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LA BIOTECNOLOGA Y SU APLICACIN EN LAS CIENCIAS VETERINARIAS

Carlos G. Borroto Subdirector del Centro de Ingeniera Gentica y Biotecnologa, La Habana (Cuba)1 Original: espaol

Resumen: Mediante un cuestionario se obtuvo informacin y comentarios de los delegados de 21 de los 29 Pases Miembros de la Comisin Regional de la OIE para las Amricas, sobre aspectos relativos a la aplicacin de la biotecnologa a la salud animal, en especial en temas relacionados con la prevencin, como el desarrollo y produccin de frmacos y vacunas, el uso de modificadores metablicos, probiticos y prebiticos, los mtodos avanzados de diagnstico veterinario, la inmunocastracin y otras aplicaciones. Tambin los aspectos regulatorios y de percepcin pblica. El informe analiza la situacin en los pases de la regin en relacin al estado del arte de estas tecnologas en el mundo, evidencindose que las tecnologas derivadas de la biotecnologa moderna ofrecen potencialidades muy importantes para la generacin de vacunas, medicamentos y otros productos de uso veterinario. El desarrollo y uso de estas tecnologas esta concentrada en una parte de los pases de la regin, mientras otros an no la utilizan lo suficiente. Existe pues la necesidad de capacitacin y divulgacin de estas tecnologas para lo cual hay condiciones adecuadas de desarrollo en varios pases del rea. Es necesario tambin propiciar el establecimiento de un marco regulatorio eficaz y comprensivo para el uso seguro de estas tecnologas tanto desde el punto de vista de bioseguridad, como el de las regulaciones establecidas en el registro veterinario. Todos los pases del rea consideran importante el papel de la OIE en el establecimiento de normas adicionales para los productos veterinarios producidos mediante las herramientas de la biotecnologa moderna. Palabras clave: biotecnologa ciencia veterinaria Amricas

Dr. Carlos G. Borroto Nordelo, Sub-Director, Centro de Ingeniera Gentica y Biotecnologa, Av. 31 % 158 y 190, Rpto. Cubanacn, Playa, Marianao, La Habana (Cuba)

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Introduccin En la 73 Sesin General de la OIE en mayo del 2005 se present y analiz el tema de Aplicaciones de la biotecnologa para el ganado y los productos zoosanitarios bajo el precepto que la biotecnologa agrcola moderna, en lo concerniente a la salud y produccin de animales, es una mezcla fascinante de ciencia de los animales, medicina veterinaria y biologa molecular. En aquella oportunidad se hizo nfasis en temas tan importantes como las regulaciones y la percepcin publica de la aplicacin de la biotecnologa en la sanidad y produccin animal en especial en temas tan polmicos como la transgnesis animal, la clonacin, el xenotrasplante, etc. Tanto los resultados del cuestionario circulado al efecto, como la presentacin tcnica, brindaron importantes resultados de suma utilidad para la labor de la OIE y los Pases Miembros. En esta oportunidad para la Conferencia de la Comisin Regional de la OIE para las Amricas se ha concebido la presentacin y anlisis de la aplicacin de la biotecnologa a la salud animal, en especial en temas relacionados con la prevencin, como el desarrollo y produccin de frmacos y vacunas, la estimulacin del sistema inmune en animales de granja y organismos acuticos (incluyendo modificadores metablicos, prebiticos y prebiticos), los mtodos avanzados de diagnstico veterinario, la inmunocastracin, etc. Son abordados as mismos los aspectos regulatorios y de percepcin pblica. Con el objetivo de obtener informacin de los Pases Miembros sobre este tema tcnico, se circul un cuestionario sobre los puntos principales a abordar en el mismo. Enviaron respuesta 21 Pases Miembros (Argentina, Barbados, Belice, Brasil, Canad, Colombia, Cuba, Chile, Ecuador, El Salvador, Estados Unidos de Amrica, Guatemala, Guyana, Hait, Honduras, Mxico, Panam, Paraguay, Repblica Dominicana, Trinidad y Tobago y Uruguay). No es posible en un informe resumen como este recoger el universo completo de las potenciales aplicaciones de la biotecnologa en las ciencias veterinarias. Es por eso que hemos seleccionado un conjunto de tecnologas de impacto real o potencial reconocido internacionalmente y que deberan promoverse y regular su uso en la Regin. El informe se ha estructurado de modo que recoja el estado del arte y la aplicacin de estas principales aplicaciones de la biotecnologa moderna en las ciencias veterinarias, en relacin al estadio en que se encuentra la regin segn las respuestas recibidas, que se abordan en las ocho secciones siguientes: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Investigacin, Vacunas veterinarias obtenidas por biotecnologa, Inmunocastracin, Estimulacin del crecimiento y/o del sistema inmune, Sistemas de diagnstico veterinario, Prebiticos y probiticos, Carencias ms importantes de aplicaciones biotecnolgicas en las ciencias veterinarias en cada uno de los pases, Marco regulatorio.

