como sendo de 100 a 500 mV a faixa de potencial de reduo que compatibilizou com o crescimento microbiano. De forma semelhante, tendo-se conhecimento de faixas de valores de xidoreduo, tornam-se possveis alteraes planejadas de frmulas, de maneira a inviabilizar o crescimento microbiano. Substncias macromoleculares como a hidroxipropilmetilcelulose (hypromellose) em concentrao igual ou superior a 0,5% (p/v) inativam de forma significativa a ao antimicrobiana do cloreto de benzalcnio. Este fenmeno ocorre no processo de esterilizao a vapor deste conservante na presena do hidroxipropilmetilcelulose, enquanto aparentemente, a clorhexidina no afetada por este procedimento. A interao e conseqente perda da atividade de compostos de amnio quaternrio como o cloreto de benzalcnio e o cloreto de cetilpiridinio relatada por pesquisadores quando na presena de polissorbato 80.

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Embora o metil e o propilparabeno tambm sofram interao com polietilenoglicol, metilcelulose, polivinilpirrolidona e gelatina, estas interaes so significativamente menores quando comparadas quelas observadas com agentes tensoativos no inicos. A interao entre o polissorbato 80 e os parabenos, descrita desde 1958, exemplo clssico de incompatibilidade associada a conservantes. Trabalhos experimentais ento conduzidos permitiram a seus autores relatarem que em soluo a 5% de polissorbato 80 somente 22% do total de metilparabeno e 4,5% do propilparabeno estavam em sua forma livre,ou seja, no ligados ao agente tensoativo. A atividade do conservante mostrou-se funo da sua concentrao livre e alm do polissorbato 80, os polissorbatos 60, 40 e 20 tambm apresentavam o mesmo comportamento. Portanto, conclui-se que a concentrao livre dos parabenos diminui com o aumento da concentrao dos tensoativos, com conseqente decaimento da sua atividade. Porm, outros pesquisadores verificaram que, na presena do agente tensoativo a susceptibilidade do microrganismo ao ataque qumico aumentava. Relataram que o polissorbato 80 poderia estar, de algum modo, alterando a permeabilidade da membrana celular. Desta forma, compostos como a clorhexidina, quando presentes em baixas concentraes, conseguiriam atingir o interior da clula. Da mesma forma, foi demonstrado que a atividade antimicrobiana do metilparabeno, fenoxietanol e clorocresol, em relao Pseudomonas aeruginosa incrementada na presena de polissorbato 80. Isto porque a reduo da tenso superficial e interfacial entre as clulas e a soluo pode facilitar a adsoro dos conservantes na superfcie bacteriana, aumentando a permeabilidade da membrana aos conservantes que, desta forma, alcanam a condio intracelular mais rapidamente. O efeito sinrgico ou antagnico que os tensoativos no inicos exercem sobre os agentes catinicos com atividade antimicrobiana pode ser explicado em termos da concentrao micelar

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crtica,ou seja, a propriedade destes compostos se agregarem ou formarem uma nova fase, sem, no entanto, se separarem da soluo. A concentrao mnima em que ocorre tal fenmeno denominada de concentrao micelar crtica. Esta propriedade de agregao ou de formao de micelas refletida em mudanas substanciais das propriedades da soluo, incluindo tenso superficial, ndice de refrao, solubilidade, condutividade eltrica etc. Na presena de ambos os tipos de tensoativos formam-se micelas mistas. Recomenda-se que para formular produtos sem o comprometimento de efeitos antagnicos ou mesmo sinrgicos, as seguintes etapas devem ser observadas: Utilizar baixa proporo do tensoativo no inico, de quatro vezes ou menos para uma poro do catinico a ser incorporado na frmula; Utilizar tensoativos no inicos com alto valor de concentrao micelar crtica, de forma a haver pequena ocorrncia de micelas; portanto, menor possibilidade do composto quaternrio ser inativado; Adicionar compostos que alteram a concentrao micelar crtica dos tensoativos como a uria, lcoois, glicis etc; Compostos quaternrios que exibam propriedade atpica devem merecer considerao. A presena de outros componentes da frmula nem sempre resulta em interao como sistema conservante ocasionando perda parcial ou total de sua atividade, podendo existir ingredientes que podem inclusive contribuir para sua ao. Por exemplo, o gliceril laurato, quando utilizado em substituio a outros agentes emulsificantes, na concentrao entre 1% a 10%, em frmulas conservadas com os parabenos e EDTA, apresenta excelente atividade contra Pseudomonas aeruginosa. Embora este composto no tenha por si s este efeito, na presena dos parabenos e EDTA este fenmeno observado. Formulaes que contm de 10 a 20% de propilenoglicol, em geral, no necessitam de conservantes. Outros componentes como glicerina, sorbitol e butilenoglicol podem contribuir

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como sistema conservador da frmula, caso utilizados em concentraes adequadas. Em geral, qualquer substncia adicionada na fase aquosa do produto no qual o conservante preferencialmente solvel, pode beneficiar substancialmente a atividade do conservante. Alm dos componentes acima citados, o gliceril monolaurato,o etanol,o sulfito de sdio,o cido saliclico e propinico,os antioxidantes, o EDTA e os leos essenciais, entre outros, tambm so considerados como agentes que contribuem com o sistema conservante. Para os produtos oftlmicos, no que se refere ao aspecto de conservao, a partir da USP XIX, recomendou-se a utilizao de 4 substncias: cloreto de benzalcnio (0,01%), nitrato de fenilmercrio ou acetato de fenilmercrio (0,002%), clorobutanol (0,5%) e o lcool feniletlico (0,5%), no indicando, pelo menos claramente,o emprego da combinao destes agentes. Esta recomendao permaneceu inalterada at a USP XXI, sendo que as edies seguintes limitaramse a fornecer orientaes gerais, no sugerindo qualquer substncia. Porm, as edies mais recentes (USP XXII a XXV) descrevem que pode ser utilizado conservante ou combinaes de substncias antimicrobianas que possuam a propriedade de prevenir ou destruir microrganismos acidentalmente introduzidos durante o uso do produto. Devido complexa natureza das frmulas farmacuticas e cosmticas, freqentemente necessria, para a proteo destes produtos contra a contaminao microbiana, a incorporao de, no mnimo, duas substncias antimicrobianas. Tais associaes podem ser preparadas ou adquiridas no mercado . 5.8.6. Avaliao da Eficcia Antimicrobiana de Conservantes Os requisitos gerais para o crescimento microbiano so gua, energia, fontes de nitrognio, minerais e vitaminas em um ambiente com nveis adequados de oxignio, pH e temperatura. Por exemplo, nos cosmticos estas condies so facilmente observadas, merecendo preocupao a incorporao de sistemas de conservao eficazes.

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O modo de ao dos agentes antimicrobianos so conhecidos, permitindo seu grupamento de acordo com o tipo de atividade. Este conhecimento entretanto pouco auxilia o formulador, sendo mais complexos os de partio, solubilizao ou estabilizao. Assim, torna-se necessrio um mecanismo seguro para avaliar a ao dos conservantes nas formulaes desenvolvidas e nas condies de uso. Os testes mais simples para avaliar o potencial conservante baseiam-se em diluio da substncia em caldo ou propiciar difuso em gel, com medida da capacidade inibitria do crescimento de cepas padres. Em cada caso est sendo determinada uma faixa de concentrao ativa ou nico ponto de letalidade, sob condies definidas, principalmente com a padronizao da idade e tamanho do inculo do organismo-teste, bem como condies de incubao, com vistas definio da atividade biocida ou biosttica. Tentativas de simular condies de uso e determinar o ponto final de letalidade tm sido desenvolvidas, tambm, para testes de desinfetantes. Assim, como qualquer tcnica microbiolgica, o tempo envolvido na anlise at obteno de resultados experimentais longo, embora o perodo referente a esta atividade seja relativamente pequeno. Convm salientar que o tempo de incubao de 24 a 48 horas para bactrias e de 4 a 7 dias para fungos pode ser consideravelmente ampliado em funo do efeito inibitrio provocado pelo prprio conservante em anlise. Tendo em vista o fator tempo, nos ltimos anos tm sido desenvolvidas tcnicas que detectam rapidamente a resposta microbiana. Isto possvel pela seleo de algum ndice de desenvolvimento celular que ocorre precocemente no ciclo de crescimento e susceptvel a agentes antimicrobianos. Tal desenvolvimento, embora no detectado macroscopicamente, pode com freqencia ser acuradamente medido por uma variedade de recursos, no perodo de horas ao invs de dias como nos mtodos convencionais.

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As limitaes inerentes s metodologias rpidas tm concentrado a sua aplicao, no caso de produtos farmacuticos e cosmticos, na avaliao da eficcia de conservantes, onde se procede ao inculo intencional de cepa conhecida.

5.8.6.1. Mtodo Turbidimtrico Esta tcnica envolve o uso de um espectrofotmetro para detectar crescimento microbiano em culturas quando no possvel sua evidncia vista desarmada. Foi usada para investigar velocidade de crescimento de Pseudomonas aeruginosa, e posteriormente aplicada para avaliar a eficcia de conservante na presena de tensoativo no inico. O mtodo foi ainda utilizado para dimensionar o efeito do conservante contra leveduras e bolores, usando Saccharomyces rouxii e Trichoderma viride. A primeira indicao de desenvolvimento celular, e portanto de no inibio, detectada em cerca de 1 hora para bactria e 3 a 6 horas para leveduras e bolores; a demora minimizada pelo uso de meio nutriente pr-aquecido e incubao em banho sob agitao. Vrios organismos deteriorantes, conservantes e componentes de formulao foram estudados, mas sistemas nos quais ocorre precipitao, aglomerao celular ou lise rpida no so adequados para investigao turbidimtrica. Esporos bacterianos representam um vetor de deteriorao problemtico, e a tcnica espectrofotomtrica pode propiciar informaes relativas a ao dos conservantes sobre eles. A aplicao do mtodo baseada nas influncias sobre o processo de germinao, em que o esporo dormente sofre alteraes fsicas e metablicas intensas para passar ao estado vegetativo. Durante esta transformao o esporo intumesce e perde refratibilidade, com queda na densidade ptica da suspenso de esporos a cerca de 60% do valor inicial. Seguindo estas alteraes precoces, o revestimento do esporo passa para a forma vegetativa seguindo-se diviso celular, de forma que a densidade ptica se eleva novamente como desenvolvimento vegetativo normal. Usando perfil de densidade ptica obtido desta maneira, possvel

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classificar conservantes em grupo que no promove a queda inicial deste valor, dos inibidores de germinao (fenois, cidos orgnicos, hidroxibenzoatos e lcool), e grupo que suprime a elevao da densidade ptica inerente ao crescimento de clulas vegetativas e sua diviso (compostos de amnio quaternrio e mercuriais orgnicos).

5.8.6.2. Intumescimento de Esporos Um indcio primrio de desenvolvimento de esporos de fungos e bactrias o processo de intumescimento. Isto compreende duas fases: uma inicial que insensvel a conservantes e uma segunda, suprimida por conservantes. A fase inicial pode ser simples hidratao ou fenmeno osmtico. A supresso de intumescimento dos esporos de fungos por agentes antimicrobianos foi usada para avaliar compostos antifngicos, em trabalho no qual se empregaram tubos de hematcrito para medir volume de esporo. Medidas microscpicas do tamanho de esporo foram mais acuradas, mas demandaram em maior tempo, sendo mais fcil usar um dos modernos analisadores eletrnicos de tamanho de partcula como o Coulter Counter. A tcnica pode ser usada no somente para investigao rpida de conservantes, mas tambm dos componentes da formula, em sistemas complexos.

5.8.6.3. Mtodo Radiomtrico O metabolismo de microrganismos em meio de crescimento contendo materiais radioativos resulta na liberao de, por exemplo, 14CO2, que pode ser til na deteco de baixo ndice de desenvolvimento celular. A adoo desta metodologia permitiu que se monitorasse a atividade antimicrobiana de vrias substncias. Empregou-se a tcnica para medir a atividade de cloroxilenol e sua inativao por Polissorbato 80. Mtodos radiomtricos encontram aplicao crescente na estimativa de nveis microbianos em alimentos, fluidos biolgicos e gua.

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5.8.6.4. Microeletroforese de Partculas Muitos agentes qumicos afetam a carga superficial e motilidade microbiana. A motilidade eletrofortica das clulas medida antes e aps contato com o conservante, com resultado obtido em 10 minutos. Esta tcnica particularmente adequada a ensaios de antibiticos, mas pode ser tambm promissora para estudo de conservantes, como ocorreu na verificao do efeito de clorhexidina sobre Escherichia coli.

5.8.6.5. Microcalorimetria de Fluxo Como todos os organismos liberam calor durante seu metabolismo, nos ltimos anos a microcalorimetria tem sido empregada no seu dimensionamento. Aplicando-se a

microcalorimetria de fluxo na medida de coeficientes fenlicos, leva-se menos que uma hora nesta determinao. Os procedimentos podem ser rapidamente adaptados na simulao de condies, e automatizados para permitir leitura de resultados impressos.

5.8.6.6. Filtrao Associada Epifluorescncia Os microrganismos so concentrados pela filtrao por membranas coradas com alaranjado de acridina, que reage com o cido nuclico das clulas viveis revelando a fluorescncia alaranjada, decorrente da mistura amarelo-esverdeada do corante ligado ao DNA, e vermelha ao RNA. A execuo da tcnica simples e rpida, sendo em tempo menor que uma hora, porm pode haver dificuldade na diferenciao entre as clulas viveis e no viveis pela cor da fluorescncia. Entretanto o problema pode ser solucionado pela pr-incubao da membrana antes da colorao e contagem. A maior limitao deste ensaio est na filtrao das amostras com viscosidade elevada. Quanto sensibilidade do mtodo, ele pode detectar somente quantidades maiores que 103 UFC/mL.

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5.8.6.7. Bioluminescncia Este mtodo baseia-se na determinao quantitativa de adenosina trifosfato (ATP) do microrganismo. Como ATP o principal composto armazenador de energia em todos os tipos de clulas, o mtodo teoricamente poderia ser utilizado para detectar todos os tipos de microrganismos. A sensibilidade da tcnica de aproximadamente 104 UFC/g (mL) da amostra. A reao envolvida, apesar de simples, influenciada por vrios fatores como a natureza dos componentes da amostra, o meio de cultura utilizado para o pr-enriquecimento no caso de baixa carga microbiana, agitao etc. Alm das limitaes citadas, equipamentos que utilizam de reaes enzimticas detectam no somente o ATP das clulas microbianas, mas tambm os provenientes de molculas derivadas de fontes biolgicas. O mtodo envolve a deteco de luz emitida pela reao da clula com a luceferina e luceferinase

5.8.6.8. Mtodo Eltrico O conceito de mtodo eltrico aplicado microbiologia j era conhecido desde o sculo passado, porm a sua utilizao foi somente desenvolvida no incio da dcada de 60. Entretanto, somente aps trs dcadas, em 1993, no Primeiro Simpsio Internacional de Mtodos Rpidos e Automao em Microbiologia, em New York,os mtodos eltricos foram efetivamente aceitos como alternativa para a monitorizao do crescimento microbiano. Desde ento, a aplicao deste mtodo tem sido estudada por diferentes autores, e considerada, dentre os mtodos rpidos, a perspectiva mais promissora. Justifica-se portanto estudo particularizado de parmetros, fatores de influncia, assim como do perfil de aplicabilidade da tecnologia que na dependncia do estgio evolutivo se pode constatar ou vislumbrar. A grande importncia de plena aceitao do seu emprego no teste de desafio devese inoculao intencional com cepas conhecidas, portanto com tempo de gerao e

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particularidades metablicas tambm sob domnio. Esta situao difere daquela de contagens microbianas em produtos no estreis,ou mesmo do teste de esterilidade, em que os microrganismos e suas caractersticas constituem-se em incgnitas e limitaes nas validaes dos procedimentos empregando mtodos eltricos. O crescimento microbiano em um dado meio provoca alteraes eltricas que podem ser avaliadas determinando-se os valores de impedncia e de condutncia, alm de resistncia e capacitncia. Em particular, a capacitncia tem sido empregada com vantagens na determinao de bolores e leveduras em suco de frutas.

5.8.6.9. Teste de Desafio Todos os produtos so sujeitos contaminao com microrganismos, e o crescimento dos mesmos depende de diversos fatores qumicos e fsicos, incluindo a disponibilidade de gua, a composio, a temperatura de estocagem e a presena ou no de substncias qumicas antimicrobianas. Quando houver gua suficiente, os produtos aquosos iro permitir o crescimento de microrganismos, a no ser que conservantes adequados estejam presentes. Materiais anidros como leo mineral, sombra para os olhos e ps so sujeitos contaminao no uso repetido, mas no iro dar suporte ao crescimento de organismos, a menos que haja a presena de gua. Para os produtos estreis de multidose, o conservante deve possuir capacidade auto-esterilizante, pois se admite a violao de esterilidade em funo da abertura do frasco. Conservantes so includos nas formulaes no estreis para reduzir o crescimento no produto aquoso e para reduzir a chance de sobrevivncia de microrganismos nas preparaes anidras. A avaliao da eficcia antimicrobiana se faz necessrio sendo o teste de eficcia de conservante essencial em substanciar a segurana de produtos multidose. Este teste feito para determinar o tipo de sistema conservante a ser usado em um produto e a concentrao exigida

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para efeito satisfatrio. Este teste importante para a aceitao de um produto para consumo por que: Quantidade por demais pequena de conservante pode resultar em crescimento microbiano, o que ir alterar os atributos do produto (como cor, odor, viscosidade) tornando-o inadequado ao uso; Quantidade excessiva do conservante pode causar efeitos txicos como a irritao de pele, levando a insatisfao do consumidor; O uso demasiado de conservante ir aumentar o custo do produto, que ser repassado ao consumidor. O teste de eficcia de conservante a ferramenta importante na determinao da concentrao ideal do conservante protegendo o produto e tornando-o seguro de um lado, e reduzindo efeitos txicos e custos desnecessrios de outro. O teste para a avaliao de sistemas conservantes foi descrito, pela primeira vez, em 1970, na USP XVIII, e abrangia somente produtos estreis aquosos

injetveis,oftlmicos,otolgicos e nasais. O mtodo e o critrio de interpretao deste compndio permaneceram sem alteraes profundas, por mais de 25 anos e so, ainda, uniformes para todos os produtos citados. O fato do teste ter permanecido essencialmente inalterado quanto a seu desenvolvimento durante longo perodo de tempo pode ser atribudo em grande parte sua reprodutibilidade e, tambm, por ter sido aceito como contribuio significativa no que concerne ao estudo da eficcia do sistema conservante. Posteriormente, a Federation Internationale Pharmaceutique (FIP) publicou diretrizes tcnicas para o referido ensaio, assim como a partir de 1980,o teste tambm passou a configurar na Farmacopia Britnica, que para cada classe de produtos, adotou critrio especfico. Nas edies posteriores, durante a dcada de 80, no houveram alteraes no mtodo e no critrio de interpretao dos resultados, embora estes fossem bastante diversos do compndio anteriormente citado. Mais recentemente, em 1994,o teste de eficcia de conservantes foi

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tambm descrito na Farmacopia Europia e na verso em ingls da 13 edio da Farmacopia Japonesa, de 1996. Embora o teste no seja obrigatrio na rotina industrial, mas apenas recomendado na fase de desenvolvimento do produto, a marcante diferena existente entre os critrios de interpretao adotados pela USP e pela Farmacopia Britnica geraram algum desconforto para a comunidade cientfica e industrial, na ltima dcada. De forma contrastante, o The Cosmetic, Toiletry, and Fragrance Association (CTFA) props critrios mais rgidos para produtos cosmticos aplicados na rea dos olhos quando comparados ao critrio estabelecido pela USP no que se refere a produtos oftlmicos: nmero maior de microrganismos desafiantes; reduo de pelo menos 90% da populao de leveduras e bolores no perodo de sete dias seguidos de reduo contnua at o final do perodo do teste; reduo de pelo menos 99,9% da populao de bactrias seguida de reduo contnua at atingir carga no detectvel no final do perodo do teste; atividade bacteriosttica contra as bactrias formadoras de esporos; necessidade de pelo menos um redesafio. Este contraste pode ser justificado, pelo menos em parte, pela maior quantidade de substncias antimicrobianas legalmente aprovadas disposio da indstria cosmtica quando comparada indstria farmacutica, especialmente aquelas produtoras de oftlmicos. Embora haja crescente interesse em produtos de dose nica,o custo de tais produtos pode ser muito elevado, de forma a inviabiliz-los, constituindo-se em estmulo para o desenvolvimento de formulaes adequadamente conservadas. Tanto os mtodos USP quanto CTFA para testes de eficcia de conservantes indicam as cepas-padro de organismos a serem usados. O mtodo USP recomenda Candida albicans (ATCC 12.031), Aspergillus niger (ATCC 16.404), Escherichia coli (ATCC 8.739), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 9.027), e Staphylococcus aureus (ATCC 6.538). O mtodo CTFA recomenda o uso de Staphylococcus aureus (ATCC 6.538), Pseudomonas aeruginosa

