UniFOA Engenharia Ambiental Microbiologia Aplicada

MICROBIOLOGIA DO AR, DA GUA E DO SOLO

Profa. Dra Denise Godoy

MICROBIOLOGIA DO AR

Composio da atmosfera:
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79% de nitrognio, 21% de oxignio, 0,032% de dixido de carbono e outros gases (nenio, argnio e hlio). partculas de p e gua (sob forma de vapor lquido ou cristais de gelo)

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Micro-organismos do ar
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flora microbiana do ar: transitria e varivel; o nmero e os tipos de agentes contaminantes do ar so determinados pelas vrias fontes de contaminao existentes no ambiente; podem ser encontrados em suspenso, em material particulado e gotas de gua; transporte: atravs de ventos, massas de ar e turbulncias da atmosfera.

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Bioaerossis
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BIOAEROSSOL Microbiota dispersa no ar:

partculas biolgicas finas de dimetro de 0,05 a 100mm. Fungos, bactrias, vrus, plens, algas, etc.

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Bioaerossis
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A matria particulada funciona num primeiro momento, como substrato ideal para a multiplicao microbiana. Em um segundo momento, a matria particulada vai atuar como elemento sinrgico no ecossistema biolgico, atravs do aumento da umidade relativa nas superfcies, aumentando o crescimento microbiano. Este fenmeno de aumento da umidade se d atravs da tenso superficial, onde duas partculas prximas entre si absorvem a gua, aprisionando-a.
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Principais doenas de transmisso area

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Principais doenas de transmisso area

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Principais doenas de transmisso area

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A habilidade do micro-organismo causar doenas depende da sobrevivncia e infectividade ao hospedeiro suscetvel. Mas dependem ainda de parmetros ambientais:
umidade

relativa, temperatura, intensidade da radiao, comprimento de onda, tenso de oxignio, nveis de poluente.
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Micro-organismos do Ar Interno
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O ambiente confinado ou com pouca troca ar interno/externo tem como caracterstica acumular gases e/ou particulados nocivos a sade, de origem biognica ou inorgnica. Nas ltimas dcadas, a preocupao com a qualidade do ar interior tem aumentado devido a um nmero crescente de doenas relacionadas a esses ambientes.
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Sndrome do Edifcio Doente (SED)

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A Organizao Mundial de Sade (OMS) classificou como SED, uma srie de sintomas gerais, que epidemiologicamente afetam ocupantes de um ambiente fechado sem origens determinadas e que, quando os queixosos so afastados do ambiente, apresentam melhoras espontneas dos sintomas.

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Sndrome do Edifcio Doente (SED)

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So chamados de doentes aqueles nos quais uma poro significativa dos usurios, em torno de 20%, apresentam uma srie de sintomas, tais como: dor de cabea, nusea, cansao, irritao dos olhos, nariz e garganta, falta de concentrao, problemas de pele, entre outros. Uma caracterstica dessa sndrome que ocorrido o afastamento da pessoa afetada, cessam os sintomas em pouco tempo. Em geral, melhoram ao final do expediente de trabalho e cessam completamente nas frias.
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Doena de Ambiente Interno (DAI)

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As doenas relacionadas ao edifcio pelo termo DAI, relaciona-se a uma infeco verdadeira e no temporria, dos usurios.

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SED e DAI
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Um edifcio que possui a SED no provoca doenas, ele colabora no sentido de agravar males de pessoas predispostas ou, como j mencionado, de provocar um estado transitrio em algumas pessoas. J edifcios que possuam a DAI, podem provocar doenas, tais como: asma, infeces bacterianas, virais ou por fungos. Estas doenas esto diretamente relacionadas s condies do edifcio.

