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rea de Ciencias Naturales BIOLOGIA I Primero de Bachillerato en Ciencia y Letras Nombre del Alumno: ________________________________________________________ Gua de laboratorio N I.

- NOMBRE de la PRCTICA: Observacin de Microorganismos (Bacterias y Protozoarios)


II.- OBJETIVO: Realizar observaciones de organismos del reino Protista y Mnera Realizar una tincin simple de bacterias procedentes de distintas muestras naturales. Hacer cultivo de hongos con la finalidad de observarlos al microscopio para mejor entendimiento del tema "Reino Fung". Observar la morfologa bacteriana y aprender a distinguir los distintos tipos de agrupaciones que existen. Practicar con el microscopio al mximo aumento y con el correcto empleo del aceite de inmersin. III.- FUNDAMENTO TEORICO: Se denomina frotis a la extensin que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o cultivo con objeto de separar lo ms posible los microorganismos, ya que si aparecen agrupados en la preparacin es muy difcil obtener una imagen clara y ntida. Este frotis debe ser posteriormente fijado al vidrio del portaobjetos para poder aplicar los mtodos habituales de tincin que permiten la observacin al microscopio de las bacterias sin que la muestra sea arrastrada en los sucesivos lavados. La fijacin de una extensin bacteriana hace que las bacterias queden inactivadas y adheridas al vidrio alterando lo menos posible la morfologa y bacteriana y las posibles agrupaciones de clulas que pudiera haber. Esta tcnica nos ayudara a realizar las diferentes preparaciones que se desean observar en el microscopio, para este laboratorio observaremos: bacterias del yogur, bacterias del vinagre, bacterias del sarro dental, bacterias del suelo. El agua es almacn de bacterias y protozoarios, as como en los alimentos que a diario ingerimos; as como algunos hongos. IV.- MATERIALES y EQUIPO: Preparacin en agua estancada y zacate. Preparacin de pan nacido Levadura Aguja enmangada o palillo de dientes limpio Muestras bacterianas de origen natural: yogur, vinagre, sarro dental, suelo, etc. Lpiz Crayones Marcador Permanente

Gotero Portaobjetos Solucin de Lugol o eosina Mechero Bunsen o de alcohol Pinzas Metlicas Colorantes para tincin: a) Solucin de cristal violeta al 1% b) Solucin de safranina al 0,5% c) Azul de metileno al 1% Microscopio Aceite de inmersin.

V.-PROCEDIMIENTO: A.- BACTERIAS EN EL AGUA En un bote de gerber, introduzca zacate y parte de agua de rio o estancada, tape un poco el bote y djelo actuar unos das. 1. Toma un gotero vierte una gota de agua de esta preparacin y trata de ubicar microorganismos en el microscopio, con suerte y un buen cultivo tendrs diversos bacterias y protozoarios. 2. Ten cuidado de no contaminar tu cuerpo al momento de manipular el gotero o el bote de gerber. 3. Dibuja lo que se observa en la preparacin:

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B.- MOHO DEL PAN Rociar con agua una pieza de pan y frotar ligeramente contra la parte humedecida teniendo cuidado de no deshacerla; Ponga el pan dentro de una bolsa plstica, cierra la bolsa y colcala durante 2 das en un lugar clido y oscuro. Dos das despus examina el pan y probablemente observars en ella unas manchas de materia algodonosa y salpicada de puntos oscuros, esta materia es un espeso material de una planta microscpica llamada hongo comn en el pan. En la muestra se observa entre verde Penicillium (s, el que produce la penicilina) y negro Aspergillus (ese produce toxinas) est el colorido hongo rosa del pan (que es, ms bien anaranjado), cuyo nombre artstico es Neurospora crassa. 1. Para examinar ste hongo coloca una partcula de la materia algodonosa formada en la superficie del pan, agrgale una gota de Lugol o eosina, ponle encima un cubreobjeto. Seguidamente observa el montaje en el microscopio y dibuja.

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C.- LA LEVADURA La levadura es un organismo procariota del reino Protista, usado en la fermentacin es un microorganismo que en contacto con el agua activa sus funciones vitales, alimentacin, crecimiento y reproduccin. 1. Tomamos una pequea porcin de levadura le agregamos un agota de agua y cubrimos con el cubreobjetos. Si tenemos suerte veremos una muestra muy viva de levaduras frente a nuestro ojo.