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(ATCC 15.442 ou 13.388), Aspergillus niger (ATCC 9.642), Penicillium luteum (ATCC 9644), Escherichia coli e Candida albicans (cepas no especificadas). O uso de bactria formadora de esporo considerado opcional, porm o CTFA indica que Bacillus cereus ou Bacillus subtilis sejam empregados quando testes com formadores de esporos so efetuados. O CTFA tambm estabelece que organismos isolados da formulao sejam inoculados nos testes de eficcia de conservante quando houver indcios de que so resistentes ao sistema conservante do produto. O uso de organismos-padro permite abrangncia morfolgica e metablica de bactrias, leveduras e bolores que esto largamente distribudos na natureza e que tenham sido associados a problemas microbiolgicos. Permite ainda comparao de sistemas conservantes em produtos diferentes. Isto possibilita padronizar a potncia do sistema conservante e comparar os sistemas conservantes em produtos similares feitos por produtores distintos. O uso de organismo isolado do produto pode ser vantajoso, pois possvel que produtos especficos possam ser mais susceptveis a esses microrganismos que s cepas-padro. Familiaridade com o teste e conhecimento do comportamento de vrios microrganismos em produtos, possibilitam ao microbiologista escolher os melhores organismos-teste para uso no ensaio de eficcia de conservantes. Ento, um perfil pode ser desenvolvido para cada produto, de forma que relacionamento constante entre diferentes microrganismos seja conhecido. Com esta informao pode-se escolher o microrganismo que seja mais lentamente inativado (maior valor D). A escolha dos organismos-teste para uso em produtos especficos fcil quando dados de velocidade de morte dos mesmos tenham sido determinados. Pode-se conduzir testes de eficcia de conservantes pela inoculao do produto com culturas puras ou mistas. Culturas mistas so preparadas inoculando classes de organismos em amostras-teste, e efetuando as contagens de aerbicos viveis por semeadura. Tipicamente, diferentes bactrias em suspenso so misturadas, cada qual com 105-107 organismos por

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mililitro. De forma similar, suspenses de leveduras e bolores so agrupadas para desafiar as amostras-teste. A principal vantagem no uso de cultura pura determinar a velocidade de morte de cada organismo. Isto possibilita ao microbiologista mapear o perfil de resistncia de cada cepa em relao ao produto. Outra variante do ensaio de eficcia antimicrobiana deriva para reinoculaes da mesma amostra aps determinado perodo. A razo de inoculaes repetidas com um organismo-teste em particular visa verificar a capacidade do sistema conservador do produto frente a desafios repetidos, at que o mesmo possa falhar. O valor deste tipo de teste foi questionado recentemente, quando foi demonstrado que a velocidade de inativao de diferentes tamanhos de populao microbiana em um dado produto similar. Estudos efetuados com Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa, comparando 10 inoculaes de 0,1 mL de suspenso padronizada frente nica contaminao com 1 mL, permitiram confirmar que embora o nmero de sobreviventes seja diferente ao longo do acompanhamento, a inclinao da curva de morte foi equivalente, ou seja, o valor D foi o mesmo. Os microrganismos so capazes de se adaptarem maioria de subtratos do seu ambiente. Muitos dos insumos qumicos usados nos cosmticos so substratos adequados para microrganismos quando condies de disponibilidade de gua, pH e temperatura so favorveis ao seu crescimento, apesar de o produto estar supostamente conservado. freqentemente detectada em cosmticos cultura pura de organismo adaptado, capaz de sobreviver e multiplicar-se neste meio. Entretanto, quando repicado em meios nutrientes ricos e reinoculado no substrato original passa a apresentar resistncia diferente. Por tais razes, cepas adaptadas no devem servir como microrganismo desafiante na comprovao da eficcia antimicrobiana. O sistema conservador de medicamentos e cosmticos, exatamente para atender a sua finalidade explcita, devem provocar nos microrganismos desafiantes do teste de eficcia de

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conservantes efeitos inibitrios de crescimento ou letais, passando por estgios de comprometimento da viabilidade celular. Por esta razo o mtodo de avaliao deve ser comprovadamente confivel no tocante recuperao da carga microbiana sobrevivente, sendo, portanto importante a completa inativao dos conservantes por ocasio da semeadura e incubao da amostra.

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6.

CONTROLE DE QUALIDADE

Os ensaios de Controle de Qualidade tm por objetivo avaliar as caractersticas fsicas, qumicas e microbiolgicas das matrias-primas, embalagens, produtos em processo e produtos acabados. Assim, a verificao da conformidade das especificaes deve ser vista como um requisito necessrio para a garantia da qualidade, segurana e eficcia do produto e no somente como uma exigncia regulatria. Conforme a legislao brasileira vigente e harmonizada no Mercosul exigida a apresentao dos dados de Controle de Qualidade (especificaes) no ato da regularizao do produto. Nas inspees, exigida a apresentao das especificaes, dos mtodos de ensaio e dos registros das anlises. A empresa deve cumprir o estabelecido no Termo de Responsabilidade, constante do dossi de registro/notificao, por meio do qual declara que os produtos atendem aos regulamentos e outros dispositivos legais referentes ao controle de processo e de produto acabado, e aos demais parmetros tcnicos relativos s Boas Prticas de Fabricao. O Controle de Qualidade o conjunto de atividades destinadas a verificar e assegurar que os ensaios necessrios e relevantes sejam executados e que o material no seja disponibilizado para uso e venda at que o mesmo cumpra com a qualidade preestabelecida. O Controle de Qualidade no deve se limitar s operaes laboratoriais, mas abranger todas as decises relacionadas qualidade do produto. de responsabilidade das empresas fabricantes e importadoras submeter os produtos cosmticos ao Controle de Qualidade. Para isso, devem disponibilizar recursos para garantir que todas as atividades a ele relacionadas sejam realizadas adequadamente e por pessoas devidamente treinadas. O pessoal que realiza as tarefas especficas deve ser qualificado com base na sua formao, experincia profissional, habilidades pessoais e treinamento.

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fundamental que esse processo seja permanentemente auditado, de maneira a corrigir possveis distores e garantir a sua melhoria contnua. So responsabilidades do Controle de Qualidade: Participar da elaborao, atualizao e reviso de especificaes e mtodos analticos para matrias-primas, materiais de embalagem, produtos em processo e produtos acabados, bem como dos procedimentos relacionados rea produtiva que garantam a qualidade dos produtos. Aprovar ou reprovar matria-prima, material de embalagem, semi-elaborado, a granel e produto acabado. Manter registros completos dos ensaios e resultados de cada lote de material analisado, de forma a emitir um laudo analtico sempre que necessrio. Executar todos os ensaios necessrios. Participar da investigao das reclamaes e devolues dos produtos acabados. Assegurar a correta identificao dos reagentes e materiais. Investigar os resultados fora de especificao, de acordo com os procedimentos internos definidos pela instituio e em conformidade com as normas de Boas Prticas de Fabricao. Verificar a manuteno das instalaes e dos equipamentos. Certificar-se da execuo da qualificao dos equipamentos do laboratrio, quando necessria. Garantir a rastreabilidade de todos os processos realizados. Promover treinamentos iniciais e contnuos do pessoal da rea de Controle da Qualidade.

6.1. MTODOS DE ENSAIO E VALIDAO DE MTODOS

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O laboratrio de Controle de Qualidade deve utilizar mtodos e procedimentos apropriados para os ensaios que realiza. Todas as etapas destinadas a garantir a qualidade e integridade dos produtos, tais como amostragem, manuseio, transporte, armazenamento e preparao dos itens para ensaio, devem estar includas nesse processo. Validao, segundo a ABNT NBR ISO/IEC 170251, a confirmao, por exame e fornecimento de evidncia objetiva, de que os requisitos especficos para determinado uso pretendido esto sendo atendidos. A qualidade dos produtos pode ser controlada por meio de mtodos de ensaios de referncia (compndios oficiais ou os descritos neste Guia) ou mtodos desenvolvidos pela empresa. A confiabilidade dos resultados deve ser comprovada e demonstrar que o procedimento conduz efetivamente ao objetivo desejado. A validao deve ser suficientemente abrangente para atender s necessidades de uma determinada aplicao ou rea de aplicao. O laboratrio deve registrar os resultados obtidos, o procedimento utilizado para a validao e uma declarao de que o mtodo ou no adequado para o uso pretendido (ABNT NBR ISO/IEC 17025).

6.2. ESPECIFICAES DE CONTROLE DE QUALIDADE

Especificaes so documentos que descrevem atributos de matrias-primas, materiais de embalagem, produtos a granel, semi-acabados e acabados. As especificaes de Controle de Qualidade so estabelecidas pela empresa atendendo regulamentao e s normas vigentes, tais como as Listas Restritiva, de Corantes, de
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ABNT NBR ISO/IEC 17025: Requisitos gerais para competncia de laboratrio de ensaio e calibrao especifica os requisitos gerais para a competncia em realizar ensaios incluindo amostragem. aplicvel a ensaios utilizando mtodos normalizados, mtodos no normalizados e mtodos desenvolvidos pelo laboratrio.

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Conservantes e de Filtros Solares e os pareceres da Catec, entre outras, de modo a assegurar a qualidade, a segurana e a eficcia do produto. Os compndios, as farmacopias, os fornecedores de matrias-primas, as pesquisas e as tendncias mercadolgicas podem ser considerados como referncias. As especificaes devem estar devidamente autorizadas e datadas, e devem ser revisadas periodicamente, por profissional competente, em relao aos ensaios preestabelecidos para cada produto. De modo geral, um documento de especificao pode conter: Identificao do material ou produto. Frmula ou referncia mesma. Forma cosmtica e detalhes da embalagem. Referncias utilizadas na amostragem e nos ensaios de controle. Requisitos qualitativos e quantitativos, com os respectivos limites de aceitao. Referncias do mtodo de ensaio utilizado. Condies e precaues a serem tomadas no armazenamento, quando for o caso. Prazo de validade. Data de possveis reavaliaes de controle. Outras informaes relevantes para a empresa.

6.3. AMOSTRAGEM

Amostragem o processo definido de coleta que seja representativa de um todo, de acordo com um plano definido pelo tipo e pela quantidade de um determinado material ou produto. A rigor, uma metodologia estatstica sistemtica para obter informaes sobre alguma caracterstica de uma populao, atravs do estudo de uma frao representativa (isto ,

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amostra) da populao. Existem vrias tcnicas de amostragem que podem ser empregadas (tais como amostragem aleatria simples, amostragem estratificada, amostragem sistemtica, amostragem seqencial, amostragem por lotes), sendo a escolha da tcnica determinada pelo propsito da amostragem e pelas condies sob as quais ela deve ser conduzida. Amostra a frao representativa de um todo, selecionada de tal modo que possua as caractersticas essenciais do conjunto que ela representa.

6.3.1. Amostragem de Produto em Processo e a Granel 6.3.1.1. Procedimento O processo dever ser realizado por pessoal devidamente treinado nos aspectos operacionais e de segurana. A amostragem dever ser executada em etapa(s) definida(s) do processo. Devem ser utilizados acessrios e recipientes previamente definidos e devidamente limpos para a coleta das amostras, com produto em quantidade suficiente para a realizao de todos os ensaios necessrios. A amostra do produto dever ser devidamente rotulada para garantir a identificao e a rastreabilidade do mesmo (exemplo: Nome do Produto/Lote/Nmero da Ordem de Fabricao/Nmero do Tanque de Armazenamento/Data de Fabricao). As amostras devero ser devidamente disponibilizadas para anlise e reteno, conforme procedimento interno da empresa.

6.3.2. Amostragem de Produto Acabado 6.3.2.1.Procedimento

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O processo dever ser realizado por pessoal devidamente treinado nos aspectos operacionais e de segurana. A coleta do produto acabado dever ser realizada aps o envase, em quantidade e periodicidade suficientes para atender s necessidades de controle. O produto amostrado dever ser devidamente identificado, com informaes suficientes para sua rastreabilidade (exemplo: Nome do Produto/Lote/Nmero da Ordem de Fabricao/Nmero do Tanque de Armazenamento/Data de Fabricao). As amostras devero ser devidamente disponibilizadas para anlise e reteno, conforme procedimento interno da empresa.

6.3.3.

Clculo de Amostragem O nmero de amostras a ser tomado pode ser equacionado pelas ferramentas da

estatstica, de modo a representar um valor amostral do total do produto. Seu clculo pode ser feito de vrias formas, sendo a equao a seguir a mais utilizada:

Onde:

n = total de produtos x = normalmente aplica-se valor igual a 1

6.4. TRATAMENTO DAS AMOSTRAS PARA ANLISE

Os produtos cosmticos podem apresentar-se nos estados lquido, semi-slido e slido. Aps selecionar a forma de amostragem, a amostra deve ser tomada e tratada da seguinte forma, conforme o estado do produto: 6.4.1. Amostra em Estado Lquido

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Neste estado encontram-se produtos tais como perfumes, loes, solues, leos, leites, aerossis, entre outros. Tomada de amostra para ensaio: depois de homogeneizada, a amostra deve ser tratada de acordo com as condies especificadas. Alguns mililitros do lquido devem ser transferidos para um recipiente adequado, a fim de realizar os ensaios pertinentes.

6.4.2. Amostra em Estado Semi-Slido Neste estado encontram-se produtos tais como cremes, emulses e gis. Tomada de amostra para ensaio. H dois casos possveis: Produtos acondicionados em embalagens com abertura estreita (exemplos: bisnagas, frascos flexveis): descarta-se a primeira alquota do produto e retira-se a amostra para ensaio. Produtos acondicionados em embalagens com abertura larga (exemplo: potes): a camada superficial deve ser eliminada, homogeneizando-se o restante, para ento ser efetuada a tomada de amostra para ensaio.

6.4.3. Amostra em Estado Slido Neste estado encontram-se produtos tais como ps, ps compactados (sombras, ps compactos, blush), sabonetes em barra e batons na forma de basto. Tomada de amostra para ensaio. H dois casos possveis: Ps: a embalagem deve ser agitada antes de ser aberta, a fim de garantir a homogeneizao da amostra. A seguir, deve ser efetuada a tomada de amostra para ensaio. Ps compactados, sabonetes em barra e batons na forma de basto: a camada superficial do slido deve ser eliminada por meio de uma leve raspagem, para ento ser efetuada a tomada de amostra para ensaio.

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Cada uma das amostras pode ser tratada individualmente ou em conjunto, na forma de pool, desde que originadas de um mesmo lote.

6.5. ENSAIOS ANALTICOS

Os ensaios analticos fazem parte do Controle de Qualidade e tm como objetivo verificar a conformidade dos materiais ou produtos frente s especificaes estabelecidas. A execuo desses ensaios deve ser realizada por profissionais qualificados. A seguir sero descritos alguns ensaios organolpticos e fsico-qumicos, cujas condies de anlise podem ser adequadas pelo fabricante, considerando a tomada da amostra, o estado fsico, a concentrao final, o solvente utilizado e as caractersticas especficas de cada mtodo e equipamento.

6.5.1. Ensaios Organolpticos Ensaios organolpticos so procedimentos utilizados para avaliar as caractersticas de um produto, detectveis pelos rgos dos sentidos: aspecto, cor, odor, sabor e tato. Fornecem parmetros que permite avaliar, de imediato, o estado da amostra em estudo por meio de anlises comparativas, com o objetivo de verificar alteraes como separao de fases, precipitao e turvao, possibilitando o reconhecimento primrio do produto. Deve-se utilizar uma amostra de referncia (ou padro) mantida em condies ambientais controladas, para evitar modificaes nas propriedades organolpticas.

6.5.1.1.Aspecto Observa-se visualmente se a amostra em estudo mantm as mesmas caractersticas macroscpicas da amostra de referncia (padro) ou se ocorreram alteraes do tipo

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separao de fases, precipitao, turvao, etc. O padro a ser utilizado no ensaio deve ser o estabelecido pelo fabricante.

6.5.1.2.Cor A anlise da cor (colorimetria) pode ser realizada por meio visual ou instrumental. Na anlise visual (colorimetria visual) compara-se visualmente a cor da amostra com a cor de um padro armazenado em frasco da mesma especificao. Pode-se efetuar essa anlise sob condies de luz branca natural ou artificial ou ainda em cmaras especiais, com vrias fontes de luz (ou seja, vrios comprimentos de onda). A anlise instrumental substitui o olho humano como detector e pode ser feita por meio da colorimetria fotoeltrica ou da colorimetria espectrofotomtrica. A colorimetria fotoeltrica o mtodo que utiliza uma clula fotoeltrica como detector. usualmente empregado com luz contida em um intervalo relativamente estreito de comprimento de onda obtido pela passagem da luz branca atravs de filtros. Os aparelhos utilizados nesse mtodo so conhecidos como colormetros ou fotmetros de filtro. A colorimetria espectrofotomtrica o mtodo que utiliza uma fonte de radiao em vrios comprimentos de onda na regio espectral do visvel. O aparelho utilizado nesse mtodo conhecido como espectrofotmetro.

6.5.1.3.Odor A amostra e o padro de referncia, acondicionados no mesmo material de embalagem, devem ter seu odor comparado diretamente atravs do olfato.

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6.5.1.4. Sabor Compara-se o sabor da amostra com o do padro de referncia, diretamente atravs do paladar.

6.5.1.5. Critrio de Avaliao Aps avaliao comparativa, a amostra tem que estar em conformidade com a amostra de referncia (padro) preestabelecida.

6.5.2. Ensaios Fsico-Qumicos Ensaios fsico-qumicos so operaes tcnicas que consistem em determinar uma ou mais caractersticas de um produto, processo ou servio, de acordo com um procedimento especificado. Os equipamentos devem ser submetidos manuteno e calibrao/aferio peridicas, de acordo com um programa estabelecido pela empresa, de forma a garantir que forneam resultados vlidos. A fim de garantir a rastreabilidade dessas aes, todos os documentos e registros referentes a elas devem ser mantidos nos arquivos da empresa.

6.5.2.1. Determinao de pH o logaritmo negativo da concentrao molar de ons de hidrognio. Representa convencionalmente a acidez ou a alcalinidade de uma soluo. A escala de pH vai de 1 (cido) a 14 (alcalino), sendo que o valor 7 considerado pH neutro. O pH determinado por potenciometria, pela determinao da diferena de potencial entre dois eletrodos o de referncia e o de medida imersos na amostra a ser analisada, e depende da atividade dos ons de hidrognio na soluo.

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6.5.2.1.1. Descrio do Mtodo Antes do uso, deve-se verificar a limpeza e determinar a sensibilidade do eletrodo, utilizando-se solues tampo de referncia e, quando aplicvel, ajustando-se o equipamento. Se o produto um slido ou semi-slido, recomenda-se preparar uma

soluo/disperso/suspenso aquosa da amostra em uma concentrao preestabelecida e determinar o pH da mistura com o eletrodo apropriado. Em alguns casos, a medio pode ser feita diretamente na amostra. Se o produto uma loo ou soluo, recomenda-se determinar o pH diretamente sobre o lquido, imergindo-se o eletrodo diretamente nele.

6.5.2.2. Determinao de Viscosidade Viscosidade a resistncia que o produto oferece deformao ou ao fluxo. A viscosidade depende das caractersticas fsico-qumicas e das condies de temperatura do material. A unidade fundamental da medida de viscosidade o poise. Consiste em medir a resistncia de um material ao fluxo por meio da frico ou do tempo de escoamento. H vrios mtodos para se determinar a viscosidade. Os mais freqentes utilizam viscosmetros rotativos, de orifcio e capilares: Determinao por viscosmetro rotativo: consiste na medio do torque requerido para rodar um fuso imerso em um dado fluido. Determinao por viscosmetro de orifcio: consiste na medio do tempo de escoamento do material comparado com a gua. Utiliza-se um copo na forma de cone (copo Ford), com um orifcio na parte inferior por onde escoa o fluido. A escolha do dimetro do orifcio feita em funo da faixa de viscosidade a ser determinada.

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Determinao por viscosmetro capilar (Ostwald): consiste na medio do tempo de escoamento do material comparado com a gua. A fora hidrosttica do lquido fora-o a fluir atravs de um tubo capilar.

