MATRICEA EXTRACELULAR

esuturile nu conin n structura lor doar celule. O parte substanial a volumului lor este ocupat de spaiul extracelular care conine o reea complex de macromolecule, constituind matricea extracelular. Aceast matrice cuprinde o mare varietate de polizaharide i proteine care sunt secretate i asamblate local ntr-o reea organizat. n diferitele esuturi animale, matricea extracelular este specializat pentru anumite funcii particulare, cum ar fi: rezistena (tendoanele), filtrarea (n glomerulii renali) sau adeziunea. De exemplu, celulele musculare netede aflate n pereii arteriali sunt legate printr-o matrice extracelular care asigur conexiuni puternice i flexibile. Aceast matrice conine diferite combinaii de proteine fibroase (colagen), acid hialuronic i complexe polizaharidice (glicozaminoglicani) n combinaie cu proteinele (proteoglicani). Proteinele receptoare de pe suprafaa celulelor se leag la diferitele elemente ale matricei asigurnd consistena i rigiditatea esuturilor. Majoritatea epiteliilor, precum i alte grupuri organizate de celule, sunt mrginite sau legate strns la o matrice subire, numit lamina bazal. Pn nu demult s-a crezut c matricea extracelular din esuturile vertebratelor alctuiete o mas inert cu rolul de a stabiliza structura fizic a esutului. Astzi ns, este clar c matricea are un rol mult mai activ i mai complex; ea controleaz mediul n care se afl celulele influennd dezvoltarea lor, migrarea, proliferarea, forma i funciile metabolice. Componentele matricei pot lega factori de cretere i hormoni, asigurnd astfel, permanent, o abunden de semnale pentru celulele care se afl aici. Celulele au nevoie de componente specifice ale matricei pentru a se diferenia. Morfogeneza, ultimul stadiu pentru dobndirea formei celulare, este strns dependent de moleculele matricei. n dezvoltare, moleculele matricei sunt n mod constant nlocuite, degradate i resintetizate, iar n cazul leziunilor, chiar i ntr-un esut adult. Matricea extracelular din esuturile conjunctive Unele esuturi animale sunt formate n special din celule ntre care exist foarte puin spaiu extracelular; un exemplu l constituie epiderma din piele. Majoritatea epiteliilor, precum i alte grupuri organizate de celule sunt nvelite sau legate strns, la o matrice subire, numit lamina bazal. Lamina bazal este format dintr-un tip special de colagen organizat ntr-o reea bidimensional. Laminele bazale sunt strns conectate cu colagenul fibros i cu alte molecule din esutul conjunctiv lax adiacent. Animalele conin o cantitate mare de esut conjunctiv n care cea mai mare parte a volumului tisular const din spaiul intercelular. esutul conjunctiv lax formeaz structura care nvelete i conecteaz la lamina bazal majoritatea epiteliilor. Proteinele cum ar fi colagenul fibros i elastina flexibil, asigur esutului form, rigiditate i flexibilitate. Cea mai mare parte a spaiului este ocupat de molecule puternic hidratate de proteoglicani care confer esutului o consisten de gel. esutul conjunctiv lax este puternic celularizat, coninnd numeroase fibroblaste, care sintetizeaz majoritatea elementelor matricei extracelulare. Principala funcie a spaiului dintre celulele acestui esut este de a permite difuziunea liber a O2 i a substanelor nutritive ctre celulele epiteliilor i glandelor. esutul conjunctiv dens, cum sunt oasele, cartilajele, tendoanele, este componenta major n organele ale cror funcii eseniale sunt rezistena i flexibilitatea. Spre deosebire de esutul lax, esutul conjunctiv dens este format dintr-o matrice extracelular fibroas i conine puine celule. Materialul extracelular const din fibre de colagen strns mpachetate cu alte proteine fibroase
205