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1.

Investigacin En la regin existen pases con un alto grado de desarrollo en las investigaciones en este campo, concentrndose principalmente en Argentina, Brasil, Canada, Chile, Colombia, Cuba, Estados Unidos de Amrica, Mxico y Uruguay, que representan el 43% de los pases que contestaron el cuestionario (ver Figura 1). Figura 1. Se estn llevando a cabo en su pas investigaciones sobre los animales y los productos, incluidos las vacunas y los medicamentos, obtenidos por biotecnologa?

43% 57%

S NO

Existe incluso en varios de estos pases desarrollo en temticas avanzadas relacionadas con la genmica, protemica y bioinformtica aplicadas a las ciencias veterinarias (ver Figura 2). Figura 2. Se estn llevando a cabo en su pas investigaciones sobre genmica animal (incluye genmica funcional, protemica, bioinformtica)?
% de paises 1.00 0.80 0.60 0.40 0.20 0.00
general sec. animales sec. patgenos gen. funcional vacunas

0.43 0.33

0.38 0.29 0.29

Tecnologas

Si bien es cierto que la no existencia de actividades importantes de investigacin en este campo en ms de la mitad de los pases de la regin es un factor no favorable, la existencia de estos polos de desarrollo cientfico en este esfera, abre una posibilidad real de capacitacin, transferencia tecnolgica y apoyo al desarrollo de infraestructura y proyectos especficos dentro del rea. 2. Vacunas veterinarias obtenidas por biotecnologa Est ampliamente demostrado que la vacunacin es el mejor mtodo disponible para prevenir con un buen comportamiento costo-beneficio las prdidas econmicas en los animales. Sin embargo continuamos sufriendo de graves enfermedades en varias regiones del mundo incluyendo la nuestra. Ocho de las principales diez causas de muerte en humanos es por enfermedades infecciosas. En animales, con un ciclo de vida ms corto, la situacin es an peor. Las vacunas convencionales se aplican ya por ms de dos siglos. Las mismas se seguirn utilizando en la misma medida que sean las ms efectivas disponibles en cada caso y se seguirn desarrollando las mismas en los casos que corresponda. Sin embargo, para disminuir el riesgo de reversin a la virulencia de las vacunas vivas, la interferencia con anticuerpos resultantes de la inmunizacin pasiva, evitar la contaminacin con otros virus, disminuir las afectaciones durante el almacenaje y otros aspectos, ya estn en uso varias vacunas basadas en tcnicas biotecnolgicas y muchas ms estn en diferentes estadios de desarrollo [1, 6, 13]. Estas vacunas brindan la gran ventaja adems de posibilitar el uso de sistemas de diagnstico diferencial (DIVA), que permita identificar separadamente los animales enfermos de los vacunados [5]. Estas vacunas llamadas vacunas DIVA por su acrnimo en ingls (Differentiate Infected from Vaccinated Animals), permiten diferenciar los animales vacunados de los expuestos a las razas del virus, posibilitando la erradicacin de enfermedades de un pas de una forma ms rpida y econmica, que cuando se utilizan
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los mtodos convencionales de erradicacin. La erradicacin de la enfermedad de Aujeszky, fue de las primeras que utiliz con xito la estrategia DIVA. Las vacunas veterinarias de base biotecnolgica no estn siendo utilizadas slo para el control de enfermedades infecciosas, sino tambin para el incremento de la productividad modulando hormonas o elementos del sistema inmune, para la inmunocastracin, el control de ectoparsitos, etc. El 76% de los pases de la encuesta, producen o aplican alguna vacuna obtenida por vas biotecnolgicas, lo cual es un avance notable en la introduccin de esas tecnologas (Figura 3). Figura 3. Se produce o aplica alguna vacuna animal en su pas que sea obtenida por biotecnologa?
24%