6.5.2.2.1. Descrio do Mtodo Vrios so os mtodos utilizados para a determinao da viscosidade de um fluido. Os mtodos a seguir so os mais usuais em laboratrios: Viscosmetro rotativo: dependendo da faixa de viscosidade da amostra, seleciona-se o fuso (spindle) adequado. A seguir, mergulha-se o fuso diagonalmente na amostra com temperatura estabilizada, conforme especificado isenta de bolhas, at a marca (sulco) da haste do fuso, e nivela-se o aparelho. Verificada a ausncia de bolhas junto ao fuso, procede-se leitura da viscosidade, de acordo com o procedimento operacional do aparelho. Viscosmetro de orifcio: nivela-se o aparelho em superfcie plana. Depois de se obstruir o orifcio localizado na parte inferior do copo com o dedo e colocar lentamente a amostra at transbordar, com temperatura estabilizada, conforme especificado nivela-se a superfcie da amostra com uma esptula. Verifica-se ento a presena de bolhas, que afetam a medida. Retira-se o dedo do orifcio e, ao mesmo tempo, com a outra mo, aciona-se o cronmetro. Imediatamente aps o escoamento, pra-se o cronmetro e registra-se o tempo para fins de clculo.

Onde: T = tempo expresso em segundos A e B = constantes definidas experimentalmente pelo fabricante, que variam para diferentes orifcios do copo Viscosmetro capilar: para determinar a viscosidade, deve-se transferir a amostra para o viscosmetro e estabilizar o conjunto at a temperatura especificada. A seguir, aspira-se a

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amostra com o auxlio de um pipetador at a marca superior do menisco no viscosmetro e cronometra-se o tempo de escoamento entre a marca do menisco superior e do inferior. Repetese esse procedimento trs vezes e calcula-se a mdia. Determinao da constante K: transfere-se a amostra para o viscosmetro e estabiliza-se o conjunto at a temperatura especificada. Aspira-se a amostra com o auxlio de um pipetador at a marca superior do menisco no viscosmetro e cronometra-se o tempo de escoamento entre a marca do menisco superior e do inferior. Repete-se esse procedimento cinco vezes e calcula-se a mdia. Clculo da constante K:

Onde: 1 = 1 centipoise T = tempo de escoamento da gua em segundos Clculo da viscosidade:

Onde: V = viscosidade da amostra em centipoises (cps) T = tempo de escoamento da amostra em segundos K = constante K De acordo com as caractersticas fsicas do produto, podem ser utilizados diferentes tipos de viscosmetros.

6.5.2.3.

Determinao de Densidade

Densidade a relao entre a massa e o volume. Existem vrias formas de densidade: Densidade absoluta uma propriedade fsica de cada substncia, cujo valor se calcula pela relao entre certa massa da substncia e o volume ocupado por essa massa (d=m/V),

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tomando por unidade geralmente o grama por centmetro cbico (g/cm3). No sistema internacional, a unidade o quilograma por metro cbico (kg/m3). Densidade relativa a relao entre a densidade absoluta de uma substncia e a densidade absoluta de outra substncia estabelecida como padro. Densidade aparente a relao direta entre a massa de uma amostra e seu volume especfico, medido em proveta graduada. Densidade especfica uma densidade relativa, sendo utilizada como padro a densidade absoluta da gua, que igual a 1.000 kg/dm3 ou g/cm3 a 4C (temperatura em que a gua mais densa). No caso de gases, tomada em relao ao ar ou ao hidrognio. Baseia-se na razo entre a massa e o volume de uma dada amostra.

6.5.2.3.1. Descrio do Mtodo A densidade pode ser medida utilizando-se picnmetro metlico, picnmetro de vidro, densmetro e densmetro digital. Determinao da densidade aparente: deve-se pesar uma quantidade da amostra e introduzi-la na proveta, tampando-a em seguida. Para os produtos na forma de p, necessrio acomodar a amostra, eliminando o ar entre as partculas por meio de leves batidas em movimentos verticais, padronizados, com altura fixa, sobre uma superfcie lisa, at obter volume constante. Deve-se anotar o volume. Clculo:

Onde: d = densidade aparente em g/ml m = massa da amostra em gramas v = volume final em mililitros

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Determinao da densidade em picnmetro de vidro ou metlico: utiliza-se o de vidro

para os produtos lquidos e o de metal para os produtos semi-slidos e viscosos. Pesa-se o picnmetro vazio e anota-se o seu peso (M0). A seguir, deve-se ench-lo completamente com gua purificada, evitando-se a introduo de bolhas. Aps sec-lo cuidadosamente, necessrio pes-lo novamente e anotar seu peso (M1). O prximo passo encher completamente o picnmetro (limpo e seco) com a amostra, evitando a formao de bolhas. Depois de sec-lo cuidadosamente, ele deve ser pesado mais uma vez e ter seu peso (M2) anotado. Clculo:

Onde: d = densidade M0 = massa do picnmetro vazio, em gramas M1 = massa do picnmetro com gua purificada, em gramas M2 = massa do picnmetro com a amostra, em gramas Determinao da densidade em solues alcolicas: transfere-se a amostra para uma proveta adequada, ajustando-se a temperatura da amostra de acordo com a especificao do alcometro. A seguir, deve-se introduzir o densmetro (tambm chamado de Alcometro GayLussac) na amostra e proceder leitura na escala do densmetro. Determinao da densidade por densmetro digital: depois de esperar o aparelho atingir a temperatura determinada pela calibrao, injeta-se a amostra com uma seringa, lentamente, tendo o cuidado de no deixar formar bolhas no tubo de vidro. O aparelho, ento, realizar a leitura.

6.5.2.4.Determinao de Materiais Volteis e Resduo Seco

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Determinada quantidade da amostra, pesada analiticamente, submetida secagem em estufa aquecida a uma temperatura preestabelecida (de acordo com as caractersticas da amostra), at atingir peso constante. A diferena entre a massa da amostra, antes e depois da secagem, revela a massa dos componentes da formulao que volatilizam ou no naquelas condies. O material remanescente denominado resduo seco. Este mtodo fornece resultados numricos facilmente interpretados, normalmente expressos em porcentagem. Clculo de materiais volteis:

Onde: MV = materiais volteis em porcentagem mi = massa inicial da amostra em gramas mf = massa final da amostra em gramas

Clculo de resduo seco:

Onde: RS = resduo seco em porcentagem mi = massa inicial da amostra em gramas mf = massa final da amostra em gramas

6.5.2.5.Determinao do Teor de gua/Umidade Vrios so os mtodos utilizados para a determinao quantitativa de gua em um produto acabado. Os mais usuais so: Mtodo Gravimtrico, Mtodo Destilao em aparelho de Dean & Stark e Mtodo Titulomtrico de Karl-Fischer. Esses mtodos fornecem resultados numricos, facilmente interpretados.

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O mtodo de ensaio depender da escolha do equipamento utilizado.

6.5.2.6.Granulometria Os produtos em forma de ps so constitudos de partculas de dimetros variados. A proporo de partculas fora dos limites especificados poder influenciar na aparncia, no desempenho e na cor do produto. Para esse tipo de ensaio, podem ser utilizados os seguintes mtodos: Tamisao: so utilizados tamis com malhas padronizadas para especificar o tamanho das partculas. Anlise granulomtrica por difrao a laser: utilizada para avaliar partculas de tamanho reduzido.

6.5.2.7.Teste de Centrfuga A fora da gravidade atua sobre os produtos, fazendo com que suas partculas se movam no seu interior. A centrifugao produz estresse na amostra, simulando um aumento na fora de gravidade, aumentando a mobilidade das partculas e antecipando possveis instabilidades. Estas podero ser observadas na forma de precipitao, separao de fases, formao de sedimento compacto (caking) e coalescncia, entre outras. As amostras so centrifugadas em temperatura, tempo e velocidade padronizados. Em seguida, procede-se avaliao visual. Geralmente, executa-se esse teste em estudos de estabilidade, podendo ser estendido ao controle de processo.

6.5.3. Ensaios Qumicos 6.5.3.1.Determinao Qumica Anlise Qualitativa e Quantitativa

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A anlise qumica caracterizada como a aplicao de um processo ou de uma srie de processos para qualificar e/ou quantificar uma substncia ou componentes de uma mistura, ou para determinar a estrutura de compostos qumicos.

6.5.4. Ensaios Microbiolgicos Produtos no estreis so aqueles nos quais se admite conceitualmente a presena de carga microbiana, embora limitada, tendo em vista as caractersticas de sua utilizao. Exemplificativamente, tm-se os produtos cosmticos e os farmacuticos tpicos e orais, que em condies ordinrias de uso tero contato com reas portadoras de flora microbiana natural, constituda de saprfitas em nmero por vezes elevado. A ateno no controle dos produtos no estreis assegura que a carga microbiana presente no produto, seja no aspecto qualitativo ou quantitativo, no comprometa a sua qualidade final ou a segurana do paciente. O objetivo imediato comprovar a ausncia de microrganismos patognicos e determinar o nmero de microrganismos viveis, em funo dos tipos de utilizao do produto. A segurana do consumidor, no que diz respeito ao aspecto quantitativo dos microrganismos saprfitas, se deve ao risco de os mesmos se portarem como agentes infectantes oportunistas. A presena das cepas reconhecidamente patognicas proibitiva, pois representa potencial risco de aquisio de quadro clnico infeccioso, ou de transferncia de toxinas igualmente indesejveis. A qualidade microbiana de medicamentos deve ser definida frente a diferentes fatores, entre os quais, de elevada importncia, o fato de ser consumido por pessoas debilitadas por vezes inclusive imunodeprimidas. No caso de cosmticos, o cuidado com peles sensveis, como a de bebs, ou adolescentes propensos a acne, exige especial cuidado quanto ao limite microbiano. Cargas microbianas elevadas podem tambm facilmente comprometer a estabilidade do produto. Conseqncias deste comprometimento esto associadas com a perda da eficcia

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teraputica, seja por degradao do princpio ativo, seja por alterao de parmetro fsico fundamental para sua atividade, como por exemplo o pH. Aspecto igualmente importante consiste na alterao das propriedades fsico-qumicas que pode indiretamente afetar a ao teraputica, comprometendo a biodisponibilidade do produto, assim como a aceitao do mesmo pelo consumidor. Situaes possveis, entre outras, so: alterao de pH, resultando em faixas de colorao distintas do corante ou em precipitaes; produo de gases, provocando odor desagradvel; ao enzimtica promovendo a degradao de tensoativos (lipases) ou de macromolculas (celulases), levando quebra de emulses ou alterao da viscosidade de gis. Fatores essenciais para que se atinjam nveis adequados de qualidade microbiana no produto terminado envolvem as fontes diretas de contaminao, acarretadas por fluidos gasosos, gua e demais matrias-primas, principalmente de origem natural, e material de acondicionamento. Ainda, existem fontes indiretas como decorrentes de: procedimentos de limpeza (borrifamento de gua contaminada); de instalaes inadequadas (fluxo de pessoal e material, barreiras sanitrias incluindo roedores, insetos e microrganismos); pessoal no paramentado ou submetido a exames mdicos peridicos; equipamentos com limpeza inadequada, particularmente nos pontos crticos e sem procedimentos validados. Seja em etapas intermedirias da manipulao, seja aps o enchimento e mesmo durante o tempo de prateleira do produto, diferentes fatores interferem elevando ou reduzindo a sua carga microbiana.

6.5.4.1.Teste de limite microbiano Produtos no estreis so aqueles nos quais se admite conceitualmente a presena de carga microbiana, embora limitada, tendo em vista as caractersticas de sua utilizao. Exemplificativamente, tm-se os produtos cosmticos e os farmacuticos tpicos e orais, que em condies ordinrias de uso tero contato com reas portadoras de flora microbiana natural,

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constituda de saprfitas em nmero por vezes elevado. A ateno no controle dos produtos no estreis assegura que a carga microbiana presente no produto, seja no aspecto qualitativo ou quantitativo, no comprometa a sua qualidade final ou a segurana do paciente. O objetivo imediato comprovar a ausncia de microrganismos patognicos e determinar o nmero de microrganismos viveis, em funo dos tipos de utilizao do produto. A segurana do consumidor, no que diz respeito ao aspecto quantitativo dos microrganismos saprfitas, se deve ao risco de os mesmos se portarem como agentes infectantes oportunistas. A presena das cepas reconhecidamente patognicas proibitiva, pois representa potencial risco de aquisio de quadro clnico infeccioso, ou de transferncia de toxinas igualmente indesejveis. A qualidade microbiana de medicamentos deve ser definida frente a diferentes fatores, entre os quais, de elevada importncia, o fato de ser consumido por pessoas debilitadas por vezes inclusive imunodeprimidas. No caso de cosmticos, o cuidado com peles sensveis, como a de bebs, ou adolescentes propensos a acne, exige especial cuidado quanto ao limite microbiano. Cargas microbianas elevadas podem tambm facilmente comprometer a estabilidade do produto. Conseqncias deste comprometimento esto associadas com a perda da eficcia teraputica, seja por degradao do princpio ativo, seja por alterao de parmetro fsico fundamental para sua atividade, como por exemplo, o pH. Aspecto igualmente importante consiste na alterao das propriedades fsico-qumicas que pode indiretamente afetar a ao teraputica, comprometendo a biodisponibilidade do produto, assim como a aceitao do mesmo pelo consumidor. Situaes possveis, entre outras, so: alterao de pH, resultando em faixas de colorao distintas do corante ou em precipitaes; produo de gases, provocando odor desagradvel; ao enzimtica promovendo a degradao de tensoativos (lipases) ou de macromolculas (celulases), levando quebra de emulses ou alterao da viscosidade de gis.

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Fatores essenciais para que se atinjam nveis adequados de qualidade microbiana no produto terminado envolvem as fontes diretas de contaminao, acarretadas por fluidos gasosos, gua e demais matrias-primas, principalmente de origem natural, e material de acondicionamento. Ainda, existem fontes indiretas como decorrentes de: procedimentos de limpeza (borrifamento de gua contaminada); de instalaes inadequadas (fluxo de pessoal e material, barreiras sanitrias incluindo roedores, insetos e microrganismos); pessoal no paramentado ou submetido a exames mdicos peridicos; equipamentos com limpeza inadequada, particularmente nos pontos crticos e sem procedimentos validados. Seja em etapas intermedirias da manipulao, seja aps o enchimento e mesmo durante o tempo de prateleira do produto, diferentes fatores interferem elevando ou reduzindo a sua carga microbiana.
Frmula O valor nutritivo proporcionado populao microbiana, devido

presena, por exemplo, de protenas e carbohidratos, hoje comum nos cosmticos, desde que no em concentrao hiperosmtica, fator favorvel elevao da carga microbiana. Diferentemente, etanol, sacarose, sorbitol e propilenoglicol tendem a favorecer cargas microbianas mais baixas, nas concentraes normalmente utilizadas em produtos lquidos. Os conservantes devem ser usados com critrio, aps testes prvios, uma vez que podem interagir com outros componentes da frmula e ter sua atividade reduzida. Por exemplo, alguns conservantes so inativados pelos tensoativos da frmula. Tambm, no devem ser usados como paliativos no obedincia aos procedimentos adequados e inobservncia a normas de BPF;
pH Os microrganismos crescem em pH neutro ou em faixa prxima da neutralidade,

havendo efeito inibitrio em valores extremamente cidos ou alcalinos;


Atividade de gua A sobrevivncia de microrganismos est diretamente associada a

nvel mnimo indispensvel de atividade de gua, da qual depende a necessidade de

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incorporao de conservantes. Alternativas interessantes, com baixa atividade de gua e aplicveis a princpios ativos de baixa estabilidade so as preparaes extemporneas. Adicionalmente ao menor risco de deteriorao e no adio de conservantes ou de gua purificada, apresentam a vantagem da reduo no peso da carga para transporte visando distribuio para comercializao do produto;
Processo Fator positivo no sentido da reduo da carga microbiana consiste no

emprego de temperaturas elevadas. Temperaturas intermedirias, da ordem de 40C, tm efeito oposto, promovendo a proliferao microbiana ao invs da letalidade. A gua de condensao que se forma na superfcie interna da tampa dos reatores, onde o produto contendo excipiente lipfilo foi homogeneizado sob aquecimento, pode permitir a proliferao de microrganismos; da mesma forma, pequena quantidade de gotculas de gua, formadas durante o resfriamento do produto. Processos envolvendo teores elevados de gua em fases intermedirias e com secagem subseqente, ainda assim devem ser considerados como fatores de risco de contaminao. As primeiras incluses de limites microbianos aplicados a produtos farmacuticos e seus insumos ocorreram de forma vaga, como a recomendao inicial de ausncia de emboloramento na 11 e 12 edies da USP, respectivamente em 1936 e 1942, que evoluiu para requisito de limite de contaminante aerbico mesfilo, na especificao de levedura de cerveja, a partir da 13 edio, em 1947. No Formulrio Nacional de 1970 (NF XIII) e na 18 edio da Farmacopia, do mesmo ano, a expresso foi modificada para drogas vegetais e animais devero estar, o mximo possvel, isentas de microrganismos, sendo que os patognicos no devero estar presentes. interessante lembrar que o primeiro insumo farmacutico com especificao relativa qualidade microbiolgica foi a gelatina, na USP XII de 1942, com o limite tolerado, em funo de sua origem, de 104 bactrias totais por grama. Esta especificao foi alterada diversas vezes, tendo passado por 5 x 103/g, na 18 edio; 104/g, na edio seguinte e, finalmente, 103/g a

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partir da 20. Alm dessa exigncia quantitativa havia outro requisito, isto , ausncia de patognicos especficos numa determinada tomada de ensaio, sendo que esse aspecto foi gradativamente se tornando mais exigente, com a tomada de ensaios de 10 mg ou menos (USP XII), alterada para 10 mg (USP XVI) e, finalmente, para 10 g (USP XVIII). Inicialmente se imps ausncia de Escherichia coli (USP XII e XIII), com modificao para ausncia de coliformes nas quatro edies seguintes, porm reconsiderada na USP XVIII. Alm disso, iniciou-se a exigncia adicional sobre a ausncia de Salmonella sp., permanecendo inalterada. As monografias farmacopeicas incluem requisitos para um ou mais patognicos especficos em funo da origem da matria-prima, visando evitar a transmisso de doenas para os pacientes atravs da terapia medicamentosa. Em alguns casos, deve-se efetuar a pesquisa de determinados grupos contaminantes (coliformes, enterobactrias) a fim de avaliar a qualidade sanitria envolvida na obteno e/ou preparo desses insumos. Ateno especial foi dirigida s matrias-primas pela Farmacopia Americana, com a introduo de captulo sobre Atributos microbiolgicos de produtos farmacuticos no estreis, na 18 edio, tendo sugerido monitoramento com maior nfase com relao a matrias-primas de origem animal ou botnica, especialmente aquelas que permitem o crescimento microbiano e que no se tornam estreis durante o processamento subsequente. A ausncia de microrganismos patognicos viveis como Salmonella sp., Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas sp. e Staphylococcus aureus foi considerada atributo desejvel para produto de qualidade adequada. Na USP XIX, o mesmo captulo inclui considerao sobre esta categoria de insumos (origem vegetal e animal), de que podem carregar microrganismos patognicos no destrudos pelos processamentos posteriores, tendo introduzido, adicionalmente pesquisa de microrganismos especficos, a contagem de microrganismos viveis aerbicos totais. Sugeriu-se

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inclusive, que os produtos contendo tais matrias-primas deveriam ser rotineiramente testados quanto presena de patognicos especficos. Na USP XXIII e NF, especificao de qualidade microbiana consta em 50 monografias de matrias-primas. Em algumas apresenta o limite de nmero de viveis e os microrganismos indesejveis e em outras, apenas os microrganismos cuja presena restrita. O limite de carga microbiana vivel permitida varia de 10 2 a 103 g(mL). Na Farmacopia Britnica, a partir da edio de 1973 configuram as monografias de digitalis e de goma adraganta com especificao declarada para a ausncia de patognicos especficos. Com relao regulamentao brasileira, observa-se a incluso de padres microbianos a partir da 2 edio, configurando para a levedura seca limites quantitativos para bactrias e fungos, sendo de 7,5 x 103 bactrias e 50 fungos por grama, semelhana de recomendaes da Farmacopia Americana da 13 a 15 edies. Na Farmacopia Brasileira III os limites para esta matria-prima foram eliminados, e a ltima edio de 1988, apenas parcialmente publicada, inclui o procedimento para a contagem de microrganismos viveis, a relao de microrganismos considerados indesejveis e os mtodos de pesquisa e identificao dos mesmos. O Fascculo I da Parte II, publicado em 1996, apresenta especificao em algumas das monografias. Em relao aos fitoterpicos, a Portaria no 123 de 19 de outubro de 1994, na Norma Tcnica para Registro de Fitoterpicos, estabelece a seguinte especificao para matriasprimas vegetais: menos que 105/g de total de viveis; menos que 104/g de leveduras ou fungos; menos que 103/g de enterobactrias; ausncia de Salmonella sp., Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli e fungos da famlia Aspergillus. No entanto, essa especificao no foi mantida na Portaria no 6 de 31 de janeiro de 1995, mencionando que a pesquisa de contaminantes microbiolgicos e biolgicos deve estar de acordo com a