nconjurate de glicoproteine, proteoglicani, precum i de alte substane, ca elastina, toate secretate de celulele relativ puine la numr. Masa polizaharidic i glicoproteic a matricei. Acidul hialuronic i proteoglicanii Macromoleculele care constiuie matricea extracelular sunt secretate local de ctre celulele acesteia. n majoritatea esuturilor conjunctive, aceste molecule sunt secretate de fibroblaste. n esuturile conjunctive specializate, cum sunt esutul cartilaginos i osos, secreia este realizat de celule din familia fibrolastelor: condroblastele pentru cartilaj i osteoblastele pentru os. Exist dou clase majore de macromolecule extracelulare care formeaz matricea: glicozaminoglicanii (GAG), molecule polizaharidice care, legate de proteine, formeaz proteoglicanii i respectiv, Fig. 1 Reprezentare schematic a unei seciuni proteinele fibroase, de dou tipuri funcionale, transversale prin piele un tip cu rol structural, colagenul i elasiina, iar cellalt cu rol de adeziune, fibronectina i laminina. Glicozaminoglicanii i proteoglicanii formeaz o mas gelatinoas puternic hidratat, n care se afl incluse proteinele fibroase. Faza apoas a acestui gel permite difuzia moleculelor nutritive a metaboliilor i a hormonilor dintre snge i celulele tisulare; fibrele de colagen mresc rezistena i contribuie la organizarea matricei, iar fibrele de elastin i asigur flexibilitatea. Fibrele de adeziune ajut celulele s se ataeze la componentele matricei: fibronectina asigur ataarea fibroblastelor la matricea din esuturile conjunctive, iar laminina faciliteaz ataarea celulelor epiteliale de lamina bazal. Glicozaminoglicanii

Fig. 2 Un glicozaminoglican tipic: dermatan-sulfat Glicozaminoglicanii (GAG) sunt lanuri polizaharidice neramificate, foarte lungi, formate din uniti dizaharidice repetitive. Se numesc glicozaminoglicani pentru c unul din glucidele care
206

formeaz dizaharidul repetitiv este ntotdeauna un glucid aminat, N- acetilglucozamina sau Nacetilgalactozamina. n majoritatea cazurilor acest glucid aminat este sulfatat. Al doilea glucid al dizaharidului repetitiv este acidul uronic. Din cauza gruprilor sulfat i carboxil, GAG sunt puternic ncrcai negativ. Lanurile polizaharidice sunt att de inflexibile nct nu se pot mpacheta n structuri globulare compacte, cum o pot face lanurile polipeptidice. De aceea, aceste molecule sunt foarte hidrofile. Astfel, GAG au tendina de a adopta o conformaie foarte extins, care ocup un volum foarte mare n raport cu masa lor, (fig. 3) formnd mase gelatinoase chiar i cnd se afl n concentraii foarte mici. Marea densitate a sarcinilor lor negative, determin atracia i legarea cationilor, de exemplu a Na+, cationi care sunt osmotic activi, ceea ce determin suciunea n matrice a unei mari cantiti de ap. Aceasta creaz o presiune de turgescen (turgor), asigurnd matricei o rezisten la forele de compresiune (n contrast cu fibrele de colagen care asigur rezistena la forele de traciune). Cantitatea de GAG din esuturile conjunctive este de obicei sub 10 % din greutatea total a proteinelor fibroase. Din cauz c formeaz un gel poros, puternic hidratat, GAG ocup totui cea mai mare parte a spaiului extracelular, asigurnd un suport mecanic pentru esuturi i perminnd difuzia rapid a moleculelor hidrosolubile precum i migrarea celulelor. Acidul hialuronic Acidul hialuronic este componentul major al matricei extracelulare care nconjoar celulele proliferative i migratoare, n Fig. 3 Volumele relative particular, din esuturile embrionare. Acesta este, de asemenea, ocupate de ctre diferite componentul structural major al proteoglicanilor care se gsesc n molecule matricea extracelular a cartilajelor. O molecul de acid hialuronic este format din aproximativ 50.000 de uniti repetitive ale unui dizaharid format din acid glucuronic i N-acetilglucozamin (fig. 4). Din cauza legturilor de tip dintre monozaharide, precum i din cauza existenei legturilor de hidrogen din interiorul moleculei, acidul hialuronic are aspectul unui bastona lung i rigid. Repulsia mutual dintre gruprile carboxil ncrcate negativ, care se afl dispuse la intervale regulate contribuie, de asemenea, la stabilizarea structurii rigide. O singur molecul poate astfel atinge lungimea de 20 m!