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D.- BACTERIAS DEL YOGUR El yogur es un producto lcteo producido por la fermentacin natural de la leche. A escala industrial se realiza la fermentacin aadiendo a la leche dosis del 3-4% de una asociacin de dos cepas bacterianas: el Streptococcus termophilus, poco productor de cido, pero muy aromtico, y el Lactobacillus bulgaricus, muy acidificante. En esta preparacin se podrn, por tanto, observar dos morfologas bacterianas distintas (cocos y bacilos) y un tipo de agrupacin (estreptococos, cocos en cadenas arrosariadas). Adems, el tamao del lactobacilo (unos 30m de longitud) facilita la observacin aunque no se tenga mucha prctica con el enfoque del microscopio. 1. Realizar el frotis disolviendo una mnima porcin de yogur en una pequea gota de agua. 2. Fijar con metanol para eliminar parte de la grasa. 3. Teir con un colorante cualquiera de los arriba indicados durante 1-2 minutos. 4. Observar al mximo aumento del microscopio.

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E.- BACTERIAS DEL VINAGRE El vinagre es una solucin acuosa rica en cido actico resultante de la fermentacin espontnea del vino o de bebidas alcohlicas de baja graduacin. La acetificacin del vino es producida por bacterias aerbicas del cido actico, principalmente Acetobacter aceti, aunque tambin Gluconobacter. Se trata de bacilos rectos con flagelos polares. 1. Tomar con una aguja enmangada una pequea porcin de madre de vinagre natural o de la telilla que se forma sobre la superficie de los vinos agriado. 2. Extender la muestra en el portaobjetos con una gota de agua y hacer el frotis. 3. Dejar secar y fijar con calor. 4. Teir 2-3 minutos, lavar el exceso de colorante y secar.

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F.- BACTERIAS DEL SARRO DENTAL El sarro dental es un depsito consistente y adherente localizado sobre el esmalte de los dientes. Est constituido principalmente por restos proteicos, sales minerales y bacterias junto con sus productos metablicos. La flora bacteriana de la cavidad bucal es muy variable dependiendo de las condiciones que se den en el momento de hacer la preparacin, pero suelen abundar bacterias saprfitas, pudindose observar gran variedad de morfologas: espiroquetas, cocobacilos, diplococos y bacilos. 1. Con una aguja enmangada tomar una pequea porcin de sarro dental y disolverla en una gota de agua sobre el portaobjetos. 2. Dejar secar y fijar con calor. 3. Teir 2-3 minutos, lavar el exceso de colorante y secar.

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G.- BACTERIAS DEL SUELO Para recoger la muestra y hacer el frotis, basta con dejar parcialmente enterrado en vertical un portaobjetos en la tierra de una maceta o de un jardn. Despus de varios das, las bacterias se habrn adherido al vidrio y slo habr que fijarlas por calor y teirlas con un colorante cualquiera. Previamente hay que limpiar los bordes del portaobjetos, as como la parte que no se va a teir.

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OTRAS BACTERIAS DAINAS

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VI.- Nota (Evaluacin, Conclusiones):


Responde las siguientes preguntas: 1- Porque los virus no pueden ser observados en el microscopio? __________________________________________________________________________ 2.- Que es el frotis? __________________________________________________________________________ 3.- En que se basan los mdicos para diferenciar una enfermedad viral de una bacteriana? __________________________________________________________________________ 4.- En qu lugares crece el moho adems del pan? __________________________________________________________________________ 5.- Que son bacterias saprofitas? __________________________________________________________________________ 6.- Cul es el hongo ms daino u toxico en los alimentos? __________________________________________________________________________ 7.- Para fabricar pan se utiliza levadura, qu sucedera si a la masa del pan no se le agrega la levadura?, qu funcin hace la levadura en la masa del pan? __________________________________________________________________________ 8.- Por qu se dice que hay bacterias sanas y bacterias dainas? __________________________________________________________________________ 9.- Mencione algunas bacterias dainas y qu enfermedad provocan? __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ 10.- Mencione 3 importancias de la Microbiologa. __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________