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Farmacopia Brasileira ou com as recomendaes da Organizao Mundial da Sade. A Resoluo RDC no 17, de 24 de fevereiro de 2000, menciona que a pesquisa de contaminantes microbiolgicos deve estar de acordo com critrios farmacopeicos ou recomendaes da Organizao Mundial da Sade. Outros padres para medicamentos no estreis e insumos foram propostos na dcada de 60. Anteriormente, apenas a Farmacopia da Checoslovquia inclua a especificao para contaminao microbiana, com limite de 5 x 104 g(mL) para contagem total de viveis e ausncia de indicadores da contaminao fecal, e de outros patognicos especficos e bolores. Nas outras farmacopias constavam especificaes para algumas matrias-primas de origem natural. O padro proposto pelo Ministrio da Sade da Sucia, em 1967, estabeleceu o limite de 102 g(mL) em relao carga microbiana vivel total, com a ressalva de, nos casos em que esta especificao no puder ser atendida, comprovar a ausncia de coliformes e de Salmonella sp. Os padres para medicamentos no estreis para uso oral foram propostos por diferentes organizaes. A nvel internacional, propostas como as da Federao Internacional Farmacutica (FIP), Comisso da Farmacopia Europia e Sociedade Italiana de Cincias Farmacuticas basearam-se no risco da contaminao para o paciente, em funo da via de administrao. Para os medicamentos de uso tpico, que no necessitam atender s provas de esterilidade, porm por serem preparaes para aplicao em reas mais susceptveis contaminao, como peles lesadas, nariz, garganta, ouvido etc., foi recomendado limite mais rgido; para outras preparaes como as de uso oral, mais tolerantes. O limite de 104 g(mL) para bactrias aerbicas totais, que consta da especificao da FIP refere-se a produtos com componentes que so inevitavelmente contaminados, e que no podem ser submetidos a processos de descontaminao. Em relao aos microrganismos que devem estar ausentes so

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citados: Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli e Salmonella sp. A especificao de quais destas espcies devem estar ausentes difere, dependendo do padro e da via de administrao. Restrio a outros microrganismos adicionais, como enterobactrias, estreptococos fecais e clostrdios sulfito-redutores foi sugerida em outras especificaes, como a do Laboratrio de Sade da Frana. Apesar do reconhecimento, a muitos anos, da importncia do controle microbiano de produtos no estreis, a implantao e aceitao dos padres sanitrios tm ocorrido lentamente. Este fato pode ser observado nas farmacopias em que os padres esto sendo includos gradativamente. As monografias farmacopeicas nas quais consta especificao para qualidade microbiolgica, de forma geral, referem-se ausncia de uma ou mais espcies especficas. Apesar de a carga microbiana total tambm ser parmetro de avaliao da qualidade sanitria do produto, o limite para o nmero de microrganismos viveis exigncia apenas em algumas especificaes. Quanto aos produtos cosmticos, devido necessidade de se estabelecer nveis microbianos que assegurassem boa qualidade dos mesmos, em 1973 a Cosmetic Toiletry and Fragrance Association (CTFA), cujos participantes so representados por vrios fabricantes dos Estados Unidos da Amrica, adotou limites de tolerncia que, embora no mandatrios, se tornaram referncia internacional. Tais limites consideram tolerncia de no mais que 500 microrganismos por grama em produtos para bebs e naqueles utilizados na rea dos olhos e de no mais que 103 microrganismos por grama para todos os outros, alm de mencionar que nenhum produto deve ter contedo microbiano considerado nocivo para o usurio. Outros padres, com nveis de exigncia por vezes diferindo dos acima apresentados, so adotados por distintas instituies, de regies geogrficas as mais diversas. A Portaria no 600 de 28 de novembro de 1997 da Secretaria da Vigilncia Sanitria, publicada no DOU em 01 de

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dezembro de 1997, submeteu consulta popular o padro proposto pelo Grupo de Microbiologia da Associao Brasileira de Cosmetologia. Segundo este padro, os produtos cosmticos so subdivididos em 2 grupos, Tipo I e II, dependendo do local de aplicao. O Tipo I refere-se a produtos para uso infantil, para rea dos olhos e para aqueles que entram em contato com a mucosa. O Tipo II, para demais produtos susceptveis contaminao. A especificao proposta para o Tipo I a seguinte: menos que 102 UFC/g(mL) de microrganismos totais aerbicos; ausncia de Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, coliformes totais e fecais em 1 g(mL); no caso do talco, ausncia de clostrdios sulfitoredutores, tambm em 1 g. O padro proposto para os do Tipo II difere em relao ao primeiro apenas no limite de aerbicos totais que de menos que 103 UFC/g(mL). Esta especificao foi confirmada na Resoluo no 481, de 23 de setembro de 1999, da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria. Os fabricantes de cosmticos, semelhana daqueles de medicamentos, devem sempre trabalhar com o objetivo de fornecer produtos seguros ao consumidor. Assim so necessrios os padres domsticos que considerem, respectivamente para medicamentos e cosmticos, orientaes de compndio farmacutico e de especificao como a do CTFA. Acima de qualquer limite, fica patente a responsabilidade do fabricante na avaliao do seu produto, da matria-prima e dos processos, devendo as especificaes refletir informaes e conhecimentos revisados e atualizados.

6.5.4.1.1. Mtodos de Anlise Os mtodos de anlise, envolvendo tanto os medicamentos no estreis quanto os cosmticos, abrangem trs etapas fundamentais: amostragem, englobando coleta, transporte e preparao da amostra para anlise; determinao numrica ou contagem das formas viveis; isolamento e identificao dos microrganismos indesejveis a serem pesquisados.

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6.5.4.1.2. Amostragem A amostragem a ser efetuada para investigao quanto ao atendimento aos padres microbianos deve ser representativa, em termos de abrangncia do volume contido, do nmero de unidades contenedoras, e das operaes unitrias envolvendo risco de contaminao adicional ou de proliferao microbiana. Para que se cumpra tal meta, critrios distintos devem ser adotados, a circunstncias especficas. Em se tratando de sacos ou barricas contendo matria-prima no estril na forma pulverizada, dispositivos de amostragem devem permitir a obteno de fraes da parte inferior, mediana e superior de cada um de N ou N + 1 do nmero total dos recipientes. H que se efetuar a assepsia na rea prxima coleta de amostras, usarem preferencialmente recipientes com vlvula de amostragem, ou na sua ausncia proceder vedao hermtica subseqente. Em se tratando de lquidos, importante que se evite o emprego de pipetas ou tubos de vidro, com risco de quebra e liberao de fragmentos no contedo. Cuidados semelhantes so tambm pertinentes aos produtos a granel, seja ao se considerar reatores ou misturadores contendo cremes, pomadas ou lquidos. Nos processos contnuos, a segmentao como incio, meio e fim do processo deve estar contemplada na amostragem. J no caso de material de acondicionamento, de embalagem ou dispensadores de produtos cosmticos ou medicamentosos, a forma facilmente aplicvel e que permite melhores resultados a adoo de planos de amostragem respeitando conceitos estatsticos, tendo como exemplo o Millitary Standard. Considerando o produto terminado, toma-se via de regra duplicata ou triplicata da amostra, representando incio, meio e fim do processo de enchimento, admitindo que aps o fechamento do material de acondicionamento a introduo de contaminantes no mais existir.

6.5.4.1.2.1. Coleta e Transporte das Amostras

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Quando da avaliao em fases intermedirias de processamento, a amostragem deve ser feita em local limpo, por operador treinado, utilizando-se de recipientes, dispositivos auxiliares, esptulas ou pipetas esterilizados. Os recipientes preferencialmente devem ser de boca larga, e com capacidade para 100 g(mL). O transporte deve ser em condies adequadas de temperatura.

6.5.4.1.2.2.Quantidade a Ser Analisada A quantidade de amostra a ser coletada depende das anlises, inclusive com reteste. Alm disto, deve ser em funo de patognicos especficos a serem pesquisados, que exijam tratamentos distintos. A recomendao das principais farmacopias, para enriquecimento na pesquisa de patognicos , geralmente, de 10 g(mL), alm da contagem total em igual quantidade. No caso do volume total da amostra ser de 10 g(mL), ou inferior, este total deve ser analisado. A tomada de ensaio pode ser reduzida para 1 g(mL) em amostras de produtos de alto valor agregado.

6.5.4.1.2.3.Preparao da Amostra A primeira preocupao ao preparar a amostra consiste na verificao da atividade antimicrobiana do produto devido presena de conservantes na frmula. Estes devem ser inativados com substncias adequadas, conforme sua natureza qumica. A adio dos inativantes, previamente esterilizados por algum dos processos eficientes, deve ser previamente validada. Outro cuidado importante, para no impedir o crescimento microbiano, o ajuste do pH do produto diludo para a faixa da neutralidade. A homogeneizao da amostra fundamental no sentido de conduzir a transferncia para etapas subseqentes de forma representativa, ainda que a mesma tenha sido diluda,

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empregando, por exemplo, soluo salina peptonada (0,1%), soluo tamponada (pH 7,0) ou caldo lactose. A homogeneizao propriamente dita normalmente feita em homogeneizadores mecnicos (no de altssima velocidade, incompatveis com a estrutura celular), podendo ser tambm manual ou empregando gral e pistilo previamente esterilizados, na dependncia da amostra. Algumas formas farmacuticas ou cosmticas podero exigir tratamento especfico, no sentido de permitir o contato ntimo da amostra com o meio diluente. Assim, no caso de produtos em aerossol, em que a tomada de amostra pode considerar o peso da embalagem antes e aps expelir alquotas do produto e propelente, este ser naturalmente eliminado. Forma de manuseio operacional trabalhosa o sabonete, que exige fragmentao criteriosa, seguida de leve aquecimento, recurso tambm aplicvel no caso de supositrios e pomadas. Produtos com fase oleosa exigem a adio de agente tensoativo, cuja concentrao deve ser cuidadosamente definida para evitar efeito inibidor sobre possveis microrganismos contaminantes. Todas as operaes empregadas de forma a possibilitar a contagem e pesquisa de microrganismo devem ser tambm parte da validao da tcnica, assegurando confiabilidade ao ensaio.

6.5.4.1.3.

Mtodos de Contagem de Microrganismos

6.5.4.1.3.1. Em Meio Slido, com Semeadura da Amostra em Profundidade (Pour Plate)

Consiste na transferncia de alquota de 1 a 2 mL da diluio da amostra (de cada diluio a ser considerada) para rplicas de placas de Petri estreis (usualmente de 2 a 3 a cada diluio). O meio de cultura estril fundido e resfriado a temperatura compatvel com a fisiologia celular (45 48oC), em quantidade de cerca de 20 mL, vertido sobre cada uma das placas contendo

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amostra, seguido de homogeneizao com movimentos em S ou 8 sobre a bancada de trabalho, as quais permanecem at solidificao a temperatura ambiente. Segue-se incubao das placas, em estufa, na posio invertida. Aps 2 a 5 dias de incubao a 30 35oC, para bactrias e 5 a 7 dias para bolores e leveduras, a 20 25oC, as colnias so contadas, a vista desarmada ou com auxlio de contadores de colnia tipo Quebec, abrangendo o crescimento tanto da superfcie como profundidade, no interior do gel. O nmero mdio (30 a 300 por placa) decorrente da rplica correspondente a uma determinada diluio, multiplicado pelo fator de diluio dar o nmero de unidades formadoras de colnias (UFC) por unidade de peso ou volume da amostra. Este mtodo limitante para amostras que conferem opacidade ao meio, no permitindo a visualizao das colnias desenvolvidadas aps a incubao. Um recurso , aps a incubao, adicionar cerca de 5 mL de gar a 1,0% em gua contendo 0,1% de cloreto de trifeniltetrazlio sobre a superfcie do meio de cultura. Aps 1 hora de incubao a 30 35oC as colnias so visualizadas com a colorao, no geral, vermelha. Quanto ao nvel de contaminante vivel, o mtodo limitante para amostras com nmero abaixo de 1 UFC/g(mL), admitindo a semeadura de 1 g(mL) do produto sem diluio. Os meios de cultura devem ter composio completa a fim de propiciar o crescimento de contaminantes, por vezes debilitados em funo das condies da prpria frmula ou ainda somado ao processo industrial envolvido durante a fabricao do produto. Entretanto, quando se tenciona a determinao de contaminantes especficos o meio de cultura dever apresentar fatores que confiram a seletividade e a diferenciao que conduzem identificao dos mesmos. Para contagem total de bactrias os meios oficialmente recomendados so principalmente gar casena-soja e gar nutriente; para fungos, gar Sabouraud-dextrose e gar batata. Os meios

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de cultura podem ser incorporados de antibiticos, de cido tartrico (inibidor do crescimento bacteriano) ou de outro agente seletivo.

6.5.4.1.3.2.Em Meio Slido, com Semeadura da Amostra em Superfcie O meio de cultura preparado e distribudo previamente em placas de Petri. Empregandose pipetas estreis, volumes de 0,1 a 0,5 mL de cada diluio considerada so distribudos na superfcie do gel j solidificado, sendo o espalhamento efetuado com movimentos cuidadosos ou com o auxlio de basto de vidro ou ala de Drigalski. Na dependncia da densidade da amostra, haver absoro total pelo meio. As placas invertidas so ento incubadas. Esta metodologia no se aplica a amostras com carga microbiana inferior a 2 UFC/g(mL). A escolha do meio de cultura, condies de incubao e clculos para determinao da carga contaminante vivel equivalem ao descrito acima.

6.5.4.1.3.3. Membrana Filtrante Alquotas do produto sob forma lquida ou suas diluies so filtradas atravs de membranas apropriadas (0,45 ou 0,20 de poro e 47 mm de dimetro, constitudas em m m derivados celulsicos), seguindo-se a deposio das membranas, na mesma posio, sobre placas contendo meio de cultura. Esta metodologia, vantajosa por permitir volumes elevados na amostragem e pela acuidade, apresenta recomendao especial para amostras contendo agentes antimicrobianos. Cuidados devem ser observados quanto ao nmero de colnias no ser superior a 70 por membrana. O clculo para determinar o nmero total de contaminantes viveis igual ao descrito anteriormente.

6.5.4.1.3.4. Nmero Mais Provvel

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A determinao do Nmero Mais Provvel (NMP) de microrganismos se baseia em estimativa fundamentada em probabilidade. Assim, indica o valor dentro de uma faixa que reflete o nmero de microrganismos presente. Embora apresentando impreciso maior que os outros mtodos descritos, ainda recomendado e muito empregado, inclusive como mtodo oficial, no controle microbiolgico de medicamentos, cosmticos, alimentos e guas. Uma vantagem de seu emprego consiste em permitir melhor revitalizao dos microrganismos debilitados, em funo do perfeito contato da amostra com o meio de cultura, enquanto o uso do meio slido fundido seria fator adicional de estresse, uma vez que a temperatura do meio, no momento da homogeneizao da amostra no seria favorvel a esses contaminantes. A tcnica recomendada para amostras pouco solveis e translcidas. Em caso de amostra com opacidade, h que diferenci-la da turbidez decorrente do crescimento microbiano adotando o recurso de subculturas. Embora permita avaliao de amostras com nveis elevados de contaminao, sua indicao para situaes nas quais se espera valores baixos de contagem, sendo esta caracterstica otimizada pelo uso de caldo de dupla concentrao. A metodologia emprega meios lquidos, usando-se diluies seriadas das amostras inoculadas nos mesmos. Exige a disponibilidade de tabelas estatsticas especficas, para obteno de resultados a partir das leituras. O nmero de rplicas empregadas a cada diluio pode variar, sendo mais comuns tabelas construdas a partir de 3 ou 5 rplicas.

6.5.4.2. Pesquisa de Patognicos Especficos Conforme algumas das orientaes farmacopeicas e citaes tcnicas mais aceitas, os microrganismos a serem pesquisados devido sua presena indesejvel nas formulaes farmacuticas ou cosmticas so:

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Pseudomonas aeruginosa nas preparaes tpicas, particularmente naquelas

envolvendo regies prximas aos olhos;


Staphylococcus aureus nas preparaes tpicas em geral; Escherichia coli nas preparaes orais; Salmonella sp. nas preparaes orais.

Pode tambm ser interessante a pesquisa de outras cepas ou grupos de microrganismos, como os coliformes.

6.5.4.2.1. Procedimentos Os procedimentos bsicos sofrem pequenas distines entre os compndios oficiais de diferentes pases, entretanto os aspectos bsicos so mantidos, e a enormidade de detalhes desmotiva o detalhamento das condies, seguindo-se apenas com a citao dos diferentes meios de cultura recomendados. 6.5.4.2.2. Meios de Enriquecimento As tomadas de ensaio recomendadas so da ordem de 10 g(mL), quantidade que pode ser simultaneamente usada para promover o enriquecimento no seletivo para pesquisa de Escherichia coli e Salmonella sp., em 100 mL de caldo lactose. Igual quantidade de amostra pode ser empregada tambm simultaneamente, para enriquecimento no seletivo de Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa, em caldo casena-soja. A incubao deve ser a 36 1oC, durante 24 a 48 horas. Particularmente para Salmonella sp., procede-se tambm ao enriquecimento seletivo, tomando-se volumes de 10 mL da suspenso resultante do enriquecimento no seletivo, para os caldos tetrationato e selenito-cistina, em volumes de 100 mL, ento incubados em estufa, durante 24 horas a 36 1oC.

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6.5.4.2.3. Meios de Diferenciao Aps enriquecimento, no seletivo e seletivo no caso de Salmonella sp., alquotas so transferidas, por repique, no geral por estria e em situaes especficas por picada, para meios de cultura para isolamento e de diferenciao visando a identificar o microrganismo. Embora por vezes empregando sistemas miniaturizados, as reaes bioqumicas observadas mais freqentes so equivalentes aos sistemas convencionais.

6.5.4.2.3.1. Staphylococcus aureus gar Baird-Parker (colnias pretas, halo transparente) De uso especfico para estafilococos coagulase-positivos, este meio contm cloreto de ltio e telurito em concentraes que inibem a flora acompanhante. Simultaneamente, o piruvato e a glicina estimulam seletivamente o crescimento de estafilococos. Devido presena de gema de ovo no meio de cultura, as colnias de estafilococos apresentam halos transparentes originados por liplise ou protelise; o meio de cultura opaco devido lecitina. Adicionalmente, originada a colorao negra devido reduo do telurito. gar Vogel-Johnson (colnias pretas, halo amarelo) Trata-se de meio adequado para a investigao de estafilococos manitol-positivos. Considerando a capacidade de reduo do telurito e a fermentao do manitol deste grupo de microrganismos, pode-se adot-lo para o seu isolamento. A concentrao elevada de manitol e a adio de vermelho de fenol como indicador de pH facilitam a visualizao desta caracterstica. Os estafilococos em geral apresentam-se tolerantes frente a concentraes elevadas de sais como cloreto de sdio e cloreto de ltio. O gar Vogel-Johnson, devido presena de cloreto de ltio, inibe o crescimento de microrganismos indesejveis. A produo de cido a partir de manitol responsvel pelo halo amarelo caracterstico. gar Manitol (colnias amarelas, halo amarelo)

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Caracteriza-se por formulao adequada para a investigao de estafilococos. Devido elevada concentrao salina impede o crescimento da maioria das outras bactrias, exceto alguns microrganismos halfilos. A degradao do manitol a cido comprovada pela viragem do indicador de pH vermelho de fenol.

6.5.4.2.3.2. Pseudomonas aeruginosa gar Cetrimida (colnias esverdeadas, com fluorescncia) Emprega brometo de sal de amnio quaternrio de cetiltrimetilamonio (cetrimida) como agente seletivo, com notvel poder inibitrio sobre microrganismos distintos da Pseudomonas aeruginosa. Tanto a formao do pigmento verde piocianina como o aspecto fluorescente das colnias observadas luz ultravioleta so favorecidos neste meio de cultura. gar Pseudomonas para Piocianina (colnias esverdeadas, com fluorescncia azul) De composio bsica semelhante ao gar cetrimida, porm valorizando a deteco do pigmento piocianina, reconhecido pela fluorescncia azul. gar Pseudomonas para Fluorescena (colnias claras e amarelas, com fluorescncia amarela) Tambm de composio semelhante, porm facilitando a visualizao da fluorescncia amarelo-esverdeada.