Fig. 4 Secvena dizaharidic repetitiv a acidului hialuronic Din cauza simplitii sale, acidul hialuronic este considerat c reprezint forma "primitiv" a glicozaminoglicanilor. Toi ceilali glicozaminoglicani prezint o serie de deosebiri fa de acesta: (1) conin zaharuri sulfatate; (2) conin uniti dizaharidice diferite, aranjate n secvene mult mai
207

complexe; (3) sunt formai din lanuri mult mai scurte, cu mai puin de 300 uniti glucidice; (4) sunt legai covalent la proteine. Rolul acidului hialuronic n migraia celulelor Moleculele de acid hialuronic se afl legate pe suprafaa celulelor migratoare. Din cauza structurii sale hidratate, a naturii "poroase", nveliul celular acoperit de acidul hialuronic "ine la distan" celulele, una fa de cealalt, asigurnd astfel libertatea lor de micare i de proliferare. Suprimarea micrii celulare i iniierea atarii intercelulare este frecvent corelat cu scderea concentraiei de acid hialuronic. Cnd migrarea celular este oprit, moleculele de acid hialuronic sunt degradate de ctre enzima hialuronidaza. Un exemplu semnificativ privind rolul acidului hialuronic n migrarea celulelor, l constituie migrarea celulelor n embriogenez. Cnd celulele se opresc din migrare, ele nceteaz sinteza de acid hialuronic i produc hialuronidaza care distruge aceast component a matricei. Acidul hialuronic are un rol cheie i n formarea celulelor musculare striate. Celulele musculare precursoare, nedifereniate, numite mioblaste, nu produc nc proteinele specifice musculare, cum ar fi a-actina sau troponina C. ute de mioblaste fuzioneaz formnd un sinciiu multinucleat n care se induce producia de proteine specifice musculare. Mioblastele sunt nconjurate de un nveli bogat n acid hialuronic care mpiedic fuziunea prematur a celulelor. In momentul fuziunii, nveliul bogat n acid hialuronic este distrus. Celulele fuzionate ncep s sintetizeze o matrice extracelular lipsit de acid hialuronic, care formeaz lamina bazal i care permite ataarea celulelor la matricea nou format, bogat n colagen. Proteoglicanii Proteoglicanii sunt macromolecule existente n toate esuturile conjunctive. Aceste molecule sunt formate dintr-un miez proteic, la care se ataeaz covalent una sau mai multe molecule de glicozaminoglicani (de acelai tip sau de tipuri diferite). Ca i n cazul celorlalte glicoproteine, lanul polipeptidic sau miezul proteic al proteoglicanilor este sintetizat pe ribozomii de pe membranele reticulului endoplasmic i introdus n lumenul acestuia. Lanurile polizaharidice sunt asamblate pe acest miez proteic mai ales n aparatul Golgi: n primul rnd, la radicalii serinici ai polipeptidului se ataeaz un trizaharid de legtur care servete ca primer pentru creterea polizaharidului; ulterior, prin intervenia unei glicozU-transferaze, se adaug succesiv radicalii glucidici. n decursul alungirii lanului polizaharidic n aparatul Golgi, o parte a glucidelor polimerizate sunt modificate covalent prin reacii de sulfatare i de epimerizare care modific configuraia monomerilor. Sulfatarea crete foarte mult ncrctura negativ a proteoglicanilor. Proteoglicanii prezint o remarcabil diversitate. O anume matrice extracelular conme proteoglicani cu diferite miezuri proteice i diferite lanuri polizaharidice ataate la acestea, astfel c, greutatea molecular precum i ncrctura electric a populaiilor de proteoglicani poate fi exprimat doar cu aproximaie; moleculele considerate individual difer considerabil. Proteoglicanii sunt clasificai n funcie de structura unitii repetitive dizaharidice a componentei lor glicozaminoglicanice. Frecvent, o clas difer de cealalt prin modificarea componentelor zaharidice ale lanului dup ce sinteza lor s-a ncheiat; de exemplu, dermatan-sulfatul se formeaz din condroitin-sulfat. Similar, heparina (utilizat n medicin ca anticoagulant), se formeaz prin modificarea enzimatic a heparan-sulfatului.

