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Guia NacioNal De coleta e Preservao De amostras

gua, Sedimento, ComunidadeS aqutiCaS e efluenteS lquidoS

Guia NacioNal De coleta e Preservao De amostras


gua, Sedimento, ComunidadeS aqutiCaS e efluenteS lquidoS

introduo

Repblica Federativa do Brasil Dilma Vana Rousseff Presidenta Ministrio do Meio Ambiente Izabella Mnica Vieira Teixeira Ministra Agncia Nacional de guas Diretoria Colegiada Vicente Andreu Guillo (Diretor-Presidente) Dalvino Troccoli Frana Paulo Lopes Varella Neto Joo Gilberto Lotufo Conejo Paulo Rodrigues Vieira Secretaria-Geral (SGE) Mayui Vieira Guimares Scafuto Procuradoria-Geral (PGE) Emiliano Ribeiro de Souza Corregedoria (COR) Elmar Luis Kichel Auditoria Interna (AUD ) Edmar da Costa Barros Chefia de Gabinete (GAB) Horcio da Silva Figueiredo Junior Coordenao de Articulao e Comunicao (CAC ) Antnio Flix Domingues Coordenao de Gesto Estratgica (CGE) Bruno Pagnoccheschi Superintendncia de Planejamento de Recursos Hdricos (SPR) Ney Maranho Governo do Estado de So Paulo Geraldo Alckmin Governador Secretaria do Meio Ambiente Bruno Covas Secretrio Companhia Ambiental do Estado de So Paulo Superintendncia de Gesto da Rede Hidrometeorolgica (SGH) Valdemar Santos Guimares Superintendncia de Gesto da Informao (SGI) Srgio Augusto Barbosa Superintendncia de Apoio Gesto de Recursos Hdricos (SAG ) Rodrigo Flecha Ferreira Alves Superintendncia de Implementao de Programas e Projetos (SIP) Ricardo Medeiros de Andrade Superintendncia de Regulao (SRE) Francisco Lopes Viana Superintendncia de Usos Mltiplos e Eventos Crticos (SUM) Joaquim Guedes Correa Gondim Filho Superintendncia de Fiscalizao (SFI) Flavia Gomes de Barros Superintendncia de Administrao, Finanas e Gesto de Pessoas (SAF) Lus Andr Muniz

Diretor-Presidente Otavio Okano Diretor Vice-Presidente Nelson Roberto Bugalho Diretor de Gesto Corporativa Srgio Meirelles Carvalho

Diretor de Controle e Licenciamento Ambiental Geraldo do Amaral Filho Diretor de Engenharia e Qualidade Ambiental Carlos Roberto dos Santos Diretora de Avaliao e Impacto Ambiental Ana Cristina Pasini da Costa

Guia NacioNal De coleta e Preservao De amostras

agncia nacional de guas ministrio do meio ambiente

Companhia ambiental do estado de So Paulo Secretaria de meio ambiente governo do estado de So Paulo

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gua, Sedimento, ComunidadeS aqutiCaS e efluenteS lquidoS

Braslia-df 2011

introduo

Agncia Nacional de guas ANA, 2011 Setor Policial Sul, Area 5, Quadra 3, Blocos B, L, M e T. CEP: 70.610-200, Braslia DF. PABX: (61) 2109-5400 | (61) 2109-5252 www.ana.gov.br

Companhia Ambiental do Estado de So Paulo CETESB, 2011 Av. Professor Frederico Hermann Jnior, 345, trreo, Alto de Pinheiros CEP 05.459-900 So Paulo SP www.cetesb.sp.gov.br

Equipe editorial Superviso de edio: Superintendncia de Implementao de Programas e Projetos - SIP/ANA. Banco Interamericano de Desenvolvimento - BID. Companhia Ambiental do Estado de So Paulo - CETESB. Elaborao dos originais: Companhia Ambiental do Estado de So Paulo - CETESB. Reviso dos originais: Companhia Ambiental do Estado de So Paulo - CETESB. Superintendncia de Implementao de Programas e Projetos - SIP/ANA. Produo: Athalaia Grfica e Editora. Projeto grfico / Capa / Diagramao: Eduardo Meneses Fotografias: Banco de imagens da CETESB. Tiragem: 2.000 exemplares Todos os direitos reservados. E permitida a reproduo de dados e de informaes contidos nesta publicao, desde que citada a fonte.

CAtAloGAo nA Fonte: CeDoC/BiBlioteCA


C737g Companhia Ambiental do Estado de So Paulo.

Guia nacional de coleta e preservao de amostras: gua, sedimento, comunidades aquticas e efluentes lquidos / Companhia Ambiental do Estado de So Paulo; Organizadores: Carlos Jesus Brando ... [et al.]. -- So Paulo: CETESB; Braslia: ANA, 2011. 326 p.: il. ISBN 1. gua, Monitoramento 2. gua, Coleta de amostras. 3. gua, Preservao de amostras. I. Brando, Carlos Jesus, org. II. Botelho, Marcia Janete Coelho, org. III. Sato, Maria Ins Zanoli, org. IV. Lamparelli, Marta Cond, org. V. Ttulo

CDU (2. ed.) 556.043(81)(058)

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COMPANHIA AMBIENTAL DO ESTADO DE SO PAULO CETESB

Organizadores Carlos Jesus Brando Mrcia Janete Coelho Botelho* Maria Ins Zanoli Sato Marta Cond Lamparelli Autores Adriana Castilho R. de Deus Setor de Comunidades Aquticas Cacilda J. Aiba*, Diviso de Anlises Fsico-Qumicas Carlos Jesus Brando Setor de Amostragem Carlos Ferreira Lopes Setor de Atendimento a Emergncia Carlos Roberto Fanchini Agncia Ambiental de Jundiai Dborah Arnsdorff Roubicek Setor de Toxicologia Humana e Sade Ambiental Elayse Maria Hachich Setor de Microbiologia e Parasitologia Francisco J. Ferreira Setor de Qumica Inorgnica Gilson Alves Quinglia Setor de Anlises Toxicolgicas Helena Mitiko Watanabe Setor de Comunidades Aquticas Joo Carlos Carvalho Milanelli Agncia Ambiental de Ubatuba Jos Eduardo Bevilacqua Diretoria de Avaliao de Impacto Ambiental Jlio Csar Swartel Rodrigues Setor de Avaliao de Sistema de Saneamento Luis Altivo Carvalho Alvim Setor de Hidrologia e Interpretao de Dados

Mara Elisa Pereira Salvador* Setor de Comunidades Aquticas Mrcia Janete Coelho Botelho * Setor de Comunidades Aquticas Maria do Carmo Carvalho Setor de Comunidades Aquticas Maria Ins Zanoli Sato Departamento de Anlises Ambientais Marta Cond Lamparelli Diviso de Anlises Hidrobiolgica Mnica Luisa Kuhlmann Setor de Comunidades Aquticas Neusa Akemi N. Beserra Setor de Qumica Orgnica Paulo Fernando Rodrigues Setor de guas Subterrneas e Solo Paulo Srgio Gonalves Rocha Setor de Amostragem Regis Nieto Setor de Avaliao de Sistema de Saneamento Ricardo Minon Filho* Setor de Amostragem Rita Cerqueira Ribeiro de Souza* Setor de Comunidades Aquticas Rogrio Visquetti de Santana Setor de Amostragem Rosalina Pereira de A. Arajo Setor de Ecotoxicologia Aqutica Valria Aparecida Prsperi Setor de Ecotoxicologia Aqutica Venicio Pedro Ribeiro Setor de Amostragem Vivian Baltazar Setor de Amostragem

Colaboradores Cesar Augusto Martins Roda* Setor de Amostragem Fernando de Caires Setor de Amostragem Geraldo G. J. Eysink* Setor de Comunidades Aquticas Guiomar Johnscher Fornasaro Setor de Comunidades Aquticas Marcelo Adriano de Oliveira Setor de Amostragem Meron Petro Zajac Diretoria de Avaliao de Impacto Ambiental

Nancy de Castro Stoppe* Setor de Microbiologia e Parasitologia Osvaldo Atanagildo da Silva Setor de Amostragem Renato Pizzi Rossetti Setor de Hidrologia e Interpretao de Dados

*ex-funcionrios da CETESB e suas reas de origem

AGNCIA NACIONAL DE GUAS - ANA Colaborao Tcnica Adriana de Araujo Maximiano Ana Paula Montenegro Generino Doralice Meloni Assirati Maria Cristina de S Oliveira Matos Brito Paulo Augusto Cunha Libnio

BANCO INTERAMERICANO DE DESENVOLVIMENTO - BID Apoio Fernanda Campello (consultora) Irene Guimares Altafin Janaina Borges de Pdua Goulart Rafael Porfrio Tavares (consultor)

aGraDecimeNtos
A Agncia Nacional de guas agradece a todos que contriburam para este documento, em especial: - Companhia Ambiental do Estado de So Paulo (CETESB), que com conhecimento, experincia e dedicao elaborou e revisou essa obra, e permitiu a ANA public-la para se tornar um documento tcnico de referncia nacional em apoio s aes do Programa Nacional de Avaliao de Qualidades das guas (PNQA); - ao Banco Interamericano de Desenvolvimento (BID) pelo apoio implementao do PNQA, por meio da Cooperao Tcnica ATN/OC 11.888-BR; - aos rgos de meio ambiente e de recursos hdricos e s companhias de saneamento estaduais e do Distrito Federal que se dedicaram a revisar esta obra e a contribuir com sugestes para seu aperfeioamento durante a consulta tcnica dirigida realizada pela ANA, em especial a: Alagoas: Instituto de Meio Ambiente do Estado de Alagoas (IMA); Amap: Instituto de Meio Ambiente e Ordenamento Territorial do Amap (IMAP); Bahia: Empresa Baiana de guas e Saneamento S/A (Embasa); Cear: Companhia de gua e Esgoto do Cear (CAGECE); Distrito Federal: Agncia Reguladora de guas e Saneamento do Distrito Federal (ADASA) e Companhia de Saneamento Ambiental do Distrito Federal (CAESB); Esprito Santo: Companhia Esprito Santense de Saneamento (CESAN); Mato Grosso do Sul: Instituto do Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul (IMASUL); Minas Gerais: Instituto Mineiro de Gesto das guas do Estado de Minas Gerais (IGAM) e Companhia de Saneamento de Minas Gerais (COPASA);

Paraba: Secretaria de Estado dos Recursos Hdricos, do Meio Ambiente e da Cincia e Tecnologia do Estado da Paraba (SERHMACT); Paran: Instituto Ambiental do Paran (IAP) e Secretaria de Estado de Meio Ambiente e Recursos Hdricos do Estado do Paran (SEMA); Piau: guas e Esgotos do Piau S/A (AGEPISA); Rio Grande do Norte: Instituto de Desenvolvimento Econmico e Meio Ambiente (IDEMA) e o Instituto de Gesto das guas (IGARN); Santa Catarina: Companhia Catarinense de guas e Saneamento (CASAN); Sergipe: Companhia de Saneamento de Sergipe (DESO). Aos rgos federais envolvidos, direta ou indiretamente, com aes relacionadas qualidade das guas que contriburam para o aperfeioamento dessa obra: Fundao Nacional de Sade (FUNASA); Secretaria Nacional de Saneamento Ambiental (SNSA) do Ministrio das Cidades; e Secretaria de Vigilncia em Sade (SVS) do Ministrio da Sade. A Companhia Ambiental do Estado de So Paulo registra um especial agradecimento: aos autores da publicao original do Guia de Coleta e Preservao de Amostras Ambientais editado em 1988 que lanaram a pedra fundamental para construir o novo texto desse Guia de Coleta: Azor Camargo Penteado Filho, Ben Hur Luttembarck Batalha, Denise Navas Pereira, Edmundo Garcia Agudo, Eduardo Bertoletti, Ernesto Werner Fredricksson, Guiomar Johnscher Fornasaro, Helcias Bernardo de Padua, Helga Bernhard de Souza, Ivan Ronaldo Horcel, Joo Ruocco Junior, Jos Guilherme Barreto Pires, Jos Leomax dos Santos, Jos Luiz de Guide, Maria Helena Roquetti Humayta, Maria Neuza Alves, Maria Therezinha Martins, Nilson Ney Scatigno, Paulo Tetuia Hasegawa, Petra Sanchez Sanchez, Renato Amaral, Rosa Helena de Oliveira Martins Freitas, Sebastio Gaglianone, Sergio Roberto e Vanderlei Marujo Prado; ANA que, com o apoio do BID, viabilizou a publicao deste Guia.

lista De fiGuras
Figura 1. Planejamento para a seleo de locais e posies de monitoramento Figura 2. Etapas principais para o planejamento de programas de amostragem Figura 3. Efeito da variabilidade temporal na estimativa quantitativa da concentrao de uma dada varivel: (A) Variaes aleatrias; (B) Variaes aleatrias e cclicas Figura 4. Representao esquemtica da mistura de um efluente com o rio: Vista Superior disperso lateral do efluente; Corte Lateral disperso vertical e lateral do efluente 37 32 34

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Figura 5. Variao da qualidade de um corpo dgua considerando a distncia do ponto de lanamento de descarga: (A) Local de amostragem prximo descarga; (B) Posio intermediria do local de amostragem; (C) Local de amostragem distante da descarga 43 Figura 6. Dimenses do tecido de gaze para a confeco da mecha para coleta de amostras para anlise de patgenos Figura 7. Mecha empregada na tcnica de Moore: (A) Esquema; (B) foto da mecha de gase com meio de transporte (Carry Blair) Figura 8. Esquema de replicata para clculo de incerteza da amostragem Figura 9. Balde de ao inox Figura 10. Coletor com brao retrtil: (A) Vista lateral do equipamento montado; (B) Vista do balde e do brao retrtil desmontado; (C) Vista superior do balde coletor Figura 11. Batiscafo: (A) Batiscafo fechado; (B) Esquema ilustrativo em corte do equipamento; (C) Batiscafo aberto Figura 12. Esquema de uma Garrafa de van Dorn Figura 13. Garrafa de Niskin Figura 14. Mensageiro: (A) Equipamento industrializado; (B) Mensageiro manufaturado Figura 15. Garrafa de van Dorn de fluxo vertical: (A) Garrafa desmontada; (B) Garrafa montada Figura 16. Garrafa de van Dorn de fluxo horizontal: (A) Garrafa desmontada; (B) Garrafa montada 87 Figura 17. Armadilha de Schindler-Patalas Figura 18. Rede de plncton: (A) Vista frontal da rede e copo coletor; (B) Vista lateral da rede e copo coletor 88 89 64 64 79 84 84 85 86 86 86 87

Figura 19. Copo coletor de rede de plncton: (A) Inox; (B) PVC Figura 20. Fluxmetro Figura 21. Pegador Ekman-Birge: (A) Equipamento desmontado; (B) Equipamento montado Figura 22. Pegador Ekman-Birge, modificado por Lenz: (A) Vista lateral do equipamento montado; (B) Vista frontal do equipamento fechado com fracionador de sedimento inserido Figura 23. Pegador Petersen modificado Figura 24. Pegador van Veen Figura 25. Pegador Ponar Pequeno Figura 26. Pegador Shipek - (A) Desmontado; (B) Montado Figura 27. Testemunhador modelo Kajak-Brinkhurst (K-B corer) Figura 28. Pegador Manual Figura 29. Draga Retangular Figura 30. Delimitador Surber Figura 31. Delimitador Hess-Canton Figura. 32. Detalhe do delimitador para estimativa da porcentagem de cobertura de comunidades de costo rochoso Figura 33. Dimenses do delimitador Figura 34. Mquina fotogrfica montada com lente close-up, suporte com delimitador de enquadramento e flashes

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Figura 35. Detalhe do delimitador para estimativa da estrutura espacial de comunidades de costo rochoso, indicando suas respectivas dimenses em centmetros 105 Figura 36. Medidor de declive de praia Figura 37. Rede Manual Figura 38. Substrato artificial do tipo cesto preenchido com pedra de brita Figura 39. Substrato artificial do tipo flutuador, com lminas de vidro: (A) Vista superior do flutuador; (B) Vista do flutuador instalado prximo margem Figura 40. Substrato artificial do tipo flutuador, com lminas de vidro: Detalhe do fio nilon de sustentao do flutuador Figura 41. Perifitmetro com escova -VIS, 1997, modificado Figura 42. Rede de espera de superfcie 105 106 108 109 110 111 121

Figura 43. Rede de espera armada Figura 44. Retirada da rede de espera Figura 45. Rede de espera ancorada no fundo Figura 46. Exemplos de espinhis Figura 47. Canio ou vara de pesca Figura 48. Curral Figura 49. Cesto ou canastra Figura 50. Cesto ou canastra

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Figura 51. Diferentes armadilhas Tipo Covo: (A) Armadilha de forma cilndrica; (B) Armadilha para pesca da lagosta; (C) Armadilha para peixes de pequeno porte em rios 127 Figura 52. Rede de arrasto manual: (A) Foto da rede de arrasto manual em operao; (B) Esquema da rede de arrasto manual Figura 53. Rede de arrasto por embarcao Figura 54. Rede de arrasto manual do tipo saco: A) Foto da rede de arrasto manual tipo saco em operao; (B) Esquema do detalhe do saco Figura 55. Tarrafa: (A) Tarrafa em uso; (B) Vista superior da tarrafa Figura 56. Pu: (A) Vista lateral (Foto: Adriana C. C. R. de Deus); (B) Equipamento em uso Figura 57. Pesca eltrica com aparelhagem do tipo mvel (mochila) Figura 58. Localizao genrica de pontos de coleta de gua superficial em grandes cursos de gua Figura 59. Coleta de amostras de gua superficial: (A) Disposio dos frascos com identificao; (B) Distribuio da amostra em todos os frascos; (C) Frascos preechidos com amostra Figura 60. Coleta de amostras de gua superficial para anlise de OD: (A) Batiscafo; (B) Fechamento do frasco Figura 61. Procedimento de preservao de amostra: (A) Adio de cido ntrico 1+1 para preservao de metais pesados; (B) Adio de acetato de zinco para preservao de sulfeto Figura 62. Coleta de amostra em profundidade com garrafa de van Dorn de Fluxo Vertical Figura 63. Filtrao em campo de amostra para metais dissolvidos Figura 64. Coleta de amostra com balde de ao inox para Teste de Ames 128 129 129 130 130 131 134

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Figura 65. Coleta de amostra de gua superficial para anlise microbiolgica: (A) com balde de ao inox; (B) diretamente do corpo dgua Figura 66. Acondicionamento e transporte de amostras para anlises microbiolgicas em caixa trmica sob refrigerao

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Figura 67. Coleta de amostra de gua recreacional (mar) para anlise microbiolgica 149 Figura 68. Sistema Porta Filtro para Filtrao de Amostras para Ensaio de Clorofila a e Feofitina a em Laboratrio Figura 69. Sistema Porta Filtro para Filtrao de Amostras para Ensaio de Clorofila a e Feofitina a em Campo Figura 70. Bomba de Vcuo Manual para campo Figura 71. Bomba de Vcuo Eltrica para campo Figura 72. Florao ou Bloom de Cianobactrias no Reservatrio Billings So Paulo-SP: (A) Proliferao excessiva de algas e cianobactrias; (B) Disco de Secchi recoberto por algas e cianobactrias Figura 73. Seleo de substrato Figura 74. Detalhe da seleo de ramos e folhas Figura 75. Cortes dos ramos e folhas selecionadas Figura 76. Seleo de ramos e folhas - Material coletado na bandeja com o lado a ser raspado para cima Figura 77. Raspagem do substrato com pincel macio Figura 78. Desenho manual das folhas e ramos Figura 79. Paqumetro utilizado para medida do comprimento e dimetro dos ramos e tamanho das folhas Figura 80. Medida do dimetro dos ramos 155 155 156 156

157 164 165 165 165 166 166 167 167

Figura 81. Coleta de amostras para Perifton com perifitmetro com escova, modificado por VIS: (A) Introduo do amostrador no local selecionado, (B) Retirada do perifiton com a escova; (C) Bombeamento da gua e perifiton raspado e preenchimento do frasco 168 Figura 82. Coleta de amostras para Perifton. (A) Flutuador de Lminas de vidro; (B) Retirada do Flutuador de Lminas de vidro 170

Figura 83: Coleta de amostras de zooplncton com armadilha de Schindler-Patalas (A) Equipamento posicionado para descida; (B) Equipamento iado aps coleta, (C) Amostra sendo filtrada, (D) Desconexo do copo coletor, (E) Transferncia da amostra retida no copo coletor para o frasco, (F) Lavagem externa do copo coletor para a retirada de material aderido nas paredes 176

Figura 84. Esquema de um sistema de produo e distribuio de gua. Fluxo operacional: (1) Manancial de abastecimento; (2) Aplicao de produtos qumicos; (3) Sistema de Floculao; (4) Sistema de decantao; (5) Sistema de filtrao; (6) Aplicao de cloro, flor e cal; (7) Reservatrio da ETA; (8) Reservatrio elevado; (9) Rede de distribuio 209 Figura 85. Torneiras localizadas no laboratrio da ETA para controle das etapas do processo de tratamento Figura 86. Coleta de amostra na torneira, aps o hidrmetro Figura 87. Coleta de amostra na torneira do jardim, aps hidrmetro
Figura 88. Coleta de amostras em reservatrio com balde e corda estreis: (A) Balde estril, (B) Balde e corda estril em procedimento de coleta

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Figura 89. Vista interna do container de uma Estao Automtica de Monitoramento: (A) Em primeiro plano o amostrador automtico refrigerado e, ao fundo, o gabinete onde esto instalados o CLP e os medidores de pH, OD, temperatura e condutividade eltrica; (B) Turbidmetro Figura 90. Vista da Estao Automtica de Monitoramento Rasgo, localizada no rio Tiet em Pirapora do Bom Jesus SP: (A) Vista da estrutura metlica flutuante que suporta a bomba de recalque; (B) Container figura 91. Rguas Limnimtricas Figura 92. Molinete Hidromtrico Figura 93. Minimolinete Hidromtrico Figura 94. Micromolinete Hidromtrico Figura 95. Guincho Hidromtrico Figura 96. Perfilador Acstico de Corrente por Efeito Doppler ou ADCP Figura 97. Calha Parshall: (A) Vista superior em corte de uma calha Parshall; (B) Vista lateral em corte longitudinal de uma calha Parshall Figura 98. Vertedores de parede delgada: (A) Soleira delgada; (B) Soleira espessa Figura 99. Vertedores de parede delgada: (A) Vertedouro retangular e clculo da vazo; (B) Vertedouro trapezoidal e clculo da vazo; (C) Vetedouro triangular ou em V e clculo da vazo Figura 100. Caixa de tranquilizao com vertedor interno Figura 101. Caixa de tranquilizao corte longitudinal Figura 102. Medidor Venturi Figura 103. Bocais e orifcios para medio de vazo Figura 104. Tubo de Pitot

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Figura 105. Medidor Magntico Figura 106. Rotmetro Figura 107. Mtodo das Coordenadas Geomtricas do Jato: (A) Vista em corte longitudinal do tubo; (B) Detalhe do corte frontal do tubo 277 Figura 108. Aplicao do Mtodo das Coordenadas Geomtricas do Jato a canalizaes inclinadas Figura 109. Mtodo Califrnia: (A) Detalhe do corte frontal do tubo; (B) Vista em corte longitudinal do tubo Figura 110. Mtodo Califrnia para condutos inclinados Figura 111. Mtodo Califrnia Modificado: (A) Tubo horizontal; (B) Tubo inclinado

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lista De tabelas
Tabela 1. Comparao entre recipientes de vidro (borossilicato) e polietileno, polipropileno ou outro polmero inerte. Tabela 2. Resumo dos controles de qualidade requeridos para amostragem Tabela 3. Principais caractersticas de alguns amostradores de sedimento, comunidades bentnicas e perifticas Tabela 4. Classificao do zooplncton em funo do tamanho dos organismos Tabela 5. Recomendaes para a seleo do equipamento de coleta de zooplncton em diferentes ambientes. Tabela 6. Caractersticas principais dos estudos passivos e ativos e determinao de biomassa de macrfitas aquticas Tabela 7. Metodologia de amostragem de declive e perfil de praias. Tabela 8. Caracterizao Tpica para Efluentes Industriais Tabela 9. Distncia recomendada entre verticais

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ANEXOS Tabela A1. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios fsico-qumicos inorgnicos - gua e Sedimento 291 Tabela A2. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de compostos qumicos orgnicos gua e Sedimento Tabela A3. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de cianobactrias e cianotoxina Tabela A4. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios ecotoxicolgicos com organismos aquticos gua e Sedimento 295 300 301

Tabela A5. Armazenamento e preservao de amostras para testes de toxicidade aguda com bactrias luminescentes Vibrio fischeri (Microtox) gua e Sedimento 303 Tabela A6. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de mutagenicidade (Salmonella/microssoma) gua e Sedimento Tabela A7. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios microbiolgicos - gua e Sedimento 304 305

Tabela A8. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de clorofila a e feofitina a gua bruta Tabela A9. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de fitoplncton gua Tabela A10. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de perifton Tabela A11. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de zooplncton Tabela A12. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios com macrfitas Tabela A13. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios com bentos Tabela A14. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de ncton (peixes)

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Prefcio
Entre os desafios da rea ambiental do Pas, o conhecimento sobre a qualidade das guas est entre os mais relevantes e emblemticos. Informaes esparsas ou inexistentes, ausncia de redes de monitoramento adequadas em termos de frequncia, parmetros e representatividade em nmero de pontos de amostragem dificultam um diagnstico mais preciso sobre a realidade da condio da qualidade dos corpos hdricos brasileiros. O Programa Nacional de Avaliao da Qualidade das guas (PNQA) surge da percepo de que a gesto integrada dos recursos hdricos requer sistemtico monitoramento tanto da quantidade quanto da qualidade das guas, para contribuir com os objetivos de uma economia em base ambientalmente sustentvel e socialmente justa. O PNQA um Programa de parcerias, que envolve, alm da ANA, outras instituies relacionadas ao monitoramento de qualidade das guas, especialmente os rgos estaduais de recursos hdricos e de meio ambiente, as companhias de saneamento e as concessionrias de empreendimentos hidreltricos. O objetivo central do PNQA prover sociedade um conhecimento adequado sobre a qualidade das guas superficiais brasileiras, de forma a subsidiar os tomadores de deciso, contribuindo, assim, com a gesto sustentvel dos recursos hdricos. Com isso, o PNQA pretende qualificar a atuao dos estados e da ANA. Seus objetivos especficos so: eliminar as lacunas geogrficas e temporais no monitoramento de Qualidade de gua no Brasil; aumentar a confiabilidade das informaes geradas sobre qualidade de gua; tornar os dados e as informaes de qualidade de gua comparveis em mbito nacional; e avaliar, divulgar e disponibilizar sociedade as informaes de qualidade de gua. O PNQA est estruturado em quatro componentes: a) Elaborao e Implementao de uma Rede Nacional de Monitoramento de Qualidade das guas; b) Padronizao de Parmetros e de Procedimen-

tos referentes coleta, preservao e anlise de qualidade de gua; c) Certificao e Aprimoramento de Laboratrios e Capacitao dos Profissionais envolvidos no Monitoramento de Qualidade de gua; e d) Avaliao e Divulgao das Informaes sobre Qualidade de gua em mbito nacional, disponvel a toda a sociedade em portal na internet. A proposta desse Guia Nacional de Coleta e Preservao de Amostras de gua, Sedimento, Comunidades Aquticas e Efluentes Lquidos se insere no escopo da componente de Padronizao do PNQA, iniciativa essa concretizada por meio do Acordo de Cooperao Tcnica n 006/2010 celebrado entre a ANA e o Estado de So Paulo, por intermdio da Companhia Ambiental do Estado de So Paulo (CETESB), e do apoio do Banco Interamericano de Desenvolvimento (BID) por meio da Cooperao n ATN OC-11.888-BR Com a concluso desse Guia, e a Resoluo ANA n 724, de 3 de outubro de 2011, publicada no Dirio Oficial da Unio n 201, em 19 de outubro de 2011, esta Agncia contribui para a qualificao tcnica e a harmonizao dos procedimentos de coleta e preservao de amostras de guas entre os diversos atores que operam no monitoramento da qualidade dos recursos hdricos brasileiros, facilitando a comparao e anlise conjunta dos dados de monitoramento e o aprimoramento dos diagnsticos de qualidade das guas superficiais no Brasil como subsdio gesto integrada de recursos hdricos. VICENTE ANDREU GUILLO Diretor Presidente Agncia Nacional de guas

Prefcio
Nos seus 50 anos de atividade, o Banco Interamericano de Desenvolvimento (BID) acumulou experincia valiosa em diversas reas de atuao, tanto no Brasil como nos demais pases da Regio. O mandato do BID em apoio aos esforos de desenvolvimento dos pases da Amrica Latina e Caribe bastante amplo e sua estratgia se baseia em dois pilares sobre os quais se constroi o desenvolvimento da Regio nas prximas dcadas: a reduo da pobreza e da desigualdade; e o crescimento econmico e social sustentado e ambientalmente sustentvel. A gesto adequada dos recursos hdricos e a garantia do acesso gua toda populao so requisitos essenciais para que se promova o desenvolvimento calcado nesses dois pilares. No tema da gua, o BID tem se mostrado um parceiro importante do Brasil, no s pelo seu carter pioneiro na implantao de programas de saneamento ambiental e de programas sociambientais integrados, como tambm no apoio implantao da legislao vigente na rea do abastecimento de gua, esgotamento sanitrio, drenagem urbana e gesto de resduos slidos. Com respeito gesto dos recursos hdricos, o BID junta-se Agncia Nacional de guas (ANA) em uma cooperao voltada ao apoio ao Programa Nacional de Avaliao da Qualidade das guas PNQA, que ir prover a sociedade brasileira do conhecimento sobre a qualidade das guas superficiais e subsidiar os orgos governamentais, nas diversas esferas, na elaborao de polticas pblicas.

A publicao do Guia Nacional de Coleta e Preservao de Amostras de gua, Sedimento, Comunidades Aquticas e Efluentes Lquidos, elaborado pela CETESB em conjunto com a ANA faz parte desta parceria, que inclui, tambm, a produo de um vdeo que demonstra os procedimentos constantes no Manual e a elaborao do Panorama da Qualidade das guas Superficiais do Brasil 2010. O BID se orgulha em participar de uma iniciativa to relevante para o Pas no tema de recursos hdricos. Fernando Carrillo-Flrez Representante do BID no Brasil

aPreseNtao
O monitoramento e o diagnstico da qualidade ambiental, bem como as aes de fiscalizao, envolvem a medida de uma ou mais variveis, cujos resultados sero utilizados para avaliar as condies de um ambiente e dar subsdios para a tomada de medidas preventivas e corretivas, com base na legislao existente. Nesse sentido, os objetivos do trabalho, as estratgias de amostragem e os mtodos de anlises a serem empregados, devem ser criteriosamente definidos para se obter resultados robustos. A etapa de amostragem crucial nesse processo, pois o material coletado deve representar de forma fidedigna o local amostrado. A seleo criteriosa dos pontos de amostragem e a escolha de tcnicas adequadas de coleta e preservao de amostras so primordiais para a confiabilidade e representatividade dos dados gerados. A CETESB sempre esteve na vanguarda desse tema, atenta importncia dos programas e processos de amostragem dentro de suas atividades, de tal forma que em 1988 publicou o Guia de Coleta e Preservao de Amostras de gua, o qual tem sido extensivamente utilizado, no s no Estado de So Paulo, mas em todo o pas, sendo ainda hoje referncia em nvel nacional. Considerando a necessidade de acompanhar a evoluo analtica, com tcnicas de ponta e limites de quantificao cada vez menores que requerem a inovao tambm das tcnicas de coleta e o avano da utilizao de novas variveis biolgicas e toxicolgicas na rea ambiental, os tcnicos da CETESB sentiram a necessidade de trabalhar em um novo Guia de Coleta no intuito de trazer para os profissionais das reas de meio ambiente, saneamento, sade, recursos hdricos e pblico interessado a sua experincia e conhecimento adquiridos nesses nos ltimos 23 anos de atividades.

Nesse processo a CETESB encontrou a parceria da Agncia Nacional de guas para a publicao desse Guia Nacional de Coleta de Amostras de gua, Sedimento, Comunidades Aquticas e Efluentes Industriais, o qual engloba dez captulos onde esto especificados os procedimentos detalhados para a coleta de amostras de gua superficial, sedimento, comunidades aquticas e efluentes industriais, para as mais diversas variveis, baseados em metodologias padronizadas e de referncia nacional e internacional, mas tambm traduz a gesto do conhecimento do corpo tcnico da CETESB, adquirido na prtica diria e no processo de implantao de um Sistema de Qualidade dessas atividades. A edio deste Guia em conjunto com a ANA, torna acessvel a experincia da CETESB aos rgos pblicos e empresas privadas de todo o pas , provendo protocolos consistentes de amostragem de campo. Os trs primeiros captulos, assim como no Guia de Coleta de 1988, trazem os conceitos bsicos necessrios ao planejameno de um programa de amostragem e organizao do trabalho de campo. O captulo quatro traz os requisitos do controle de qualidade analtica no processo de amostragem, essencial para a rastreabilidades dos resultados analticos. O captulo cinco traz de forma detalhada as especificaes dos equipamentos requeridos para amostragem. Os captulos seis, sete e oito trazem os procedimentos para coleta de guas superficiais, gua de consumo humano, sedimento e efluentes industriais. O captulo nove destaca os procedimentos para os ensaios de campo, bem como medidores e amostradores automticos, cada vez mais importante nos programas de monitoramento. O captulo dez aborda os mtodos de medio de vazo, considerando a importncia da interpretao conjunta dos dados de quantidade (vazo) e qualidade ambiental. O ltimo captulo traz a bibliografia consultada na elaborao desse Guia O Guia apresenta tambm trs Anexos, o primeiro (Anexo I) traz informaes relativas s frascarias empregadas na coleta e os procedimentos para armazenamento e preservao de amostras, detalhados por ensaio, o segundo (Anexo II) apresenta um glossrio com as terminologias mais frequentemente empregadas na rea e o terceiro (Anexo III) traz a Resoluo ANA n 724/2011 que aprova este Guia como documento de referncia nacional para o monitoramento da qualidade das guas.

Apensado a esta obra encontra-se um DVD com vdeos que demonstram os procedimentos de coleta e preservao de amostras de gua destinadas anlise dos parmetros que compem a Rede Nacional de Avaliao da Qualidade das guas, integrante do Programa Nacional de Avaliao da Qualidade das guas PNQA. A adoo desse Guia pela Agncia Nacional de guas como referncia para os procedimentos de coleta dentro de seu campo de atuao demonstra a responsabilidade da CETESB na sua misso institucional de transferncia de tecnologia ambiental, colaborando para o desenvolvimento cientfico e tecnolgico do pas. Eng. OTVIO OKANO Diretor Presidente da CETESB

sumrio

1 INTRODUO 2 PLANEJAMENTO DE AMOSTRAGEM


2.1 Definio do Programa de Amostragem 2.1.1 Usos do Corpo dgua 2.1.2 Natureza da Amostra 2.1.3 Parmetros de Caracterizao da rea de Estudo 2.1.4 Informaes sobre a rea de Influncia 2.1.5 Local e Pontos de Coleta 2.1.5.1 gua Bruta 2.1.5.2 gua Tratada 2.1.5.3 Sedimento 2.1.5.4 Efluentes Lquidos e Corpos Hdricos Receptores 2.1.6 Apoio Operacional 2.1.7 Capacidade Analtica Laboratorial 2.1.8 Recursos Financeiros e Humanos

31 35
35 35 36 36 39 40 40 43 44 46 46 46 47

3 ORGANIZAO DOS TRABALHOS DE CAMPO


3.1 Planejamento das atividades 3.2 Coleta e Preservao de Amostras 3.2.1 Coleta e Tipos de Amostras 3.2.2 Preservao de amostra 3.3 Acondicionamento, Transporte e Armazenamento de Amostras 3.3.1 Acondicionamento 3.3.1.1 Tipos de Recipientes 3.3.1.2 Limpeza e Preparo de Recipientes 3.3.2 Transporte e Armazenamento 3.4 Segurana nos Trabalhos de Campo 3.4.1 Transporte Rodovirio 3.4.2 Acesso aos Pontos de Amostragem 3.4.3 Embarcaes 3.4.4 Manipulao de Reagentes e Solues 3.4.5 Amostras de Efluentes (industriais e domsticos) e Resduos Slidos

49
49 51 51 54 56 56 56 58 65 65 66 66 67 68 68

3.5 Preparo de Solues e Reagentes 3.5.1 Formol Neutralizado 3.5.2 Formol Neutralizado, com Sacarose 3.5.3 Meio de Transporte Cary e Blair (Tcnica de Moore) 3.5.4 Soluo de Acetato de Zinco (Zn (C2H3O2)2) 2M 3.5.5 Soluo de cido Clordrico (HCl) 1+9 (10%) 3.5.6 Soluo de cido Clordrico (HCl) 1+1 (50%) 3.5.7 Soluo de cido Ntrico (HNO3) 1+9 (10%) 3.5.8 Soluo de cido Ntrico (HNO3) 1+1 (50%) 3.5.9 Soluo de cido Sulfrico (H2SO4) 1+1 (50%) 3.5.10 Soluo de cido Sulfrico (H2SO4) 1+9 (10%) 3.5.11 Soluo de cido Sulfrico (H2SO4) / cido Ntrico (HNO3) 10% (6+1) 3.5.12 Soluo Alcali-Iodeto-Azida 3.5.13 Soluo de lcool 70 GL 3.5.14 Soluo de Carbonato de Magnsio (MgCO3) 1% 3.5.15 Soluo de Cloreto de Clcio Dihidratado (CaCl2.2H2O) 1% 3.5.16 Soluo de Corante Rosa-de-bengala 0,1% 3.5.17 Soluo de Detergente Alcalino 0,1 % 3.5.18 Soluo de Detergente Enzimtico 0,5 % 3.5.19 Soluo de EDTA (C10H16N2O8) 15% 3.5.20 Soluo de Formol 4% 3.5.21 Soluo de Formol 5% 3.5.22 Soluo de Formol 10% 3.5.23 Soluo de Formol 20% 3.5.24 Soluo de Fluoreto de Potssio 20% 3.5.25 Soluo de Hidrxido de Sdio (NaOH) 10M 3.5.26 Soluo de Amido 3.5.27 Soluo de Lugol (iodo ressublimado e iodeto de potssio - KI) 3.5.28 Soluo Metanol/Amnio (50+1 v/v) 3.5.29 Soluo de Sulfato Manganoso 2,14 M 3.5.30 Soluo de Tiossulfato de Sdio (Na2S2O3) 0,0125 N padronizada 3.5.31 Soluo de Tiossulfato de Sdio (Na2S2O3) 3% 3.5.32 Soluo de Tiossulfato de Sdio (Na2S2O3) 10% 3.5.33 Soluo Transeau

69 69 69 69 70 70 70 70 70 71 71 71 71 71 71 72 72 72 72 72 72 72 72 73 73 73 73 73 73 73 74 74 74 74

4 CONTROLE DE QUALIDADE NA AMOSTRAGEM


4.1 Brancos 4.1.1 Branco de Campo e de Viagem 4.1.2 Branco de Equipamentos 4.1.3 Branco de Frascaria 4.1.4 Branco de Sistema de Filtrao 4.2 duplicata de Campo 4.3 temperatura de transporte e armazenamento 4.4 incerteza da amostragem

75
76 76 76 77 77 78 78 79

5 EQUIPAMENTOS DE AMOSTRAGEM
5.1 Amostradores de Superfcie 5.1.1 Balde de Ao Inox 5.1.2 Coletor com Brao Retrtil 5.1.3 Batiscafo 5.2 Amostradores de Profundidade (coluna dgua) 5.2.1 Garrafas de van Dorn e de Niskin 5.2.2 Armadilha de Schindler-Patalas (Trampa) 5.2.3 Bomba de gua 5.2.4 Redes de Plncton 5.3 Amostradores de Fundo 5.3.1 Pegador de Ekman-Birge 5.3.2 Pegador Petersen e van Veen 5.3.3 Pegador Ponar 5.3.4 Pegador Shipek 5.3.5 Amostrador em Tubo ou Testemunhador 5.3.6 Draga Retangular 5.3.7 Delimitadores 5.3.8 Rede Manual 5.4 Substrato Artificial 5.4.1 Cestos com Pedras (Zoobentos) 5.4.2 Flutuador com Lminas (Perifiton) 5.5 Substrato Natural 5.6 Amostradores de Ncton 5.6.1 Aparelhos de Pesca Passivos 5.6.2 Aparelhos de Pesca Ativos 5.6.3 Manuteno e Cuidados com os Equipamentos de Pesca

83
83 83 84 85 85 85 87 88 88 91 91 94 96 97 98 100 101 106 107 107 109 110 120 120 128 131

6 AMOSTRAGEM DE GUA BRUTA E SEDIMENTOS


6.1 Coleta e Preservao de Amostras para Ensaios em gua Bruta 6.1.1 Qumicos (exceto metais dissolvidos) 6.1.2 Metais Dissolvidos 6.1.3 Ecotoxicolgicos 6.1.4 Mutagenicidade com Salmonella/Microssoma (Teste de Ames) 6.1.5 Microbiolgicos 6.1.6 Balneabilidade de Praias 6.1.7 Comunidades Biolgicas 6.1.7.1 Pigmentos Fotossintetizantes (Clorofila a e Feofitina a) 6.1.7.2 Comunidade Fitoplanctnica 6.1.7.3 Comunidade Periftica 6.1.7.4 Comunidade Zooplanctnica 6.1.7.5 Macrfitas Aquticas 6.1.7.6 Comunidade Bentnica de gua Doce 6.1.7.7 Comunidade Bentnica Marinha 6.1.7.8 Comunidade Nectnica 6.2 Ensaios de Contaminantes e Nutrientes em Sedimentos

133
136 136 139 140 142 143 147 149 151 157 161 171 180 184 189 198 204

7 AMOSTRAGEM DE GUAS PARA ABASTECIMENTO PBLICO 209


7.1 Vigilncia da qualidade da gua para consumo humano 7.2 Coleta em Estao de Tratamento de gua (eta) 7.3 Coleta em Sistemas de Distribuio 7.3.1 Procedimentos de coleta na rede de distribuio 7.3.2 Procedimentos de coleta em reservatrio domiciliar 7.4 Procedimentos de Coleta em Solues Alternativa Coletiva de Abastecimento de gua 7.4.1 Poos Freticos e Profundos Equipados com Bomba 7.4.2 Poos Freticos Sem Bomba 210 211 212 214 215 216 216 216

8 AMOSTRAGEM DE EFLUENTES LQUIDOS


8.1 Caractersticas dos Efluentes Lquidos 8.1.1 Efluentes Industriais 8.1.2 Efluentes Mistos (Industriais e Domsticos) 8.1.3 Efluentes Gerados em Plantas de Incinerao de Resduos Slidos Industriais ou Hospitalares 8.1.4 Efluentes Percolados Gerados em Aterros Industriais e Sanitrios 8.2 Planejamento da Amostragem de Efluentes Lquidos 8.2.1 Local e Pontos de Amostragem 8.2.2 Tipos de Amostragem 8.2.3 Seleo dos Ensaios a Serem Realizados 8.2.4 Avaliao do Desempenho do STAR 8.2.5 Elaborao de Projeto de STAR 8.2.6 Atendimento aos Padres da Legislao

219
220 220 225 225 226 227 227 228 231 238 238 239

9 ENSAIOS EM CAMPO
9.1 9.2 9.3 9.4 9.5 9.6 9.7 9.8 9.9 9.10 9.11 Cloro Residual - Mtodo DPD oxignio dissolvido - mtodo eletromtrico Oxignio Dissolvido - Mtodo Winkler Modificado pela Azida Sdica Condutividade e Salinidade pH - Potencial Hidrogeninico - Mtodo Eletromtrico Potencial Redox - Eh ou ORP - Mtodo Eletromtrico temperatura da gua e ar transparncia Turbidez - Mtodo Nefelomtrico Slidos Sedimentveis - Cone Imhoff Medidores e Amostradores Automticos 9.11.1 Monitoramento Automtico da Qualidade das guas

241
241 242 243 245 246 247 248 248 248 249 250 251

10 MEDIO DE VAZO
10.1 Medio de Vazo em Canais Abertos 10.1.1 Mtodo Volumtrico 10.1.2 Medio com Flutuadores 10.1.3 Mtodo Convencional com Molinete Hidromtrico 10.1.4 Mtodo Acstico 10.1.5 Mtodo do Traador 10.1.6 Medio com Dispositivos de Geometria Regular 10.2 Medio de Vazo com Dispositivos Instalados em Tubos 10.2.1 Medidor Venturi 10.2.2 Medio com Bocais e Orifcios 10.2.3 Tubo de Pitot 10.2.4 Medidor Magntico 10.2.5 Rotmetro 10.3 Medio de Vazo em Tubos com Descarga Livre 10.3.1 Mtodo das Coordenadas Geomtricas do Jato 10.3.2 Mtodo Califrnia

257
258 259 259 260 265 266 268 272 272 273 274 275 276 277 277 278

11 BIBLIOGRAFIA ANEXOS
ANExO 1 PROCEDIMENTOS PARA O ARMAZENAMENTO E PRESERVAO DE AMOSTRAS POR ENSAIO ANExO 2 GLOSSRIO ANExO 3 RESOLuO ANA N 724/2011

281

289 315 323

capTUlO

1 INTRODUO
A presente publicao rene o conhecimento tcnico para realizao de coleta e preservao de amostras de guas brutas, tratadas, residurias, sedimentos e biota aqutica, visando fiscalizao, controle e a caracterizao da qualidade ambiental. A coleta e preservao de amostras infelizmente ainda so consideradas como atividades simples, que no exigem qualquer critrio ou conhecimento cientifico. Essa percepo completamente falha, porque uma amostra, por definio, representa o prprio ambiente estudado e, assim, a sua coleta exige profundo conhecimento tcnico e cientfico, o que significa contar com recursos humanos altamente treinados e capacitados para desenvolverem as atividades em campo. A definio dos usos previstos para o corpo dgua, o conhecimento dos riscos sade da populao, os danos aos ecossistemas, a toxicidade das substncias qumicas, os processos industriais e as medidas de vazo, somam algumas das informaes bsicas necessrias para se definirem as tcnicas e as metodologias de coleta que sero utilizadas, a definio dos locais de amostragem e a seleo de parmetros que sero analisados. Sem isso, qualquer programa para avaliar a qualidade ambiental pode gerar dados no representativos sobre a rea de estudo. Na escolha do local adequado para o programa de amostragem importante considerar que a qualidade de um corpo dgua varia conforme o local (espacial) e o decorrer do tempo (temporal). Para garantir a homogeneidade e representatividade do local de amostragem proposto, as aes a serem tomadas devem ser cuidadosamente planejadas, como detalhado na Figura 1.

introduo

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conhecer os objetivos do programa

levantar os dados existentes na rea de influncia a ser estudada e proceder a um reconhecimento da mesma

selecionar possveis locais de amostragem, examinando a homogeneidade espacial e temporal

local homogneo

local no homogneo

selecionar locais alternativos

no se obtendo locais alternativos, definir diferentes pontos de coleta no mesmo local

verificar se o programa economicamente vivel

elaborar plano de amostragem

iniciar o programa de amostragem e anlises

Figura 1. planejamento para a seleo de locais e posies de monitoramento

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Guia NacioNal De coleta e Preservao De amostras

Portanto, o objetivo da amostragem e dos ensaios no a obteno de informaes sobre alquotas em si, geralmente constitudas de pequenas fraes, mas a caracterizao espacial e temporal do corpo dgua amostrado. Deve-se ter sempre presente que o tempo e os custos envolvidos se elevam sensivelmente, medida que se exijam informaes mais detalhadas que possam implicar no aumento do nmero de parmetros de avaliao, nmero de amostras, frequncia de amostragem, ou utilizao de tecnologia mais avanada. Para evitar que os custos da caracterizao da gua ultrapassem os benefcios que dela advm, deve-se planejar cuidadosamente todas as etapas do programa de amostragem conforme mostra a Figura 2.

introduo

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definio clara dos objetivos

seleo dos parmetros e locais de amostragem

seleo do nmero de amostras e tempo de amostragem

seleo dos mtodos analticos

seleo dos eQuipamentos e mtodos de coleta e preservao de amostras

plano de amostragem

reavaliao da metodologia e interpretao de dados

Figura 2. etapas principais para o planejamento de programas de amostragem.

Este guia traduz a experincia da CETESB na coleta e preservao de amostras, apresentando critrios e metodologias internacionalmente conhecidas para ensaios fsico-qumicos, microbiolgicos, biolgicos e toxicolgicos. Determinadas tcnicas de hidrometria tambm foram includas, pois permitem a determinao das cargas poluidoras e, por isso, representam uma importante contribuio para o planejamento e execuo da amostragem ambiental.

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Guia NacioNal De coleta e Preservao De amostras

cAPTuLO

2 PLANEJAMENTO DE AMOSTRAGEM
A caracterizao de um ecossistema aqutico uma tarefa complexa e envolve grande nmero de variveis, o que pode conduzir elaborao de programas de amostragem com extenso e recursos super dimensionados e uma relao custo/beneficio inadequada. Estabelecer um plano de amostragem apenas uma das etapas necessrias caracterizao do meio a ser estudado, mas dele dependem todas as etapas subsequentes: ensaios laboratoriais, interpretao de dados, elaborao de relatrios e tomada de decises quanto qualidade desses ambientes. Os responsveis pela programao, bem como os tcnicos envolvidos na execuo dos trabalhos de coleta, devem estar totalmente familiarizados com os objetivos, metodologias e limitaes dos programas de amostragem, pois as observaes e dados gerados em campo ajudam a interpretar os resultados analticos, esclarecendo eventualmente dados no-conformes.

2.1 Definio do Programa de Amostragem


A definio do programa de coleta de amostras exige a considerao de algumas variveis, tais como: usos, natureza, rea de influncia e caractersticas da rea de estudo, pois a definio da metodologia de coleta, preservao de amostras e dos mtodos analticos depende desses fatores.

2.1.1 Usos do Corpo dgua


A caracterizao deve considerar o(s) uso(s) preponderante(s) do corpo dgua, como: (a) consumo humano, (b) preservao da vida aqutica; (c) irrigao e dessedentao de animais; (d) abastecimento industrial; (e) recreao entre outros.

planejamento de amostragem

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2.1.2 Natureza da Amostra


As amostras podem ser coletadas em guas classificadas como bruta, tratada ou residuria; superficial ou subterrnea; interior ou costeira; doce, salobra ou salina. A natureza do corpo dgua determinante para o planejamento e coleta da biota aqutica e do sedimento de fundo.

2.1.3 Parmetros de Caracterizao da rea de Estudo


Atualmente dispe-se de centenas de variveis ou determinantes que podem ser empregados para caracterizar um corpo de gua, envolvendo parmetros fsicos, qumicos, microbiolgicos, biolgicos, toxicolgicos e radiolgicos. Esses parmetros devem ser definidos com o conhecimento adequado do seu significado, abrangncia, limitaes, confiabilidade, referncias para comparaes e custos para sua obteno. As combinaes entre essas variveis no permitem formular planos padres. Cada caso deve ser estudado individualmente, sendo que os parmetros e critrios mais empregados incluem os estabelecidos na legislao vigente. A formulao dos programas requer ainda definies relativas aos seguintes fatores: Variabilidade espacial: de maneira geral, os corpos de gua superficiais apresentam variaes quanto s concentraes dos seus constituintes nos diferentes pontos de uma seo transversal, bem como ao longo do eixo longitudinal de deslocamento. H ainda uma variao no eixo vertical, a qual mais pronunciada em corpos dgua mais profundos. Variao temporal: A concentrao dos constituintes de um corpo dgua pode ainda variar ao longo do tempo, num mesmo ponto, de forma aleatria ou cclica em funo das caractersticas das contribuies recebidas ou das variveis meteorolgicas. Em zonas estuarinas, por exemplo, a influncia das mars provoca de forma cclica profundas alteraes nas caractersticas dessas guas. Para o estabelecimento do local, momento e frequncia de coleta das amostras, deve-se definir previamente se o estudo visa a obter uma caracterstica mdia, valores mximos ou mnimos, ou a caracterizao instantnea de um ponto do corpo receptor. A melhor soluo tcnica

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Guia NacioNal De coleta e Preservao De amostras

seria o uso de monitores automticos que registram continuamente as alteraes da qualidade do corpo de gua (ver Captulo 9). Na impossibilidade de utilizao dessa metodologia devido ao custo elevado e no-aplicabilidade para todas as variveis, deve-se definir a frequncia e o momento da coleta, com base em informaes e dados disponveis ou, sempre que possvel, com a realizao de levantamento preliminar. Os planos de amostragem baseados em consideraes subjetivas, ou simplesmente na capacidade de amostragem e analtica do laboratrio, podero gerar resultados no representativos, por no considerarem a variabilidade espacial e temporal. Para ilustrar estas consideraes, so apresentados dois grficos hipotticos, representando a variao temporal da concentrao de um dado parmetro (Figura 3). O primeiro grfico (A) representa uma variao aleatria resultante, por exemplo, de lanamentos descontnuos ou do efeito de lixiviao de escoamento superficial provocado por chuvas. O segundo grfico (B) simula uma variao cclica resultante, por exemplo, de lanamentos de esgotos domsticos, variaes sazonais de temperatura ou chuvas, variao diria de insolao ou temperatura, ou de lanamentos descontnuos, porm cclicos.

Figura 3. Efeito da variabilidade temporal na estimativa quantitativa da concentrao de uma dada varivel: (A) Variaes aleatrias; (B) Variaes aleatrias e cclicas.
Legenda: () resultados obtidos por monitoramento automtico continuo; () mdia dos resultados obtidos com o monitoramento automtico; (.) concentraes obtidas por coletas instantneas.

A intensidade dessas variaes pode ser reduzida, por exemplo, medida que o ponto de amostragem se afasta do ponto de lanamento. Portanto, para o estabelecimento do instante e da frequncia de coleta de amostras, deve-se conhecer a variabilidade temporal de cada parmetro, por local de amostragem. A partir do perfil dessa variabili-

planejamento de amostragem

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dade possvel estabelecer o programa de amostragem e o nmero de amostras que devem ser tomadas. Quanto maior o nmero de amostras investigadas, melhor ser o conhecimento da variabilidade e, consequentemente, da estimativa do impacto ambiental. O tamanho da amostra pode ser determinado com base em clculos estatsticos, supondo-se uma distribuio normal da varivel de qualidade e amostras aleatrias e independentes. Nessas condies, pode-se aplicar a seguinte frmula: Equao 1
n = nmero de amostras a serem coletadas; t = fator da distribuio t de Student para (n 1) graus de liberdade e determinado limite de confiana, geralmente entre 90 e 99%. Para a primeira estimativa, usar o valor de t para s = estimativa do desvio padro da caracterstica medida; I = incerteza desejada. = nvel de significncia
Exemplo de aplicao: Para se estimar a mdia anual de cloreto com uma incerteza de 5 mg/L Cl, com 95% de confiana, supondo-se s = 10 mg/L, j conhecido por meio de estudos preliminares: Para a primeira estimativa

Da tabela de distribuio t de Student temos: t= 1,960 Portanto: n = (1,960 x 10/5)2 = 15,4 ou n = 16 amostras. Recalculando para (n 1) graus de liberdade
(n 1) = 15

Da tabela temos: t = 2,131 Finalmente: n = (2,131 x 10/5)2 = 18,2 ou n = 19 amostras.

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Quando o objetivo de um programa avaliar concentraes mdias de uma dada varivel dentro de um dado perodo (geralmente 24 horas), pode-se, em alguns casos, reduzir o nmero das amostras necessrias ao ensaio, pela obteno de amostras compostas, formadas pela mistura de alquotas individuais apropriadas. Para a retirada dessas alquotas pode-se empregar amostradores automticos programveis. As amostras compostas so teis quando se deseja obter a qualidade mdia de um corpo de gua no homogneo. Nesse caso, so retiradas alquotas em vrios pontos e profundidades do corpo de gua, reunindo-se todas em uma nica amostra. A desvantagem de se compor uma amostra que pode se perder a associao com as demais variveis de caracterizao do corpo dgua ou efluente, que foram coletadas pontualmente. Para a tomada de amostras compostas, os seguintes cuidados devem ser observados: No podem ser empregadas para a determinao de variveis que se alterem durante a manipulao das alquotas; o caso do oxignio dissolvido, pH, dixido de carbono livre, microrganismos, metais dissolvidos, compostos volteis e leos e graxas. Deve-se obedecer s recomendaes relativas ao prazo mximo entre a retirada da alquota e o incio da anlise no laboratrio. No caso da DBO, por exemplo, quando se quer formar uma amostra composta de 24 horas, ao ser retirada a ltima alquota o prazo j expirou para as primeiras. importante considerar a possibilidade de se tomarem alquotas individuais proporcionais s vazes do corpo de gua no instante da coleta, quando se deseja estimar cargas poluidoras, especialmente em escoamentos que apresentem variaes sensveis de vazo ao longo do perodo de amostragem, tanto para o ambiente aqutico como para efluentes.