S NO

76%

Entre las tecnologas utilizadas, lamentablemente slo una cuarta parte de los pases utilizan al menos una de las vacunas marcadas que permiten el diagnstico diferencial (Figura 4). Figura 4. Tipos de vacunas
% por paises

1.00 0.80 0.60 0.40 0.20 0.00

v. viral v. bacteriano DIVA subunidad ADN peptidos plantas

0.48 0.38 0.24

0.48 0.24 0.14 0.14

Un aspecto importante en estas nuevas tecnologas es su uso seguro y la adecuada informacin al pblico de su naturaleza, cuales son sus beneficios, como es el escrutinio regulatorio de cada una y como se manejan las mismas para reducir al mnimo sus riesgos potenciales. Un inadecuado manejo de la informacin al pblico en general y a los decisores polticos, puede conducir al fracaso o la prohibicin de un producto demostradamente seguro y eficaz. En la Figura 5 se puede observar la insuficiente informacin en dos terceras partes de los pases de la regin y en la Figura 6 podemos constatar que slo en una cuarta parte de los pases el pblico est informado y los considera seguro. ste es un tema que debemos prestarle la debida atencin si queremos abrazar las ventajas poderosas de estas tecnologas sobre bases regulatorias seguras. Figura 5. El pblico en general est informado de que en su pas se utilizan vacunas o medicamentos obtenidos por biotecnologa?
33%
S NO

67%

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Figura 6. Cmo percibe generalmente el pblico de su pas las vacunas y/o los medicamentos obtenidos por biotecnologa?
1.00 0.80 0.60 0.40 0.20 0.00
Seguros Controvertidos Pblico no interesado

0.57 0.24

0.14

0.10
Cuestionamiento por ambientalistas

3.

Inmunocastracin En animales de importancia econmica (porcino, bovino) y afectivos (perros, gatos), es frecuente la conveniencia de prevenir la reproduccin. Los mtodos ms usados son la castracin quirrgica y la administracin de esteroides. Ambos mtodos tienen inconvenientes, el primero requiere de personal especializado para llevarse a cabo, es irreversible, provoca infecciones, as como posterior desarrollo de hernias inguinales e inmunosupresin, llegando a provocar muertes. El segundo causa efectos secundarios que afectan la salud de los animales. Por estas razones se ha ensayado la inmunocastracin de animales con el uso de pptidos anlogos a la hormona liberadora de gonadotropina (GnRH) conjugados con protenas, con el objetivo de levantar anticuerpos que neutralicen la funcin de la GnRH [11]. La inmunocastracin est reportada como alternativa ventajosa en los animales de importancia econmica, por mejorar el comportamiento agresivo de los machos, el olor y sabor de la carne, la conversin alimenticia, producirse canales ms magras y una reduccin en el consumo de alimento. Para el caso de los animales afectivos la caracterstica reversible de la inmunocastracin es una ventaja que marca la diferencia con las otras alternativas. En la regin, esta tecnologa se aplica en menos de la mitad de los pases, y slo en el 18% de los mismos, el pblico esta informado sobre sus potencialidades, su uso y las regulaciones que garanticen el uso seguro de esta tecnologa. Es de destacar que slo en el 10% de los pases se considera controvertida esta tecnologa.

4.

Estimulacin del crecimiento y/o del sistema inmune En los ltimos aos se han desarrollado biomolculas que han probado su accin de encender genes endgenos que conducen a un incremento del crecimiento y activacin del sistema inmune (innato y adquirido). Este accionamiento de diferentes vas metablicas adems de favorecer un mayor crecimiento y desarrollo de las cras jvenes, provoca una mayor supervivencia, ganancia de peso y una sincronizacin de la poblacin de animales. En particular en los organismos acuticos (peces y camarones) se han ensayado con xito estos modificadores metablicos que mejoran significativamente la produccin y reducen el uso de antibiticos y de qumicos [7]. Aunque es una aplicacin relativamente reciente, ya el 48% de los pases de la regin utilizan o investigan sobre los mismos (Figura 7).