208

Deseori, moleculele de proteoglicani nu sunt componente exclusive ale matricei extracelulare ci, prin miezul proteic inserat n bistratul fosfolipidic membranar, formeaz molecule transmembranare astfel orientate nct moleculele polizaharidice de GAG se leag la miezul proteic doar pe suprafaa extracelular. Acesta este cazul, mai ales al celulelor epiteliale.

Fig. 5 Legtura dintre lanul polipeptidic i un glicozaminoglican din molecula unui proteoglican

Fig. 6 Modelul unui proteoglican de suprafa celular, la celulele epiteliale mamare de oarece

Figura 6 nfieaz structura unei astfel de molecule existente n membrana celulelor epiteliale din glandele mamare de oarece. Lanurile de heparan-sulfat ataate, se leag la moleculele de colagen (de tip I, III i IV), precum i la moleculele de fibronectin din matricea din apropierea laminei bazale. Astfel de proteoglicani de suprafa celular ancoreaz celulele la fibrele matricei. Agregatele macromoleculare de proteoglicani Proteoglicanii din cartilaje sunt cele mai mari agregate moleculare cunoscute; o singur molecul poate fi mai lung de 4 m i cu un volum mai mare chiar dect al unei celule bacteriene! Asemenea proteoglicani confer cartilajului proprietile sale caracteristice: consisten asemntoare unui gel i rezisten la deformare. Componenta central a agregatelor de proteoglicani o formeaz o molecul foarte lung de acid hialuronic. La el se leag strns, dar nu covalent, la intervale de 40 nm, proteinele miez ale proteoglicanilor de Fig. 7 Reprezentare schematic a unui agregat de condroitin-sulfat. Legarea proteoglicanilor la proteoglicani acidul hialuronic este asigurat de o protein linker. La fiecare miez proteic se ataeaz multiple lanuri de condroitin-sulfat i cheratan - sulfat (fig. 7).
209