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Micro-organismos do Ar Interno
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O Ministrio da Sade, atento a esta tendncia, publicou em 1998, a Portaria 3523, contendo Regulamento Tcnico que visa promover o estabelecimento de medidas referentes limpeza dos sistemas de climatizao e medidas especficas de padres da qualidade do ar, identificando poluentes de natureza fsica, qumica e biolgica com suas respectivas fontes, visando preveno de riscos sade dos ocupantes desses ambientes.
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Legislao
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Segundo o padro referencial brasileiro microbiolgico (1998), o Conselho Cientfico da Sociedade Brasileira de Meio Ambiente e de Qualidade do Ar de Interiores (BRASINDOOR) aprovou em 1998, o seguinte referencial brasileiro para ambientes: Qualitativos: no so admitidos nos ambientes interiores:

Fungos Histoplasma capsulatum, Cryptococcus neoformans, Paracoccidioides brasiliensis, Aspergillus parasiticus, Aspergilus flavus, Aspergilus fumigatus, Stachybotrys atra e Fusarium moniliforme. Bactria Legionella pneumophila
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Legislao
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Resoluo RE 09 da ANVISA Valor mximo recomendado, para fungos: 750 UFC/m3

Para a relao I/E 1,5

onde I a quantidade de fungos no ambiente interior e E a quantidade de fungos no ambiente exterior.

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Tcnicas de anlise microbiolgica do ar

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Uma variedade de tcnicas tem sido desenvolvida com objetivo de se determinar o contedo microbiano em:
hospitais, escolas, locais

pblicos e no ar livre (ETE e estaes de compostagem)

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Tcnicas de anlise microbiolgica do ar

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Tcnica da sedimentao em placa: tcnica muito utilizada, porm no se pode avaliar o volume de ar que foi efetivamente analisado; somente os micro-organismos presentes no ar que possuem certas dimenses podero ser retidos com o uso de vrias placas; obtm-se uma estimativa aproximada da contaminao area e dos tipos de microorganismos presentes numa determinada rea.
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Tcnicas de anlise microbiolgica do ar

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Tcnica da sedimentao em placa:

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Tcnicas de anlise microbiolgica do ar

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Tcnica da membrana filtrante:

os

aparelhos so semelhantes aos usados para analise bacteriolgica de gua e apresentam a vantagem de reter todo tipo de partculas; essa tcnica permite medir o volume de ar amostrado e no indicada para amostras de ar muito contaminadas.

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Tcnicas de anlise microbiolgica do ar

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Tcnica da membrana filtrante:

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Tcnicas de anlise microbiolgica do ar

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Aparelhos de impacto slido

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Placas aps incubao

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Clculo da concentrao de micro-organismos no ar

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EXERCCIO: Em um dado ambiente, coletou-se uma amostra durante 10 minutos, e o amostrador estava regulado para 28L/min. Depois de 7 dias de incubao, foram contadas 153 UFC (unidades formadoras de colnia) de fungos nesta placa. A qualidade do ar deste ambiente atende legislao atual?
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MICROBIOLOGIA DA GUA

Ambiente Aqutico
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guas naturais:
gua

atmosfrica nuvens e precipitaes gua superficial lagos, rios oceanos gua de lenol fretico e poros do solo
habitat para

muitos micro-organismos

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Microbiologia da gua
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O meio aqutico: nutrientes diludos baixa diversidade de micro-organismos A presena de matria orgnica: aumento da atividade microbiana: inmeros exemplos de aumento das populaes microbianas devido ao aumento da carga orgnica

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Microbiologia da gua
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Uma gota dgua parece simples mas , na realidade, bastante complexa: diferentes substncias qumicas diferentes tipos de micro-organismos

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Microbiologia da gua
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Micro-organismos podem:
mudar

a composio qumica da gua fornecer nutrientes para outros organismos aquticos

CICLOS

DA MATRIA

representar

um grande risco para a sade humana e

animal
PATGENOS

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Condies ambientais
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Os tipos de micro-organismos presentes em ambientes aquticos so determinados pelas condies fsicas e qumicas que prevalecem naquele ambiente:

Temperatura de 0 a 40C
90%

do ambiente marinho est a 5C psicrfilos Alguns locais: prximo a 100C

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Condies ambientais
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Turvao devido a partculas provenientes da eroso da crosta terrestre, detritos de matria orgnica particulada, micro-organismos suspensos.