6.5.4.2.3.3. Escherichia coli gar Mac Conkey (colnias vermelho-tijolo a prpura, com halo de precipitao de bile) Consiste em meio seletivo para o isolamento de salmonelas e bactrias coliformes, caracterstica decorrente de seus componentes sais biliares e cristal violeta, que inibem a flora

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Gram (+). A lactose, tambm presente na composio, tem sua degradao evidenciada devido presena do indicador de pH vermelho neutro. As colnias lactose-negativas so incolores (Salmonella sp.) e as lactose-positivas so vermelho-violeta com halo turvo, devido diminuio do valor de pH e a precipitao dos cidos biliares (Escherichia coli), ou rosadas e mucides (Enterobacter, Klebsiella). gar Eosina-Azul de Metileno (EMB) (colnias vermelho-escuras, brilho metlico) Usualmente empregado na identificao de Escherichia coli, este meio de cultura apresenta contedo rico em corantes, que inibe os microrganismos Gram (+); enquanto colnias de Enterobacter aerogenes se apresentam com centro cinzento, aquelas de Escherichia coli, graas sua interao com a eosina e o azul de metileno, apresentam colnias tpicas com brilho metlico esverdeado e centro escuro, inconfundveis. gar Endo (colnias rosadas a vermelhas, brilho metlico) Meio de cultura para identificao de coliformes fecais, devido ao seu contedo de sulfito sdico e fuccina reprime consideravelmente o crescimento de bactrias Gram (+). Os coliformes que degradam a lactose produzem aldedo e cido. O aldedo, por sua vez, libera fuccina a partir da combinao fuccina-sulfito, conferindo s colnias a colorao vermelha. No caso da Escherichia coli esta reao apresenta tal intensidade que promove a cristalizao da fuccina, o que resulta em colorao das colnias com brilho metlico estvel, com reflexos verdes.

6.5.4.2.3.4. Salmonella sp. Meios de Enriquecimento Seletivo: Caldo Selenito-Cistina e Caldo Tetrationato Meios de Isolamento: gar Verde Brilhante (colorao transparente) e gar Sulfito de Bismuto (colnia preta ou esverdeada)

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O efeito seletivo destes meios de cultura baseia-se no seu contedo de verde brilhante, inibindo a flora Gram (+) acompanhante. O efeito diferenciador deve-se ao fato de as colnias de microrganismos fortemente redutores apresentarem uma elevada presso de eltrons na parte central, que diminui na periferia. Portanto, no centro destas colnias ocorre reduo a sulfeto de ferro, ocorrendo a colorao negra. Ao redor, apenas possvel a reduo dos ons bismuto a bismuto metlico, acarretando o surgimento de brilho metlico na periferia da colnia. gar Xilose-Lisina-Desoxicolato (XLD) (colnias vermelhas, ncleo negro) Devido sua composio, e particularmente graas ao contedo reduzido de desoxicolato, adequado para demonstrar a presena de Salmonella e Shigella. A degradao dos acares xilose, lactose e sacarose da sua composio a cido promove a viragem do indicador de pH vermelho de fenol a amarelo,indicativo de outras bactrias. O tiossulfato serve como substncia de reao e o sal de Ferro (III) como indicador da formao de sulfeto de hidrognio, visualizado ento nas colnias negras de sulfeto de ferro. As bactrias que descarboxilam lisina cadaverina so reconhecidas por promoverem a colorao prpura ao redor das colnias, devido elevao do valor de pH. Vrias destas reaes podem ocorrer simultnea e sucessivamente, permitindo originar matizes de colorao. Tambm, incubaes prolongadas podem promover inverses de viragem do indicador de pH, podendo ser inclusive devido evaporao dos cidos formados. Meios de Diferenciao: gar Trplice Acar-Ferro (colorao avermelhada na superfcie, amarela no fundo, precipitao de sulfeto de ferro) Possibilita a investigao de Proteus, Hafnia, Providencia e outras bactrias que no fermentam a lactose ou o fazem muito lentamente, mas que fermentam a sacarose de maneira relativamente rpida, permitindo a excluso destas bactrias na identificao de Salmonella sp. A degradao de acar com formao de cido pode ser comprovada pelo indicador vermelho de fenol, que passa para a colorao amarela, e a alcalinizao decorre em cor

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vermelho-escura (Salmonella sp.). O tiossulfato sofre reduo a sulfeto de hidrognio por alguns microrganismos, o que por reao com sal frrico produz sulfeto de ferro, de cor negra. O volume de meio de cultura dispensado no tubo e a sua solidificao so de forma a permitir que haja, no mesmo, uma poro inclinada para repique por estria superficial, e uma coluna na parte inferior para repique por picada, em profundidade. Fazendo-se os repiques em estria e picada, observa-se viragem apenas na regio em picada (profunda). Em contrapartida, se ocorrer degradao de lactose e sacarose, a viragem de cor para amarela ocorre tanto na regio em picada como na inclinada, caracterizando o comportamento de Escherichia e Aerobacter. Formam-se cavidades e espaos, decorrentes do gs que se forma na degradao do acar.

6.5.4.2.4. Provas Adicionais Havendo suspeita da presena de um dos microrganismos, e coerncia com a caracterstica micromorfolgica, deve ser seguida a pesquisa empregando outras provas bioqumicas e sorolgicas especficas conforme se faa necessrio. Entre vrios dos sistemas complementares rotineiramente empregados constam o recurso de investigao quanto capacidade de fermentao de diferentes acares, investigao quanto ao potencial de aproveitamento de sais amoniacais como nica fonte de nitrognio e de citrato como nica fonte de carbono (gar Citrato), formao de acetona (reao positiva de Voges-Proskauer), reao de peroxidase, coagulase e outros.

6.5.4.2.5. Mtodos Alternativos A necessidade crescente de respostas que sejam simultaneamente seguras e geis na identificao de microrganismos tem de longa data quebrado o conformismo com as tcnicas convencionais, em que vrias etapas devem ser respeitadas, sempre acompanhadas de tempos de incubao compatveis com o metabolismo celular para visualizao de resposta. Assim,

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considerando passivamente o metabolismo microbiano, muito se tem trabalhado a questo da resposta, de forma a torn-la visvel ou de outra forma detectvel em menos tempo. Atualmente, os processos de fabricao encontram-se cada vez mais automatizados e rpidos, procura-se a melhoria de produtos e a quebra de paradigmas. Essa dinmica induz busca de novas tcnicas de anlise de anlise microbiolgica, compatveis com o ritmo acelerado da produo industrial e que compatibilizem com o desenvolvimento tecnolgico. Com essa preocupao vrios mtodos alternativos tm sido propostos por diversos autores. Adicionalmente, compndios oficiais tm sugerido a utilizao de mtodos automatizados para a avaliao da qualidade microbiolgica de produtos farmacuticos, para sade (correlatos) e cosmticos, desde que validados e assim oferecendo resultados equivalentes ou melhores que o mtodo convencional. Para a identificao de microrganismos, na dcada de 1970 surgiram os primeiros sistemas miniaturizados, tendo sido desde ento comercializados por diferentes empresas sob diferentes nomes, como o Api20 da Bio Merrieux Inc. e o Biolog da Baltimore Biological Laboratory. Outra opo so sistemas automatizados e computadorizados, comercializados por fabricantes de equipamentos e que, embora envolvam elevado capital inicial, devem ser considerados nos casos de nmero significativo de amostras a serem analisadas. Instrumento disponvel no mercado internacional Vitek da Bio Merrieux Inc., altamente automatizado e capaz de avaliar acima de 100 amostras simultaneamente. Outro tipo de metodologia que tende a apresentar resultado rpido baseado no metabolismo microbiano, e emprega cromatografia gasosa. Sistema oferecido pela Hewllet Packard esterifica cidos graxos produzidos no metabolismo de microrganismos, e por anlise cromatogrfica define compostos orgnicos e por sua vez cepas microbianas.

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Opes adicionais existem, porm sempre h que se considerar a questo do custobenefcio da aquisio do equipamento e material de consumo, frente ao benefcio real por ele permitido, assim como a segurana indispensvel no uso de medicamentos, que exige grande cautela. O desenvolvimento de tcnicas alternativas tem ainda assim encontrado espao, e as mais adequadas para o controle da qualidade microbiana nas indstrias farmcuticas e cosmticas so: filtrao associada a epifluorescncia, mtodos eltricos como a impedncia, condutncia e capacitncia e a bioluminescncia. No mtodo por filtrao associado a epifluorescncia, os microrganismos provenientes da amostra so filtrados atravs de membrana e posteriormente so corados com soluo de alaranjado de acridina. O princpio do mtodo baseia-se nas reaes do corante com DNA e RNA das clulas viveis. O DNA revelado com fluorescncia amarelo esverdeada e o RNA com a colorao vermelha, assim resultando uma fluorescncia alaranjada. A limitao do mtodo a necessidade de filtrao da amostra e o nvel de deteco de microrganismo, no mnimo de 103 microrganismos/mL. O mtodo eltrico fundamenta-se na deteco das alteraes eltricas, provocadas pelo metabolismo de crescimento de microrganismos em determinado meio de cultura. H a transformao dos substratos com baixa carga eltrica, como carbohidratos, protenas e lipdios em substncias de maior carga eltrica, como cidos e aminas. Estas alteraes so avaliadas por parmetros como impedncia, condutncia, capacitncia e resistncia. Para medida de carga microbiana da amostra, define-se o tempo de deteco que corresponde ao intervalo de tempo necessrio para alcanar o nvel de 106 a 107 UFC/mL, ponto no qual a acelerao pode ser analisada na curva de impedncia. As limitaes decorrentes deste mtodo constituem-se na necessidade de se conhecer o tempo de gerao do microrganismo, e no tempo necessrio para a execuo do teste, pois muito prximo do mtodo convencional de contagem. Como vantagens, esse mtodo apresenta o custo operacional menor, sendo possvel realizar acima de

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100 ensaios simultneos e as amostras podem ser coloridas e/ou turvas, como suspenses e emulses. O mtodo de bioluminescncia baseia-se no fenmeno da bioluminescncia que definida como a gerao de luz por organismos vivos. Para que ocorra esse fenmeno necessria a presena de ATP (adenosina trifosfato), da luciferina e da enzima luciferase. O ATP a medida de energia livre dos sistemas biolgicos, o principal composto armazenador de energia livre dos sistemas biolgicos e o principal composto armazenador de energia em todos os tipos de clula. Portanto, o mtodo teoricamente pode detectar quaisquer tipos de microrganismos. A aplicao de mtodos rpidos para contagem de microrganismos viveis pelo mtodo de bioluminescncia reduz no somente o tempo de teste, mas tambm o volume de trabalho, diminuindo os custos e trazendo benefcios para empresas que necessitam de uma liberao rpida de seus produtos. Os mtodos rpidos acima mencionados oferecem a indicao do total de biomassa celular presente na amostra, portanto, contemplando apenas o aspecto quantitativo dos requisitos farmacopeicos da avaliao da qualidade microbiana. A reao da cadeia de polimerase (PCR) amplifica uma seqncia especfica de DNA de um genoma microbiano e pode indicar ento a presena ou ausncia de um microrganismo patognico especfico. O desenvolvimento e a aplicao deste ensaio na determinao da qualidade de alimentos e no rpido diagnstico de microrganismos patognicos nas anlises clnicas tm sido amplamente utilizados. Entretanto, na rea de controle de qualidade de medicamentos e cosmticos a aceitao da tcnica tem merecido restries. Atualmente, com os avanos na rea de genoma microbiano, a quase ilimitada disponibilidade de seqncia de primers de DNA permite selecionar marcadores da faixa de 1.500 a 147 pares de base. Adicionalmente, os protocolos de extrao de DNA no exigem o emprego de solventes, precipitao com lcool, ou outros tratamentos nas amostras que

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demandem em tempo de preparo antes da anlise. Isto porque diferentes matrias primas nas formas de ps, leos e gomas, assim como diferentes composies dos produtos terminados nas formas de cremes, de comprimidos, de emulses e de pastas no interferem na reao de PCR. Conseqentemente, o desenvolvimento e aplicao de mtodo de ensaios pela PCR para pesquisa de patognicos em medicamentos, correlatos, cosmticos e suas respectivas matrias primas permitem avaliar a qualidade microbiana de forma rpida, com preciso, especificidade e potencial para deteco de baixos nveis de contaminao. As razes que limitam a no implementao do ensaio pela PCR como rotina de laboratrios de controle de qualidade de medicamentos, correlatos e cosmticos podem ser a dificuldade da performance e por vezes relacionadas ao nvel de contaminao. Estudos recentes demonstram a possibilidade de execuo do teste para a deteco dos diferentes tipos de microrganismos. Uma das aplicaes pioneiras da PCR na qualidade de medicamentos utilizou o sistema BAXTM para a determinao de Salmonella spp. em 25 amostras de matrias primas e produtos terminados. Comparando-se com a pesquisa tradicional de patognicos o teste utilizou menor quantidade de amostra, consumiu menos tempo no preparo da amostra e os resultados foram obtidos 24 horas aps enriquecimento. A deteco da Salmonella spp. nesse tempo representaria economia, pois o mtodo tradicional pode se estender de 5 a 6 dias. Mtodos empregando tcnica PCR foram desenvolvidas e validadas para a deteco de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli, indicadores de contaminao em 24 matrias primas e produtos terminados com tempos de 24 a 30 horas. Nenhuma das amostras, matrias-primas e produtos, mostraram-se inibidores da reao, permitindo seu emprego na avaliao rpida da qualidade microbiana das amostras. Os mtodos alternativos so em primeira anlise mais caros que os convencionais, entretanto os benefcios de reduo de tempo, de trabalho, de material, dos limites de deteco mais baixos, e da possibilidade de automao devem ser considerados na anlise dos custos. Os

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novos mtodos devem ser avaliados em relao aos tradicionais antes de serem utilizados na rotina de laboratrios de controle de qualidade. H a tendncia mundial em aceitar esses mtodos e programas de avaliao e validao tm sido desenvolvidos, como da AOAC INTERNATIONAL nos Estados Unidos, da Association Franaise de Normalisation (AFNOR) na Frana, e o projeto MICROVAL da Comunidade Europia.

6.5.4.3.Anlise Microbiolgica de gua A maior demanda de gua destina-se ao consumo humano, que pressupe exigncia de qualidade no geral atendida pelas redes de abastecimento urbano. Entretanto, quando destinada ao uso industrial, exigncias tcnicas rgidas devem ser consideradas. Em sistemas de armazenamento e distribuio de gua de processos produtivos, conhecida a formao de biofilmes. Esses incorporam comunidades de microrganismos, em geral bactrias, aderidas superfcie, que produzem e liberam substncias, entre as quais polmeros extracelulares com caracterstica adesiva. Embora se proceda sanitizao peridica desses sistemas e, apesar da condio de escassos nutrientes, alguns microrganismos como a Burkholderia cepacea, apresentam alta capacidade de formao e manuteno desses biofilmes. A gua muitas vezes o componente mais representativo de uma formulao farmacutica ou cosmtica, podendo ser o de maior relevncia como fonte contaminante. A contaminao do produto pode se originar diretamente da gua do processo, ou indiretamente em decorrncia de processos de limpeza, devido umidade residual de pisos, pias e drenos instalados em equipamentos na rea produtiva. Os compndios oficiais, alm de se restringirem a especificao de gua destinada a produtos farmacuticos, em detrimento de algumas outras, pecam tambm pela no uniformidade. encontrado enfoque mais uniforme, embora no consentneo, nas monografias farmacopeicas, para gua purificada e gua para injetveis, sendo adicionalmente descritas:

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gua purificada estril, gua estril para injeo, gua estril para inalao, gua bacteriosttica estril para injeo e gua estril para irrigao.

6.5.4.3.1. Fontes e Tratamentos 6.5.4.3.1.1.gua Potvel A gua de uso industrial proveniente da rede de abastecimento local ou de poos artesianos. Em ambos os casos usual que a sua qualidade microbiana seja satisfatria ou at excelente. As ressalvas a serem feitas so, no caso de poos artesianos, referentes a relato quanto a contaminaes de lenis freticos, seja por microrganismos ou por pesticidas. No caso do abastecimento urbano, o cloro o agente responsvel pela baixa carga microbiana, porm em locais mais afastados, por falhas nas tubulaes ou falta de limpeza nos reservatrios a concentrao de cloro empregada pode no ser efetiva, conduzindo a desvios indesejveis. A coleta da gua para anlise deve ser sempre feita dos pontos mais distantes, de forma a representar a condio de maior risco. A gua de poos artesianos, proveniente de lenis subterrneos, aquela que em seu trajeto sofre processo de filtrao atravs do solo. Dependendo da profundidade e do tipo de solo esta gua contm contaminao muito baixa, desde que se impea a contaminao externa; no entanto, na poca das primeiras chuvas, a carga microbiana da superfcie levada para estes lenis, podendo a filtrao natural no ser suficiente.

6.5.4.3.1.2. Deionizao

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gua purificada resultante da deionizao a forma mais comum de preparo de gua para produtos farmacuticos no estreis, apesar de permitir nveis de contaminao dos mais elevados. A fonte de gua para a produo de gua purificada normalmente aquela de qualidade potvel, contendo cloro quando proveniente da rede de abastecimento urbano. Porm, nas unidades de fabricao, localizadas em reas distantes, a gua pode conter apenas quantidades residuais de cloro, que permitem o desenvolvimento de Pseudomonas e outros Gram (-). Neste caso faz-se necessria a clorao em tanques de estocagem. Outros aspectos a considerar so etapas de tratamento precedendo a deionizao. Referese, por exemplo, ao emprego de leitos de carvo ativo, considerado estgio para remoo tambm intencional do cloro da gua. Sabe-se que apesar de tratamentos qumicos, renovaes e limpeza das resinas, constituem-se nos constantes desafios para a qualidade (sanitria) da gua. Tambm o sistema de distribuio e eventuais armazenamentos acrescem pontos potencialmente crticos. Emprega-se no geral, anteriormente s resinas, os filtros de carvo, efetivos na remoo do cloro e de hidrocarbonetos de baixo peso molecular, porm menos efetivos na remoo daqueles de peso molecular mais elevado, comuns s guas de superfcie, usadas pelas redes de distribuies. Estes filtros so normalmente empregados para evitar saturao irreversvel das resinas de troca inica. O crescimento microbiano propiciado pelas molculas orgnicas depositadas sobre as partculas de carvo. Organismos coliformes e Pseudomonas podem ser encontrados revestindo os filtros de carvo, havendo, portanto necessidade de tratamento trmico e troca peridica de carvo. Aps os filtros de carvo esto posicionadas as resinas de troca inica. Os deionizadores catinico/aninico, se corretamente usados e submetidos regenerao constante das resinas, no se constituem de forma inerente em problema dos mais difceis de tratar. Entretanto, comum que sejam constantemente contaminados com bactrias do sistema havendo sempre a

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possibilidade de bolses de estagnao, que so reservatrios adequados ao crescimento microbiano. Ocorrem na dependncia de interaes entre microrganismo e resina, condies adesivas, um problema ainda mais difcil de sanar. Molculas orgnicas de alto peso molecular e produtos de degradao das mesmas, oriundos da prpria gua, estaro concentrados sobre as esferas da resina. Parmetros fsicos contribuem para sua adsoro, o que por sua vez contribui para a fixao de microrganismos. Aquelas molculas insolveis fixam-se sobre a matriz da resina, seguindo-se a proliferao microbiana induzida por condies favorveis. Conforme o biofilme se desenvolve no leito da resina, a qualidade microbiana da gua declina. A extenso do crescimento microbiano ser funo do tipo e nvel de material orgnico presente na gua, da temperatura do leito, e das caractersticas operacionais da planta. Tipicamente deve se esperar contagens da ordem de 103 UFC/mL em gua de um deionizador antes da regenerao das resinas, considerando freqncia diria de regenerao; sendo a freqncia de tratamento semanal de regeneraes deve se esperar valores da ordem de 105 a 106 UFC/mL. Os organismos mais freqentemente associados aos deionizadores so Acinetobacter spp., o grupo Alcaligenes e espcies de Pseudomonas, embora tambm possam ser encontrados Gram (+) e cocos. Os mecanismos empregados para contornar o problema da contaminao microbiana dos deionizadores podem ser pelo uso de lmpadas ultravioleta ou pela filtrao, principalmente, podendo, entretanto sofrer recontaminao posterior:
Luz ultravioleta (UV) Lmpadas UV na regio de 254 nm so as mais

freqentemente empregadas, havendo situaes em que seu uso recomendado em pontos estratgicos do sistema de circulao, prximo ao ponto de uso. Sua efetividade est na dependncia do correto dimensionamento da unidade, da velocidade de fluxo da gua, da

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claridade ptica e do bioburden esperado do sistema. Manuteno correta das lmpadas UV, particularmente quanto limpeza da proteo de quartzo, essencial, assim como controle do decaimento da radiao a nveis ainda efetivos respeitando o tempo de vida til das mesmas. Pode no geral ser considerada opo no eficaz.
Filtrao A filtrao da gua atravs de filtros de membrana com porosidade de 0,2

nm mtodo amplamente empregado na indstria farmacutica para reduo de sua carga microbiana. Pr-filtrao pode ser conveniente no sentido de prolongar a vida til dos filtros, aumentando o intervalo de tempo antes da saturao dos dispendiosos filtros retentores dos microrganismos. A adequada instalao dos filtros deve obrigatoriamente ser avaliada.
Sistema de distribuio Certa proporo de microrganismos poder estar associada

ao prprio sistema de distribuio, seja aderida superfcie de tubulaes, em filtros ou tanques de estocagem e nas conexes em geral. Velocidades de fluxo da ordem de 1 a 2 m/s so normalmente recomendadas para minimizar a adeso. No geral, fluxos mais lentos assim como rugosidades de superfcies estaro facilitando a formao de biofilmes, que traro a necessidade de limpeza vigorosa para a remoo. Fluxos turbulentos so desejveis.