Nu toate moleculele de proteoglicani sunt att de mari. De exemplu, o clas de proteoglicani "simpli" se afl n laminele bazale. Acetia sunt formai dintr-un miez proteic cu greutate molecular de 20.000 - 40.000 la care se ataeaz lanuri de heparan sulfat. Proteinele fibroase multifuncionale ale matricei: Colagenul Colagenul formeaz o clas major de proteine fibroase din matricea extracelular. Este cea mai abundent protein prezent n organismul animal. Au fost descrise 12 tipuri de colagen, dintre care, patru sunt cele mai comune (I, II, III, IV). Tipurile I, II i III sunt cele mai abundente i formeaz fibrile cu structur similar. Tipul IV nu formeaz fibrile, ci structuri reticulare bidimensionale, fiind componentul principal al laminei bazale. Particularitile structurale ale fiecrui tip fibrilar de colagen i asigur funciile specifice. S-a crezut pn nu demult, c toate tipurile de colagen sunt secretate numai de fibroblaste, dar acum se tie c exist numeroase varieti de celule epiteliale care produc anumite variante de colagen. Structura colagenului Unitatea structural fundamental a colagenului de tip I este reprezentat de o protein lung (300 nm) i subire (1,5 nm) care este format din trei lanuri polipeptidice mpletite n helix: dou lanuri 1 i un lan 2. Fiecare lan este format din exact 1050 de aminoacizi. Un lan a conine cte 3 aminoacizi per fiecare tur de helix, din care tot al treilea este glicina (fig. 8). n afar de glicin, colagenul este bogat i n prolin i hidroxiprolin, care au rolul de a stabiliza cele trei lanuri . Lanurile ale colagenului, mpletite n triplu helix, formeaz colagenul fibrilar (tipurile I, II, i III). Secretate n spaiul extracelular, moleculele de colagen fibrilar se asambleaz n formaiuni polimerice ordonate, numite fibrile de colagen, care sunt structuri subiri, filiforme, cu lungimea de civa |am i foarte bine vizibile la microscopul electronic. Fibrilele de colagen se agreg n structuri mari, vizibile la microscopul optic, numite fibre de colagen, care au diametrul de civa microni. Toate aceste structuri sunt formate din colagenul de tip I, II sau III. Colagenul de tip IV a fost evideniat doar n laminele bazale; n loc s formeze fibrile, moleculele sale se asambleaz n reele plane, bidimensionale. Modul de asamblare al celorlalte tipuri de colagen este nc neclar. Sinteza moleculelor de colagen Lanurile de colagen sunt sintetizate n lumenul reticulului endoplasmic rugos, sub forma unor molecule de pro-lanuri . Fiecare pro-lan conine la capete cte o secven adiional de aminoacizi; 150 de aminoacizi la captul N-terminal i 250 de aminoacizi la

Fig. 8 (A) Modelul unui lan de colagen. (B) Modelul moleculei de colagen format dintr-un triplu helix de lanuri . x i y pot fi orice amino-acid

captul C-terminal. Aceste secvene adiionale de aminoacizi formeaz propeptidele. Cu excepia unei poriuni foarte scurte de la captul N-terminal, propeptidele formeaz domenii moleculare globulare. Dup ce au fost sintetizate, pro-lanurile se asambleaz cte trei pentru a forma moleculele de procolagen. Acestea se deosebesc de moleculele de colagen mature prin existena la capetele lor a propeptidelor.
210

Rolul propeptidelor este de a iniia asocierea pro-lanurilor i de a dirija asocierea lor n triplu helix. Asamblarea este iniiat la nivelul captului C-terminal al propeptidelor ntre care se stabilesc legturi disulfidice (fig. 9). Dup formarea lor, cele trei pro-lanuri a se mpletesc n direcia C-terminal N-terminal, formnd un triplu helix.

Fig. 9 Asamblarea n triplu helix a lanurilor polipeptidice de colagen Colagenul nou sintetizat este modificat n reticulul endoplasmic i n aparatul Golgi. Asamblarea fibrelor de colagen ncepe la nivelul reticulului endoplasmic rugos (RER), se continu n aparatul Golgi i este definitivat dup ce acesta a fost secretat n afara celulei (fig. 10). Imediat dup terminarea sintezei n RER i nc nainte de a se fi format triplul helix, prolanurile ale colagenului sunt supuse la mai multe modificri. Aminoacidul prolina (mai rar i lizina) din poriunea pro-lanurilor care se va mpleti n triplu helix, este supus unui proces de hidroxilare. n plus, nc din RER, se ncepe glicozilarea pro-lanurilor prin adugarea moleculelor de galactoz la moleculele de hidroxilizin i a unor oligozaharide mai lungi, la asparagin. Acidul ascorbic (vitamina C) este un factor esenial pentru enzimele care produc hidroxilarea prolinei. n absena vitaminei C, colagenul este insuficient hidroxilat. Astfel, lanurile sale nu pot forma un triplu helix stabil i deci, nici fibre de colagen normale. Lanurile de procolagen nehidroxilate sunt degradate intracelular. De aceea, absena vitaminei C din alimentaie produce creterea fragilitii vaselor sanguine, a tendoanelor i a pielii, modificri caracteristice bolii numite scorbut.

