CLOSTRIDIOS - Reviso de Literatura BRANDO, Gabriela C. Discente do Curso de Medicina Veterinria da UESC BISINOTTO, Marcela G.

Discente do Curso de Medicina Veterinria da UESC

RESUMO
Clostridios so bactrias anaerbicas gram-positivas e formadoras de esporos do gnero Clostridium. Algumas espcies desse gnero so patognicas, sendo invasoras de tecidos ou tendo a capacidade de produzir toxinas que agem de diferentes maneiras. Tais toxinas podem ser produzidas no intestino, em tecidos necrosados ou at mesmo em matria orgnica animal ou nos alimentos. So, na maioria das vezes, letais e podem acometer caprinos, ovinos, equinos, sunos e aves, alm de humanos. Tema Central: Medicina Veterinria, doenas causadas por Clostridium sp. Palavras-chaves: Clostridioses, bactrias, toxinas

ABSTRACT Clostridia are gram-positive anaerobic bacteria and spore-forming of the gender Clostridium. Some species of this gender are pathogenic. They can be invasive of tissues or have the ability to produce toxins that act in different ways. Such toxins can be produced in the intestine, necrotic tissue or even animal or organic matter in food. They are, in most cases, lethal and can affect goats, sheep, horses, pigs and poultry and humans.

Central

subject:

Veterinary

medicine,

diseases

caused

by

Clostridium

sp.

Keywords: Clostridia, bacteria, toxins

INTRODUO

O gnero Clostridium composto por bacilos Gram-positivos, predominantemente mveis, anaerbicos, formadores de esporos. Na forma esporulada estes microrganismos so extremamente resistentes a condies adversas do meio ambiente. Clostrdios so encontrados em ambientes com alta concentrao de matria orgnica, gua e contedo intestinal de homens e animais (Carter GR, Wise DJ, 1991).

Diversas espcies de clostrdios apresentam patogenicidade para animais. Clostridium chauvoei, Clostridium septicum, Clostridium novyi, Clostridium sordelli, esto relacionados ocorrncia de mionecroses, representadas pelo carbnculo sintomtico e gangrena gasosa. Clostridium haemolyticum o agente causal da hemoglobinria bacilar, enquanto Clostridium botulinum e Clostridium tetani so responsveis pelo botulismo e ttano, respectivamente.O gnero Clostridium se caracteriza pela produo de diferentes toxinas. Cada espcie possui determinado espectro de fraes toxignicas com propriedades letais, necrosantes, hemolticas e neurotxicas ( Stevens DL, 1997). Os clostrdios so microrganismos que tm a habilidade de passar para uma forma de resistncia chamada esporo e podem se manter, potencialmente infectantes, no solo por longos perodos at 40 anos-, representando um grande risco para animais e humanos. Muitas espcies de clostrdios podem estar presentes na gua doce e salgada -, no solo e no trato intestinal normal de animais e humanos. Apesar de estarem presentes no ambiente e no trato intestinal, os clostrdios no so transmitidos de um animal para outro, e o que causa os sinais clnicos no so as bactrias, mas as toxinas produzidas por elas (QUIN et al. 1992; ODENDAAL, 1994). Por ser anaerbio, incapaz de utilizar o O2 como aceptor final de hidrognio. Estes organismos carecem de citocromo e de citocromo-oxidase sendo incapazes de degradar o perxido de hidrognio, uma vez que no possuem catalase. Dessa forma, o perxido tende a acumular-se em concentraes txicas quando na presena de O2. As exigncias de anaerobiose estrita variam entre as espcies de clostrdios. Para propsitos prticos, indicadores de oxidao-reduo (como azul de metileno e resazurina) so mensuradores adequados das condies para o cultivo de anaerbios patognicos. Os clostrdios preferem 2 a 10 % de CO2 em seu ambiente. A maioria dos clostrdios patognicos requer meios complexos contendo aminocidos, carboidratos e vitaminas. Sangue ou soro benfico. Um pH prximo do neutro e temperatura de 37C so ideais (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999). O crescimento normalmente visvel dentro de 1 ou 2 dias. As colnias em geral tem forma e contorno irregulares. Vrios clostrdios espalham-se pela superfcie de gar mido sem formar colnias. A maioria dos clostrdios produz hemlise. Em meios lquidos, os clostrdios frequentemente crescem ao ar desde que um agente redutor esteja presente (pedaos cozidos de carne, tioglicolato). O crescimento ocorre apenas em reas limitadas do meio (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999). Das 80 espcies de clostrdios, talvez 10 possuem importncia na veterinria (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999).