6.5.4.3.1.3.Destilao A gua destilada, imediatamente aps condensao, estril, e na dependncia de cuidados asspticos de coleta e estocagem ser mantida desta forma. Na indstria de produtos parenterais, a forma empregada para estocagem desta gua sob aquecimento a 80C, em sistema com circulao, ou ainda se emprega o recurso da esterilizao imediatamente aps a coleta de determinado volume, em recipientes de vidro neutro. Ambos os recursos so por demais dispendiosos para emprego, em larga escala, nos produtos em que a caracterstica de esterilidade no compulsria.

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6.5.4.3.1.4.Osmose Reversa A gua produzida por osmose reversa (OR) pode ser estril e apirognica uma vez que sua obteno envolve passagem forada, por presso osmtica atravs de membrana semipermevel, seletiva a pesos moleculares de 250 D. Contaminao ps-osmose reversa pode ocorrer devido ao ingresso de microrganismos via membrana no recipiente de estocagem ou no sistema de distribuio.

6.5.4.3.2. Padres Microbianos No mbito internacional, enquanto so definidos os limites rgidos do ponto de vista qumico, os nveis de carga microbiana para gua de uso industrial inexistem, exceto ao se referir gua estril, que de forma inerente indica ausncia de microrganismos. Esta situao tem sido contornada por cada empresa pela adoo do seu prprio padro interno. A indstria de produtos farmacuticos, cosmticos e correlatos avalia com periodicidade definida a gua nos distintos pontos da planta. Em contrapartida, a caracterstica da potabilidade da gua tem sido objeto de legislao nos diferentes pases. O Brasil no exceo (Portaria Bsb no 635/75 e Bsb no 280/77, ambas do Ministro da Sade), sendo que hoje as normas e padro de potabilidade da gua destinada ao consumo humano vigentes constam da Portaria n 36 de 19 de janeiro de 1990. Para efeito desta Portaria, gua potvel definida como aquela adequada ao consumo humano, devendo para tanto atender a caractersticas fsicas, organolpticas e qumicas alm da bacteriolgica, traduzida pela ausncia de coliformes fecais em 100 mL de amostra e ausncia de bactrias do grupo coliformes totais em 100 mL quando a amostra coletada na entrada da rede de distribuio, alm de atender aos limites de radioatividade.

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A interpretao da exigncia bacteriolgica deve considerar o conceito dado para Grupos Coliformes: todos os bacilos Gram (-), aerbicos ou anaerbicos facultativos, no formadores de esporos, oxidase-negativa, capazes de crescer na presena de sais biliares ou outros compostos superficialmente ativos (tensoativos) com propriedades similares de inibio de crescimento e que fermentam a lactose com produo de aldedo, cido e gs a 35C, no perodo de 24 a 48 horas. Quanto s tcnicas de deteco, considera-se do Grupo Coliformes aqueles organismos que na tcnica dos tubos mltiplos (ensaios presuntivo e confirmatrio) fermentam a lactose, com produo de gs, a 35oC; no caso da tcnica da membrana filtrante, aqueles que produzem colnias escuras, com brilho metlico, a 35oC, em meio de cultura do tipo Endo, no mximo em 24 horas. A Portaria conceitua ainda os coliformes fecais ou termotolerantes, como bactrias que apresentam as caractersticas do grupo, porm temperatura de incubao de 44,5 0,2 C durante perodo de 24 horas. Mais recentemente, e vinculada rea de alimentos, encontra-se a Portaria no 1.006, de 15 de dezembro de 1998, publicada para consulta pblica em 16 de dezembro do mesmo ano, a qual apresenta em anexo Regulamento Tcnico para Fixao de Identidade e Qualidade de gua Mineral Natural e gua Potvel de Mesa. Entre outros aspectos so contemplados os critrios microbiolgicos, em que se define a ausncia absoluta de Escherichia coli (ou coliformes fecais termotolerantes, caracterizados como de origem fecal); outras bactrias, abrangendo coliformes totais, Enterococcus, Pseudomonas aeruginosa e Clostridium perfringens quando detectadas induzem ao segundo exame, restrito a coliformes totais, a Enterococcus, Pseudomonas aeruginosa e Clostridium perfringes, com maior nmero de amostras e limite distinto (nmero mximo de duas bactrias para as quatro amostras de cada lote, exceto para Pseudomonas aeruginosa com limite de abaixo de 10).

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Em ambas as portarias, so recomendadas tambm a investigao de bactrias heterotrficas como indicativo das condies de higiene.

6.5.4.3.3. Anlise da gua A gua merece especial considerao pelo seu amplo uso e caractersticas propcias ao crescimento microbiano. Quando considerada como componente de formulaes, por vezes preponderante, e justamente por isso tais produtos so mais propensos ao desenvolvimento microbiano. A gua tambm empregada nos diferentes tipos de limpeza, operaes unitrias intermedirias, entre outros usos. Recebe tratamento e critrio de anlise distinta conforme a aplicao que se tem em vista.

6.5.4.3.3.1.Potabilidade da gua A caracterstica de potabilidade da gua est na dependncia da legislao de cada pas, j que esta define critrios e limites aceitveis. Ainda assim, sob o ponto de vista microbiolgico pode-se afirmar que a potabilidade est associada ausncia de patognicos, por sua vez, a patogenicidade est ligada contaminao fecal. Considerando a dificuldade em pesquisar os patognicos de maneira direta, frente a sua sensibilidade quando em quantidades reduzidas, aos processos onerosos e prolongados, alm da necessidade de laboratrios muito bem equipados, lana-se mo da pesquisa do indicador de contaminao fecal. Considera-se que guas que apresentam contaminao fecal so potencialmente perigosas. Os indicadores de contaminao fecal so microrganismos presentes nas fezes em quantidade muito acima dos patognicos. As caractersticas ideais de um Indicador de Contaminao Fecal so: presena simultnea dos microrganismos patognicos; tempo de sobrevivncia igual ou superior aos patognicos; resistncia equivalente dos patognicos aos

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processos de autodepurao; o seu nmero deve estar diretamente relacionado ao dos contaminantes fecais, ou seja, no devem se multiplicar no ambiente livre; por ltimo, praticidade no mtodo de deteco.

6.5.4.3.3.2.Principais Indicadores de Contaminao Fecal 6.5.4.3.3.2.1. Coliformes Fecais So os microrganismos descritos na legislao como Indicadores Fecais. So bacilos Gram (-), no esporulados, aerbicos ou anaerbicos facultativos, fermentam a lactose a temperatura de 35C a 37C com produo de gs. Este grupo abrange espcies dos gneros Escherichia, Citrobacter, Enterobacter e Klebsiella. Particularmente o Enterobacter falha em uma das caractersticas legais, pois se multiplica no ambiente livre. Apesar de a legislao determinar como no adequada gua com a presena confirmatria destes gneros, eles podem tambm ter sido originados no exclusivamente das fezes, mas de outras fontes, como do contato com o solo e plantas. Pode-se fazer ento a pesquisa de coliformes fecais, que se caracterizam como termorresistentes, fermentando a lactose a 44,5oC. A Escherichia coli um parasita comensal, no patognico, presente nas fezes dos homeotermos e dificilmente se multiplica na gua. Apresenta velocidade de morte e reduo equivalente dos patognicos. Reforando, apenas a Escherichia coli considerada ser seguramente de natureza fecal.

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6.5.4.3.3.2.2.

Estreptococos Fecais

O emprego deste grupo de microrganismos menos recomendado que os coliformes, devido principalmente ao seu tempo de sobrevivncia ser superior ao dos patognicos, correndo-se o risco de rejeio de uma gua ainda adequada ao consumo. interessante o seu emprego, uma vez que a sua sobrevivncia indicativa da possibilidade de enterovirus. Pode ainda ser empregado na definio da origem, se humana ou animal, uma vez que nas fezes humanas predominam os coliformes fecais, e nas fezes dos animais predominam os estreptococos fecais. medida que se distancia da fonte de contaminao a proporo entre os dois grupos de microrganismos se altera, pois o nmero de estreptococos aumenta devido ao seu maior tempo de sobrevida.

6.5.4.3.3.2.3. Clostridium Perfringens Sendo microrganismo esporulado, pode permanecer no solo por mais tempo, indicando contaminao fecal muito remota. Ocorre em nmero menor que os coliformes e estreptococos.

6.5.4.3.3.2.4. Pseudomonas Aeruginosa, Staphylococcus Aureus, Candida Albicans Indicativos de tratamento no eficiente. Presentes em nmero grande, porm com pequeno tempo de sobrevida, a sua presena est associada condio de higiene. possvel indicador da presena de enterovirus.

6.5.4.3.3.3.Anlise Bacteriolgica da gua Determinao Quantitativa 6.5.4.3.3.3.1. Coleta da Amostra Alm dos cuidados relacionados com o frasco coletor de amostra que deve ser esterilizado, devem-se desprezar as primeiras pores, quando se tratar de gua canalizada.

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Quando a amostra for gua clorada, deve ser adicionada de tiossulfato de sdio (0,1 mL de soluo a 10% para 100 mL de gua). Durante o transporte e armazenamento da amostra, caso no analisada de imediato, mant-la a baixa temperatura (10C). O valor absoluto no apresenta significado. Consiste apenas em um controle sobre a variao esperada, sendo um ndice das condies de higiene.

6.5.4.3.3.3.2. Coliformes Totais e Fecais So avaliados mediante os testes subseqentes: Teste presuntivo Empregam-se neste mtodo os caldos Lactose ou Lactose-Lauril Sulfato de Sdio, preparados e distribudos em tubos de ensaio contendo tubos de Durhan invertidos, que permitem observar a formao de gs, evidncia de resultado positivo. Outros microrganismos que no os coliformes podem fermentar a lactose, como bacilos Gram (+) esporulados e leveduras, o que justifica a fase seguinte. Teste confirmatrio Uma alada dos tubos positivos transferida para respectivos tubos contendo o meio seletivo. Utiliza-se nesta etapa meio seletivo como Caldo Bile-Verde Brilhante, que contm componente natural do trato intestinal, favorecendo a proliferao de coliformes, enquanto o corante impede a proliferao de formas esporuladas e ou de leveduras. Igualmente etapa anterior, a resposta positiva diz respeito fermentao da lactose com produo de gs.

6.5.4.3.3.3.3. Coliformes Fecais (Escherichia Coli)

Emprega-se o caldo que contm em sua composio lactose, proteases e sais biliares em sistema tamponado. A identificao associa a propriedade da termorresistncia dos coliformes fecais, sendo a incubao feita a 44,5C, com a fermentao da lactose.

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Em todas as etapas recorre-se contagem pela tcnica de Nmero Mais Provvel, considerando como resposta positiva a fermentao da lactose, cujos dados so confrontados com tabelas de NMP. Na gua tratada, cistos de protozorios podem estar presentes mesmo na ausncia de coliformes. A clorao no elimina os cistos, eles devem ser eliminados na floculao e filtrao, e os vrus por absoro.

6.6.REGISTROS/RASTREABILIDADE

Os registros servem para documentar o sistema da qualidade da empresa, fornecem as evidncias de que os requisitos esto sendo atendidos e constituem a base de controle essencial para a adequao e melhoria contnua dos processos e sistemas. Os procedimentos de identificao, preenchimento, organizao, armazenamento, acesso, recuperao e controle dos registros devem ser claramente definidos e corretamente implementados. Os registros gerados pelo Controle de Qualidade devem permanecer arquivados e disponveis para garantir a rastreabilidade das informaes.

6.7.DESCARTE DE MATERIAIS

Os resduos qumicos apresentam riscos potenciais de acidentes inerentes s suas propriedades especficas. Devem ser consideradas todas as etapas de sua armazenagem e descarte, com a finalidade de minimizar no s acidentes decorrentes dos efeitos agressivos imediatos (inflamabilidade, corrosividade e toxicidade), como os efeitos a longo prazo, tais como os de teratognese, carcinognese e mutagnese.

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Para a realizao dos procedimentos adequados de descarte importante a observncia do grau de inflamabilidade, de toxicidade e de compatibilidade entre os resduos. Com isso, evitase o risco de reaes indesejadas e danos ao meio ambiente. Os resduos, aps corretamente identificados, devem ser tratados e armazenados em recipientes prprios, se necessrio, antes do descarte. Deve ser estabelecido um programa de gerenciamento, tendo como meta a reduo da gerao de resduos. A manuteno da segregao dos resduos, a substituio de produtos mais perigosos por outros de menor risco, a aquisio de quantidades corretas de produtos, alm da subcontratao de empresas terceirizadas para o recolhimento e a incinerao dos resduos ou reciclagem so itens importantes, que devem ser considerados neste programa. importante observar que o descarte de materiais deve atender os regulamentos vigentes nos mbitos federal, estadual e municipal.

6.8.LIBERAO DE PRODUTOS PARA O MERCADO

Antes de ser liberado para o mercado, todo lote de produto fabricado deve ser aprovado pelo Controle de Qualidade, conforme as especificaes estabelecidas e mediante processo claramente definido e documentado. Somente o Controle de Qualidade tem autoridade para liberar um produto acabado.

6.9.AMOSTRAS DE RETENO

Tambm chamadas de Amostras de Referncia Futura, so as amostras do produto acabado que so retidas em material de embalagem original ou equivalente ao material de

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embalagem de comercializao e armazenadas nas condies especificadas, em quantidade suficiente para permitir que sejam executadas, no mnimo, duas anlises completas. As retenes devem ser de produtos acabados e, quando for o caso, de matrias-primas e produtos em processo.

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7.

ESTUDO DE ESTABILIDADE

O estudo da estabilidade de produtos cosmticos fornece informaes que indicam o grau de estabilidade relativa de um produto nas variadas condies a que possa estar sujeito desde sua fabricao at o trmino de sua validade. Essa estabilidade relativa, pois varia com o tempo e em funo de fatores que aceleram ou retardam alteraes nos parmetros do produto. Modificaes dentro de limites determinados podem no configurar motivo para reprovar o produto. O estudo da estabilidade de produtos cosmticos contribui para: Orientar o desenvolvimento da formulao e do material de acondicionamento; Adequado; fornecer subsdios para o aperfeioamento das formulaes; Estimar o prazo de validade e fornecer informaes para a sua confirmao; Auxiliar no monitoramento da estabilidade organolptica, fsico-qumica e microbiolgica, produzindo informaes sobre a confiabilidade e segurana dos produtos.

7.1.

FATORES QUE INFLUENCIAM A ESTABILIDADE Cada componente, ativo ou no, pode afetar a estabilidade de um produto. Variveis

relacionadas formulao, ao processo de fabricao, ao material de acondicionamento e s condies ambientais e de transporte podem influenciar na estabilidade do produto. Conforme a origem, as alteraes podem ser classificadas como extrnsecas, quando determinadas por fatores externos; ou intrnsecas, quando determinadas por fatores inerentes formulao.

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7.1.1. Fatores Extrnsecos Referem-se a fatores externos aos quais os produtos estaro expostos, tais como: a) Tempo O envelhecimento do produto pode levar a alteraes nas caractersticas organolpticas, fsico-qumicas, microbiolgicas e toxicolgicas. b) Temperatura Temperaturas elevadas aceleram reaes fsico-qumicas e qumicas, ocasionando alteraes em: atividade de componentes, viscosidade, aspecto, cor e odor do produto. Baixas temperaturas aceleram possveis alteraes fsicas como turvao, precipitao, cristalizao. Problemas gerados, em funo de temperaturas elevadas, ou muito baixas, podem ser decorrentes tambm de no-conformidades no processo de fabricao, armazenamento ou transporte do produto. c) Luz e Oxignio A luz ultravioleta, juntamente com o oxignio, origina a formao de radicais livres e desencadeia reaes de xido-reduo. Os produtos sensveis ao da luz devem ser acondicionados ao abrigo dela, em frascos opacos ou escuros e devem ser adicionadas substncias antioxidantes na formulao, a fim de retardar o processo oxidativo. d) Umidade Este fator afeta principalmente as formas cosmticas slidas como talco, sabonete em barra, sombra, sais de banho, entre outras. Podem ocorrer alteraes no aspecto fsico do produto, tornando-o amolecido, pegajoso, ou modificando peso ou volume, como tambm contaminao microbiolgica.

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e) Material de Acondicionamento Os materiais utilizados para o acondicionamento dos produtos cosmticos, como vidro, papel, metal e plstico podem influenciar na estabilidade. Devem ser efetuados testes de compatibilidade entre o material de acondicionamento e a formulao, a fim de determinar a melhor relao entre eles. f) Microrganismos Os produtos cosmticos mais suscetveis contaminao so os que apresentam gua em sua formulao como emulses, gis, suspenses ou solues. A utilizao de sistemas conservantes adequados e validados (teste de desafio do sistema conservante - Challenge Test), assim como o cumprimento das Boas Prticas de Fabricao necessria para a conservao adequada das formulaes. g) Vibrao Vibrao, durante o transporte, pode afetar a estabilidade das formulaes, acarretando separao de fases de emulses, compactao de suspenses, alterao da viscosidade dentre outros. Um fator agravante do efeito da vibrao a alterao da temperatura durante o transporte do produto.

7.1.2. Fatores Intrnsecos So fatores relacionados prpria natureza das formulaes e sobretudo interao de seus ingredientes entre si e ou com o material de acondicionamento. Resultam em incompatibilidades de natureza fsica ou qumica que podem, ou no, ser visualizadas pelo consumidor.

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Incompatibilidade Fsica: Ocorrem alteraes, no aspecto fsico da formulao observado por: precipitao, separao de fases, cristalizao, formao de gretas, entre outras. Incompatibilidade Qumica: a) pH Devem-se compatibilizar trs diferentes aspectos relacionados ao valor de pH: estabilidade dos ingredientes da formulao, eficcia e segurana do produto. b) Reaes de xido-Reduo Ocorrem processos de oxidao ou reduo levando a alteraes da atividade das substncias ativas, das caractersticas organolpticas e fsicas das formulaes. c) Reaes de Hidrlise Acontecem na presena da gua, sendo mais sensveis substncias com funes ster e amida. Quanto mais elevado o teor de gua da formulao, mais provvel a ocorrncia desse tipo de reao. d) Interao entre Ingredientes da Formulao So reaes qumicas indesejveis que podem ocorrer entre ingredientes da formulao anulando ou alterando sua atividade. e) Interao entre Ingredientes da Formulao e o Material de Acondicionamento So alteraes qumicas que podem acarretar modificao em nvel fsico ou qumico entre os componentes do material de acondicionamento e os ingredientes da formulao.

7.1.3. Aspectos considerados na estabilidade Fsicos: devem ser conservadas as propriedades fsicas originais como aspecto, cor, odor, uniformidade, dentre outras;

220

Qumicos: devem ser mantidos dentro dos limites especificados a integridade da estrutura qumica, o teor de ingredientes e outros parmetros; Microbiolgicos: devem ser conservadas as caractersticas microbiolgicas, conforme os requisitos especificados. O cumprimento das Boas Prticas de Fabricao e os sistemas conservantes utilizados na formulao podem garantir estas caractersticas. Alm desses aspectos necessrio considerar tambm a manuteno das caractersticas do produto quanto : Funcionalidade: os atributos do produto devem ser mantidos sem alteraes quanto ao efeito inicial proposto. Segurana: no devem ocorrer alteraes significativas que influenciem na segurana de uso do produto.

7.1.4.

Quando realizar os testes de estabilidade Durante o desenvolvimento de novas formulaes e de lotes-piloto de laboratrio e de

fbrica. Quando ocorrerem mudanas significativas no processo de fabricao. Para validar novos equipamentos ou processo produtivo. Quando houver mudanas significativas nas matrias-primas do produto. Quando ocorrer mudana significativa no material de acondicionamento que entra em contato com o produto.