211

Secreia i asamblarea n fibre a procolagenului Procolagenul este convertit n colagen dup ce a fost secretat, prin reacii catalizate de enzime extracelulare numite procolagen-peptidaze. n timpul sau imediat dup exocitoz, moleculele de procolagen de tip I sufer un proces de clivri proteolitice prin care se ndeprtez propeptidele N-terminale i C-terminale. Apoi, n spaiul extracelular, moleculele de colagen sunt asociate pentru a forma fibrilele de colagen. Fibrilele de colagen de tip I se formeaz prin asocierea spontan a moleculelor de colagen lungi de 300 nm. Ele se dispun paralel i decalat una fa de cealalt, cu 67 nm (fig. 11). Aceast dispoziie face ca o fibril de colagen s aib o structur striat la microscopul electronic. Fiecare fibril are o grosime de 50 nm i o lungime de civa m. Formarea fibrilelor este acompaniat de oxidarea unor aminoacizi de lizin i hidroxilizin, ceea ce duce la formarea unor aldehide reactive. Reacia este catalizat de o enzim numit lizil-oxidaza. Aceste aldehide formeaz spontan puni covalente ntre moleculele de colagen alturate, stabiliznd fibril. Structurile fibrilare ale colagenului Tipul II este forma major de colagen din cartilaje. Fibrilele sale sunt mai mici n diametru i sunt orientate ntmpltor n matricea vscoas de proteoglicani. Asemenea molecule rigide prezint rezisten la compresibilitate i permit matricei s reziste la deformri i, aa cum se ntmpl n articulaii, s absoarb ocul. Legat pe suprafaa fibrilelor de colagen de tip II, se afl colagenul de tip IX. La acesta exist dou segmente helicale, Fig. 10 Procesele intra- i extracelulare care ntrerupte de o zon flexibil. Din aceast zon se intervin n formarea colagenului fibrilar extinde o molecul de condroitin-sulfat, precum i un domeniu nehelical care leag fibrilele de alte componente ale matricei (fig. 12). Colagenul de tip VI se gsete n unele esuturi conjunctive, fiind frecvent legat la capetele fibrilelor de tip I. Tipul VI este un colagen neobinuit, ale crui polipeptide nu formeaz helixuri triple. n general, colagenul fibrilar este organizat n esuturi n diferite moduri, ndeplinind astfel funcii;specifice. Una din organizrile cele mai remarcabile se afl n osul matur i n corneea transparent. n cornee, fibrele sunt aranjate n straturi; fibrele dintr-un strat sunt dispuse paralel unele

212

fa de altele i perpendicular fa de fibrele paralele din stratul adiacent. Acest aranjament asigur structura subire, dar rezistent i nedeformabil a corneei.

Fig. 11 Aranjamentul moleculelor de colagen n structura fibrelor de colagen Colagenul de tip IV din structura laminei bazale Lamina bazal este o reea dens de componente ale matricei extracelulare, care mrginete suprafaa bazal a epiteliilor i a celulelor endoteliale, conectndu-le cu esutul conjunctiv alturat. Laminele bazale nconjoar, de asemenea, unele celule cum sunt celulele musculare i adipocitele. n mod uzual, lamina bazal nu este mai groas de 60-100 nm. Unul din constituenii si principali este colagenul de tip IV care formeaz un reticul plan, bidimensional. Acesta asigur structura caracteristic i rigid a laminei bazale. Cele trei tipuri de polipeptide ale colagenului IV formeaz un triplu helix lung de 40 nm, avnd la captul C-terminal un domeniu globular. Segmentul helical este mai neobinuit pentru c secvena XY- Glicin este ntrerupt de aproximativ 20 de ori cu secvene care nu pot forma triplu helix. Aceste segmente nehelicale introduc Fig. 12 Asocierea flexibilitate n aceste regiuni. Regiunile helicale ale mai multor colagenului de tip II cu molecule se asociaz lateral, formnd straturi foarte subiri, suprapuse colagenul de tip IX (fig. 13). Aceast dispoziie, mpreun cu interaciunile dintre domeniile globulare C- terminale, genereaz o reea fibroas aparent neregulat, bidimensional.