2.1.4 Informaes sobre a rea de Influncia


O planejamento adequado envolve a obteno de informaes preliminares sobre a rea de influncia do corpo dgua a ser amostrado, como: Levantamento de estudos j realizados no local que contribuam com informaes sobre as caractersticas da rea de estudo e as principais atividades poluidoras na bacia, que podem influir na qua-

planejamento de amostragem

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lidade das guas, tais como: indstria, agricultura, minerao, zonas urbanas, etc., a fim de estabelecer os locais de amostragem; Elaborao de croqui com a localizao dos possveis pontos de coleta; Visita rea de estudo para georreferenciamento dos locais de coleta por meio de GPS (Global Position System), levantamento fotogrfico com as caractersticas locais e contato com as pessoas do local a fim de se obter dados adicionais que confirmem ou esclaream os dados preliminares levantados (lanamentos de lixo, resduos industriais ou domsticos no corpo de gua ou nas suas margens, e outras informaes); Verificao das vias de acessos, bem como a situao das mesmas, tempo necessrio para a realizao dos trabalhos, disponibilidade de apoio local para armazenamento e transporte de material de coleta e amostras, colocao da embarcao (como marinas, clubes etc.), avaliando possveis limitaes ou interferncias.

2.1.5 Local e Pontos de Coleta


Muitas vezes os objetivos determinam os locais e pontos de coleta. Por exemplo, quando se quer avaliar a eficincia de uma unidade de tratamento (industrial ou de esgoto), necessariamente preciso amostrar o afluente e o efluente dessa estao. Entretanto, quando os objetivos estabelecidos apontam apenas para uma indicao geral, como o efeito de um efluente na qualidade de gua de um rio ou a avaliao da qualidade da gua potvel distribuda para a populao, necessrio selecionar cuidadosamente os locais de amostragem. 2.1.5.1 gua Bruta preciso considerar que todo corpo dgua heterogneo e que, seja qual for o local de amostragem, este no representativo de todo o sistema1 em estudo. Por esse motivo, devem ser selecionados locais adequados s necessidades de informao de cada programa. Entre os fatores responsveis pela heterogeneidade de um corpo dagua podemos citar:
1 A palavra sistema usada para representar bacias hidrogrficas, cursos de gua, rios, lagos, reservatrios, estaes de tratamento e sistemas de distribuio, entre outros.

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a) Estratificao trmica vertical, decorrente de variao da temperatura ao longo da coluna dgua e do encontro de massa de gua; b) Zona de mistura, formada por dois ou mais tipos de guas que esto em processo de mistura (rio logo a jusante da descarga de um efluente ou tributrio) (Figura 4), sendo que a coleta deve ser realizada aps a completa mistura (Fig. 4, trecho A-A); c) Distribuio heterognea de determinadas substncias ou organismos em um sistema hdrico homogneo. Isso ocorre quando os materiais no dissolvidos, com densidade diferente da gua, tendem a ficar heterogeneamente distribudos (por exemplo, o leo tende a flutuar na superfcie da gua, enquanto os slidos em suspenso tendem a se depositar) ou quando ocorrem reaes qumicas ou biolgicas na coluna dgua, como o crescimento de algas nas camadas superiores em funo da penetrao de luz, com as consequentes mudanas no pH e concentrao de oxignio dissolvido.

Figura 4. Representao esquemtica da mistura de um efluente com o rio: Vista Superior disperso lateral do efluente; Corte Lateral disperso vertical e lateral do efluente.

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Quando no se conhece detalhadamente um determinado sistema, recomendvel realizar uma investigao preliminar, de preferncia com base em um planejamento estatstico, a fim de avaliar o seu grau de heterogeneidade. Testes rpidos de campo, como condutividade eltrica, temperatura e oxignio dissolvido, podem ser teis para essa finalidade, bem como o uso de equipamentos que permitem medio contnua. O uso de tcnicas de traadores, como corantes ou materiais radioativos, tem se mostrado til no estudo dos processos de mistura nos corpos de gua. Contudo, no planejamento desses testes preliminares necessrio lembrar que o grau de heterogeneidade pode depender do tipo de ensaio em questo; por isso, essa avaliao deve ser feita com base em mais de um ensaio. O grau de heterogeneidade dever ser avaliado para se verificar como as caractersticas de qualidade oscilam no espao e no tempo. Em geral no se deve retirar amostras prximas s margens de rios, canais e no ponto de lanamento de despejos, exceto quando essas regies so de interesse especfico, pois a qualidade, em tais pontos, geralmente no representativa de todo o corpo dgua. No caso da contribuio dos tributrios (afluentes), importante acompanhar a qualidade de suas guas, e como ela afeta o corpo principal, por meio da coleta de amostras em ponto prximo da sua desembocadura (foz) ou de acordo com o objetivo do trabalho. Quando se deseja acompanhar a qualidade da gua de um corpo hdrico, a longo prazo, o posicionamento do local de amostragem, deve levar em considerao a existncia de lanamentos de efluentes lquidos industriais e/ou domsticos, bem como a presena de afluentes na rea de influncia do ponto de amostragem, pois estes podem alterar a qualidade da gua do corpo. Caso haja este tipo de situao, o local de monitoramento deve estar situado aps a mistura completa do referido lanamento, seja ele contnuo ou intermitente (Fig. 5). Para isto deve-se conhecer as vazes do lanamento e as do rio, e o regime de escoamento para determinar o local onde a mistura completa. Desse modo obtm-se uma amostra de gua representativa daquele ponto do rio.

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Figura 5. Variao da qualidade de um corpo dgua considerando a distncia do ponto de lanamento de descarga: (A) Local de amostragem prximo descarga; (B) Posio intermediria do local de amostragem; (C) Local de amostragem distante da descarga.

s vezes, os locais de amostragem podem ser escolhidos erroneamente, mais pela convenincia do que por sua adaptao a uma amostragem representativa. As pontes, por exemplo, so usadas para amostragem em rios devido sua acessibilidade, mas nem sempre so os locais mais apropriados, pois sua presena pode interferir ou alterar fatores bsicos do corpo dgua. Entretanto, esta pode ser uma opo quando o local adequado de amostragem for totalmente invivel. 2.1.5.2 gua Tratada O princpio que orienta a amostragem o de que as caractersticas da gua so modificadas em seu percurso nos sistemas e nas solues alternativas de abastecimento de gua. Essas variaes necessitam ser conhecidas, pois fornecem importantes elementos para: (1) subsidiar a avaliao do risco ao consumidor; (2) permitir a correo do problema especfico de contaminao, bem como os problemas operacionais geradores da anomalia. Para o controle de qualidade da gua para consumo humano devem ser considerados na definio dos pontos e locais de coleta: (i) o monitoramento operacional para avaliar o desempenho das medidas de controle nas diversas etapas de tratamento, desde a captao no manancial at o consumidor, e (ii) o monitoramento para garantir que o processo de tratamento como um todo esteja operando de forma segura (verificao). No estabelecimento da frequncia de amostragem para um monitoramento mais global da gua de consumo humano existe a necessidade de se realizar um balano dos benefcios e custos de se obter um nmero maior de informaes. O nmero de amostras e a frequncia de amostragem so geralmente baseados na populao abastecida ou no volume de gua distribudo, para refletir o risco populao. A frequncia de anlises para os parmetros individuais ir tambm depender da

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variabilidade da qualidade. Requer-se uma maior frequncia de anlise dos parmetros microbiolgicos do que dos fsico-qumicos, isso porque episdios curtos de contaminao microbiolgica podem levar facilmente a surtos de doenas gastrointestinais nos consumidores, enquanto episdios de contaminao qumica, que poderiam constituir um risco agudo sade, so raros (WHO, 2011). No Captulo 7 encontram-se detalhes sobre os procedimentos para o planejamento e execuo de amostragem de guas de consumo humano. 2.1.5.3 Sedimento A seleo dos pontos de coleta de sedimento deve considerar, alm do objetivo do estudo, os tipos de ambiente, os locais de lanamento da carga de poluentes e os padres de vazo, velocidade e sentido da corrente. Muitos estudos de sedimento aplicam a abordagem que utiliza um ponto ou condies de referncia dentro de uma determinada regio ou bacia hidrogrfica. O ponto de referncia corresponde a um ambiente livre da ao antrpica ou o menos impactado dentro da rea de estudo. fundamental que as caractersticas fsicas, geolgicas e hidrolgicas, entre os pontos a serem comparados sejam compatveis. Assim, dados como granulometria, teor de matria orgnica e umidade do sedimento, tipo e grau de preservao da cobertura vegetal da margem, tipo de hbitat amostrado e ordem do rio devem ser similares entre o ponto de referncia e os pontos a serem diagnosticados. So definidas as condies consideradas ideais, estabelecendo-se valor ou faixa de valor, para cada parmetro, que seria esperado em um ambiente preservado. Qualquer que seja o tipo de ambiente amostrado (rios, lagos, reservatrios, esturios e oceanos), a coleta para avaliao da qualidade de sedimentos (biolgica, fsica e qumica) geralmente ocorre nas reas de deposio de sedimentos finos (argila), j que normalmente so nesses locais que os contaminantes so retidos e a comunidade bentnica mais desenvolvida. Em lagos, reservatrios e esturios o acmulo de partculas finas ocorre na regio mais profunda; em rios, nas margens deposicionais e nas reas de remansos. A margem deposicional localiza-se no lado oposto ao da erosional, apresentando declive mais suave e, muitas vezes, bancos de macrfitas enraizadas. Remansos ocorrem em trechos mendricos e pantanosos.

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Em estudos de sedimentos so considerados essenciais a avaliao dos seguintes parmetros: pH (potencial hidrogeninico), Eh (potencial redox), contedo orgnico (carbono orgnico total - COT ou resduos volteis), sulfetos volatilizveis em cido (SVA), granulometria, umidade e teor de matria orgnica. Em gua de fundo, nitrognio amoniacal e oxignio dissolvido so parmetros importantes para acompanhar ensaios ecotoxicolgicos e de bentos (ver detalhes no Captulo 6). A variabilidade do sedimento em um ponto precisa ser considerada na amostragem e decorre da heterogeneidade espacial, tanto vertical quanto horizontal. A heterogeneidade vertical , principalmente, consequncia da oscilao histrica da contaminao; a horizontal formada pela dinmica de deposio das partculas (apresentando-se quimicamente em mosaicos) e pela distribuio agrupada das populaes bentnicas. O ideal ter conhecimento desta variabilidade por meio da tomada de rplicas. O nmero de rplicas pode ser definido a partir de dados obtidos em amostragem prvia, utilizando-se frmulas que se baseiam em valores de varincia, desvio ou erro padro, como exemplificado no item 2.1.3. No entanto, o nmero resultante de rplicas algumas vezes invivel e opta-se por um nmero mnimo, considerando-se a capacidade analtica do laboratrio. Em geral faz-se de 3 a 5 rplicas. Se o custo do projeto e a capacidade analtica de um laboratrio no permitem a execuo de rplicas, opta-se pela obteno de amostras compostas (desde que a varivel em questo permita a sua composio), que teoricamente representam o valor mdio dessa composio sendo, portanto, uma opo mais adequada do que a tomada de uma s amostra por ponto (maiores detalhes no Captulo 6). Em estudos de sedimento h de se considerar tambm a variabilidade temporal, j que as variaes sazonais podem influenciar a disponibilidade de contaminantes. Em reservatrios, a dinmica de circulao/ estratificao altera a relao de oxirreduo das camadas profundas de gua e, em perodos de seca, a exposio do sedimento marginal. Em rios, ocorre deposio de sedimentos finos no perodo da seca e lavagem desse material nas chuvas. Para estudos de caracterizao e diagnstico e programas de monitoramento da qualidade de sedimentos, uma nica coleta anual no perodo de seca pode ser adequada.

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2.1.5.4 Efluentes Lquidos e Corpos Hdricos Receptores Para definio dos locais de amostragem de efluentes lquidos (industriais e domsticos) e dos corpos hdricos receptores, devem ser considerados os objetivos envolvidos na amostragem, tais como: avaliao do desempenho do sistema de tratamento, atendimento aos padres da legislao, obteno de informaes para elaborao de projeto de sistemas de tratamento de guas residurias (STAR), implantao de medidas de preveno poluio, entre outros. No captulo 8 encontram-se detalhes sobre os procedimentos para o planejamento e execuo deste tipo de amostragem.

2.1.6 Apoio Operacional


Os veculos, embarcaes, equipamentos, frascaria, material de preservao e acondicionamento de amostras devem estar disponveis em quantidade e qualidade adequadas, evitando-se adaptaes de ltima hora.

2.1.7 Capacidade Analtica Laboratorial


No planejamento da amostragem deve ser considerada a capacidade analtica do(s) laboratrio(s) quanto quantidade de amostras que podem ser processadas e os tipos de parmetros a serem investigados, limites de deteco, mtodos de ensaio, disponibilidade de padres e cronograma de atendimento. importante considerar os seguintes conceitos nessa etapa: Concentrao mnima de interesse do analito: um dado fundamental para a seleo de mtodos analticos que devem ser empregados em um planejamento. Normalmente definida por legislao ou publicada como padro internacional, e serve de orientao para a definio das tcnicas de coleta e dos limites de quantificao aceitveis para os mtodos analticos que sero utilizados para a tomada de deciso ambiental. Limite de deteco do Mtodo (LDM): menor concentrao de uma substncia que pode ser detectada, mas no necessariamente quantificada, pelo mtodo utilizado. Limite de quantificao: a menor concentrao de um analito que pode ser determinada com um nvel de aceitabilidade que garanta

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sua representatividade. Aps ter sido determinado, esse limite serve para orientar e avaliar se a preciso e a exatido do mtodo analtico escolhido atende aos objetivos do plano. Normalmente, para embasar substancialmente as decises ambientais, recomendvel que o limite de quantificao de um mtodo seja pelo menos 50% menor do que a concentrao mnima de interesse. Quando no existirem mtodos oficiais (USEPA, Standard Methods, ISO, etc) que atendam concentrao mnima de interesse do analito recomenda-se adotar o mtodo dentre estes que melhor atenda a esse limite. Incerteza de medio: caracteriza a disperso de valores associada ao resultado, que podem ser razoavelmente atribudos ao mensurando (amostras). usada para avaliar a exatido, preciso e confiabilidade de um resultado analtico. A definio dos valores mximos de incerteza dos resultados deve ser estabelecida juntamente com a concentrao mnima de interesse e deve ser usada para auxiliar na escolha das metodologias analticas adotadas.

2.1.8 Recursos Financeiros e Humanos


So os recursos necessrios para realizar os trabalhos de campo, as tarefas analticas e as de interpretao de dados. Sob este aspecto, convm planejar criteriosamente os parmetros a serem avaliados, o nmero de amostras a serem examinadas e a frequncia de sua coleta, adequando-os aos recursos disponveis. Tanto em programas de monitoramento, onde so avaliadas as tendncias e a eficcia das medidas de controle da poluio, como em levantamentos especficos, devem ser elaborados cronogramas de desenvolvimento dos trabalhos, considerando todas as atividades envolvidas, a sazonalidade e a disponibilidade para alocao dos recursos humanos e materiais.

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Refrigerao de Amostras Foto Carlos Jesus Brando/CETESB

CAPTuLO

3 ORGANIZAO DOS TRABALHOS DE CAMPO


Estabelecido o planejamento de amostragem, que inclui a definio dos objetivos, dos locais e frequncia de amostragem, dos parmetros selecionados, dos mtodos analticos e de amostragem adequados e o cronograma de atividades, passa-se para as etapas de organizao e execuo dos trabalhos de campo. A sntese contendo as recomendaes e orientaes de como realizar o armazenamento e a preservao de amostras, conforme o tipo de ensaio (classe da amostra, tipo de recipiente para armazenamento, volume/quantidade necessrio de amostra, tipo de preservao e prazo mximo recomendado entre coleta e incio do ensaio), encontra-se no Anexo 1.

3.1 Planejamento das Atividades


O planejamento correto das atividades de campo de importncia fundamental para o sucesso dos trabalhos e deve envolver os seguintes aspectos: Seleo de itinerrios racionais, observando-se os acessos, o tempo para coleta e preservao das amostras e o prazo para seu envio aos laboratrios, obedecendo-se o prazo de validade para o ensaio de cada parmetro, a capacidade analtica e o horrio de atendimento e funcionamento dos laboratrios envolvidos. Muitos programas de amostragem necessitam de vrios dias para serem desenvolvidos, o que exige remeter amostras coletadas diariamente aos laboratrios por despachos rodovirios ou areos. Nesses casos, devem-se planejar coletas calculando-se a localizao e os horrios das empresas transportadoras; Certificao de que a programao de coleta foi enviada aos laboratrios envolvidos e de que os mesmos tenham condies de atender ao programa;

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Verificao da existncia de eventuais caractersticas locais nos pontos de coleta que exigem equipamentos ou cuidados especiais, o que permitir a sua adequada seleo e preparo. Isto vale especialmente para o caso de coletas com embarcaes, coletas de sedimentos, peixes e organismos bentnicos, coletas em locais de difcil acesso, ou com alto risco de acidentes (rios caudalosos, mar, pontes de trfego intenso, amostragem em indstrias etc.); Preparao de tabelas contendo os equipamentos e materiais necessrios aos trabalhos (fichas de coleta, frascos para as amostras, preservantes qumicos, caixas trmicas, equipamentos de coleta e de medio, cordas, embarcaes, motores de popa, equipamento de segurana etc.). conveniente levar frascos reserva para o caso de amostragem adicional, perda ou quebra de frascos; e Verificao da disponibilidade e funcionamento adequado dos equipamentos utilizados para amostragem e de apoio.

Convm assegurar-se de que os tcnicos envolvidos nas atividades de coleta estejam devidamente treinados e capacitados para utilizar as tcnicas especficas de coleta, preservao de amostras e as medidas de segurana, manusear os equipamentos de campo e de medio, e localizar precisamente os pontos de coleta. fundamental que observem e anotem quaisquer fatos ou anormalidades que possam interferir nas caractersticas das amostras (cor, odor ou aspecto estranho, presena de algas, leos, corantes, material sobrenadante, peixes ou outros animais aquticos mortos), nas determinaes laboratoriais e na interpretao dos dados. Devem ainda ter condies para estabelecer, se necessrio, pontos de amostragem alternativos e outros parmetros complementares para uma melhor caracterizao do ambiente em estudo. Um tcnico bem treinado, consciente e observador de importncia fundamental para a consecuo dos objetivos dos programas de avaliao dos ecossistemas aquticos. importante destacar que as coletas de amostras biolgicas dependem de autorizao prvia dos rgos competentes, como o Instituto Chico Mendes de Conservao da Biodiversidade (ICMBio). Essa autorizao, todavia, no necessria para fins de monitoramento da qualidade da gua. Maiores informaes podem ser obtidas no site do Sistema de Autorizao e Informao em Biodiversidade (SISBIO) do Ministrio do Meio Ambiente (http://www4.icmbio.gov.br/sisbio//)

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3.2 Coleta e Preservao de Amostras


Neste tpico encontram-se orientaes quanto limpeza e ao preparo dos recipientes utilizados para o armazenamento de amostras. Informaes sobre as tcnicas de preservao para cada varivel, o tipo de recipiente, o volume de amostra necessrio, o tipo de preservao recomendada e o prazo para ensaios fsico-qumicos, microbiolgicos, biolgicos e toxicolgicos encontram-se no Anexo 1.

3.2.1 Coleta e Tipos de Amostras


A coleta de amostras , provavelmente, o passo mais importante para a avaliao da rea de estudo; portanto, essencial que a amostragem seja realizada com precauo e tcnica, para evitar todas as fontes possveis de contaminao e perdas e representar o corpo dgua amostrado e/ou a rede de distribuio de gua tratada. Para definir a natureza da amostra coletada, nesse Guia so adotados cdigos que se referem classe da amostra: A - Amostras de gua tratada; B - Amostras de gua bruta; C - Amostras de gua residuria; D - Amostras de solo, sedimento, lodo, material slido de dragagem, resduo slido e semi-slido em geral; E - Amostras de materiais biolgicos. As definies de cada uma delas encontram-se no Glossrio (Anexo 2). A tcnica a ser adotada para a coleta de amostras depende da matriz a ser amostrada (gua superficial, em profundidade, subterrnea, tratada, residuria, sedimento, biota aqutica, entre outras), do tipo de amostragem (amostra simples, composta ou integrada) e, tambm, dos ensaios a serem solicitados (ensaios fsico-qumicos, microbiolgicos, biolgicos e toxicolgicos) e devem ser tomados os seguintes cuidados: Verificar a limpeza dos frascos e dos demais materiais e equipamentos que sero utilizados para coleta (baldes, garrafas, pipetas etc.); Empregar somente os frascos e as preservaes recomendadas para cada tipo de determinao, verificando se os frascos e reagentes para preservao esto adequados e dentro do prazo de validade para uso (Anexo 1). Em caso de dvida, substitu-los; Certificar-se que a parte interna dos frascos, assim como as tampas e batoques, no sejam tocadas com a mo ou fiquem expostas ao p, fumaa e outras impurezas (gasolina, leo e fumaa de exausto de veculos podem ser grandes fontes de contaminao de amostras).

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Cinzas e fumaa de cigarro podem contaminar as amostras com metais pesados e fosfatos, entre outras substncias. importante, portanto, que os tcnicos responsveis pela coleta de amostras no fumem durante a coleta e utilizem uniformes e EPI adequados para cada tipo de amostragem (avental, luva cirrgica ou de borracha de ltex, culos de proteo, entre outros), sempre observando e obedecendo s orientaes de cada local ou ambiente onde ser realizada a amostragem; Fazer a ambientao dos equipamentos de coleta com gua do prprio local, se necessrio; Garantir que as amostras lquidas no contenham partculas grandes, detritos, folhas ou outro tipo de material acidental durante a coleta; Coletar um volume suficiente de amostra para eventual necessidade de se repetir algum ensaio no laboratrio; Fazer todas as determinaes de campo em alquotas de amostra separadas das que sero enviadas ao laboratrio, evitando-se assim o risco de contaminao; Colocar as amostras ao abrigo da luz solar, imediatamente aps a coleta e preservao; Acondicionar em caixas trmicas com gelo as amostras que exigem refrigerao para sua preservao (observar que as amostras para ensaio de Oxignio Dissolvido no devem ser mantidas sob refrigerao); Manter registro de todas as informaes de campo, preenchendo uma ficha de coleta por amostra, ou conjunto de amostras da mesma caracterstica, contendo os seguintes dados: a) Nome do programa de amostragem e do coordenador, com telefone para contato; b) Nome dos tcnicos responsveis pela coleta; c) Nmero de identificao da amostra; d) Identificao do ponto de amostragem: cdigo do ponto, endereo, georreferenciamento, etc. e) Data e hora da coleta; f) Natureza da amostra (gua tratada, nascente, poo fretico, poo profundo, represa, rio, lago, efluente industrial, gua salobra, gua salina etc.); g) Tipo de amostra (simples, composta ou integrada) h) Medidas de campo (temperatura do ar e da gua, pH, condutividade, oxignio dissolvido, transparncia, colorao visual, vazo, leitura de rgua, etc.);

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i) j)

Eventuais observaes de campo; Condies meteorolgicas nas ltimas 24 horas que possam interferir com a qualidade da gua (chuvas); k) Indicao dos parmetros a serem analisados nos laboratrios envolvidos; l) Equipamento utilizado (nome, tamanho, malha, capacidade, volume filtrado, e outras informaes relevantes). As amostras podem ser simples, compostas ou integradas. A amostra simples (pontual ou instantnea) aquela coletada em uma nica tomada de amostra, num determinado instante, para a realizao das determinaes e ensaios. O volume total da amostra ir depender dos parmetros escolhidos. indicada para os casos onde a vazo e a composio do lquido (gua ou efluente) no apresentam variaes significativas. obrigatria para os parmetros cujas caractersticas alteram-se rapidamente ou no admitem transferncia de frasco (sulfetos, oxignio dissolvido, solventes halogenados, leos e graxas, microbiolgicos). A amostra composta constituda por uma srie de amostras simples, coletadas durante um determinado perodo e misturadas para constituir uma nica amostra homogeneizada. Este procedimento adotado para possibilitar a reduo da quantidade de amostras a serem analisadas, especialmente quando ocorre uma grande variao de vazo e/ou da composio do lquido. A amostragem pode ser realizada em funo (a) do tempo (temporal); (b) da vazo; (c) da profundidade do local a ser amostrado; (d) da margem ou distncia entre um ponto de amostragem e outro (espacial). A composio de amostra realizada de acordo com o objetivo de cada trabalho e definida pelo coordenador tcnico no momento da elaborao do projeto. O perodo total da amostragem composta poder ser subdividido, de acordo com a capacidade de processamento do laboratrio. Quando o laboratrio de ensaios se encontra em local distante dos pontos de amostragens, recomenda-se que as amostras sejam compostas em perodos menores que 24 horas, devido aos tempos mximos para a realizao de ensaios de alguns parmetros, de forma a no exceder o prazo de validade da amostra. A amostragem integrada aquela realizada com amostradores que permitem a coleta simultnea, ou em intervalos de tempo o mais

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prximo possvel, de alquotas que sero reunidas em uma nica amostra. Para uma melhor representatividade do local amostrado, pode-se tambm realizar a amostragem com rplicas (duplicata ou triplicata), quando a amostra coletada de modo sequencial e independente, em um determinado perodo de tempo ou espao. A coleta de gua varia tambm em funo da profundidade em que foi realizada, podendo ser superficial ou em diferentes distncias abaixo da superfcie. A coleta de gua superficial a que ocorre entre 0 e 30 centmetros da lmina dgua, enquanto que a em profundidade ocorre abaixo de 30 centmetros da lmina dgua e deve ser realizada obrigatoriamente com o auxlio de equipamento adequado, tomando-se o cuidado de no provocar a suspenso do sedimento prximo ao fundo. Os nveis de profundidade so definidos pelo coordenador tcnico no momento da elaborao do projeto, de acordo com o objetivo de cada trabalho. A profundidade total do local de amostragem verificada em campo, com auxlio de uma corda metrada com um peso extra, tipo poita, ou com ecobatmetro da embarcao. Toda vez que o procedimento de coleta for realizado com apoio de embarcao, assim que for confirmada sua ancorao no ponto onde ser realizada a coleta, a embarcao deve ser mantida na mesma posio, no podendo ser ligada para reposicionamento at o final do procedimento.

3.2.2 Preservao de amostra


Independente da natureza da amostra, a estabilidade completa para cada constituinte nunca pode ser obtida. As tcnicas de preservao, a seleo adequada dos frascos e a forma de armazenamento, tm por objetivo retardar a ao biolgica e a alterao dos compostos qumicos; reduzir a volatilidade ou precipitao dos constituintes e os efeitos de adsoro; e/ou preservar organismos, evitando ou minimizando alteraes morfolgicas, fisiolgicas e de densidades populacionais, em todas as etapas da amostragem (coleta, acondicionamento, transporte, armazenamento, at o momento do ensaio). As alteraes qumicas que podem ocorrer na estrutura dos constituintes acontecem, principalmente, em funo das condies fsico-qumi-

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cas da amostra. Assim, metais podem precipitar-se como hidrxidos, ou formar complexos com outros constituintes; os ctions e nions podem mudar o estado de oxidao; ons podem ser adsorvidos na superfcie interna do frasco de coleta; e outros constituintes podem dissolver-se ou volatilizar-se com o tempo. As aes biolgicas podem conduzir alterao da valncia de elementos ou radicais. Os constituintes solveis podem ser convertidos em matria orgnica e, com a ruptura das clulas, esses constituintes podem ser liberados na soluo. Os ciclos biogeoqumicos, como do nitrognio e do fsforo, so exemplos dessa influncia biolgica na composio da amostra. As tcnicas de preservao de amostras mais empregadas so: adio qumica, congelamento e refrigerao. Adio qumica O mtodo de preservao mais conveniente o qumico, atravs do qual o reagente adicionado prvia (ensaios microbiolgicos) ou imediatamente aps a tomada da amostra, promovendo a estabilizao dos constituintes de interesse por um perodo maior. Contudo, para cada ensaio existe uma recomendao especfica (Anexo 1). Geralmente realizada com o auxlio de um frasco dosador, frasco conta-gota, pipeta, proveta, entre outros. Congelamento uma tcnica aceitvel para alguns ensaios e serve para aumentar o intervalo entre a coleta e o ensaio da amostra in natura, sem comprometer esta ltima. inadequada para as amostras cujas fraes slidas (filtrveis e no filtrveis) alteram-se com o congelamento e posterior retorno temperatura ambiente, e para a maioria das determinaes biolgicas e microbiolgicas. Os ensaios que permitem esta tcnica de preservao constam no Anexo 1. Refrigerao Constitui uma tcnica comum em trabalhos de campo e pode ser utilizada para preservao de amostras mesmo aps a adio qumica, sendo empregada frequentemente na preservao de amostras para

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ensaios microbiolgicos, fsico-qumicos orgnicos e inorgnicos, biolgicos e toxicolgicos. Os ensaios que permitem esta tcnica de preservao constam no Anexo 1.

3.3 Acondicionamento, Transporte e Armazenamento de Amostras


3.3.1 Acondicionamento
Neste item encontram-se orientaes para o acondicionamento de amostras, quanto ao tipo, limpeza e preparo dos recipientes utilizados. 3.3.1.1 Tipos de Recipientes Os tipos de recipientes mais utilizados para coleta e preservao de amostras so os de plstico autoclavvel de alta densidade (polietileno, polipropileno, policarbonato ou outro polmero inerte) e os de vidro, com boca larga (mais ou menos 4 cm de dimetro) para facilitar a coleta da amostra e a limpeza. Estes dois tipos de materiais apresentam vantagens e desvantagens (Tabela 1).
Tabela 1. Comparao entre recipientes de vidro (borossilicato) e polietileno, polipropileno ou outro polmero inerte.
Condies Operacionais Material Vidro (Borossilicato) Plstico (polmero inerte)

Interferncia com a amostra

Indicado para todas as anlises de compostos orgnicos. Inerte a maioria dos constituintes, exceto a forte alcalinidade. Adsorve metais em suas paredes. Pesado Muito Frgil Fcil

Indicado para a maioria dos compostos inorgnicos, biolgicos e microbiolgicos. Pode contaminar amostras com ftalatos. Leve Durvel Alguma dificuldade na remoo de componentes adsorvveis Apenas por tcnicas de uso pouco comum no Brasil, como xido de etileno e radiao gama. Alguns tipos so autoclavveis.

Peso Resistncia quebra Limpeza

Esterilizvel

Sim

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Os recipientes de plstico apresentam maiores vantagens por serem leves e resistentes quebra, e so recomendados quando o plstico aceitvel na coleta, devido ao baixo custo e menor adsoro de ons de metais. Recipientes de polietileno tambm podem ser usados, porm so menos rgidos e, consequentemente, apresentam uma menor resistncia autoclavao. Os frascos podem ser de vidro neutro ou de borossilicato. A desvantagem deste tipo de material o seu peso e a possibilidade de quebra durante o seu manuseio e transporte. O vidro de borossilicato o recomendado por ser inerte maior parte dos materiais e indicado para determinados tipos de ensaios, como os microbiolgicos, pesticidas e de leos e graxas; entretanto, possui um custo mais elevado. Os recipientes podem ser tambm do tipo descartvel ou reutilizvel. Os recipientes descartveis so utilizados quando o custo da limpeza alto. Estes devem estar limpos, serem prova de vazamento e, quando necessrio, estreis. Os recipientes reutilizveis so usados quando o custo de limpeza baixo em comparao com o custo de aquisio de novos recipientes. Devem ser de fcil lavagem e, se necessrio, resistentes a temperaturas elevadas. A capacidade dos recipientes varia em funo do volume de amostra necessrio para os ensaios a serem efetuados. O frasco geralmente precisa ter capacidade suficiente para conter a amostra e deixar um espao que permita uma boa homogeneizao, a menos que o procedimento recomende a coleta com o frasco totalmente cheio. Normalmente, empregam-se frascos de 250mL, 500mL, 1L e 5L. Todavia, recipientes com capacidades menores ou maiores podem ser necessrios, de acordo com as determinaes a serem realizadas. No caso das amostras de sedimento, podem ser acondicionadas em potes ou sacos plsticos de polietileno, potes de vidro de cor mbar ou papel alumnio e sacos plsticos reforados (APHA, 2005). fundamental que tanto o recipiente, como a tampa e o batoque estejam livres do analito de interesse, especialmente quando os limites de quantificao so baixos. No caso de ensaios orgnicos, no usar frascos plsticos, exceto aqueles feitos de polmeros fluorinados, tal como teflon (PTFE politetrafloretileno), pois alguns analitos da amostra podem ser adsorvidos pela parede do recipiente plstico e/

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ou alguns contaminantes do recipiente plstico podem ser liberados na amostra. Evitar recipientes plsticos sempre que possvel, devido ao seu potencial de contaminao, principalmente por steres de ftalato. Considerando que alguns compostos orgnicos (como tambm os pigmentos fotossintetizantes) so fotodegradveis, necessrio utilizar frascos de vidro de cor mbar ou, na impossibilidade, envolver os frascos transparentes em papel alumnio ou kraft. Para a anlise de metais, tomar cuidado para que a amostra no entre em contato com batoques metlicos; para a realizao de ensaios microbiolgicos, os recipientes devem ser esterilizados. Como regra geral, as tampas e os batoques devem garantir uma boa vedao da amostra, especialmente durante o transporte. 3.3.1.2 Limpeza e Preparo de Recipientes A limpeza dos recipientes, tampas e batoques de grande importncia para impedir a introduo de contaminantes nas amostras com o analito de interesse. Um exemplo dessa contaminao o uso de detergentes comuns para lavar recipientes que sero empregados nos ensaios de surfactantes e fosfatos. Portanto, deve-se garantir que os procedimentos de lavagem sejam eficazes para a limpeza e no acrescentem interferentes nos resultados analticos (qualidade e composio dos detergentes, pureza das solues usadas, tempo de contato com os reagentes, controle da temperatura, dentre outros). Os procedimentos manuais mais utilizados na limpeza e preparo de frascaria so listados a seguir (limpeza bsica e especial). Procedimentos automticos podem ser empregados utilizando-se mquina de lavagem de vidraria, escolhendo o programa apropriado para cada tipo de frascaria. a) Limpeza bsica de frascaria i. Deixar os frascos, tampas e batoques de molho em soluo de detergente alcalino 0,1% por tempo suficiente para facilitar a remoo dos resduos da amostra e possveis etiquetas; ii. Esfregar os frascos com gaspilho at retirada total dos resduos; iii. Esfregar com esponja de ao e detergente neutro a parte externa dos frascos; iv. Enxaguar com gua corrente para retirada do detergente (se necessrio, usar gua quente);

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Realizar enxague final com agua destilada ou deionizada; Colocar em estufa entre 70C e 100C, durante duas horas, para secagem ou deix-los secar com a boca para baixo sobre papel filtro absorvente; vii. Tampar e armazenar em local apropriado (livre de poeira).
v. vi.

No caso de recipientes novos descartveis ou de vidro, enxaguar cada frasco, tampa e batoque com gua destilada ou deionizada. Normalmente este procedimento suficiente para garantir a limpeza dos frascos. Entretanto necessrio realizar teste de branco de frascaria para atestar a limpeza dos frascos. b) Limpeza especial Os procedimentos especiais de lavagem so adotados para a limpeza dos recipientes para os ensaios de metais, fosfatos e fsforo total, compostos orgnicos (semivolteis e volteis), microbiolgicos e mutagenicidade. Ensaios de Metais
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.

Imergir os frascos e suas tampas em soluo de cido ntrico 10%, mantendo-os assim por no mnimo 48 horas; Retir-los da soluo, escoando-os bem; Enxagu-los com gua destilada ou deionizada; Deix-los secar com a boca para baixo sobre papel filtro absorvente; Tampar e identificar o lote, que ficar aguardando o resultado do ensaio do branco de lavagem (item 4.1.3. Branco de Frascaria); Armazenar em local especfico apropriado (livre de poeira); Aps o resultado satisfatrio do ensaio de branco de frascaria, identificar cada frasco com o nmero de lote.

Recomenda-se, para cada lote, a realizao do ensaio de branco de lavagem para todos os metais de interesse, utilizando-se a mesma tcnica que ser empregada na determinao. Esta lavagem empregada nos recipientes para os ensaios de cromo hexavalente, metais, semimetais e metais dissolvidos (Anexo 1).

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Ensaios de fosfatos e fsforo total


1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.

Imergir os frascos e suas tampas em soluo de cido clordrico 10%, mantendo-os assim por no mnimo 48 horas; Retir-los da soluo, escoando-os bem; Enxagu-los com gua desmineralizada. Deix-los secar com a boca para baixo sobre papel filtro absorvente; Tampar e identificar o lote, que ficar aguardando o resultado do ensaio do branco de lavagem (item 4.1.3. Branco de Frascaria); Armazenar em local especfico apropriado (livre de poeira); Aps o resultado satisfatrio do ensaio de branco de frascaria, identificar cada frasco com o nmero de lote.

Ensaios de Compostos Orgnicos Semivolteis


1. 2. 3. 4. 5.

6.

7. 8. 9

Remover os resduos dos frascos, com gua corrente quente para retirar a sujeira grosseira; Lavar com detergente enzimtico 0,5%, ou similar, com auxlio de gaspilho e esponja de limpeza; Enxaguar abundantemente com gua corrente quente (no mnimo 5 vezes) ou na mquina de lavar com gua quente (no mnimo 2 vezes); Enxaguar com gua destilada; Colocar os frascos em forno mufla (270C - 300C) por no mnimo 8 horas, para remover completamente qualquer composto orgnico. Uma alternativa para a remoo desses compostos a rinsagem dos frascos com metanol ou isopropanol; As tampas e os septos devem ser lavados pelo mesmo procedimento, entretanto o processo de secagem deve ser realizado em estufa em temperatura inferior 100oC. Tampar e identificar o lote que ficar aguardando o resultado do ensaio do branco de lavagem (item 4.1.3 Branco de Frascaria); Armazenar em local protegido (livre de poeira); Aps o resultado satisfatrio do ensaio do branco de frascaria, identificar cada frasco com o nmero do lote.

Esta lavagem empregada nos recipientes para os ensaios de fenis por cromatografia, herbicidas fenoxicidos, PAH (Hidrocarbonetos Policclicos Aromticos)/Benzo(a)Pireno, Pesticidas organoclorados/PCB (Bifenilas policloradas) e Pesticidas organofosforados (Anexo 1).

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Ensaio de Compostos Orgnicos Volteis


1. 2. 3. 4. 5.

6.

Remover os resduos dos frascos, com gua corrente quente para retirar a sujeira grosseira; Lavar com detergente enzimtico a 0,5% ou similar, com auxlio de gaspilho e esponja de limpeza; Enxaguar com gua corrente quente (no mnimo 5 vezes), ou enxaguar na mquina de lavar com gua quente (no mnimo 2 vezes); Enxaguar com gua destilada e secar em estufa em temperatura entre 100oC - 150C por no mnimo1 hora. O mesmo procedimento deve ser aplicado ao septo de teflon (se reutilizado) e a tampa, entretanto o processo de secagem deve ser realizado em estufa em temperatura inferior 105oC. Armazenar em local protegido (livre de poeira)

Esta lavagem empregada nos recipientes do tipo V Vial (COV e THM) (Anexo 1). Ensaios Microbiolgicos Limpeza dos recipientes Lavar os frascos e tampas, interna e externamente, com uma soluo de detergente alcalino 0,1% ou equivalente, com o auxlio de um gaspilho; 2. Enxaguar os frascos cerca de dez vezes em gua corrente e uma vez final com gua destilada ou deionizada, enchendo e esvaziando totalmente os frascos; 3. Acondicionar as tampas e os frascos em posio vertical e com o bocal voltado para baixo para retirar o excesso de gua.
1.

Aps a lavagem necessria a adio de preservantes e a esterilizao dos frascos para garantir que estejam livres de contaminao microbiolgica. Deve ser testada a eficincia do processo de autoclavao com bioindicadores. Adio de Preservantes Os frascos para a coleta de amostras destinadas a anlises microbiolgicas de guas e efluentes clorados devem conter um

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agente neutralizador de cloro residual (tiossulfato de sdio) e um agente quelante (EDTA etileno diamino tetracetato de sdio), em quantidades adequadas para neutralizar cloro e quelar metais pesados que possam estar presentes nessas amostras. Para anlise de efluentes clorados, adicionar tiossulfato de sdio em quantidades suficientes para obter-se uma concentrao de 100mg/L na amostra (por exemplo, 0,1mL de uma soluo 10% para 120mL de amostra), o que ir neutralizar at 15mg/L de cloro residual. Para coleta de gua tratada, a concentrao de tiossulfato de sdio pode ser reduzida: 0,1mL de uma soluo 3% para 120mL de amostra iro neutralizar at 5mg/L de cloro residual. necessrio conhecer previamente os teores de cloro residual de novos pontos de amostragem para que os frascos de coleta possam ser preparados com as quantidades adequadas de tiossulfato de sdio. Um agente quelante deve ser adicionado, caso a amostra possa conter metais pesados (cobre, nquel, zinco etc) em concentraes superiores a 0,1 mg/L. Nessa situao provvel, adicionar 0,3mL de uma soluo 15% de EDTA para cada 120mL de amostra. Essas solues devem ser adicionadas aos frascos de coleta antes da esterilizao. Aps a adio dos agentes quelantes e neutralizadores de cloro livre, o frasco fechado e a tampa e o gargalo recobertos com papel alumnio, de modo que fiquem protegidos da contaminao pelo manuseio, durante todo o processo de coleta. importante que a tampa esteja ligeiramente frouxa para evitar a ruptura do frasco, facilitar a circulao de vapor e eliminar o ar do seu interior no processo de esterilizao. Aps o processo de esterilizao, rosquear completamente a tampa do frasco e fixar o papel alumnio com elstico. Para a coleta de lodo de esgoto e sedimento no h necessidade de adio de reagentes. Autoclavar os frascos e proteger a tampa e gargalo com um pedao de papel alumnio. Depois de autoclavado, manusear o frasco sem a remoo do papel alumnio para evitar a sua contaminao.

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Esterilizao dos recipientes Para a esterilizao dos recipientes, devem ser observados os cuidados necessrios em funo do tipo de recipiente, como descrito a seguir:

i. Recipientes de vidro neutro Esterilizar em estufa temperatura de 170oC a 180C, durante duas horas. ii. Recipientes de plstico autoclavvel

Autoclavar a 121C e 0,1 MPa (1 atm), durante 15 a 30 minutos. Deve ser realizado teste de esterilidade dos frascos e teste de neutralizao do cloro residual livre, aps a esterilizao. Preparo e esterilizao da mecha para ensaios de patgenos (Tcnica de Moore) A mecha confeccionada em tecido de crepe ou gaze esterilizada, que deve ser dobrado cinco vezes, mantendo as dimenses de 23cm de largura x 46cm de comprimento em cada dobra (Fig. 6). A partir da base inferior de 23cm, cortam-se 5 tiras de 4,5cm de largura e 36cm de comprimento, deixando-se 10cm livres na parte superior sem cortar, onde ser fixado o fio de nilon para servir de suporte para a mecha (Fig. 7). A metragem do fio de nilon utilizada dever ser determinada de acordo com a profundidade do ponto de coleta a ser amostrado, garantindo que a mesma fique totalmente imersa. Para as coletas em rios, represas ou crregos, as mechas devero possuir em seu interior um peso fixado, para facilitar a imerso da mesma. Embrulhar em papel kraft e autoclavar a 121C durante 15 minutos.

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Figura 6. Dimenses do tecido de gaze para a confeco da mecha para coleta de amostras para anlise de patgenos.

(A)

(B)

Figura 7. Mecha empregada na tcnica de Moore: (a) Esquema; (b) foto da mecha de gase com meio de transporte (Carry blair) (Foto: Carlos Jesus brando/CETESb).

Ensaios de mutagenicidade (Teste Ames) Limpeza dos recipientes Lavar os frascos e tampas de borossilicato, interna e externamente, com uma soluo de detergente tipo Extran alcalino 0,1%, com auxlio de um gaspilho; 2. Enxaguar de oito a dez vezes com gua corrente, at que visualmente no se perceba o resduo do detergente; 3. Lavar com uma soluo de cido sulfrico/cido ntrico 10% (6+1); 4. Enxaguar de oito a dez vezes em gua corrente e 1 vez em gua destilada ou deionizada;
1.

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Acondicionar as tampas e os frascos com a boca voltada para baixo, para retirar o excesso de gua; 6. Secar em estufa temperatura acima de 50C; 7. No necessria a posterior esterilizao dos recipientes.
5. 1.

2. 3. 4. 5. 6. 7.

8.

Fibras de Blue Rayon Lavar as fibras de Blue Rayon (fibras de rayon ligadas covalentemente ao tiosulfato de cobre ftalocianina) em bquer com gua deionizada usando basto de vidro por 5 minutos, por quatro vezes; Remover o excesso de gua com auxlio de papel filtro; Imergir as fibras em soluo metanol/amnio (50+1 v/v) e deixar em agitador mecnico por 1 hora; Aps esse perodo, descartar a soluo de solventes. Repetir essa etapa por duas vezes; Imergir o Blue Rayon em soluo metanol/amnio (50+1 v/v) por uma noite; Lavar o Blue Rayon por imerso com metanol por 1 hora, agitando ocasionalmente; Retirar o Blue Rayon e secar em capela todo o solvente residual. A soluo de metanol deve ser concentrada em evaporador rotatrio para posterior verificao da presena de possveis resduos que possam interferir na anlise (branco); Armazenar o Blue Rayon em um bquer protegido da luz.

3.3.2 Transporte e Armazenamento


O transporte das amostras coletadas deve ser realizado sob refrigerao, assim como a etapa de armazenamento at o momento de ensaio, observando as excees especificadas no Anexo 1.

3.4 Segurana nos Trabalhos de Campo


Os trabalhos de campo so realizados em condies e locais muito variados, podendo resultar em acidentes. Para que os riscos de acidentes possam ser reduzidos, deve-se alertar e treinar os tcnicos envolvidos, providenciando os equipamentos de proteo individuais (aventais, botas, luvas, culos de segurana, capa de chuva, protetor solar) e coletivos adequados ao trabalho a ser realizado, bem como ter disponvel uma caixa de primeiros socorros.

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A seguir, so feitas consideraes e recomendaes para algumas das atividades que oferecem maiores riscos de acidentes para os trabalhos em campo.

3.4.1 Transporte Rodovirio


O prprio deslocamento do tcnico e dos equipamentos ao local de amostragem oferece grandes riscos. No s os inerentes ao deslocamento, como os decorrentes do transporte concomitante do material de coleta, principalmente quando houver embarcao, equipamentos especiais, frascos de vidro e reagentes para a preservao de amostras. Esses materiais no devem ser transportados junto aos passageiros. Recomenda-se armazenar adequadamente os materiais, de preferncia, no porta-malas ou na caamba do veculo. A capacidade mxima de peso e volume do veculo deve ser observada. obrigatria a utilizao de cinto de segurana, mesmo em pequenos trajetos, conforme exige a legislao vigente. Os frascos que acondicionam os reagentes utilizados na preservao de amostras devem ser preferencialmente de plstico e com batoques de vedao para impedir vazamentos. No caso de serem de vidro, os frascos devem ser calados e protegidos adequadamente para no se quebrarem durante o transporte.

3.4.2 Acesso aos Pontos de Amostragem


Locais de difcil acesso e prximos a pontes, estradas movimentadas e locais de trfego intenso de mquinas etc., podem aumentar a probabilidade de acidentes, muitas vezes evitveis. Uma ponte, por exemplo, pode constituir-se em caminho mais fcil para se atingir o meio de um rio e retirar a amostra. Na sua maioria, porm, esses locais so muito movimentados, h estreitamento de pista e pequena faixa de segurana para pedestres, o que dificulta a parada do veculo e oferece riscos aos tcnicos que executam os trabalhos. Por isso, a coleta em pontes deve ser precedida da colocao de dispositivo de sinalizao adequado, que proporcione proteo contra veculos em trnsito. Regies com muita vegetao, nas quais o acesso aos pontos de coleta realizado por meio de trilhas, oferecem maior risco de picadas de insetos e mordeduras de cobras ou outros animais. Portanto, nesses

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locais a ateno deve ser redobrada e deve-se usar vestimenta adequada, como calas compridas, botas, perneira, chapu etc. Repelentes para insetos podem ser utilizados, desde que sejam usadas luvas durante o manuseio das amostras para ensaios qumicos, a fim de evitar a contaminao das mesmas.

3.4.3 Embarcaes
A utilizao de embarcaes para coleta de amostras em rios, represas, reservatrios, reas estuarinas e no mar muito frequente. Por isso, a verificao das condies gerais da embarcao, da carreta e dos seus acessrios importante para se evitar atrasos e acidentes durante o trajeto e o percurso embarcado at o local de amostragem. Devem ser verificadas as condies de funcionamento do conjunto de equipamentos. So itens obrigatrios: motor, tanque e mangueira de combustvel, bateria, tampes de casco, remos, colete salva-vidas em nmero suficiente para toda a tripulao, ncora, extintor de incndio, cordas, luzes de sinalizao noturna da embarcao e da carreta e estepe para a carreta. Recomenda-se ainda outros acessrios, como bssola, ecobatmetro, GPS, telefone celular, sistema de radiocomunicao, sinalizadores de fumaa colorida, alm de peas de manuteno bsica do motor (velas, caixa de ferramentas, leo 2 tempos para o motor etc.). Toda documentao da embarcao e da carreta, bem como a habilitao nutica dos operadores das embarcaes, devero estar em ordem. Deve-se levar em considerao a compatibilidade da localizao dos pontos com a categoria da habilitao nutica do condutor. Quando o trabalho exigir a operao da embarcao longe da costa ou em reas, rios ou reservatrios, sob jurisdio da Marinha do Brasil necessrio estabelecer um ponto de apoio em terra (marinas, barragens, clubes, Capitania dos Portos, Polcia Militar/Ambiental, etc.), informando o plano de trabalho e a rota de navegao, um nmero de celular ou a frequncia do rdio para contato. Recomenda-se, ainda, obter informaes prvias sobre as condies meteorolgicas da regio e ter em mos mapas ou cartas nuticas e tbua de mars. No caso de amostragem de longa durao, importante ter a bordo gua potvel e alimentao leve. Recomenda-se que a equipe de trabalho tenha treinamento em natao bsica e sobrevivncia de nufragos.

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3.4.4 Manipulao de Reagentes e Solues


A preservao de amostras com a utilizao de reagentes qumicos tem provocado inmeros acidentes. Deve-se evitar a manipulao inadequada e a tcnica de pipetar o reagente com auxlio da boca, evitando-se com isso queimaduras nas mos, corpo e nos ps, ataque ao esmalte dos dentes e a ingesto acidental do reagente. A quebra de frascos e pipetas de vidro poder ser evitada com a utilizao de frascos plsticos, tipo conta gotas ou pissete dosadoras, os quais permitem adicionar diretamente na amostra a quantidade necessria de reagente, sem o emprego de pipetas.

3.4.5 Amostras de Efluentes (industriais e domsticos) e Resduos Slidos


Quando os pontos de amostragens esto localizados dentro das indstrias, os tcnicos envolvidos estaro expostos a todos os riscos de acidentes inerentes quela rea. Portanto, devem receber treinamento adequado para a sua permanncia, bem como estar munidos de equipamentos de segurana exigidos pela indstria. Como os efluentes lquidos podem apresentar diversos compostos qumicos e/ou constituintes infecto-contagiosos, os tcnicos devem estar preparados para manuse-los de forma segura, prevenindo-se contra todos os tipos de acidentes, quer do ponto de vista txico ou explosivo, quer do ponto de vista de contaminao e riscos biolgicos. Como exemplo, efluentes contendo cianeto e arsnio apresentam toxicidade elevadas, mesmo em baixas concentraes; solventes, em geral, apresentam risco de exploso; vrios compostos qumicos podem ser carcinognicos ou apresentar risco de queimadura; esgotos e resduos domsticos podem conter microrganismos patognicos. Portanto, os tcnicos precisam ser treinados para as situaes de emergncia que podem ocorrer nos locais das amostragens, como as indstrias, as estaes de tratamento de esgotos, os aterros sanitrios e industriais e as plantas de incinerao de resduos slidos.

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3.5 Preparo de Solues e Reagentes


3.5.1 Formol Neutralizado
importante destacar que existem diferenas entre as solues de formol (formalina) e de formaldedo. O formol contm em sua composio em mdia 40% de formaldedo. Por esse motivo uma soluo de formol 10% (formalina 10%) equivale a uma soluo de formaldedo a 4%. Portanto, para fins de padronizao no texto deste Guia todas essas solues foram expressas com base em formol. a) Procedimento para o emprego em amostras de plncton (fitoplncton e zooplncton): Adicionar 5g de bicarbonato de sdio (ou 20g de tetraborato de sdio) em 1L de formol P.A. b) Procedimento para o emprego em amostras de bentos: Medir o pH do formol com fita indicadora de pH ou pHmetro; Acrescentar, aos poucos, quantidade suficiente de bicarbonato de sdio (ou tetraborato de sdio) para que o pH torne-se 7.

3.5.2 Formol Neutralizado, com Sacarose


Diluir 40g de sacarose (acar) em 1L de formol P.A. previamente neutralizado com bicarbonato de sdio ou tetraborato de sdio.

3.5.3 Meio de Transporte Cary e Blair (Tcnica de Moore)


Frmula: 1,5g de tioglicolato de sdio (C2H3NaO2S),1,1g de fosfato de sdio dibsico anidro (Na2HPO4), 5g de cloreto de sdio (NaCl) e 5g de agar.

Pesar os ingredientes acima ou pesar meio desidratado (Cary and Blair Transport Medium) na quantidade especificada pelo fabricante e acrescentar 991mL de gua destilada; Aquecer em banho-maria fervente, com agitao constante at completa dissoluo, mantendo o meio por mais 15 minutos, para esteriliz-lo; Estabilizar o meio de cultura a uma temperatura de 50oC a 55C, em banho-maria; Adicionar, assepticamente, 9mL de cloreto de clcio (CaCl2)1%; Ajustar o pH final 8,4 0,2;

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Distribuir volumes de 300mL em sacos plsticos estreis de 20L; Fechar os sacos e etiquetar com o nome do meio de cultura, nome do responsvel pelo preparo, datas de preparo e validade e o nmero do lote; Armazenar em refrigerador de 2oC a 8C; Vlido por 15 dias.

3.5.4 Soluo de Acetato de Zinco (Zn (C2H3O2)2) 2M


Pesar 220g de acetato de zinco em bquer de 1L; Adicionar cerca de 500mL de gua destilada; Agitar at dissoluo; Transferir para balo volumtrico de 1L; Completar o volume com gua destilada.

3.5.5 Soluo de cido Clordrico (HCl) 1+9 (10%)


Em balo volumtrico de 1L, adicionar aproximadamente 600mL de gua destilada; Acrescentar, vagarosamente, 100mL do cido concentrado; Completar o volume para 1L com gua destilada.

3.5.6 Soluo de cido Clordrico (HCl) 1+1 (50%)


Em balo volumtrico de 1L, adicionar aproximadamente 400mL de gua destilada; Acrescentar, vagarosamente, 500mL do cido concentrado; Completar o volume para 1L com gua destilada.

3.5.7 Soluo de cido Ntrico (HNO3) 1+9 (10%)


Em balo volumtrico de 1L, adicionar aproximadamente 600mL de gua destilada; Acrescentar, vagarosamente, 100mL do cido ntrico concentrado; Completar o volume para 1L com gua destilada.

3.5.8 Soluo de cido Ntrico (HNO3) 1+1 (50%)


Em balo volumtrico de 1L, adicionar aproximadamente 400mL de gua destilada; Acrescentar, vagarosamente, 500mL do cido ntrico concentrado; Completar o volume para 1L com gua destilada.

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3.5.9 Soluo de cido Sulfrico (H2SO4) 1+1 (50%)


Em balo volumtrico de 1L, adicionar aproximadamente 400mL de gua destilada; Acrescentar, vagarosamente, 500mL do cido sufrico concentrado; Completar o volume para 1L com gua destilada.