CLOSTRDIOS

Clostridium tetani:

O Clostridium tetani um bacilo Gram-positivo, anaerbio, fino, medindo de 0,3 a 0,6 x36 m, mvel, com numerosos flagelos e que se apresenta na forma vegetativa e esporulada. Esta a sua forma de resistncia, amplamente disseminada na natureza. Que resiste a condies muito adversas (LEAO, Raimundo N. Q., 1997) Uma caracterstica morfolgica distinta de C. tetani o formato esfrico e a posio terminal de seus esporos (baquetas de tambor, raquetes ou palito de fsforo) (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999).

 comum a ocorrncia da doena aps ferimentos, acidentais ou prticas de manejo, como castrao, descola - corte da cauda - tosquia, descorna, aplicaes de vacinas e/ou medicamentos. Em filhotes, o cordo umbilical a porta de entrada mais comum para esta toxinfeco. .Para que o esporo se multiplique e produza as toxinas, necessrio que haja uma condio de anaerobiose falta de oxignio local, o que geralmente acontece nas feridas mais profundas. Em condies favorveis nas feridas, esses esporos germinam, multiplicam-se e produzem a neurotoxina, que atravs dos nervos perifricos transportada para o sistema nervoso central e causam os sinais clnicos (ODENDAAL, 1994). Das duas exotoxinas, a tetanolisina, uma hemolisina sensvel ao oxignio, no possui significado patognico conhecido. A tetanoespamina uma neurotoxina codificada por plasmdeos responsvel pela doena. Da mesma forma que a toxina butolnica, ela age prsinapticamente nos neurnios motores bloqueando a liberao de neurotransmissores por meio de hidrlise das protenas de coalescncia. A atividade significativa exercida sobre as fibras aferentes no corno ventral da medula ssea espinhal. A toxina destruda por calor e proteases (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999). A principal porta de entrada para o C. tetani so as feridas profundas, contaminadas por fezes ou material contendo esporos da bactria (ODENDAAL, 1994). Clostridium tetani cresce em gar sangue sob condies anaerbias de rotina. Pode haver espraiamento. Suas reaes diferenciais variam com o meio usado. Os esporos resistem fervura por at 1,5 hora, mas no autoclavao. Desinfeco por alguns compostos halogenados (iodo a 3%) pode ser eficaz em poucas horas, mas fenol, lisol e fomalina nas concentraes usuais so ineficazes (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999). comum a ocorrncia da doena aps ferimentos, acidentais ou prticas de manejo, como castrao, descola - corte da cauda - tosquia, descorna, aplicaes de vacinas e/ou medicamentos. Em filhotes, o cordo umbilical a porta de entrada mais comum para esta toxinfeco. .Para que o esporo se multiplique e produza as toxinas, necessrio que haja uma condio de anaerobiose falta de oxignio local, o que geralmente acontece nas feridas mais profundas. Em condies favorveis nas feridas, esses esporos germinam, multiplicam-se e produzem a neurotoxina, que atravs dos nervos perifricos transportada para o sistema nervoso central e causam os sinais clnicos (ODENDAAL, 1994). Um esfregao corado pelo Gram de um ferimento contaminado pode revelar a morfologia caracterstica de baqueta de tambor da bactria. Sua ausncia no exclui o ttano e sua presena meramente sugestiva j que essa morfologia no exclusiva. (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999). O diagnstico se baseia nos sinais clnicos e dados epidemiolgicos, visto que na macro e microscopia geralmente no so encontradas alteraes. Porm, em alguns casos pode-se observar a ferida onde a bactria se desenvolveu, pois h edema e hemorragia subcutnea e muscular. (COETZER, TUSTIN, 2004)

Clostridium botulinum:

O agente indistinguvel morfologicamente. Em pH prximo e acima da neutralidade, ele produz esporos ovais subterminais. (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999). Clostridium botulinum um anaerbio estrito. Grupos submetidos a cultura possuem caractersticas coloniais variveis. Alguns so incapazes de crescer em superfcies de gua. A maioria hemoltica (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999). O microrganismo um bacilo Gram-positivo, formador de esporos, mvel, de extremidades arredondadas e esporos geralmente terminais. Ocorre sob duas formas na