7.1.5.

Princpios dos testes de estabilidade Os testes devem ser conduzidos sob condies que permitam fornecer informaes sobre

a estabilidade do produto em menos tempo possvel. Para isso, amostras devem ser armazenadas em condies que acelerem mudanas passveis de ocorrer durante o prazo de

221

validade. Deve-se estar atento para essas condies no serem to extremas que, em vez de acelerarem o envelhecimento, provoquem alteraes que no ocorreriam no mercado. A seqncia sugerida de estudos (preliminares, acelerados e de prateleira) tem por objetivo avaliar a formulao em etapas, buscando indcios que levem a concluses sobre sua estabilidade.

7.1.5.1.

Acondicionamento das Amostras

Recomenda-se que as amostras para avaliao da estabilidade sejam acondicionadas em frasco de vidro neutro, transparente, com tampa que garanta uma boa vedao evitando perda de gases ou vapor para o meio. A quantidade de produto deve ser suficiente para as avaliaes necessrias. Se houver incompatibilidade conhecida entre componentes da formulao e o vidro, o formulador deve selecionar outro material de acondicionamento. O emprego de outros materiais fica a critrio do formulador, dependendo de seus conhecimentos sobre a formulao e os materiais de acondicionamento. Deve-se evitar a incorporao de ar no produto, durante o envase no recipiente de teste. importante no completar o volume total da embalagem permitindo um espao vazio (head space) de aproximadamente um tero da capacidade do frasco para possveis trocas gasosas. Pode-se utilizar em paralelo ao vidro neutro, o material de acondicionamento final; antecipando-se, assim, a avaliao da compatibilidade entre a formulao e a embalagem.

7.1.5.2.

Condies de Armazenagem

As caractersticas da Zona Climtica onde os produtos sero produzidos e ou comercializados, bem como as condies de transporte as quais sero submetidos devero ser consideradas.

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Para os testes de estabilidade, as condies de armazenagem mais comuns das amostras so: temperatura (ambiente, elevada, baixa), exposio luz e ciclos de congelamento e descongelamento. Temperatura Ambiente: Amostras armazenadas temperatura ambiente monitorada. Temperaturas Elevadas: Os limites de temperatura mais freqentemente praticados, durante o desenvolvimento de produtos, so: Estufa: 37 20C; Estufa: 40 20C; Estufa: 45 20C; Estufa: 50 20C. Nessas condies, a ocorrncia de alteraes fsico-qumicas freqente e at mesmo esperada, portanto os resultados obtidos devem ser avaliados cuidadosamente. Temperaturas Baixas: Os limites de temperatura mais utilizados, durante o desenvolvimento de produtos, so: Geladeira: 5 20C; Freezer: 5 20C ou 10 20C. Exposio Radiao Luminosa: Pode alterar significativamente a cor e o odor do produto e levar degradao de ingredientes da formulao. Para a conduo do estudo, a fonte de iluminao pode ser a luz solar captada atravs de vitrines especiais para esse fim ou lmpadas que apresentem espectro de emisso semelhante ao do Sol, como as lmpadas de xennio. Tambm so utilizadas fontes de luz ultravioleta. Ciclos de Congelamento e Descongelamento: Nesta condio as amostras so armazenadas em temperaturas alternadas, em intervalos regulares de tempo. O nmero de ciclos varivel. Limites sugeridos: Ciclos de 24 horas temperatura ambiente, e 24 horas a 5 20C; Ciclos de 24 horas a 40 20C, e 24 horas a 4 20C; Ciclos de 24 horas a 45 20C, e 24 horas a 5 20C; Ciclos de 24 horas a 50 20C, e 24 horas a 5 20C.

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7.1.5.3. Parmetros de Avaliao na Estabilidade Os parmetros a serem avaliados devem ser definidos pelo formulador e dependem das caractersticas do produto em estudo e dos ingredientes utilizados na formulao. De modo geral, avaliam-se: Parmetros Organolpticos: aspecto, cor, odor e sabor, quando aplicvel; Parmetros Fsico-Qumicos: valor de pH, viscosidade, densidade, e em alguns casos, o monitoramento de ingredientes da formulao;
Parmetros Microbiolgicos: contagem microbiana e teste de desafio do sistema

conservante (Challenge Test).

7.1.5.4. Estudos de Estabilidade Antes de iniciar os Estudos de Estabilidade, recomenda-se submeter o produto ao teste de centrifugao. Sugere-se centrifugar uma amostra a 3.000 rpm durante 30 minutos. O produto deve permanecer estvel e qualquer sinal de instabilidade indica a necessidade de reformulao. Se aprovado nesse teste, o produto pode ser submetido aos testes de estabilidade.

7.1.5.4.1.

Estabilidade Preliminar

Este teste tambm conhecido como Teste de Triagem, Estabilidade Acelerada ou de Curto Prazo, tem como objetivo auxiliar e orientar a escolha das formulaes. O estudo de estabilidade preliminar consiste na realizao do teste na fase inicial do desenvolvimento do produto, utilizando-se diferentes formulaes de laboratrio e com durao reduzida. Emprega condies extremas de temperatura com o objetivo de acelerar possveis reaes entre seus componentes e o surgimento de sinais que devem ser observados e analisados conforme as caractersticas especficas de cada tipo de produto. Devido s condies em que

224

conduzido, este estudo no tem a finalidade de estimar a vida til do produto, mas sim de auxiliar na triagem das formulaes.

7.1.5.4.1.1. Procedimento Recomenda-se que as amostras para avaliao da estabilidade sejam acondicionadas em frascos de vidro neutro, transparente, com tampa que garanta uma boa vedao evitando perda de gases ou vapor para o meio. A quantidade de produto deve ser suficiente para as avaliaes necessrias. Se houver incompatibilidade conhecida entre componentes da formulao e o vidro, o formulador deve selecionar outro material de acondicionamento. O emprego de outros materiais fica a critrio do formulador, dependendo de seus conhecimentos sobre a formulao e os materiais de acondicionamento. Deve-se evitar a incorporao de ar no produto, durante o envase no recipiente de teste. importante no completar o volume total da embalagem permitindo um espao vazio (head space) de aproximadamente um tero da capacidade do frasco para possveis trocas gasosas. Pode-se utilizar em paralelo ao vidro neutro, o material de acondicionamento final; antecipando-se, assim, a avaliao da compatibilidade entre a formulao e a embalagem. A durao do estudo geralmente de quinze dias e auxilia na triagem das formulaes. As formulaes em teste so submetidas a condies de estresse visando acelerar o surgimento de possveis sinais de instabilidade. Geralmente as amostras so submetidas a aquecimento em estufas, resfriamento em refrigeradores e a ciclos alternados de resfriamento e aquecimento. Neste tipo de estudo, as amostras so armazenadas em condies distintas de temperatura, alternadas em intervalos regulares de tempo. A periodicidade de avaliao das amostras pode variar conforme a experincia tcnica, as especificaes do produto, as caractersticas especiais de algum componente da formulao ou o

225

sistema conservante utilizado, porm o mais usual neste estudo preliminar que sejam avaliadas, inicialmente, no tempo zero e durante todos os dias em que estiverem submetidas s condies do estudo. Os parmetros que geralmente so avaliados devem ser definidos pelo formulador e dependem das caractersticas da formulao em estudo e dos componentes utilizados nesta formulao. De modo geral, avaliam-se: Caractersticas Organolpticas: Aspecto, cor, odor e sabor, quando aplicvel. Caractersticas Fsico-Qumicas: Valor de pH, viscosidade e densidade, ou outros. Deve-se tomar uma amostra de referncia, tambm denominada padro, que em geral pode ser mantida em geladeira ou a temperatura ambiente, ao abrigo da luz. Em carter complementar, podem ser tambm utilizadas amostras de mercado, cuja aceitabilidade seja conhecida, ou outros produtos semelhantes, considerados satisfatrios no que se refere aos parmetros avaliados.

7.1.5.4.2.

Estabilidade Acelerada

Tambm conhecida como Estabilidade Normal ou Exploratria tem como objetivo fornecer dados para prever a estabilidade do produto, tempo de vida til e compatibilidade da formulao com o material de acondicionamento. Este teste empregado tambm na fase de desenvolvimento do produto utilizando- se lotes produzidos em escala laboratorial e piloto de fabricao, podendo estender- se s primeiras produes. Emprega geralmente condies menos extremas que o teste anterior. Serve como auxiliar para a determinao da estabilidade da formulao. um estudo preditivo que pode ser empregado para estimar o prazo de validade do produto. Pode ser realizado, ainda, quando houver mudanas significativas em ingredientes do produto e ou do processo de fabricao, em

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material de acondicionamento que entra em contato com o produto, ou para validar novos equipamentos ou fabricao por terceiros.

7.1.5.4.2.1. Procedimento Recomenda-se que as amostras para avaliao da estabilidade sejam acondicionadas em frasco de vidro neutro, transparente, com tampa que garanta uma boa vedao evitando perda de gases ou vapor para o meio. A quantidade de produto deve ser suficiente para as avaliaes necessrias. Se houver incompatibilidade conhecida entre componentes da formulao e o vidro, o formulador deve selecionar outro material de acondicionamento. O emprego de outros materiais fica a critrio do formulador, dependendo de seus conhecimentos sobre a formulao e os materiais de acondicionamento. Deve-se evitar a incorporao de ar no produto, durante o envase no recipiente de teste. importante no completar o volume total da embalagem permitindo um espao vazio (head space) de aproximadamente um tero da capacidade do frasco para possveis trocas gasosas. Pode-se utilizar em paralelo ao vidro neutro, o material de acondicionamento final; antecipando-se, assim, a avaliao da compatibilidade entre a formulao e a embalagem. Geralmente tem durao de noventa dias e as formulaes em teste so submetidas a condies menos extremas que no teste de Estabilidade Preliminar. Em alguns casos, a durao deste teste pode ser estendida por seis meses ou at um ano, dependendo do tipo de produto. As amostras podem ser submetidas a aquecimento em estufas, resfriamento em refrigeradores, exposio radiao luminosa e ao ambiente. As amostras tambm devem ser submetidas ao Teste de Estabilidade Acelerada em seu material de acondicionamento. Os produtos devem ser armazenados em mais de uma condio de temperatura, para que se possa avaliar seu comportamento nos diversos ambientes a que possa ser submetido.

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A periodicidade da avaliao das amostras pode variar conforme experincia tcnica, especificaes do produto, caractersticas especiais de algum componente da formulao ou sistema conservante utilizado, porm o mais usual neste estudo acelerado que sejam avaliadas inicialmente no tempo zero, 24 horas e aos 70, 150, 300, 600 e 900 dias. Se o estudo se prolongar por mais tempo, recomendam-se avaliaes mensais at seu trmino. Os parmetros a serem avaliados devem ser definidos pelo formulador, dependem das caractersticas da formulao em estudo e dos componentes utilizados nesta formulao. De modo geral, avaliam-se: Caractersticas Organolpticas: Aspecto, cor, odor e sabor, quando aplicvel. Caractersticas Fsico-Qumicas: Valor de pH, viscosidade e densidade, ou outros. Caractersticas Microbiolgicas: Estudo do sistema conservante do produto por meio do teste de desafio efetuado antes e ou aps o perodo de estudo acelerado. Deve-se tomar uma amostra de referncia, tambm denominada padro, que em geral pode ser mantida em geladeira ou temperatura ambiente, ao abrigo da luz. Em carter complementar, pode-se tambm utilizar amostras de mercado, cuja aceitabilidade seja conhecida, ou outros produtos semelhantes considerados satisfatrios no que se refere aos parmetros avaliados.

7.1.5.4.3.

Teste de prateleira

Tambm conhecido como Estabilidade de Longa Durao ou Shelf life, tem como objetivo validar os limites de estabilidade do produto e comprovar o prazo de validade estimado no teste de estabilidade acelerada. um estudo realizado no perodo de tempo equivalente ao prazo de validade estimado durante os estudos de estabilidade relacionados anteriormente. utilizado para avaliar o comportamento do produto em condies normais de armazenamento.

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A freqncia das anlises deve ser determinada conforme o produto, o nmero de lotes produzidos e o prazo de validade estimado. Recomendam-se avaliaes peridicas at o trmino do prazo de validade e, se a inteno ampli-lo, pode-se continuar o acompanhamento do produto.

7.1.5.4.3.1.

Procedimento

No estudo de estabilidade de prateleira, amostras representativas do produto so armazenadas temperatura ambiente. O nmero de amostras deve permitir a realizao de todos os testes que sero executados durante o estudo. Essas amostras so analisadas periodicamente at que se expire o prazo de validade. Devem ser feitos os mesmos ensaios sugeridos nos procedimentos citados anteriormente, e outros definidos pelo formulador de acordo com as caractersticas da formulao.

7.1.5.4.4.Teste de Compatibilidade entre Formulao e Material de Acondicionamento A estabilidade do produto e sua compatibilidade com o material de acondicionamento so conceitos distintos, separados e complementares, que devem ser aplicados ao produto antes de ser comercializado. Neste teste, so avaliadas diversas alternativas de materiais de acondicionamento para determinar a mais adequada para o produto. As condies ambientais e a periodicidade das anlises podem ser as mesmas mencionadas nos Estudos de Estabilidade para a formulao e, nesta fase, so verificadas as possveis interaes entre o produto e o material de acondicionamento com o qual tem contato direto. Podem ser observados fenmenos de: absoro, migrao, corroso e outros que comprometam sua integridade.

229

Considerando que este tipo de teste geralmente destrutivo, necessrio definir com segurana o nmero de amostras a serem testadas.

7.1.5.4.4.1. Tipos de Materiais de Acondicionamento e Principais Avaliaes

7.1.5.4.4.1.1. Embalagem celulsica Exemplos: cartuchos, bandejas, displays e embalagens cartonadas. Avaliam-se:
Alteraes na estrutura do papel e da formulao verificando-se possvel migrao de

componentes que possam contaminar o produto (ex: sachets); Estabilidade fsico-qumica de embalagem; Alteraes na formulao aspecto, cor, odor, entre outros; Aspecto e funcionalidade da embalagem; Funo de barreira (ex: permeao de leos, gua e gases); Determinao de metais, quando aplicvel.

7.1.5.4.4.1.2.

Embalagem metlica

Avaliam-se: Delaminao, quando aplicvel; Corroso; Alteraes na formulao aspecto, cor, odor, entre outros; Aspecto e funcionalidade da embalagem; Reao com a frmula; Integridade do verniz ou resina (interno ou externo); Determinao de metais, quando aplicvel;

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Funcionalidade. 7.1.5.4.4.1.3. Embalagem plstica Tipos de plsticos: Polipropileno (PP), Polietileno de alta densidade (PEAD), Polietileno de baixa densidade (PEBD), Polietileno tereftalato (PET), Poliestireno (PS) e Policloreto de vinila (PVC). Avaliam-se: Alteraes na formulao aspecto, cor, odor, entre outros; Aspecto e funcionalidade da embalagem; Interao e migrao de componentes entre embalagem e produto; Porosidade ao vapor dgua; Transmisso da luz; Termo-selagem (quando aplicvel); Deformaes (colapsar ou abaular).

7.1.5.4.4.1.4. Embalagem vidro Avaliam-se: Alteraes na formulao aspecto, cor, odor, entre outros; Aspecto e funcionalidade da embalagem; Resistncia mecnica da embalagem.

7.1.5.4.4.1.5. Embalagem pressurizada As avaliaes devem estar em acordo com as caractersticas dos materiais relacionados anteriormente, considerando-se adicionalmente a influncia do propelente na formulao e nos materiais da embalagem.

231

Avaliam-se: Performance do produto conforme sua funcionalidade; Corroso e eletrlise da embalagem; Controle do verniz interno e externo (porosidade), quando aplicvel; Homogeneidade do revestimento quanto formao de bolhas, fissuras e corroso; Performance da vlvula e seus componentes; Presena de eletrlitos, odor e precipitao da formulao.

7.1.5.4.5.

Teste de Transporte e Distribuio

Os estudos de estabilidade tm a finalidade de predizer o comportamento do produto em todo o sistema logstico, incluindo manuseio e transporte. As condies a que os produtos so submetidos durante o transporte podem afetar a estabilidade das formulaes, ocorrendo em alguns casos separao de fases (emulses), diminuio da viscosidade de gis ou compactao de suspenses, entre outras. Um fator agravante desse efeito a temperatura elevada durante o transporte do produto. O conjunto formado por produto e embalagem o primeiro aspecto percebido pelo consumidor. A embalagem agrega valor ao produto proporcionando proteo e comunicao, alm de manter as caractersticas do mesmo. A manuteno das caractersticas do produto em sua embalagem um aspecto valioso, uma vez que qualquer problema nesse sentido pode comprometer todo o valor agregado. Nesse contexto, um programa de teste de transporte deve ser estabelecido para ser aplicado em dois momentos. No primeiro, para determinar a capacidade da embalagem resistir s condies de estresse normalmente encontradas no manuseio e no transporte. Essa etapa aplicada na fase de desenvolvimento de uma nova embalagem ou de um novo material de

232

acondicionamento. No segundo momento, o teste aplicado para avaliar a estabilidade desse conjunto frente s diferentes condies reais de manuseio, transporte e estocagem.

7.1.5.4.5.1. Teste de Ensaios de Transporte Ensaio Real acondicionam-se as amostras sob determinadas condies reais de meios de transporte (caminho, avio, trem, navio) avaliando-se: embalagem primria, embalagem secundria, acondicionamento final e formulao. Como variveis que influenciam no processo temos: temperatura, vibrao, umidade, presso e impacto.
Ensaio Simulado submetem-se as amostras a condies e equipamentos que simulem

diferentes meios de transporte e suas variveis. Este teste pode no retratar, em alguns casos, a realidade a que o produto estar sujeito, mas utilizado como uma avaliao prvia para determinar a probabilidade da embalagem comportar-se adequadamente durante o transporte real. As condies de simulao envolvem: vibrao, presso, teste de queda drop test e variaes ambientais (umidade e temperatura). Para a realizao dos ensaios podero ser consultadas fontes como as normas da American Society for Testing & Materials (ASTM) ou de acordo com procedimentos internos da empresa.

7.1.5.4.5.2. Caractersticas Avaliadas Com relao embalagem podem ser avaliadas: capacidade de vedao, riscos, quebras e danos nos componentes da embalagem, e alteraes que comprometam sua integridade e aparncia. Com relao formulao podem ser avaliadas: caractersticas organolpticas, viscosidade, valor de pH, ponto de fuso e outros parmetros dependendo das caractersticas do produto.

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O transporte de cargas completas geralmente provoca menos danos do que o transporte de carga fracionada, durante o qual as embalagens so manuseadas repetidamente durante as operaes e tm muito mais chance de carem ou serem colocadas prximas de cargas potencialmente danosas.

7.1.5.4.5.3. Tipos de Esforos que Influenciam os Produtos na Distribuio e Transporte No transporte ferrovirio podem ocorrer danos devido troca e acoplagem de vages. No transporte martimo os produtos esto sujeitos a nveis elevados de umidade, vibrao e salinidade. No transporte areo os produtos so submetidos a condies drsticas de temperatura e pressurizao. No transporte rodovirio os produtos podem ser submetidos a condies drsticas de temperatura, umidade e vibrao. A montagem de cargas completas ou fracionadas altera as caractersticas de manuseio incluindo a probabilidade de queda ou contaminao. As empresas que utilizam diferentes canais de distribuio devem avaliar as condies a que sero submetidos seus produtos, especialmente no Brasil onde o principal meio de transporte rodovirio. importante estabelecer e implementar adequadamente as Boas Prticas de Distribuio e Transporte, a fim de manter as caractersticas propostas inicialmente para os produtos. As caractersticas do local de armazenamento tambm determinam as condies ambientais (temperatura e umidade), a altura de empilhamento, a probabilidade de infestao de insetos e pragas e o acmulo de poeira.

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7.1.5.4.6.

Avaliao das Caractersticas do Produto

Os parmetros a serem avaliados nos produtos submetidos a testes de estabilidade devem ser definidos pelo formulador e dependem das caractersticas do produto em estudo e dos componentes utilizados na formulao.

7.1.5.4.6.1. Avaliao Organolptica As caractersticas organolpticas determinam os parmetros de aceitao do produto pelo consumidor. De um modo geral, avaliam-se: Aspecto; Cor; Odor; Sabor; Sensao ao tato.