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Figura 7. Se produce, aplica o investiga en su pas algn estimulador del crecimiento o sistema inmune en animales (incluidos los organismos acuticos)?
1.00 0.80 0.60
% de pases

0.48 0.38 0.19 0.14

0.40 0.20 0.00

?

Se produce y usa Se importa

Se investiga

5.

Sistemas de diagnstico veterinario La deteccin e identificacin de enfermedades y el diagnstico de sus agentes causales se han realizado por numerosos mtodos, desde los ms clsicos utilizando tcnicas morfolgicas y bioqumicas, hasta utilizando cada vez ms las tcnicas inmunolgicas y moleculares de la biotecnologa moderna. Estas tcnicas inmuno enzimticas se mejoran continuamente y se incorporan tecnologas como las tiras rpidas diagnsticas de muy fcil uso, incluso a nivel de unidad productiva y con una respuesta inmediata. Por otra parte, con el desarrollo de la biologa molecular, se han abierto posibilidades muy importantes en las tcnicas de diagnstico y se generalizan aceleradamente en los laboratorios de diagnstico veterinario [9]. Las secuencias nicas de DNA proveen un alto grado de especificidad en el diagnstico y el control de especies de microorganismos patgenos y sus razas y las tcnicas de la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) permiten niveles de especificidad extremadamente altos [4]. Los mtodos moleculares no slo han incrementado la sensibilidad y la especificidad de los mtodos de diagnstico, sino que han reducido mucho la subjetividad inherente a la interpretacin de los datos morfolgicos y biolgicos. El PCR a tiempo real (RT-PCR) es una de las ltimas mejoras a las tcnicas de PCR que han sido incorporadas a los laboratorios de diagnstico veterinario. El procedimiento se desarrolla todo en un tubo individual sellado, que disminuye muchsimo el problema de la contaminacin cruzada, y el procesamiento electrnico en directo de la fluorescencia detectada, elimina la necesidad de la reaccin posterior y la corrida electrofortica necesaria en el PCR tradicional. El RT-PCR permite adems la aplicacin de mtodos cuantitativos. La secuenciacin de genomas completos de patgenos brinda importantes elementos para los estudio de la biologa y para mejorar el diagnstico y control de parsitos. Las nuevas tcnicas de las micromatrices (microarrays) permiten el tamizaje (screening) para los genotipos de parsitos especficos y constituyen un apoyo importante para los estudios epidemiolgicos de parsitos veterinarios. Las herramientas de la protemica permiten la identificacin y caracterizacin de las protenas producidas por los patgenos y tienen gran aplicacin en el diagnstico veterinario al brindar la posibilidad de estudiar el patrn de expresin de protenas de virus, bacterias y otros agentes patgenos. Permite adems estudiar las protenas que se expresan o reprimen diferencialmente como resultado del ataque de patgenos, lo cual es de suma importancia para identificar nuevos mtodos de control de los mismos, ya sea por vacunas, frmacos, etc. Otras tecnologas como los biosensores, la hibridacin fluorescente in situ (FISH) y las nanotecnologas se incorporan como herramientas al diagnstico veterinario. En las respuestas a la encuesta se evidencia que en el 80% de los pases de la regin se produce o investiga en sistemas de diagnstico veterinario.

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Sin embargo, como puede observarse en la Figura 8, es bajo el por ciento de pases que reportan la utilizacin de tecnologas modernas de la biologa molecular en el diagnstico veterinario, incluidas las que se consideran ya de rutina, como el PCR y el RT-PCR. Figura 8. Tecnologas de diagnstico utilizadas en el pas
1.00 0.80 0.60 % de pases 0.40 0.19 0.20 Tiras rpidas PCR 0.00 ELISA Micromatrices RT-PCR DIVA 0.57 0.81 0.62 0.43 0.24 0.10 Nanotecnologas Biosensores Protemica FISH 0.29 0.19 0.19

6.