3.5.10 Soluo de cido Sulfrico (H2SO4) 1+9 (10%)


Em balo volumtrico de 1L, adicionar aproximadamente 600 mL de gua destilada; Acrescentar, vagarosamente, 100mL de cido sulfrico; Completar o volume de gua destilada para 1L.

3.5.11 Soluo de cido Sulfrico (H2SO4) / cido Ntrico (HNO3) 10% (6+1)

Misturar 6 partes da soluo de cido sulfrico 10% e 1 parte da soluo de cido ntrico 10%.

3.5.12 Soluo Alcali-Iodeto-Azida


Em balo volumtrico de 1L, dissolver 500g de hidrxido de sdio (NaOH) P.A. e 150g de iodeto de potssio (KI) P.A. em gua destilada (em banho de gua fria ou gelo); Acrescentar 10g de azida sdica (NaN3), dissolvidos em 40mL de gua destilada; Completar o volume para 1L com gua destilada.

NOTA: No caso de amostras de gua do mar, no necessria a adio de azida sdica.

3.5.13 Soluo de lcool 70 GL


Diluir o lcool comercial 96 GL em gua destilada; Medir seu grau continuamente com um alcometro (segundo GayLussac), at que se atinja 70GL. Dissolver 1g de carbonato de magnsio finamente pulverizado em 100mL de gua destilada.

3.5.14 Soluo de Carbonato de Magnsio (MgCO3) 1%


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3.5.15 Soluo de Cloreto de Clcio Dihidratado (CaCl2.2H2O) 1%


Em um balo volumtrico de 100 mL dissolver 1g de cloreto de clcio dihidratado em 100mL de gua destilada; Homogeneizar at a completa dissoluo do sal.

3.5.16 Soluo de Corante Rosa-de-bengala 0,1%


Adicionar 1g do corante em 1L de soluo de formol 10% ou etanol 70-95oGL.

3.5.17 Soluo de Detergente Alcalino 0,1 %


Em balo volumtrico de 1L, adicionar aproximadamente 900mL de gua destilada; Acrescentar 1mL do detergente; Completar o volume para 1L com gua destilada.

3.5.18 Soluo de Detergente Enzimtico 0,5 %


Em balo volumtrico de 1L, adicionar aproximadamente 900mL de gua destilada; Acrescentar 5mL do detergente; Completar o volume de gua destilada para 1L.

3.5.19 Soluo de EDTA (C10H16N2O8) 15%


Em balo volumtrico de 1L, dissolver 150g de EDTA em gua destilada; Completar o volume para 1L com gua destilada.

3.5.20 Soluo de Formol 4%


Em uma proveta, diluir 1 parte de formol P.A. em 24 partes de gua destilada. Em uma proveta, diluir 1 parte de formol P.A. em 19 partes de gua destilada. Em uma proveta, diluir 1 parte de formol P.A. em 9 partes de gua destilada.

3.5.21 Soluo de Formol 5%


3.5.22 Soluo de Formol 10%


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3.5.23 Soluo de Formol 20%


Em uma proveta, diluir 1 parte de formol P.A. em 4 partes de gua destilada.

3.5.24 Soluo de Fluoreto de Potssio 20%


Em balo volumtrico de 1L dissolver 200g de fluoreto de potssio (KF.2H20) P.A. em gua destilada. Completar o volume para 1L com gua destilada.

3.5.25 Soluo de Hidrxido de Sdio (NaOH) 10M


Dissolver 400g de hidrxido de sdio (NaOH) em 500mL de gua destilada; Transferir para um balo volumtrico de 1L; Completar o volume para 1L com gua destilada.

3.5.26 Soluo de Amido


Pesar separadamente 2g de amido solvel P.A. e 0,2 g de cido saliclico P.A.; Transferir para bquer de 200mL. Adicionar 10mL de gua deionizada e agitar at dissoluo; Adicionar 95mL de gua deionizada quente; Levar a aquecer at a fervura, durante 5 minutos; Deixar esfriar e acondicionar em frasco de polipropileno, ao abrigo da luz.

3.5.27 Soluo de Lugol (iodo ressublimado e iodeto de potssio - KI)


Adicionar 10g de iodo puro, 20g de iodeto de potssio e 20g de cido actico glacial, em 200mL de gua destilada; Manter ao abrigo da luz.

3.5.28 Soluo Metanol/Amnio (50+1 v/v)


Acrescentar 20mL de hidrxido de amnia a 1L de metanol. Dissolver 400 g de MnSO4.2H2O em gua destilada; Filtrar e completar o volume com gua destilada para 1L em balo volumtrico.

3.5.29 Soluo de Sulfato Manganoso 2,14 M


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3.5.30 Soluo de Tiossulfato de Sdio (Na2S2O3) 0,0125 N padronizada


Pesar 3,1025g de tiossulfato de sdio P.A. em bquer de 500mL; Adicionar cerca de 400mL de gua deionizada e agitar at dissoluo; Transferir para balo de 1000mL; Adicionar 1 g de Hidrxido de Sdio P.A. e agitar at dissoluo; Completar o volume para 1L com gua deionizada, homogeneizar e guardar em frasco escuro.

3.5.31 Soluo de Tiossulfato de Sdio (Na2S2O3) 3%


Em balo volumtrico de 1L dissolver 30 g de tiossulfato de sdio (Na2S2O3) em 100mL de gua destilada; Completar o volume para 1L com gua destilada.

3.5.32 Soluo de Tiossulfato de Sdio (Na2S2O3) 10%


Em balo volumtrico de 1L dissolver 100g de tiossulfato de sdio (Na2S2O3) em 100mL de gua destilada; Completar o volume para 1L com gua destilada.

3.5.33 Soluo Transeau


Acrescentar seis partes de gua destilada, trs partes de lcool etlico 95o GL e uma parte de formol P.A..

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CApTULO

4 CONTROLE DE QUALIDADE NA AMOSTRAGEM


A amostragem considerada como um fator crtico em todo o processo analtico; na verdade frequentemente o ponto mais frgil do processo e necessita de cuidado especial. A preocupao com a real influncia da coleta nos resultados tem sido cada vez maior, dentre outros motivos, em consequncia dos processos de acreditao dos ensaios na NBR ISO/IEC 17.025. Vrios rgos internacionais tm proposto formas de garantir a qualidade dos procedimentos de coleta, como por exemplo, o EURACHEM que, em 2007, publicou o documento Medidas de incerteza de amostragem um guia de mtodos e estratgias (RAMSEY & ELLISON, 2007), propondo uma metodologia para a estimativa da incerteza associada aos procedimentos de coleta. Seguindo essa tendncia o INMETRO publicou, no final de 2009, os critrios para acreditao da amostragem de guas e matrizes ambientais com o intuito de orientar os laboratrios que esto requerendo acreditao nessa rea (INMETRO NIT-DICLA-057, 2009). Os controles de qualidade do processo de amostragem devem ser estabelecidos antecipadamente atividade de coleta e ter seus critrios de aceitao e de tomada de deciso definidos. A utilizao destes controles deve ser planejada considerando os analitos de interesse, as caractersticas da amostragem e os custos envolvidos. Esse planejamento fundamental para garantia da integridade e representatividade da amostra que trazida ao laboratrio para anlise. Para se estabelecer um sistema de qualidade da amostragem consistente, vrios aspectos devem ser considerados, uma vez que influenciam direta e indiretamente na representatividade da amostra. Esses aspectos dizem respeito adoo de procedimentos que

controle de qualidade na amostragem

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consigam detectar interferncias que possam ocorrer no processo de amostragem. Os principais controles de qualidade adotados durante a amostragem so descritos a seguir.

4.1 Brancos
So controles realizados para avaliar a presena de contaminao em partes especficas dos procedimentos de coleta. Normalmente usada gua deionizada, com comprovada iseno dos compostos que sero avaliados. Nesse tipo de controle, a presena de resultados positivos para um analito especfico pode indicar que ocorreu contaminao similar nas demais amostras.

4.1.1 Branco de Campo e de Viagem


O branco de campo usado para a verificao de contaminaes ambientais que podem ser adicionadas s amostras durante os procedimentos de coleta. O branco de viagem verifica a ocorrncia de contaminao durante o transporte (laboratrio campo laboratrio). So preparados no laboratrio trs frascos de branco (A, B, e C) com gua deionizada. O frasco A encaminhado imediatamente para anlise e os demais vo a campo. No ponto de coleta, o frasco B permanece na caixa de transporte, enquanto o frasco C retirado, aberto e exposto ao ambiente durante todo o procedimento de coleta. Ao final, o frasco C fechado, armazenado na caixa de transporte juntamente com as demais amostras coletadas e o frasco B, sendo todos submetidos ao processo analtico requerido. Recomenda-se a realizao de pelo menos um controle (trs frascos) para cada viagem realizada. Os resultados de cada controle so obtidos conforme descrito a seguir: (B A) = Branco de viagem (C B A) = Branco de Campo

4.1.2 Branco de Equipamentos


Os procedimentos de branco de equipamento podem ser usados tanto para avaliar a eficincia da lavagem dos equipamentos de coleta em laboratrio como em campo (rinsagem). No caso da realizao em campo, serve para verificar a eficincia da lavagem realizada nos equi-

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pamentos entre os pontos de coleta, minimizando a possibilidade de contaminao cruzada. Para sua realizao, utiliza-se gua deionizada, que ao fim do processo de lavagem usada como ultima gua de enxgue do equipamento, devendo ser coletada e analisada para o(s) parmetro(s) de interesse. As amostras devem apresentar resultados abaixo do limite de quantificao do mtodo.

4.1.3 Branco de Frascaria


usado para verificar a possibilidade da contaminao da amostra pelos frascos de coleta. Podem ser usados para verificar a presena de contaminao de frascos descartveis ou para avaliar a eficincia da lavagem de frascos reutilizveis. Aps preservao dos frascos (quando pertinente ao mtodo), os mesmos so encaminhados ao(s) laboratrio(s), para realizao dos ensaios de interesse, devendo apresentar resultados abaixo do limite de quantificao do mtodo analtico. No caso do ensaio de branco para compostos orgnicos semi-volteis, os frascos devem ser preenchidos com solvente (usualmente o diclorometano) e encaminhados para o laboratrio para verificar a ausncia de contaminao, indicando assim a eficincia do procedimento de lavagem.

4.1.4 Branco de Sistema de Filtrao


Para anlise de metais dissolvidos deve-se averiguar se a unidade filtrante, a ser empregada na filtrao das amostras em campo, est isenta dos analitos de interesse. Retira-se uma quantidade representativa de filtros do lote (aproximadamente 1% a 4% do total), que so pr-condicionados pela filtrao de 50mL de gua deionizada, volume esse desprezado. Em seguida, filtra-se 100mL de gua deionizada, que deve ser coletada, preservada e encaminhada ao laboratrio para anlise dos analitos de interesse. O lote ser aprovado se os resultados estiverem abaixo do limite de quantificao.

controle de qualidade na amostragem

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4.2 Duplicata de Campo


usada para medir a preciso e repetitividade dos procedimentos de coleta, atravs da comparao dos resultados da anlise de duas amostras coletadas de um mesmo local, que so encaminhadas ao laboratrio como amostras cegas (USEPA, 2005). So retiradas duas amostras ao mesmo tempo de um local (R1 e R2), as quais so encaminhadas ao laboratrio e analisadas. A variao entre os resultados das duplicatas (RPD) calculada de acordo com a frmula a seguir (AUSTRALIA, 2007): Equao 2 De um modo geral, so consideradas normais variaes no resultado na ordem de 20% (AUSTRALIA, 2007). Porm possvel e em alguns casos recomendvel definir outros critrios de avaliao, como por exemplo, no caso de ensaios biolgicos, onde devem ser avaliados e estabelecidos, durante a validao, critrios adequados realidade do ensaio.

4.3 Temperatura de Transporte e Armazenamento


Na maioria dos casos, as amostras devem ser transportadas sob refrigerao. Procedimentos de controle de temperatura devem ser realizados para garantir que o sistema adotado eficiente, tais como: medida da temperatura de frasco controle (gua deionizada ou glicerina) ou utilizao de datalog na caixa trmica, equipamentos esses adequadamente calibrados. A temperatura das amostras deve ser avaliada no momento de chegada ao laboratrio pela medida da temperatura do frasco controle ou registros do datalog e o valor obtido deve ser relacionado temperatura da gua e do ambiente no momento da coleta e ao tempo de armazenamento. As amostras devem ser analisadas o mais rapidamente possvel, quando da sua chegada ao laboratrio; entretanto, em determinadas situaes, as amostras que possuem prazo de validade mais longo podem ser armazenadas em cmara fria ou geladeira at o momento do ensaio, sendo que a temperatura desses equipamentos deve ser controlada por termmetros calibrados e adequadamente registrados, para fins de rastreabilidade.

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4.4 Incerteza da Amostragem


O termo incerteza da amostragem usado para expressar as variabilidades temporal, espacial e inerente da amostra coletada. Para o clculo de incerteza de amostragem, uma das metodologias aplicadas a publicada pelo EURACHEM em 2007, a qual baseada na replicao dos procedimentos de amostragem ou partes deles (rplica de amostras), conforme mostra a Figura 8. Esse mtodo o mais adequado para fins ambientais, pois considera que os analitos investigados podem variar em funo do tempo e do espao.

ponto de coleta

amostra 1

amostra 2

anlise 1

anlise 2

anlise 3

anlise 4

Figura 8. esquema de replicata para clculo de incerteza da amostragem.

Clculo da incerteza A incerteza obtida por meio do desvio padro relativo (RSD), que calculado pela diferena relativa entre as duplicatas de cada etapa do esquema proposto na Figura 8 (NORWAY, 2007, p. 18-19). Cada duplicata produz os resultados xi1 e xi2.

O valor absoluto Di (da diferena entre cada duplicata calculado para cada etapa: Di = | xi1 xi2 | Equao 1

controle de qualidade na amostragem

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A seguir calcula-se a mdia

de cada duplicata:

Equao 2 A partir das equaes 1 e 2, calcular a diferena relativa, di , atravs da equao:

A seguir, calcular a mdia da diferena relativa, d, das n duplicatas realizadas

O desvio padro relativo, RSD, calculado usando a constante estatstica de 1,128 (quando se analisa duplicatas):

A Tabela 2 resume os controles de qualidade requeridos no processo de amostragem.

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Tabela 2. Resumo dos controles de qualidade requeridos para amostragem


Ao no laboratrio Ao em campo Recomendao mnima

Tipo de Controle

Contaminao investigada

Contaminao ambiental Preparo de 3 frascos A, B e C (item 4.1.1) Branco de Viagem: levar fechado a campo, em caixa trmica, juntamente com as demais amostras. No retirar nem manusear em campo. Transportar ao laboratrio para anlise. No Aplicvel Lavagem entre pontos de coleta item 4.1.2 No Aplicvel

Branco de campo e de viagem

Branco de Campo: abrir o frasco de coleta e exp-lo ao ambiente pelo mesmo perodo que a amostra. Fechar o frasco e transport-lo ao laboratrio para anlise.

controle de qualidade na amostragem

Contaminao durante o transporte Validao da lavagem item 4.1.2 No Aplicvel

1 jogo (3 frascos) por atividade ou a cada 10 amostras

Branco de equipamentos

Resduos aps lavagem dos equipamentos de coleta

1 vez por ano (quando utilizado 1 equipamento por ponto de coleta) toda vez que o equipamento for usado 1% a 4% do lote avaliado

Contaminao cruzada

Branco de frascaria Item 4.1.3

Contaminao nos frascos e avaliao dos procedimentos de lavagem Item 4.1.4 No Aplicvel

Branco do sistema de filtrao No Aplicvel

Contaminao durante o procedimento de filtrao

1% a 4% do lote avaliado

Duplicata de Campo

Preciso e repetitividade dos procedimentos de coleta

Item 4.2

1 para cada 20 amostras (5% do total)

(Fonte: EPA - Austrlia, 2007 adaptado)

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Determinao de Slidos Sedimentveis em campo - Cone Imhoff- Foto Carlos Jesus Brando/CETESB.

cAPTUlO

5 EQUIPAMENTOS DE AMOSTRAGEM
Nesse captulo so apresentados os diversos tipos de equipamentos de amostragem, sendo que as metodologias de coleta e as peculiaridades esto detalhadas nos captulos especficos de amostragem de guas superficiais, sedimentos, guas tratadas, efluentes lquidos e corpos hdricos receptores. Os equipamentos empregados nas determinaes em campo e na medio de vazo sero tratados em captulos especficos.

5.1 Amostradores de Superfcie


5.1.1 Balde de Ao Inox
O balde normalmente utilizado para amostragem na superfcie de corpos dgua em geral, deve ser confeccionado em ao inox AISI 316L polido, para evitar incrustaes nas costuras de solda, e apresentar volume adequado para a finalidade da amostragem (Fig. 9). Deve ser autoclavado para as coletas microbiolgicas (em poos freticos e reservatrios de gua potvel). Em amostragens onde no exigida a esterilidade do balde, o mesmo dever ser ambientado com gua do prprio local, antes da coleta propriamente dita.

equipamentos de amostragem

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Figura 9. Balde de ao inox (Foto: Carlos Jesus Brando/CetesB).

5.1.2 coletor com Brao Retrtil


utilizado em amostragem de guas superficiais, como em sadas de efluentes, em locais de coleta de difcil acesso por meio de outros equipamentos (Fig. 10). O brao retrtil permite que se alcance o local desejado para coleta, mesmo permanecendo na margem. Dependendo dos ensaios a serem realizados, o copo coletor pode ser de plstico (plstico inerte), acrlico ou ao inox AISI 316L, e deve ser liso ou polido para evitar incrustraes.

(A)

(B)

(c)

Figura 10. Coletor com brao retrtil: (a) vista lateral do equipamento montado; (B) vista do balde e do brao retrtil desmontado; (C) vista superior do balde coletor (Fotos: Carlos Jesus Brando/CetesB).

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5.1.3 Batiscafo
Esse equipamento empregado para coletar amostras que no podem sofrer aerao, como aquelas destinadas aos ensaios de oxignio dissolvido e sulfetos, e permite coletar amostras superficiais ou subsuperficiais at 30 cm da lmina dgua. Coletas abaixo desta profundidade devem ser realizadas com amostradores de profundidade. Consiste de um tubo cilndrico, confeccionado em ao inox AISI 316L polido (Fig. 11), em cujo interior coloca-se um frasco de vidro de boca estreita e tampa esmerilhada de 300mL (frasco de DBO). A gua a ser amostrada entra por um tubo localizado na parte superior central da tampa e atinge o interior do frasco, permitindo que o ar contido seja expulso por um orifcio lateral medida que ele vai sendo preenchido com gua. O volume do batiscafo permite uma renovao da gua dentro do frasco de DBO, removendo assim todo o ar que poderia alterar os resultados.
(A) (B) (c)

Figura 11. Batiscafo: (a) Batiscafo fechado; (B) esquema ilustrativo em corte do equipamento; (C) Batiscafo aberto (Fotos: Carlos Jesus Brando/CetesB).

5.2 Amostradores de Profundidade (coluna dgua)


5.2.1 Garrafas de van Dorn e de Niskin
Esses equipamentos permitem a coleta de amostras na superfcie e em diferentes profundidades. Os tipos mais empregados so van Dorn e Niskin. No so indicados para ensaios que requerem grandes volumes de amostra e para coleta de organismos de maior mobilidade.

equipamentos de amostragem

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As garrafas podem ser confeccionadas com tubo cilndrico de PVC rgido, acrlico ou de ao inox AISI 316L polido com capacidade variadas, por exemplo de 2L, 6L e 10L (Fig. 12 e Fig. 13).

Figura 12. esquema de uma garrafa de van dorn (Fonte: CetesB, 1988).

Figura 13. garrafa de niskin (Foto: Carlos J. Brando /CetesB).

Mergulha-se a garrafa aberta em ambas as extremidades e, aps atingir a profundidade desejada, solta-se o mensageiro (Fig.14), que fecha hermeticamente o amostrador. Essas garrafas podem ser utilizadas para coleta tanto de fluxo vertical como horizontal, dependendo do sistema de desarme (Fig.15 e Fig.16). Para estudos de microdistribuio, devem ser empregadas as garrafas de fluxo horizontal, que podem ser arranjadas em srie.

(A) (B)

Figura 14. mensageiro: (a) equipamento industrializado; (B) mensageiro manufaturado (Fotos:Carlos Jesus Brando/CetesB).

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(A)

(B)

Figura 15. Garrafa de van Dorn de fluxo vertical: (A) Garrafa desmontada; (B) Garrafa montada (Foto: Carlos Jesus Brando/CetesB). (A) (B)

Figura 16. Garrafa de van Dorn de fluxo horizontal: (A) Garrafa desmontada; (B) Garrafa montada (Fotos: Carlos Jesus Brando /CetesB).

5.2.2 Armadilha de Schindler-Patalas (Trampa)


utilizada em estudos qualitativos e quantitativos da comunidade planctnica. Confeccionada em acrlico transparente (Fig. 17), tem o formato de cubo ou paraleleppedo e capacidades variveis (geralmente entre 5 e 30L). Apresenta uma rede de nilon em um de seus lados, com dimetro de poro conhecido, por onde a gua do local filtrada e os organismos planctnicos ficam retidos. Pode ser utilizada para obter amostras pontuais ou integradas da coluna dgua, sendo a operao deste equipamento detalhada no Captulo 6 (item 6.1.7.4 Comunidade Zooplanctnica).

equipamentos de amostragem

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Figura 17. armadilha de schindler-patalas (Foto: Carlos Jesus Brando/CetesB).

5.2.3 Bomba de gua


Apresenta a vantagem de se obter grandes volumes de gua e em diferentes profundidades e muito empregada na coleta de organismos zooplanctnicos. Para aplicao, submerge-se uma mangueira flexvel ligada a uma bomba de gua at a profundidade desejada, deixando-se passar gua do local em abundncia. Sua operao est descrita com mais detalhes no Captulo 6 (6.1.7.4 Comunidade Zooplanctnica).

5.2.4 Redes de Plncton


H vrios tipos de redes de plncton e, apesar de apresentarem melhorias importantes ao longo do tempo, modelos simples ainda so muito utilizados (Fig. 18). A rede tem a forma de um cone e as costuras devem ser feitas com cuidado, a fim de que os organismos no fiquem retidos nas dobras. Na extremidade inferior encaixa-se um copo (Fig. 19), que pode ser rosqueado e apresentar orifcios vedados com malha de nilon adequada para a reteno dos organismos planctnicos em estudo e para diminuir o acmulo de gua no interior do copo.

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(A)

(B)

Figura 18. rede de plncton: (a) vista frontal da rede e copo coletor; (B) vista lateral da rede e copo coletor (Fotos: Carlos Jesus Brando /CetesB). (A) (B)

Figura 19. Copo coletor de rede de plncton: (a) inox; (B) pvC (Foto: Carlos Jesus Brando / CetesB).

As redes mais indicadas so aquelas confeccionadas com malha de nilon monofilamento, que no so facilmente suscetveis s alteraes e deformidades. Trs cordis so amarrados equidistantemente na extremidade superior da rede (aro da boca de rede), aos quais se prende uma corda, que deve ser graduada quando se quer conhecer

equipamentos de amostragem

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a profundidade do arrasto. Redes pequenas podem apresentar uma haste lateral de tamanho fixo, ou um brao retrtil, para estudos qualitativos de organismos que vivem prximos s margens ou em vegetao. As caractersticas da rede (comprimento, largura, dimetro da boca, modelo, dimetro do poro da malha etc.) e o tipo de arrasto (horizontal, vertical, oblquo ou estratificado) devem ser definidos de acordo com o objetivo do estudo e com as caractersticas do local, especialmente o tamanho da abertura da malha, que vai variar em funo da classe de organismos que se deseja avaliar. Deve-se lembrar que, por mais finas que sejam as malhas, a capacidade da rede em reter os organismos est limitada a uma frao do plncton total, e no coleta toda a variedade de organismos existentes na massa dgua. Para estudos qualitativos, uma forma simples de coletar o plncton mergulhar a rede na gua, retirando-a e deixando escorrer a gua retida atravs da malha. Para medida quantitativa do plncton, necessrio medir a quantidade de amostra a ser filtrada, o que pode ser feito por meio de uma proveta, balde de inox AISI 316L polido ou de um recipiente qualquer de volume aferido. O ideal acoplar um fluxmetro calibrado (Fig. 20) entre o centro e o aro da boca da rede, que medir com maior preciso o volume de gua que passa pela rede. A rede amplamente empregada para estudos qualitativos do fitoplncton e quali-quantitativos do zooplncton; informaes quantitativas do fitoplncton geralmente so obtidas com amostras coletadas com garrafas. Detalhes sobre a coleta com redes de plncton encontram-se no Captulo 6 - Comunidades Fitoplanctnica e Zooplanctnica.

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Figura 20. Fluxmetro (Foto: Csar augusto m. roda/CetesB).

5.3 Amostradores de Fundo


Um bom amostrador de fundo (sedimentos) deve obter amostras representativas do sedimento, sendo que a escolha do equipamento mais apropriado depende das caractersticas do sedimento, volume e eficincia necessrios, e objetivos do estudo. Adequaes no desenho do equipamento, controle na velocidade de descida e conhecimento prvio do local so procedimentos que podem auxiliar para um bom trabalho de amostragem. A amostragem de sedimentos pode ser realizada utilizando-se pegadores ou testemunhadores (core sampler ou corer), que devem ser preferencialmente usados sobre uma superfcie de apoio (ex.: barco ou plataforma). Em geral, pegadores so utilizados em estudos da distribuio horizontal de variveis fsicas, qumicas e biolgicas dos sedimentos, enquanto que os testemunhadores adequam-se a estudos da distribuio vertical (em perfil) dessas mesmas variveis. Redes, delimitadores e substratos artificiais so amostradores exclusivos da biota aqutica associada aos substratos (bentos).

5.3.1 Pegador de Ekman-Birge


Este tipo de amostrador um dos mais utilizados em reservatrios, tanto pela facilidade de operao do equipamento, quanto por sua eficincia, e adequado para avaliao da contaminao de sedimentos finos de ecossistemas aquticos. Como se trata de um equipamento muito leve, no indicado para locais com correnteza moderada ou forte e em substrato duro.

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O desenho original foi feito por Ekman em 1911, posteriormente descrito por Birge em 1922 e modificado por Lenz em 1931 e 1932 (OSullivan e Reynolds, 2004). O pegador Ekman-Birge (Fig.21) constitudo por uma caixa, confeccionada preferencialmente em ao inoxidvel AISI 316L polido, onde se prendem duas garras em forma de concha e cujo mecanismo de fechamento funciona por meio do uso de mensageiro. No topo da caixa esto inseridas, por meio de dobradias, duas portinholas que se abrem na descida do pegador, para que ele ganhe velocidade, tenha melhor fixao no sedimento e previna a formao de ondas de choque. Essas portinholas se fecham na subida, prevenindo a lavagem da superfcie do sedimento e o extravasamento do material coletado.
(A) (B)

Figura 21. pegador ekman-Birge: (a) equipamento desmontado; (B) equipamento montado (Fotos: Csar augusto m. roda/CetesB).

O tamanho padro possui as dimenses de 15cm de largura x 15cm de comprimento x 15cm de altura, mas pode ser encontrado em verses maiores (15cm x 15cm x 23cm, 23cm x 23cm x 23cm e 30cm x 30cm x 30cm). Verses com altura maior que a largura so aconselhveis para coleta de sedimentos muito moles.

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Para armar o pegador, as garras devem ser puxadas para cima e um anel terminal ligado ao cabo de ao atado s garras deve ser enganchado em um pino localizado no topo do amostrador. O amostrador deve ser imerso perpendicularmente ao barco (que dever estar ancorado) ou plataforma fixa de onde for lanado. Uma vez no fundo, quando a corda estiver perfeitamente reta e esticada, lanar o mensageiro pela corda, que ativar o mecanismo de desarme, provocando o fechamento das garras e a captura do sedimento. preciso cuidado na armao do pegador, pois no existem travas de segurana e o fechamento se d rapidamente. O pegador Ekman-Birge necessita de pesos adicionais para sua perfeita penetrao em sedimentos mais grossos (arenosos), locais muito profundos ou com correnteza. Em locais com sedimentos finos (silte e argila, predominantemente), esse pegador tende a aprofundar-se demais, sendo necessrio lanar o mensageiro assim que este alcana o fundo, a fim de evitar o transbordamento da amostra. A verso modificada por Lenz (Fig. 22) permite o fracionamento da amostra de sedimento. Apresenta fendas horizontais equidistantes em um dos lados da caixa, onde encaixada uma chapa inteiria verticalmente para impedir a perda do material coletado. Para o fracionamento da amostra, essa chapa deve ser retirada e chapas adicionais de ao inoxidvel (de dimenses similares seco transversal do pegador) so inseridas horizontalmente nas fendas laterais, de modo a isolar somente a camada de sedimento de interesse (desprezando-se o restante).

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(A)

(B)

Figura 22. Pegador Ekman-Birge, modificado por Lenz: (A) Vista lateral do equipamento montado; (B) vista frontal do equipamento fechado com fracionador de sedimento inserido (Fotos: Csar augusto m. roda/CetesB).

5.3.2 Pegador Petersen e van Veen


Muito utilizados para amostragem de fundos de areia, cascalho e argila, so capazes de escavar (morder) substratos grossos devido ao seu peso elevado e sistema de alavanca. De acordo com a necessidade, como a existncia de uma forte correnteza no local, o peso do equipamento pode ser aumentado pela adio de peas metlicas. So construdos preferencialmente em ao inoxidvel AISI 316L polido e podem ser confeccionados em vrios tamanhos. Geralmente so manejados com o auxlio de um guincho fixo na borda da embarcao ou outro ponto de apoio. Por no possuirem travas de segurana, requerem cuidado no manuseio. O pegador Petersen possui um sistema de braos armados em pantgrafo que, quando tensionados, mantm aberta a caamba

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por meio de uma trava. Quando o pegador chega ao fundo, a tenso desaparece e libera a trava. O fechamento do pegador somente ocorre quando o cabo novamente tracionado para a retirada do pegador da gua, permitindo a coleta do sedimento. A verso modificada (Fig. 23) alterou o formato da seco transversal da caamba, de circular (formato original) para semicircular, e a posio dos braos.

Figura 23. Pegador Petersen modificado (Foto: Csar Augusto M. Roda).

O pegador van Veen difere do Petersen original por possuir um sistema de fechamento formado por corda ou corrente, e caamba em semicrculo (Fig. 24). A fixao dos braos na borda das garras fornece maior estabilidade na descida e no fechamento deste pegador, com relao ao pegador Petersen original. A presena de orifcios no topo da caamba minimiza a formao de ondas de choque na descida, evitando a lavagem da camada superficial do sedimento e o afastamento da epifauna, e permitindo maior velocidade de operao.

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Figura 24. pegador van veen (Foto: Csar augusto m. roda/CetesB).

5.3.3 Pegador Ponar


O pegador Ponar considerado o melhor equipamento para a coleta qualitativa e quantitativa do bentos em substrato grosso (Burton,1992), e o mais frequentemente usado, devido reduo na formao de ondas de choque. Pode ser encontrado em dois tamanhos: padro (rea de captura aproximada: 0,052m2) e pequeno (0,023m2) (petite Ponar). O primeiro requer guincho na operao e aconselhado para ambientes pristinos (maior diversidade bilogica), e o segundo indicado para ambientes poludos. Esse amostrador apresenta pino de segurana para manuseio e transporte, e formado por um par de garras que descem tensionadas por meio de um pino com mola e que fecham quando apropriadamente posicionadas no fundo. Possui placas laterais e uma tela no topo da caamba que previnem a perda de material no fechamento. Sobre a tela h ainda uma placa de borracha que impede a lavagem e consequente perda de material durante a subida (Fig. 25). Pesos adicionais podem ser acoplados ao equipamento a fim de estabilizar a sua descida.

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Figura 25. pegador ponar pequeno (Foto: mnica l. Kuhlmann/CetesB).

5.3.4 Pegador Shipek


Este amostrador consiste em um cilindro de ao, semelhante a um tambor cortado metade (longitudinalmente), e montado em um dispositivo provido de molas helicoidais de alta presso (Fig. 26). Quando as molas so acionadas, o cilindro gira rapidamente em 180, para dentro do sedimento, recolhendo a amostra superficial com um mnimo de distrbio. A amostra retirada fica bem protegida do efeito de lavagem que poderia ocorrer na subida do sistema.

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(A)

(B)

Figura 26. pegador shipek - (a) desmontado; (B) montado (Foto: CetesB).

5.3.5 Amostrador em Tubo ou Testemunhador


Apropriado para a coleta de sedimentos finos em gua doce, esturios e mares, em baixas e altas profundidades. considerado o mais adequado a estudos de dinmica e distribuio vertical dos elementos qumicos e biolgicos nessa matriz, pois provoca baixa perturbao no perfil do sedimento coletado e na interface sedimento-gua. mais eficiente em substrato compactado, com menor teor de gua, onde se obtm amostras ntegras. Requer embarcao e guincho, embora algumas verses menores possam ser operadas manualmente. Esse equipamento consiste de um cilindro, geralmente de ao inoxidvel AISI 316L polido, com tubo coletor interno de plstico resistente e inerte (ex.: acrlico, politetrafluoretileno teflon, cloreto de polivinil - PVC e polietileno de alta densidade). Pode ser simples ou mltiplo (tubos paralelamente acoplados); de dimetro e comprimento variveis; gravitacionais ou manuais. No modelo Kajak-Brinkhurst (K-B) (Fig. 27), encontra-se conectada uma ponteira cnica de borda cortante na extremidade inferior do cilindro de ao, onde se prende um retentor em forma de meia laranja. O retentor, fabricado com material flexvel, tem como funo deixar entrar a amostra e impedir a sua sada. Esse modelo operado com mensageiro, que o tcnico lana ao sentir que o equipamento penetrou adequadamente no sedimento. O mensageiro fecha uma vlvula, gerando um vcuo parcial dentro do tubo durante a retirada do amostrador do fundo, que ajuda a reter o sedimento. Para o funcionamento apropriado do mensageiro, a corda que prende o testemunhador deve estar esticada verticalmente superfcie da gua.

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O manuseio adequado normalmente requer dois tcnicos para perfeita estabilidade do equipamento, principalmente em locais com correnteza e mais profundos, e os modelos oceanogrficos, de maior porte, necessitam de guincho. Podem formar ondas de choque, minimizadas com a diminuio da velocidade de descida do equipamento que, por outro lado, pode provocar uma menor profundidade de penetrao. Em locais com correnteza ou profundos, recomenda-se que o modelo tenha aletas (para proporcionar maior hidrodinamismo) e permita a utilizao de pesos adicionais (se possvel no meio do equipamento), para evitar a inclinao durante a sua descida e aumentar a penetrao no substrato, respectivamente.

Figura 27. testemunhador modelo Kajak-Brinkhurst (K-B corer) (Foto: CetesB).

Maiores informaes sobre os mtodos de fracionamento de amostras obtidas com testemunhadores podem ser obtidas em MUDROCH e MACKNIGHT (1994). Modelos manuais (Fig. 28) so utilizados em ambientes rasos ou por megulhadores em locais profundos. Podem ser construdos com um tubo de PVC rgido de 25cm de dimetro e cerca de 50cm de comprimento, ou mais. Na extremidade inferior podem ser feitos recortes, para facilitar sua penetrao no sedimento, e prximo extremidade superior podem ser feitos dois recortes horizontais atravs dos quais se acopla uma barra para facilitar seu manuseio.

equipamentos de amostragem

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Figura 28. pegador manual (Fonte: CetesB, 1988).

5.3.6 Draga Retangular


A draga retangular apropriada para amostragem por arrasto, geralmente no ambiente marinho. Devido ao seu tamanho, necessita de guincho e embarcao apropriada, e indicada para a coleta de organismos de maior porte, como crustceos, equinodermos e macroalgas. Consiste de uma armao metlica, de dimenses variadas, qual se prende uma rede resistente, com malhas de abertura selecionadas conforme o material que se quer amostrar (Fig. 29). frente da armao h duas hastes que so unidas a um cabo, por onde feita a descida e a subida do equipamento. O equipamento lanado na gua e arrastado com o barco em movimento, sendo recomendada a padronizao do tempo ou distncia percorrida pelo arrasto para a comparao dos resultados (semiquantitativos).

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Figura 29. draga retangular (Fonte: CetesB, 1988).

5.3.7 Delimitadores
Embora tenham sido concebidos para amostragem quantitativa de bentos e macrfitas, os delimitadores so mais utilizados em estudos qualitativos ou semiquantitativos de locais rasos de diversos ambientes (de 30cm a 70cm de profundidade, em gua doce, esturio e marinho), costes rochosos e manguezais, por definirem uma rea de coleta. No caso desses equipamentos, a experincia do profissional fundamental para que uma boa amostragem seja realizada. Consistem de uma armao de rea definida, na qual pode estar acoplada uma rede. Quanto menor a malha da rede, maior ser a resistncia correnteza, maior o refluxo e, consequentemente, maior a perda de material. A malha de 0,25mm retm a maioria dos estdios larvais de insetos aquticos, mas malhas de 0,50mm a 0,90mm so as mais utilizadas para evitar o refluxo. O delimitador do tipo Surber (Fig. 30) consiste em uma rede que se mantm aberta por uma moldura quadrada, perpendicular a outra moldura de igual tamanho. Quando em operao, a moldura que suporta a rede fica em posio vertical enquanto que a moldura horizontal, que corresponde rea de amostragem, pressionada manualmente contra o fundo. o mais usado e tambm o mais indicado para a amostragem em locais de difcil acesso, pois dobrvel e mais leve, o que facilita o seu transporte em terreno acidentado.

equipamentos de amostragem

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Figura 30. delimitador surber (Foto: lucy l. ogura/CetesB).

O Hess-Canton (Fig. 31), outro tipo de delimitador, pode ser montado em tubo de PVC ou acrlico, onde so feitas duas aberturas: uma a ser posicionada para montante, protegida por uma rede, de forma a no permitir contaminao por material indesejado, e a outra, oposta primeira, contm a rede, em forma de saco em que os organismos so aprisionados. A rea interna do tubo corresponde rea de amostragem.

Figura 31. delimitador Hess-Canton (Foto: Helena m. Watanabe/CetesB).

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Nos amostradores Surber e Hess-Canton, a correnteza utilizada como fora motriz que conduz os organismos desalojados da rea delimitada, por raspagem com as mos ou ps, para o fundo das redes. No momento da coleta deve-se tomar cuidado para que no fiquem frestas na base do equipamento e para que no se perturbe o substrato rio acima. Para minimizar as perdas de organismos, recomenda-se acoplar material flexvel, como esponjas, sua base. O delimitador de bentos de substrato consolidado (costes rochosos) para porcentagem de cobertura consiste em uma armao retangular de PVC, que pode ser de 22cm x 18cm (amostrando uma rea de 396cm2), na qual so presos fios de nilon em intervalos regulares, tanto na direo horizontal, quanto na vertical (Fig. 32 e Fig. 33).

Figura. 32. detalhe do delimitador Figura 33. dimenses do delimitador (Fonte: para estimativa da porcentagem de milanelli, 2003/CetesB). cobertura de comunidades de costo rochoso (Fonte: lopes, 1997/CetesB).

Outro mtodo utilizado para as avaliaes de cobertura das populaes de substrato consolidado o fotogrfico. As fotografias so tomadas com a utilizao de uma cmera fotogrfica com lente close-up (Fig. 34), que enquadra, por meio de um suporte com um delimitador, uma rea padronizada do substrato.

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Figura. 34. Mquina fotogrfica montada com lente close-up, suporte com delimitador de enquadramento e flashes (Foto: Guiomar J. Fornasaro/CETESB).

Para a determinao da estrutura espacial de comunidades de costo podem ser utilizados vrios tipos de amostradores, cujas dimenses esto relacionadas distribuio dos indivduos no substrato, bem como a presena de espcies menos comuns e mesmo raras. A figura 35 apresenta um delimitador para essa finalidade confeccionado em madeira, com dimenso de 10cm x 50cm, dentro do qual corre um menor, de 10cm x 10cm, subdividido em quadrculos de 1cm x 1cm (Milanelli, 1994). Os delimitadores anteriormente mencionados nas figuras 32 e 33 tambm podem ser empregados para amostragem da porcentagem de cobertura (dimenso de 22cm x 18cm); a diferena consiste no modo de amostragem devido s finalidades distintas (Lopes, 1997 e Milanelli, 2003).

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Figura 35. detalhe do delimitador para estimativa da estrutura espacial de comunidades de costo rochoso, indicando suas respectivas dimenses em centmetros (Fonte: milanelli, 1994/CetesB).

A determinao do declive de costo rochoso feita por meio de duas rguas. Ambas so confeccionadas em madeira, com comprimento de 200cm, marcada de 1cm em 1cm, com numeraes a cada 10cm. A largura da barra varivel, preferencialmente em torno de 5cm, com espessura em torno de 1cm, o que a torna suficientemente resistente e de fcil manuseio. As definies do declive e do perfil da praia so feitas com um declivmetro, aparelho desenvolvido pela CETESB. constitudo por trs barras cilndricas de ao, com 1 metro de comprimento cada, e uma barra horizontal que corre por duas barras verticais, uma delas graduada em centmetros (Fig. 36).

Figura 36. medidor de declive de praia (Fonte: milanelli, 2003/CetesB).

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5.3.8 Rede Manual


Redes manuais servem coleta qualitativa ou semiquantitativa da macrofauna bentnica em ambientes rasos (lnticos e lticos), de at 70 cm de profundidade, e da fauna associada a bancos de macrfitas (Fig. 37) em gua doce. Na avaliao semiquantitativa, o esforo amostral deve ser padronizado em termos temporais ou espaciais. Um mtodo bastante utilizado em biomonitoramento com macroinvertebrados bentnicos em riachos chamado kick sampling. Neste mtodo, a rede manual, geralmente de formato retangular, posicionada transversalmente ao curso do rio, de forma a ter sua abertura direcionada para a nascente. O tcnico coletor posiciona-se frente da rede e literalmente chuta o substrato desde uma distncia previamente padronizada. Com este movimento, os organismos que colonizam este substrato sero desalojados e capturados na rede. Com abertura de forma triangular, retangular ou semicircular (Rede D), a rede deve ter preferencialmente abertura de malha de 0,25mm a 0,90mm. Aberturas menores acarretam problema de refluxo de gua, podendo ocasionar perda de organismos.

Figura 37. rede manual (Foto: Helena m. Watanabe/CetesB).

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5.4 Substrato Artificial


Existe uma variedade grande de tipos de substratos artificiais, desenvolvidos para diferentes ambientes e objetivos de amostragem. De uma forma geral, esses amostradores prestam-se amostragem qualitativa e semiquantitativa da macrofauna bentnica e do perifton, em ambientes lticos pouco profundos ou lntico litorneo. A amostragem com substrato artificial no destrutiva e adequase a: (a) estudos de biomonitoramento da qualidade das guas em ambientes de acesso restrito; (b) inventrio faunstico em reas de proteo ambiental; (c) atividades de educao ambiental; (d) auxiliar no levantamento faunstico, somando-se a outras tcnicas de amostragem; (e) coleta em situaes em que seja impraticvel o uso de outros amostradores, como em rios mais profundos (em que as dimenses do substrato artificial sejam compatveis com a profundidade local, no perodo seco), de fundo pedregoso ou em laje. As principais desvantagens em seu uso referem-se : (a) necessidade de duas viagens a campo (instalao e coleta); (b) suceptibilidade ao vandalismo, o que acarreta perda ou m gerao de dados; (c) limitao do histrico do dado extenso do perodo de exposio; (d) avaliao da qualidade da gua e no do sedimento natural; (e) necessidade de definio prvia do tempo de exposio ideal (em que no h mais aumento de riqueza no processo de colonizao), que ir variar com o tipo de substrato e ambiente de estudo. Estudos com substratos artificiais devem ser evitados no vero, j que enchentes podem aumentar a probabilidade de perda e causar distrbios no processo de colonizao.

5.4.1 cestos com Pedras (Zoobentos)


Os cestos preenchidos com pedras desenvolvidos pela CETESB (Fig. 38) so retangulares, confeccionados em tela plstica resistente e com abertura de malha de 1cm a 2cm (KUHLMANN et al, 2003). Exibem uma ala superior para facilitar a manipulao, feita em tubo fino de PVC. So preenchidos com pedra de brita de dimetro aproximado de 4cm e seu peso final , em mdia, entre 7kg e 8kg. O uso da pedra de brita foi adotado tendo em vista sua rugosidade, que facilita a colonizao, e fcil obteno.

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Figura 38. Substrato artificial do tipo cesto preenchido com pedra de brita (Foto: Monica L. Kuhlmann/CetesB).

Na instalao, cada cesto deve ser preso pela ala a uma corda de nilon, fixada em um ponto da margem pela outra extremidade. Como ponto de fixao podem ser usadas rvores ou, quando essas no ocorrerem, estacas de madeira. importante camuflar (com barro ou vegetao, por exemplo) tanto as estacas quanto as partes expostas da corda. As rplicas de substrato devem ser colocadas em pontos diferentes, selecionados de forma aleatria com distncia mnima de 2 metros, mas prximos margem. A localizao dos cestos deve ser registrada em um croqui ou registro fotogrfico do local de coleta para facilitar seus resgates. Como medida preventiva perda de animais por lavagem pelo filme de tenso superficial da gua, pode-se (a) costurar um pedao de tela no fundo e nas laterais do cesto; (b) colocar uma rede manual sob o cesto, antes de retir-lo da gua, lavando o material aprisionado na rede no saco plstico, onde o cesto for acondicionado; (c) acondi-

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cionar o cesto diretamento no saco plstico, ainda quando este estiver sob a superfcie da gua.

5.4.2 Flutuador com Lminas (Perifiton)


Flutuadores constituem uma opo, dentre os substratos artificiais utilizados para o estudo e coleta de perifton. Os flutuadores desenvolvidos pela CETESB (Fig. 39) so retangulares, confeccionados com dois tubos de PVC e comportam lminas de vidro usadas em microscopia comum, que so presas em encaixes existentes nas placas laterais de acrlico. Em uma das extremidades de cada tubo de PVC, h um orifcio que permite amarrar uma corda de nilon e prender o flutuador em um ponto fixo da margem, como uma rvore, por exemplo (Fig. 40).
(A) (B)

Figura 39. Substrato artificial do tipo flutuador, com lminas de vidro: (A) Vista superior do flutuador; (B) Vista do flutuador instalado prximo margem (Foto: Rita Cerqueira Ribeiro de souza/CetesB).

A localizao dos flutuadores deve ser registrada em um croqui ou registro fotogrfico do local de coleta, anotando-se pontos de referncia e coordenadas geogrficas para facilitar o resgate dos mesmos. aconselhvel a instalao dos flutuadores em locais pouco frequentados e protegidos, para evitar a perda pelo manuseio por estranhos e/ou roubo. Existem flutuadores de diferentes modelos, como aqueles com tubos ou placas mltiplas de diferentes materiais (por exemplo madeira, acrlico) ao invs de lminas. Perifitmetros podem ser comprados em algumas lojas especializadas em material e equipamentos para estudos limnolgicos e podem ser usados em reservatrios ou rios/riachos.

equipamentos de amostragem

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Figura 40. Substrato artificial do tipo flutuador, com lminas de vidro: Detalhe do fio nilon de sustentao do flutuador (Foto: Rita Cerqueira Ribeiro de Souza/CETESB).

5.5 Substrato Natural

Perifitmetro com escova (VIS, 1997, modificado) Perifitmetros com escovas so utilizados para coleta de perifton em substratos naturais consolidados (rochas) e podem ser usados para coleta em rios e riachos rasos, em rochas que no podem ser removidas. O perifitmetro com escova adaptado pela CETESB (Fig. 41) consiste em um tubo de acrlico ao qual so acoplados uma escova e uma pra de suco. A escova presa na parte superior do equipamento por uma pea de borracha flexvel, que permite moviment-la em todas as direes por meio de um cabo, externo. Um furo permite a passagem de uma mangueira de borracha, qual se prende uma pra de suco. Do outro lado do tubo, uma mangueira mais fina serve para transferncia da amostra do equipamento para o frasco de coleta.

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Figura 41. Perifitmetro com escova -VIS, 1997, modificado (Foto: Rita Cerqueira Ribeiro de souza/CetesB).

Na parte inferior do equipamento, que aberta, uma borracha com dimetro de medida conhecida permite que o equipamento seja encostado no substrato que se pretende amostrar, possibilitando uma medida quantitativa, relativa rea do amostrador, dos organismos coletados. Na Tabela 3 esto relacionados os amostradores de substratos apresentados nesse captulo, trazendo as principais vantagens e desvantagens das aplicaes de seus usos.

equipamentos de amostragem

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Tabela 3. Principais caractersticas de alguns amostradores de sedimento, comunidades bentnicas e perifticas


EQUIPAMENTO AMBIENTE PEGADORES USO

Ponar

marinho e estuarino. gua doce rios profundos e margens de reservatrios.

em substrato grosso e duro (arenoso cascalho). para ensaios qumicos, toxicolgicos, microbiolgicos e de comunidades bentnicas. a verso maior (523 cm2) mais indicada para ambientes marinhos, estuarinos e pristinos de gua doce; a menor (232 cm2) para locais de gua doce poludos. serve para amostragem quantitativa e qualitativa da comunidade bentnica. em substrato grosso e duro (arenoso cascalho). para ensaios qumicos, toxicolgicos, microbiolgicos e de comunidades bentnicas. a verso maior (588cm2 e 1000 cm2) mais indicada para ambientes marinhos e estuarinos; a menor (390 cm2) para locais de gua doce. serve para amostragem quantitativa e qualitativa da comunidade bentnica. em substrato fino e mole (arenoso fino argiloso). para ensaios qumicos, toxicolgicos, microbiolgicos e de comunidades bentnicas. serve para amostragem quantitativa e qualitativa da comunidade bentnica. a modificao de Lenz permite estratificao e estudos ao longo do perfil vertical do sedimento.

Petersen ou van Veen modificado

marinho e estuarino. gua doce rios profundos e margens de reservatrios.

Ekman-Birge

estuarino. gua doce regio profunda de reservatrios e regies de fraca correnteza em rios.

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VANTAGENS PEGADORES

DESVANTAGENS

apresenta vrios tamanhos. considerado o melhor amostrador quantitativo em substrato duro para a comunidade bentnica. as placas laterais e telas previnem a perda de amostra no fechamento e reduzem a formao de ondas de choque. possui pino de segurana.

a amostra obtida no to ntegra quanto em amostragens com testemunhador (corer). a verso maior pesada e necessita de guincho. no muito adequado para uso em substrato mole, podendo haver perda de partculas finas por ondas de choque e no captura adequadamente organismos que se enterram mais profundamente. sua garras podem ser bloqueadas por pedras, galhos ou outros detritos, acarretando perda de amostra. possvel ocorrer contaminao da amostra por metais que possam compor a estrutura do pegador (verificar o material empregado na confeco do equipamento). a amostra obtida no to ntegra quanto em amostragens com testemunhador (corer). as verses mdia e maior so pesadas e necessitam de guincho. no muito adequado para uso em substrato mole, havendo perda de partculas finas por ondas de choque e de organismos que se enterram mais profundamente suas garras so frequentemente bloqueadas por pedras, galhos ou outros detritos, acarretando perda de amostra. possvel ocorrer contaminao da amostra por metais que possam compor a estrutura do pegador (verificar o material empregado na confeco do equipamento). a amostra obtida no to ntegra quanto em amostragens com testemunhador (corer). muito leve para ser usado em substrato duro ou sob correnteza moderada ou forte. suas garras frequentemente no fecham totalmente por falha no mecanismo. possvel ocorrer contaminao da amostra por metais que possam compor a estrutura do pegador (verificar o material empregado na confeco do equipamento). possvel a perda de material fino na subida do amostrador.
Continua...

apresenta vrios tamanhos. captura grande volume de sedimento.

leve e de fcil operao. reduz as ondas de choque pela existncia de placas que se abrem no topo. a amostra obtida quase ntegra, permitindo subamostragem.

equipamentos de amostragem

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Tabela 3. Principais caractersticas de alguns amostradores de sedimento, comunidades bentnicas e perifticas (continuao)
EQUIPAMENTO AMBIENTE REDES e DELIMITADORES USO

Simples ou mltiplo

marinho e estuarino. gua doce rios profundos e regio profunda de reservatrios.

em substrato fino e mole (arenoso fino argiloso). para ensaios qumicos, toxicolgicos, microbiolgicos e de comunidades bentnicas. a verso maior (45,6cm2) mais indicada para ambientes marinhos e estuarinos; a menor (20,3 cm2) para locais de gua doce. serve para amostragem quantitativa e qualitativa da comunidade bentnica.

Manual

marinho, estuarino e de gua doce rasos.

em substrato fino e mole (arenoso fino argiloso). para ensaios qumicos, toxicolgicos, microbiolgicos e de comunidades bentnicas. serve para amostragem quantitativa e qualitativa da comunidade bentnica.

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VANTAGENS

DESVANTAGENS REDES e DELIMITADORES

a amostra obtida ntegra, permitindo estratificao e estudos ao longo do perfil vertical do sedimento. a perturbao da interface sedimento-gua mnima. adequado para coleta de organismos que se enterram profundamente em sedimento mole. o pequeno tamanho amostral permite maior nmero de replicatas, com reduo do tempo de ensaio. existem vrios modelos (por ex.: fechamento por gravidade ou mensageiro), dimetros e comprimentos. pode apresentar vlvulas de funcionamento automtico que previnem a perda da amostra. baixo risco de contaminao da amostra por metais que possam compor a estrutura do pegador devido ao uso de material inerte na confeco dos tubos removveis. a amostra obtida ntegra, permitindo estratificao e estudos ao longo do perfil vertical do sedimento. a perturbao da interface sedimento-gua mnima. adequado para coleta de organismos que se enterram profundamente em sedimento mole. o pequeno tamanho amostral permite maior nmero de replicatas, com reduo do tempo de ensaio. existem vrios dimetros e comprimentos. baixo risco de contaminao da amostra por metais que possam compor a estrutura do pegador devido ao uso de material inerte na confeco dos tubos removveis.

aqueles que operam por gravidade podem apresentar problemas de funcionamento e ocasionar perda da amostra. a rea de amostragem limitada, requerendo repetio da operao e retirada de tubos. devido a pequena rea de amostragem, no permite preciso na estimativa da biomassa bentnica e de densidade populacional de organismos bentnicos de maior porte. no retm areia. muitos modelos requerem barco e guincho na operao. necessrio cuidado no manuseio para evitar perda de sedimento na retirada da amostra.

a rea de amostragem limitada, requerendo repetio da operao e retirada de tubos. devido a pequena rea de amostragem, no permite preciso na estimativa da biomassa bentnica e de densidade populacional de organismos bentnicos de maior porte. no retm areia. necessrio cuidado no manuseio para evitar perda de sedimento na retirada da amostra .

Continua... equipamentos de amostragem 115

Tabela 3. Principais caractersticas de alguns amostradores de sedimento, comunidades bentnicas e perifticas (continuao)
EQUIPAMENTO AMBIENTE REDES e DELIMITADORES USO

Rede para kick sampling

riachos rasos (profundidade inferior a 32 cm) de correnteza moderada.

em substrato grosso e duro (arenoso grosso, cascalho e seixos). para ensaios de comunidades bentnicas. serve para amostragem semi-quantitativa e qualitativa da comunidade bentnica. em substrato grosso e duro (arenoso grosso, cascalho e seixos). para ensaios de comunidades bentnicas. serve para amostragem quantitativa e qualitativa da comunidade bentnica.

Hess

riachos rasos (profundidade inferior a 32 cm) de correnteza moderada.

Surber

riachos rasos (profundidade inferior a 32 cm) de correnteza moderada.

substrato grosso e duro (arenoso grosso, cascalho e seixos). para ensaios de comunidades bentnicas. serve para amostragem quantitativa e qualitativa da comunidade bentnica.

Perifitmetro com escova

agua doce rios rasos com rochas.

em substrato consolidado. serve para amostragem quantitativa e qualitativa da comunidade periftica.