Ao mesmo tempo que impede a passagem da luz, serve de superfcie de adeso e fonte de nutrientes

Presso hidrosttica 1 atm a cada 10 m BAROTOLERANTES: at 3.000 m BAROFLICOS: 4.000-6.000 m BAROFLICOS EXTREMOS: acima de 6.000m
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Condies ambientais
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Estimativas do nmero total nos oceanos: 1,3 x 1028 Archaea 3,1 x 1028 Bacteria

Fonte: Microbiologia de Brock; Madigan et al., 20 Microbiologia Aplicada - Prof. Dra Denise Godoy

Condies ambientais
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Luz fotossintticos (algas e cianobactrias) zona ftica de 50 a 125 m - a vida na gua depende, direta ou indiretamente, dos produtos da fotossntese
Lago: - fototrficos predominantes: micro-organismos zonas xicas: cianobactrias e algas zonas anxicas: bactrias fototrficas anaerbias

PRODUTORES PRIMRIOS taxas de produo primria atividade microbiana

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Condies ambientais
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pH de 6,5 a 8,5 (mar de 7,5 a 8,5); lagos salgados pH 11,5 Salinidade NaCl varia de quase zero a 32% de

Nutrientes nitratos e/ou fosfatos; excesso podem causar super crescimento de algas carga de nutriente
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gua Potvel
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Potvel = livre de micro-organismos patognicos e substncias qumicas prejudiciais sade.

Normalmente

proveniente das guas superficiais. Purificao da gua

abastecimento residencial abastecimento Municipal

(sedimentao, filtrao e

clorao)
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gua Potvel
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Anlise Bacteriolgica da gua para potabilidade:

Contagem

em placa Tcnica da membrana filtrante Coliformes

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gua Potvel
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Micro-organismos indicadores da qualidade da gua

micro-organismo indicador sua presena na gua evidncia de que ela est poluda com material fecal de origem humana ou de outros animais de sangue quente. Indica que qualquer microorganismo patognico que ocorre no trato intestinal pode estar presente. Descrio: Bacilos Gram negativos no esporulados, facultativos, que fermentam lactose com produo de cido e gs em 48 h a 35C. Exemplos: Escherichia coli; Streptococcus faecalis, Clostridium perfringens.
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gua Potvel
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Caractersticas do micro-organismo indicador :

est presente em guas poludas e ausentes em guas no poludas; est presente quando os patognicos estiverem; nmero de micro-organismos indicadores est relacionado com o ndice de poluio; sobrevive melhor e por mais tempo que os patognicos; apresenta propriedades uniformes e estveis; inofensivo ao homem e outros animais; facilmente evidenciado por tcnicas laboratoriais padronizadas.

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Potabilidade da gua
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Potabilidade da gua: Portaria 518 (25 de maro de 2004) do Ministrio da Sade Estabelece os procedimentos e responsabilidades relativos ao controle e vigilncia da qualidade da gua para consumo humano e seu padro de potabilidade, e d outras providncias.

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Potabilidade da gua
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Portaria 518 (25 de maro de 2004) Art. 4 Para os fins a que se destina esta Norma, so adotadas as seguintes definies: I. gua potvel gua para consumo humano cujos parmetros microbiolgicos, fsicos, qumicos e radioativos atendam ao padro de potabilidade e que no oferea riscos sade;

IV. controle da qualidade da gua para consumo humano conjunto de atividades exercidas de forma contnua pelo(s) responsvel(is) pela operao de sistema ou soluo alternativa de abastecimento de gua, destinadas a verificar se a gua fornecida populao potvel, assegurando a manuteno desta condio;
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Potabilidade da gua
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Portaria 518 (25 de maro de 2004) VI. coliformes totais (bactrias do grupo coliforme) - bacilos gram-negativos, aerbios ou anaerbios facultativos, no formadores de esporos, oxidasenegativos, capazes de desenvolver na presena de sais biliares ou agentes tensoativos que fermentam a lactose com produo de cido, gs e aldedo a 35,0 0,5 C em 24-48 horas, e que podem apresentar atividade da enzima -galactosidase. A maioria das bactrias do grupo coliforme pertence aos gneros Escherichia, Citrobacter, Klebsiella e Enterobacter, embora vrios outros gneros e espcies pertenam ao grupo; VII. coliformes termotolerantes - subgrupo das bactrias do grupo coliforme que fermentam a lactose a 44,5 0,2C em 24 horas; tendo como principal representante a Escherichia coli, de origem exclusivamente fecal;
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Potabilidade da gua
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Portaria 518 (25 de maro de 2004) VIII. Escherichia Coli - bactria do grupo coliforme que fermenta a lactose e manitol, com produo de cido e gs a 44,5 0,2oC em 24 horas, produz indol a partir do triptofano, oxidase negativa, no hidroliza a uria e apresenta atividade das enzimas galactosidase e glucoronidase, sendo considerada o mais especfico indicador de contaminao fecal recente e de eventual presena de organismos patognicos; IX. contagem de bactrias heterotrficas - determinao da densidade de bactrias que so capazes de produzir unidades formadoras de colnias (UFC), na presena de compostos orgnicos contidos em meio de cultura apropriada, sob condies pr-estabelecidas de incubao: 35,0, 0,5oC por 48 horas;
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Potabilidade da gua
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Portaria 518 (25 de maro de 2004)