7.1.5.4.6.2. Avaliao Fsico-Qumica So importantes para pesquisar alteraes na estrutura da formulao que nem sempre so perceptveis visualmente. Estas anlises podem indicar problemas de estabilidade entre os ingredientes ou decorrentes do processo de fabricao. As anlises fsico-qumicas sugeridas so: Valor de pH; Materiais volteis; Teor de gua; Viscosidade;

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Tamanho de partcula; Centrifugao; Densidade; Granulometria; Condutividade eltrica; Umidade; Teor de ativo, quando for o caso. Quando necessrio, diferentes tcnicas analticas podem ser utilizadas na determinao quantitativa dos componentes da formulao, entre elas: ensaios via mida (metodologias diversas); Espectrofotometria no Ultravioleta-Visivel (UV-Vis) e Infravermelho (IV); Cromatografia (camada delgada, gasosa e lquida de alta eficincia). Eletroforese capilar, entre outras. Os testes citados so sugestes, cabendo ao formulador avaliar sua adequao ao produto levando em considerao as necessidades e caractersticas particulares de cada empresa. Outros testes no relacionados podero ser empregados de acordo com as condies especficas ou interesse do formulador.

7.1.5.4.6.3. Avaliao Microbiolgica A avaliao microbiolgica permite verificar se a escolha do sistema conservante adequada, ou se a ocorrncia de interaes entre os componentes da formulao poder prejudicar-lhe a eficcia. Os testes normalmente utilizados so:

Teste de desafio do sistema conservante (Challenge Test);

Contagem microbiana.

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7.1.5.4.7.

Consideraes sobre Segurana e Eficcia do Produto e sua Estabilidade

A realizao dos Estudos de Estabilidade serve como instrumento preditivo de possveis desvios na eficcia e na segurana definidas para o produto, durante seu desenvolvimento. Para monitorar a manuteno dessas caractersticas importante considerar os seguintes aspectos: Caractersticas e propriedades dos ingredientes; Mecanismo de degradao dos ingredientes; Possveis incompatibilidades; Riscos envolvidos em cada etapa do processo de fabricao; Conhecimento dos fatores realmente crticos a cada formulao. Recomenda-se que os estudos de segurana e eficcia sejam precedidos por estudos de estabilidade. O acompanhamento do produto no mercado pode confirmar as informaes obtidas inicialmente ou identificar novas situaes que devero ser investigadas.

7.1.5.4.8.

Anlise Estatstica

A anlise estatstica pode ser uma das ferramentas utilizadas na interpretao dos dados obtidos durante os estudos de estabilidade, para os diversos aspectos avaliados, em suas diferentes etapas de realizao. necessrio delinear adequadamente o teste, definindo as variveis que sero controladas e que influenciam nos resultados, ex: ciclos, tempo e temperaturas. Alm dos fatores relacionados ao estudo existem outras variveis no controladas que podem interferir no

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resultado. importante considerar essas variveis, evitando que suas influncias afetem as informaes obtidas sobre os fatores de interesse. Os dados obtidos em um estudo de estabilidade podero ser qualitativos ou quantitativos, devendo-se considerar que informaes prvias e histrico de outros produtos podem auxiliar na interpretao. As vrias ferramentas estatsticas disponveis devem ser criteriosamente escolhidas na anlise e na interpretao dos dados, conforme a etapa do estudo (seleo das formulaes, estabilidade acelerada, normal, de prateleira e validao de processos). Como exemplos, temos: Avaliao da significncia da diferena entre duas sries de dados: Teste de Hiptese Teste t; Determinao da capacidade de um resultado amostral e estimativa do valor real: Estimativa por Intervalo de Confiana; Determinao dos limites de tolerncia de caractersticas especficas: Limites de Tolerncia; Incorporao de informaes prvias na previso de eventos futuros: Teorema de Bayes; Avaliao das relaes entre duas ou mais variveis atravs de uma equao para estimar um resultado: Regresso Linear. importante tambm considerar que, embora existam inmeras ferramentas estatsticas e softwares que facilitam a anlise dos resultados, a experincia e o conhecimento do pesquisador so fundamentais na interpretao correta desses dados. Muitas vezes, resultados estatisticamente significativos podem no ser analiticamente importantes. Por outro lado, existe tambm a situao inversa, em que resultados, estatisticamente no-significativos, podem ser muito importantes do ponto de vista analtico, no devendo ser desconsiderados.

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7.1.5.4.9.

Critrios para Aprovao de Produtos em Estabilidade

A interpretao dos dados obtidos durante o Estudo da Estabilidade depende de critrios estabelecidos, segundo a experincia do formulador. As amostras so avaliadas em comparao amostra-padro e produtos considerados referncia, submetidos s mesmas condies do teste. Geralmente definem-se limites de aceitao para os parmetros avaliados, e a amostrapadro dever permanecer inalterada durante toda a vida til do produto. A correspondncia entre os dados e sua interpretao deve ser relativa por considerar que, na prtica, os objetivos e as caractersticas de cada produto ou categoria so bastante distintos. Em geral, consideram-se os seguintes critrios: Aspecto: o produto deve manter-se ntegro durante todo o teste mantendo seu aspecto inicial em todas as condies, exceto em temperaturas elevadas, freezer ou ciclos em que pequenas alteraes so aceitveis. Cor e odor: devem permanecer estveis por, no mnimo, 15 dias luz solar. Pequenas alteraes so aceitveis em temperaturas elevadas. Viscosidade: os limites de aceitao devem ser definidos pelo formulador considerando- se a percepo visual e sensorial decorridas de alteraes. Deve-se levar em conta a possibilidade do consumidor tambm reconhec-las. Compatibilidade com o material de acondicionamento: deve-se considerar a integridade da embalagem e da formulao, avaliando-se o peso, a vedao e a funcionalidade. Nos casos em que o monitoramento dos teores de ingredientes ativos necessrio, devese levar em considerao os parmetros de qualidade e performance do produto. Outros parmetros podem ser estabelecidos de acordo com o formulador e as especificaes do produto.

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7.1.5.4.10. Prazo de Validade de Produtos No Brasil, a obrigatoriedade da indicao do prazo de validade na embalagem dos produtos cosmticos, vista do consumidor, est estabelecida em legislao especfica, Resoluo 79/00 e suas atualizaes e Lei 8.078/90 - Cdigo de Proteo e Defesa do Consumidor. O prazo de validade - caracterizado como o perodo de vida til, durante o qual o produto mantm suas caractersticas originais - antes de ser um requisito legal, , sobretudo, um requisito tcnico de qualidade, pois um produto instvel do ponto de vista fsico-qumico, microbiolgico ou toxicolgico, alm da perda de eficcia poder tambm causar algum dano e comprometer a confiabilidade frente ao consumidor. Devido natureza particular das formulaes dos produtos cosmticos, aceita-se como regra geral, a impossibilidade da eleio de um ingrediente isolado do restante da formulao. Assim, torna-se difcil a aplicao da relao entre constante cintica, temperatura e uma correlao direta dessas variveis com o prazo de validade estimado. Portanto, o prazo de validade pode ser estimado por meio dos Estudos de Estabilidade, e sua confirmao deve ser realizada por meio do Teste de Prateleira.

7.1.5.4.11.

Relatrio de Concluso dos Estudos de Estabilidade

Identificao do produto Material de acondicionamento utilizado no teste Condies do estudo (condies de armazenamento das amostras, perodo de tempo do teste e periodicidade das avaliaes) Resultados (podero ser registrados na forma de tabela relacionando as condies de armazenamento, tempo e periodicidade das anlises)

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Concluso (avaliar os resultados obtidos, relatar se o produto foi aprovado ou no, condies em que o teste foi conduzido, e estimar o prazo de validade) Assinatura do responsvel pelo estudo

7.1.6. Avaliao dos Resultados Os resultados sero considerados satisfatrios quando as amostras apresentarem valor dentro da especificao estabelecida para o produto. Alguns produtos, em funo do risco que podem apresentar, tm limites estabelecido por regulamentao especfica.

7.1.7. Especificaes para Liberao de Lotes Fabricados Se um lote apresentar, no momento da fabricao, alguma especificao prxima dos limites estabelecidos para o produto, certamente uma pequena mudana pode acarretar a transposio desses limites e a ocorrncia de uma no-conformidade que pode reduzir o tempo em que o produto se apresenta adequado ao uso. Com o objetivo de preservar o prazo de validade projetado para o produto desejvel que se estabeleam duas especificaes: uma denominada Especificao de Liberao a ser adotada no momento da fabricao, e outra denominada Especificao de Shelf life, segundo a qual o produto caracterizado durante sua vida til. Durante o tempo de estocagem do produto em condies de mercado suas especificaes podero variar entre os limites estabelecidos pelas Especificaes de Liberao e as Especificaes de Shelf life, especialmente para aqueles parmetros em que o produto menos estvel. O tempo em que a variao desse parmetro permanece entre esses dois grupos de especificaes deve ser menor ou igual ao prazo de validade estabelecido para o produto.

241

7.1.8. Legislao Brasileira Os estudos de estabilidade tm por objetivo avaliar a capacidade de um produto manter as caractersticas organolpticas, fsico-qumicas, microbiolgicas e de segurana e eficcia. Assim, o estudo da estabilidade deve ser visto como um requisito necessrio para a garantia da qualidade do produto e no somente como uma exigncia do rgo Regulamentador. No Brasil de responsabilidade da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa/ MS, regulamentar, fiscalizar e controlar a produo e a comercializao de produtos cosmticos, para propiciar produtos seguros e com qualidade no mercado; contribuindo, assim, para a proteo da sade da populao. As exigncias regulatrias sobre estabilidade de produtos cosmticos esto

fundamentadas nos seguintes atos normativos: Resoluo 79/2000 Normas e Procedimentos para Registro de Produtos de Higiene Pessoal, Cosmticos e Perfumes e Listas de Corantes Permitidos e de Substncias de Uso Restrito. Resoluo 335/1999 Normas e Procedimentos para Notificao de Produtos Grau de Risco 1 - Artigo 2: O fabricante ou importador deve possuir dados comprobatrios que atestem a qualidade, segurana e eficcia de seus produtos. Portaria 348/1997 Manual de Boas Prticas de Fabricao e Roteiro de Inspeo. Item 12.15: estudo de estabilidade dos produtos com registros de condies dos testes, resultados, mtodos analticos usados. Resoluo 481/1999 Parmetros para Controle Microbiolgico de Produtos Cosmticos. Resoluo RDC 161/2001 Lista de Filtros Ultravioleta Permitidos. Resoluo RDC 162/2001 Lista de Conservantes Permitidos.

242

Pareceres Tcnicos da Cmara Tcnica de Cosmticos Recomendaes Tcnicas com requisitos especficos para determinados tipos de produtos ou substncias.

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REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

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APNDICE

FORMAS DE UTILIZAES DOS PRODUTOS........................................................... 253 LEO CORPORAL LUMINOSO DE MACADMIA E BAUNILHA VAIDADE......... 253 LOO CREMOSA DE MARACUJ E HORTEL (RELAXANTE E REFRESCANTE) PREGUIA............................................................................................................................. 253 BANHO DE ESPUMA DE CEREJA COM CHAMPAGNE LUXRIA.......................... 253 SABONETE ESFOLIANTE CORPORAL DE LICHIA COM SEMENTE DE DAMASCO IRA.......................................................................................................................................... 254 CREME HIDRATANTE CORPORAL DE FONDUE DE CHOCOLATE COM AMORA GULA..................................................................................................................................... 254 SABONETE LQUIDO DE CAPPUCCINO AVAREZA.................................................. 254 PERFUME DE MORANGO COM PIMENTA INVEJA................................................... 254

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FORMAS DE UTILIZAES DOS PRODUTOS

LEO CORPORAL LUMINOSO DE MACADMIA E BAUNILHA - VAIDADE Use vaidosamente! Inicialmente precisar do leo luminoso de macadmia e baunilha um espelho para visualizar o seu exuberante corpo, em seguida, retire o produto da magnfica embalagem, e admire-o. Posicione o espelho de modo que voc possa ver e sentir o contato do leo em seu corpo. Passe-o atravs de massagem corporal, para acentuar a sua beleza e prazer. E por fim, admire-se muito no espelho. Veja como a sua pele ficou extremamente macia, iluminada e cheirosa.

LOO CREMOSA DE MARACUJ E HORTEL (RELAXANTE E REFRESCANTE) PREGUIA Use com preguia! Primeiro deite em um lugar confortvel e macio, em seguida, passe a loo corporal de Maracuj e hortel, massageando a pele de todo seu corpo, bem devagar, at voc dormir.

BANHO DE ESPUMA DE CEREJA COM CHAMPAGNE - LUXRIA Use com prazer! Misture o banho de espuma de cereja com champagne, juntamente com a gua quente e gostosa, em uma banheira ou um furo. Retire a sua roupa, e entre nesse prazer acompanhada ou s.

253

SABONETE ESFOLIANTE CORPORAL DE LICHIA COM SEMENTE DE DAMASCO IRA Use irado! Passe o sabonete esfoliante corporal de lichia com semente de damasco sobre a pele cuidadosamente, removendo todas as impurezas presentes em seu corpo, e por fim, jogue uma ducha gelada e forte para retirar o produto.

CREME HIDRATANTE CORPORAL DE FONDUE DE CHOCOLATE COM AMORA GULA Use essa delcia! Em uma pele limpa, passe o delicioso creme hidratante corporal fundue de chocolate com amora, em todo o seu corpo, sempre o massageando. Terminado, a sua pele estar macia, cheirosa e muito gostosa

SABONETE LQUIDO DE CAPPUCCINO - AVAREZA Use sem misria! Molhe o corpo com o mnimo de gua. Coloque uma exuberante quantia de sabonete lquido de cappuccino, em uma esponja, esfregue o seu corpo, retire o produto lavando com pouca gua.

PERFUME DE MORANGO COM PIMENTA - INVEJA Use transmitindo inveja! Pegue o perfume de morango com pimenta na frente de suas amigas, retire a tampa ilustrando o produto e esborrife em seu pescoo e pulso. O efeito ser imediato, todas iro arder de inveja.

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ANEXOS

ANLISES DE CUSTOS E CARACTERSTICAS DAS CONCORRNCIAS............ 256 EXEMPLOS DE METODOLOGIA IN VITRO................................................................ 258 EXEMPLOS DE TESTES................................................................................................... 259 ATRIBUTOS LIGADOS SEGURANA....................................................................... 260 GLOSSRIO........................................................................................................................ 262 FORMULRIO SAC.......................................................................................................... 266 FORMULRIO PARA ANVISA....................................................................................... 268 TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO...................................... 270 FORMULRIO DE DECLARAO DE RESPONSABILIDADE E COMPROMISSO DO PATROCINADOR........................................................................................................ 276 FORMULRIO DE DECLARAO DE RESPONSABILIDADE E COMPROMISSO DO INVESTIGADOR.......................................................................................................... 278 FORMULRIO DE APRESENTAO DO ESTUDO................................................... 280 PROTOCOLO DE ESTUDO............................................................................................... 282 RESOLUO N 481, DE 23 DE SETEMBRO DE 1999................................................. 296

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ANLISES DE CUSTOS E CARACTERSTICAS DAS CONCORRNCIAS

Pesquisa realizada pela empresa One, em maio de 2009. Tabela 10: Anlises de preos e caractersticas dos produtos de concorrentes. Produtos Caractersticas Empresas A nutrio reparadora e o conforto de longa durao para que as peles Nutre Royal Body Lancome secas transformem-se em "pele de beb". Creme ultra-hidratante para o corpo com fundo de amndoas. Body lotion amber Victorias Proporciona uma pele suave e romance 250ml secret macia. Um aroma marcante e bem sensual. Criado por Ernest Beaux, famoso perfumista da poca, a pedido de Coco Chanel. foi o primeiro perfume sinttico a levar o nome de um estilista. Revolucionando o mundo das fragrncias, o perfumista utilizou em sua frmula corpos sintticos em propores inditas at Coco Feminino. ento: eram mais de 65 substncias Eau de Toilette Channel. 100ml em sua composio entre elas rosas, Channel jasmins de Grasse, flores raras do oriente e sndalo, alm da luxuosa essncia do pau-rosa, rvore tropical ameaada de extino e que encantou os europeus desde o sculo XVIII por sua fragrncia. "Um perfume de mulher com cheiro de mulher" Floral suave, com notas de bergamota, tangerina, pimenta rosa, ptalas de flores, gardnia, algodo doce, sndalo, almscar branco e Carolina Herrera 212 baunilha. Uma fragrncia sensual, Sexy Feminino Eau de Parfum profunda e ardente que traz a certeza 100ml da seduo no primeiro encontro. 212 Sexy foi especialmente concebido para a mulher sofisticada e sensual. Amber Romance Para uma pele suave, macia e Victorias Body Butter Victoria perfumada, a mescla fantstica e Secret 200 ml deliciosa de Cereja Preta, Creme Anglaise e Madeira de Sndalo faz de Amber Romance uma fragrncia

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EXEMPLOS DE METODOLOGIA IN VITRO

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Tabela 11: Exemplos de Metodologia in vitro Teste Alternativo Tipo de Avaliao Het-Cam Irritao Ocular BCOP Irritao Ocular Citotoxicidade pela difuso em gel agarose Irritao Ocular Citotoxicidade pelo mtodo de Vermelho Neutro Irritao Ocular Citotoxicidade pelo mtodo do MIT Irritao Ocular Teste de Corrosividade Potencial de Irritao Cutnea Teste de Fototoxicidade Potencial Fototxico Fonte: Guia de Orientao para Avaliao de Segurana de Produtos Cosmticos

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EXEMPLOS DE TESTES

Tabela 12: Exemplos de Testes Testes Comedogenicidade Irritabilidade Drmica Primria Irritabilidade Ocular Irritabilidade Drmica Cumulativa Sensibilizao Drmica Sensibilizao Drmica Maximizada Fotoirritao Drmica Primria Fotoirritao Drmica Cumulativa Fotossensibilizao Drmica Maximizada Fotossensibilizao Drmica no Maximizada Fototoxicidade Determinao da DL-50 Oral Irritabilidade da Mucosa Irritabilidade da Mucosa Genital Carcinogenicidade Teratogenicidade Teste LLNA Fonte: Guia de Orientao para Avaliao de Segurana de Produtos Cosmticos

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ATRIBUTOS LIGADOS A SEGURANA

Tabela 13: Atributos ligados segurana Atributo de segurana Significado/Comentrios Avaliado em humanos sob controle de mdico dermatologista, para verificar potencial de reaes cutneas Avaliado em humanos sob controle de uso, sob controle mdico oftalmologista para verificar potencial de reaes oftlmicas Avaliado em humanos sob controle de uso, sob controle mdico dermatologista e eventualmente de outro especialista para verificar potencial de reaes Ensaios recomendados em humanos Ensaios de compatibilidade cutnea e/ou ensaios de aceitabilidade cutnea, em condies normais de uso, conduzidos por mdico dermatologista Ensaios aceitabilidade, em indivduos hgidos, analisandose reaes oftlmicas Ensaios aceitabilidade, em indivduos hgidos, analisandose particularidades dos stios de uso Ensaios oclusivos de contato repetido em indivduos negros/ou ensaios de uso por quatro semanas, ambos com acompanhamento dermatolgico, com monitoramento do nmero de comedes antes e depois, ou contra um controle Ensaio em uso 3-4 semanas, em indivduos com predisposio a acne e/ou pele oleosa Ensaios de compatibilidade cutnea e ensaios de uso em indivduos de pele sensvel, de acordo com a conceituao Ensaios de compatibilidade cutnea, de sensibilizao e fotossensibilizao, sem ocorrncia de reaes

Dermatologicamente testedo

Oftalmologicamente testado

Clinicamente testado

No comedognico

Avaliado em humanos para observar o potencial de formar comedes (cravos)

No Acnegnico Produto para Pele Sensvel

Hipoalergnico

Avaliado em humanos para observar o potencial de formar ou piorar espinhas/acne Avaliado em indivduos que apresentem sintomas caractersticos de um quadro de pele sensvel Produto com menor potencial de causar reaes alrgicas; o termo no recomendado pelo FDA, pois todo o produto cosmtico, em tese, no deve ter potencial sensibilizante

Produto Infantil

Produto apropriado para uso na

Ensaios de compatibilidade

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cutnea em adultos, e em casos especficos, na seqncia, ensaios de aceitabilidade cutnea no pblico-alvo (regulamentao especifica) Fonte: Guia de Orientao para Avaliao de Segurana de Produtos Cosmticos pele, cabelos e mucosas infantis, conforme legislao brasileira

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GLOSSRIO

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FORMULRIO SAC

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FORMULRIO PARA ANVISA

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TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO

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FORMULRIO DE DECLARAO DE RESPONSABILIDADE E COMPROMISSO DO PATROCINADOR

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FORMULRIO DE DECLARAO DE RESPONSABILIDADE E COMPROMISSO DO INVESTIGADOR

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FORMULRIO DE APRESENTAO DO ESTUDO

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PROTOCOLO DE ESTUDO

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RESOLUO N 481, DE 23 DE SETEMBRO DE 1999