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VANTAGENS

DESVANTAGENS REDES e DELIMITADORES

a amostra de fcil processamento analtico. de fcil construo e operao. equipamento de baixo custo. pode ser usado em banco de macrfitas.

necessita de experincia do coletor, que deve ser capaz de reconhecer os diferentes mesohabitats do local.

amostra uma unidade de rea definida e totalmente cercada, o que impede a perda lateral de organismos. a amostra de fcil processamento analtico. de fcil construo e operao. equipamento de baixo custo.

difcil de ser colocado sobre alguns substratos, podendo ocorrer perda de organismos pela parte inferior do equipamento. Adaptaes com espuma na base do equipamento melhoram a sua aderncia ao fundo, minimizando essa perda. no pode ser usado eficientemente sob correnteza branda. necessita de experincia do coletor, que deve ser capaz de reconhecer os diferentes meso habitats do local. pesado e volumoso, o que dificulta o seu transporte, principalmente em trilhas. difcil de ser colocado sobre alguns substratos, podendo ocorrer perda de organismos pela parte inferior do equipamento. Adaptaes com espuma na base do equipamento melhoram a sua aderncia ao fundo, minimizando essa perda. pode ocorrer perda de organismos pela lateral da rede, devido a rea de amostragem no ser totalmente cercada. no pode ser usado eficientemente sob correnteza branda. necessita de experincia do coletor, que deve ser capaz de reconhecer os diferentes mesohabitats do local. tem uso limitado a determinados habitats: rios rasos, com rochas. demanda cuidados especiais na limpeza da escova, borrachas e mangueiras antes do uso entre diferentes locais de coleta. no h padronizao do tipo de superfcie do substrato.
Continua...

amostra unidade de rea definida. a amostra de fcil processamento analtico. de fcil construo e operao. equipamento de baixo custo.

permite padronizao da rea amostral. de fcil manipulao. um equipamento de fcil confeco e custo relativamente baixo.

equipamentos de amostragem

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Tabela 3. Principais caractersticas de alguns amostradores de sedimento, comunidades bentnicas e perifticas (continuao)
EQUIPAMENTO AMBIENTE SUBSTRATO ARTIFIcIAL USO

cesto com pedras

rios, riachos e margens de reservatrios.

em substrato grosso e duro (arenoso a rochoso). para ensaios de comunidades bentnicas (amostragem semiquantitativa e qualitativa).

Flutuador com lminas

rios, riachos e margens de reservatrios.

para coleta de perifton. amostragem quantitativa e qualitativa da comunidade periftica.

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VANTAGENS

DESVANTAGENS SUBSTRATO ARTIFIcIAL

padroniza o substrato de coleta. permite amostragem em locais duros demais para uso de outros amostradores. a amostra de fcil processamento analtico. de fcil construo e operao. equipamento de baixo custo.

o tempo de colonizao dos organismos espacial e temporalmente varivel. Por isso, exige um estudo prvio de tempo de colonizao dos organismos para cada ambiente em que o equipamento for empregado. exige duas viagens a campo (instalao e retirada). s reflete as condies do ambiente no perodo de colonizao. seletivo para alguns organismos, favorecendo a coleta de insetos. Consequentemente, no retrata a estrutura da comunidade bentnica do local de amostragem. frequente a perda de amostras por vandalismo ou inundaes no local. o tempo de colonizao dos organismos espacial e temporalmente varivel. Por isso, exige um estudo prvio de tempo de colonizao dos organismos para cada ambiente em que o equipamento for empregado. exige duas viagens a campo (instalao e retirada). s reflete as condies do ambiente no perodo de colonizao. seletivo para alguns organismos e favorece o estudo de diatomceas. Consequentemente, no retrata a estrutura da comunidade periftica do local de amostragem. frequente a perda de amostras por vandalismo ou inundaes no local.

padroniza o substrato de coleta. a amostra de fcil processamento analtico. de fcil construo e operao. um equipamento de baixo custo.

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5.6 Amostradores de Ncton


Existe uma variedade muito grande de amostradores de ncton para fins cientficos (estudos de comunidades, de taxonomia, bioacumulao etc.) e a escolha do equipamento depende de diversos fatores, tais como: caractersticas do ambiente (rio, reservatrio etc.), objetivos de estudo, estrutura da comunidade do local e poca do ano. uma amostragem que envolve vrios tcnicos e geralmente se estende por muitos dias, o que torna necessrio um planejamento detalhado, considerando a disponibilidade de pessoal, recursos materiais e financeiros. Desta forma, antes de definir os procedimentos de amostragem de ncton, composto majoritariamente por peixes, necessrio consultar o item 6.1.7.8 do Captulo 6, Comunidade Nectnica. Os amostradores de ncton podem ser passivos ou ativos. Amostradores passivos so fixos ou estacionrios, como anzol, espinhel, armadilha, rede de espera etc. Amostradores ativos so mveis, como as redes de deriva (rede de lance) e de arrasto e tarrafas. A captura com os amostradores passivos depende do movimento dos peixes em relao ao aparelho, enquanto que nos ativos, os peixes so capturados a partir do movimento do amostrador. Amostradores como anzol, espinhel e armadilhas dependem no s do movimento como tambm do comportamento do peixe em relao isca utilizada. Quando do uso de redes, a escolha do tamanho das malhas (abertura entre ns) depender dos organismos e dos ambientes a que so destinadas. Outros recursos podem ser utilizados na coleta de amostras ictiolgicas cientficas, como por exemplo: drogas (como o timb), arpes e aparelhos eltricos. A seguir so listados alguns dos equipamentos mais utilizados na pesca cientfica para amostragem da comunidade nectnica. importante destacar a necessidade de atender a legislao especfica em vigor que rege esta atividade.

5.6.1 Aparelhos de Pesca Passivos


Rede de espera A rede de espera sem o emprego de isca muito utilizada para a amostragem de peixes, pode ser empregada em diversos ambientes, e sua disposio na massa liquida no plano vertical. Tambm conhecida como rede de poita, pode ser armada na superfcie, meio e fundo. Consiste basicamente de uma malha retangular, de comprimento e

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altura variveis, presa a um cordel superior no qual esto dispostas as bias a intervalos regulares (tralha de bias) (Figs. 42, 43 e 44). Na parte inferior h um cordel com pesos a intervalos regulares (tralha de chumbo). Na rede de superfcie, a tralha de bias deve apresentar poder de flutuao suficiente para sustentar o peso da panagem e a tralha de chumbo (lastro de baixo peso) e a rede deve ser presa a uma bia ancorada, ou na margem.

Figura 42. rede de espera de superfcie (Fonte: CetesB, 1988).

equipamentos de amostragem

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Figura 43. rede de espera armada (Foto: adriana C. C. r. de deus/CetesB).

Figura 44. retirada da rede de espera (Foto: adriana C. C. r. de deus/CetesB).

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Variaes no peso e na tralha de chumbo permitem a disposio da rede no meio da coluna dgua ou ancorada no fundo. Assim, a rede de espera de fundo (Fig. 45) deve ter lastros mais pesados e bias menores. As extremidades dos cabos de bia e da rede so presas na margem ou a uma bia demarcada na superfcie da gua, por meio de um cabo suficientemente resistente para permitir a retirada da rede. H tambm redes de espera com duas ou mais panagens diferentes sobrepostas, presas a um nico cordel de bias e de chumbada, como a rede feiticeira (ou de tresmalho).

Figura 45. rede de espera ancorada no fundo (Fonte: american Fisheries society - esquema utilizado com permisso).

Espinhel ou linhada H uma grande variedade de espinhis e, basicamente, so constitudos de uma linha mestra ao longo da qual se aplicam linhas secundrias com anzis. A quantidade de linhas secundrias e o tipo de anzol vo depender das espcies de peixes a serem capturadas. O espinhel de superfcie possui bias ao longo da linha mestra, sendo suas extremidades presas a boas separadas e ancoradas ou presas em troncos, pedras ou qualquer outro suporte; o espinhel de fundo no apresenta bias ao longo da linha mestra (Fig. 46).

equipamentos de amostragem

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Figura 46. exemplos de espinhis (Fonte: american Fisheries society - esquema utilizado com permisso).

canio ou vara de pesca Esse mecanismo de pesca constitudo de uma vara de bambu e uma linha de nilon resistente, com ou sem bia, e anzol na extremidade com isca viva ou artificial. Esse tipo de pesca pode ser realizado com uso de embarcao ou no (Fig. 47).

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Figura 47. Canio ou vara de pesca (Foto: adriana C. C. r. de deus/CetesB).

curral (rede de estacas ou cerco) Constitui-se de um cerco geralmente feito de taquaras tranadas, fixado no substrato por meio de estacas, onde existe apenas uma abertura que permite a entrada do peixe, mas no a sua sada. Por isso, importante garantir que a parede do curral tenha altura suficiente para permanecer sempre acima do nvel da gua (para que possa ser feita a vistoria e coleta dos organimos) e trama bem fechada (para impedir a fuga dos peixes) (Fig. 48).

equipamentos de amostragem

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Figura 48. Curral (Foto: CetesB).

cesto ou canastra Armadilha de forma varivel, podendo ser cnica, cncava ou em fundo de saco. Sua confeco tambm varivel, podendo ser de taquara tranada, arame tranado ou aros de arame recobertos de malhagem de algodo (Figs. 49 e 50).

Figura 49. Cesto ou canastra (Foto: adriana C. C. r. de deus/CetesB).

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Figura 50. Cesto ou canastra (Foto: CetesB).

covo Tipo de armadilha, de forma cilndrica ou cnica, que permite a entrada do peixe, mas no a sada, podendo ser usado com ou sem isca. A entrada do covo de forma cnica, com o vrtice voltado para o interior, sendo flexvel de modo a permitir a entrada do peixe. Na sua confeco emprega-se tela metlica, arame, taquara ou arame revestido de malha de nilon, algodo etc. (Fig. 51).

(A) (c)

(B)

Figura 51. Diferentes armadilhas Tipo Covo: (A) Armadilha de forma cilndrica; (B) Armadilha para pesca da lagosta; (C) armadilha para peixes de pequeno porte em rios (Fonte: american Fisheries society esquema utilizado com permisso).

equipamentos de amostragem

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5.6.2 Aparelhos de Pesca Ativos


Rede de lance Empregada principalmente para amostragem de peixes em corredeiras suaves e sem obstculos, e em braos de esturio. tambm chamada de rede de deriva, pois lanada no corpo dgua e acompanhada pela embarcao. Semelhante rede de espera, consta de um nico pano, mas o cordel inferior apresenta lastro de pesos menores e no usa poita nem bias ancoradas. Nas extremidades da rede so colocados flutuadores que servem de guia e fazem com que ela permanea aberta durante o trajeto. Rede de arrasto Constituda de panagem inteira ou de duas partes. Na parte superior so colocadas bias e na inferior, as chumbadas. As extremidades superiores e inferiores de cada lado da rede so amarradas a hastes laterais de madeira. Em locais pouco profundos, o arrasto pode ser feito diretamente pelas hastes, enquanto que em locais de maior profundidade e correnteza, onde necessria a utilizao de embarcao, uma corda de trao pode ser presa em cada uma das extremidades das hastes (Figs. 52 e 53).
(A) (B)

Figura 52. rede de arrasto manual: (a) Foto da rede de arrasto manual em operao; (B) esquema da rede de arrasto manual (Fonte: american Fisheries society Foto e esquema utilizados com permisso).

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Figura 53. rede de arrasto por embarcao (Fonte: american Fisheries society esquema utilizado com permisso).

Rede de saco Consta de um pano de confeco semelhante a da rede de espera. No seu centro forma-se um saco semelhante a um coador, com malha de dimetro maior que o das extremidades. A sua fixao se faz como a da rede de espera (Fig. 54).
(A) (B)

Figura 54. rede de arrasto manual do tipo saco: a) Foto da rede de arrasto manual tipo saco em operao; (B) esquema do detalhe do saco (Fonte: american Fisheries society Foto e esquema utilizados com permisso).

Tarrafa Empregada em locais de pouca profundidade, consta de uma rede de forma cnica, presa pelo vrtice a um cabo, e cuja base circular provida de tralha de chumbo, destinada ao fechamento do aparelho quando o cabo tracionado. O seu lanamento feito de modo que possa se abrir no ar, atingindo a superfcie da gua na maior rea possvel, e afundando rapidamente em virtude da tralha de chumbo (Fig. 55).

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(A)

(B)

Figura 55. tarrafa: (a) tarrafa em uso; (B) vista superior da tarrafa (Fotos: CetesB e adriana C. C. r. de deus).

Linha de arrasto (corrico) Consta de uma linha resistente com anzol e isca artificial, usada com o barco em movimento. Pu e coador So aparelhos geralmente utilizados para recolhimento de espcimes durante atividades de pesca ou em episdios de mortandade de organismos aquticos. So constitudos de um crculo de metal ao qual se prende uma rede afunilada de tamanho variado. O crculo de metal preso a um cabo de bambu, madeira ou a um cordel. Dependendo da regio, a malha da rede pode diferir (Figs. 56 e 57).
(A) (B)

Figura 56. pu: (a) vista lateral (Foto: adriana C. C. r. de deus); (B) equipamento em uso (Fonte: american Fisheries society Foto utilizada com permisso).

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Pesca Eltrica A pesca eltrica um mtodo de amostragem empregado para fins cientficos. Esse tipo de coleta normalmente utilizado em ambientes de guas rasas. A pesca eltrica pode ser empregada a partir de embarcao preparada para esse fim ou por meio de aparelhagem adaptada para uso mvel, tipo mochila (Fig. 57). Independentemente do equipamento a ser empregado, devem ser observadas as medidas de segurana necessrias para coleta em campo, principalmente as relativas aos riscos inerentes a descargas eltricas.

Figura 57. Pesca eltrica com aparelhagem do tipo mvel (mochila). Foto: American Fisheries society (usado com permisso)

5.6.3 Manuteno e cuidados com os Equipamentos de Pesca


Esses equipamentos de pesca (redes, tarrafas, covos, cestos e pus) aps sua utilizao, devem ser lavados com gua limpa em jatos fortes; se necessrio, utilizar uma soluo suave de detergente neutro e deix-los secar a sombra, esticadas ao abrigo da luz e armazenados em local adequado, longe de outros equipamentos que possam danificlos. Durante o transporte devem ser acondicionados em embalagem adequada, tipo caixa de madeira ou isopor. A parte mais delicada dos equipamentos de pesca deve ser protegida como, por exemplo, em um balde ou saco de polietileno.

equipamentos de amostragem

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Filtrao de amostra para metais dissolvidos - Foto Carlos Jesus Brando/CETESB

cApTUlO

6 AMOSTRAGEM DE GUA BRUTA E SEDIMENTOS


Em um estudo bsico de avaliao da qualidade das guas e do sedimento deve-se levar em considerao os seus usos preponderantes. Para tanto, recomenda-se consultar o captulo Planejamento de Amostragem. De uma maneira geral, a amostragem em rios, riachos e pequenos cursos dgua feita a montante e a jusante das fontes poluidoras, quando essas existem. Dependendo do objetivo do estudo, pode-se adicionar pontos de coleta para avaliar o grau de poluio ou assimilao de carga orgnica ao longo do trecho avaliado, por exemplo. Convm evitar a coleta de amostras em reas onde possa ocorrer estagnao da gua e em locais prximos margem interna das curvas, exceto para a coleta de sedimentos e organismos bentnicos. Para cursos dgua maiores deve-se levar em considerao a existncia e o grau de mistura dos lanamentos (afluentes e efluentes) no corpo receptor, tanto lateral (de uma margem outra) como verticalmente (da superfcie ao fundo). A mistura na direo lateral muitas vezes ocorre mais lentamente que a mistura na direo vertical. Por outro lado, deve-se considerar que a gua do corpo principal pode adentrar o tributrio pela superfcie ou pelo fundo, devido diferena de densidade causada pela temperatura, sais dissolvidos ou turbidez. Para se obter uma amostra representativa, essas possibilidades devem ser avaliadas durante o perodo de caracterizao ou monitoramento, realizando coleta de amostras em pontos mltiplos ao longo do eixo transversal (Fig. 58) ou vertical do corpo dgua quando no houver certeza da completa mistura.

amostragem de gua bruta de sedimentos

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Figura 58. Localizao genrica de pontos de coleta de gua superficial em grandes cursos de gua (Fonte: cetesb, 1988). Legenda: A - Controle na regio superior da rea em estudo (referncia ou background); B Monitoramento de fontes poluidoras no pontuais (exemplo: poluio agrcola); C - Amostragem de descargas poluidoras no ponto de seu lanamento no corpo receptor; D - Pontos mltiplos a jusante dos lanamentos, para verificar a sua mistura no sentido lateral; E - Amostragem em tributrios, na rea de sua desembocadura no corpo receptor em estudo (no esquema, o monitoramento a montante do tributrio obtido por meio da amostragem em D); F Monitoramento a jusante do tributrio, aps sua mistura no corpo.

A no ser que sejam necessrias informaes sobre a qualidade da gua durante perodo chuvoso, a amostragem poder ser suspensa durante ou logo aps fortes chuvas, pois pode ocorrer aumento significativo da vazo do curso dgua. No caso dos estudos que necessitem de informaes sazonais, a amostragem deve ter continuidade e mesmo os dados obtidos no perodo de chuvas podero ser englobados aos demais.

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Em ambientes lnticos (lagos, reservatrios, audes etc.), a programao de amostragem depende no s dos seus usos (recreao, aquicultura, gerao de energia, agricultura, indstria, esgotamento sanitrio, drenagem pluvial e abastecimento pblico), como tambm dos objetivos do estudo, tais como: taxa de sedimentao, disperso e degradao de poluentes orgnicos, distribuio e comportamento de metais e pesticidas, eutrofizao e carga de nutrientes, estudos ictiofaunsticos, entre outros. Cada caso requer uma metodologia especfica, tanto de coleta quanto de ensaios e interpretao de dados. Para definio dos ensaios a serem realizados nas guas superficiais (bruta) e sedimento e o enquadramento das classes e usos, fundamental manter-se atualizado, consultando a legislao vigente nos sites das instituies responsveis pela sua elaborao e/ou homologao, como ANA (Agncia Nacional de guas), ANVISA (Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria), CONAMA (Conselho Nacional do Meio Ambiente), IBAMA (Instituto Brasileiro do Meio Ambiente), SMA (Secretaria do Meio Ambiente) de cada estado, e critrios internacionais adotados pela OMS (Organizao Mundial de Sade), USEPA (Agncia de Proteo Ambiental dos Estados Unidos), Environment Canada, Comunidade Europia, entre outros. Nas coletas de gua bruta e sedimento de uma forma geral recomenda-se que: 1. a coleta de gua seja realizada antes da coleta de sedimentos; 2. os primeiros frascos a serem preenchidos de gua do local devem ser direcionados aos ensaios microbiolgicos, biolgicos e aos que no podem sofrer aerao, e 3. a gua superficial seja coletada antes da amostra em profundidade. importante lembrar que, neste guia, considerado como gua superficial os primeiros 30cm da lmina dgua, e gua em profundidade aquela coletada na coluna dgua abaixo dos 30cm superficiais e acima de 1m do fundo. Para que sejam evitados problemas de contaminao cruzada durante a amostragem, deve-se utilizar materiais de coleta diferentes para cada amostra, como por exemplo, um balde e uma corda em cada ponto

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amostrado. Caso isto no seja possvel, esses materiais devem ser lavados em campo com gua destilada ou deionizada e ambientados, ou seja, enxaguados com gua do local a ser amostrado. A seguir, sero considerados os procedimentos para a coleta de amostras em gua bruta (camada superficial e em profundidade) e em sedimento para os diversos ensaios. A preservao, tipo de recipiente, volume requerido e prazo de validade da amostra esto descritos no Anexo 1.

6.1 Coleta e Preservao de Amostras para Ensaios em gua Bruta


6.1.1 Qumicos (exceto metais dissolvidos)
Procedimentos de coleta em guas superficiais: Encher o balde de ao inox ou a garrafa de van Dorn de fluxo horizontal e distribuir seu volume proporcionalmente nos diversos frascos destinados aos ensaios qumicos, como forma de garantir a homogeneidade da amostra; (Fig. 59); Repetir o procedimento at que todos os frascos estejam com o volume de gua necessrio para os ensaios, tomando o cuidado de manter um espao vazio no frasco para sua posterior homogeneizao; No caso de amostras que no podem sofrer aerao (oxignio dissolvido, sulfeto, compostos orgnicos volteis e fenis), a garrafa de van Dorn de fluxo horizontal ou o batiscafo devero ser empregados (Fig. 60). No caso da utilizao da garrafa de van Dorn, a mangueira deve ser introduzida estrangulada at o fundo do recipiente, liberando-se lentamente o regulador de fluxo da mangueira e deixando-se extravasar duas vezes, ou mais, o volume do frasco, no deixando espao vazio; Efetuar as preservaes requeridas (ver Anexo 1) (Fig. 61); Acondicionar a amostra em caixa trmica, sob refrigerao, para transporte.

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(A)

(B)

(C)

Figura 59. Coleta de amostras de gua superficial: (A) Disposio dos frascos com identificao; (B) Distribuio da amostra em todos os frascos; (C) Frascos preechidos com amostra (Fotos: carlos Jesus brando/cetesb). (A) (B)

Figura 60. Coleta de amostras de gua superficial para anlise de OD: (A) Batiscafo; (B) Fechamento do frasco (Fotos: Carlos Jesus Brando/CETESB). (A) (B)

Figura 61. Procedimento de preservao de amostra: (A) Adio de cido ntrico 1+1 para preservao de metais pesados; (B) Adio de acetato de zinco para preservao de sulfeto (Fotos: carlos Jesus brando/cetesb).

amostragem de gua bruta de sedimentos

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Procedimento de coleta em guas de profundidade: Coletar com garrafa de profundidade (ex.: garrafa de van Dorn de fluxo vertical) no estrato de interesse. importante que o equipamento no promova a suspenso do sedimento; para tanto, recomenda-se a coleta de gua at 1m acima do fundo, exceto quando o estrato abaixo de 1m for de interesse (Fig. 62); Desconectar a mangueira da garrafa e desprezar a gua contida na mangueira; Distribuir seu volume proporcionalmente nos diversos frascos destinados aos ensaios qumicos, como forma de garantir a homogeneidade da amostra; Repetir o procedimento at que todos os frascos estejam com o volume de gua necessrio, tomando o cuidado de manter um espao vazio para sua posterior homogeneizao. No caso de amostras que no podem sofrer aerao (oxignio dissolvido, sulfeto, compostos orgnicos volteis e fenis), a mangueira deve ser introduzida estrangulada at o fundo do recipiente, liberando-se lentamente o regulador de fluxo da mangueira e deixando-se extravasar duas vezes ou mais, o volume do frasco, no deixando espao vazio; Efetuar as preservaes requeridas (ver Anexo 1); Acondicionar a amostra em caixa trmica, sob refrigerao, para transporte.

Figura 62. Coleta de amostra em profundidade com garrafa de van Dorn de Fluxo Vertical (Foto: carlos Jesus brando/cetesb).

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6.1.2 Metais Dissolvidos


Para o ensaio de metais dissolvidos, a gua do local dever ser filtrada em campo. A gua filtrada a que ser encaminhada para o ensaio. A unidade filtrante deve passar por um pr-condicionamento antes da filtragem, como forma de prepar-la para receber a amostra. Podem ser utilizadas seringa e unidade filtrante descartveis para cada ponto de coleta, que devem ser recolhidas para descarte apropriado. A filtragem da amostra tambm pode ser realizada por meio de bomba de vcuo manual ou movida a gerador de eletricidade.
Procedimento para o pr condicionamento da unidade filtrante: Encher uma seringa estril com gua deionizada; Conectar uma unidade filtrante de 0,45m na seringa; Passar um volume de 50mL de gua deionizada pelo filtro.

Procedimento de coleta de amostra para metais dissolvidos em guas superficiais: Coletar a amostra de gua do local com auxlio de um balde confeccionado em ao inox (AISI 316L), ou de uma garrafa de van Dorn horizontal; Encher a seringa, preenchendo todo o seu volume; Conectar o filtro precondicionado ponta da seringa; Pressionar o mbolo da seringa e recolher a amostra filtrada em frasco de coleta apropriado (Fig. 63); Repetir o procedimento at obter o volume necessrio para o ensaio; Caso ocorra saturao do filtro, substitu-lo por outro novo j pr-condicionado, e completar o volume necessrio para o ensaio; Efetuar as preservaes requeridas (ver Anexo 1); Acondicionar a amostra em caixa trmica, sob refrigerao, para transporte. Guardar o(s) filtro(s) e seringa(s) para descarte, conforme procedimento de cada laboratrio.

Procedimento de coleta de amostra para metais dissolvidos em guas de profundidade: Coletar a amostra de gua de profundidade com garrafa de van Dorn vertical; Desconectar a mangueira da garrafa e desprezar a gua contida na mangueira; Preencher um frasco descartvel de 1L e retirar uma alquota com a seringa, preenchendo todo o seu volume; Conectar o filtro precondicionado ponta da seringa e proceder conforme protocolo para gua superficial.

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Figura 63. Filtrao em campo de amostra para metais dissolvidos (Foto: Carlos Jesus Brando/ cetesb).

6.1.3 Ecotoxicolgicos
Sero abordados os procedimentos de coleta e preservao de amostras para ensaios ecotoxicolgicos com organismos aquticos e de toxicidade aguda com bactria luminescente Vibrio fischeri (Teste Microtox). Ensaios ecotoxicolgicos so procedimentos nos quais as respostas de organismos aquticos so usadas para detectar ou avaliar, a presena ou efeito, de uma ou mais substncias, despejos lquidos ou fatores ambientais, considerados isoladamente ou em conjunto. Esses ensaios podem ser realizados em condies controladas de laboratrio ou em campo. Neste guia so abordados apenas os procedimentos de coleta para realizao de ensaios ecotoxicolgicos em condies controladas de laboratrio. Nesses ensaios os organismos teste so expostos amostra bruta (gua superficial ou sedimento) ou a vrias concentraes da amostra em soluo (efluente), por um determinado perodo. Aps o perodo de

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teste verifica-se os efeitos da amostra em relao alguns parmetros biolgicos, como mortalidade, crescimento e reproduo, dentre outros. Os organismos de gua doce e marinha mais comumente empregados constam da Tabela A4 do Anexo 1. Outro ensaio frequentemente empregado para a triagem de toxicidade aguda em amostras de gua e sedimento (gua intersticial) o ensaio com a bactria Vibrio fischeri tambm conhecido como teste Microtox. A bactria marinha Vibrio fischeri emite luz naturalmente em ambientes aquticos favorveis e na presena de substncias txicas bactria, a luminescncia diminui, sendo esta diminuio de intensidade de luz proporcional toxicidade da amostra. A escolha dos ensaios depender do objetivo do estudo. No caso de atendimento legislao recomenda-se utilizar mtodos padronizados elaborados pela ABNT ou rgo internacional de padronizao.
Procedimentos para coleta de amostras para ensaios ecotoxicolgicos com organismos aquticos e Microtox em guas superficiais: Preencher todo o volume do frasco sem deixar volume morto, de maneira a evitar a presena de ar; Tampar o frasco, deix-lo em repouso por alguns minutos e verificar se no existem bolhas de ar no seu interior. Caso haja presena de bolhas, bater levemente nas laterais do frasco, visando o desprendimento das bolhas; Completar o volume do frasco, se necessrio; Identificar a amostra; Acondicionar a amostra em caixa trmica, sob refrigerao, para transporte.

Procedimentos para coleta de amostras para ensaios ecotoxicolgicos com organismos aquticos e Microtox em guas de profundidade: Aps a coleta com garrafa de van Dorn, desconectar a mangueira de ltex da garrafa; Desprezar a gua contida na mangueira de ltex e encher o frasco, preenchendo todo o volume do frasco sem deixar volume morto, de maneira a evitar a presena de ar; Tampar o frasco e seguir os procedimentos descritos no item anterior.

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6.1.4 Mutagenicidade com Salmonella/Microssoma (Teste de Ames)


O teste de Salmonella/Microssoma tem por objetivo detectar a presena de substncias que possam produzir danos genticos nos organismos expostos. No caso de amostras ambientais, o objetivo detectar a presena destes compostos no meio e no avaliar diretamente o seu efeito neste ou naquele indivduo ou populao. O ensaio utiliza diferentes linhagens de Salmonella typhimurium, na presena e na ausncia de ativao metablica, capazes de detectar compostos que atuam por meio de mecanismos de ao diferentes. O teste foi desenvolvido especificamente para deteco de mutagnese induzida quimicamente e pode ser realizado tanto em amostras lquidas, aps esterilizao, quanto em extratos orgnicos. Podem ser avaliadas amostras de guas, efluentes, solos, sedimentos, lodos e material particulado. O procedimento adotado para a coleta de guas superficiais e de profundidade empregando balde e amostradores especficos o mesmo empregado para anlises qumicas (item 6.1.1) (Fig. 64).

Figura 64. Coleta de amostra com balde de ao inox para Teste de Ames (Foto: Carlos Jesus brando/cetesb).

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As amostras de gua podem tambm ser coletadas empregando-se o mtodo denominado Blue rayon in situ (Sakamoto & Hayatsu, 1990). As mechas de Blue rayon (ver preparo Captulo 3) so acondicionadas em redes de nilon, com um peso no fundo, e estas so conectadas a uma bia. O conjunto colocado no ponto de amostragem e as fibras permanecem imersas por 24 horas. Aps este perodo o conjunto removido e as mechas de Blue rayon levadas ao laboratrio. Maiores informaes relativas a tipos de frascos empregados, armazenamento e preservao das amostras esto detalhadas na Tabela A6 do Anexo 1.

6.1.5 Microbiolgicos
A contaminao das guas por excretas de origem humana ou animal pode torn-las um veculo na transmisso de agentes de doenas infecciosas. Dessa forma, a vigilncia da qualidade microbiolgica da gua essencial, sendo requerida pelas legislaes aplicadas nos mais diversos usos da gua. Embora sejam disponveis mtodos para determinao dos microrganismos patognicos responsveis pelas doenas de veiculao hdrica, essas anlises so complexas, demoradas e dispendiosas. Alm disso, somente pessoas e animais infectados eliminam esses microganismos, que podem estar em concentraes extremamente baixas nas amostras de gua e requerem mtodos especficos de concentrao. Por esse motivo, a pesquisa de patgenos realizada somente em condies especficas, por exemplo, na ocorrncia de surtos, em estudos de vigilncia epidemiolgica ambiental de patgenos, estudos de avaliao de risco microbiolgico, entre outras. Na rotina para monitoramento da gua e atendimento das regulamentaes de sua qualidade so realizadas as anlises dos microrganismos indicadores de poluio fecal, os quais podem indicar o risco da presena de microrganismos enteropatognicos. A anlise de indicadores microbianos na gua um mtodo bastante sensvel e especfico para deteco de poluio de origem fecal, no sendo adequada a anlise qumica para esse objetivo. As anlises devem ser realizadas com regularidade e frequncia, uma vez que a poluio fecal intermitente e poucas amostragens podem no ser suficientes para detect-la. Deve-se, portanto, dar preferncia a um mtodo simples, ao invs de vrios mtodos ou um mtodo complexo, embora

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nem sempre os resultados apresentem uma relao direta com patgenos mais persistentes no ambiente. Alm de fornecer informaes sobre a presena de contaminao fecal na gua, as anlises microbiolgicas so teis para se avaliar a eficcia de mtodos de tratamento para determinados grupos de microrganismos. Por exemplo, a presena de bacterifagos pode indicar que os vrus no foram removidos, e a presena de clostrdios sulfito-redutores pode estar demonstrando a presena de microrganismos mais persistentes. A contagem de bactrias heterotrficas aerbicas pode fornecer informaes sobre a disponibilidade de nutrientes na gua que propiciam o crescimento bacteriano, o que pode resultar em problemas estticos, ou na presena de microrganismos patognicos oportunistas, tais como Pseudomonas aeruginosa, Legionella sp e Aeromonas sp. Para esses, existem tcnicas especficas de deteco, que no so utilizadas rotineiramente, mas somente quando necessrio para resolver problemas relacionados sua presena. A coleta de amostras de gua para exame microbiolgico apresenta tcnica diferenciada em gua bruta e tratada e deve ser realizada sempre antes da coleta de qualquer outro tipo de ensaio ou determinao de campo, a fim de se evitar o risco de contaminao do local de amostragem com frascos ou amostradores no estreis. O frasco deve ser preparado previamente no laboratrio, estril e conter (a) EDTA em quantidade necessria para complexar metais pesados que possam estar presentes na amostra (por exemplo, cobre), e (b) tiossulfato de sdio, se houver a suspeita da presena de cloro livre (Captulo 3 - Ensaios Microbiolgicos). Este frasco no deve ser ambientado e a coleta deve ser pontual, ou seja, a amostra para ensaio microbiolgico no deve ser composta.

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Procedimentos de coleta de amostras para ensaio microbiolgico em guas superficiais As amostras para anlises microbiolgicas devem, preferencialmente, ser recolhidas diretamente nos frascos esterilizados que sero enviadas para anlise; ou em baldes esterilizados. Remover a tampa do frasco, juntamente com o papel alumnio protetor, tomando cuidado para evitar a contaminao da amostra pelos dedos das luvas ou outro material; Manter a tampa sobre o frasco no momento da coleta a uma distncia de aproximadamente 10 centmetros, para evitar a contaminao da parte interna da tampa ou queda de qualquer material no interior do frasco; Encher o frasco com a amostra at aproximadamente (trs quartos) do seu volume, para possibilitar sua homogeneizao durante o processo de ensaio no laboratrio (Fig. 65); Fechar imediatamente o frasco, fixando muito bem o papel alumnio protetor em volta da tampa; Identificar a amostra; Acondicionar a amostra em caixa trmica, sob refrigerao, para transporte.

(A)

(B)

Figura 65. Coleta de amostra de gua superficial para anlise microbiolgica: (A) com balde de ao inox; (B) diretamente do corpo dgua (Foto: Carlos Jesus Brando/CETESB).

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Procedimentos de coleta de amostras para ensaio microbiolgico em guas de profundidade Aps a coleta da amostra do local com garrafa de van Dorn, desconectar a mangueira de ltex; Desprezar a gua contida na mangueira de ltex da garrafa de van Dorn; Remover a tampa do frasco, juntamente com o papel alumnio protetor, tomando cuidado para evitar sua contaminao pelos dedos das luvas ou outro material; Encher o frasco atravs da mangueira de ltex, at aproximadamente (trs quartos) do seu volume, para possibilitar sua homogeneizao durante o processo de ensaio no laboratrio: Manter a tampa sobre o frasco no momento da coleta a uma distncia de aproximadamente 10 centmetros, para evitar a contaminao da parte interna da tampa ou queda de qualquer material no interior do frasco; Fechar imediatamente o frasco, fixando muito bem o papel alumnio protetor em volta da tampa; Identificar a amostra; Acondicionar e transportar a amostra em caixa trmica, sob refrigerao (Fig. 66).

Figura 66. Acondicionamento e transporte de amostras para anlises microbiolgicas em caixa trmica sob refrigerao (Foto: Carlos Jesus Brando/CETESB).

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As amostras para ensaios de bactrias patognicas podem ser obtidas de duas formas distintas: coleta de gua do local (observando o preparo da frascaria na coleta para ensaios microbiolgicos), ou instalao de uma mecha que, aps ser retirada do local, deve ser transportada em meio de transporte Cary e Blair. Orientaes para a confeco da mecha e preparo do meio de transporte Cary e Blair encontram-se no Captulo 3 (Ensaios Microbiolgicos).
Procedimento de coleta com mecha (Bactrias patognicas) Imergir a mecha no ponto de coleta, amarrando previamente o seu fio de nilon em local seguro; Deixar a mecha no local por um perodo de 48h ou mais, de acordo com a finalidade do estudo; Retirar a mecha, colocando-a em saco plstico esterilizado contendo meio de transporte Cary e Blair; Identificar a amostra; Acondicionar e transportar a amostra em caixa trmica, sob refrigerao.

6.1.6 Balneabilidade de Praias


As praias a serem monitoradas e seus pontos de coleta devem ser definidos considerando os diversos fatores que influem na sua balneabilidade. Esses pontos so selecionados em funo da frequncia de banhistas, da fisiografia da praia e dos riscos de poluio que possam existir e devem ser revistos periodicamente. As amostras de gua para balneabilidade so coletadas no local considerado mais representativo, na regio de profundidade aproximada de 1 metro, que representa a seo no corpo de gua mais utilizada para a recreao. Deve-se tambm observar certa distncia da rea de influncia de cursos dgua eventualmente contaminados, para que as amostragens sejam representativas das condies de balneabilidade da praia. As condies de amostragem tm um importante papel no resultado do monitoramento de balneabilidade e devem ser aquelas consideradas as mais crticas. As amostragens devem ser realizadas nos dias de maior afluncia do pblico s praias, geralmente aos domingos, e preferencialmente na mar vazante no caso de guas marinhas, na qual, em princpio, observa-se maior contribuio e menor diluio dos efluentes.

amostragem de gua bruta de sedimentos

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Recomenda-se que a periodicidade de amostragem das praias seja estabelecida em funo da poca do ano, frequncia de banhistas e do ndice de ocupao residencial das regies prximas sua orla. Assim, as praias mais frequentadas devem ser monitoradas semanalmente. As praias menos frequentadas, mas que j passam por um processo de urbanizao em suas imediaes, podem ser avaliadas por meio de monitoramento mensal sem, no entanto, serem classificadas conforme as categorias preconizadas pela Resoluo Conama relativa ao controle da qualidade da gua para balneabilidade (CONAMA n 274/00). O acompanhamento da evoluo da qualidade destas praias deve ser realizado em carter preventivo e, se forem constatados ndices indicadores de contaminao fecal em quantidades significativas, o monitoramento deve ser conduzido semanalmente. Na poca de temporada (meses do vero e das frias escolares), deve ser prevista a intensificao do monitoramento para as praias com maiores ndices de contaminao. No Estado de So Paulo informaes adicionais sobre a balneabilidade das praias podem ser obtidas na pagina oficial da CETESB (www. cetesb.sp.gov.br), especialmente nos Relatrios Anuais Qualidade das guas Litorneas do Estado de So Paulo, e na pgina da Secretaria do Meio Ambiente do Estado de So Paulo (www.ambiente.sp.gov.br).
Procedimentos de coleta de amostras para ensaios microbiolgicos, para avaliao de balneabilidade das praias interiores e litorneas A coleta deve ser realizada em local com maior frequncia de banhistas; O tcnico deve adentrar na gua at linha de cintura do banhista; Remover a tampa do frasco, juntamente com o papel alumnio protetor, tomando cuidado para evitar sua contaminao pelos dedos das luvas ou outro material (Fig. 67); Manter a tampa sobre o frasco no momento da coleta a uma distncia de aproximadamente 10 centmetros, para evitar a contaminao da parte interna da tampa ou queda de qualquer outro material no interior do frasco; Encher o frasco com a amostra at aproximadamente (trs quartos) do seu volume, para possibilitar sua homogeneizao durante o ensaio no laboratrio; Fechar imediatamente o frasco, fixando muito bem o papel alumnio protetor em volta da tampa; Identificar a amostra; Acondicionar a amostra em caixa trmica, sob refrigerao, para transporte.

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Figura 67. Coleta de amostra de gua recreacional (mar) para anlise microbiolgica (Fonte: Foto carlos Jesus brando/cetesb).

6.1.7 Comunidades Biolgicas


As comunidades biolgicas fornecem a melhor base para a avaliao da integridade ecolgica dos ecossistemas aquticos. Uma vez que o dado biolgico gerado a partir da coleta de organismos vivos, que podem escapar captura ou apresentar comportamento migratrio ou distribuio espacial heterognea no local de investigao, o programa de amostragem biolgica deve ser cuidadosamente planejado para que os resultados tenham aplicabilidade e reflitam com fidelidade a qualidade do hbitat. Sempre que for possvel, as estaes para monitoramento biolgico (biomonitoramento), ou caracterizao ecolgica, devem ser as mesmas que aquelas estabelecidas para o levantamento qumico, fsico e bacteriolgico, de forma que todas as coletas sejam concomitantes. Para efeito de comparao, os pontos de coleta devem ter condies ecolgicas similares dentro do mesmo projeto ou programa de monitoramento; por exemplo, devem estar localizados na mesma regio em lagos e reservatrios (litornea, limntica e profunda), ou serem em rios de ordens similares (1, 2, 3, 4 ordens). importante que sejam levantados, ao mesmo tempo, dados relativos ao meio fsico como, por exemplo, granulometria do sedimento, transparncia e cor da gua, velocidade e vazo da corrente, largura

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e profundidade do leito, tipos de hbitat presentes no local (por exemplo, proximidade de corredeiras, remansos, vrzeas, presena de macrfitas e cobertura vegetal das margens). Devem tambm ser observadas condies do local, tais como uso e ocupao do solo, presena de despejos industriais e urbanos, extrao de areia ou outra atividade de minerao. Para se comparar diferentes pontos de coleta essencial tambm que todos sejam amostrados aproximadamente ao mesmo tempo. A periodicidade de amostragem depende da comunidade a ser analisada, mas se alguma situao atpica ocorrer, como descarga ou derramamento de substncias qumicas, as amostragens devem ser realizadas a intervalos de tempo menores, de modo a acompanhar a recuperao das comunidades. A seleo do tamanho da estao de amostragem influenciada pelos grupos taxonmicos a serem estudados e pela natureza do problema a ser investigado. Para fitoplncton e macroinvertebrados, um local adequado de amostragem pode cobrir pequenas reas ou volumes, enquanto que para peixes uma estao pode se estender de 100m2 a 1000m2, dependendo da densidade das populaes e do territrio usual da espcie sob investigao. A amostragem de comunidades biolgicas pode ser dividida basicamente em trs tipos, conforme o objetivo do trabalho ou projeto: qualitativa, semiquantitativa e quantitativa. O tipo da amostragem define os equipamentos e o esforo da coleta, necessrios. A amostragem qualitativa serve a estudos de comparao espacial e/ou temporal, baseados na composio faunstica e/ou florstica. Neste caso, no h transformao dos dados em unidade de rea ou volume. Amostras semiquantitativas podem ser obtidas de duas formas: a) o esforo amostral (tempo) medido no emprego de mtodos qualitativos de coleta, ou b) amostradores quantitativos so usados em coleta no aleatria e sem rplicas. A amostragem mais exigente , sem dvida, a quantitativa, em que so amostradas unidades de rea ou volume bem definidos. Preferencialmente so realizadas rplicas (ou unidades de amostragem), tomando-se cuidados relativos ao tamanho e distribuio das unidades de amostragem na rea de estudo. Os dados da coleta quantitativa se prestaro a objetivos mais amplos, fornecendo a possibilidade de se estimar densidades ou

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biomassas das populaes de organismos, alm das informaes obtidas pelos outros dois tipos de amostragem. Existem vrios estudos definindo o nmero de rplicas necessrio em relao confiabilidade estatstica que se deseja obter na amostragem quantitativa. Em geral, so aplicadas frmulas onde se empregam dados (mdia, desvio ou erro padro, varincia) provenientes de uma campanha de amostragem preliminar. Os dados obtidos sero tanto mais confiveis quanto mais cuidadosamente definidos o local de amostragem e o nmero de rplicas (para maiores informaes recomenda-se a consulta Elliott,1977 e Merritt & Cummins, 1996). O plano de amostragem depende dos objetivos do projeto ou do programa de monitoramento. Cada caso requer uma metodologia especfica, tanto de coleta, quanto de ensaios e interpretao de dados. 6.1.7.1 Pigmentos Fotossintetizantes (Clorofila a e Feofitina a) H diversos mtodos para se avaliar a biomassa vegetal de um ecossistema aqutico. Alm da estimativa do standing-stock por meio da contagem do nmero de organismos num dado volume de gua (determinao do fitoplncton, seja de gua doce ou marinha), pode-se efetuar a estimativa pela determinao da concentrao de pigmentos, sobretudo de clorofila a. A clorofila a que um pigmento comum a todos os vegetais, representa de 0,1% a 9,7% do peso do material orgnico em todas as algas planctnicas, sendo por isso, o indicador preferido para estimar a biomassa algal. Entretanto, as molculas de clorofila no so estveis; dependendo das condies do meio, tais como mudanas do pH, temperatura, ou luminosidade excessiva, elas podem sofrer degradao, originando produtos conhecidos como feopigmentos. A feofitina a um produto da degradao da clorofila a, que pode interferir grandemente nas medidas deste pigmento, por absorver luz na mesma regio do espectro que a clorofila a. A relao entre clorofila a e feofitina a em ambientes aquticos tem grande importncia na indicao do estado fisiolgico da comunidade fitoplanctnica. A determinao quantitativa da clorofila a propicia a avaliao do grau de trofia do ambiente, ou seja o grau de enriquecimento por nutrien-

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tes, podendo ainda ser utilizada para uma estimativa da biomassa algal, bem como da produo primria. Procedimentos de coleta As amostras para determinao das concentraes de clorofila a e feofitina a devem ser obtidas preferencialmente em replicata, por ponto de coleta. A distncia entre as rplicas determinada aleatoriamente. Estas rplicas so coletadas na superfcie, at 30cm de profundidade. Deve-se sempre enxaguar o frasco com gua do local antes de introduzir a alquota que servir de amostra para exame. O frasco no deve ser totalmente preenchido, a fim de facilitar a homogeneizao da amostra antes da filtragem. Os recipientes utilizados para o armazenamento de amostras para a determinao de clorofila devem ser de vidro neutro, devido sensibilidade de algumas algas ao meio alcalino. Utilizar preferencialmente vidros escuros (frasco mbar de 1L) com tampa rosqueada. No caso de se utilizar outro tipo de frasco de vidro neutro, este deve ser protegido por folha de papel alumnio, para que no haja penetrao de luz, evitando o metabolismo fotossinttico, bem como a degradao da molcula de clorofila. Os frascos plsticos devem ser evitados, pois o material tende a aderir nas paredes, resultando em perdas nas determinaes. A amostra deve ser filtrada em campo, imediatamente aps a coleta; caso isto no seja possvel, deve ser mantida refrigerada at a chegada ao laboratrio, o que dever ocorrer em um prazo mximo de 48 horas (ver detalhes no Anexo 1). Quando o pH da amostra for inferior a 6, ou se considerado necessrio, a amostra pode ser preservada com carbonato de magnsio 1%.

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Procedimentos para coleta de amostras para ensaio de clorofila a e feofitina a em guas superficiais: Antes da amostragem, deve-se verificar se h anlises correlatas como, por exemplo, nutrientes, fitoplncton e teste de toxicidade, para se ter o cuidado de distribuir alquotas da mesma amostragem nos diferentes frascos; Realizar a coleta a aproximadamente 30cm abaixo da lmina dgua. Esta coleta pode ser feita manualmente (submergindo o frasco de coleta), com um balde de ao inox polido AISI 316L ou garrafa de amostragem; Preencher o frasco de coleta de forma que fique um espao que possibilite a homogeneizao da amostra. Caso a filtrao no possa ser realizada no local, a amostra deve ser imediatamente armazenada ao abrigo da luz e transportada em caixa trmica com gelo, nunca excedendo o prazo de 48 horas aps a coleta para a filtrao.

Procedimentos para coleta de amostras para ensaio de clorofila a e feofitina a em amostras de profundidade: Antes da amostragem, deve-se verificar se h anlises correlatas como, por exemplo, nutrientes, fitoplncton e teste de toxicidade, para se ter o cuidado de distribuir alquotas da mesma amostragem nos diferentes frascos; Aps a coleta com garrafa de van Dorn, desconectar a mangueira de ltex da garrafa; Desprezar a gua contida na mangueira de ltex, e transferir para um frasco de vidro, sendo que este no deve ser totalmente preenchido para que possa ser feita a homogeneizao de seu contedo no laboratrio; Caso a filtrao no possa ser realizada no local, a amostra deve ser imediatamente armazenada ao abrigo da luz e transportada em caixa trmica com gelo, nunca excedendo o prazo de 48 horas aps a coleta, para ser filtrada.

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Procedimentos para filtrao das amostras para ensaios de clorofila a e feofitina a em campo: Materiais: Membrana filtrante (47mm de dimetro) de fibra de vidro ou membrana filtrante de celulose hidroflica com porosidade entre 0,45mm e 1,0mm.; Conjunto para filtrao a vcuo para membranas de 47mm de dimetro (Figs. 68 e 69); Pina de ponta reta, de ao inoxidvel, borda plana; Envelope de papel pardo do tipo kraft, para armazenar o filtro com o contedo filtrado; Proveta de 500mL a 1L; Pisseta com gua destilada; Bomba de vcuo, para filtragem sob presso (Figs. 70 e 71); Frasco envolvido em papel alumnio ou dessecador, contendo slica gel, onde os envelopes com as amostras so armazenados e mantidos sob refrigerao. Procedimentos: Homogeneizar a amostra por cerca de dez vezes antes de iniciar a filtrao. O volume de gua a ser filtrado pode variar de 0,05L a 1L, dependendo da concentrao de organismos ou partculas em suspenso existentes na amostra. Filtrar a maior quantidade possvel, preferencialmente todo o volume coletado, e anotar esta informao (volume filtrado); Filtrar em membrana (47mm de dimetro) de fibra de vidro ou membrana filtrante de celulose hidroflica com porosidade entre 0,45mm e 1,0mm.; Este processo no deve exceder 10 minutos e a amostra deve permanecer protegida da luz; Aps o trmino da filtragem, lavar o funil internamente com gua destilada; Com o auxlio da pina, dobrar o filtro contendo o material nele retido, uma nica vez ao meio, sem que haja contato manual; Guardar o filtro em envelope contendo indicaes do volume filtrado, identificao de amostras, ponto de amostragem, data e outras informaes que sejam necessrias; Colocar o envelope imediatamente em frasco escuro, ou envolvido em papel alumnio, contendo slica gel; Devido ao fato de que, temperatura ambiente e sob a ao da luz, as molculas de clorofila degradam-se muito rapidamente, o frasco contendo as amostras filtradas deve ser colocado, imediatamente aps a filtragem, sob refrigerao at o momento de sua chegada ao laboratrio; Transportar o frasco para o laboratrio de destino, sob refrigerao, em caixa trmica com gelo. Se a amostra for demorar mais de 48 horas para ser entregue no laboratrio, este frasco deve ser mantido congelado at a ocasio do transporte.

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Figura 68. Sistema Porta Filtro para Filtrao de Amostras para Ensaio de Clorofila a e Feofitina a em Laboratrio (Foto: Carlos Jesus Brando/CETESB).

Figura 69. Sistema Porta Filtro para Filtrao de Amostras para Ensaio de Clorofila a e Feofitina a em Campo (Foto: Carlos Jesus Brando/CETESB).

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Figura 70. Bomba de Vcuo Manual para campo (Foto: Carlos Jesus Brando/CETESB).

Figura 71. Bomba de Vcuo Eltrica para campo (Foto: Carlos Jesus Brando/CETESB).

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6.1.7.2 Comunidade Fitoplanctnica O termo fitoplncton refere-se comunidade de organismos microscpicos fotossintetizantes que vivem em suspenso nas diversas camadas de gua. Em ambientes de gua doce, o fitoplncton constitudo principalmente por algas (clorofceas, diatomceas, euglenofceas, crisofceas, dinofceas e xantofceas) e cianobactrias. A distribuio vertical est predominantemente associada zona euftica onde, devido presena de energia luminosa, realizam a fotossntese. Constituem parte da comunidade responsvel pela produo primria de um ecossistema aqutico sendo, portanto, a base da cadeia alimentar tanto de ambientes marinhos como de gua doce. A comunidade fitoplanctnica, de uma forma geral, pouco abundante em ambientes pobres em nutrientes (oligotrficos). Entretanto, pode estar bem representada por organismos de vrios grupos. J em ambientes ricos em nutrientes (eutrficos), a comunidade geralmente abundante com presena de espcies pertencentes a um nico grupo. Como principal consequncia da eutrofizao destaca-se a proliferao excessiva de algas e cianobactrias, fenmeno conhecido como florao ou bloom, sendo as cianobactrias os organismos mais frequentes em floraes de guas continentais (Fig.72). Esses microrganismos podem produzir toxinas altamente potentes, conhecidas como cianotoxinas, as quais podem apresentar efeitos neurotxicos, hepatotxicos ou dermatotxicos.
(A) (B)

Figura 72. Florao ou Bloom de Cianobactrias no Reservatrio Billings So Paulo-SP: (A) Proliferao excessiva de algas e cianobactrias; (B) Disco de Secchi recoberto por algas e cianobactrias (Foto: carlos Jesus brando/cetesb).

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Outros fatores influenciam a composio e distribuio da comunidade de fitoplncton, alm da quantidade de nutrientes da gua, tais como: vento, correnteza, estratificao, circulao, hora do dia, profundidade de penetrao da luz, intensidade luminosa, estao do ano e presena de material txico, entre outros. O desequilbrio da comunidade fitoplanctnica pode trazer vrios problemas qualidade da gua, como: gosto e odor, colorao acentuada, variao na concentraco de oxignio dissolvido, alm de que algumas espcies apresentam potencial para produzir toxinas. Estes problemas se agravam principalmente quando o uso da gua est direcionado para abastecimento pblico. O ensaio de fitoplncton, sua identificao e quantificao, so de grande interesse para avaliar as condies ecolgicas de um ecossistema aqutico, prevenir ou controlar situaes indesejveis ou incompatveis com a finalidade de utilizao de um determinado manancial. Procedimentos de Coleta do Fitoplncton A amostragem para ensaio de fitoplncton pode ser feita de vrias maneiras, dependendo do objetivo do estudo. Na gua superficial pode ser realizada em uma nica tomada, de uma forma integrada (quando vrias coletas da gua superficial so reunidas em uma amostra), ou em rplicas (duas ou mais, que sero analisadas individualmente). Na coluna dgua, pode ser feita em vrias profundidades e compostas em uma nica amostra ou analisadas individualmente (rplicas). recomendvel que em amostragens de rotina para programas de monitoramento a coleta seja realizada, se possvel, no mesmo perodo do dia. importante ressaltar que dentro do grupo das cianobactrias existem espcies que possuem aertopos as quais podem migrar na coluna dgua de acordo com a intensidade luminosa. Esta caracterstica importante principalmente nas amostragens em guas captadas para consumo humano, nas quais a altura da tomada da gua, bem como a integrao de dados de toda coluna dgua, devem ser considerados.

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Procedimentos para coleta manual de amostras, para ensaio fitoplncton, em guas superficiais: A coleta manual pode ser realizada com o balde de inox ou, na falta deste, com o prprio frasco. Para tanto, deve-se submergir o frasco de 1 L (mbar, de boca larga) na camada superficial (at 30cm) ou preench-lo com ajuda de um balde de ao inox AISI 316L, tomando-se o cuidado de no preench-lo completamente para facilitar a homogeneizao em laboratrio; Antes da amostragem, deve-se verificar se h anlises correlatas como, por exemplo, nutrientes, clorofila a e teste de toxicidade, para se ter o cuidado de distribuir alquotas da mesma amostragem nos diferentes frascos; Manter a amostra refrigerada e ao abrigo da luz. Se necessrio, adicionar ainda em campo, formol at uma concentrao final de 5%, ou lugol, procurando manter uma alquota, em um frasco menor (100mL), refrigerada para observao do material vivo. OBS - Procedimentos para a coleta manual de amostras de floraes de cianobactrias: Quando h formao de nata superficial no ponto de coleta, proceder como descrito acima, tomando o cuidado ao se colocar o balde ou o frasco na gua, para no movimentar muito a massa flutuante. Distribuir alquotas da mesma amostragem nos diferentes frascos.

Procedimentos para coleta de amostras para ensaio de fitoplncton, com auxlio de equipamento: Coleta com garrafas de profundidade van Dorn horizontal e vertical A coleta com garrafa pode ser utilizada para amostragem superficial e de profundidade. Aps a coleta com a garrafa na profundidade desejada, desconectar a mangueira de ltex; Desprezar a gua contida na mangueira de ltex e distribuir a amostra para o(s) frasco(s) o mais rpido possvel tomando-se o cuidado de no preench-lo(s) completamente, para facilitar a homogeneizao no laboratrio. Neste caso tambm deve ser observado se h anlises correlatas como clorofila a e teste de toxicidade para que as alquotas distribudas nos diferentes frascos sejam provenientes de uma mesma amostragem; Manter a amostra refrigerada e ao abrigo da luz. Se necessrio, adicionar ainda em campo, formol at uma concentrao final de 5%, ou lugol, procurando manter uma alquota, em um frasco menor (100mL), refrigerada para observao do material vivo.