Probiticos y prebiticos Los probiticos se definen como cultivos de microorganismos vivos que se establecen en el tracto intestinal de humanos y/o animales y ejercen una accin beneficiosa sobre la salud del hospedero. Los gneros de bacterias probiticas ms importantes son Lactobacillus y Bifidobacterium. Tambin existen levaduras que ejercen efecto probitico. Los prebiticos son ingredientes alimenticios que mejoran la salud del consumidor al estimular de forma selectiva el crecimiento y/o actividad de las bacterias probiticas en el tracto intestinal. Los principales prebiticos son oligosacridos no digeribles, tales como: fructooligosacridos (FOS), galactooligosacridos (GOS), maltooligosacridos (MOS) y xilooligosacridos (XOS). Los FOS y la inulina son considerados los prebiticos tpicos y se comercializan ampliamente para uso en humanos y animales monogstricos. Los simbiticos son una mezcla de probiticos y prebiticos que afectan benficamente la salud del consumidor mejorando la supervivencia e implantacin de los primeros en el tracto gastrointestinal por medio de una estimulacin selectiva de su actividad y/o crecimiento. Est documentado en la literatura cientfica que el consumo de probiticos, prebiticos o simbiticos mejora la flora intestinal, previene y rehabilita enfermedades diarreicas, mejora la composicin de lpidos de la sangre, reduce colesterol y mejora presin sangunea, incrementa la absorcin y retencin de calcio, modula funciones inmunes y disminuye el riesgo del cncer del colon [3, 10, 12]. En animales de cra, el empleo de probiticos, prebiticos o simbiticos ofrece el beneficio adicional de reducir o eliminar el uso profilctico de antibiticos en los piensos o agua. El uso de los probiticos en la acuicultura es amplio, utilizndose con varios objetivos: Exclusin competitiva de patgenos, Fuente de nutrientes y contribucin enzimtica a la digestin, Mejorador de la calidad del agua, Estimulador de la respuesta inmune, Efectos antivirales.

Se ha convertido por ello en una herramienta de manejo importante, pero su eficiencia depende de la comprensin de la competencia entre las cepas utilizadas [2].

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En dos terceras partes de los pases de la regin se utiliza este tipo de productos, fundamentalmente en bovinos, cerdos y aves y debe promoverse su incremento en el resto (Figuras 9 y 10). Figura 9.

1.00 0.80 0.52 0.60 % de paises 0.40 0.20 0.00 Prebiticos Probiticos Simbiticos 0.29 0.67

Figura 10. Especies

Camarones Peces Bovinos Cerdos Aves 0.00 0.20 0.40 0.60 0.24 0.33 0.67 0.67 0.62 0.80 1.00

% de pases

7.

Carencias ms importantes de aplicaciones biotecnolgicas en las ciencias veterinarias en cada uno de los pases Tres cuartas partes de las autoridades veterinarias de los pases, manifestaron tener necesidad de nuevos y ms eficaces aplicaciones veterinarias mediante el uso de la biotecnologa (Figura 11). Es interesante sealar que el 100% de los pases con ms aplicaciones veterinarias de base biotecnolgica, manifestaron esa necesidad de nuevos productos y que todos los que no contestaron afirmativamente, tienen muy pocas aplicaciones de este tipo en uso en su pas. Esto hace evidente el hecho que mientras ms se conocen, ensayan y evalan estas tecnologas, ms posibilidades se le encuentran, lo que conlleva a la necesidad de una divulgacin y capacitacin de los especialistas de la regin en esta temtica. Figura 11. Qu carencias tiene su pas en cuanto a productos biolgicos producidos con biotecnologas modernas para mejorar el control de las enfermedades de los animales?
% por paises 1.00 0.80 0.60 0.40 0.20 0.00 Vacunas Pruebas diagnsticas Medicamentos 0.52 0.52 0.38

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8.