213

Proteinele de adezivitate ale matricei: Laminina i Fibronectina Matricea extracelular conine, pe lng proteoglicani i colagen, care sunt cele mai importante componente ale sale, o serie de proteine speciale care se leag nu numai la colagen i proteoglicani, ci i la receptorii de suprafa celular. Aceste proteine sunt foarte importante deoarece contribuie la organizarea celorlalte componente ale matricei i, de asemenea, determin forma celulelor, regleaz ataarea celulelor la matrice i migrarea celulelor. Laminina Toate laminele bazale conin un set comun de proteine i glicozaminoglicani: colagen de tip IV, proteoglicanul heparan-sulfat, o protein foarte puin cunoscut numit entactina, precum i laminin. Lamina bazal mai este denumit i matrice de tip IV, datorit tipului de colagen pe care l conine. Toate componentele sale sunt sintetizate de ctre celulele dipuse pe suprafaa sa. Laminina este o molecul cu o form caracteristic (fig. 14), lung de 70 nm; este att de lung pe ct de groas este lamina bazal. Molecula este format din 3 polipeptide i conine situsuri cu mare afinitate de legtur la celelalte Fig. 13 Modelul prezumptiv de componente ale laminei bazale. asociere a moleculelor de colagen de Celulele, n general, nu se pot lega direct de tip IV colagenul de tip IV sau de proteoglicani. Laminina ns, asigur ancorarea suprafeei celulare la membranele bazale. Diferitele celule care sunt mrginite de lamine bazale, cum ar fi celulele epiteliale, celulele adipoase, celulele musculare netede i striate, pot utiliza pentru aceasta diferii receptori de suprafa. Laminina posed cel puin dou regiuni de care se pot lega asemenea receptori. O categorie de receptori pentru laminin face parte din superfamilia de receptori numii integrine. Aceti receptori sunt similari din punct de vedere structural, fiind formai din dou proteine transmembranare, i . Diferii receptori conin diferite conbinaii de lanuri i . Fiecare receptor de integrin se poate lega la una sau mai multe glicoproteine din matrice. De exemplu, receptorul pentru laminin existent n unele celule, se leag doar la laminin, pe cnd receptorii VLA existeni la celulele T ale sistemului imun, se leag att de laminin ct i de fibronectin. Lamina bazal este structurat diferit n diferite esuturi; aceast diversitate poate fi generat de diversitatea receptorilor pentru laminin pe care i posed diferitele tipuri de celule. Axoriii i dendritele celulelor nervoase, direcioriate de ctre conurile de cretere, se alungesc migrnd de-a lungul direciilor dictate de matricea extracelular care conine laminin. Receptorii pentru laminin existeni pe suprafaa conurilor de cretere se lepjelaminin n aa fel nct interaciunile se formeaz i se rup pentru ca prelungirea nervoas s se deplaseze de-a lungul fibrei. S-a demonstrat c, dac neuronii sunt plasai pe suprafaa unui flacon de cultur acoperit cu laminin, celulele i extind axomi. Aceasta sugereaz c laminina are o aciune de tip hormonal asupra

214

neuronilor tineri (neurite), iar receptorii pentru laminin ai neuritelor asigur transducia semnalului oferit de laminin, prin membrana celular, la fel cum o fac i receptorii pentru hormoni.

