Universidade Catlica de Petrpolis Centro de Cincias da Sade

Universidade Catlica de Petrpolis Centro de Cincias da Sade Qumica Geral e Experimental Professor: Mauro Turma: B Alunos: Rafaella Teixeira Rampini 11100246 Camila Telles Canedo 11210347 Daniela Mendes de S. Simon 11210348 Nome da Prtica: Procedimento para extrao de DNA Data de entrega: 18/05/2012 Resumo Nesse experimento verificamos como extrair o DNA do repolho, atravs do experimento vimos o DNA que formou filamentos finos como fios de algodo, observou-se tambm bolhas de pecnase que apresenta a consistncia de gelia Objetivo O objetivo deste experimento contribuir para a identificao do DNA extrado a partir de material vegetal, neste caso o repolho Introduo Com esse experimento observou-se lise onde atravs da degradao da bi camada lipdica foi possvel a extrao do DNA e da pectinase que um polissacardeo. Consegui-se observar a forma do DNA que forma filamentos finos e pectina que tem a consistncia de gelia. Materiais e Mtodos - 01 Placa aquecedora - 01 Trip - 03 Becker - 01 Funil - 01 Termmetro - 40 ml de lcool gelado - 30 ml de gua - Detergente - Sal de cozinha - Material biolgico: repolho - Algodo - 01 Placa aquecedora - 01 Bacia com gelo - Papel filme 3 etapa: Foi adicionado, o mesmo volume da soluo anterior, de gua no bekcer. Aquecendo-o na placa aquecedora at atingir a temperatura de 70 C. 4 etapa: Aps o aquecimento da soluo aquosa, foi incubado o bekcer com a primeira soluo em banho-maria, por 20 minutos. 5 etapa: Retirou-se o bekcer em banhomaria, filtrou-se a soluo utilizando o funil com o algodo, recolhendo o material em outro becker. 6 etapa: Colocou-se o bekcer com a soluo filtrada em um recipiente com pedras de gelo deixando-o esfriar por 5 minutos 7 etapa: Removeu-se o becker do gelo e adicionou-se o lcool gelado, escorrendo vagarosamente pela parede do copo. Resultado e discusso A soluo resultou-se em 41 ml, onde at 20 ml obteve-se a colorao lils, de 20 a 40 ml colorao transparente e por fim observou-se por uma nuvem esbranquiada o DNA extrado. 1-Qual a funo da soluo lise? Tem a funo de romper a membrana plasmtica e outras membranas. 2-Por que o material deve ser picado em pequenos pedaos? PROCEDIMENTOS EXPERIMENTAIS 1 etapa: adcionou-se (30 ml) de gua no becker, e acrescentou-se o detergente lquido e o sal de cozinha e misturando-os vagarosamente, formando a soluo lise. 2 etapa: Picou-se o material vegetal em pequenos pedaos, colocando-o dentro do becker com a soluo de lise, e novamente misturou-se a soluo, aps cubriu-se o becker com o papel filme plstico.

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Quanto mais picado estiver o material, maior ser sua superfcie de contato com a soluo de lise e melhor a ao da soluo sobre as clulas. Isto permitir a liberao de uma maior quantidade de molculas de DNA e, portanto, um bom rendimento. 3-O que pode acontecer se o banho Maria estiver a temperatura maiores do que setenta graus? E se estiver a temperatura menores? A temperatura elevada promove agitao das molculas, facilitando a ao do detergente em desestabilizar as membranas lipdicas. A alta temperatura tambm ajuda a inativar enzimas que podem degradar o DNA. Em temperaturas menores acontece a precipitao do DNA. 4-Qual a funo do lcool no processo? Porque a adio deve ser lenta? O lcool gelado diminui a solubilidade do DNA com a ajuda do sal adicionado inicialmente. O DNA, menos solvel em lcool, formar um aglomerado que precipitar junto com outras molculas. Adicionar o lcool gelado em velocidade lenta auxilia na eficincia de precipitao do DNA. 5-O que pectinase? Qual a sua funo? A pectina um polissacardeo ramificado constitudo principalmente de polmeros de cido galacturnico, ramnose, arabinose e galactose. um dos principais da parede celular das plantas e o principal componente da lamela mdia. As suas ramificaes servem para aprisionar a gua em redor a fim de tornar o meio mais gel. Concluso Foi possvel extrair o DNA do repolho porque atravs de um mtodo simples, vrias etapas acabaram com a extrao dessa molcula. Na primeira etapa, foi possvel ver a destruio da parede celulsica que envolve a clula vegetal. J na segunda, o detergente foi responsvel pelo rompimento da membrana citoplasmtica e da liberao do DNA no suco. Assim, com a adio do lcool, foi possvel separar essa molcula do resto do suco. Com esse experimento, provamos a existncia do DNA atravs dos resultados obtidos REFERENCIA BIBLIOGRFICA www.biotecnologia.com.br/revista/b io09/extracao.pdf (16/05/201220:30) www.ebah.com.br/content/.../funda mentos-extracao-dna-rna (16/05/2012 - 21:30) www.dbio.uevora.pt/LBM/Foco/Extr accao/Extraccao_DNA.html (16/05/2012 21:45)