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A coleta com redes de plncton geralmente empregada em estudos qualitativos e pode ser feita por meio de arrasto horizontal e vertical, principalmente. H vrios tipos de redes disponveis, sendo as mais indicadas para o estudo do fitoplncton as de malha de nilon com abertura de 20m a 45m. Recomendam-se as redes longas e de boca larga, que possibilitam maior rea de filtrao. importante destacar que a coleta com rede no permite a quantificao precisa do fitoplncton. Alm disso, algumas espcies muito pequenas (nanoplncton) no so retidas no copo, impossibilitando o conhecimento da comunidade total. Para ambientes com muito material em suspenso, como alguns rios, recomenda-se a coleta com redes de at 60m, pois as de malhas menores entopem e inviabilizam a filtragem do material.
Procedimentos de coleta horizontal do fitoplncton com rede: Amarrar uma corda na extremidade da rede; Em seguida, mergulha-se a rede na gua a uma profundidade at 30cm; Com auxlio de uma embarcao realizado um arrasto na superfcie por tempo determinado, tomando-se o cuidado de evitar a zona de turbulncia provocada pelo deslocamento da embarcao; A amostra retida no copo da rede transferida para um frasco. Com auxlio de uma pisseta de gua destilada, efetuar a lavagem, de fora para dentro do copo, como forma de retirar o material aderido ao mesmo; Manter a amostra refrigerada e ao abrigo da luz. Se necessrio, adicionar ainda em campo, formol at uma concentrao final de 5%, ou lugol ou soluo Transeau.

Procedimentos de coleta vertical do fitoplncton com rede: Mergulhar a rede na gua at a profundidade desejada; Suspender a rede lentamente at a superfcie; A amostra retida no copo da rede transferida para um frasco. Com auxlio de uma pisseta de gua destilada, efetuar a lavagem de fora para dentro do copo, como forma de retirar o material aderido ao mesmo; Caso haja necessidade de uma quantidade maior de organismos fitoplanctnicos, repetir o procedimento descrito nos itens anteriores; Manter a amostra refrigerada e ao abrigo da luz. Se necessrio, adicionar ainda em campo, formol at uma concentrao final de 5%, ou lugol ou soluo Transeau.

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Procedimentos de Coleta para Determinao de Cianotoxinas: A amostragem deve ser realizada na superfcie da gua, coletando-se apenas a nata superficial, diretamente com frasco ou balde de inox; Armazenar em frasco de polietileno de 5 litros sob refrigerao. Obs.: Quando no houver presena de nata, pode-se realizar arrastos (vertical e/ou horizontal) com rede procurando concentrar o maior nmero de organismos; armazenar em frasco adequado sob refrigerao.

6.1.7.3 Comunidade Periftica O perifton, segundo Wetzel (1983) constitui uma complexa comunidade de microrganismos (algas, bactrias, fungos e animais) aderidos a substratos orgnicos (vivos ou mortos) ou inorgnicos. Os primeiros amostradores artificiais de perifton foram desenvolvidos por Moebius em 1883 para coleta de animais em ambientes marinhos, utilizando lminas de microscpio (SCHWARTZBOLD, 1990). A maioria dos estudos sobre a comunidade periftica tem como foco as cianobactrias e algas, remetendo-se raiz nomenclatural do termo (fton). O perifton tem papel importante no metabolismo dos ecossistemas aquticos continentais, sendo considerado um dos produtores primrios mais significativos tanto em ambientes lnticos como em ambientes lticos. Em muitos ecossistemas, o perifiton pode contribuir com cerca de 70 - 80% de matria orgnica para a produtividade total. Alm disso, destaca-se como regulador do fluxo de nutrientes. Organismos perifticos colonizam muitos habitats de rios e lagos e tm sido utilizados como indicadores biticos de caractersticas do ambiente e para biomonitoramento. Dentre as caractersticas que tornam esta comunidade boa indicadora da qualidade da gua incluem-se: Sendo ssseis, esto sempre submetidos s condies do local e isso os torna at melhores indicadores de grau de trofia do que o fitoplncton;

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Apresentam a relao volume/superfcie grande, o que favorece o acmulo de certas substncias qumicas e contaminantes como DDT, Dieldrin, 32P, 65Zn, etc.; Tem ampla ocorrncia e distribuio; H dados disponveis sobre sua autoecologia e limites de tolerncia; Por seu ciclo de vida curto e alta taxa de reproduo, respondem rapidamente a mudanas ambientais e tem requerimentos ambientais especficos (sensibilidade a fatores impactantes), o que os torna excelentes indicadores de qualidade da gua. Esta comunidade tem sido utilizada para monitoramento e avaliao da qualidade, tanto em gua doce, como no meio marinho. Estudos de perifton de guas continentais podem incluir toda a comunidade ou partes desta, tais como diatomceas. Com essa perspectiva, os equipamentos e aparelhos desenhados para coleta de perifton tambm foram caracterizados para amostragem de toda a comunidade ou para a coleta de assemblias como as diatomceas. Uma reviso sobre metodologias de coleta utilizando substratos artificiais foi feita por SLDECKOV (1962). PANITZ (1980) testou substratos artificiais variados para amostragem de perifton em reservatrios e SCHWARTZBOLD (1990) fez uma comparao entre metodologias de amostragem de perifton tanto em substratos artificiais como naturais. Mtodos comumente utilizados para coleta de perifton de gua doce Os mtodos de coleta de perifton podem ser classificados como: coleta manual de substratos naturais captura total ou de parte de substratos naturais (folhas, ramos, pedras); coleta com delimitador captura em rea determinada do substrato natural, mediante perturbao manual do substrato (como por exemplo com o perifitmetro com escova); e coleta com substrato artificial - captura, como substrato de colonizao, sem destruir ou perturbar o ambiente em amostragem (como o flutuador com lminas de vidro). Quaisquer destes mtodos podem ser utilizados para amostragens quantitativas, no entanto a comparao entre pontos s pode ser feita quando os habitats investigados forem similares. No caso de utilizao

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de substratos artificiais, necessria tambm a padronizao do tempo de exposio. Cuidados e preparao da coleta A avaliao dos substratos naturais disponveis no ambiente em estudo, comparando facilidade de coleta, constncia de ocorrncia em todos os pontos amostrais e possibilidade de uso, bem como a avaliao da possibilidade de uso do mesmo equipamento/aparelho para coleta, seja em substratos naturais ou artificiais, parte da preparao da coleta. Os substratos naturais devem ser padronizados, dentro do possvel, quanto ao tamanho das pedras, o tipo de folhas (forma, rugosidade e desenvolvimento maduras, mas no senescentes) e ramos (quanto espessura, formato e rugosidade). No caso de uso de substratos artificiais, estes devem ser instalados no local previamente coleta propriamente dita, para teste do tempo de colonizao. Um procedimento comum em qualquer metodologia de coleta de perifton o clculo de rea raspada/coletada, que possibilita a expresso dos resultados posteriores em organismos por rea. A exatido dos resultados depende diretamente dessas medidas que precisam, portanto, ter a maior acurcia possvel. Outro cuidado que deve ser comum a qualquer metodologia a limpeza de acessrios, aparelhos e equipamentos entre coleta de rplicas e principalmente entre pontos. Esta limpeza deve ser feita com gua do local (entre rplicas) e com gua potvel (de torneira) entre um ponto de coleta e outro. A seguir so descritos procedimentos de coleta de perifton em substratos naturais (folhas, ramos e pedras) e artificiais (flutuador com lminas de vidro). Procedimentos de coleta Pode-se amostrar a comunidade periftica de substratos naturais orgnicos (folhas, ramos), inorgnicos (pedras) ou utilizar substratos artificiais. Substratos naturais podem ser amostrados em rios/riachos e margens de reservatrios.

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A escolha dos substratos depende de sua disponibilidade no local, do tempo e oramento disponveis.
Procedimentos para coleta de perifton em substratos naturais (folhas, ramos, pedras pequenas): Vistoriar o local em busca das melhores plantas, ramos e/ou pedras. A seleo deve levar em conta submerso, evitando-se substratos expostos, e padronizao de rplicas, optando-se por substratos o mais semelhantes em textura e tamanho. Devem ser coletadas pelo menos trs rplicas de cada substrato (Figs. 73 e 74); Cortar ramos e folhas selecionados com auxlio de tesoura, que deve ser lavada com gua do local depois da coleta de cada rplica. Colocar o material coletado em bandeja, com o lado a ser raspado para cima (Figs. 75 e 76); Raspar cada um dos substratos com pincel macio, lavando o material raspado para o frasco de amostra com gua destilada, com auxlio de pisseta. A gua deve ter um volume conhecido (neste caso, 150mL). No caso das pedras e das folhas, raspar apenas a parte superior (Fig. 77); Homogeneizar as amostras e dividir em 2 frascos, sendo 80mL para anlise de clorofila a e 70mL para anlise da comunidade; Preservar a amostra para estudo da comunidade com 6mL de formol 4%, 3 gotas de lugol ou soluo Transeau (1:1). Manter a amostra para anlise de clorofila a refrigerada; Medir comprimento e dimetro dos ramos, com auxlio de rgua e paqumetro. Desenhar com lpis o contorno das folhas e pedras raspadas, em papel vegetal. Os desenhos sero usados posteriormente para medida da rea, com medidor de rea foliar. A rea dos ramos calculada por aproximao da figura geomtrica mais prxima (cilindro). As medidas de rea permitem a expresso dos resultados em organismos/cm2 (Figs. 78, 79 e 80).

Figura 73. seleo de substrato (Foto: rita cerqueira ribeiro de souza/cetesb).

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Figura 74. Detalhe da seleo de ramos e folhas (Foto: Rita Cerqueira Ribeiro de Souza/ cetesb).

Figura 75. Cortes dos ramos e folhas selecionadas (Foto: Mrcia Janete Coelho Botelho/ cetesb).

Figura 76. Seleo de ramos e folhas - Material coletado na bandeja com o lado a ser raspado para cima (Foto: Rita Cerqueira Ribeiro de Souza/CETESB).

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Figura 77. Raspagem do substrato com pincel macio (Foto: Rita Cerqueira Ribeiro de Souza/ cetesb).

Figura 78. Desenho manual das folhas e ramos (Foto: Rita Cerqueira Ribeiro de Souza/CETESB).

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Figura 79. Paqumetro utilizado para medida do comprimento e dimetro dos ramos e tamanho das folhas (Foto: Rita Cerqueira Ribeiro de Souza/CETESB).

Figura 80. Medida do dimetro dos ramos (Foto: Helena Mitiko Watanabe/CETESB).

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Em rios/riachos rasos onde ocorram pedras grandes que no possam ser removidas, a coleta do perifton pode ser realizada com o perifitmetro com escova, modificado de Vis (VIS, 1997; VIS et al, 1998).
Procedimentos para coleta de perifton em substrato natural consolidado (pedras grandes demais para serem deslocadas) com perifitmetro com escova: Selecionar as pedras a serem amostradas; Encostar a borracha da parte inferior do equipamento na pedra, no local mais plano possvel evitando que gua entre ou saia de dentro do tubo (Fig. 81 A); Escovar toda a superfcie delimitada pelo equipamento, tentando retirar todo o perifton sem usar muita fora (Fig. 81 B); Colocar a extremidade com a mangueira livre no frasco de coleta. Levantar a mangueira com a pra na extremidade e bombear at que toda a gua e perifton raspado tenham sido transferidos do interior do equipamento para o frasco de amostra (Fig.81, C); Preservar a amostra com lugol, formol 4% ou soluo Transeau (1:1).

(A)

(B)

(C)

Figura 81. Coleta de amostras para Perifton com perifitmetro com escova, modificado por VIS: (A) Introduo do amostrador no local selecionado, (B) Retirada do perifiton com a escova; (C) Bombeamento da gua e perifiton raspado e preenchimento do frasco (Fotos: Rita cerqueira ribeiro de souza/cetesb).

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Substratos artificiais, como flutuadores com lminas de vidro podem ser usados em rios/riachos ou reservatrios onde haja razovel proteo contra vandalismo (locais mais distantes, com margens florestadas, propriedades privadas). Os tubos de vidro cilndricos e lminas de microscpio so considerados excelentes substratos artificiais por seu baixo custo, boa aderncia e colonizao do perifton, facilidade de remoo do biofilme aderido e fcil delimitao de rea e volume.
Procedimentos para coleta de perifton em substrato artificial com flutuador de lminas de vidro: Selecionar o local para instalao do flutuador, evitando a exposio e acesso a estranhos, e determinar ponto de fixao na margem; Prender o flutuador ao ponto fixo. Desenhar um croqui do local, anotar coordenadas geogrficas e registrar fotograficamente, de modo a possibilitar o resgate do equipamento; Deixar o flutuador no local pelo tempo pr-determinado, usualmente, 15 dias (Fig. 82 A); Depois do tempo pr-determinado, voltar ao local e retirar o equipamento da gua, colocando-o em bandeja (Fig. 82 B); Abrir o flutuador soltando dois dos parafusos das extremidades; Retirar uma lmina de cada vez, raspar o perifton com pincel macio no frasco de amostra, lavando com pisseta e gua. Preservar as amostras com lugol, formol 4% ou soluo Transeau (1:1); Pode-se optar por analisar a amostra completa em laboratrio. Nesse caso, a lmina dever ser colocada sem raspagem, diretamente no frasco de coleta e preservada.

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(A)

(B)

Figura 82. Coleta de amostras para Perifton. (A) Flutuador de Lminas de vidro; (B) Retirada do Flutuador de Lminas de vidro (Fotos: Rita Cerqueira Ribeiro de Souza).

Fixao e preservao de amostras de perifton Para a fixao e conservao do perifton existem vrios processos e produtos citados na literatura: Congelamento - uma forma de preservao utilizada para anlise de biomassa, composio de diatomceas e abundncia semiquantitativa de txons como clorofceas e cianobactrias. Este o nico mtodo prtico para preservao de grandes amostras para anlise de biomassa; Soluo Transeau a desvantagem deste preservante a grande quantidade de soluo necessria, o que torna o custo elevado e inviabiliza o seu uso em excurses de coletas de maior durao ou com grande nmero de amostras; Soluo de formol 4 a 10% neutralizado pode ser usada para preservao de amostras pequenas ou subamostras, para anlise quantitativa e composio taxonmica; Lugol actico 5% pode ser usado para amostras pequenas ou subamostras, para anlise quantitativa e composio taxonmica. A soluo de Lugol facilita a sedimentao (particularmente de pequenas diatomceas) e mantm estruturas celulares frgeis. Entretanto, este preservante s se mantm ativo por 1-2 anos, e as amostras devem ser armazenadas no escuro e em frascos mbar. Tanto o formol como o Lugol mantm as formas das algas sem carapaas. Formol o preservante usado mais comumente porque no degrada as estruturas das organelas ou colorao de algas sem carapaa. Este preservante permanece ativo indefinidamente.

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6.1.7.4 Comunidade Zooplanctnica Os organismos zooplanctnicos so aqueles que vivem em suspenso devido sua limitada capacidade de locomoo; podem ocupar toda a coluna de gua, desde a superfcie at grandes profundidades. A maioria dos invertebrados est representada no zooplncton, seja como adultos, larvas, ou ambos, assim como os ovos e larvas de peixes (vertebrados), e podem ocupar diferentes nveis trficos. Alguns dos organismos permanecem no ambiente planctnico durante todo o seu ciclo de vida (holoplncton), outros, s parte dele (meroplncton), como larvas de diversos grupos (poliquetos, crustceos, insetos e peixes). So encontrados em praticamente todos os ambientes aquticos, como lagos, charcos, lagoas, esturios, oceanos e em muitos rios. Apesar de apresentarem capacidade limitada de deslocamento horizontal, demonstram uma excepcional capacidade de migrao vertical. Por isso, alm de uma distribuio horizontal heterognea, apresentam movimentos verticais diferenciados em resposta a diversos estmulos, como alimento, reproduo, luminosidade, correntes etc. Essa migrao vertical pode ser dividida basicamente em dois tipos: sazonal: associada reproduo ou a fatores fsico-qumicos. Animais que vivem em guas profundas podem deslocar-se para a superfcie numa determinada poca do ano para se reproduzir, por exemplo, e animais que vivem na superfcie no inverno podem mover-se para guas mais profundas e frias no vero, e vice-versa; diria: associada principalmente intensidade luminosa. Cada espcie tem preferncia por determinada intensidade de luz, movendo-se mais para a superfcie ou mais para o fundo, medida que o sol se eleva ou se pe durante o dia, sendo que a nebulosidade tambm pode influenciar esse movimento. A concentrao mxima do zooplncton ocorre, em geral, nas camadas superficiais onde h, entre outros fatores, concentraes mais elevadas de alimento. Contudo, a quantidade de zooplncton de um local depende da resposta a estmulos promovidos por diversos outros fatores, como perodo do dia, estao do ano, concentrao de nutrientes, presena de substncias txicas na gua, entre outros. O tamanho dos organismos zooplanctnicos geralmente varia de poucos micrmetros at mais de 20mm e incluem flagelados, ciliados, rotferos, coppodes, cladceros e outros invertebrados (Tab. 4).

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Tabela 4. Classificao do zooplncton em funo do tamanho dos organismos


Grupo Limites de tamanho Principais organismos

Ultrananoplncton ou Picoplncton Nanoplncton Microplncton Mesoplncton Macroplncton Micronecton Megaloplncton

< 2m 2m - 20m 20m - 200m 200m - 2mm 2mm - 20mm 20mm - 200mm > 200mm

Bactrias livres Pequenos flagelados, ciliados e alguns rotferos Foraminferos, ciliados, flagelados, rotferos, cladceros e coppodes Cladceros, coppodes, quetognatos e larvceos Pterpodos, coppodes, eufausiceos e quetognatos Cefalpodes, eufausiceos, sergestdeos e mictofdeos Cifozorios, Taliceos

Fonte: OMORI & IKEDA, 1984, modificado.

A comunidade zooplanctnica responde rapidamente s alteraes ambientais devido ao curto ciclo de vida dos organismos, fazendo com que possam ser empregados como indicadores da qualidade da gua. Apesar disto, a natureza transitria e a distribuio frequentemente agrupada muitas vezes tornam necessria a interpretao de seus resultados conjuntamente com outros dados biolgicos, fsicos e qumicos, coletados simultaneamente. Alm disso, o ambiente planctnico conta com a presena comum, ainda que normalmente em baixas densidades, de organismos bentnicos que fazem incurses na massa dgua ou so ressuspensos na coluna dgua em funo de turbulncia e mistura de gua, como na zona de influncia de rios, ocorrncia de chuvas e ventos fortes, especialmente em locais rasos (<20m). Muitos aparelhos de coleta foram desenvolvidos para essa comunidade em funo, principalmente, da variabilidade na distribuio do zooplncton, da diversidade de ambientes e da capacidade de fuga e de escape dos zooplanctontes e, por isso, no h um mtodo que colete toda a variedade de organismos. Na tabela 5 encontram-se algumas a recomendaes para a escolha do aparelho de coleta.

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Tabela 5. Recomendaes para a seleo do equipamento de coleta de zooplncton em diferentes ambientes.


Amostras integradas horizontalmente Amostras integradas verticalmente guas pelgicas ou profundas guas litorneas ou rasas Amostras em vegetao

Equipamento

Amostras pontuais

Garrafas Armadilhas Bombas Redes

+ ++ ++ -

+ + ++

+ ++

+ ++ ++ +

++ ++ ++
-

Legenda: (-) Pouco recomendado; (+) Recomendado; (++) Muito recomendado.

Como a distribuio do zooplncton geralmente agregada e durante a coleta ocorre fuga e escape dos organismos, torna-se necessrio aumentar o volume coletado por amostra ou adicionar rplicas (ou ambos). Apesar de no existir definio quanto ao volume mnimo a ser amostrado, pois depende da finalidade da investigao, sabe-se que, em ambientes oligotrficos, estuarinos e costeiros, necessrio coletar um volume muito maior (geralmente centenas de litros) do que em ambientes eutrficos; j nesses ltimos a concentrao de zooplncton frequentemente alta. Recomenda-se coletar um volume mnimo, por rplica, de 100L para o zooplncton de gua doce e de 5m3 para o costeiro/estuarino e a obteno de pelo menos duas rplicas em cada ponto de amostragem. Uma vez estabelecido o procedimento e o equipamento de coleta, muito importante que estes no sejam alterados ao longo do estudo, a fim de possibilitar a comparao dos resultados. Na necessidade de informaes adicionais, deve-se complementar com mais outro tipo de amostragem. A seguir sero descritos os procedimentos para as coletas mais rotineiramente empregadas, sem mencionar tcnicas bioacsticas e de observao in situ. Maiores detalhes sobre coleta de zooplncton podero ser encontrados em APHA (2005), BOLTOVSKOY (1981), De BERNARDI (1984), OMORI & IKEDA (1984), PINTO-COELHO (2004) e UNESCO (1968).

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i - Procedimentos de coleta com garrafas e armadilhas A garrafa do tipo van Dorn a mais utilizada, porm h diversos outros tipos de garrafas que podem ser empregados na coleta de zooplncton. bastante eficiente para capturar organismos pequenos, que apresentam baixa capacidade de locomoo e fuga, como protozorios e rotferos. Por coletarem um volume pequeno (2L a 30L), quase sempre necessitam de vrios lances para capturar as formas raras ou de maior mobilidade. Por isso, no so recomendadas para ambientes oligotrficos ou profundos. Para organismos maiores (cladceros e coppodes), so preferidas bombas, armadilhas e redes. A armadilha (ou trampa) uma associao de uma garrafa de maior capacidade e uma rede. As amostras obtidas com garrafas van Dorn ou com armadilha de Schindler-Patalas so geralmente filtradas em redes de nilon de malha conhecida. Podem ser utilizadas para ensaio qualitativo ou quantitativo, em estudos para o conhecimento da distribuio vertical do zooplncton, sendo estes equipamentos mais prticos para ambientes aquticos pequenos, como lagoas rasas ou pequenos lagos. As principais vantagens que as garrafas e armadilhas exibem so a possibilidade de coleta em qualquer profundidade e o conhecimento do volume preciso de gua em que os organismos foram capturados. Ambas podem ser empregadas satisfatoriamente em ambientes eutrficos, onde a abundncia de zooplncton e matria orgnica em suspenso podem reduzir a eficincia de outros equipamentos, em estudos de microdistribuio e da zona litornea. Recomenda-se que a garrafa e a armadilha sejam transparentes e sem partes brilhantes, a fim de reduzir a fuga de organismos mais velozes. Estes equipamentos podem ser empregados para obter amostras pontuais ou integradas. A amostra pontual obtida simplesmente lanando-se em um determinado local, uma nica vez, o equipamento de coleta. J a amostra integrada o resultado de diversos lances realizados no mesmo intervalo de tempo e reunidos em uma nica amostra.

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Coleta de amostras para ensaio de zooplncton com garrafa van Dorn: Lanar a garrafa de van Dorn e coletar na profundidade desejada, quantas vezes forem necessrias; A cada lance efetuado, filtrar o seu contedo em rede de plncton (a seleo da malha depende de que classe de tamanho ou grupo de organismos se deseja avaliar); Remover o copo da rede, vertendo a amostra para o frasco de coleta; Limpar o copo da rede, vertendo seu contedo para o frasco de coleta quantas vezes forem necessrias para a completa remoo dos organismos; Adicionar formol e completar com gua filtrada (zooplncton de gua doce) ou com gua do local (zooplncton marinho) at obter uma soluo de formol 10% neutralizado. Em amostras de gua doce, adicionar previamente ao formol, 100mL de gua gasosa e esperar por 15 minutos, aproximadamente; Sempre que possvel, adicionar de 5mL a 10mL de soluo do corante rosa de bengala 0,1%; Fechar bem o frasco coletor e mant-lo ao abrigo da luz.

A coleta integrada de zooplncton ao longo da coluna dgua com garrafa ou armadilha deve ser realizada de forma homognea (a mesma quantidade de lances) em cada estrato, desde a superfcie at prximo do fundo (geralmente de 0,5m a 1m do fundo).
Coleta de amostras para ensaio de zooplncton com armadilha de Schindler-Patalas Lanar a armadilha e coletar na profundidade desejada; Retirar a armadilha da gua; Remover o copo, vertendo a amostra para o frasco de coleta; Limpar o copo da rede, vertendo seu contedo para o frasco de coleta quantas vezes forem necessrias para a completa remoo dos organismos (figs. 83 A, B, C, D, E, e F); Ao final de todos os lances, adicionar formol ao frasco de coleta e completar com gua filtrada (zooplncton de gua doce) ou com gua do local (zooplncton marinho), at obter uma soluo de formol 10% neutralizado. Em amostras de gua doce, adicionar previamente ao formol, 100mL de gua gasosa e esperar por 15 minutos, aproximadamente; Sempre que possvel, adicionar de 5mL a 10mL de soluo do corante rosa de bengala 0,1%; Fechar bem o frasco coletor e mant-lo ao abrigo da luz.

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(A)

(B)

(C)

(D)

(E)

(F)

Figura 83: Coleta de amostras de zooplncton com armadilha de Schindler-Patalas (A) Equipamento posicionado para descida; (B) Equipamento iado aps coleta, (C) Amostra sendo filtrada, (D) Desconexo do copo coletor, (E) Transferncia da amostra retida no copo coletor para o frasco, (F) Lavagem externa do copo coletor para a retirada de material aderido nas paredes (Fotos: Jos Jorge neto/cetesb).

ii - Procedimentos de coleta com bombas As bombas podem ser usadas em estudos qualitativos e quantitativos do zooplncton. Contam com a facilidade de manejo, preciso da profundidade de coleta e facilidade de clculo do volume de gua coletado. Contudo, deve-se selecionar uma bomba cujas engrenagens no fragmentem os organismos, que precisam permanecer intactos para identificao. As bombas contam com a limitao da profundidade em que podem operar e do dimetro relativamente pequeno do tubo de entrada, que dificulta a captura de organismos maiores, mais ativos e que podem evitar facilmente a suco na entrada do tubo. Para evitar esse problema, um funil pode ser colocado no bocal para diminuir a velocidade de entrada da gua e aumentar a rea de ao do

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equipamento, principalmente em ambientes pouco turbulentos, nos quais podem ocorrer erros maiores de amostragem. iii - Procedimentos de coleta com redes de plncton As redes de plncton so a aparelhagem mais empregada no estudo do zooplncton geral. Apesar disto, h um considervel nmero de erros associados amostragem com redes, desde aqueles decorrentes do arrasto propriamente dito (volume, fuga, escape, seletividade, estrato amostrado, contaminao, colmatagem, distribuio agrupada, eficincia de filtrao, etc) at aqueles associados perda de organismos, que ficam aderidos malhagem, durante a transferncia do material para o frasco de coleta. No entanto, as redes de plncton so preferveis s garrafas e armadilhas para amostragem em ambientes oligotrficos, onde o zooplncton menos abundante ou onde elevada quantidade de biomassa necessria para as anlises. De uma forma geral, deve-se utilizar redes cujos poros sejam, pelo menos, 25% menores que a largura dos organismos desejados (BOLTOVSKOY, 1981). Para o estudo do zooplncton geral de gua doce recomenda-se usar malha com porosidade de 60m a 75m e para o zooplncton marinho entre 150m e 250m. A fuga de organismos, um dos principais problemas relacionados amostragem com rede, pode ser reduzida pelo uso de redes maiores, de cores discretas, sem partes brilhantes, velocidades aumentadas (entre 0,5m/s e 1,0m/s), e remoo de acessrios da frente da rede. Se o objetivo for um estudo quantitativo, deve-se equipar as redes com fluxmetro calibrado entre o centro e a borda da boca da rede, para estimar o volume de gua filtrado pelo arrasto. O procedimento para a calibrao do fluxmetro est descrito em Hubold (1979). Quando no se dispe de fluxmetro, pode-se estimar o volume filtrado (m3) durante o arrasto vertical por meio da frmula: volume de gua filtrado (m3) = rea da boca da rede (m2) x profundidade de coleta (m). Esse procedimento, contudo, no recomendado por levar a uma estimativa pouco precisa do volume filtrado, devido ao erro introduzido pela colmatagem.

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Os arrastos mais empregados na coleta de zooplncton so o horizontal e o vertical. (a) Arrasto horizontal D-se preferncia amostragem por arrastos horizontais em determinados estratos, em lugares rasos, prximos s margens, ou onde grande a influncia de fatores fsicos, como o vento e correntezas. Este tipo de coleta tem a finalidade de estimar a distribuio e abundncia do zooplncton dentro de uma camada de gua em particular. Deve-se fixar um flutuador junto boca da rede para mant-la na profundidade desejada.
Procedimentos de coleta por meio de arrasto horizontal: Lanar a rede na gua, tomando-se o cuidado de anotar a leitura inicial do fluxmetro; Estando a rede na profundidade desejada, iniciar lentamente o seu deslocamento de forma que a rede fique longe da zona de turbulncia causada pelo motor da embarcao; A velocidade do arrasto no deve ser superior a 0,5m/s; Depois de decorrido o tempo determinado de arrasto, puxar lentamente o cabo no qual a rede est amarrada e retirar a rede da gua lentamente; Imediatamente aps a sada da boca da rede da gua, anotar a leitura final do fluxmetro; Remover o copo da rede com o zooplncton concentrado, vertendo a amostra para o frasco de coleta; Limpar o copo da rede, vertendo seu contedo para o frasco coletor, quantas vezes forem necessrias para a completa remoo dos organismos; Adicionar formol neutralizado at uma concentrao final de 10% (proporo de 1 parte de formol para 9 partes de amostra) e completar o frasco coletor com gua filtrada (no caso de zooplncton de gua doce) ou com gua do local (no caso de zooplncton marinho); Sempre que possvel, adicionar de 5mL a 10mL de soluo do corante rosa de bengala 0,1%; Fechar bem o frasco coletor e mant-lo ao abrigo da luz.

(b) Arrasto vertical A coleta por meio de arrasto vertical , em geral, mais apropriada do que o arrasto horizontal pois o zooplncton pode apresentar-se verticalmente descontnuo, com tendncia a se concentrar nas camadas mais profundas durante o dia, por exemplo. Entretanto, esse tipo de

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amostragem deve ser realizado em regies onde os fatores fsicos, como correntezas, interferem pouco na coleta da amostra.
Procedimentos de coleta por meio de arrasto vertical: Lanar a rede na gua lentamente, tomando-se o cuidado de anotar a leitura inicial do fluxmetro; Descer a rede at 0,5m-1,0 m do fundo. importante evitar que a rede no bata no fundo, o que ressuspenderia o sedimento e contaminaria a amostra; Subir lentamente a rede e, imediatamente aps a sada da boca da rede da gua, anotar a leitura final do fluxmetro. A velocidade do arrasto deve ser de 0,5m/s, aproximadamente; Retirar a rede da gua. No caso da rede subir com muito material aderido malha, recomendvel submerg-la (deixando a boca da rede fora dgua) a fim de que a gua do local empurre, de fora para dentro, os organismos que ficaram aderidos; Remover o copo da rede com o zooplncton concentrado, vertendo a amostra para o frasco de coleta; Limpar o copo da rede com a gua da pisseta, vertendo o contedo do copo para o frasco coletor quantas vezes forem necessrias para a completa remoo dos organismos, principalmente das malhas laterais; Adicionar formol neutralizado at uma concentrao final de 10% (proporo de 1 parte de formol para 9 partes de amostra) e completar o frasco coletor com gua filtrada (no caso de zooplncton de gua doce) ou com gua do local (no caso de zooplncton marinho); Sempre que possvel, adicionar de 5mL a 10mL de soluo do corante rosa de bengala 0,1%; Fechar bem o frasco coletor e mant-lo ao abrigo da luz.

(c) Cuidados a serem tomados na coleta de zooplncton com redes: a coleta com rede deve ser realizada com o maior cuidado possvel, evitando-se sacudidas e golpes contra o casco da embarcao para evitar fuga dos organismos; os arrastos com redes finas devem ser suficientemente breves para no permitir o entupimento da malha (colmatagem); as redes devem ser inspecionadas entre uma coleta e outra, a fim de verificar a existncia de furos ou outro tipo de dano malha, o que exigiria correo imediata; importante limpar a rede entre dois pontos de coleta com gua do local; esse procedimento ajuda na desobstruo dos poros do cone filtrante (caso estejam um pouco entupidos) e evita a contaminao pela presena de organismos de outro local.

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iv - Fixao e preservao de amostras de zooplncton Existem vrios produtos empregados na fixao e conservao do zooplncton, sendo o formol (5 a 10%) neutralizado e o etanol (70 a 95GL) os mais amplamente utilizados. Recomenda-se a adio da soluo de formol neutralizado com sacarose (item 3.5.2.) para prevenir a distoro da carapaa e a perda de ovos em cladceros de gua doce e a adio da soluo corante rosa-de-bengala 0,1% (10mL, dentro de 24 horas aps a coleta), tanto como forma de destacar organismos em ambientes trbidos, como para controlar a perda de organismos durante a manipulao para o ensaio. A fixao do zooplncton deve ser realizada imediatamente aps a coleta (de 5 a 10 minutos), para evitar a deteriorao e reduzir a predao ainda no frasco. Contudo, alguns grupos zooplanctnicos contraem o corpo com a aplicao do fixador, como alguns rotferos, dificultando a identificao posterior. Para reduzir esta contrao, pode-se refrigerar rapidamente a amostra viva, ou adicionar um pouco de gua quente ou gua gasosa (100mL, aproximadamente) logo aps a coleta da amostra. Esperar 5 a 10 minutos e preencher o frasco completamente com a soluo fixadora (para reduzir as perdas do zooplncton que fica aderido s paredes do frasco), sendo recomendada a proporo mnima de 2/3 desta soluo. Amostras de zooplncton conservam-se por longos perodos, desde que estejam armazenadas em locais abrigados de luz, com temperaturas entre 5oC e 20C, e o nvel da soluo conservadora seja periodicamente verificado. 6.1.7.5 Macrfitas Aquticas O termo macrfitas aquticas refere-se a plantas superiores de tamanho macroscpico que habitam os ambientes aquticos. Este grupo apresenta uma grande heterogeneidade filogentica e taxonmica, podendo incluir desde macroalgas, pteridfitas at angiospermas. Alguns dos gneros mais conhecidos so os aguaps (Eichhornia), alface-dgua (Pistia), vitria-rgia (Victoria) e taboa (Typha). Sua presena mais notada na regio litornea dos ambientes aquticos, incluindo ambientes de gua doce, estuarinos e marinhos, sendo possvel classific-las em cinco grupos distintos, conforme seu bitipo. Elas podem ser plantas enraizadas, emersas, com folhas flutuantes ou submersas. Outros grupos so as plantas livres submersas ou

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flutuantes. A sua distribuio espacial no ambiente depende do grupo a que pertencem. Plantas enraizadas com folhas emersas ou flutuantes esto condicionadas profundidade, j que seus pecolos tm um limite fsico de comprimento, sobretudo no que diz respeito s trocas gasosas. As plantas submersas enraizadas so limitadas pela transparncia da gua. J as plantas flutuantes e as submersas livres tm outras limitaes como nutrientes, vento e correnteza, por isso no so frequentes em ambiente lticos, mas sim em reservatrios, podendo inclusive se transformar em um problema para o abastecimento, gerao de energia e navegao. A contribuio das macrfitas aquticas na produtividade de um ecossistema e na criao de habitats para o desenvolvimento de outras espcies justifica a sua importncia. As metodologias de utilizao de macrfitas aquticas como instrumento de monitoramento de ambientes aquticos podem ser divididas em duas linhas bsicas: a primeira que utiliza as alteraes na composio das comunidades como indicadoras de um impacto (estudos fitossociolgicos) e a segunda que utiliza ensaios qumicos do material vegetal para determinar a eventual bioacumulao de contaminantes (estudos de bioacumulao). Macrfitas aquticas so amplamente utilizadas como bioindicadoras da qualidade da gua de ambientes lnticos e lticos. Entretanto torna-se necessrio que haja o conhecimento prvio das suas caractersticas, bem como das condies que limitam sua ocorrncia e crescimento; da proliferao e manejo da espcie utilizada. i - Estudos fitossociolgicos Esses estudos pressupem um levantamento detalhado da composio especfica dos diferentes ecossistemas e levam em considerao tanto as variaes de habitats como as variaes sazonais. Alguns artigos apresentam a listagem de espcies encontradas em diferentes regies do Brasil (IRGANG; GASTAL JNIOR, 2003), mas muitas delas so consideradas semicosmopolitas. Para a identificao at nvel de espcie, algumas vezes necessrio recorrer s partes reprodutivas, apesar de existirem chaves mais direcionadas s partes vegetativas (COOK,1996; HOEHNE, 1979). Existem algumas metodologias para levantamentos qualitativos e quantitativos, sendo mais utilizados para ambientes aquticos os

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mtodos de parcelas, por meio de amostragem aleatria, ou em transectos. Em POTT e POTT (2003) so apresentados mtodos de levantamento em transectos com diagrama de distribuio de espcies em relao profundidade e distncia da borda. Pode-se ainda, a partir destes levantamentos, calcular a porcentagem de cobertura ou de abundncia/dominncia das diferentes espcies. Em APHA (2005), so apresentados mtodos de mapeamento, incluindo o sensoriamento remoto, mtodos de levantamento das populaes de macrfitas aquticas, metodologias de coleta e abordagens quantitativas, bem como mtodos para a avaliao de produtividade. Para avaliaes de biomassa deve-se considerar que a biomassa de plantas enraizadas est em grande parte enterrada. Tcnicas de levantamento utilizadas: Imagens de satlite (Landsat) Imagens de satlite de alta resoluo (Ikonos) Fotografias areas georreferenciadas Levantamentos em campo (GPS e SIGs) Videografia digital Ecobatimetria tridimensional

Determinao da biomassa de macrfitas A biomassa de macrfitas o peso do material vegetal contido acima e abaixo da lmina dgua, inclusive do material presente no interior do sedimento, expresso por unidade de rea. Por intermdio de um amostrador de rea conhecida, um quadro ou parcela introduzida no local selecionado do banco de macrfitas aquticas, coleta-se em sacos plsticos todo o material vegetal vivo e morto contido em seu interior. Posteriormente, o material seco e pesado e o resultado final expresso por unidade de rea (maiores detalhes encontram-se descritos em POMPO & MOSCHINI-CARLOS, 2003). ii - Estudos de bioacumulao Os estudos de bioconcentrao por macrfitas objetivavam, inicialmente, a reduo da concentrao de nutrientes no ambiente, por meio das plantas. No entanto, um trabalho realizado por SEIDEL (1966) demonstrou que Scirpus lacustri tambm era capaz de absorver grandes quantidades de

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compostos orgnicos, como pentaclorofenol e EDWARD (1975) demonstrou a sua utilidade em estudos com pesticidas (DDT) e PCBs. MAURI et al. (1988) fizeram estudos de absoro de mercrio com Elodea densa e determinaram que a absoro podia ocorrer tanto pelas razes como pelas folhas das macrfitas aquticas. Tambm estudaram o processo de descontaminao, que consiste na eliminao dos contaminantes para a gua, podendo ainda ocorrer a translocao desses contaminantes do tecido velho para o jovem, ou vice-versa. Os estudos podem ser passivos (Tab. 6), quando se coleta o material em determinado ambiente para ensaio posterior, ou ativos, quando introduz-se material no contaminado no meio, para ser recolhido e analisado posteriormente.
Tabela 6. Caractersticas principais dos estudos passivos e ativos e determinao de biomassa de macrfitas aquticas
TIPO DE COLETA DEFINIO VANTAGENS DESVANTAGENS

Bioacumulao Passiva

Coleta de macrfitas aquticas presentes no ambiente

Utiliza-se espcimes que ocorrem nos locais a serem estudados; Leva em considerao um possvel desenvolvimento de resistncia (gentico) das populaes dos diferentes locais. Padronizao da idade e material vegetal transplantado. Podem ser realizadas comparaes em qualquer poca do ano, e para qualquer perodo de exposio. Utiliza-se espcimes que ocorrem nos locais a serem estudados.

Em estudos sazonais, ou com comparaes temporais algumas espcies podem desaparecer do ambiente;

Ativa (ou Mtodo de Transplante) Bioacumulao ativa.

Consiste em introduzir material no contaminado, no meio, que ser posteriormente recolhido e analisado.

Deve-se realizar ensaios preliminares dos contaminantes nas amostras. As amostras introduzidas devem ser marcadas e fixadas para poderem ser recolhidas. Mtodo destrutivo que elimina material de uma rea determinada.

Determinao da biomassa

Coleta de macrfitas aquticas presentes no ambiente

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6.1.7.6 Comunidade Bentnica de gua Doce Em projetos que integrem ensaios qumicos, fsicos, biolgicos e ecotoxicolgicos dos sedimentos, a coleta de amostras para ensaio da comunidade bentnica deve anteceder as dos demais parmetros, minimizando-se assim o efeito da perturbao do sedimento pelo equipamento de coleta, que pode provocar a fuga ou a lavagem dos organismos. A escolha do amostrador a ser empregado na coleta da fauna bentnica depende do objetivo do trabalho, do tipo de ambiente a ser estudado e do substrato encontrado no local de coleta. Os amostradores podem ser classificados em: Pegador - captura, em rea, uma poro do sedimento do ambiente em amostragem; Corer - captura, em profundidade, uma poro do sedimento do ambiente em amostragem; Rede e Delimitador - capturam, em rea, mediante perturbao manual do substrato; e Substrato artificial - captura, como armadilha de colonizao, sem destruir ou perturbar o ambiente em amostragem. Amostragens qualitativas e semiquantitativas de bentos de gua doce podem ser obtidas com o uso de qualquer tipo de amostrador, mas no segundo caso, o esforo amostral, em geral medido como tempo de coleta para redes ou nmero de unidades amostrais para pegadores, corer, delimitadores e substratos artificiais, dever ser padronizado. Amostragens deste tipo em geral se destinam a um levantamento faunstico completo, em que todos os tipos de habitat do ponto de coleta devem ser investigados, mesmo que para isso seja necessria a utilizao de mais de um mtodo e/ou equipamento. Comparaes entre pontos de coleta diferentes s sero vlidas quando habitats similares forem considerados. Embora este tipo de coleta consuma menos tempo, a experincia e habilidade do operador tornam-se fundamentais, pois necessrio que se defina, em campo, todos os diferentes tipos de habitat a serem amostrados. No ensaio de bentos a pegada total considerada, inclusive a gua que acompanha a amostra e o material orgnico e inorgnico grosseiro.

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Nem todo tipo de amostrador se presta para amostragens quantitativas, j que necessria a existncia de uma rea amostral definida, como em pegadores, corers e delimitadores. Embora o nmero de rplicas necessrio para tais amostragens seja calculvel a partir de dados obtidos em estudos piloto, frequentemente estabelece-se como trs a quantidade mnima de unidades amostrais, considerandose o tempo de processamento das anlises e a necessidade de fornecimento rpido dos dados. Entretanto, a obteno de cinco rplicas aumentaria a preciso e a exatido estatstica do dado e, portanto, seria ideal. Ao se realizar amostragem de organismos bentnicos ou de sedimento para ensaio fsico-qumico, desaconselhvel a coleta sobre pontes; uma vez que o sedimento sob ponte no o natural do curso do rio. Muitos pegadores, ao descer, formam ondas de choque na coluna dgua que promovem uma lavagem na superfcie a ser coletada e, consequentemente, subestimam as populaes bentnicas amostradas. O controle da velocidade de descida minimiza esse problema, mas o ideal adotar aparelhos que apresentem mecanismos ou estruturas que evitem essa perturbao do substrato. O pegador Ekman-Birge solucionou satisfatoriamente esse problema ao apresentar portinholas duplas em sua face superior, que se abrem na sua descida e se fecham na subida. Sua eficincia na coleta de amostras da zona profunda de lagos e reservatrios, onde predominam sedimentos finos, tem sido demonstrada em uma srie de trabalhos comparativos e, de fato, esse o equipamento mais empregado em estudos de bentos destes locais. O corer mltiplo pode ser tambm uma boa opo, principalmente na amostragem de populaes de menor tamanho e que se enterram profundamente, como de vermes Oligochaeta. J o corer simples, que possui rea amostral restrita, requerer um maior nmero de rplicas para estimativas populacionais confiveis. Em ambos os casos, a amostragem de organismos de maior porte, como os grandes bivalves sul-americanos, comprometida pela pequena rea de captura deste tipo de equipamento. A Ekman modificada por Lenz e os equipamentos do tipo corer permitem fracionamento da amostra de sedimento e, consequentemente, estudos da distribuio vertical das populaes bentnicas.

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Na zona marginal de lagos e reservatrios e em rios, onde o substrato tende a ser mais grosso e duro, o pegador do tipo Ponar o que tem sido considerado o melhor equipamento para amostragens quantitativas de bentos, sendo, por essa razo, o mais frequentemente usado. Sua verso maior (523cm2) tem sido recomendada para ambientes preservados, enquanto que, para ambientes poludos, tem se considerado suficiente a rea de pegada da verso menor (232cm2). Os pegadores Petersen e van Veen, assim como o modelo modificado que funde esses dois aparelhos, tambm tm sido utilizados, embora no apresentem solues eficientes ao problema da formao de ondas de choque. Em riachos rasos (profundidade inferior a 30cm) a rede D para coleta com o mtodo kick sampling e os delimitadores, que apresentam reas de amostragem definida, so ideais para a coleta de organismos bentnicos. No caso do kick sampling, onde o coletor perturba o fundo com os ps, deslocando os organismos para dentro da rede, fundamental padronizar e anotar o tempo de amostragem. A abertura de malha da rede pode variar (de 0,35 a 0,6mm) e, embora as malhas mais finas retenham populaes de menor tamanho e indivduos em estgios iniciais de desenvolvimento, essas promovem maior perda de material por refluxo. Na amostragem com equipamentos do tipo Surber ou Hess, em que o substrato perturbado com as mos, recomendado o uso de luvas grossas para proteo contra objetos cortantes. Nas coletas com redes e delimitadores, organismos de maior porte, visualizados no momento da coleta, podem ser retirados manualmente da rea de coleta e colocados em frasco, sem serem jogados na rede. Com este cuidado preserva-se sua integridade estrutural, facilitando sua identificao. A amostragem com substrato artificial tem como maiores vantagens no ser destrutiva e padronizar o substrato de coleta. Porm, preciso que se tenha em mente que as comunidades que colonizam os substratos frequentemente diferem daquela encontrada no substrato natural. Na instalao desses equipamentos preciso se preocupar em minimizar perdas por vandalismo e inundaes e a recuperao deve ser realizada ao mesmo tempo, de forma a que todos tenham sido teoricamente submetidos ao mesmo processo de colonizao. Assim como o mtodo, o local de amostragem variar tambm com o objetivo do trabalho. Por exemplo, em estudos que se destinem ava-

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liao da qualidade de sedimento, a coleta da fauna bentnica dever ser realizada na zona de deposio de sedimentos finos, ou seja, na margem deposicional ou remansos em rios e na regio profunda em reservatrios e lagos. Neste caso, adequado o uso de pegadores ou corer. Por outro lado, amostragens do bentos da zona sublitoral servem aos estudos de gradientes ambientais dentro de um reservatrio. J a aplicao de ndices biticos em riachos pede uma amostragem exaustiva, ou seja, de todos os tipos de habitat existente no ponto de coleta, devendo, dependendo do ndice a ser aplicado, ser qualitativa ou semiquantitativa. Alguns dados fsicos e qumicos devem acompanhar a amostragem de bentos para facilitar a discusso posterior dos resultados. A listagem completa de variveis depender do local e do objetivo do projeto, mas pode-se considerar como medidas mnimas a serem tomadas: profundidade, rea do amostrador ou tempo de colonizao, granulometria, teor de matria orgnica e de umidade no sedimento, transparncia da gua, velocidade da corrente, tipo de ambiente coletado (canal ou margem/corredeira ou remanso para rios e riachos; litoral, sublitoral ou profunda para reservatrios e lagos) e oxignio de fundo. Cuidados na coleta Alguns cuidados para prevenir erros de amostragem ou contaminao da amostra por organismos que no pertenam ao local devem ser tomados na coleta. Essas aes dependero do tipo de amostrador usado e esto apontadas a seguir.

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Pegadores e Testemunhadores: Desconsiderar amostras quando o pegador ou corer no tiver fechado corretamente; Amostras ideais devem ter volume correspondente a cerca de 2/3 da capacidade total do amostrador; Lavar o amostrador entre dois pontos de coleta; Cada amostra corresponder ao volume de uma pegada.

Substrato artificial (cesto com pedras) Retirar rapidamente o cesto; Inserir o cesto em sacos plsticos etiquetados ou rede antes de passar pelo filme de tenso superficial, de forma a evitar a lavagem dos organismos; Cada amostra corresponder ao contedo de um cesto.

Redes e Delimitadores Amostrar todo tipo de habitat (p.ex.: canal, margens, vegetao, remansos) existente no ponto de coleta; No perturbar o ambiente a montante do amostrador, ou seja, processar a amostragem de jusante para montante; Evitar o escape de material pelas laterais da rede e pela face inferior dos delimitadores; Concentrar no fundo da rede o contedo aprisionado lavando-a com gua de torneira e despejar o concentrado em frasco de coleta etiquetado; Cada amostra corresponder ao contedo de um esforo amostral (tempo para a rede e unidade de rea para os delimitadores).

Quando a coleta for realizada em local muito distante, envolvendo um perodo de amostragem prolongado, adequado que as lavagens de amostras coletadas com pegador ou corer sejam efetuadas em campo para facilitar o transporte. Para tanto necessrio levar para campo a rede ou peneira de lavagem, cuja malhagem ser definida de acordo com o objetivo do estudo. A lavagem dever ser feita sob gua corrente e o material retido armazenado em potes plsticos devidamente etiquetados e fixados em formol em concentrao final na amostra de 10% ou lcool 70 GL.

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6.1.7.7 Comunidade Bentnica Marinha Esta comunidade abrange organismos ssseis, cavadores ou que se locomovem ou se arrastam sobre o substrato. Seus representantes ocupam toda a rea desde o nvel da mar alta at profundidades abissais, compreendendo diversos tipos: formas ssseis: animais tais como esponjas, cracas, mexilhes, poliquetas, algas macroscpicas e muitas diatomceas; formas que se locomovem ou arrastam: caranguejos, lagostas, coppodes, anfpodes, outros crustceos, protozorios, bivalvos, gastrpodos e alguns peixes; formas cavadoras: maioria dos bivalvos e poliquetos, alguns crustceos e equinodermos. De acordo com o tamanho, os organismos do bentos so geralmente classificados em: Macrofauna ou macrobentos: compreende os organismos retidos pela peneira com malha de 0,5mm (equivalente ABNT n. 35). Enquadram-se nesta categoria a maioria dos organismos cavadores ou perfuradores de sedimentos no compactados, e os organismos que se locomovem sobre sedimentos duros, incluindo os mais ativos; Meiofauna ou meiobentos: inclui a maioria dos menores metazorios, que passam atravs da malha de 0,5mm (ABNT n. 35), e se subdivide em: Meiofauna temporria: composta pelos representantes jovens pertencentes a qualquer grupo da macrofauna que possuem estgios juvenis bentnicos; podem ser muito abundantes em certos locais de amostragem; Meiofauna permanente: composta por animais adultos de pequenas dimenses, tais como: rotferos, gastrotrqueos, tardgrados, ostrcodos, nemtodos, alguns poliquetas, gastrpodos, holoturides, tunicados etc.; Microfauna: organismos que necessitam de tcnicas microscpicas especiais para serem examinados. Incluem protozorios e outros seres de dimenso semelhante. Sob certos aspectos, o estudo da fauna bntica que habita a regio entre as mars mais fcil (por ser mais acessvel) do que nas reas localizadas abaixo delas, mas como o hbitat est sujeito tanto a condies aquticas como areas, os fatores que influenciam sua distribuio so

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mais complexos. Deve-se assinalar que uma determinada comunidade bentnica vive em um determinado tipo de substrato, o qual, por sua vez, representa um certo conjunto de condies fsico-qumicas do local de coleta. Outros aspectos gerais influenciam a distribuio da comunidade bentnica: Profundidade: A densidade e a diversidade dos organismos tende a decrescer com o aumento da profundidade das estaes de amostragem; quanto maior a profundidade, mais superficialmente sero encontrados os organismos cavadores; Latitude: A densidade e a variedade de organismos aumentam da regio polar em direo ao equador; Sedimento: O nmero e a diversidade de organismos diminuem com o substrato mais grosso e aumentam com o mais fino; em geral, locais de sedimentos mais finos no esto to sujeitos s aes de ondas ou correntes e esto localizados perto de esturios ou desembocadura de rios, onde h maior taxa de precipitao de partculas orgnicas e certa oscilao na salinidade. Em sedimentos arenosos h grande quantidade de organismos cavadores, e em fundos mais finos e moles a fauna cavadora menos abundante. i - Costo rochoso Costes rochosos compreendem formaes de rochas cristalinas baslticas ou granticas, presentes entre a terra e o mar, podendo apresentar diferentes configuraes como falsias (substratos ngremes e elevados), costes amplos com superfcie homognea ou recortada, ou campos de mataces de diferentes formas, tamanhos e grau de agregao. A superfcie rochosa favorece a colonizao e o desenvolvimento de uma comunidade biolgica muito rica, a qual se encontra adaptada tanto a se aderir / fixar nesse tipo de substrato, como a suportar as adversidades ambientais ocorrentes principalmente nos limites da zona da oscilao das mars (zona entre-mars). Na zona entre-mars as algas e animais esto sujeitos a nveis variveis de dessecao, temperatura, salinidade, hidrodinamismo etc, e cada espcie encontra-se adaptada a exigncias ambientais especficas.

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Dessa forma a comunidade biolgica desses ambientes apresenta uma estrutura espacial em estratos (zonao) ao longo do gradiente vertical do substrato. As flutuaes abiticas e biticas alteram marcadamente a composio da comunidade em diferentes locais e ao longo das estaes do ano (variaes espao/temporais). Tendo em vista essas particularidades, para o estudo dessas comunidades fundamental estabelecer um protocolo de coleta e amostragem que atenda os objetivos do pesquisador, cujas principais abordagens esto contempladas a seguir. Ressalta-se que para esse tipo de coleta, as mesmas devem ser realizadas durante baixamares de sizgia, com consulta prvia Tbua das Mars editada pela DHN (Diretoria de Hidrografia e Navegao). a) Coleta para determinao da porcentagem de cobertura por espcies ssseis dominantes (amostragem quantitativa)
Contagem in loco: Selecionar uma rea no costo, cuja largura deve estar relacionada ao grau de homogeneidade da superfcie. Superfcies mais heterogneas devem ter largura maior (a ordem de grandeza das reas de amostragem de algumas dezenas de metros); Em caso de locais formados por mataces, estabelecer subreas similares quanto inclinao, orientao geogrfica e hidrodinamismo; Demarcar a largura da rea de amostragem por meio de dois pinos de ao cravados rocha, acima da zona ocupada pela comunidade biolgica. Os pinos alm de marcar a rea, servem como encaixe para parafusos utilizados na amarrao das cordas e como sustentao ao pesquisador (EPI); Unir os dois pinos por meio de uma corda graduada a intervalos regulares de 22cm,o qual est associado largura do delimitador de campo utilizado que apresenta 22cm x 18cm de rea; Sortear, previamente em laboratrio, as marcas da corda que iro orientar a colocao do delimitador sobre a rea de ocupao da espcie a ser amostrada; Em campo, posicionar o delimitador (ver Captulo 5) na direo da marcao sorteada, sobre a populao a ser amostrada, em sua rea mais densa de ocupao, e contar as intersees sob as quais os indivduos dessa populao ocorrem; Anotar o resultado em uma ficha de campo contendo local, data, horrio do registro, espcie, denominao do ponto de amostragem e do nmero da rplica.

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Coleta pelo mtodo fotogrfico: Consiste na utilizao de uma cmera fotogrfica subaqutica, com lenteclose-up que enquadra a fotografia por meio de um suporte com um delimitador e flashes estroboscpicos. Para realizar a coleta pelo mtodo fotogrfico, deve-se: Selecionar uma rea no costo, cuja largura deve estar relacionada ao grau de homogeneidade da superfcie. Superfcies mais heterogneas devem ter largura maior; Em caso de locais formados por mataces, estabelecer subreas similares quanto inclinao, orientao geogrfica e hidrodinamismo; Demarcar a largura da rea de amostragem por meio de dois pinos de ao cravados rocha, acima da zona ocupada pela comunidade biolgica; Unir os dois pinos por meio de uma corda graduada. A graduao da corda apresenta intervalos regulares, os quais so da mesma largura da rea padronizada pelo delimitador da mquina. Sortear, em laboratrio, as marcas da corda que iro orientar a colocao do delimitador sobre a populao da espcie a ser amostrada; Em campo, posicionar o delimitador da cmera fotogrfica na direo da marcao sorteada, sobre a populao a ser amostrada, e tirar a fotografia. Devido presena dos flashes, as fotos podem ser tiradas durante a noite desde que observados os EPIs adequados; Em laboratrio, as fotos so analisadas no computador, por meio de editores de fotos, sendo subdividida em 100 pontos de interseo homogeneamente distribudos. Este procedimento pode ser feito tambm com o auxlio de um projetor de slides ou projetor multimdia, sendo as fotos projetadas contra uma cartolina branca subdividida da mesma forma; So contados os pontos de interseo sob os quais indivduos da populao esto presentes.