Fig. 14 Structura moleculei de laminin

Fig. 15 Structura moleculei de fibronectin

Fibronectina Fibronectinele formeaz o clas major de glicoproteine din matrice. Rolul primordial al acestor molecule este de a asigura ataarea celulelor la diverse matrto extracelulare. Prezena fibronectinei pe suprafaa celulelor de cultur netransformate, precum i absena ei pe celulele transformate (tumorale) este primul fapt experimental care sugereaz implicarea fibronectinei n adezivitatea celular. Prin aceasta, fibronectina regleaz forma celulei i organizarea citoscheletului; este esenial de asemenea, in migrarea celular precum i n diferenierea pe parcursul embriogenezei. Fibronectina este implicat fundamental n procesele de vindecare a rnilor deoarece faciliteaz migrarea macrofagelor i a altor celule imunologice ctre ariile afectate, iniiind i procesul de coagulare sanguin prin determinarea plachetelor de a adera la vasele sanguine lezate. Fibronectin este o molecul dimer, format din dou peptide similare (fig. 15). Cei doi dimeri sunt legai ntre ei prin dou puni disulfidice. Fiecare lan este mpachetat n mai multe domenii globulare, desprite ntre ele prin segmente polipeptidice liniare. Domeniile individuale sunt specializate pentru legarea specific la diferite alte molecule din matrice sau de pe suprafaa celular. Astfel fibronectin posed situsuri de legare la receptori de suprafa, la colagen i la proteoglicani sulfatai. Integrinele ntre celule i matricea extracelular care le nconjoar se stabilesc uneori relaii foarte complexe. Datorit multiplelor interaciuni care se realizeaz la acest nivel, uneori este foarte dificil s se stabileasc cu precizie unde se termin componentele membranare i unde ncepe matricea. Dup cum am amintit anterior, unii proteoglicani sunt componente intrinseci ale membranei celulare, fiind inserai n bistratul fosfolipidic, iar domeniul lor extern se leag de componentele matricei, n alte situaii, componentele matricei extracelulare se leag de suprafaa celulelor prin intermediul unor receptori glicoproteici specifici.

215

Receptorii pentru matrice difer de receptorii celulari pentru hormoni prin aceea c ei se leag de ligand cu o afinitate relativ slab, precum i pentru c sunt prezeni pe suprafaa celulelor n concentraii de 10 pn la 100 de ori mai mari. Unul din cei mai bine caracterizai receptori pentru matrice este receptorul pentru fibronectin de pe suprafaa celulelor de mamifere. Acest receptor, un complex de proteine asociate necovalent, este format din dou polipeptide, numite i (fig. 16). El funcioneaz ca un "linker" transmembranar ce mediaz interaciunea dintre citoscheletul intracelular format din actin i respectiv, fibronectin ce intr n structura matricei extracelulare. Au mai fost descrii i ali receptori (pentru colagen i pentru laminin) care sunt organizai la fel i toi au fost inclui ntr-o clas aparte de molecule numite integrine. Integrinele au fost clasificate n trei familii. Prima familie include receptorul pentru fibronectin i nc cinci alte tipuri de receptori. A doua familie cuprinde receptori prezeni pe suprafaa plachetelor sanguine i care se leag la diferite componente ale matricei cum ar fi fibronectin i fibrinogenul, o protein ce interacioneaz cu plachetele n timpul coagulrii sngelui. Indivizii cu boala Glanzmann sunt genetic deficieni pentru aceti receptori i sufer de sngerri excesive. A treia familie de integrine este reprezentat de receptori de pe suprafaa leucocifelor sanguine. De exemplu, unul a fost denumit LFA-1 ("lymphocyte function associated"), iar un altul, Mac-1 deoarece a fost evideniat doar la macrofage. Aceti din urm receptori sunt implicai att n interaciunile celul-celul ct i celul-matrice i sunt foarte importani pentru aceste celule n localizarea zonelor de infecie. Subiecii cu boala numit deficiena adeziunii leucocitare, au o deficien genetic pentru sinteza acestor receptori. n Fig. 16 Structura receptorului consecin leucocitele lor nu posed asemenea receptori ceea pentru fibronectin ce face ca subiecii s fie foarte susceptibili la infecii bacteriene.

216