Art.11. A gua potvel deve estar em conformidade com o padro microbiolgico conforme Tabela 1, a seguir:

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Potabilidade da gua
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Anlise bacteriolgica da gua

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Metodologia:
teste presuntivo teste confirmativo teste completo

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Tcnica dos tubos mltiplos para determinao do Nmero Mais Provvel de coliformes - Teste Presuntivo

10 ml por tubo

1 ml por tubo

Amostra de gua 0,1 ml por tubo

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incubao a 35C/24-48 h: formao de gs: NMP

Teste presuntivo: caldo lauril triptose (caldo lactosado)

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Teste confirmativo: caldo lactosado bile-verde brilhante Tubos com gs do teste anterior Tubos com caldo lactosado bile verde brilhante

Incubao a 35 C/24-48 h
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Coliformes fecais

Tubos com gs do teste confirmativo

Caldo lactosado incubao a 44,5 C

Coliformes fecais fermentam a lactose a 44,5 C Coliformes no fecais fermentam a lactose somente at 37 C

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Colnias tpicas: azuis

Teste da membrana filtrante

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Colnias tpicas: brilho metlico Microbiologia Aplicada - Prof. Dra Denise Godoy

gua de Esgotos
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Esgotos sanitrios eliminam despejos domsticos e industriais. Esgotos pluviais carregam as guas de superfcie e das chuvas Esgotos combinados

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gua de Esgotos
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Caractersticas das guas residuais: * caractersticas fsicas e qumicas 99,9% de gua; slidos at 100 ppm grandes volumes. Compostos orgnicos e inorgnicos provenientes da indstria. * caractersticas microbiolgicas fungos, protozorios, algas, bactrias e vrus.

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SOLO

Solo
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Sistema vivo, dinmico Recurso no-renovvel Influencia a produo de alimentos, a eficincia ambiental e o balano global

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Solo
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A qualidade do solo pode ser definida como a capacidade contnua do solo de aceitar, estocar e reciclar gua, nutrientes e energia, bem como reter, dispersar e transformar materiais qumicos e biolgicos, funcionando como um tampo ou filtro ambiental.

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Solo
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Maior reservatrio de micro-organismos do planeta

direta ou indiretamente recebe todos os dejetos dos seres vivos local de transformao da matria orgnica em substncias nutritivas

com grande abundncia e diversidade de micro-organismos 1 hectare de solo pode conter at 4 tons de micro-organismos
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O solo como habitat microbiano

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A quantidade de micro-organismos presentes no solo depende:

Quantidade e tipo de nutrientes Umidade disponvel Grau de aerao Temperatura pH Prticas ou eventos que podem introduzir micro-organismos no solo (adubo, enchentes, dejetos de esgoto) ou remover micro-organismos (tempestades de poeira)

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O solo como habitat microbiano

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O solo como habitat microbiano

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Presena de micro-organismos nas vrias profundidades do solo

Profundidade (cm) 0-8 8- 20 20-40 40-60 60-80 80-100 Umidade (%) 18,2 10,0 11,5 13,5 7,9 5,3 Mat. orgnica (%) 4,4 1,5 0,5 0,6 0,4 0,4 Bactrias (x 106)/g aerbias 24 3,1 1,9 0,9 0,7 0,15 anaerbias 2,7 0,4 0,4 0,04 0,03 0,01 Fungos (m/g) 280 43 0 0 0 0

Fonte: Lindegreen & Jensen, 1973

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O solo como habitat microbiano

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Rizosfera: Regio onde o solo e as razes das plantas entram em contato

O efeito rizosfrico

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O solo como habitat microbiano

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Bactrias:

grupo mais numeroso e mais diversificado

3 x 106 a 5 x 108 por g de solo seco

Gneros mais freqentes:

Bacillus, Clostridium, Arthrobacter, Pseudomonas, Nocardia, Streptomyces, Micromonospora, Rizbios Cianobactrias: pioneiras, fixao de N2