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b) Coleta para determinao da estrutura espacial (zonao)


Contagem in loco: Estabelecer um transecto vertical no costo, com 50cm de largura. A delimitao do transecto feita com a utilizao de dois pinos de ao cravados rocha acima da comunidade biolgica, distanciados em 50cm. Dois pinos tambm podem ser cravados na rocha no limite inferior da zona entremars, para que assim a rea de amostragem esteja perfeitamente fixada; Deve-se unir os pinos com uma corda que desce em ambos os lados do transecto at a base da rocha ou linha dgua, formando um trilho que vai orientar a colocao do delimitador (ver Cap. 5) de forma correta ao longo do transecto; A corda previamente marcada com lpis dermatogrfico ou tinta indelvel a intervalos de 10cm, para auxiliar o posicionamento do delimitador nos diferentes nveis do costo; Posiciona-se o delimitador prximo linha dgua ou base da rocha, conforme o caso, e conta-se o total de quadrculas no interior das quais determinada espcie encontra-se presente; Organismos (animais e vegetais) com identificao duvidosa devem ser coletados para confirmao taxonmica em laboratrio ou para envio a especialistas; Os organismos devem ser coletados vivos e acondicionados em frascos com tamanho proporcional ao tamanho dos indivduos e com tampa de boa qualidade. Os vidros devem ser etiquetados, com identificao do local e data de coleta, nvel do transecto, quando for o caso. importante que alm das etiquetas externas, sejam feitas etiquetas internas, em papel vegetal, escritas a lpis, pois as externas podem borrar ou ser perdidas; Repete-se o procedimento paulatinamente, nvel a nvel no costo, obedecendo-se as marcaes da corda, at o limite superior de distribuio da comunidade; Sugere-se a realizao de, pelo menos, 10 rplicas para as amostragens quantitativas e trs transectos para a amostragem estratificada.

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Coleta pelo mtodo fotogrfico: Estabelecer um transecto vertical no costo. A delimitao do transecto feita com a utilizao de dois pinos de ao cravados rocha, um acima dos limites da comunidade biolgica, e outro prximo linha dgua ou base da rocha; Os pinos so unidos por uma corda com marcaes feitas a intervalos de 18cm, constituindo um transecto perpendicular linha dgua; So tiradas fotografias digitais contguas, desde o nvel superior at o nvel prximo base da rocha ou linha dgua; Em laboratrio, as fotos so analisadas no computador, por meio de editores de fotos, sendo subdividida em 100 pontos de interseo homogeneamente distribudos. Este procedimento pode ser feito tambm com o auxlio de um projetor de slides ou projetor multimdia, sendo as fotos projetadas contra uma cartolina branca subdividida da mesma forma; So contados os pontos de interseo sob os quais indivduos das diferentes populaes esto presentes; Sugere-se a realizao de, pelo menos, 10 rplicas para as amostragens quantitativas e trs transectos para a amostragem estratificada.

c) Coleta para amostragem qualitativa


Estabelecer uma rea padro de amostragem, representativa do costo de estudo, a qual comporte a estrutura fisiogrfica dominante da rea de interesse; Deve-se padronizar, tanto quanto possvel, o tamanho da rea amostral, o tempo de coleta (esforo amostral) e o nvel de detalhamento em coletas sucessivas e entre pontos de coleta; As observaes devem ser feitas minuciosamente, sendo as ocorrncias dos organismos registradas em ficha de campo. As identificaes devem ser realizadas de acordo com o conhecimento do tcnico coletor; Organismos (animais e vegetais) com identificao duvidosa devem ser coletados para confirmao taxonmica em laboratrio ou para envio a especialistas. Os organismos devem ser coletados vivos e acondicionados em vidros com tamanho proporcional ao tamanho dos indivduos e com tampa de boa qualidade. Os vidros devem ser etiquetados, com identificao do local e data de coleta, nvel do transecto, quando for o caso. importante que alm das etiquetas externas, sejam feitas etiquetas internas, em papel vegetal, escritas a lpis, pois as externas podem borrar ou ser perdidas. Os invertebrados e as algas devem ser fixados com formol neutralizado, diludo a 10%. Animais pequenos podem ser alternativamente preservados com lcool 70GL. Estocar as amostras em local escuro at o ensaio.

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ii - Praias As praias so ambientes costeiros compostos basicamente de material inconsolidado mineral, mais frequentemente areias, podendo conter tambm lodo (silte, argila), cascalhos, pedras roladas, seixos, calhaus, conchas de moluscos, restos de corais, algas calcrias etc. Estes ambientes se estendem, perpendicularmente linha da costa, desde o nvel de baixa-mar at a zona de vegetao permanente, restingas, dunas e falsias, sendo divididos em pores denominadas ante-praia e ps-praia. A ante-praia representa a zona entre-mars propriamente dita, a qual recebe os efeitos das ondas, enquanto que a ps-praia s atingida pelos borrifos das ondas, ou ocasionalmente em mars vivas excepcionais. As praias so ambientes costeiros extremamente importantes ecologicamente, seja pela sua prpria riqueza biolgica, seja pelo importante papel que desempenham em relao aos outros ecossistemas costeiros. A riqueza e composio biolgica so extremamente variveis, dependendo do tipo e localizao da praia. A riqueza em espcies de uma praia pode chegar a vrias dezenas de espcies, principalmente pertencentes aos grupos dos moluscos, aneldeos - poliquetos e crustceos. Vrios outros grupos esto presentes, mas em menor abundncia e variedade de espcies. Da mesma forma que em costes rochosos, as praias so ambientes bastante complexos, com grande variedade de fauna, ocupando os diferentes microhabitats disponveis. A caracterizao das comunidades de praias baseia-se em sua composio de espcies, riqueza, densidade das populaes, distribuio espacial das comunidades (zonao horizontal e vertical), variaes temporais (sazonais, anuais, bianuais etc.), entre muitos outros fatores. Comumente, para avaliao dessa varivel, utilizam-se amostradores ou delimitadores (cilndricos ou em forma de caixa) com tamanhos variveis, aplicados em transectos contnuos ou no, perpendiculares linha dgua, tambm com largura e nmero de rplicas definidas pelo pesquisador. Para a coleta, os delimitadores so introduzidos no sedimento at a profundidade de objetivo do estudo (10cm ou mais) sendo o material coletado com o prprio delimitador ou com o auxlio de uma pequena p.

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As amostras devem ser lavadas preferencialmente com gua do prprio local, logo aps a amostragem, para evitar choque osmtico. Considerando que durante a preservao muitos organismos se contraem, dificultando a observao de estruturas importantes para a sua identificao, alguns taxonomistas solicitam que os organismos sejam anestesiados antes da fixao com formol ou com lcool. Deste modo, importante que se contate os especialistas que colaboraro com os trabalhos de identificao, que indicaro, se ou qual, anestsico dever ser utilizado. Procedimentos detalhados a respeito dessas metodologias podem ser encontrados em Amaral et al. (1994a; 1994b; 1988; 1995a; 1995b; 1991;1990), Belcio et al. (1989; 1995), Leite et al (1988; 1992), Lopes (1993); Lopes et al (1989); Monteiro (1980), Morgado et al (1994), Pardo et al (1993; 1994), Reis et al. (1994), Rodrigues et al (1986), Rodrigues et al (1988), Salvador et al (1995), Shimizu (1990; 1992; 1994). No que diz respeito s praias, as principais variveis ambientais determinantes da estrutura das comunidades biolgicas so o declive e a topografia (perfil), as caractersticas granulomtricas do sedimento e o hidrodinamismo. A metodologia de amostragem de declive e perfil de praias encontra-se na Tabela 7, a seguir.
Tabela 7. Metodologia de amostragem de declive e perfil de praias.
Equipamento Forma de amostragem rea de amostragem

Declivmetro, metros dobrveis. Ao longo do transecto, perpendicular linha dgua, em medidas lineares contguas. Limitada pelas franjas do infralitoral e supralitoral. Depende do objetivo do trabalho. Coletas nos cantos das praias possibilitam uma melhor caracterizao. Se for vivel apenas uma rplica em cada ponto, devem-se padronizar as coletas no meio das praias.

Rplicas

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iii - Infralitoral Bentos marinho infralitoral composto pelos organismos que habitam os sedimentos permanentemente submersos. Segundo sua posio no substrato, os organismos bentnicos podem ser classificados como: epifauna - vivem sobre o substrato; infauna - vivem no interior de tubos e galerias no sedimento e fauna intersticial - vivem nos interstcios dos gros. a) Coleta para amostragem no infralitoral Coleta quantitativa Em regies estuarinas ou costeiras, de um modo geral, as coletas so realizadas com o auxlio de um pegador de fundo, do tipo Petersen modificado, que amostra uma rea correspondente a 1/17m2. Em casos onde a profundidade grande, prefervel lanar mo de pegadores mais pesados, para favorecer a coleta do sedimento. Em ambiente marinho o pegador mais utilizado o tipo van Veen, com capacidade de 1/10m2. Procedimento de coleta: Aps agarrar o fundo, o pegador puxado bordo (com auxlio de guincho eltrico ou manual, preferencialmente com o auxlio de um pau de carga) e aberto no interior de uma cuba de polietileno de tamanho adequado. Se o volume de sedimento amostrado no for representativo em relao ao volume interno do pegador, deve-se desprezar a amostra e repetir o procedimento. Para isso, deve-se orientar a embarcao para outra posio no local. Para uma boa caracterizao da comunidade biolgica, deve-se trabalhar com replicaes, cujo nmero (n) deve ser estabelecido por ocasio de amostragens preliminares. importante que se considere cada local de amostragem no como um ponto mas como uma rea, e que as rplicas sejam obtidas nessa rea e no exatamente no mesmo local, para que a variabilidade natural seja explorada. Esse aspecto de fundamental importncia para minimizar concluses equivocadas sobre o ambiente. Recomenda-se, portanto, que se alterne as coletas nas bordas da embarcao e que se derive um pouco entre as coletas das amostras.

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As amostras devem ser transferidas para o interior de sacos plsticos reforados ou lavadas em campo, onde so empregadas peneiras de malha 0,5mm (no caso de triagem de macrobentos) e gua do local. Muitos organismos se contraem durante a preservao dificultando a observao de estruturas importantes para a sua identificao, sendo recomendado por alguns taxonomistas que os organismos sejam anestesiados antes da fixao com formol ou com lcool. importante que esses especialistas, que colaboraro com os trabalhos de identificao, sejam contatados para indicar se ou qual o anestsico dever ser utilizado. Os sacos plsticos de amostra e os frascos de material preservado devem ser etiquetados por dentro (com etiqueta vegetal) e por fora (com etiqueta a caneta, ou lapis dermatogrfico), contendo informaes tais como o nmero da amostra, o nmero do ponto de coleta e da rplica, nome do projeto, data de coleta. Coleta qualitativa Pegadores amostram uma rea definida, podendo-se ento a partir da calcular a densidade populacional da comunidade bentnica em estudo sendo, portanto, uma amostragem quantitativa. Dependendo do objetivo do estudo, uma amostragem qualitativa apenas, oferece informaes suficientes. Nesse caso o que se obtm uma estimativa da riqueza em espcies da comunidade em questo, sem, no entanto, saber o nmero de indivduos presentes de cada espcie. Nesse tipo de coleta, utiliza-se uma draga que opera por arrasto horizontal. Como uma grande rea amostrada, esse tipo de coleta permite avaliar de modo eficiente a riqueza em espcies da comunidade de determinado stio, principalmente se o tempo de arrasto for elevado. Aps coletado o sedimento, o mesmo deve ser lavado e estocado conforme descrito no item acima. 6.1.7.8 Comunidade Nectnica O ncton constitudo pelos organismos capazes de nadar ativamente contra as correntes. Fazem parte deste grupo a grande maioria dos peixes, mamferos aquticos (baleia, peixe-boi, por exemplo), crustceos (como o camaro), e moluscos cefalpodes (como as lulas).

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O maior grupo dentre os organismos nectnicos constitudo pelos peixes, e so eles que normalmente so estudados com mais intensidade no ambiente aqutico. Esses organismos distribuem-se em cerca de 20 mil espcies, das quais mais de 8 mil so comerciveis e comestveis, sendo cerca de 41% em gua doce e 58% nos oceanos. Os peixes so vertebrados aquticos, pecilotrmicos cujos corpos podem apresentar diferentes formas e tamanhos, podendo ainda ser ou no recobertos por escamas. Movimentam-se por meio de nadadeiras e, geralmente, possuem brnquias para absorver o oxignio dissolvido na gua. A coleta de ncton exercida unicamente com fins de pesquisas por instituies ou pessoas devidamente habilitadas denominada pesca cientfica. Antes de realizar um procedimento de amostragem de ncton fundamental consultar a legislao de aquicultura e pesca vigente no Brasil. De acordo com o Cdigo de Pesca (Decreto-Lei n 221, de 28 de fevereiro de 1967 - Cdigo de Pesca - Dispe sobre a Proteo e Estmulos Pesca e d outras providncias), necessria autorizao pelos rgos competentes para expedio cientfica cujo programa se estenda pesca, que depender de prvia anuncia. O Instituto Chico Mendes (ICMBio) mantm em sua pgina na Internet uma seo destinada a servios on-line, onde possvel o acesso ao Sisbio (Sistema de Autorizao e Informao em Biodiversidade), inclusive para obter Autorizaes e Licenas para Fins Cientficos e Didticos. O Sisbio um servio de atendimento distncia que permitir aos pesquisadores, por meio do preenchimento e envio de formulrios eletrnicos pela Internet, solicitar autorizaes, licenas e incluir colees cientficas, didticas e particulares no Cadastro Nacional de Colees Cientficas. Diversos Estados possuem legislaes especficas de pesca que devem ser consultadas. No caso do Estado de So Paulo, o Cdigo de Pesca Estadual (Lei Estadual (So Paulo) n 11.165, de 27 de junho de 2002 Cdigo de Aquicultura e Pesca do Estado de So Paulo) estabelece que nas investigaes relacionadas pesca, com coleta de seres vivos, as instituies e pessoas devidamente habilitadas devero ser autorizadas pelo rgo estadual competente, que decidir sobre a manuteno da execuo dos projetos e avaliar os relatrios que lhe sero obrigatoriamente encaminhados.

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Os tipos de estudo com a comunidade nectnica mais frequentemente realizados so: Ensaio da contaminao dos organismos (peixes, crustceos, moluscos etc). Ensaio para determinao de metais, microncleo e cometa em sangue de peixe Ensaio de episdios de mortandades de peixes e/ou outros organismos nectnicos. Ensaio da estrutura da comunidade de peixes. i - Contaminao dos organismos Os organismos para ensaio de contaminantes podem ser coletados de qualquer uma das formas descritas no item ensaio da estrutura da comunidade de peixes, podendo, inclusive, ser adquiridos de pescadores locais, desde que estejam em boas condies (no podem estar em decomposio). Caranguejos e siris tambm podem ser adquiridos de coletores locais. Quando o material for adquirido dos pescadores, deve-se ter a certeza do local onde foram coletados. Devido aos baixos limites de deteco de vrias substncias, os procedimentos laboratoriais e de campo para ensaio de contaminantes em organismos aquticos so especialmente importantes, pois uma contaminao das amostras pode ocorrer durante qualquer estgio da coleta, manuseio, armazenamento ou ensaio.

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Procedimentos de coleta: Lavar os organismos coletados na gua do ambiente logo aps a coleta para remover qualquer material estranho da superfcie externa; Os peixes e ou outros organismos aquticos nectnicos devem ser enviados ou trazidos para o laboratrio, em gelo, dentro de um prazo de 24 horas aps a coleta. O material coletado deve ficar coberto por uma camada de gelo durante o transporte; Reduzir ao mximo a manipulao das amostras em campo e evitar contato com fontes de contaminao (fumaa do motor do barco, graxas, poeira) e o gelo; Evitar a contaminao pelo gelo usado para refrigerar as amostras. Os moluscos com concha, os crustceos e os peixes inteiros devem ser embrulhados individualmente em papel alumnio ou pelo menos por espcie e colocados em sacos plsticos limpos que evitem a entrada da gua e devidamente etiquetados com a data, ponto de coleta e espcie; As amostras devem ser colocadas no gelo o mais rapidamente possvel aps a coleta. Se o tempo de trnsito das amostras at o laboratrio for maior que 24 horas, prefervel o uso de gelo seco; Amostras para ensaio microbiolgico devem chegar no laboratrio em um prazo mximo de 24 h e NO devem ser congeladas, apenas refrigeradas; Caso o objetivo do trabalho seja o ensaio de contaminantes orgnicos e/ou inorgnicos, os organismos, aps o devido acondicionamento, podero ser congelados diretamente no freezer; O estudo de metais em sangue de peixes tem o seu procedimento descrito a seguir.

ii - Determinao de metais, microncleo e cometa em sangue Para complementar os estudos de monitoramento ambiental, o biomonitoramento tem sido amplamente usado para avaliar a exposio de um sistema biolgico a substncias xenobiticas. O uso de biomarcadores, como os de exposio e efeito, pode fornecer informaes relevantes, como a real exposio dos organismos a contaminantes presentes no meio, o que pode levar a aes imediatas de preveno e controle. A determinao de metais em sangue pode ser utilizada para refletir a exposio recente dos organismos a essas substncias qumicas. Pode-se avaliar tambm a atividade genotxica de xenobiticos pelo aumento na frequncia de microncleos nas clulas sanguneas de peixes expostos ou pela avaliao de quebras na molcula de DNA nestas mesmas clulas no ensaio cometa.

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Procedimentos de coleta: Realizar puno caudal, ou outra tcnica adequada espcie em estudo, com seringas previamente heparinizadas ou com EDTA; Para os testes de cometa e microncleo, o sangue deve ser coletado no indivduo vivo; Transferir as amostras de sangue para microtubos contendo aproximadamente 50 L de heparina ou EDTA, a fim de evitar sua coagulao; Homogeneizar os microtubos imediatamente por inverso, de oito a dez vezes; Manter os microtubos sob refrigerao e ao abrigo de luz para posterior processamento laboratorial.

iii - Mortandades de peixes e/ou outros organismos nectnicos Para que se consiga determinar a(s) causa(s) de uma mortandade de peixes, a preocupao principal que o atendimento seja feito o mais rpido possvel. As coletas das amostras de gua (e sedimento, caso seja necessrio), devem ser definidas conforme as suspeitas de possveis causas e preservadas conforme as metodologias descritas neste guia. A escolha das variveis fsicas e qumicas a serem determinadas depende de vrios fatores, tais como: caractersticas de ocupao do solo na regio, presena de despejos de indstrias ou de esgotos domsticos etc. Os ensaios biolgicos incluem fitoplncton (em casos de floraes de algas), coliformes (em casos de contaminao pelo lanamento de esgotos) e teste de toxicidade. essencial que seja coletada uma amostra de gua montante e no prprio local onde est ocorrendo a mortandade e, caso se julgue necessrio, uma amostra jusante.

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Procedimentos de coleta: Coletar gua e sedimento para os ensaios considerados necessrios, conforme orientaes descritas neste guia; Coletar, pelo menos, 5 peixes moribundos ou que acabaram de morrer, de cada espcie; Envolver os peixes em papel alumnio coloc-los num saco plstico, guardar numa caixa trmica com gelo e encaminh-los ao laboratrio para ensaio; NO coletar peixes mortos h algum tempo e que j esto em decomposio; Observar o comportamento dos peixes que esto morrendo (se vm superfcie abocanhar o ar, se apresentam movimento descoordenado, etc.); Observar alterao no aspecto externo dos peixes, como: presena de fungos, manchas, colorao das brnquias, etc.; Todos os dados observados em campo devem ser sistematicamente anotados em ficha especfica e, sempre que possvel, os peixes e o local de coleta devem ser fotografados.

iv - Estrutura da Comunidade de Peixes Em estudos quantitativos, os equipamentos de captura devem ser colocados por um tempo padronizado (normalmente 4 horas), como as redes de espera. Estudos qualitativos no envolvem coleta padronizada, mas sim a utilizao de vrios tipos de equipamentos, uma vez que todas so seletivas. A escolha de aparelhos de coleta (redes de espera de diversas malhagens, cercos, etc.), depende das caractersticas fsicas do meio aqutico, como presena ou no de rochas, pedras, guas paradas, vegetao aqutica, entre outras. Deve-se coletar nos locais mais adequados para obteno da maior diversidade possvel de espcies. Estes locais devem ser escolhidos levando-se em considerao principalmente as informaes de pescadores da regio a ser estudada. Deve-se considerar tambm a poca do ano, tendo em vista que algumas espcies so migratrias, o que significa que s possvel captur-las em perodos muito especficos.

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Procedimentos de coleta: Capturar alguns exemplares das espcies presentes no local e colocar em sacos plsticos, refrigerar e enviar para o laboratrio, onde podem ser congelados; Colocar, adicionalmente, alguns exemplares de cada espcie em frascos ou sacos plsticos reforados, contendo uma soluo neutra de formol (10% a 20%) para identificao taxonmica. Esses exemplares devem permanecer nesta soluo por, pelo menos, 1 a 2 semanas, pois a fixao pode levar de poucos dias (para espcimes pequenos) a uma semana (para os espcimes maiores). Pode-se inclusive aplicar a soluo com auxlio de uma seringa; Se possvel, fotografe em campo um exemplar de cada espcie. Para tanto, seleciona-se um exemplar recm tirado da gua, quando ainda apresenta todas as tonalidades das cores, e que esteja inteiro (principalmente a nadadeira caudal); Recomenda-se a colocao de uma etiqueta numerada no exemplar fotografado, para a confirmao posterior da identificao, e de uma rgua, para se ter noo do tamanho do exemplar.

6.2 Ensaios de Contaminantes e Nutrientes em Sedimentos


Sedimento todo material originado da destruio (decomposio) de qualquer tipo de rocha ou material de origem biolgica, transportado e depositado (alctone) ou apenas depositado (autctone) na superfcie terrestre. Os sedimentos compem-se de partculas de diferentes tamanhos, formas e composio qumica. Um diagnstico ambiental abrangente deve integrar informaes dos compartimentos gua e sedimento. As concentraes de poluentes na gua indicam a carga que o ambiente recebe no momento da coleta, enquanto que o sedimento reflete a contaminao ocorrida e acumulada no sistema ao longo de um perodo de tempo. Contaminantes e nutrientes adsorvidos nos sedimentos podem ser disponibilizados coluna dgua e biota por meio de processos fsicos, qumicos e biolgicos, servindo como fonte interna e contnua de poluentes. Por essas razes, o uso do sedimento como instrumento de avaliao da qualidade dos ecossistemas aquticos, vem ganhando crescente ateno da comunidade cientfica mundial desde a dcada de 80.

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Deve ser salientado que o ensaio do sedimento auxilia a tomada de decises sobre as medidas que devem ser adotadas no estabelecimento de programas de controle, mitigao e recuperao do ambiente como, por exemplo, na avaliao do processo de dragagem e disposio de sedimentos em canais de navegao. O gerenciamento ambiental deve ser subsidiado por uma classificao da qualidade do sedimento, que preferencialmente integre as caractersticas fsicas, qumicas, biolgicas e ecotoxicolgicas deste compartimento. Considerando outros objetivos, o sedimento pode ser tambm classificado segundo, por exemplo, sua granulometria, teor de matria orgnica, teor de gua, textura, cor e origem geolgica. Devido complexidade do ensaio do sedimento, a sua coleta deve ser realizada de acordo com procedimentos especficos, estabelecidos de acordo com o objetivo do estudo. Como procedimento geral, a gua que cobre o sedimento deve ser retirada por sifonamento ou vertendo o equipamento de coleta. O material orgnico deve ser mantido no ensaio de teor orgnico (COT e resduos), enquanto que o inorgnico (por exemplo, pedras e cascalhos) deve ser mantido no ensaio de granulometria. Para os outros parmetros, pode-se efetuar uma catao do material grosseiro antes de se armazenar as amostras nos recipientes. Cuidados devem ser tomados para que as condies de oxirreduo do sedimento amostrado sejam mantidas, j que os sedimentos oxidam-se rapidamente quando em contato com o ar, alterando a disponibilidade de contaminantes. Para tanto, a amostra deve ser o mnimo exposta ao ar e o recipiente de coleta preenchido at boca. Para coleta de amostra composta necessrio que exatamente o mesmo volume seja tomado de cada rplica e que a homogeneizao seja bem executada. Para evitar a oxidao, os volumes das rplicas a serem misturados devem ser mantidos, at o momento da homogeneizao, em saco plstico ou bandeja de ao inox ou qualquer outro recipiente, de acordo com os ensaios a serem realizados. Durante a coleta, deve-se evitar alguns efeitos negativos, tais como: ondas de presso na descendncia do equipamento, resistncia e

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inclinao na penetrao do sedimento, lavagem durante a retirada e transbordamento. Uma descida muito rpida, por exemplo, pode provocar ondas de choque e mau funcionamento do equipamento. Todos os procedimentos de coleta acarretam um certo grau de distrbio na integridade da coluna de sedimento. Em estudos geocronolgicos, paleolimnolgicos, de biorrevolvimento e de trocas qumicas na interface sedimento-gua, por exemplo, torna-se necessrio a obteno de amostras mais ntegras possveis. Nestes casos indicado o uso de amostradores em tubo (corer) que tambm permitem o fracionamento da amostra, fundamental para estudos do perfil do sedimento. Na amostragem do depsito recente (camada superficial de sedimento de 2cm a 6cm) devem ser usados pegadores que possibilitam o fracionamento da amostra (Ekman-Birge modificada por Lenz e tubo). Nesses casos, muitas vezes no se consegue volume suficiente em uma s pegada, sendo necessrio compor vrias pegadas numa mesma rplica antes de distribuir o material nos recipientes de amostragem. Do mesmo volume devem ser retiradas amostras para ensaios qumicos e ensaios ecotoxicolgicos. O volume de coleta para ensaio ecotoxicolgico com sedimento depende do tipo e nmero de testes que sero realizados por amostra e da distribuio para os diferentes laboratrios. O ideal coletar um recipiente para cada tipo de teste e uma amostra de sedimento controle, obtida em local no degradado. Amostras efetuadas com corer e destinadas a ensaios qumicos do perfil vertical do sedimento devem ser manuseadas cuidadosamente, de forma a evitar mistura dos estratos, e podem ser congelados em campo, com nitrognio lquido, para posteriores fracionamentos. Conforme os ensaios a serem realizados no sedimento, deve-se utilizar frascos e equipamentos adequados as atividades de coleta de amostras, bem como materiais de apoio, como por exemplo colheres de ao inox ou polietileno inerte, bandejas de ao inox ou polietileno inerte, caixas trmicas, etc. Podemos citar como exemplo os compostos orgnicos que podem ser absorvidos em plsticos (exceto teflon) ou degradados em vidro alcalino. Nestes casos necessrio utilizar frascos de borossilicato, de cor mbar com tampa rosquevel e septo

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de teflon. No caso de metais, como sdio, ltio e potssio, recomendase que as amostras sejam acondicionadas em frascos de polietileno ou polipropileno, pois os mesmos podem ser adsorvidos em superfcies de vidro ou aumentar sua concentrao por absoro. Os ensaios, tipos de frascos, prazo de anlises, encontram-se no Anexo 1.

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Coleta de sedimento com Pegador Petersen modificado - Foto Carlos Jesus Brando/CETESB

CAPTULO

7 AMOSTRAGEM DE GUAS PARA ABASTECIMENTO PBLICO


A gua tratada deve ser coletada em locais que foram submetidos a algum tipo de tratamento (convencional ou simplificado), como sistemas de produo (Estao de Tratamento de gua - ETA), de reservao, rede de distribuio e solues alternativas coletivas de abastecimento de gua. Para definio dos locais de amostragem e ensaios a serem analisados em um sistema de tratamento de gua para consumo humano necessrio o conhecimento das etapas da produo desde a retirada da gua do manancial, passando pela aduo, tratamento, reservao e distribuio, at a entrega ao consumidor final, levando-se em conta ainda as caractersticas especficas de cada unidade de produo (Fig. 84), trabalhando em consonncia com o Plano de Segurana da gua (PSA), conforme orientao da Organizao Mundial da Sade (WHO, 2011) e com as legislaes de gua de consumo humano vigentes.

Figura 84. esquema de um sistema de produo e distribuio de gua. Fluxo operacional: (1) manancial de abastecimento; (2) aplicao de produtos qumicos; (3) sistema de Floculao; (4) Sistema de decantao; (5) Sistema de filtrao; (6) Aplicao de cloro, flor e cal; (7) Reservatrio da ETA; (8) Reservatrio elevado; (9) Rede de distribuio (Fonte: CETESB, 2009).

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Os procedimentos operacionais que devem ser adotados nesse contexto dependem de fatores como: tipo de manancial de abastecimento (rio, lago, represa, subsolo, chuva etc.); qualidade inicial da gua (composio qumica e biolgica); distncias percorridas; fatores climticos, topogrficos e ambientais; aplicao de produtos qumicos durante o processo e tempo de contato necessrio para as respectivas reaes qumicas e biolgicas; tipo de tratamento requerido etc. A frequncia, o nmero mnimo de amostras, os locais, os parmetros a serem analisados e os valores mximos permitidos so definidos pela legislao vigente sobre qualidade da gua para consumo humano. Alm disso, os responsveis pelo abastecimento de gua devem manter avaliao sistemtica do sistema ou soluo alternativa coletiva de abastecimento de gua, sob a perspectiva dos riscos sade, com base na ocupao da bacia contribuinte ao manancial, no histrico das caractersticas de suas guas, nas caractersticas fsicas do sistema, nas prticas operacionais e na quantidade da gua distribuda, conforme os princpios dos Planos de Segurana da gua (PSA) recomendados pela Organizao Mundial de Sade ou definidos em diretrizes vigentes no pas.

7.1 Vigilncia da qualidade da gua para consumo humano


O monitoramento da qualidade da gua pode ser entendido como uma atividade de vigilncia ou de investigao e consiste em avaliar, continuamente, a qualidade da gua consumida pela populao, permitindo a identificao de fatores de riscos e a definio de estratgias de melhoria da situao existente, alm do acompanhamento dos impactos resultantes das medidas implementadas. Considerando que o objetivo do controle da qualidade comprovar a potabilidade da gua fornecida para consumo humano, verificar pontos crticos do sistema e fornecer subsdios para a rea operacional, corrigindo de imediato as possveis anomalias detectadas, natural que seu plano de amostragem seja o mais abrangente possvel. Os pontos de coleta de amostras podem ser selecionados por uma composio entre os pontos crticos e no crticos, endereos fixos e variveis. A escolha deve objetivar a obteno de informaes do

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abastecimento e consumo de gua no municpio. A representatividade desejada pode ser composta por critrios de distribuio geogrfica e identificao de situaes de riscos. Os critrios a serem observados na definio dos pontos de amostragem do monitoramento de vigilncia da qualidade da gua devem incluir: Distribuio geogrfica: sada do tratamento ou entrada no sistema de distribuio; sada de reservatrios de distribuio; pontos na rede de distribuio; reas mais densamente povoadas; pontos no monitorados pelo controle (solues alternativas, fontes individuais no meio urbano, escolas na zona rural, etc.). Locais estratgicos: reas com populaes em situao sanitria precria; consumidores mais vulnerveis (hospitais, escolas, creches, etc.); reas prximas a pontos de poluio (indstrias, lixes, pontos de lanamento de esgoto, cemitrios, etc.); reas sujeitas presso negativa na rede de distribuio; pontos em que os resultados do controle indiquem problemas recorrentes; solues alternativas desprovidas de tratamento ou de rede de distribuio; veculo transportador e reas que, do ponto de vista epidemiolgico, justifiquem ateno.

7.2 Coleta em Estao de Tratamento de gua (ETA)


Os locais de amostragem para o controle das condies de operacionalidade da estao e consequente caracterizao da qualidade da gua produzida, devem ser escolhidos no decorrer do processo (entrada da ETA, floculao, decantao, filtrao, desinfeco/fluoretao/sada da ETA), cujos pontos de tomada de amostras geralmente esto disponveis no laboratrio da estao (Fig. 85). Recomenda-se no alterar a vazo das torneiras, pois haver alterao significativa nas caractersticas da gua, comprometendo o controle de qualidade realizado pelo operador.

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Figura 85. torneiras localizadas no laboratrio da eta para controle das etapas do processo de tratamento (Foto: carlos Jesus brando/cetesb).

Parmetros operacionais importantes para serem monitorados na gua captada (fonte) incluem turbidez, tempo de vazo e reteno, cor, condutividade, condies meteorolgicas, absorbncia em UV, algas; e no processo de tratamento deve-se controlar a concentrao do desinfetante e tempo de contato, pH, turbidez e cor entre outros, dependendo do tipo de tratamento a ser aplicado.

7.3 Coleta em Sistemas de Distribuio


A proteo do sistema de distribuio essencial para assegurar a qualidade da gua de consumo humano. Os sistemas de distribuio por inclurem longas extenses de tubulaes, reservatrios de estocagem, interconexes e por estarem sujeitos a adulterao e vandalismo, so vulnerveis contaminao qumica e microbiolgica. Quando o suprimento de gua intermitente, a baixa presso de gua resultante possibilita o ingresso de gua contaminada no sistema atravs de fraturas, fendas, juntas e furos presentes na tubulao. Apesar de no desejvel, a intermitncia no suprimento de gua muito comum e o controle de gua nessa situao um desafio, uma vez que os riscos de infiltrao e refluxo aumentam significativamente.

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Os microrganismos naturalmente presentes na gua (amebas de vida livre, bactrias heterotrficas, fungos), sob condies favorveis podem colonizar o sistema de distribuio formando biofilmes. No h evidncia que os microrganismos normalmente presentes nos biofilmes constituam risco para a sade da populao em geral, com algumas excees como o caso da Legionella que coloniza tubulaes de edifcios, bem como a populao de indivduos seriamente imunocomprometidos (WHO, 2003). A gua que entra no sistema de distribuio deve ser microbiologicamente segura e biologicamente estvel. O sistema de distribuio por si s deve fornecer uma barreira segura para evitar a contaminao da gua no sistema de distribuio durante o transporte at o consumidor. importante manter um residual de desinfetante no sistema de distribuio para proteger contra a contaminao e limitar problemas de crescimento bacteriano (WHO, 2011). Fenmenos naturais, como enchentes, seca e movimentos sismolgicos, e atividades antrpicas como trfego pesado e obras civis podem afetar significativamente as tubulaes de gua dos sistemas de distribuio e levar ao aparecimento de epidemias. Medidas especficas e imediatas devem ser tomadas para prevenir a sade da populao incluindo o aumento da frequncia de amostragem. O monitoramento operacional de sistemas de distribuio canalizados deve incluir parmetros como: cloro residual, indicadores bacterianos de contaminao fecal (E.coli, coliformes termotolerantes), coliformes totais, bactrias heterotrficas, pH, fluoreto, cor e turbidez. A escolha dos pontos de amostragem depender de cada sistema de abastecimento. As amostragens para anlises microbiolgicas e seus parmetros associados como cloro residual so realizadas em maiores frequncias e em pontos de coleta dispersos. Ateno especial deve ser dada tambm aos pontos de coleta e frequncia de amostragem para constituintes qumicos provenientes de tubulaes e soldas e que no so controlados diretamente pela legislao e por constituintes que podem ser formados no sistema de distribuio como trihalometanos (THMs).

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O uso de amostragem estratificada randomizada para os sistemas de distribuio tem se mostrada efetiva (WHO, 2011).

7.3.1 Procedimentos de coleta na rede de distribuio


A retirada de amostra para ensaio da gua contida na rede de distribuio geralmente feita em uma torneira prxima ao hidrmetro da residncia ou outra que receba gua diretamente da rede de abastecimento pblico (Figs. 86 e 87).

Figura 86. Coleta de amostra na torneira, aps o hidrmetro (Foto: Vencio Pedro Ribeiro/ cetesb).

Figura 87. Coleta de amostra na torneira do jardim, aps hidrmetro (Foto: Vencio Pedro ribeiro/cetesb).

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Abrir a torneira e deixar escoar por dois a trs minutos ou o tempo suficiente para eliminar a gua estagnada na tubulao. A torneira no dever ter aeradores ou filtros, nem apresentar vazamento. necessrio ter certeza que a gua seja proveniente da rede de distribuio e no de caixas ou reservatrios internos, por meio do teste de cavalete. Esse teste consiste em fechar o registro de entrada de gua da rede de distribuio e abrir a torneira indicada para a coleta; se no houver escoamento de gua pela torneira, conclui-se que realmente a gua proveniente da rede de distribuio. Se necessrio a torneira pode ser desinfetada com aplicao de uma soluo de hipoclorito de sdio 100mg/L. Neste caso, o excesso de hipoclorito de sdio deve ser removido antes da coleta. A desinfeco da torneira ou o uso de balde e cordas estreis somente necessrio para coleta de ensaio microbiolgico. Abrir a torneira a meia seco, para que o fluxo seja pequeno e no haja respingos, deixar escoar por aproximadamente um a dois minutos. Posicionar o frasco de maneira que no tenha contato com a torneira para evitar possveis contaminaes. No momento da coleta deve ser realizada a determinao de cloro residual livre.

7.3.2 Procedimentos de coleta em reservatrio domiciliar


A coleta de amostra pode ser realizada na torneira de sada de gua do reservatrio, na sada do registro de controle ou diretamente do reservatrio com auxlio de balde de ao inox e cordas estreis (Fig. 88). No momento da coleta deve ser realizada a determinao de cloro residual livre.

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(A)

(B)

Figura 88. Coleta de amostras em reservatrio com balde e corda estreis: (A) Balde estril, (b) balde e corda estril em procedimento de coleta (Foto: vencio pedro ribeiro/cetesb).

7.4 Procedimentos de Coleta em Solues Alternativa Coletiva de Abastecimento de gua


Soluo alternativa coletiva de abastecimento de gua para consumo humano toda modalidade de abastecimento coletivo, destinada a fornecer gua potvel, com captao subterrnea ou superficial, com ou sem canalizao e sem rede de distribuio incluindo as indstrias, fontes, poo comunitrio, distribuio por veculo transportador, entre outras. Os procedimentos para coleta de amostra devem levar em considerao as caractersticas individuais de cada unidade que, de forma geral, encontram-se mencionados neste captulo.

7.4.1 Poos Freticos e Profundos Equipados com Bomba


A gua do poo deve ser bombeada por tempo suficiente para eliminar a gua estagnada na tubulao. A coleta deve ser realizada em uma torneira prxima da sada do poo ou na entrada do reservatrio. Se necessrio, a torneira pode ser desinfetada com aplicao de uma soluo de hipoclorito de sdio 100mg/L. Neste caso, o excesso de hipoclorito de sdio deve ser removido antes da coleta. Realizar a determinao de cloro residual livre se o poo for clorado.

7.4.2 Poos Freticos Sem Bomba


A coleta deve ser realizada com auxlio de balde de ao inox e corda estril. O conjunto balde e corda s deve ser desembalado no momento da coleta, para evitar contaminao.

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Utilizar um conjunto para cada ponto de amostragem, para evitar a contaminao cruzada de um ponto de coleta para outro e, consequentemente, da prpria amostra. Descer o balde at que afunde na gua evitando-se o contato com as paredes do poo e da corda com a gua. Aps enchimento, retir-lo com os mesmos cuidados. Realizar a determinao de cloro residual livre se o poo for clorado. Para coleta de amostras em veculo transportador de gua, pode ser adotado esse mesmo procedimento.
Procedimento de coleta em ETA, rede de distribuio, reservatrios ou solues alternativas de abastecimento pblico Encher todos os frascos diretamente da torneira ou com auxlio de equipamentos; Para o ensaio microbiolgico1, remover a tampa do frasco juntamente com o papel alumnio protetor, mantendo-a a uma distncia de aproximadamente 10 centmetros, para evitar contaminao; Encher o frasco com a amostra at aproximadamente (trs quartos) do seu volume, para possibilitar sua homogeneizao; Fechar imediatamente o frasco, fixando o papel alumnio protetor em volta da tampa; Para os demais ensaios, repetir o item 1 acima, at que todos os frascos estejam com o volume necessrio para os ensaios. No caso de compostos orgnicos volteis, no dever haver espao vazio; Preservar as amostras conforme Anexo e acondicion-las em caixa trmica, sob refrigerao para transporte.
1

O frasco para ensaio microbiolgico no deve ser ambientado. A coleta deve ser realizada sempre antes de qualquer outro procedimento e a amostra no pode ser composta.

Para pesquisa de microrganismos patognicos em gua tratada grandes volumes devem ser analisados considerando a baixa concentrao desses microrganismos nessas guas. Nesse caso volumes de 400L a 1000L devem ser concentrados na prpria ETA ou nos pontos da rede de interesse, empregando sistemas especficos de filtrao, com cartuchos e membranas filtrantes variveis de acordo com o patgeno a ser pesquisado (APHA, 2005).

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Determinao de pH em sedimento - Foto Carlos Jesus Brando/CETESB

cApTULO

8 AMOSTRAGEM DE EFLUENTES LQUIDOS


Ao se retirar uma amostra de qualquer efluente pretende-se que esta reproduza dados sobre as condies reais das guas residurias geradas pelo processo, sendo o mais representativa possvel. Para assegurar tais condies, o tcnico deve conhecer todo o processamento industrial e o funcionamento das unidades geradoras de efluentes que possam interferir nas caractersticas dos despejos. A confiabilidade e a representatividade de qualquer programa de amostragem para a avaliao dos efluentes lquidos e dos corpos hdricos receptores dependem fundamentalmente da seleo criteriosa dos parmetros a serem analisados, dos pontos de coleta de amostras e da utilizao correta das tcnicas de coleta e preservao de amostras, pois os efluentes lquidos variam em sua composio qualitativa e quantitativa, frequncia e tipo de emisso, de acordo com as atividades desenvolvidas. A importncia da anlise dos efluentes lquidos tem aumentado devido a necessidade de avaliar o possvel impacto de seu lanamento em cursos de gua e na rede pblica coletora de esgotos, o que exige das fontes de poluio compilar e manter os registros e controle de todas as atividades de monitoramento, para que possam ser implantadas medidas preventivas e/ou corretivas para controle de qualidade ambiental. Um programa de caracterizao de efluentes lquidos tem como objetivos principais: Avaliar a eficincia e o funcionamento de sistemas de tratamento de guas residurias, de maneira global ou de determinadas unidades, visando otimizao da sua operao e do seu desempenho;

amostragem de efluentes lquidos

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Avaliar os efluentes lquidos gerados pelas indstrias, estaes de tratamento de esgotos domsticos, aterros sanitrios e industriais e plantas de incinerao de resduos, bem como as possveis alteraes na qualidade do corpo receptor causadas pelo lanamento desses efluentes, visando a verificao do atendimento s condies e aos padres de qualidade do corpo receptor e de emisso/ lanamento de efluentes lquidos estabelecidos na legislao estadual e federal vigente; Obter dados e informaes para fornecer subsdios a elaborao de projetos de sistemas de tratamento de guas residurias de empreendimentos em implantao; Verificar a ocorrncia de perdas de matrias-primas, produtos auxiliares ou acabados do processo industrial e que so agregados ao efluente lquido e, desta maneira, avaliar a possibilidade de recirculao ou reutilizao de efluentes lquidos industriais no processo industrial, dentro de um programa de preveno poluio; Determinar as cargas poluidoras potenciais e/ou remanescentes de empresas, em programas de controle de poluio de uma regio ou de determinada bacia hidrogrfica; Determinar concentraes e cargas poluidoras de efluentes lquidos de empresas, lanados na rede pblica de esgotos, para fins de cobrana por parte da empresa gerenciadora do sistema pblico de esgotos e de minimizao de impactos sobre os mesmos; Avaliar a contaminao do solo e das guas superficiais, provocada pelos aterros sanitrios e industriais e reas contaminadas.

8.1 Caractersticas dos Efluentes Lquidos


Para um melhor entendimento das diferentes caractersticas dos efluentes lquidos, os mesmos podem ser classificados de acordo com sua origem em: (1) efluentes industriais, (2) efluentes industriais em esgotos domsticos, (3) efluentes de plantas de incinerao de resduos slidos e (4) efluentes percolados gerados em aterros sanitrios e industriais.

8.1.1 Efluentes Industriais


Os efluentes lquidos em uma indstria, alm dos esgotos domsticos, podem ser compostos por: efluentes do processo produtivo, gua de refrigerao, gua de condensao, gua de lavagem de equipamentos,

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efluentes de equipamentos de controle de poluio do ar (lavador de gases de chamin ou de cabine de pintura) e pelos efluentes no pontuais, como as guas pluviais contaminadas, lavagem de pisos externos e derramamentos em reas externas rea industrial. O tipo da indstria e o completo entendimento do processo produtivo permitiro o conhecimento da origem dos efluentes lquidos industriais, bem como os materiais poluentes neles contidos. O tipo da indstria e o completo entendimento do processo produtivo permitiro o conhecimento da origem dos efluentes lquidos industriais, bem como dos materiais poluentes neles contidos. Uma indstria, independentemente de sua atividade, sempre apresenta a gerao de esgotos domsticos, que corresponde aos descartes de banheiros e de refeitrios. A sua carga orgnica mdia per capita praticamente a mesma, qualquer que seja o ramo industrial; porm, verifica-se que sua concentrao varia com a hora do dia, com o dia da semana e com a condio climtica. Outro fator que influencia as caractersticas qualitativas e quantitativas dos esgotos domsticos nas indstrias a existncia, ou no, de refeitrios e de chuveiros para os funcionrios tomarem banho. As vazes de pico, nestes casos, ocorrem nos horrios das refeies e nos trminos de turnos. Uma parcela preponderante da gua utilizada pelas indstrias em seus processos produtivos, na maioria dos casos, descartada na forma de efluentes lquidos, que, em funo das substncias neles contidas, podem causar poluio ao serem lanados nos corpos de gua. Portanto, os efluentes lquidos gerados devem ser submetidos a um Sistema de Tratamento de guas Residurias (STAR), corretamente dimensionado e operado, para possibilitar seu lanamento em um corpo hdrico ou em um sistema pblico de esgotos. preciso, portanto, realizar o levantamento industrial, processo que envolve o conhecimento do(a): perodo de funcionamento da indstria; nmero de empregados; fluxograma do processo industrial; planta da fbrica; matrias primas; produo; uso da gua; efluente gerado; sistema de tratamento dos efluentes; condies de funcionamento dos equipamentos industriais; e, condies de gerenciamento da indstria.

amostragem de efluentes lquidos

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a) Perodo de funcionamento da indstria As indstrias trabalham normalmente em turnos de oito horas; algumas funcionam em trs turnos, totalizando 24 horas por dia. Geralmente, o funcionamento de segunda a sexta-feira, mas algumas so ininterruptas. Alm do horrio de funcionamento da produo, necessrio verificar se o regime produtivo contnuo ou no, e se os processos so cclicos. preciso tambm verificar se a gerao de despejos ocorre principalmente durante o perodo de funcionamento da fabricao ou nos outros perodos (como no final da jornada diria, nos perodos noturnos, nos finais de semana etc.), geralmente decorrente de lavagens e limpezas. b) Nmero de empregados O nmero de empregados indicar o volume e a carga orgnica dos esgotos domsticos gerados. A existncia ou no de refeitrios tambm ir influenciar nas caractersticas do despejo. Neste item devero ser includos todos os funcionrios existentes no local em estudo (funcionrios prprios e terceirizados), tanto das reas produtivas como das reas administrativas e de apoio. c) Fluxograma do processo industrial O conhecimento do processo industrial de fundamental importncia em qualquer trabalho de caracterizao pois, para cada tipo de processamento haver diferentes particularidades, tais como produtos auxiliares ou catalisadores que podero proporcionar diferentes caractersticas aos despejos gerados, tanto nos seus constituintes quanto nas suas concentraes e vazes. O fluxograma do processo industrial permitir ao tcnico visualizar a necessidade, ou no, da segregao dos despejos e, dessa forma, definir quantos sero os pontos de amostragem para a caracterizao dos efluentes de uma indstria. d) Planta da fbrica A planta da fbrica, juntamente com a indicao dos sistemas de distribuio de gua e das redes de coleta de efluentes lquidos, iro facilitar no s o entendimento do fluxo do processo industrial como tambm

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a visualizao da possibilidade da implantao de medidas de controle interno, como a recuperao de matria prima ou outros produtos derramados no piso e que sero arrastados nos efluentes lquidos. Permitir tambm verificar a possibilidade de recirculao de efluentes lquidos antes ou aps sofrerem um tratamento especfico, assim como a existncia, ou no, de uma adequada segregao de despejos. O conhecimento da rede de coleta de efluentes, da localizao da estao de tratamento e dos locais de disposio de resduos slidos (caso haja), ir possibilitar a escolha dos melhores pontos de amostragem, para que a caracterizao seja representativa. Tambm importante a indicao do sistema de coleta de esgotos domsticos na planta do empreendimento, para os casos de indstrias em que haja incompatibilidade de tratamento conjunto dos mesmos. necessrio tambm que a rede de guas pluviais seja indicada na planta do empreendimento, uma vez que, quando contaminadas, so consideradas efluentes lquidos e, como tais, devem ser tratadas adequadamente antes de sua disposio final. Ressalta-se que a prtica de reunir as guas pluviais no contaminadas aos efluentes proibida por lei, caracterizando-se como uma diluio e, portanto, no aceita pelos rgos de controle ambiental. e) Informaes sobre matrias primas A relao de matrias primas e dos produtos auxiliares ir contribuir para a definio do tipo de amostras a serem coletadas e dos parmetros a serem analisados. Para isto, necessrio conhecer o princpio ativo de cada substncia e no somente o seu nome fantasia. Alm desta relao, deve-se ter conhecimento das quantidades utilizadas, dos mtodos de armazenamento e das condies de segurana quanto aos derramamentos, que podero representar fontes potenciais de poluio. f) Informaes sobre a produo A relao dos produtos fabricados, as quantidades e a frequncia de fabricao dos mesmos, os tipos de embalagens utilizadas, os locais de armazenamento e a porcentagem da gua incorporada ao produto, sero muito importantes num trabalho de caracterizao de um despejo industrial.

amostragem de efluentes lquidos

223

Por meio destes dados possvel fazer a comparao entre indstrias similares com relao aos fatores de emisso, representados pelas vazes especficas do efluente (por exemplo, m3 de gua utilizada por tonelada de produto) e cargas poluidoras especficas (por exemplo, kg de poluente por tonelada de produto), para estabelecer exigncias de reduo destes valores, se necessrio. g) Informaes sobre o uso da gua Um balano hdrico completo, contendo a indicao de todas as informaes sobre o uso da gua, de extrema importncia. Para isso, deve-se dispor de dados de fluxo de gua industrial (gua de processo, gua incorporada ao produto e gua liberada pela matria prima), gua de refrigerao, gua resultante de lavagens de pisos e equipamentos, gua utilizada nos equipamentos de controle de poluio do ar e gua para consumo humano (ingesto, lavatrio, descarga sanitria, preparo de alimentos). h) Informaes sobre o efluente gerado As peculiaridades na gerao do efluente lquido (tais como: perodo e frequncia de cada descarte), a possibilidade de medir a vazo por linha de descarte, as redes de coleta e as condies de acesso aos locais de amostragem so fatores primordiais para a definio de qualquer campanha de amostragem de efluentes lquidos. Quando necessrio, importante o conhecimento da existncia, ou no, de segregao de despejos. i) Sistema de tratamento de efluentes O prvio conhecimento da descrio do sistema de tratamento de efluentes, assim como o seu fluxograma, proporcionar ao responsvel pela amostragem uma viso global. Permitir, tambm, uma precisa definio dos pontos de amostragem e dos parmetros a serem analisados, principalmente nos casos de avaliao de desempenho do sistema de tratamento. j) Condies de funcionamento dos equipamentos industriais As condies de conservao dos equipamentos e dos maquinrios indicam a probabilidade de quebra e, por isso, podem significar perda de matria prima ou de subprodutos com consequente aumento na gerao de efluentes lquidos.

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l) Condies de gerenciamento da indstria As condies de gerenciamento de uma indstria do uma idia de como os assuntos relacionados ao controle da poluio so tratados. Quando existe a preocupao da implantao de programas de treinamento para os funcionrios, tanto no campo produtivo como na parte ambiental, com certeza as caractersticas de seus efluentes sero diferentes daquelas indstrias onde esta poltica no existe. Para realizao de um levantamento industrial confivel fundamental que os itens anteriormente citados sejam verificados com preciso. Alm dos dados fornecidos pela indstria, as observaes efetuadas no processo produtivo e nos pontos geradores de efluentes lquidos iro possibilitar uma melhor definio do plano de amostragem, com a escolha precisa da frequncia e tempo de amostragem, com uma descrio detalhada das condies fsicas do ponto de coleta e medio de vazo, e a correta escolha dos parmetros a serem analisados. Alm da checagem das informaes anteriormente citadas, dever ser verificada a existncia de interligaes indevidas, tais como: guas de refrigerao com efluentes industriais, guas pluviais e/ou de refrigerao, existncia de by pass no efluente bruto, entre outras. Portanto, torna-se indispensvel uma criteriosa inspeo na indstria por parte do responsvel pela amostragem, para a seleo adequada dos equipamentos a serem utilizados na campanha de amostragem e para o dimensionamento da equipe que realizar os trabalhos.

8.1.2 Efluentes Mistos (Industriais e Domsticos)


A presena de efluentes industriais misturados ao esgoto domstico em sistemas pblicos de tratamento de esgotos normalmente resulta em despejos com caractersticas diferentes daquelas onde somente existe esgoto domstico. Portanto, cuidados especiais devero ser adotados na seleo dos parmetros a serem analisados.

8.1.3 Efluentes Gerados em Plantas de Incinerao de Resduos Slidos Industriais ou Hospitalares


Embora guarde pontos em comum com efluentes industriais, este tipo particular de efluente no domstico apresenta particularidades no

amostragem de efluentes lquidos

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plano de amostragem que devem ser observadas para que os resultados da avaliao sejam representativos. Os pontos principais de gerao de efluentes numa planta de incinerao de resduos so: 1. Quench (resfriamento brusco de gases), quando efetuado por equipamentos via mida, tais como: lavador Venturi, torre de spray e torre de enchimento; 2. Equipamentos de controle de poluio do ar por via mida; 3. Efluentes provenientes da manuteno de equipamentos; 4. guas de lavagens de pisos da planta de incinerao; 5. guas de drenagem de resfriamento de escria de resduo industrial incinerado, e; 6. guas de lavagem de baas de armazenamento de resduo hospitalar. A maior contribuio de vazo , sem dvida, proveniente dos equipamentos de controle de poluio do ar via mida. Deve-se conhecer a quantidade e a composio do resduo introduzido no incinerador, a quantidade e o tipo de combustvel utilizado e os equipamentos que geram efluentes. tambm importante a avaliao da rede de coleta de efluentes e de guas pluviais, pois em caso de derramamento e posterior lavagem decorrente do manuseio, transbordo e transporte de grandes quantidades de resduos (algumas vezes perigosos), estes se caracterizam em efluentes e, portanto, devem ser tratados adequadamente.

8.1.4 Efluentes Percolados Gerados em Aterros Industriais e Sanitrios


A disposio de resduos slidos em aterros industriais e sanitrios gera lquidos percolados, conhecidos como chorume, que podem infiltrar e contaminar o lenol fretico e, portanto, devem ser coletados e adequadamente caracterizados. importante ressaltar que este efluente apresenta uma composio qumica que varia de acordo com a idade do aterro, condies climticas, etc.; fatores estes que dificultam a determinao de sua caracterizao qualitativa e quantitativa.

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8.2 Planejamento da Amostragem de Efluentes Lquidos


A elaborao de um plano de amostragem de efluentes lquidos deve considerar vrios aspectos, tais como: objetivo da avaliao, localizao do empreendimento, tempo da amostragem, pontos de retirada de amostras, dimensionamento da equipe tcnica, material necessrio para realizao dos trabalhos, conhecimento do levantamento industrial, vistoria prvia no local, conhecimento da atividade industrial, de seu processo de fabricao e da hidrografia da regio (quando o efluente descartado em rios) e parmetros a serem analisados no efluente para avaliao do atendimento a legislao ambiental de controle de poluio das guas. Os tcnicos precisam observar e anotar todas as condies de funcionamento da unidade geradora dos efluentes no dia da avaliao e/ou caracterizao, que possam interferir nas caractersticas do despejo a ser amostrado.