natureza: quando no possui boas condies para a sua multiplicao, encontrado sob a forma esporulada, na qual sobrevive no meio ambiente por vrios anos; algumas estirpes de C. botulinum podem resistir por at 5 minutos temperatura de 180C. Quando as condies so favorveis, passa para a forma vegetativa onde inicia a sua multiplicao e eventual formao de toxina. Para que isto ocorra, so necessrios temperatura, umidade e pH adequados, decomposio de substrato orgnico animal ou vegetal e anaerobiose. As toxinas produzidas por C. botulinum esto entre as mais potentes da natureza. Classificadas dentro dos tipos A a G, elas so antigenicamente distintas, apresentam ao farmacolgica semelhante e variaes de susceptibilidade nas diferentes espcies animais (Tokarnia et al. 1970, Smith 1977) As clulas vegetativas produzem neurotoxinas e outras protenas difusveis entre 12 e 35C, incluindo hemaglutinina, algumas das quais protegem a neurotoxina contra inativao. A neurotoxina liberada aps lise da clula bacteriana produzida como pr-toxina ativada por proteases. Em junes neurais colinrgicas perifricas, ela inibe a liberao de acetilcolina, bloqueando, desta forma, a transmisso dos impulsos nervosos (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999). A toxina botulnica paralisa a musculatura esqueltica. Botulismo animal visto principalmente em ruminantes, equinos, martas, aves domsticas, especialmente aquticas. Raramente so afetados sunos, carnvoros e peixes. (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999) A confirmao laboratorial do butolismo feita pela tcnica do ensaio biolgico em camundongo (inoculao intraperitoneal de extrato heptico, contedo ruminal e intestinal de animais afetados), considerando o teste mais especfico para a doena, mas que apresenta sensibilidade prxima de 43 % (DUTRA et al., 2001)

Clostridium perfringens:

Clostridium perfringens uma bactria em forma de bastonete, Gram positivo, anaerbia, com esporos subterminais e centrais (SCHOCKEN-ITURRINO & ISHI, 2000). Produz vrios tipos de toxinas, mas classificada de A a E, em razo das toxinas alfa, beta, epsilon, teta, iota, kappa, lambda e m, capazes de provocar patologias diversas, principalmente a enterite necrtica (CARTER, 1998). Clostridium perfringens relativamente aerotolerante. Ele imvel e possui uma cpsula de polissacardeo quando nos tecidos. H cico tipos (de A at E), com base na sua produo de toxina. Cada tipo produz uma combinao diferente de toxina designadas pelas letras gregas alfa, beta, psilon e iota. Os genes que codificam algumas toxinas (beta e psilon) esto localizados em plasmdeos (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999). As caractersticas de diagnstico incluem atividade hemoltica de fosfolipase C, coagulao do leite seguida de ruptura gasosa e neutralizao(em gar gema de ovo) da atividade de fosfolipase C por anticorpos especficos (reao de Nagler). Os clostrdios vegetativos so to sensveis a estresse ambiental e desinfetantes como outras bactrias. Os endsporos fornecem resistncia a dessecao, calor, irradiao e desisnfetantes (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999).

Clostridium novyi:
Clostridium novyi um bastonete reto com bordas arredondados visto no tecido e no cultivo e tambm um anaerbio estrito desprovido de cpsula e mvel que produz grandes esporos ovais altamente resistentes ao calor. O crescimento pode ser melhorado com a adio de glicose. As colnias so chatas com bordas irregulares que se espalham na superfcie do agar como um filmede crescimento transparente. Existem trs tipos (A a C), que diferem entre si pelas caractersticas bioqumicas, epidemiolgicas e patognicas. Habitante do solo e a causa da hepatite necrtica dos ovinos e bovinos. So conhecidos como hepatite necrtica ou "Black disease (Sasaki, Y.; Kojima, A.; Aoki, H.; Ogikubo, Y.; Takikawa, N.; Tamur, Y., 2002). O tipo A comum em solos. O tipo A e B ocorrem no ambiente intestinal normal e no fgado de herbvoros. Todos infectam os seus hospedeiros por meio de ingesto ou infeco de feridas (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999). Como todo Clostridia, ubiquitrio, tem a propriedade de permanecer por longo perodo no solo na forma de esporos, e ao encontrar condies favorveis, prolifera rapidamente e produz toxinas (Uzal et al., 1996). O tipo A est associado com a gangrena gasosa em humanos e feridas em animais. Clostridium novyi tipo B provoca hepatite necrtica infecciosa de ovinos e caprinos, e raramente de equinos e sunos. O tipo C est relacionadssdo com osteomielite do bfalo dgua (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999).

Clostridium chauvoei:
Clostrdio tpico, que possui esporos subterminais e subcentrais. Clostridum chauvoei requer condies estritas de anaerobiose e meio rico em cistenas e vitaminas hisrossolveis. As colnias so arredondadas e com contornos suaves, atingindo tamanho de at 4 mm em dois dias. O C. chauvoei est distribudo no solo e trato intestinal dos herbvoros. A sobrevivncia do agente no solo sob a forma de esporos o fator mais significante para a transmisso aos bovinos, pois a ingesto de pastos contaminados com esporos constitui-se na principal fonte de infeco. Hemlise varivel (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999). Os esporos duram anos quando dessecados, so destrudos por fervura em 2 a 5 minutos e resistem a fenis, lcool e desinfetantes amnio quaternrios (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999). A bactria Clostridium chauvoei o agente etiolgico do carbnculo sintomtico, uma doena altamente fatal dos ruminantes e outras espcies animais, que geralmente acomete a musculatura (Sterne & Batty, 1975). Clostridium Chauvoei habita o intestino, o fgado e outros tecidos de espcies suscetveis e resistentes. Tradicionalmente, a confirmao do diagnstico dessas enfermidades baseada no cultivo e isolamento dos microrganismos envolvidos (Correa et al., 1980; Baldassi et al., 1985). Bastonetes Gram-posotivos esporulados podem ser demonstrados em esfregaos de tecidos infectados e identificados com reagentes imunofluorescentes. Msculo triturado em salina cultivado em placas de gar sangue, que so incubadas em anaerobiose. A identificao feita por imunofluorescncia ou por testes qumicos (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999).