Streptomyces
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O solo como habitat microbiano

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Fungos:

5 x 103 - 9 x 105 por g de solo seco limitados superfcie do solo favorecidos em solos cidos ativos decompositores de tecidos vegetais melhoram a estrutura fsica do solo Gneros mais freqentes:

Penicillium, Mucor, Rhizopus, Fusarium, Aspergillus, Trichoderma

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O solo como habitat microbiano

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Algas
103

- 5 x 105 por g de solo seco abundantes na superfcie acumulao de matria orgnica: solos nus, erodidos

Protozorios e vrus
equilbrio

das populaes predadores de bactrias parasitas de bactrias, fungos, plantas, ...

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Micro-organismos e os ciclos da matria

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Terra: quantidade praticamente constante de matria

Mudanas no estado qumico produzindo uma grande diversidade de compostos.

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Ciclos biogeoqumicos
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Permuta cclica de elementos qumicos que ocorre entre os seres vivos e o ambiente. Tais ciclos envolvem etapas biolgicas, fsicas e qumicas, alternadamente, da a denominao usada.
Ciclo

carbono Ciclo nitrognio Ciclo do enxofre Ciclo do ferro

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MS MS

Mquina decompositora
Nitrognio Carbono Fsforo Potssio Clcio Magnsio Ferro Enxofre Mangans Cobre outros
MS MS

Resduos orgnicos

MS

Microrganismo operrio

MS

Hmus

Decomposio de restos vegetais no solo: mquina decompositora operada pelos microrganismos (Siqueira & Franco, 1988)

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Ciclos biogeoqumicos
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Interferncia das atividades humanas sobre os ciclos biogeoqumicos

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Indicadores Biolgicos
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A qualidade do solo est relacionada atividade microbiana, ou seja, a reaes biolgicas e bioqumicas catalisadas pelos micro-organismos. Essas reaes so responsveis pela decomposio de resduos de plantas, animais, urbanos e industriais, pela ciclagem biogeoqumica, incluindo a fixao de N2, pela formao de agregados do solo e pela taxa de decomposio de materiais orgnicos. Devido a essas caractersticas, os micro-organismos do solo so considerados como indicadores sensveis para avaliar o impacto antropognico sobre os processos biolgicos do solo
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Parmetro microbiano
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Deve apresentar as seguintes caractersticas:

(1)

ser mensurvel de forma acurada; (2) ser testado em uma variedade de tipos e condies de solo; (3) ser sensvel ao do agente em estudo; (4) apresentar validade cientfica confivel.

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Parmetro microbiano
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So divididos em trs grupos:

1-

o que mede a atividade microbiana global; 2- o que determina o tamanho da populao de um organismo ou da comunidade de um grupo funcional; 3- o que correlaciona a atividade com a comunidade microbiana predominante no solo

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Parmetro microbiano
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Nos estudos para determinar os efeitos dos agentes contaminantes e do manejo do solo sobre a atividade e a dinmica da comunidade microbiana, as anlises mais utilizadas como indicadoras so:

liberao de CO2 pela respirao microbiana, mineralizao de nitrognio e carbono, fixao biolgica do nitrognio, atividades enzimticas, contagem de grupos microbianos e biomassa microbiana de C, N, P e S mtodos moleculares de extrao de DNA do solo a anlise de fosfolipdios

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Parmetro microbiano
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Biomassa microbiana considerada um parmetro indicador da qualidade do solo, pois o seu acompanhamento reflete as modificaes que ocorrem como resultado do preparo e da aplicao de resduos orgnicos no solo

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Parmetro microbiano
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A respirometria um mtodo que determina a quantidade de carbono liberado na forma de CO2, resultante da decomposio da matria orgnica pela comunidade microbiana quimiorganotrfica aerbia do solo. Permite quantificar o carbono que est sendo degradado no solo e tambm verificar se as condies climticas, o manejo do solo e a presena de elementos poluentes esto ou no comprometendo a atividade microbiana durante a decomposio e a mineralizao do carbono no solo.
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Parmetro microbiano
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A contagem de micro-organismos no solo uma medida que poder ser obtida diretamente por microscopia ou estimada por mtodos indiretos, quando os propgulos existentes na amostra so capazes de formar colnias.

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