8.2.1 Local e Pontos de Amostragem


Na escolha dos locais de amostragem deve-se considerar que: As vazes afluente e efluente do sistema so de fundamental importncia para o clculo da carga poluidora, e consequente avaliao da eficincia do sistema de tratamento, bem como para a coleta de amostras compostas; O ponto da amostragem deve ser representativo e com turbulncia, de modo a se obter uma boa mistura. Devem ser evitados locais situados a montante de vertedores devido sedimentao de slidos; As amostras devem ser tomadas no centro do canal, onde a velocidade mais alta e a sedimentao de slidos mnima; O local deve ser de fcil acesso. Para definio dos pontos de amostragem, devem ser considerados os objetivos envolvidos na campanha de amostragem, tais como: avaliao do desempenho do sistema de tratamento, verificao do atendimento aos padres de legislao, obteno de informaes para elaborao de um projeto de um STAR e implantao de medidas de preveno poluio.

amostragem de efluentes lquidos

227

8.2.2 Tipos de Amostragem


Aps a seleo dos pontos de amostragens e dos parmetros a serem analisados, deve-se definir o tipo da amostra, a frequncia e o perodo da amostragem para, finalmente, detalhar a organizao e a execuo dos trabalhos. A coleta pode ser realizada manualmente ou com auxlio de amostrador automtico e as amostras podem ser simples ou compostas. A amostra simples indicada para os casos onde a vazo e a composio do lquido no apresentam variaes (qualitativas e quantitativas) significativas e todas as informaes que se deseja podem ser obtidas por meio de uma nica amostra. A amostra composta adotada para possibilitar a minimizao do nmero de amostras a serem analisadas e, principalmente, quando h uma grande variao do volume da vazo e/ou da composio do efluente. Tanto a amostragem simples como a composta foram descritas de uma forma mais abrangente e com mais detalhes no captulo 3 Organizao dos Trabalhos de Campo. O tempo e a vazo podem ser utilizados como base para a composio das amostras compostas. Quando o tempo a base da composio, um volume fixo de amostra retirada do fluxo de efluentes, em intervalos fixos de tempos. Este tipo de composio recomendado para os casos onde a variao da frequncia da vazo conhecida e o intervalo entre as vazes seja o menor possvel. Nestes casos, para clculo do volume de cada alquota a ser coletada, utiliza-se a frmula:

onde:

Val : volume de cada alquota Vam : volume total da amostra n: nmero de alquotas

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Quando a vazo a base da composio da amostra, os volumes das alquotas sero proporcionais as variaes das vazes instantneas do efluente. Para o clculo do volume de cada alquota, a frmula utilizada : onde: Val: volume da alquota Qi : vazo instantnea Qm: vazo mdia Vam: volume total da amostra n: nmero total de alquotas Como a vazo instantnea Qi varia a cada momento, o volume de cada alquota tambm ir variar proporcionalmente. O volume da amostra Vam funo dos parmetros a serem analisados no laboratrio e a vazo mdia Qm corresponde mdia obtida durante o perodo da referida amostra. O perodo de tempo no qual a amostra dever ser composta ir depender dos objetivos do programa. Sugere-se que para um processo produtivo contnuo (24 h/dia), o perodo mnimo de amostragem seja de uma jornada diria de trabalho, de forma a obter uma correlao com as caractersticas da produo. Neste caso sugere-se que seja realizada uma campanha constituda de 4 amostras, cada uma delas coletadas num perodo de 6 horas, com alquotas coletadas a cada 30 ou 60 minutos. Para alguns parmetros no possvel realizar composio de amostras, sendo exigida a coleta de amostra simples. Fazem parte desse grupo de parmetros os leos e graxas, sulfeto, oxignio dissolvido, solventes halogenados, indicadores microbiolgicos, entre outros, que podem ser alterados (transferncia de frascos, volatilizao, oxidao e reduo, perda de viabilidade, etc) durante o processo de composio ou pelo prazo requerido para anlise. Para esses casos, a amostra simples normalmente coletada na penltima alquota da amostra composta.

amostragem de efluentes lquidos

229

Coleta com garrafa de van Dorn - Fluxo Horizontal - Foto Carlos Jesus Brando/CETESB

8.2.3 Seleo dos Ensaios a Serem Realizados


A escolha dos parmetros depender, alm dos objetivos do programa citados anteriormente, do tipo de efluente industrial e da classe dos corpos hdricos receptores. Para tanto, fundamental manterse atualizado, consultando a legislao vigente nos sites das instituies responsveis pela sua elaborao e/ou homologao, como ANA (Agncia Nacional de guas), Anvisa (Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria), Conama (Conselho Nacional do Meio Ambiente), Ibama (Instituto Brasileiro do Meio Ambiente, OMS (Organizao Mundial de Sade), SMA (Secretaria do Meio Ambiente) de cada estado, entre outros. Para a avaliao dos efluentes visando implementao de sistemas de reso de gua, os parmetros a serem analisados dependero do processo produtivo e de quais contaminantes sero tolerados no reso. Na tabela 8 esto indicados os parmetros pertinentes a diversas atividades industriais; contudo, esta tabela deve ser utilizada apenas como referncia, devendo o tcnico acrescentar ou no outros parmetros, com base no levantamento industrial e na vistoria realizada na indstria.

amostragem de efluentes lquidos

231

232

Tabela 8. Caracterizao Tpica para Efluentes Industriais (parte 1)


TIPOS DE INDSTRIA

cereais

Bebidas

Baterias

Borrachas

Automvel

Amianto

Alimentcia

Componentes Eltro-eletrnico

Celulose e Papel

Acar e lcool

Abatedouros e Frigorficos

ENSAIOS

Alumnio x x x x

Amnia

Arsnio

Brio x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x

Boro

Cdmio

Chumbo

Cianeto

Cobre

Coliformes termotolerantes

Coliformes Totais

Cromo Hexavalente

Cromo Total

DBO

DQO

Estanho

Fenis

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Ferro Solvel

Fluoretos x x x x x x

Fosfatos

Mangans x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x
continua...

Mercrio x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x

Nquel

Nitrognio amoniacal

Nitrognio Nitrato

Nitrognio Nitrito

Nitrognio Orgnico

Nitrognio Total

amostragem de efluentes lquidos

leos e Graxas

pH

Prata

Resduo Sedimentvel

Selnio

Srie de Resduos

Solventes Aromticos

Solventes Halogenados

Sulfatos

Sulfetos

Surfactantes

Temperatura

Zinco

233

234

Tabela 8. Caracterizao Tpica para Efluentes Industriais (parte 2) (continuao)


TIPOS DE INDSTRIA

Laticnios

Minerao

Mveis de Madeira

Materias Plsticos e Sintticos

Metalrgicas

Galvanoplastia

Fertilizantes

Fundio de ferro

Curtumes

Estao de Tratamento de Esgotos

Concreto, Cimento, Cal e Gesso

ENSAIOS

Alumnio x x x

x x x

Amnia

Arsnio x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x

Brio x x x

Boro

Cdmio

Chumbo

Cianeto

Cobre

Coliformes termotolerantes

Coliformes Totais

Cromo Hexavalente

x x x x x x x x x x

Cromo Total

DBO

DQO

Estanho

Fenis

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Ferro Solvel

Fluoretos x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x

Fosfatos

Mangans

Mercrio

Nquel

Nitrognio amoniacal

Nitrognio Nitrato

Nitrognio Nitrito

Nitrognio Orgnico

Nitrognio Total

amostragem de efluentes lquidos continua...

leos e Graxas

pH

Prata

Resduo Sedimentvel

Selnio

Srie de Resduos

Solventes Aromticos

Solventes Halogenados

Sulfatos

Sulfetos

Surfactantes

Temperatura

Zinco

235

236

Tabela 8. Caracterizao Tpica para Efluentes Industriais (parte 3) (continuao)


TIPOS DE INDSTRIA

Txteis

Vidros e Cermicas

Siderurgia

Produtos Orgnicos

Produtos Inorgnicos

Produtos Farmacuticos

Produo de leos Vegetais

Planta de Incinerao de Resduos

Porcelana

Vegetais e Frutas Enlatadas

Processamento de alumnio

Processamento de Cobre

Petroqumica e Refinaria

ENSAIOS

Alumnio x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x

x x

Amnia

Arsnio

Brio x x x x x x x x

Boro

Cdmio

Chumbo

Cianeto

Cobre

Coliformes termotolerantes

Coliformes Totais x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x

Cromo Hexavalente

Cromo Total

DBO

DQO

Estanho

Fenis

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Ferro Solvel

Fluoretos x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x

Fosfatos

Mangans

Mercrio

Nquel

Nitrognio amoniacal

Nitrognio Nitrato

Nitrognio Nitrito

Nitrognio Orgnico

Nitrognio Total

amostragem de efluentes lquidos

leos e Graxas

pH

Prata

Resduo Sedimentvel

Selnio

Srie de Resduos

Solventes Aromticos

Solventes Halogenados

Sulfatos

Sulfetos

Surfactantes

Temperatura

Zinco

237

8.2.4 Avaliao do Desempenho do STAR


Quando se deseja efetuar apenas a avaliao do desempenho de um STAR como um todo, os pontos de amostragem a serem escolhidos so a entrada e a sada do sistema; porm, se avaliao em estudo alguma unidade do STAR, os locais escolhidos devero ser a entrada e a sada da unidade. Por exemplo: para um tratamento biolgico realizado atravs de um sistema de lodos ativados, muitas vezes necessrio avaliar a operao do tanque de aerao; para isto, necessrio que a amostra seja coletada dentro desta unidade e no retorno de lodo. Portanto, para cada caso necessrio o conhecimento dos parmetros de operao de cada unidade ou do sistema de tratamento, para escolher os locais adequados de amostragem para a avaliao de seu desempenho. A avaliao de um desempenho no sistema de tratamento levar em conta: Aspectos quantitativos relativos vazo e capacidade hidrulica do sistema de tratamento; e, Aspectos qualitativos relativos s caractersticas fsicas, qumicas e biolgicas do efluente bruto e tratado. No caso de sistemas biolgicos com baixa eficincia no seu funcionamento, onde todas as condies fsico-qumicas e hidrulicas encontram-se de acordo com os valores recomendados, necessrio verificar os possveis compostos txicos ao sistema e, neste caso, os ensaios a serem realizados devero ser extensamente pesquisados na relao de todos os produtos qumicos utilizados, independente da quantidade e da finalidade de seu uso.

8.2.5 Elaborao de Projeto de STAR


A obteno de informaes para dimensionamento de um projeto de sistema de tratamento, em muitos casos, necessita de uma amostragem prvia em diferentes pontos, para verificar se h necessidade de segregao de linhas geradoras de efluentes. Os pontos de amostragem devem ser selecionados de forma a representar as caractersticas dos efluentes a serem tratados. Caso os efluentes sejam lanados em vrias linhas e unificados antes da

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entrada do STAR, a amostragem dever ser feita aps a unificao das linhas. Caso no seja possvel esta reunio, a amostragem dever ser feita em cada linha, caracterizando o efluente a ser tratado. imprescindvel que a amostragem de efluentes seja representativa, ou seja, a sua caracterizao deve ser realizada por meio de amostragem composta por alquotas coletadas, preferencialmente, com o volume proporcional a vazo no efluente bruto durante, pelo menos, o perodo dirio de produo da empresa.

8.2.6 Atendimento aos Padres da Legislao


Para a avaliao dos efluentes lquidos de uma indstria, quanto ao atendimento s condies e padres de emisso (lanamento), deve-se selecionar os ensaios pertinentes quele tipo de atividade industrial, e outros especficos quela empresa, levando-se em conta suas particularidades, observadas no roteiro de informaes descritas, no necessitando analisar todos os parmetros listados na legislao estadual e/ou federal. Quando a indstria apresenta em sua relao de matria prima muitos compostos qumicos de grande complexidade, como defensivos agrcolas, e o laboratrio no possui todos os padres analticos para sua determinao, deve-se escolher outros ensaios que possam indicar a presena de tais compostos qumicos no efluente ou no corpo receptor, para possibilitar a sua melhor caracterizao. No caso de estao de tratamento de esgotos domsticos, a escolha dos ensaios ir depender, alm das suas caractersticas (que so bastante conhecidas), dos possveis tipos de indstrias existentes na regio e cujos efluentes drenam para esta estao. Para as anlises dos efluentes de plantas de incineradores, ou do lquido percolado em aterros industriais, deve-se verificar os possveis constituintes existentes nos materiais incinerados ou nos resduos dispostos, para possibilitar a seleo dos ensaios adequados. No caso da legislao do Estado de So Paulo, alm da amostragem no efluente final, necessrio amostrar o efluente bruto, para a verificao da eficincia na remoo de carga poluidora em termos de DBO5 dias, 20C, a qual normalmente expressa em kg DBO/dia.

amostragem de efluentes lquidos

239

Para a verificao quanto ao atendimento s condies e padres de qualidade do corpo receptor, deve-se escolher os ensaios indicados na legislao que esto relacionados com a atividade industrial em questo, em que estes possam ser alterados pelo lanamento do efluente lquido, sendo necessrio realizar a amostragem no corpo receptor, a montante e a jusante dos lanamentos da indstria ou da unidade geradora de efluentes lquidos. Deve-se sempre certificar que no local escolhido a jusante, o efluente descartado esteja completamente misturado massa lquida do corpo receptor, de tal forma que somente este lanamento seja o causador das possveis alteraes na sua qualidade. As indstrias que apresentam algum tipo de disposio de resduos slidos ou de lquidos no solo devero realizar amostragem no aqufero, por meio de poos de monitoramento, para verificar possvel contaminao das guas subterrneas. Para o atendimento aos padres da legislao importante incluir os ensaios toxicolgicos. Apesar de no constar a obrigatoriedade do ensaio de Ames na legislao vigente, este tem se tornado uma informao importante no diagnstico ambiental e no monitoramento da qualidade dos corpos dgua receptores.

240

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CAPtulO

9 ENSAIOS EM CAMPO
Neste captulo sero abordados os ensaios frequentemente conduzidos em campo devido ao curto prazo requerido pela anlise, o que implica em cuidados especficos para sua realizao. Para evitar a contaminao do local de coleta, todos os resduos dos ensaios realizados em campo devem ser recolhidos.

9.1 Cloro Residual - Mtodo DPD


Existem trs tipos de determinao de cloro residual na gua tratada (livre, total e combinado). O cloro residual livre aquele presente na forma elementar dissolvida (Cl2), ou como cido hipocloroso (HClO), ou como on hipoclorito (ClO). O cloro residual total a soma do cloro residual livre com o cloro residual combinado. O cloro residual combinado a subtrao do cloro residual livre do cloro residual total. Devido instabilidade e degradao rpida do cloro residual livre, a sua determinao deve ser realizada em campo, antes da coleta das demais amostras, podendo-se utilizar um kit comparador colorimtrico mtodo DPD (N, N-dietil-p-fenilenediamina) ou um fotmetro de campo do tipo pocket. O cloro livre faz a oxidao do DPD, formando uma substncia de colorao rosa que tem sua intensidade diretamente proporcional concentrao de cloro residual. A determinao do cloro residual livre a mais comum nos trabalhos que envolvem redes de distribuio de gua para consumo humano, pois empregado na desinfeco da gua. Em todas as amostras coletadas para anlises microbiolgicas deve ser efetuada, no momento da coleta, medio de cloro residual livre ou de outro composto residual ativo, caso o agente desinfetante utilizado no seja o cloro. Conforme a Portaria n 518/2004 do Ministrio da Sade, art. 13, aps a desinfeco, a gua deve conter um teor

ensaios em campo

241

mnimo de cloro residual livre de 0,5mg/L, sendo obrigatria a manuteno de, no mnimo, 0,2mg/L em qualquer ponto da rede de distribuio e um teor mximo de cloro residual livre, em qualquer ponto do sistema de abastecimento, de 2,0mg/L.
Procedimentos para ensaio de cloro residual livre Abrir a torneira e deixar a gua escorrer por dois ou trs minutos; Lavar as cubetas (do kit ou pocket) com a amostra; Encher as cubetas, at o menisco de marcao, com a amostra a ser analisada (gua da torneira); Adicionar os reagentes e realizar a determinao conforme orientao do fabricante; Anotar os resultados, que sero expressos em mg/L de cloro residual livre.

9.2 Oxignio Dissolvido - Mtodo Eletromtrico


Existem trs mtodos eletromtricos para a determinao de oxignio dissolvido em corpos dgua: Polarogrfico - Ideal para guas que no apresentam concentraes de oxignio dissolvido prximo ao zero e presena de sulfeto elevada. O sistema trabalha por pulso eltrico e no necessita de agitao. Galvnico O sistema constitudo de uma clula galvnica que, pela difuso do oxignio dissolvido atravs da membrana, realiza a determinao. Necessita de agitao e ideal para determinao de oxignio dissolvido em todos os tipos de gua. tico O sistema realiza a determinao por luminescncia, no necessita de agitao, e ideal para a determinao de oxignio dissolvido em todos os tipos de gua. A determinao pode ser realizada diretamente no corpo dgua ou no recipiente coletor de amostras com a utilizao de um oxmetro e sonda acoplada, onde o comprimento do cabo depender da profundidade do local a ser amostrado. Os procedimentos de ajustes dos equipamentos eletromtricos devem ser realizados de acordo com as recomendaes e especificaes tcnicas do fabricante.

242

Guia nacional De coleta e preservao De amostras

Para a determinao do oxignio dissolvido em rea estuarina ou marinha, deve-se efetuar a correo da salinidade antes do ensaio. Anotar os resultados, que sero expressos em mg/L de oxignio dissolvido.l

9.3 Oxignio Dissolvido - Mtodo Winkler Modificado pela Azida Sdica


O mtodo de Winkler (modificado pela azida sdica) ainda o mtodo mais empregado para a determinao do oxignio dissolvido. Pode ser empregado para a determinao do oxignio dissolvido em corpos dgua em geral, guas de abastecimento, guas residurias e guas do mar. Aplica-se para as concentraes de oxignio dissolvido superiores a 0,1mg/L, sendo que o mtodo no se aplica a amostras que contenham interferentes, como: sulfito, tiossulfato, politionato, cloro livre e hipoclorito. Nesses casos, podem ser empregadas outras modificaes do mtodo de Winkler ou o mtodo eletromtrico. A coleta de amostra realizada com a utilizao de equipamentos apropriados, que no permitem a aerao da amostra, como batiscafo para coleta de amostras superficiais ou garrafa de van Dorn (fluxo vertical ou horizontal) para coleta em profundidade.

ensaios em campo

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Procedimentos para coleta de oxignio dissolvido - mtodo Winkler, modificado pela azida sdica Coletar a amostra com auxlio de batiscafo, na superfcie, ou com garrafa de van Dorn, enchendo o frasco de DBO; Adicionar imediatamente 2mL de soluo de sulfato manganoso e, em seguida, 2mL de soluo reagente alcali-iodeto azida, tendo o cuidado de verter lentamente os reagentes na borda do frasco e no trocar a ordem dos reagentes; O sulfato manganoso reage com o hidrxido de sdio para produzir um precipitado flocoso de hidrxido manganoso, que pode variar de branco at marrom, dependendo da concentrao de oxignio dissolvido; Fechar bem o frasco de DBO, sem deixar bolhas de ar no interior; Agitar bem o frasco fechado para dispersar o precipitado de hidrxido manganoso uniformemente na amostra; Deixar o precipitado sedimentar at aproximadamente a metade do volume do frasco. No caso de gua do mar, o tempo de contato da amostra com o precipitado deve ser de, pelo menos, dois minutos; Agitar novamente muito bem, para que a reao seja completa; Encaminhar a amostra para ensaio no laboratrio.

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Procedimentos para ensaio de oxignio dissolvido em campo ou no laboratrio - mtodo Winkler, modificado pela azida sdica Materiais e reagentes necessrios para titulao: Base, haste, garra, Erlenmeyer de 250mL, bureta de 10mL classe A, pipeta volumtrica de 100mL classe A ou tubo de Nessler de 100mL graduado, pra de laboratrio; cido sulfrico 1+1; soluo de fluoreto de potssio; soluo de tiossulfato de sdio 0,0125N e soluo indicadora de amido. Procedimento: Depois de realizado o procedimento acima para coleta e preservao da amostra, acrescentar 2mL de soluo de fluoreto de potssio (no caso de amostra de gua estuarina ou marinha no se acrescenta essa soluo); Acrescentar em seguida 4mL de soluo de cido sulfrico 1:1, com cuidado, fechar o frasco e agitar muito bem para dissolver completamente o material precipitado; Transferir imediatamente 100mL para um Erlenmeyer, com auxlio de um tubo de Nessler graduado ou pipeta volumtrica de 100mL; Titular a amostra com a soluo de tiossulfato de sdio 0,0125N at a deteco de cor amarelo palha, usando a soluo de amido como indicadora; O ponto final da titulao dado pelo primeiro desaparecimento da cor azul caracterstica; Expresso do resultado: A concentrao de oxignio dissolvido dada por: V1 x 2 x Fc = mg/L OD V1 = Volume gasto na bureta Fc = fator de correo do tiossulfato de sdio; Os resultados sero expressos em mg/L de oxignio dissolvido.

9.4 Condutividade e Salinidade


A capacidade da gua em conduzir a corrente eltrica pode ser expressa numericamente pela condutividade/salinidade, que est relacionada diretamente com as concentraes inicas e temperatura. A condutividade indica a quantidade de sais presentes na gua, fornecendo uma medida indireta da concentrao de poluentes e uma indicao das modificaes na composio do corpo dgua. Concentraes acima de 100S/cm (micro Siemens/cm) geralmente indicam ambientes impactados; valores altos podem tambm indicar caractersticas corrosivas da gua. Em ambientes salobros, estuarinos e no mar, a expresso do resultado de condutividade mS/cm (mili Siemens/cm).

ensaios em campo

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A salinidade absoluta a concentrao de todos os ons dissolvidos na gua e, na prtica, no pode ser medida diretamente, sendo necessria a determinao da salinidade prtica (S). uma grandeza adimensional, sendo o termo 0/00 substitudo por Sx10-3. A salinidade prtica pode ser determinada por mtodos indiretos relacionados com medies de propriedades fsicas como condutividade, densidade, ndice de refrao (refratmetro), entre outros. Esses dois tipos de ensaios (condutividade e salinidade) so realizados preferencialmente em campo, diretamente no corpo dgua, ou por meio de amostra coletada com equipamentos apropriados, como balde de ao inox (na superfcie) ou garrafa de van Dorn. No caso do emprego de equipamento, a amostra acondicionada em um frasco descartvel e a determinao pode ser realizada imediatamente aps a coleta ou encaminhada ao laboratrio, caso no tenha o equipamento disponvel no momento da coleta. A determinao da condutividade e salinidade realizada com um condutivmetro/salinmetro acoplado a uma sonda ou sensor (ou refratmetro para a salinidade), sendo que os procedimentos de ajustes dos equipamentos eletromtricos devem ser realizados de acordo com as recomendaes e especificaes tcnicas do fabricante.

9.5 pH - Potencial Hidrogeninico - Mtodo Eletromtrico


O potencial hidrogeninico (pH) o cologaritimo da concentrao de ons hidrognio em uma amostra, expresso em mol/L. Seu valor varia de 0 a 14, onde gua com pH menor que 7 considerada cida; com valor acima de 7 considerada bsica ou alcalina; e, com valor igual a 7 considerada como uma gua neutra. Quanto menor for o valor do pH de uma substncia, maior a concentrao de ons hidrnio (H3O+) e menor a concentrao de ons OH-; o inverso verdadeiro para gua bsica ou alcalina. A membrana do eletrodo separa dois meios de concentraes de pH diferentes (faixa cida e alcalina). Desenvolve-se entre os dois lados da membrana uma diferena de potencial, que proporcional diferena de pH entre os meios, sendo esta diferena medida pelo eletrodo de medio contra uma referncia.

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A determinao de pH realizada preferencialmente direto no corpo dgua, quando possvel, ou em uma amostra coletada com equipamento apropriado, como balde de ao inox (superfcie) ou com auxlio de uma garrafa de van Dorn em profundidade. importante ressaltar que a determinao de pH deve ser realizada com eletrodos especficos. Os procedimentos de ajustes dos equipamentos eletromtricos devem ser realizados de acordo com as recomendaes e especificaes tcnicas do fabricante.
Procedimentos para ensaio de pH - mtodo eletromtrico Coletar a amostra com auxlio de batiscafo na superfcie ou com garrafa de van Dorn, enchendo um frasco descartvel; Ligar o phmetro (potencimetro) e aguardar at que os valores se estabilizem, ou seja, no fiquem variando; Lavar os eletrodos com gua deionizada e enxug-los delicadamente com papel absorvente; Calibrar o equipamento com as solues padro de pH, conforme orientao do fabricante; Retirar os eletrodos da soluo padro, lav-los com gua deionizada e enxug-los; Inserir os eletrodos na amostra coletada; Esperar os valores se estabilizarem e fazer a leitura do resultado; Retirar os eletrodos da amostra, lav-los e deix-los imersos em soluo de acordo com o manual do fabricante; Desligar o equipamento. Prazo mximo para este ensaio de 15 minutos a partir do momento da coleta de amostra.

9.6 Potencial Redox - Eh ou ORP - Mtodo Eletromtrico


O potencial de oxidao e reduo (ORP, do ingls Oxidation Reduction Potential), tambm conhecido como potencial Redox (Eh) e serve para avaliar as reaes qumicas de um meio, atravs do equilbrio entre as reaes de oxidao e reduo. A determinao do ORP realizada com eletrodo especfico, utilizando-se um medidor de pH (pHmetro), ajustado em mV (mili Volts). Os procedimentos de ajustes devem ser realizados de acordo com as recomendaes e especificaes tcnicas do fabricante.

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9.7 Temperatura da gua e Ar


A medio da temperatura da gua na superfcie pode ser realizada com termmetro de imerso parcial, submergindo-o diretamente no corpo dgua ou atravs dos sensores de temperatura dos equipamentos eletromtricos utilizados para os ensaios de pH, condutividade e oxignio dissolvido ou termistores especficos disponveis no mercado. Na impossibilidade de medir a temperatura diretamente no corpo dgua, realizar a medida em um balde de ao inox com volume de 5 litros a 10 litros de amostra ou frasco descartvel imediatamente aps a coleta. Para a determinao da temperatura em profundidade, utilizar um dos equipamentos eletromtricos citados acima, com sonda de profundidade e sensor de temperatura, utilizando como resultado da medio o valor expresso no display do equipamento. A determinao de temperatura do ar pode ser realizada com os sensores acima, mantendo o termmetro ou sensor na posio vertical, evitando incidncia direta da luz solar.

9.8 Transparncia
A transparncia da gua obtida com auxlio do disco de Secchi. Para tanto, necessrio observar as seguintes condies, sempre que possvel: o operador deve se posicionar de tal maneira que sua viso fique vertical ao eixo central do disco; realizar a determinao em condies de cu claro, preferencialmente sombra, e selecionar um local com pouca agitao ou ondas. O disco submerso no local onde ser realizada a determinao at seu desaparecimento do campo visual. Repetir a operao para certificao de que o disco est no seu limite de visualizao e efetuar a medio deste limite no cabo graduado de apoio do equipamento. Anotar os resultados na ficha de coleta.

9.9 Turbidez - Mtodo Nefelomtrico


Turbidez a reduo da transparncia de uma amostra aquosa devido presena de material em suspenso. O mtodo utilizado para leitura da turbidez o nefelomtrico que um mtodo secundrio, indireto. Baseia-se na determinao da intensidade de luz dispersa pela amostra num ngulo de 90 em relao direo da luz incidente, comparada com a intensidade de luz dispersa por uma suspenso-padro.

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A determinao da turbidez pode ser realizada em campo com o auxlio de um turbidmetro e seus procedimentos de ajustes devem ser realizados de acordo com as recomendaes e especificaes tcnicas do fabricante, ou encaminhada ao laboratrio, caso no tenha o equipamento disponvel no momento da coleta. Anotar os resultados na ficha de coleta.

9.10 Slidos Sedimentveis - Cone Imhoff


todo material slido que sedimenta por ao da gravidade em uma amostra aquosa. A amostra para o ensaio de slidos sedimentveis no requer preservao qumica e pode ser analisada em campo (ensaio imediato) ou no laboratrio em at, no mximo, 24 horas aps a coleta. Princpio do mtodo O mtodo consiste na sedimentao, por ao da gravidade, dos slidos de densidade superior ao da gua presentes na amostra.

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Procedimentos para ensaio de slidos sedimentveis em campo ou laboratrio - mtodo do cone Imhoff Materiais: Cone Imhoff, de 1L, de vidro ou de plstico, com graduao; Basto de vidro; Suporte com argola com 80mm; Cronmetro; Interferentes: Amostras apresentando colorao muito intensa podem impedir a visualizao do slido sedimentvel; Amostras com alto teor de slidos podem no apresentar sedimentao visvel no cone Imhoff.

Nota: Caso a fase sedimentada apresente heterogeneidade no momento da leitura, cancelar a determinao e efetuar novo ensaio. Determinao: Acondicionar o cone Imhoff no suporte; Homogeneizar e transferir aos poucos 1L da amostra para o cone Imhoff, homogeneizando durante todo o processo de transferncia; Deixar em repouso por 45 minutos; Com um basto de vidro, deslocar delicadamente as partculas aderidas parede do cone com movimentos circulares, para que as mesmas possam sedimentar; Deixar sedimentar por mais 15 minutos; Verificar o volume sedimentado, em mL/L. Expresso dos resultados: 0,1mL/L a 2,0mL/L uma unidade decimal 2,0mL/L a 10mL/L mltiplos de 0,5 11mL/L a 40mL/L nmeros inteiros 42mL/L a 100mL/L nmeros inteiros pares 150mL/L a 1000mL/L mltiplos de 50.

9.11 Medidores e Amostradores Automticos


Nos primeiros projetos de monitoramento automtico dos cursos dgua, as medies eram realizadas por instrumentos mecnicos e os registros efetuados em papel. Esses instrumentos, destinados medio de grandezas hidrometeorolgicas, determinavam as chuvas e as variaes de nvel

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dos rios e reservatrios por meio de bias e balanas que moviam pequenas engrenagens e deslocavam uma caneta registradora sobre um rolo de papel contnuo. Os registros, em forma de grfico, representavam as variaes do parmetro medido, em funo do tempo. Essa onerosa forma de registro implicava necessidade de manuteno constante dos equipamentos de medio, acionamento frequente dos mecanismos por corda do relgio e reposio tambm frequente dos rolos de papel e da tinta da caneta. Por fim, a transformao dos anagramas em dados numricos era realizada por leitura manual dos grficos, com emprego de rguas especficas, o que demandava uma carga de trabalho considervel para se dispor dos resultados necessrios s anlises dos dados. O grande desenvolvimento tecnolgico do monitoramento automtico foi determinado pela evoluo dos processos eletroeletrnicos, que possibilitaram a substituio dos movimentos mecnicos dos sensores por impulsos eltricos. Os mecanismos de relojoaria deram lugar a motores eltricos sincronizados, alimentados por baterias. Mais recentemente, os progressos na rea da informtica propiciaram a transformao dos impulsos eltricos em cdigos digitais que podiam ser gravados em dispositivos magnticos com capacidade de armazenamento gigantesca. Registradores virtuais de tempo sincronizados s leituras dos dados dispensaram os sensores mecnicos, permitindo informar, para cada dado coletado, a hora correspondente. Atualmente, a telemetria dos dados gerados em campo s centrais de gerenciamento por meio da transmisso por celular, satlite e rede ethernet tem permitido acompanhamento operacional ininterrupto das estaes e postos de medio e a disponibilizao quase que imediata dos dados gerados ao pblico usurio.

9.11.1 Monitoramento Automtico da Qualidade das guas


Denomina-se automtico o monitoramento que realizado por dispositivos capazes de determinar os parmetros de interesse, registrar, processar e, em sistemas mais sofisticados, interpretar os dados de forma automtica e sistemtica, sem a necessidade constante de superviso por parte de um operador. Como o monitoramento constante e ininterrupto, permite detalhar com mais preciso a evoluo da qualidade da gua ao longo de

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perodos de interesse, com a identificao de eventos cclicos ou pontuais como, por exemplo, descargas de efluentes clandestinas, mau funcionamento de estaes de tratamento de efluentes, contribuies difusas durante episdios de chuvas, etc. Esses eventos manifestamse em curtos intervalos de tempo e dificilmente seriam detectados em monitoramentos convencionais nos quais a coleta de amostras d-se de forma manual. Quando dotada de computador lgico programvel (CLP) e modem, uma estao de monitoramento automtico pode transmitir os dados gerados em tempo real, agregando uma srie de recursos ao monitoramento e, no caso da estao possuir amostrador automtico, coletar amostras de gua a qualquer momento. Estaes de monitoramento automtico podem tambm integrar sistemas de alerta, emitindo sinais de alarme para fax, celular (SMS) ou computador na sala de controle distncia quando da ocorrncia de eventos crticos de qualidade da gua. Esse sinal de alarme pode, ainda, ser combinado ao acionamento automtico de um amostrador que passa a coletar amostras durante o evento. Um software instalado no CLP comanda as operaes da estao e monitora o prprio sistema, informando mau funcionamento ou defeito nos dispositivos, permitindo realizar ajustes a distncia. Todo esse aparato tecnolgico tem viabilizado a disseminao de estaes de monitoramento automtico de qualidade das guas. As determinaes fsicas, qumicas e at biolgicas so realizadas em campo por equipamentos eletromtricos e sensores que geram sinais eltricos, os quais so enviados a dispositivos dotados de memria eletrnica. Esses dispositivos, conhecidos como data-loggers, so hoje fundamentais para as estaes de monitoramento, sendo capazes de armazenar dados coletados durante semanas ou mesmo meses, dependendo de sua capacidade e do intervalo de tempo entre medies. Sensores especficos para cada ensaio so conectados aos diversos canais de registro dos data-loggers. Cada um dos sensores fornece uma determinada resposta eletrnica ao estmulo recebido durante o contato com a gua. As respostas so registradas periodicamente para que, aps a coleta dos dados armazenados com auxlio de um

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extrator de dados ou computador porttil, haja a converso em valores numricos. Os ensaios medidos durante o monitoramento automtico geralmente incluem: pH, oxignio dissolvido, potencial redox, temperatura, salinidade, condutividade eltrica, turbidez, e nutrientes como amnia, nitrato e cloreto. Sensores de ficocianina, ficoeritrina e clorofila foram disponibilizados recentemente no mercado. As determinaes de fsforo, nitrognio, toxicidade, demanda bioqumica de oxignio (DBO), demanda qumica de oxignio (DQO) e carbono orgnico total (COT) compem a lista de ensaios que necessitam de equipamentos e estaes mais sofisticadas tecnicamente. A determinao de outros parmetros em laboratrio para complementar o monitoramento possvel mediante a coleta de amostras por amostradores automticos. Esses amostradores so constitudos de: a) interface digital para programao da amostragem; b) dispositivo de coleta de amostras e bico dosador e c) compartimento refrigerado onde as amostras ficam acondicionadas em frascos cuja quantidade bastante varivel, dependendo do modelo do equipamento e da estratgia operacional adotada. A amostragem pode ser programada para ocorrer de forma simples ou composta em cada frasco, alm de se estabelecer o intervalo de tempo entre amostragens. Dessa forma, a amostra colhida em cada frasco estar associada a uma data e hora inicial e final. Aps o preenchimento, os frascos so encaminhados ao laboratrio para as anlises de interesse. Um exemplo de monitoramento automtico o realizado pela Companhia Ambiental do Estado de So Paulo (CETESB) em algumas regies dentro do seu Monitoramento de Qualidade das guas. Os dados so registrados a cada minuto e enviados por telemetria baseada em celular a uma Central de Gerenciamento localizada em sua sede na capital paulista, permitindo o acompanhamento online da qualidade das guas nos corpos monitorados. Essas estaes funcionam como minilaboratrios, onde a aparelhagem analtica para a determinao de pH, temperatura, oxignio dissolvido, condutividade eltrica e turbidez fica abrigada em um container (Fig. 89). A gua amostrada continuamente por uma bomba de recalque instalada submersa em uma estrutura metlica flutuante que acompanha as variaes de nvel dgua e permite que a amostragem ocorra sempre a uma mesma profundidade (Fig. 90).

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(A)

(b)

Figura 89. vista interna do container de uma estao automtica de monitoramento: (a) em primeiro plano o amostrador automtico refrigerado e, ao fundo, o gabinete onde esto instalados o clp e os medidores de pH, oD, temperatura e condutividade eltrica; (B) turbidmetro (Foto: luis altivo carvalho alvim/cetesB).

(b)

(A)

Figura 90. vista da estao automtica de monitoramento rasgo, localizada no rio tiet em Pirapora do Bom Jesus SP: (A) Vista da estrutura metlica flutuante que suporta a bomba de recalque; (B) Container (Foto: Luis Altivo Carvalho Alvim/CETESB).

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As estaes contam, ainda, com lingrafos que registram a variao do nvel dgua e amostradores automticos refrigerados para acionamento por alarme ou pelo operador mediante programao in loco. Os dados transmitidos Central de Gerenciamento so inseridos em banco de dados e validados antes de serem disponibilizados aos pblicos interno e externo. As estaes automticas exigem visitas de manuteno com frequncia pr-determinada, variando de semanal a mensal, durante as quais realizada a verificao de todos os equipamentos (vlvulas, medidores, mdulos de lavagem automtica, amostrador), limpeza das clulas e sensores, calibrao e aferio dos medidores, extrao de dados do CLP, alm da lavagem do conjunto flutuante-bomba e tubulao de recalque para garantir a fidelidade da gua amostrada. Mais recentemente, as sondas multiparmtricas tm sido utilizadas para o monitoramento automtico contnuo ou temporrio de corpos dgua. Essas sondas tm formato cilndrico da ordem de 10 cm de dimetro e 50 cm de altura e exigem para sua instalao somente um suporte do tipo mo-francesa dotado de roldana com corda ou cabo de ao para ajuste da profundidade de imerso da mesma, devidamente apoiado na margem do corpo dgua ou instalado na extremidade de um pier. No caso de reservatrios ou represas, as sondas podem ser instaladas em estruturas flutuantes apoitadas. A alimentao eltrica da sonda garantida por baterias internas suficientes para perodos extensos de medio, dependendo da frequncia de determinao e registro programada. A telemetria dos dados pode ser realizada de forma anloga de uma estao convencional. Esse tipo de equipamento tem experimentado rpida evoluo tecnolgica nos ltimos anos, podendo-se encontrar no mercado sensores para determinao de quase todos os parmetros citados anteriormente. O uso de sondas multiparmetro constitui, dessa forma, alternativa interessante a ser considerada no projeto de redes de monitoramento automtico da qualidade de corpos dgua. Esses equipamentos so tecnicamente confiveis e exigem infra-estrutura mais simples para a sua instalao em comparao s estaes automticas convencionais, compostas de container e sistema de bombeamento, o que implica custos menores tanto na implantao quanto na manuteno ao longo de sua vida til.

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Determinao de Cloro residual - Foto - Carlos Jesus Brando

cAptulO

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10 MEDIO DE VAZO
Cada vez mais se tem reconhecido a importncia da interpretao conjunta dos dados de quantidade (vazo) e qualidade. A informao de vazo de um corpo dgua ou despejo de efluentes, aliada aos dados de qualidade, possibilita o clculo das cargas poluidoras, expressas em quantidade no tempo, geralmente kg/dia ou t/ano. Em se tratando de um processo industrial, a vazo permite determinar o balano de massa no sistema para determinado elemento. Para a medio de vazo necessria equipe tcnica treinada e apta a fazer uso de vrios mtodos e dispositivos, dependendo de uma srie de fatores, tais como: objetivo da medio; porte do curso de gua; tipo, variabilidade e regime do escoamento; acessibilidade ao local; recursos tcnicos, humanos e econmicos e tempo, disponveis. A vistoria prvia do local imprescindvel e indicar o mtodo de medio mais adequado. Nessa etapa, pode ser necessrio que o tcnico de campo estime a vazo por mtodos simples, como o volumtrico ou com uso de flutuadores. Saliente-se que embora a determinao da vazo no seja atividade do coletor de amostras, o mesmo pode contribuir de forma simples e rpida para a sua determinao. Nos locais de amostragem prximos de um posto fluviomtrico dotado de rguas limnimtricas, basta ao coletor realizar a leitura da rgua e registr-la em sua ficha de coleta. Mediante parceria com a entidade responsvel pelo posto, essa leitura pode ser facilmente transformada no valor da vazo do momento da coleta.

medio de vazo

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10.1 Medio de Vazo em Canais Abertos


Rios, crregos e ribeires constituem canais abertos cujas vazes podem ser determinadas por vrios mtodos, podendo-se citar como os principais: volumtrico; com flutuadores; convencional com molinete hidromtrico; acstico; traador; com dispositivos de geometria regular.

A medio de vazo em canais abertos considera parmetros caractersticos da seo de interesse, relacionados: geometria da seo: rea molhada, largura superficial, profundidade, dentre outros; ao escoamento: distribuio de velocidades da massa lquida na seo. Esses parmetros variam com o nvel dgua, cuja leitura realizada com a instalao de rguas limnimtricas na seo (Fig. 91), e podem ser definidos como: rea molhada: rea da seo transversal ocupada por gua e expressa em metros quadrados; Largura superficial: comprimento da linha horizontal da rea molhada, expressa em metros; Profundidade: distncia da superfcie livre de gua ao leito, podendo ser dada em termos da mdia, mxima e em determinada vertical.

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Figura 91. Rguas limnimtricas (Foto: luis altivo carvalho alvim/cetesB).

10.1.1 Mtodo Volumtrico


O mtodo volumtrico consiste em se medir o tempo necessrio para o enchimento de um reservatrio de volume conhecido. Um balde ou tambor pode ser usado no caso de pequenas vazes, mas o conceito pode ser ampliado para o reservatrio de uma usina hidreltrica. Quando aplicvel, o mtodo ser to mais preciso quanto forem o volume do reservatrio e o tempo medido para complet-lo. Em funo do tempo de reao inerente ao ser humano na cronometragem, no devem ser escolhidos recipientes que impliquem tempos de enchimento muito curtos, recomendando-se, no mnimo, 100 segundos. A vazo ser obtida pela diviso do volume coletado pelo tempo medido.

10.1.2 Medio com Flutuadores


A estimativa da velocidade com o uso de flutuadores uma alternativa simples e rpida, mas com preciso limitada. Recomenda-se escolher um trecho de curso dgua retilneo que apresente margens paralelas, declividade do leito constante e profundidade uniforme no sentido longitudinal.

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Esse mtodo aceitvel somente nos seguintes casos: Ocorrncia de cheias com velocidades e profundidades impeditivas ao uso de embarcao para medio com molinete; Escoamentos com velocidades extremamente baixas em que o uso de molinete seja invivel. O flutuador posicionado no meio do rio ou canal, permitindo-se que ele percorra um pequeno trecho antes de se iniciar a cronometragem. Dessa forma, o objeto adquirir, praticamente, a mesma velocidade da gua que o circunda. A velocidade superficial obtida dividindo-se a distncia percorrida pelo tempo medido. A velocidade mdia na seo estimada multiplicando-se a velocidade superficial pelo fator 0,85. Estimando-se a rea da seo transversal de escoamento, a vazo ser calculada como o produto dessa rea pela velocidade mdia de escoamento.

10.1.3 Mtodo Convencional com Molinete Hidromtrico


O mtodo convencional de medio de vazes com molinete hidromtrico bastante utilizado e serve de referncia aos demais mtodos, consistindo em se determinar a rea molhada e a velocidade mdia na seo transversal de interesse, obtendo-se a vazo como o produto dessas duas grandezas. Para que sejam consideradas as variaes da geometria do leito e a distribuio de velocidades da massa lquida, a seo dividida em um nmero significativo de subsees delimitadas por verticais - linhas imaginrias contidas no plano da seo transversal e perpendiculares superfcie livre de gua. A distncia entre verticais depende da largura do rio. O extinto Departamento Nacional de guas e Energia Eltrica DNAEE, hoje Agncia Nacional de Energia Eltrica ANEEL, recomendava as distncias entre verticais relacionadas na tabela 09.

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Tabela 9. Distncia recomendada entre verticais


Largura do rio (m) 3 3-6 6 15 15 30 30 50 50 80 80 150 150 250 250 Fonte: DNAEE, 1967 apud Santos et al, 2001. Distncia entre verticais (m) 0,30 0,50 1,00 2,00 3,00 4,00 6,00 8,00 12,00

importante tomar nota do nvel dgua ao incio e final dos trabalhos, sendo desejvel que o mesmo no se altere excessivamente durante a medio, aceitando-se uma variao de at 6cm. Em cada vertical, realizada a medio da profundidade (p). Calculando-se a profundidade mdia de cada subseo e multiplicando pela sua largura, tem-se a rea. A soma dessas reas constituir a rea molhada da seo. Concomitantemente, so medidas as velocidades com molinete hidromtrico (Fig. 92) em diferentes profundidades de cada vertical, de forma se obter a velocidade mdia. No Brasil, normalmente empregado o mtodo simplificado ou dos dois pontos para a determinao da velocidade mdia: se p < 0,60m, a velocidade medida em um ponto da vertical a 0,6p; se p 0,60m, a velocidade medida em dois pontos a 0,2 e 0,8p.

medio de vazo

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Figura 92. molinete Hidromtrico (Foto: luis altivo carvalho alvim/cetesB).

O molinete hidromtrico constitudo de um eixo ao qual acoplada uma hlice calibrada e um contato eltrico que aciona um contador de rotaes. O nmero de rotaes por segundo dessa hlice correlaciona-se velocidade da massa lquida por meio de uma equao fornecida pelo fabricante do equipamento. importante observar que cada hlice apresenta medidas vlidas para determinada faixa de velocidades. No caso de velocidades muito baixas, deve-se fazer uso de mini e micromolinetes (Figs. 93 e 94).

Figura 93. minimolinete Hidromtrico (Foto: luis altivo carvalho alvim/cetesB).

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Figura 94. micromolinete Hidromtrico (Foto: luis altivo carvalho alvim/cetesB).

O procedimento mais utilizado no Brasil para o clculo da vazo o da Meia Seo, segundo o qual vazes parciais so calculadas para cada subseo com uma vertical ao centro e delimitada pelas semidistncias s verticais adjacentes. Dessa forma, a rea de cada subseo ser dada pelo produto da soma das semi-distncias pela profundidade da vertical. Multiplicando-se essa rea pela velocidade mdia na vertical, tem-se a vazo parcial nessa subseo. A soma dessas vazes parciais resultar na vazo total da seo. A seo de medio deve ser escolhida com critrio, de forma a que os seguintes requisitos sejam atendidos: Deve situar-se em trecho retilneo do rio; Deve ser a mais regular possvel, sem obstculos - blocos de pedra, bancos de areia, dentre outros - no fundo e nas margens; No devem ser observadas zonas de estagnao ou de remanso, bem como de deflexo da corrente. Uma seo com as caractersticas citadas apresenta uma desejvel distribuio paralela de velocidades. No h necessidade de coincidncia com a seo de rguas limnimtricas, desde que inexista contribuio importante entre elas, sejam afluentes naturais ou despejos. A medio de vazo em pequenos cursos dgua onde a profundidade inferior a 1 metro requer poucos equipamentos: molinete, haste graduada de fixao, contador de rotaes e trena ou cabo de ao graduado. Nesse caso, a medio pode ser feita a vau - o operador

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posiciona-se dentro do leito dgua - ou a partir de pequenas pontes. A seo demarcada com cabo de ao graduado ou trena esticada de margem a margem para servir de referncia ao posicionamento do molinete nas verticais. Em se tratando de rios maiores, com profundidades acima de 1m e/ ou largura superior a 10m, a medio normalmente realizada com embarcao a partir da qual o molinete lanado. Um cabo de ao graduado esticado de uma margem a outra e servir de suporte para o deslocamento do barco e para o posicionamento das verticais. Para garantir a verticalidade do molinete, utilizado abaixo do mesmo um lastro com forma hidrodinmica e com peso proporcional velocidade da gua, podendo variar de 10 a 150kg. O conjunto molinete-lastro suportado por cabo de ao especial - possui no centro um fio que envia os impulsos correspondentes s rotaes da hlice do molinete - preso a um guincho hidromtrico (Fig. 95). Esse guincho firmemente fixado embarcao e constitudo de tambor dotado de manivela com engrenagem e trava de segurana.

Figura 95. Guincho Hidromtrico (Foto: luis altivo carvalho alvim/cetesB).

A escolha da embarcao adequada um item importante a ser considerado devido sua relao direta com a segurana do pessoal e de todo o equipamento. A anlise deve contemplar a estabilidade, borda livre e potncia do motor. Entretanto, quanto maior a embarcao, maiores sero o espao necessrio para manobra e as dificuldades para transporte por via terrestre e colocao na gua.

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10.1.4 Mtodo Acstico


O mtodo acstico utiliza os equipamentos denominados perfiladores acsticos de corrente por efeito doppler ou, em ingls, acoustic doppler current profiler, mais conhecidos pela sigla ADCP (Fig. 96). A aplicao desse mtodo teve incio nos EUA na dcada de 1980 e, j na dcada de 1990, chegou ao Brasil, onde vem se difundindo nas instituies que desenvolvem trabalhos de hidrometria.

Figura 96. Perfilador acstico de corrente por efeito doppler ou adcP (Foto: luis altivo carvalho alvim/cetesB).

Esse tipo de equipamento emite pulsos de ultrasom que so refletidos pelas partculas slidas em suspenso na massa lquida e pelo fundo. Na prtica, o aparelho afixado na lateral da embarcao e conectado a um notebook onde instalado o software fornecido pelo fabricante. Ento, so realizadas, no mnimo, duas travessias da seo do rio, quando so registrados, simultaneamente: perfil de fundo ou batimetria; perfis e direes de velocidade e a trajetria descrita pelo barco. O prprio software encarrega-se de registrar e processar as informaes colhidas e calcular a vazo total na seo.

medio de vazo

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O ADCP um equipamento que apresenta inmeras vantagens em relao ao molinete, dentre as quais: Medio de vazo em grandes profundidades, podendo chegar a mais de 200m; Uso em oceanografia, onde a velocidade e direo das correntes variam consideravelmente; Maior preciso na determinao das velocidades e profundidades; Medies mais rpidas, com menos equipamentos embarcados, dispensando-se o uso de cabo de ao na seo e lastro; Obteno da vazo imediatamente ao final das travessias. Por outro lado, podem ser apontadas como desvantagens ou limitaes do ADCP: Necessidade de capacitao tcnica dos operadores em informtica para a operao do equipamento em campo e interpretao dos dados fornecidos pelo software em tempo real; Custo relativamente elevado de aquisio; Inadequao para medio de vazo em guas cristalinas ou com turbidez muito baixa; Como a medio realizada com o aparelho parcialmente submerso e tem incio e fim a certa distncia das margens, na camada superficial e nas duas extremidades da seo a vazo no medida, sendo apenas estimadas as velocidades; Como a medio realizada com o aparelho parcialmente submerso, corpos dgua muito rasos no admitem o mtodo. Estudos comparativos entre dados de vazo obtidos pelos mtodos convencional e acstico tm demonstrado uma correlao bastante elevada, sem tendncia de um mtodo apresentar resultados sistematicamente superiores ou inferiores a outro.

10.1.5 Mtodo do Traador


Denomina-se mtodo do traador injeo, em determinado ponto do rio, de uma soluo de produto qumico de concentrao conhecida e relativamente elevada. A medio da concentrao na gua ser realizada com um salinmetro ou condutivmetro.

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De forma anloga, pode-se utilizar como traador material fluorescente (normalmente fluorescena ou rodamina) ou radioistopo em soluo. Para a determinao da fluorescncia, utiliza-se um equipamento denominado fluormetro e no caso de se optar pelo uso de radioistopos em soluo, a atividade radioativa ser medida diretamente em campo com um detector cintilador. (a) Injeo contnua O procedimento de injeo contnua de uma vazo constante baseiase no princpio de que a diluio sofrida pela soluo injetada ser diretamente proporcional vazo do corpo dgua. Dessa forma, a uma distncia a jusante suficiente para que a mistura soluo-gua do rio esteja completa, ser medida a concentrao do traador adicionado na gua. A vazo do corpo dgua ser dada por: onde: Q = vazo do rio (m3/s) q = vazo injetada de soluo (L/s) Cs = concentrao da soluo (g/L) Cr = concentrao na gua do rio (mg/L) A escolha do traador deve levar em considerao diversos aspectos, dentre os quais: custo; alta solubilidade em gua; baixa corrosividade e toxicidade; ausncia na gua do rio; decaimento da atividade ao longo do tempo do estudo, no caso de material radioativo.

(b) Integrao O procedimento de integrao ou injeo instantnea ocorre quando um volume conhecido de soluo despejado em determinado ponto do rio e, numa seo a jusante onde a mistura completa j tenha ocorrido, amostras so tomadas durante todo o tempo de passagem da soluo.

medio de vazo

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A vazo ser dada pela equao seguinte, onde a concentrao do traador das amostras integrada no tempo: onde: Q = vazo do rio (m3/s) V = volume de soluo despejado (L) Cs = concentrao da soluo (g/L) Cr = concentrao varivel do traador na gua do rio (mg/L) T = tempo de passagem da soluo pela seo de amostragem (s). Nessa variante do mtodo do traador, importante que nenhuma parcela da soluo despejada seja retida em pontos de remanso ou de gua parada.

10.1.6 Medio com Dispositivos de Geometria Regular


Os dispositivos de geometria regular, como as calhas Parshall e os vertedores, so utilizados para medio de vazo devido ao fato de as relaes cota-vazo serem conhecidas. Uma vez que as dimenses desses dispositivos so padronizadas, elas podem ser facilmente reproduzidas em campo, mantendo-se as equaes determinadas em laboratrio. Esses dispositivos aplicam-se medio de pequenas vazes, no mximo 5m3/s. (a) Calha Parshall A calha Parshall (Fig. 97) um exemplo de canal de controle utilizado para medies contnuas de descarga e no requer caixa de tranquilizao a montante. Suas principais desvantagens so a maior complexidade construtiva e o custo elevado. Por outro lado, apresenta as seguintes vantagens em relao aos vertedores: no altera significativamente as condies naturais do corpo dgua, como a circulao de sedimentos, nutrientes e vida aqutica; uma nica estrutura permite medir uma ampla faixa de vazes.

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(A)

(b)

Figura 97. calha Parshall: (a) vista superior em corte de uma calha Parshall; (B) vista lateral em corte longitudinal de uma calha Parshall (Fonte: cetesB, 1988).

A vazo dada por: Q = 2,2 . W . Ha 3/2 onde:

Q = vazo (m3/s) W = largura da garganta (m) Ha = carga na seo convergente (m) O coeficiente de descarga adimensional 2,2 vlido para 0,30 < W < 2,45. Os smbolos utilizados pelas disposies construtivas so interrelacionados e esto contidos nos manuais de Hidrulica. A largura da garganta o tamanho nominal do Parshall e as demais dimenses dependem desse valor. A equao mostrada somente pode ser aplicada se a calha apresentar a veia de jusante - medida por Hb com escoamento livre. (b) Vertedores de soleira delgada Um vertedor de soleira delgada consiste em uma placa fina que intercepta transversalmente o fluxo dgua, provocando uma elevao a montante e vertendo para jusante. Os vertedores de parede delgada

medio de vazo

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(Fig. 98) distinguem-se dos de soleira espessa pela largura da soleira. Se for possvel observar paralelismo dos filetes na soleira, o vertedor dito de soleira espessa.
(A) (b)

Figura 98. vertedores de parede delgada: (a) soleira delgada; (B) soleira espessa (Fonte: cetesB, 1988).

O formato do recorte na placa por onde a gua escoa - triangular, retangular, trapezoidal e outros - determina o tipo de vertedor e a formulao estabelecida para o clculo da vazo, conforme mostrado na Figura 99.
(A)

Q = 1,84 . L . H3/2 onde: Q = vazo (m3/s) L = largura da crista (m) H = carga (m) Q = 1,84 . L . H3/2 onde os smbolos tm significado idntico ao acima

(b)

(C)

Q = 1,4 . H5/2 se o angulo for de 90; os demais smbolos idnticos aos acima

Figura 99. vertedores de parede delgada: (a) vertedouro retangular e clculo da vazo; (B) vertedouro trapezoidal e clculo da vazo; (c) vetedouro triangular ou em v e clculo da vazo (Fonte: cetesB, 1988).

