Introduo: O Epitlio O epitlio um tecido celular existente nos animais, formado por uma s ou vrias camadas, que limita

a as superfcies externas e internas do corpo. O epitlio bucal, tal como o prprio nome indica, o tecido animal que reveste a mucosa bucal, essencialmente caracterizado por apresentar clulas arredondadas ou alongadas que no possuem parede celular rgida como as clulas vegetais. Tcnicas e meio de montagem A observao de material microscpico exige a aplicao de diversas tcnicas para uma observao pormenorizada dos componentes celulares, visto que as clulas so de reduzidas dimenses e no apresentam contraste entre os seus constituintes. Estas tcnicas primam pelo mnimo de alterao possvel das caractersticas originais do material a observar, e conservam-no por um perodo de tempo mais longo do que o habitual, uma vez que as clulas rapidamente se danificam devido evaporao do meio de montagem, que acompanhado de um processo progressivo de degradao e autlise. A colorao uma tcnica que permite evidenciar determinados constituintes celulares, pois estes tendem a absorver certos corantes. Assim sendo, de acordo com os constituintes a observar, devemos utilizar o corante certo. Tal como nesta atividade experimental, utilizou-se a soluo de azul de metileno, um corante bsico que atua preferencialmente sobre o ncleo corando-o de azul, permitindo uma boa visualizao deste organito. Os corantes possuem tcnicas de aplicao, sendo uma delas a tcnica de irrigao ou capilaridade. Esta tcnica consiste em aplicar uma gota de corante num dos bordos da lamela, e no lado oposto da lamela, coloca-se uma tira de papel de filtro, cujo efeito de suco permite ao material biolgico entrar em contacto com o corante, realando as estruturas que no contrastam suficientemente de modo a tornarem-se distintas umas das outras. Esfregao uma leve camada de matria orgnica sobre uma lmina de vidro, para exame microscpico. A tcnica do esfregao que utilizada para material que se encontra formado por clulas isoladas, como por exemplo as clulas da mucosa bucal. Esta consiste em espalhar uma gota do material biolgico a observar sobre uma lmina de vidro formando uma fina pelcula para uma melhor observao ao

microscpio, que mais tarde pode ser submetida a uma colorao para evidenciar alguns constituintes desse material a ser visualizado. 2.Objetivos: Preparar lmina a fresco das clulas da mucosa bucal com colorao. 3.Material e Mtodos: 3.1 Material Palitos de madeira, lmina e lamnula, gua destilada, azul de metileno, papel filtro e microscpio ptico. 3.2 Mtodos. Raspou-se a mucosa bucal com um palito de madeira, com material realizou-se um, um esfregao fino sobre uma lmina com duas gotas de gua, em seguida pingou-se duas gotas de azul de metileno e colocou-se a lamnula em um ngulo de 45 sobre o esfregao descendo lentamente para no formar bolhas de ar. Coloca-se a Lamina pronta no microscpio ptico, realiza-se a focalizao e observao nas objetivas de 4x , 10x e 40x. 4. Resultados Observou-se a clula com forma oval e arredondada, o limite entre a clula e seu meio, o ncleo, localizado no centro da clula, e citoplasma, as partes ficaram com a cor levemente azulada por conta do corante utilizado. 5. Discusso e Concluso 1) Explique por que algumas regies da clula foram coradas mais fortemente que outras. ???????

2) Explique mais dois mtodos de preparao de lminas a fresco.

Mtodo de Colorao Pelo Triocrmio (identifica cistos e trofozotos) Quando a fixao do esfregao adequada, observam-se com clareza as estruturas citoplasmticas e nucleares dos protozorios e o citoplasma cora de verde azulado. J a cromatina nuclear dos trofozotos e dos cistos, bem como os corpos cromatides dos cistos, hemcias e bactrias dentro dos trofozotos coram em vermelho prpura. Outros materiais existentes no esfregao como leveduras, clulas teciduais, etc. tomam uma cor verde. Os cistos de E. histolytica tomam uma cor prpura menos acentuada que os cistos da E. coli. Mtodo Direto a Fresco Utilizando Salina 37 A pesquisa direta, tem como objetivo pesquisar formas mveis de amebas nas fezes. A tcnica consiste em colocar uma pequena poro de fezes misturada com a salina entre lmina e lamnula, dando preferncia s partes mucosanguinolentas quando presentes, e observar ao microscpio num aumento de 400x, em busca de presena de formas mveis de amebas, bem como o tipo de movimento apresentado pelo microrganismo. As formas mveis observadas emitem pseudpodes finos, longos e rpidos partindo de vrios pontos do corpo do parasito. Pode ainda ser observado um ectoplasma hialino e distinto, o endoplasma granuloso e de fcil observao, os vacolos digestivos, que podem aparecer com hemcias fagocitadas ou com contedos hemoglobnicos, so bem observados no endoplasma. O ncleo, normalmente no observado nas preparaes fresco.

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