Marco regulatorio En las secciones anteriores han quedado claras las altas potencialidades que la biotecnologa moderna proporciona a las ciencias veterinarias y hemos evaluado el estado de la aplicacin de esas tecnologas en los pases de la regin. No obstante, estas tecnologas requieren un marco regulatorio adecuado que garanticen el uso seguro de las mismas. En el caso de las tecnologas que impliquen la liberacin al ambiente de organismos genticamente modificados, adicionalmente a las pruebas necesarias para el registro de un producto veterinario (por ej. pureza, seguridad, potencia, eficacia), es necesario realizar una evaluacin de riesgo particular que demuestre que el producto es inocuo para la salud humana y animal y compatible con el ambiente. Por otra parte, el desconocimiento o falta de regulaciones especficas, provoca que en muchas ocasiones se considere errneamente que todas las aplicaciones de la biotecnologa moderna, constituyen organismos genticamente modificados (OGM) y en una gran parte de los casos no es as. Por ejemplo son muchos, desde las vacunas por subunidad que contienen slo protenas como ingrediente farmacutico activo, o modificadores metablicos conteniendo slo protenas o partes de ellas (polipptidos), prebiticos o probiticos, o sistemas de diagnsticos especficos, etc. De hecho, la mayora de las aplicaciones a que hemos hecho referencia en este informe, no implican la liberacin al ambiente de OGM. Cuando son OGM realmente, deben ajustarse a dos tipos de regulaciones, uno el que se establece a todos los productos de uso veterinario y el otro a las regulaciones especificas de bioseguridad. Cuando las tcnicas de ingeniera gentica se utilizan durante el proceso de produccin pero no estn contenidas en el producto final, entonces las regulaciones de bioseguridad son aplicables a los lugares de fabricacin y no a los de uso final. El desarrollo impetuoso de estas tecnologas exige el desarrollo rpido y eficiente de regulaciones especficas para su uso, pues complica el asunto el hecho de la existencia de cientos de compaas tratando de obtener beneficios econmicos de las mismas y por tanto presionando para su introduccin. En la regin mucho se ha avanzado en las regulaciones para el registro y control de los productos veterinarios de modo que tengan la calidad adecuada y la pureza, eficacia y seguridad de los productos y para asegurar que los animales tratados no sean dainos para los consumidores. Adems de las regulaciones establecidas por las autoridades nacionales, a nivel regional es encomiable la labor para la harmonizacin que lleva a cabo el Comit de las Amricas de Medicamentos Veterinarios (CAMEVET) basificado en la oficina regional de la OIE [8]. El resultado de la encuesta corrobora lo analizado en CAMEVET sobre la necesidad de avanzar en el marco regulatorio de los productos veterinarios producidos por las tecnologas de la biotecnologa moderna. En menos de la mitad de los pases de la regin que respondieron la encuesta existen regulaciones de bioseguridad para el uso de estas tecnologas (Figura 12). Figura 12. Existen regulaciones de bioseguridad con respecto a vacunas de uso veterinario obtenidas por biotecnologa?
S NO

52%

48%

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Y lo que no es menos preocupante, en menos de la mitad de los pases existen requisitos especiales para el registro de medicamentos veterinarios de base biotecnolgica (Figura 13). Figura 13. Existen requisitos especiales para el registro de estas vacunas en el Registro de Medicamentos Veterinarios?
S NO

52%

48%

Es evidente la necesidad urgente de apoyar a los pases de la regin en la implementacin de un marco regulatorio adecuado para el uso seguro de estas tecnologas, tanto desde el punto de vista de la bioseguridad como en el de los registros de productos veterinarios. Por eso no es de extraar que la nica pregunta de la encuesta, que tuvo respuesta unnime y positiva, fuera la del inters de los pases de la regin que la OIE produzca ms normas en el campo de productos veterinarios producidos con biotecnologa moderna. Conclusiones 1. 2. 3. 4. Las tecnologas derivadas de la biotecnologa moderna ofrecen potencialidades muy importantes para la generacin de vacunas, medicamentos y otros productos de uso veterinario. El desarrollo y uso de estas tecnologas esta concentrada en una parte de los pases de la regin, mientras otros an no la utilizan generalizadamente. Existe la necesidad de capacitacin y divulgacin de estas tecnologas para lo cual hay un marco propicio de desarrollo en varios pases del rea. Es necesario propiciar el establecimiento de un marco regulatorio eficaz y comprensivo para el uso seguro de estas tecnologas tanto desde el punto de vista de bioseguridad como el de las regulaciones establecidas en el registro veterinario. Los pases miembros consideran necesario que la OIE produzca ms normas en este campo.

Referencias
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