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Os coeficientes de vazo (1,84; 1,86; 1,4) variam em funo do vertedor. Os valores de L e X so dados em funo de Hmax , que a altura mxima da lmina dgua em metros, descontado o bordo livre, isto : L pelo menos 3 Hmax , X pelo menos 2 Hmax. Como forma de tornar o escoamento a montante do vertedor o mais regular possvel, pode-se instalar uma caixa de tranquilizao (Fig. 100 e 101). As dimenses da caixa podem variar para se adaptar s condies reinantes em cada local, desde que resultem em escoamento tranquilo. Adicionalmente, podem ser instaladas chicanas antes da lmina do vertedor.

Figura 100. caixa de tranquilizao com vertedor interno (Fonte: cetesB, 1988).

medio de vazo

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Figura 101. caixa de tranquilizao corte longitudinal (Fonte: cetesB, 1988).

10.2 Medio de Vazo com Dispositivos Instalados em Tubos


A seguir so apresentados os dispositivos medidores de vazo instalados em tubos, com seus desenhos esquemticos e formulao bsica. So eles: Medidor Venturi (Fig. 102), bocais e orifcios (Fig. 103), tubo de Pitot (Fig. 104), medidor magntico (Fig. 105) e rotmetro (Fig. 106).

10.2.1 Medidor Venturi

Figura 102. medidor venturi (Fonte: cetesB,1988).

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onde:

Q = vazo (m3/s) A = rea da garganta (m2) H = carga diferencial de presso (m)

d1 = dimetro do tubo (m) d2 = dimetro da garganta (m) g = acelerao da gravidade (9,81m/s2) Obs.: O coeficiente 0,98 j considera o fato de haver mercrio no manmetro.

10.2.2 Medio com bocais e Orifcios

Figura 103. Bocais e orifcios para medio de vazo (Fonte: cetesB, 1988).

medio de vazo

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onde: A = rea da seo (m2) Q = vazo (m3/s) C = coeficiente de vazo adimensional para cada tipo de orifcio ou bocal K = 4,42 H = H1 H2 , carga hidrulica (mca) Os bocais distinguem-se dos orifcios e dos tubos a partir da relao entre comprimento e dimetro (d). Esta relao tambm influi nos coeficientes de vazo e na velocidade do escoamento, se o orifcio estiver instalado em uma canalizao.

10.2.3 Tubo de Pitot

Figura 104. tubo de Pitot (Fonte: cetesB, 1988).

Q = S . V, onde: Q = vazo (m3/s) S = rea da seo (m2) V = velocidade mdia na seo (m/s) onde: g = acelerao da gravidade (9,81m/s2) H = P2 P1 (mca)

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A velocidade mdia na seo obtida variando-se a posio do bocal. Genericamente, a velocidade mdia oscila entre 0,5 e 0,8 da velocidade no eixo.

10.2.4 Medidor Magntico

Figura 105. medidor magntico (Fonte: cetesB, 1988).

Q = vazo Vv = voltagem induzida e proporcional a Vm Vm = velocidade mdia VT = a voltagem Vv amplificada levada a um compensador, a corrente alternada transformada em contnua e levada ao multiplicador e conduzida ao acumulador cuja leitura indica VT. B = caracterstica da seo transversal do conduto (dimetro) A formulao equivalente a Q = Vm.F, que pode ser obtida por leitura direta do equipamento calibrado.

Q = Vv . VT . B, onde:

medio de vazo

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O medidor magntico pode ser instalado externamente a uma canalizao, embora os eletrodos entrem em contato com o lquido.

10.2.5 Rotmetro

Figura 106. rotmetro (Fonte: cetesB, 1988).

onde: Q = vazo K = coeficiente de descarga (fluidos tericos e reais) = relao entre dimetro do tubo medidor e do flutuador Df = dimetro do flutuador F = fora que atua no flutuador, dependendo da diferena de densidade entre flutuador e lquido = densidade do lquido

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O rotmetro utilizado em lquidos claros e limpos. um equipamento preciso e de baixo custo, sendao a vazo obtida por leitura direta no tubomedidor, j graduado de forma conveniente.

10.3 Medio de Vazo em Tubos com Descarga Livre


A vazo em tubos com descarga livre pode ser obtida a partir do mtodo das coordenadas geomtricas do jato (Figs. 107 e 108) e mtodo Califrnia (Figs. 109, 110 e 111).

10.3.1 Mtodo das Coordenadas Geomtricas do Jato

Figura 107. mtodo dascoordenadas Geomtricas do Jato: (a)vista em corte longitudinal do tubo; (B) detalhe do corte frontal do tubo (Fonte: cetesB, 1988).

onde: Q = vazo (m3/s) A = rea da seo molhada (m2) X = distncia na horizontal (m) Y = distncia na vertical (m)

medio de vazo

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Y = c + b (m) c = profundidade na canalizao (m) b = distncia do fundo do conduto at a superfcie do lquido que escoa (m) O coeficiente 2,21 obtido a partir do equacionamento hidrulico, considerando a veia fluda em escoamento sob ao da gravidade. Para conduto ou canalizao inclinada (Fig. 108), o dispositivo deve ser ajustado inclinao do conduto e calibrado, podendo ento ser acoplado extremidade do conduto. Recomendase sua utilizao para ngulos de inclinao pequenos.

Figura 108. aplicao do mtodo das coordenadas Geomtricas do Jato a canalizaes inclinadas (Fonte: cetesB, 1988).

10.3.2 Mtodo Califrnia


O Mtodo Califrnia indicado para condutos horizontais (Fig. 109). No caso de condutos inclinados, estes devem ser ligados a um comprimento de tubo horizontal por meio de uma mangueira, como ilustrado na Figura 110.

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(A)

(b)

Figura 109. mtodo califrnia: (a) detalhe do corte frontal do tubo; (B) vista em corte longitudinal do tubo (Fonte: cetesB, 1988).

Q = K . h1,88, onde: Q = vazo (L/s) K = coeficiente de descarga que depende das caractersticas do conduto (m) K = 0,057 + 0,01522 d (cm) d = dimetro do conduto (cm) h = altura da lmina dgua (cm) h = d a (m) a = altura do conduto no tomada pelo lquido (cm)

Figura 110. mtodo califrnia para condutos inclinados (Fonte: cetesB, 1988).

Existe tambm o Mtodo Califrnia Modificado, que uma adaptao aos tubos cheios horizontais ou inclinados (Fig. 111). O ngulo pode variar, mas o valor de Y fixo e igual a 0,25m. O valor 12,5 obtido

medio de vazo

279

algebricamente a partir do equacionamento, considerando escoamento sob ao da gravidade.


(A)

(b)

Figura 111. Mtodo Califrnia Modicado: (A) Tubo horizontal; (B) Tubo inclinado (Fonte: cetesB, 1988).

Q = 12,5 . X . D2, onde: Q = vazo (L/h) X = L = comprimento na horizontal (cm) D = dimetro interno do tubo (cm) Y = distncia na vertical (m)

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288

Guia NacioNal De coleta e Preservao De amostras

anexos

anexo 1 - PRoCeDIMenToS PaRa o aRMaZenaMenTo e PReSeRVao De aMoSTRaS PoR enSaIo A seguir, encontram-se listadas as recomendaes e orientaes de como realizar o acondicionamento, preservao e armazenamento das amostras por ensaio e demais cuidados que devem ser tomados por ocasio da coleta. Informaes mais detalhadas sobre procedimentos especficos podem ser obtidas nos Captulos 6 a 10. Nas tabelas a seguir apresentamos: a classe da amostra (A - amostra de gua tratada; B - amostra de gua bruta; C - amostra de gua residuria; D - amostras de solo, sedimento, lodo, material slido de dragagem, resduo slido e semi-slido em geral; E - amostra de material biolgico); o tipo do recipiente que deve ser utilizado para conter a amostra coletada; a quantidade de amostra; o volume ou massa suficiente para a realizao do ensaio; a preservao e os cuidados necessrios para garantir a estabilidade dos constituintes da amostra; o armazenamento; o procedimento que deve ser seguido para garantir a validade at o momento do ensaio; o prazo de validade, e o tempo mximo de estocagem permitido para a realizao do ensaio a partir do momento da coleta. Os ensaios que utilizam o mesmo tipo de preservao podem ser encaminhados para o laboratrio de anlise em um nico recipiente e esto agrupados na mesma linha nas tabelas a seguir. Por exemplo: cloreto, fluoreto, nitrato, nitrito e sulfato.

bibliografia

289

importante destacar a necessidade de manter-se atualizado sobre os procedimentos para coleta dos diferentes ensaios, consultando periodicamente a bibliografia recente e os responsveis tcnicos dos laboratrios. Informaes adicionais sobre armazenamento e preservao de amostras podem ser obtidas no Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater (APHA), e em publicaes da U. S. Environmental Protection Agency(USEPA), entre outros. Os prazos de validade estabelecidos para as anlises fsico-qumicas nas tabelas a seguir (exceto para sulfeto) so os prazos mais restritivos citados nas bibliografias acima para garantir a integridade da amostra.

290

Guia NacioNal De coleta e Preservao De amostras

anexos

Tabela a1. armazenamento e preservao de amostras para ensaios fsico-qumicos inorgnicos - gua e Sedimento
Recipiente (1) Preservao armazenamento Quantidade de amostra Prazo de Validade (2)

ensaio

Classe da amostra

acidez P, VB 250mL

A, B

Resfriamento (em gelo) Resfriamento (em gelo) Refrigerao a 4C 2C Manter ao abrigo da luz Refrigerao a 4C 2C

Refrigerao a 4C 2C

24h

alcalinidade P, V 250mL

A, B

24h

Cianeto total e Cianeto livre P, V 250mL 250g


(aproximadamente)

A, B, C

NaOH 10 M at pH>12 Resfriamento (em gelo) Manter ao abrigo da luz Resfriamento (em gelo)

24h

Cianeto

PP (500mL)

Refrigerao a 4C 2C

7 dias

Cloreto, Fluoreto, nitrato, nitrito, Sulfato P 250mL Resfriamento (em gelo) -

A, B, C

Refrigerao a 4C 2C

Cloreto, Fluoreto e Sulfato - 28 dias Nitrato e Nitrito 48h Ensaio imediato

Cloro residual total e livre (em campo) P, V 250mL

Condutividade

A, B, C

Resfriamento (em gelo) -

Refrigerao a 4C 2C -

28 dias Ensaio imediato


Continua...

Condutividade (em campo)

A, B, C

291

292

Tabela a1. armazenamento e preservao de amostras para ensaios fsico-qumicos inorgnicos - gua e Sedimento (continuao)
Recipiente (1) Preservao Resfriamento (em gelo) Resfriamento (em gelo) No requerida Adicionar HNO3 1+1 at pH<2 P LE, V LE Resfriamento (em gelo) 250mL Refrigerao a 4C 2C Refrigerao a 4C 2C Refrigerao a 4C 2C 48h 24h Ensaio imediato 6 meses armazenamento P, V P LE, V LE 700g
(aproximadamente)

ensaio 250mL 250mL -

Classe da amostra

Quantidade de amostra

Prazo de Validade (2)

Cor, Turbidez

A, B

Cromo hexavalente

A, B, C

eh (em campo) PP (700mL)

B, C, D

Granulometria

Temperatura ambiente Manter ao abrigo da luz

Metais (exceto cromo hexavalente), Semimetais e Dureza 250g


(aproximadamente)

A, B, C

Metais, Arsnio, Selnio, Antimnio e Dureza - 6 meses Boro e Mercrio - 28 dias Refrigerao a 4C 2C Refrigerao a 4oC 2C 6 meses

Metais e semimetais PP LE (500 mL) P LE, V LE 100mL

Resfriamento (em gelo) (3) Resfriamento (em gelo)

Metais dissolvidos (solveis) P, V 250mL

A, B, C

6 meses

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ortofosfato

A, B, C

(4) Resfriamento (em gelo)

Refrigerao a 4C 2C

48 h

anexos

oxignio dissolvido (Mtodo de Winkler) VDBO 300mL 1mL de sulfato manganoso + 1mL de azida sdica Sem resfriamento No requerido 8h

A, B, C

oxignio dissolvido (em campo) -

A, B, C

Ensaio imediato

H SO 1+1 at pH < 2
2 4

nitrognio amoniacal, nitrognio orgnico, nitrognio Kjeldahl, Fsforo total P, V Resfriamento (em gelo) 250mL Refrigerao a 4C 2C PP
(500mL) (aproximadamente)

A, B, C

Nitrognio - 7 dias; Fsforo total 28 dias

Fsforo total, nitrognio total 250g Resfriamento (em gelo) Resfriamento (em gelo) Resfriamento (em gelo) VDBO VDBO 300mL 300mL

Refrigerao a 4C 2C Refrigerao a 4C 2C Refrigerao a 4C 2C -

6 meses 24h Ensaio imediato 6 meses Ensaio imediato


Continua...

odor

A, B

pH (em campo)

A, B, C, D

Salinidade

A, B, C

Salinidade (em campo)

293

294

Tabela a1. armazenamento e preservao de amostras para ensaios fsico-qumicos inorgnicos - gua e Sedimento (continuao)
Recipiente (1) Preservao armazenamento P, V 500mL Resfriamento (em gelo) Refrigerao a 4C 2C 7 dias Quantidade de amostra Prazo de Validade (2)

ensaio

Classe da amostra

Slidos totais, Slidos fixos, Slidos volteis

A, B, C

Slidos totais, Slidos fixos, Slidos volteis, Umidade PP (500mL) Resfriamento (em gelo) Refrigerao a 4C 2C 250g (aproximadamente) 1,5L 300mL Resfriamento (em gelo) (5) Resfriamento (em gelo) Refrigerao a 4C 2C Refrigerao a 4C 2C P, V VDBO

7 dias

Slidos sedimentveis

A, B, C

24h 7 dias

Sulfeto

A, B, C

Turbidez (em campo) -

A, B, C

Ensaio imediato

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Legenda: (1) Recipientes: V = Frasco de vidro neutro; VDBO = Frasco do tipo DBO (300mL), com tampa esmerilhada; LE = Limpeza especial (ver Captulo 3); P = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte); PP = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte) do tipo pote; (2) A partir do momento da coleta das amostras; (3) Filtrar em campo em membrana 0,45mm e adicionar HNO3 (1+1) at pH<2; (4) Filtrar em campo em membrana 0,45mm (5) Adicionar 4 gotas de soluo 2N de acetato de zinco/100 mL da amostra, aguardar 15 minutos e adicionar NaOH at pH entre 9 e 10.

anexos

Tabela a2. armazenamento e preservao de amostras para ensaios de compostos qumicos orgnicos gua e Sedimento
Recipiente (1) Preservao H2SO4 1+1 at pH2 (gua doce) Resfriamento (em gelo) VDBO HCl 1+1 at pH2 (gua salobra e marinha) (somente Classe B, C) Resfriamento (em gelo) Resfriamento (em gelo) 300mL Refrigerao a 4C 2C 7 dias 28 dias (6) armazenamento Quantidade de amostra Prazo de Validade (2)

ensaio

Classe da amostra

Carbono orgnico total (CoT) / Carbono orgnico dissolvido (CoD)

A, B, C

CoT

PVA (3)

100g (aproximadamente)

Refrigerao a 4C 2C

7 dias 28 dias (6)

Compostos orgnicos volteis (CoV) aromticos (BTexe) V Vial LE (4) 40mL V Vial LE (4) 40mL 100g (aproximadamente) 40mL PVA (3) (4) V Vial LE (4)

Na2S2O3 (9) Resfriamento (em gelo) Resfriamento (em gelo) Resfriamento (em gelo) Na2S2O3(9) Resfriamento (em gelo)

Refrigerao a 4C 2C

14 dias

CoV aromticos (BTexe)

B, C

Refrigerao a 4C 2C Refrigerao a 4C 2C Refrigerao a 4C 2C

14 dias 14 dias

CoV aromticos (BTexe)

CoV halogenados (SH)

14 dias

Continua...

295

296

Tabela a2. armazenamento e preservao de amostras para ensaios de compostos qumicos orgnicos gua e Sedimento (continuao)
Recipiente (1) Preservao armazenamento V Vial LE (4) PVA (3) (100mL) (4) 100g (aproximadamente) 40mL Resfriamento (em gelo) Resfriamento (em gelo) Resfriamento (em gelo) V Vial LE (4) V Vial LE (4) 40mL Refrigerao a 4C 2C Refrigerao a 4C 2C Refrigerao a 4C 2C 40mL Resfriamento (em gelo) Refrigerao a 4C 2C Quantidade de amostra Prazo de Validade (2) 14 dias

ensaio

Classe da amostra

CoV halogenados (SH)

B, C

CoV halogenados (SH)

14 dias

CoV varredura

14 dias

CoV varredura

B, C

14 dias

CoV varredura

PVA (3) (100mL) (4) 100g (aproximadamente) P, V 2 frascos de 1L

Resfriamento (em gelo)

Refrigerao a 4C 2C

14 dias

DBo (demanda bioqumica de oxignio) P, V 250mL

A, B, C

Resfriamento (em gelo)

Refrigerao a 4C 2C

24h 48h (6)

DQo (demanda qumica de oxignio)

A, B, C

H2SO4 1+1 at pH2 Resfriamento (em gelo)

Refrigerao a 4C 2C

7 dias 28 dias (6)

Guia NacioNal De coleta e Preservao De amostras

Fenis por cromatografia (Pentaclorofenol / 2,4,6-Triclorofenol) VA LE (5)

1L

Na2S2O3 (9) Resfriamento (em gelo)

Refrigerao a 4C 2C

7 dias

anexos

Fenis por cromatografia (Pentaclorofenol / 2,4,6-Triclorofenol) VA LE (5) 1L Resfriamento (em gelo) 7 dias Refrigerao a 4C 2C

B, C

Fenis por cromatografia (Pentaclorofenol / 2,4,6-Triclorofenol) PVA (5) (100mL) 100g (aproximadamente) Resfriamento (em gelo) Refrigerao a 4C 2C VA BE 1L H2SO4 1+1 at pH2 Resfriamento (em gelo) Resfriamento (em gelo) Na2S2O3 (9) Resfriamento (em gelo) Refrigerao a 4C 2C Refrigerao a 4C 2C Refrigerao a 4C 2C

14 dias

Fenis totais (ndice de fenis) PVA 100g (aproximadamente) 1L

A, B, C

(7) 28 dias (6) 28 dias

Fenis totais (ndice de fenis) VA LE (5)

Herbicidas fenxicidos clorados (2,4-D)

7 dias

Herbicidas fenxicidos clorados (2,4-D; 2,4,5-T; 2,4,5-TP) VA LE (5) 1L VA BL (3) 1L

B, C

Resfriamento (em gelo)

Refrigerao a 4C 2C

7 dias

leos e Graxas totais

A, B, C

HCl 1+1 at pH2 Resfriamento (em gelo) Resfriamento (em gelo)

Refrigerao a 4C 2C

28 dias

leos e Graxas totais PVA

100g (aproximadamente)

Refrigerao a 4C 2C

28 dias

Continua...

297

298

Tabela a2. armazenamento e preservao de amostras para ensaios de compostos qumicos orgnicos gua e Sedimento (continuao)
Recipiente (1) Preservao armazenamento Quantidade de amostra Prazo de Validade (2)

ensaio

Classe da amostra

HaP (Hidrocarbonetos Policclicos aromticos) / Benzo(a)Pireno VA LE (5) 1L Na2S2O3 (9) Resfriamento (em gelo) Refrigerao a 4C 2C VA LE (5) PVA (5) 100 g (aproximadamente) Resfriamento (em gelo) 1L Resfriamento (em gelo) Refrigerao a 4C 2C Refrigerao a 4C 2C

7 dias

HaP / Benzo(a) Pireno

B, C

7 dias 14 dias

HaP / Benzo(a) Pireno

Pesticidas organoclorados / PCB (Bifenilas policloradas) VA LE (5) 1L Na2S2O3 (9) Resfriamento (em gelo) VA LE (5) 1L Resfriamento (em gelo)

Refrigerao a 4C 2C

7 dias

Pesticidas organoclorados / PCB PVA (5) 100g (aproximadamente)

B, C

Refrigerao a 4C 2C

7 dias

Pesticidas organoclorados / PCB

Resfriamento (em gelo)

Refrigerao a 4C 2C

14 dias

Guia NacioNal De coleta e Preservao De amostras

Pesticidas organofosforados VA LE (5)

1L

Na2S2O3 (9) Resfriamento (em gelo)

Refrigerao a 4C 2C

7 dias

anexos

Pesticidas organofosforados VA LE (5) 7 dias 48h P 250mL Resfriamento (em gelo) Resfriamento (em gelo) Refrigerao a 4C 2C Refrigerao a 4C 2C 1L Resfriamento (em gelo) Refrigerao a 4C 2C

B, C

Surfactantes aninicos VA BE 3 frascos de 1L

A, B

THMFP (potencial de formao de THM) V Vial LE (4) V Vial LE (4) 40mL (8) Resfriamento (em gelo) 40mL (8) Na2S2O3 (9) Resfriamento (em gelo) Refrigerao a 4C 2C Refrigerao a 4C 2C

(7)

Trihalometanos (THM)

14 dias

Trihalometanos (THM)

14 dias

Legenda: (1) Recipientes: VDBo = Frasco do tipo DBO (300mL), com tampa esmerilhada; Be = Boca estreita; BL = Boca larga; Le = Limpeza especial (ver Captulo 3); P = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte); PVa = Frasco de vidro mbar do tipo pote; THM = Lavagem especial para uso em anlise de THMFP (potencial de formao de THM); Va = Frasco de vidro de cor mbar; V Vial = Frasco de vidro de cor mbar, de borossilicato, com capacidade de 40mL (tipo Vial), com tampa rosquevel com septo de teflon; (2) A partir do momento da coleta das amostras; (3) Com tampa de rosca com septo de teflon; (4) Os frascos devem estar totalmente preenchidos com a amostra, de maneira a evitar a presena de ar; (5) Com tampa de rosca com septo de teflon ou folha de alumnio entre o frasco e a tampa; (6) Prazo mximo regulatrio segundo o Standard Methods, 21 ed., 2005; (7) Analisar o mais breve possvel; (8) Coletar 2 (dois) frascos; (9) 50mg de Na2S2O3 para 1L de amostra e 3mg em 60mL para anlises deTHMFP.

299

300

Tabela a3. armazenamento e preservao de amostras para ensaios de cianobactrias e cianotoxina


Recipiente (1) Preservao (2) armazenamento Quantidade de amostra Prazo de Validade (3)

ensaio

Classe da amostra

Cianobactrias (qualitativa) VA 1L Formol/lugol ou Transeau Armazenar em temperatura ambiente

1 ms a 1 ano dependendo da preservao. 1 ms a 1 ano dependendo da preservao. 24h5

Cianobactrias (quantitativa) VA 1L Lugol (ideal) Formol ou Transeau

Armazenar em temperatura ambiente, protegido da luz Refrigerar (4C a 8 C) e manter protegido da luz

Microcistinas (eLISa)(4) VA 1L Resfriamento (em gelo)

A, B

Cianotoxinas (LC-MS/MS)(6) VA (boca larga) 1L Resfriamento (em gelo)

A, B

Refrigerar (4C a 8 C) e manter protegido da luz

48h

Guia NacioNal De coleta e Preservao De amostras

Legenda: (1) Recipiente: Va = Frasco de vidro de cor mbar; (2) A preservao qumica necessria adicionada no recipiente no momento de sua preparao (ver captulo 3); (3) A partir do momento da coleta das amostras; (4) Enzyme linked immuno assay; (5) A amostra pode ser mantida a -20oC por tempo no definido na literatura, nesse caso somente as microcistinas totais sero determinadas, devido a ruptura das clulas; (6) Cromatografia lquida de alta eficincia acoplada a espectrometria de massas.

anexos

Tabela a4. armazenamento e preservao de amostras para ensaios ecotoxicolgicos com organismos aquticos gua e Sedimento
Recipiente (1) Preservao gua Doce P Resfriamento (em gelo) Resfriamento (em gelo) Resfriamento (em gelo) Refrigerao < 10C, sem congelamento Congelamento a < -10C at 48h aps a coleta Resfriamento (em gelo) Resfriamento (em gelo) P 15L (3) Refrigerao < 10C, sem congelamento Congelamento a < -10C at 48h aps a coleta Resfriamento (em gelo) Resfriamento (em gelo) P 2L (3) Refrigerao < 10C, sem congelamento Congelamento a < -10C at 48h aps a coleta Resfriamento (em gelo) Refrigerao < 10C, sem congelamento P P P P 30L (3) 5L 10L (3) 2L (3) 1L (3) Resfriamento (em gelo) Refrigerao < 10C, sem congelamento Congelamento a < -10C at 48h aps a coleta 12h 48h 60 dias 12h 48h 60 dias 12h 48h 60 dias 12h 48h 60 dias 60 dias
Continua...

Tipo de ensaio/ organismo-teste armazenamento

Classe da amostra

Quantidade de amostra

Prazo de validade (2)

agudo (esttico)/ Daphnia similis

agudo (esttico)/ Danio rerio ou Pimephales promelas

agudo (semi-esttico)/ Danio rerio ou Pimephales promelas

1L (3)

Crnico (semi-esttico)/ Ceriodaphnia dbia

10 dias (semi-esttico)/ Hyalella azteca PP (700mL)

2Kg (3)

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Tabela a4. armazenamento e preservao de amostras para ensaios ecotoxicolgicos com organismos aquticos gua e Sedimento

(continuao) Recipiente (1) Preservao armazenamento gua Marinha P Resfriamento (em gelo) P P Resfriamento (em gelo) P PP (700mL) 2Kg (3) Resfriamento (em gelo) Resfriamento (em gelo) 2L (3) 1L (3) 2L (3) 1L (3) Resfriamento (em gelo) Refrigerao < 10C, sem congelamento Congelamento a < -10C at 48h aps a coleta Resfriamento (em gelo) Refrigerao < 10C, sem congelamento Congelamento a < -10C at 48h aps a coleta Refrigerao < 10C, sem congelamento Quantidade de amostra

Tipo de ensaio/ organismo-teste

Classe da amostra

Prazo de validade (2)

12h 48h 60 dias 12h 48h 60 dias 60 dias

agudo (esttico) / Mysidopsis juniae

Crnico (esttico)/ Lytechinus variegatus

Crnico (esttico)/ Lytechinus variegatus PP (700mL) 2Kg (3)

10 dias (esttico)/ Leptocheirus plumulosus

Refrigerao < 10C, sem congelamento

60 dias

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Legenda: (1) Recipientes: P = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte); PP = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte), do tipo pote; (2) A partir do momento da coleta das amostras; (3) Os frascos devem ser totalmente preenchidos de maneira a evitar a presena de ar.

anexos

Tabela a5. armazenamento e preservao de amostras para testes de toxicidade aguda com bactrias luminescentes Vibrio fischeri (Microtox) gua e Sedimento
Recipiente (1) Preservao armazenamento Quantidade de amostra Prazo de Validade (2)

ensaio / organismo

Classe da amostra

Toxicidade aguda / Vibrio fischeri P PIP (3) 30mL

Refrigerao de 2C a 5C Congelamento a -15C a -25C

48h 60 dias

A, B, C

Resfriamento (em gelo)

Toxicidade aguda / Vibrio fischeri 500g (aproximadamente) Resfriamento (em gelo)

PP (500mL) (3)

Refrigerao de 2C a 5C

60 dias

Legenda: (1) Recipientes: P PIP = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte), com sistema de fechamento com trava e lacre; PP = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte) do tipo pote; (2) A partir do momento da coleta das amostras; (3) Os frascos devem estar totalmente preenchidos com a amostra, de maneira a evitar a presena de ar.

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Tabela a6. armazenamento e preservao de amostras para ensaios de mutagenicidade (Salmonella/microssoma) gua e Sedimento
Recipiente (1) Preservao armazenamento VA LE (4L) (3) Blue Rayon (4) Refrigerao entre 2C e 8C Resfriamento (em gelo) Refrigerao entre 2C e 8C Resfriamento (em gelo) Refrigerao entre 2C e 8C Quantidade de amostra Prazo de Validade (2) 14 dias 7 dias

ensaio

Classe da amostra

Mutagenicidade

A, B, C

Mutagenicidade

A, B

Mutagenicidade

PP (500mL)

>100g (aproximadamente)

28 dias

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Legenda: (1) Recipientes: Le = Limpeza especial (ver Captulo 3); PP = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte) do tipo pote; Va = Frasco de vidro de cor mbar; (2) A partir do momento da coleta das amostras; (3) 4L a 20L para gua bruta, 50L a 100L para gua tratada e 1L a 5L para gua residuria (efluentes lquidos/ efluentes domsticos ou mistura de ambos); (4) Amostragem in situ.

anexos

Tabela a7. armazenamento e preservao de amostras para ensaios microbiolgicos - gua e Sedimento
Recipiente (1) armazenamento Quantidade de amostra (2) Preservao (3) 100mL Prazo de Validade (4) 30h (R) 24h (AC) 8h (R) 24h (AC) 24h (R, AC) 24h

ensaio

Classe da amostra

A, B (gua de consumo humano) P, V, SP LE P, V, SP LE Resfriamento (em gelo) P, V, SP LE PP,SP LE P, V, SP LE PP, SP LE P, V, SP LE 100mL Resfriamento (em gelo) Refrigerao entre 2 C e 8C e proteger da luz. No congelar 200g (aproximadamente) 100mL Resfriamento (em gelo) 200g (aproximadamente) 100mL 100mL Refrigerao entre 2 C e 8C e proteger da luz. No congelar

Indicadores bacterianos (5)

A, B, C

Indicadores virais (6)

Refrigerao entre 2 C e 8C e proteger da luz. No congelar

48h

A, B, C

Fungos bolores e leveduras PP, SP LE

24h

200g (aproximadamente)

Continua...

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Tabela a7. armazenamento e preservao de amostras para ensaios microbiolgicos - gua e Sedimento (continuao)
Recipiente (1) armazenamento Quantidade de amostra (2) Preservao (3) 1 a 1000L (8) (9) Resfriamento (em gelo) 200g (8) 100mL Resfriamento (em gelo) 200g (aproximadamente) Refrigerao entre 2 C e 8C e proteger da luz. No congelar Prazo de Validade (4)

ensaio

Classe da amostra

A, B, C

P, V, SP LE

24h (10)

Microrganismos patognicos (bactrias, vrus, protozorios e helmintos) (7) PP, SP, LE P, V, SP LE (11) PP, SP LE

A, B, C

Bactrias dos ciclos biogeoqumicos

Refrigerao entre 2 C e 8C e proteger da luz. No congelar

24h

Guia NacioNal De coleta e Preservao De amostras

Legenda: (1) Recipiente: Le = Limpeza e preparo especial (ver Captulo 3); P = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte); PP = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte) do tipo pote; V = Frasco de vidro neutro; SP = sacos plsticos estreis; (2) Coletar volumes (ou massas) suficientes de amostra para as anlises a serem realizadas; (3) A preservao qumica necessria para as amostras das classes A, B e C adicionada no recipiente no momento de sua preparao (ver captulo 3); (4) A partir do momento da coleta das amostras (R = prazo regulatrio, AC = anlise para controle); (5) Coliformes totais, Coliformes termotolerantes, E.coli, Enterococos, Clostridium perfringens e Pseudomonas aeruginosa; bactrias heterotrficas - somente para gua de consumo humano; (6) Bacterifagos somticos e bacterifagos F-especficos; (7) Em amostras de gua de classe B e C, pode-se realizar o ensaio de bactrias patognicas com mecha (tcnica de Moore), em meio de transporte Cary e Blair (ver captulo 3), sendo o prazo de validade de 96 horas; (8) Coletar volumes (ou massas) compatveis com a contaminao da amostra, ou seja, quanto melhor a qualidade da matriz, maiores devem ser os volumes ou massas coletados; (9) Volumes elevados devem ser concentrados em campo; (10) Para Giardia sp. e Cryptosporidium sp. o prazo de validade de 72 horas; (11) Para os microrganismos anaerbios estritos os frascos devem estar totalmente preenchidos com a amostra, de maneira a evitar a presena de ar (anaerobiose requerida)

anexos

Tabela A8. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de clorofila a e feofitina a gua bruta
Recipiente (1) Preservao armazenamento Quantidade de amostra Prazo de Validade (2)

ensaio

Classe da amostra

Clorofila a e Feofitina a (Filtrada no laboratrio) VA BL 1L (3) Resfriamento (em gelo) e proteger da luz Refrigerao entre 4C e 10C e manter ao abrigo da luz

48h

Clorofila a e Feofitina a (Filtrada em campo) VA BL 1L (3) Resfriamento (em gelo) e proteger da luz at o momento da filtrao

(4)

28 dias

Legenda: (1) Recipientes: BL = Boca larga; Va = Frasco de vidro de cor mbar; (2) A partir do momento da coleta das amostras; (3) O frasco no deve ser totalmente preenchido e quando solicitado as amostras devem ser coletadas em rplicas; (4) Aps a filtrao, a membrana filtrante deve ser colocada em um envelope de papel do tipo kraft, devidamente identificado. O envelope deve ser acondicionado em frasco (ou dessecador) contendo slica gel, sendo o frasco envolvido em papel alumnio, para proteger da luz. O frasco deve ser enviado ao laboratrio sob refrigerao e protegido da luz no prazo de 24 horas. Na impossibilidade de cumprimento deste prazo, o frasco contendo as amostras filtradas deve ser mantido no freezer e encaminhado posteriormente sob refrigerao ao laboratrio.

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Tabela A9. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios de fitoplncton gua


Recipiente (1) Preservao armazenamento Quantidade de amostra Prazo de Validade (2) 24h

ensaio

Classe da amostra

Fitoplncton vivo VA BL 1L (4)

Resfriamento (em gelo) (5) e proteger da luz Formol (6) ou Lugol (7) (8) Manter ao abrigo da luz

Refrigerao entre 4C e 10C (5) e manter ao abrigo da luz

Fitoplncton fixado V (3), VA 100mL

3 meses

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Legenda: (1) Recipientes: BL = Boca larga; V = Frasco de vidro neutro; Va = Frasco de vidro de cor mbar; (2) A partir do momento da coleta das amostras; (3) Para amostras fixadas em formol; (4) O frasco no deve ser totalmente preenchido; (5) Evitar o contato do frasco com o gelo, pois algumas cianobactrias so danificadas em temperaturas baixas como, por exemplo, as do gnero Cylindrospermopsis; (6) Formol neutralizado, at concentrao final de 5% (= formaldedo 2%); (7) Adicionar lugol at obter uma colorao de conhaque (0,3mL a 0,5mL / 100mL e em casos de florao 0,5mL a 1,0mL/100mL); (8) As amostras preservadas com formol ou lugol devem ser acondicionadas e transportadas em caixa trmica separadas dos demais ensaios.

anexos

Tabela a10. armazenamento e preservao de amostras para ensaios de perifton


Recipiente (1) Preservao armazenamento Quantidade de amostra Prazo de Validade (2) 24h

ensaio

Classe da amostra

Perifton vivo V Formol (4) ou Lugol (5) 150mL (3)

Resfriamento e proteger da luz Manter ao abrigo da luz

Refrigerao entre 4C e 10C e manter ao abrigo da luz

Perifton fixado

Indeterminado

Legenda: (1) Recipiente: V = Frasco de vidro neutro; (2) A partir do momento da coleta das amostras; (3) O frasco no deve ser totalmente preenchido; (4) Concentrao final do formol neutralizado a 4% ou 3mL a 5mL de Lugol para 1 L de amostra; (5) As amostras preservadas com formol ou lugol devem ser acondicionadas e transportadas em caixa trmica separadas dos demais ensaios.

Tabela a11. armazenamento e preservao de amostras para ensaios de zooplncton


Recipiente (1) Quantidade de amostra Preservao armazenamento Prazo de Validade (2) Resfriamento (em gelo) 100L Formol ou Etanol 70 a 95 GL (3) (4) Manter ao abrigo da luz (5) Indeterminado Refrigerao entre 4C e 10C

ensaio

Classe da amostra

Zooplncton vivo

24h

B
(250 mL)

P, V

Zooplncton fixado

Legenda: (1) Recipientes: P = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte); V = Frasco de vidro neutro; (2) A partir do momento da coleta das amostras; (3) Em formol neutralizado e diludo a 10%; (4) Para o zooplncton de gua doce, adicionar cerca de 100 mL de gua mineral gasosa, esperar 15 minutos e fixar com o formol neutralizado, com sacarose (concentrao final 10%)); (5) As amostras preservadas devem ser acondicionadas e transportadas em caixa trmica, separadas dos demais ensaios.

309

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Tabela A12. Armazenamento e preservao de amostras para ensaios com macrfitas


Recipiente (1) Preservao Resfriamento em gelo; Manter ao abrigo da luz Manter ao abrigo da luz Refrigerao entre 4C e 10C (2) armazenamento Quantidade de amostra Prazo de Validade (2) Amostras frescas: 7 dias Amostras secas e maceradas: 3 meses

ensaio

Classe da amostra

Macrfitas: Bioacumulao SP 300g por frao a ser analisada

Legenda: (1) Recipiente: SP Sacos plsticos reforados descartveis (de polmero inerte); (2) A partir do momento da coleta das amostras.

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anexos

Tabela a13. armazenamento e preservao de amostras para ensaios com bentos

ensaio

Classe da amostra Preservao armazenamento

Recipiente (1) (2)

Quantidade de amostra

Prazo de Validade (3) At a lavagem: 24 h.

Resfriamento (em gelo) Manter ao abrigo da luz Refrigerao entre 4C e 10C e manter ao abrigo da luz SP (4) (5)

Bentos de gua doce (pegador ou substrato artificial) Formol (7) (9) Manter ao abrigo da luz

D, E

Aps a lavagem e preservao (7) (9): Indeterminado At a lavagem: 48 h Aps a lavagem e preservao (7) (9): Indeterminado

Bentos de gua doce (delimitador ou rede manual) PP (5) Formol (7) (9) ou lcool 70C V, PP Varivel (6) Formol (8) (9)

D, E

Manter ao abrigo da luz

Indeterminado

Bentos marinho: Costes rochosos

D, E

Manter ao abrigo da luz

Indeterminado
Continua...

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Tabela a13. armazenamento e preservao de amostras para ensaios com bentos (continuao)

ensaio

Classe da amostra Preservao armazenamento Resfriamento (em gelo) SP (4), V, PP (500 mL) Manter ao abrigo da luz Formol (8) (9) Resfriamento (em gelo) Manter ao abrigo da luz Volume de 1 pegada ou 1 draga Formol (8) (9) Manter ao abrigo da luz Volume de 1 delimitador para cada nvel Refrigerao entre 4C e 10C Manter ao abrigo da luz

Recipiente (1) (2)

Quantidade de amostra

Prazo de Validade (3)

Bentos marinho: Praia

D, E

At a lavagem: 24 h. Aps a lavagem e preservao (8) (9): Indeterminado Indeterminado

Bentos marinho: Infralitoral SP (4), V, PP

Refrigerao entre 4C e 10C e manter ao abrigo da luz

At lavagem: 24 h. Aps lavagem e preservao (8) (9): Indeterminado Indeterminado

D, E

Manter ao abrigo da luz

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Legenda: (1) Recipientes: PP = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte) do tipo pote; SP - Sacos plsticos reforados descartveis (de polmero inerte); V = Frasco de vidro neutro; (2) As amostras no lavadas em campo devem ser transferidas diretamente para dois sacos plsticos reforados, um dentro do outro, e as bocas devem ser firmemente fechadas, de modo independente; para acondicionar as amostras lavadas em campo, os recipientes mais apropriados so os recipientes de polietileno, tipo pote; para acondicionar os organismos retidos nas peneiras e triados, utilizar recipientes de vidro com capacidades inferiores e variveis (10mL a 70 mL); (3) A partir do momento da coleta das amostras; (4) Manter o saco plstico em balde ou caixa at o momento da lavagem da amostra; (5) Volume de 1 pegada ou 1 delimitador ou 1 substrato ou 1 perodo de passagem da rede; (6) Depende do nmero de nveis do transecto e da necessidade de confirmao de identificaes; (7) Formol neutralizado, at a concentrao final de 5 a 10%; (8) Formol neutralizado, at a concentrao final de 10%; (9) As amostras preservadas com formol ou lugol devem ser acondicionadas e transportadas em caixa trmica separadas dos demais ensaios.

anexos

Tabela a14. armazenamento e preservao de amostras para ensaios de ncton (peixes)


Recipiente (1) Preservao armazenamento Quantidade de amostra Prazo de Validade (2)

ensaio

Classe da amostra

Comunidades SP, PA (3) 10 a 20 indivduos de cada espcie, dependendo do tamanho.

Refrigerao entre 4C e 10C (5)

24 horas

Metais SP, PP LE

Resfriamento (em gelo) Manter ao abrigo da luz

Congelamento

Indeterminado

E PA (3) 1mL de sangue (aproximadamente) 500L de sangue Heparina ou EDTA Resfriamento (em gelo) Manter ao abrigo da luz

orgnicos

Refrigerao entre 2C e 8C Refrigerao entre 2C e 8C Refrigerao entre 2C e 8C (5)

Indeterminado Indeterminado

Microncleos Microtubo cnico (4)

Cometas

24 horas

Legenda: (1) Recipientes: Le = Limpeza especial (ver Captulo 3); Microtubo cnico = Microtubo plstico descartvel (de polmero inerte), graduado, com tampa e volume aproximado de 1,5 mL; Pa = Papel alumnio para envolver as amostras de peixes; PP = Frasco plstico descartvel (de polmero inerte), do tipo pote; SP = Saco plstico reforado descartvel (de polmero inerte) para o acondicionamento das amostras de peixes para avaliao de comunidades nectnicas, ensaios de metais pesados, ensaios biomtricos e necroscpicos; (2) A partir do momento da coleta das amostras; (3) Somente para ensaios orgnicos; (4) Para ensaios com sangue; (5) Em eventos de mortandade, nunca congelar os peixes, apenas resfri-los em gelo.

313

anexo 2 GLoSSRIo ADSORO - Aderncia de molculas sobre uma superfcie mineral ou de partculas slidas por meios fsicos, sem comportar interao qumica.
GUA BRUTA gua que no passou por nenhum tipo de tratamento simplificado ou convencional (in natura), proveniente de rio, represa, lago, poo fretico, nascente, esturio, mar etc. GUA INDUSTRIAL gua utilizada exclusivamente em processamento industrial, como matria-prima ou parte do sistema de produo. GUA PLUVIAL gua proveniente da precipitao atmosfrica. O mesmo que gua meterica e gua de chuva. GUA RESIDURIA Despejo ou resduo lquido proveniente de atividades domsticas (efluentes domsticos), industriais (efluentes industriais), comerciais, agrcolas e outras, bem como a de sistemas de tratamento de disposio de resduos slidos. GUA SUBTERRNEA gua de subsolo que ocupa a zona saturada; num sentido geral, toda a gua situada abaixo da superfcie do solo.

GUA TRATADA gua destinada ao consumo humano, submetida a algum tipo de tratamento convencional (ETA - Estao de Tratamento de gua) ou simplificado (filtrao, clorao, fluoretao etc.). ALCTONE - O que no originrio da regio. AMOSTRA Uma ou mais pores, com volume ou massa definida, coletadas em corpos receptores, efluentes industriais, rede de abastecimento pblico, estaes de tratamento de gua e esgotos, rios, represas e outros, com o fim de inferir as caractersticas fsicas, qumicas, fsico-quimicas e biolgicas do ambiente de onde foi retirada. AMOSTRA SIMPLES/PONTUAL - Amostra coletada uma nica vez, em um determinado instante, constituda por uma nica poro.

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AMOSTRA COMPOSTA - Amostra que pode ser coletada por: (a) amostragens em funo de tempo (temporal); (b) amostragens em funo da vazo; (c) amostragens em funo da profundidade do local a ser amostrado; (d) amostragens em funo da margem ou distncia entre um ponto de amostragem e outro (espacial). Quando o objetivo de um programa avaliar concentraes mdias de uma dada varivel pode-se, em alguns casos, reduzir o nmero das amostras necessrias ao ensaio, pela obteno de amostra composta, formada pela mistura de alquotas individuais apropriadas. Aps a composio das alquotas tem-se como produto final uma nica amostra. AMOSTRAGEM Atividade que consiste em retirar uma frao representativa (amostra) de uma regio (gua, solo, efluentes, entre outros) para fins de ensaio ou medio. AMOSTRAGEM EM REPLICATA - Procedimento no qual duas ou mais amostras so tomadas no mesmo ponto, de modo independente. AMOSTRAGEM PROPORCIONAL VAZO Tcnica destinada obteno de uma amostra, na qual a frequncia da coleta ou o volume da amostra diretamente proporcional vazo da gua ou do efluente bruto. AQUFERO Toda formao geolgica capaz de armazenar e transmitir gua em quantidades apreciveis. ATERRO SANITRIO Mtodo de disposio final de resduos slidos (lixo) no solo, sem causar danos ao ambiente ou sade pblica. AUTCTONE - O que originado no prprio local onde ocorre. BALANO HDRICO DE UNIDADE INDUSTRIAL Relao entre as entradas e sadas de gua e efluentes de cada unidade de processo industrial, indicando as fontes de abastecimento, usos internos, perdas por evaporao ou incorporao ao processo produtivo, lavagens de pisos e equipamentos, e efluentes gerados por qualquer fonte industrial ou domstica.

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BIOMASSA Somatrio da massa orgnica viva existente num determinado espao, num dado instante. Pode ser expressa em peso mido ou seco, por unidade de rea ou volume. BIOTA Conjunto de vegetais, animais e microorganismos de uma determinada regio, provncia ou rea geogrfica. CARGA POLUIDORA Quantidade de poluente transportado ou lanado em um corpo receptor. COLETA DE GUA SUPERFICIAL a amostra coletada entre 0 e 30 cm da lmina dgua. Pode ser coletada com o auxlio de um balde de ao inox, batiscafo e garrafas, ou diretamente do corpo dgua. COLETA DE GUA EM PROFUNDIDADE - a amostra coletada em profundidade superior a 30cm da lmina dgua, at 1m acima do fundo. Esta amostra deve ser coletada obrigatoriamente com o auxlio de equipamento, tipo Garrafa de van Dorn. DEPOSICIONAL Zona de baixa dinmica em ambientes de gua corrente, onde se deposita e acumula material no consolidado. DRAGAGEM - Remoo de material slido do fundo de um ambiente aqutico. EFLUENTE INDUSTRIAL Resduo lquido proveniente de processos industriais. Em geral, contm poluentes de diversas formas, como por exemplo, de natureza qumica, que podem apresentar perigo sade humana, prejuzos fauna e a flora, comprometimento do lazer, e outros. O mesmo que resduo lquido industrial, despejo industrial e esgoto industrial. ESCOAMENTO SUPERFICIAL Parte da precipitao que escoa em direo a um curso d gua pela superfcie do solo. ESGOTO DOMSTICO Resduo lquido domstico, decorrente do uso da gua em cozinha, sanitrio, chuveiro, lavatrio e lavanderia domstica. O mesmo que resduo lquido domstico e despejo domstico.

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ESGOTO MISTO Mistura de resduos lquidos domsticos com resduo lquido proveniente de processos industriais, ou de lavagem de pisos e equipamentos pertencentes rea industrial. ESPCIE-CHAVE Aquela que controla a estrutura da comunidade. ETA Estao de Tratamento de gua. EUTROFIZAO processo de enriquecimento por nutrientes, principalmente nitrognio e fsforo, que tem como consequncia o aumento da biomassa vegetal (fitoplncton e plantas aquticas). A eutrofizao das guas continentais pode ser um processo natural, porm, o descarte de efluentes domsticos e/ou industriais e lavagem de solos agrcolas contendo muitos nutrientes (matria orgnica) acelera o processo, causando a chamada eutrofizao artificial ou antrpica. Ambientes enriquecidos so denominados ambientes eutrficos. EXATIDO Grau de concordncia entre um valor medido e um valor verdadeiro (referncia) de um mensurando. FLORAO Multiplicao excessiva, geralmente de curta durao, de uma ou algumas espcies fitoplanctnicas, frequentemente produzindo colorao visvel nos corpos dgua. FLUXOGRAMA Diagrama demonstrativo dos estgios de um processo e suas interrelaes. FRASCO DOSADOR Pissete de polietileno com ponteira dosadora utilizada para armazenar e dosar solues preservantes adicionadas s amostras durante as coletas em campo. GASPILHO Escova com cerdas e ponta pincel, prpria para limpeza de vidraria; o mesmo que escova rabo de gato. GRANULOMETRIA - Propores relativas entre partculas de diferentes dimenses que entram na composio de solos, sedimentos e agregados.

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HBITAT Ambiente onde um organismo normalmente vive e que oferece um conjunto de condies (biticas e abiticas) adequadas sua sobrevivncia. JUSANTE A partir de um ponto de referncia, direo para onde vo as guas, em um curso dgua. Por exemplo, local do rio, posterior ao lanamento do efluente, levando-se em considerao a direo para onde correm as guas (rio abaixo). LNTICO Ambiente aqutico em que o fluxo da massa de gua lento, como em tanques, lagos ou reservatrios. LITORAL (zona) Pelo sistema limnolgico, regio de um lago que se estende da linha litornea at o limite superior de ao de ondas. LTICO Ambiente aqutico em que a massa dgua tem movimento, como em rios e corredeiras. MATERIAL BIOLGICO - Materiais ou lquidos de origem biolgica, como peixes (inteiros ou suas partes), moluscos, sangue, urina, plantas, invertebrados, ossos e alimentos. MATERIAL ORGNICO GROSSEIRO Frao orgnica visvel, incluindo pedaos de madeira, folhas, fibras vegetais, restos de animais etc. MENISCO superfcie curva de um lquido contido em um tubo estreito. MITIGAO Atenuao de um impacto. MONTANTE Posio relativa de um lugar acima de outro. Num curso de gua, com relao corrente fluvial, a montante significa rio acima; por exemplo, um local do rio anterior ao lanamento do efluente, levando-se em considerao a direo para onde correm as guas. PECILOTRMICOS organismos que no tm mecanismos internos que regulem a temperatura do seu corpo.

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PRESERVAO DE AMOSTRAS - Adoo de medidas desde o momento da coleta e transporte at seu armazenamento, com o intuito de diminuir a reatividade ou inibir a atividade dos organismos, mantendo o mximo possvel das caractersticas da amostra no momento da coleta. As formas de preservao de amostras so a refrigerao, congelamento e adio de produtos qumicos quando aplicvel. PRESERVAO QUMICA - A adio de soluo ou produto qumico com o objetivo de minimizar a reatividade dos compostos qumicos e complexos, reduzir a volatilidade ou precipitao dos constituintes e os efeitos da adsoro ou preservar organismos, evitando ou minimizando alteraes morfolgicas ou fisiolgicas. PROFUNDA (zona) rea do fundo de um corpo hdrico (lago, reservatrio). Pelo sistema limnolgico, regio de um lago que se estende do limite inferior da termoclina at sua maior profundidade. SEDIMENTO - Material originado da decomposio de qualquer tipo de rocha, material de origem biolgica em decomposio ou resduos provenientes da ao humana que so transportados e depositados no fundo dos corpos dgua. SIZGIA (mar) Mar de grande amplitude que ocorre quando o sol e a lua esto em sizgia, isto , quando a atrao gravitacional do sol e da lua se somam. Ocorre por ocasio da lua cheia e da lua nova. STAR (Sistema de Tratamento de guas Residurias) - Conjunto de estruturas, dispositivos, instalaes, equipamentos e aparelhos diversos, de maior ou menor complexidade, utilizados para o tratamento e disposio de guas residurias e do lodo resultante deste tratamento. Semelhante ETE (Estaes de Tratamento de Esgotos). SUBLITORAL (zona) Regio que tem como limite superior o nvel alcanado pela baixa-mar normal e como limite inferior aquele compatvel com a vida das fanergamas marinhas e das algas fotfilas; pelo sistema limnolgico, regio de um lago que se estende do limite inferior da ao de ondas ao limite superior da termoclina; regio de fundo de um lago permanentemente coberta por vegetao.

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SUBSTRATO Aquilo que serve para fixao para organismos (planta ou animal). . Ex. o substrato de uma alga epfita pode ser outra alga.; TERMOCLINA camada intermediria de um lago estratificado, em que se verifica uma brusca diferena de temperatura. TRIPLICATA DA AMOSTRAS Trs amostras coletadas de modo sequencial e independente, em um determinado perodo de tempo ou espao, visando uma melhor representatividade do local amostrado. VAZO Volume de fluido que passa em uma seo transversal de um escoamento, por unidade de tempo. ZONA FTICA (EUFTICA) Poro superior iluminada da massa dgua, com luz suficiente para promover a fotossntese pelos vegetais e microorganismos aquticos. ZONAO Distribuio dos organismos em reas, camadas ou zonas distintas.

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anexo 3 ReSoLUo ana n 724/2011 RESOLUO N 724, DE 3 DE OUTUBRO DE 2011 Estabelece procedimentos padronizados para a coleta e preservao de amostras de guas superficiais para fins de monitoramento da qualidade dos recursos hdricos, no mbito do Programa Nacional de Avaliao da Qualidade das guas (PNQA). O DIRETOR-PRESIDENTE DA AGNCIA NACIONAL DE GUAS ANA, no uso da atribuio que lhe confere o art. 13, III, da Lei n. 9.984, de 17 de julho de 2000, torna pblico que a DIRETORIA COLEGIADA, em sua 420 Reunio Ordinria, realizada em 3 de outubro de 2011, com fundamento no art. 12, II, da Lei n. 9.984, de 17 de julho de 2000; considerando que a gesto sistemtica dos recursos hdricos, sem dissociao dos aspectos de quantidade e qualidade um dos instrumentos da Poltica dos Recursos Hdricos, conforme disposto no art. 3 da Lei 9.433, de 08 de janeiro de 1997; considerando que a ANA tem competncia para disciplinar, em carter normativo, a implementao, a operacionalizao, o controle e a avaliao dos instrumentos da Poltica Nacional de Recursos Hdricos, conforme disposto no disposto no art. 4 da Lei n 9.984/2000; considerando que o Conselho Nacional de Recursos Hdricos, por meio do disposto na Resoluo n 58, de 30 de janeiro de 2006, instituiu a necessidade de elaborao de um relatrio anual de conjuntura dos recursos hdricos, do qual o panorama de qualidade das guas do pas elemento fundamental; considerando o Acordo de Cooperao Tcnica ACT n 006/2010 celebrado entre a ANA e o Estado de So Paulo, por intermdio da Companhia Ambiental do Estado de So Paulo (CETESB), em 28 de maio de 2010;

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considerando o Termo de Cesso de Uso do Guia de Coleta e Preservao de Amostras de gua, Sedimento, Comunidades Aquticas e Efluentes Lquidos, celebrado em 16 de fevereiro de 2011, tendo como cedente a CETESB e como cessionria a ANA; considerando os objetivos do Programa Nacional de Avaliao da Qualidade das guas (PNQA) e seus componentes, formalizado na 278 Reunio Ordinria da Diretoria Colegiada da ANA, realizada em 14/04/2008; considerando que a padronizao de procedimentos de coleta e preservao de amostras de guas superficiais um dos requisitos para a obteno de dados de monitoramento representativos do meio ambiente estudado e passveis de serem analisados em conjunto com dados de outros corpos dgua do pas; RESOLVE: Art. 1 Estabelecer os procedimentos a serem observados pelos operadores das estaes de monitoramento de qualidade das guas superficiais, para fins de coleta e preservao de amostras, no mbito do Programa Nacional de Avaliao da Qualidade das guas (PNQA). Art. 2 O monitoramento de qualidade das guas compreende o conjunto de aes e equipamentos destinados ao levantamento de dados de parmetros indicadores de qualidade das guas superficiais. Art. 3 Aprovar o Guia Nacional de Coleta e Preservao de Amostras de gua, Sedimento, Comunidades Aquticas e Efluentes Lquidos, na forma do Anexo desta Resoluo, como documento de referncia tcnica para disciplinar os procedimentos de coleta e preservao de amostras de guas superficiais destinadas ao monitoramento de qualidade dos recursos hdricos em todo territrio nacional. Pargrafo nico os dados de monitoramento da qualidade das guas para serem inseridos no Banco de Dados Hidro e comporem a rede nacional de monitoramento da qualidade das guas da ANA devero seguir, obrigatoriamente, as orientaes e procedimentos dispostos no Anexo desta Resoluo.

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Art. 4 Fica estabelecido o prazo de 1 (um) ano, contados a partir da data de publicao desta Resoluo, para que as instituies ou rgos aos quais esta norma se aplica, promovam as adequaes necessrias a seu cumprimento. Art. 5 de responsabilidade da Unio, dos Estados, dos Municpios e do Distrito Federal a adoo das medidas necessrias para o fiel cumprimento do disposto nesta Resoluo. Art. 6 Esta Resoluo entra em vigor na data de sua publicao. VICENTE ANDREU GUILLO Diretor-Presidente

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