Clostridium septicum:

Principal clostrdio em infeces de feridas de animais de fazenda. O C. septicum foi a primeira espcie do gnero Clostridium spp identificada. As clulas so curtas, robustas e pleomrficas. Em alguns exsudatos, so encontrados filamentos longos. Clostridium septicum produz DNAse, hialuronidase, neuraminidase, hemaglutinina e duas toxinas hemolticas, sendo uma delas (alfa) leucotxica, necrosante e letal. Clostridium septicum cresce em gar sangue de ruminantes sob condies anaerbias razoavelmente boas, produzindo em 48 horas colnias hemolticas de at 5mm de dimetro, com bordas semelhantes a razes e tendncia frequente de espraiamento (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999). O C. septicum produz quatro toxinas: - alfa (lecitinase) necrotizante, hemoltica e letal, - beta (dessoxiribonuclease), leucocida, - gama (hialuronidase) e - delta (hemolisina).A toxina mais importante a alfa. Ela fatal, necrotizante e tambm contm uma hemolisina oxignio estvel. A patogenia est relacionada com a produo das toxinas. A infeco denominada edema maligno, se espalha a partir do ponto da infeco em algumas horas ou dias. O msculo fica com a cor escura, desenvolvendo hemorragia, edema e necrose (Sasaki, Y.; Kojima, A.; Aoki, H.; Ogikubo, Y.; Takikawa, N.; Tamur, Y., 2002).

Clostridium haemolyticum:
Clostriidum haemolyticum assemelha-se ao C. novyi tipo B em praticamente todas as caractersticas fenotpicas. Sua toxina, a lecitinase C, apesar de idntica toxina beta de C. novyi tipo B, produzida em quantidades muito maiores (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999). O C. haemolyticum maior que os outros clostrdios invasores e apresentam-se sozinhos ou em cadeias curtas nos tecidos e no cultivo. Seu esporo oval e gera um aumento do volume da clula em que se aloja.So ativamente mveis quando jovens e Gram positivos mas logo perdem a capacidade de colorao.So bactrias hemolticas. Formam grande quantidade de H2S no meio com peptonaproteose grande quantidade de indol. negativo para a prova do VM / VP e muito exigente em suas necessidades de crescimento e multiplicao. Boas condies de anaerobiose e meios, contendo triptofano timo para o crescimento e formao da toxina (Sasaki, Y.; Kojima, A.; Aoki, H.; Ogikubo, Y.; Takikawa, N.; Tamur, Y.,2002).

Clostridium difficile:
O C. difficile reconhecido como um bacilo anaerbio obrigatrio, gram-positivo e com esporo subterminal, que faz parte da microbiota intestinal, tanto do homem como de outros animais. Esse agente produz duas toxinas denominadas toxina A (enterotoxina) e toxina B (citotoxina). Contudo, foram isoladas, em portadores humanos e animais, cepas que no produzem toxinas (Kelly, C. P., 1994) O Clostridium difficile produz duas toxinas denominadas de toxina A (enterotoxina) e toxina B (citotoxina), que possuem uma seqncia de 2710 e 2366 aminocidos e pesos moleculares de 308 e 279 kDa, respectivamente Este agente causa importante de enfermidade diarrica em seres humanos, mas o seu significado em outros animais pouco esclarecido (HIRSH, DWIGHT C.; ZEE, YUAN C., 1999).

Clostridium piliforme:
Bactrias gram-negativas em forma de bastonete e filamentosas. Sua transmisso feita atravs da ingesto de esporos do ambiente ou atravs das fezes de um animal infectado. Os esporos podem permanecer infecciosos por pelo menos um ano. O C. piliforme pode abrigar nos animais sem sinais clnicos e animais imunocompetentes eliminam a infeco dentro de algumas semanas (Percy DH, Barthold SW., 2007).

CONCLUSO Conclumos com o trabalho que o estudo dos clostrdios tem grande importncia, importncia essa que se mostrou medida que fazamos a reviso de literatura pelo grande nmero de espcies desse gnero que so patognicas e, na maioria das vezes, letais e pelo grande nmero de espcies animais que os clostrdios podem afetar, alm dos humanos.

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